外周血循环肿瘤细胞检测课件

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外周血循环肿瘤细胞(CTCs)分离富集检测及其临床应用

仅能揭示瞬时的基因组特征不可行无 58%（肺癌）
49.6%（肺癌）
97.2%（肺癌）未见报道不可以不可以数据质量较差
CTC检测助力肿瘤诊疗
2 最具潜力的液体活检---CTC检测
7
2.1 CTC概念
循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cell,CTC)指从实体瘤中脱离出来并进入外周血液循环的肿瘤细胞。
03 非典型形态
• CTC入血后随血液快速流动。 • 与其他细胞碰撞、受到血管壁的挤压。 • 受机体免疫系统以及药物的攻击。 • CTC形态有别于肿瘤组织、细胞大小、形态及表型发生变化。
瘤标志物
Weinberg提出CTC 可作为具有临床实践价值的诊断指标，为临床提供重要信
息
CTC的EMT状态与肿瘤治疗效果和复
发相关
CFDA批准叶酸受体阳性CTC检测试
剂盒
1869 1889
1976
1982
2004
2007 2008
2011
2012
2013
2014
2016 2017
提出“种子与土壤”假说，即肿瘤细胞可随血液在体内循环，进入其他器官如同种子遇到土壤，
03 非典型形态
•相同肿瘤的不同细胞之间的基因与表型存在差异。
• 不同实体肿瘤来源CTC，不同患者CTC表面抗原表达、分布存在差异。
Burrell RA, et. al. Nature. 2013 ;501(7467):338-45.
2.3 循环肿瘤细胞特点---非典型形态
01 稀有性
02 异质性
优点：非侵入式；无创；可重复性取样；获取全面的疾病信息。
Alix-Panabières C, Pantel K. Clin Chem. 2013 Jan; 59(1):110-8.

人外周血循环肿瘤细胞(CTC)

人外周血循环肿瘤细胞(CTC)检测技术的研发及临床应用开发美国肿瘤协会于2006 年发表的年度报告指出，目前全世界范围内每3 人中就有1 人在其一生中会患有某种肿瘤，而且肿瘤发病率在发展中国家随着污染程度的增加，患病几率还会高于1/3 的比例。

现今全世界用于肿瘤治疗与防治的费用每年以16.5% 的比例递增。

仅用于乳腺癌，结直肠癌及前列腺癌（还不包括发病率最高的肺癌）的投资，目前世界范围内已达每年92 亿美元。

目前全世界用于肿瘤诊断的方法可归为三大类：病理学（活检切片）；影像学（超声，X光，CT, PET 等）和血清学（血清肿瘤相关蛋白，如CA-125, CA-199, CEA 等），但所有这些方法都有不可避免的缺点，例如灵敏性及特异性差，过于依赖医生判断的主观性等。

因此目前临床急需一种能够为医生及病人提供准确，快速的肿瘤检测手段。

经过长时间的大量研究，美国FDA 认证的人外周血循环肿瘤细胞（Circulating Tumor Cell, CTC）检测目前已被公认为最好及最可观的检测手段之一。

目前已有越来越多的国内外医生开始应用此技术作为肿瘤检查的重要辅助手段。

不仅于此，CTC 检测也被公认为是目前国外新近流行的肿瘤治疗方法-即阻断肿瘤细胞入血转移的唯一有效检测指标。

除了上述CTC可作为肿瘤检测手段外，CTC还可成功应用于以下一系列其它方面的用途：(1)个体化治疗的体外肿瘤药物筛选；(2)体内化疗药物药效的快速评估: 相对于每12周一查的CT 诊断，CTC在第1-2周即可显示药效结果，这一点对临床医生和病人尤为重要；(3) 根据CTC数目，判断病人愈后状况及存活时间；（4）肿瘤病人复发的监测与及时诊断；及（5）正常人群体检普查以利于尽可能的肿瘤早期诊断。

除了应用于临床外，CTC 亦可应用于众多药厂和科研机构的基础研究，包括寻找新的肿瘤标识物以及开发新的抗肿瘤药物等。

目前美国FDA已于2004年认证了美国上市公司Immunicon/Veridex的CTC检测技术及其临床应用。

2023版《循环肿瘤细胞检测在胃肠道肿瘤诊疗中的应用中国专家共识》解读ppt课件

特点
CTCs具有稀有性、异质性和动态变化的特点，是一种非侵入性的“液态活检”手段。
检测原理及技术方法
检测原理
基于物理、生化及免疫学方法对血液中的CTCs进行富集和鉴定。
技术方法
包括大小、密度、电荷等物理特性差异进行富集的方法（如滤膜法、微流控芯片技术等）、利用抗体与抗原特异性结合进行捕获的方法（如免疫磁珠法）以及其他新兴技术（如基于核酸适配体的方法等）。
2023版《循环肿瘤细胞检测在胃肠道肿瘤诊疗中的应用中国专家共识》解读
汇报人：XXX 2023-11-17
目录
• 引言 • 循环肿瘤细胞检测的基本原理与技术 • 循环肿瘤细胞检测在胃肠道肿瘤诊疗中的应用 • 专家共识详细解读 • 未来展望与研究方向
01 引言
背景介绍
癌症负担
胃肠道肿瘤是我国常见的恶性肿瘤之一，严重威胁着人民的健康和生命安全，给社会和家庭带来巨大的负担。
VS
早期发现
CTC检测有助于胃肠道肿瘤的早期发现，从而提高治疗的成功率和患者的生存率。
在胃肠道肿瘤分期中的应用
判断肿瘤侵袭程度
通过CTC检测可以判断胃肠道肿瘤的侵袭程度，有助于准确分期。
指导治疗方案
准确的分期信息有助于医生为患者制定更合适的治疗方案。
在胃肠道肿瘤预后评估中的应用
预测生存时间
CTC检测可用于预测胃肠道肿瘤患者的生存时间，为患者提供更个性化的治疗建议。
探索循环肿瘤细胞检测在其他肿瘤类型中的应用
拓宽应用领域
基于现有研究基础，进一步探索循环肿瘤细胞检测在其他肿瘤类型（如肺癌、乳腺癌等）中的应用，为更多肿瘤患者提供个体化诊疗服务。
跨瘤种比较
开展循环肿瘤细胞检测在不同肿瘤类型中的比较研究，揭示其在各类肿瘤中的共性与特性，为临床提供更多维度的参考信息。

外周血循环肿瘤细胞检测ppt课件

4.6
0.505 (0.417-0.592)
Cyfra21-1
90
0.352
32.3
0.716 (0.615-0.816)
SCC-Ag
93.8
0.15
12.3
0.624 (0.535-0.713)
天津市肿瘤医院成都大学附属医院重庆市肿瘤医院苏州大学第一附属医院西安交大一附院陕西省人民医院西京医院长安医院等
检测方法
特异度（%）
约登指数 I期NSCLC灵敏度（%）
AUC（95%CI）
CTC
84.1
0.573
67.2
0.823 (0.773-0.874)
NSE
95.9
0.055
4.6
0.585 (0.495-0.675)
CEA
94.9
0.25
18.5
0.76 (0.69-0.83)
CA125
97.6
0.175
肺癌卵巢癌结直肠癌
CTC检测技术对比
核心技术
特异性灵敏度自动化血样体积
适应症
早期（I期）敏感性
中晚期敏感性
报告时间
可视化
CytoploRare®
（格诺）免疫磁中和晚期肺癌
89% 6h/12样本
CellSearch®
CyttelTM （北京莱尔）
ISET（滤膜) 荧光标记
70%
30% 全自动 10mL
晚期癌肿
0%
20%(2/10)
未报道
未报道
25%（22/87) 6h/8样本
61%-88% 48h/1样本
30% 48h/1样本

循环肿瘤细胞(CTC)检测

循环肿瘤细胞（CTC）检测一、什么是循环肿瘤细胞（CTC）？循环肿瘤细胞（Circulating Tumor Cell，CTC）是存在于外周血中的各类肿瘤细胞的统称，因自发或诊疗操作从实体瘤病灶（原发灶、转移灶）脱落，进入外周血循环的肿瘤细胞。

CTC非常稀少，每毫升血液中109血细胞只有几个CTC。

大部分CTC在进入外周血后会发生凋亡或被吞噬，少数能够逃逸并发展成为转移灶，增加恶性肿瘤患者的死亡风险。

二、肿瘤的发生及检测诊断全国肿瘤登记中心发布的2015年年报显示，2011年我国新增癌症病例约337万例，比2010年增加28万例——这相当于每分钟有6人被诊断为癌症。

然而，令人担忧的是这样的情势似乎仍未到达峰顶，未来可能还会不断增加。

美国约翰-霍普金斯大学Kinmel 癌症中心的Bert-Vogelstein 等专家在2013年3月份的一篇综述文章中写道：在今年将死于癌症的一百万人里，绝大部分是因为他们的癌症没有在发生、发展的前90%的时间内被发现。

因此，我们需要明确一点：癌症是一种慢性病，它只是被突然发现，并非是突然发生的。

我们需要尽可能早的发现它，从而提高治愈率。

伴随肿瘤的发生过程，肿瘤细胞的大小也随之增大。

传统方法诊断出癌症的时候，大部分已经是晚期。

晚期癌症的治愈率极低，其五年生存率也很低。

在肿瘤的发生过程中，早期到中期之间是最佳治疗期，因此，如果在早期就可以发现肿瘤的存在，必然可以提高治愈率。

临床癌症研究（Clinical Cancer Research）杂志上发表的荟萃分析（Meta-analysis）证实CTC在乳腺癌预测中的价值，结果表明早期和转移性乳腺癌患者的循环肿瘤细胞CTC检测是一个稳定的预测和预后工具。

如果将肿瘤易感性基因检测和循环肿瘤细胞检测完美结合，那么能够将肿瘤的早期发现率提高数倍。

肿瘤易感性检测是对未来可能患有癌症的一种风险预测。

如果风险等级高，除了改变生活方式外，还可以定期做循环肿瘤细胞检测，即CTC检测，而且检查频率可以适当增加，每2-3个月检查一次，从而达到实时监控的目的。

CTC检测术

10
GDS_70000_Title_v1 10
ISET膜过滤 OncoQuick分离体系无
（根据细胞密度）流式细胞检测法
免疫捕获法——磁珠分选
原理：
将特异性抗原包被在已有同源二抗的磁珠上制成免疫磁珠再与靶细胞上抗抗原结合成“靶细胞—抗原抗体—磁珠”复合物，在磁
场作用下向一定方向移动，从而富集靶细胞.
# of Cases N (%) >1 CTC N (%) >2 CTC N (%) >3 CTC N (%) >4 CTC N (%) >5 CTC
10 0 0 0 0
295 (3%) (0%) (0%) (0%) (0%)
15
GDS_70000_Title_v1 15
阳性富集- CTCs-Chip
GDS_70000_Title_v1 9
CTCs的检测方法及代表技术产品
原理技术产品
阳性富集法：
•CellsearchTM系统 •CTC芯片（CTC-chip） •MACS®Cell Separation 免疫捕获法(根据细胞表面标志物) 阴性筛选法： •Easy Sep •Cyttel
过滤法(根据细胞大小) 密度梯度离心
富集得到CTCs.
基于细胞大小过滤
特点： • 细胞完整性好； • 可完全分离上皮型、间质型CTCs； • 可检出循环肿瘤拴子； • 局限：不宜检出细胞直径小于8μm的肿瘤 • 如神经内分泌瘤
21
GDS_70000_Title_v1 21
HepG2 cells stained with anti-KL1
•CTCs的鉴定：如何鉴定所获细胞为CTCs？
※将恶性肿瘤细胞与红细胞、白细胞、正常上皮细胞、造血干细胞等区分开来

肿瘤患者外周血循环内皮细胞的检测及其临床意义

ｍａｉｎｎｕｒｎ・ｔｌｉａｉｎｆａｃ．ｅｈｄＣＥｒｅｅｔｄｉ８ｎｒｌｃｎｒｌｈａｔｙｃｎｒｌｌａｔｔｍｏｓａｄｉｃｉｃｌｓｇｉｉｎｅＭｔｏｓｇｓｎｃＣｓｗｅｅｄｔｃｅｎ４ｏｍａｏｔｏｓ（ｅｌｈｏｔｏｇｏｐｎ０ｐｔｎｓｗｉｌｎｎｕｒｔｍｏｒｕ）ｂｙｆｗｙｏｔｙａｄｔｅｎｍｂｒｃａｇｆｒｕ）ａｄ８ａｉｔｔｍａｉａｔｔｍｏｓ（ｕｒｇｏｐｅｈｇｌｃｔｍｅｒ，ｎｈｕｅｈｎｅｏＣｓｉｏＣＥｎ
【要】目的摘
２环内皮细胞（Ｅ）肿瘤患者外周血中的变化及其Ｉ意义。方法ＣＣ在涵床
测４健康对照者和８８例Ｏ例肿瘤患者外周血中ＣＣ的数量，观察肿瘤缓解患者ＣＣ数量的变化。结果（）Ｅ并Ｅ１与健康对照组（．２．３ｕ）较，瘤组ＣＣ数量（．８３５／Ｌ）著升高，异有统计学意义（一３６８Ｐ２４士１３／Ｌ比肿Ｅ４３ ± ．２ｕ显差￡．９，＜Ｏ０１；２肿瘤缓解组ＣＣ数量（．３１０／Ｌ显著低于未缓解组（．３２１／Ｌ（一３４８Ｐ＜００）．０）（）Ｅ２７ ± ．０ｕ）４３土．７／）ｔ．８，２．５。结论ＣＣ变化可能与肿瘤的发生、展有密切的关系，望作为肿瘤疗效观察的指标。Ｅ发有中图分类号：４６１Ｒ３Ｒ４．；７文献标志码：Ａ文章编号：６２９５（０８２ —４７０１７ —４５２０）４１７ —２

循环肿瘤细胞的检测方法

循环肿瘤细胞的检测方法一、C TCs 的体外检测方法CTCs 的富集方法是基于物理或生物特性的。

前者取决于肿瘤细胞的尺寸、电性能等其他物理特性，而后者主要依赖于抗原抗体结合。

近年来，联合物理和生物特性检测的新型微流控芯片技术具有自动化、微型化、高通量、可集成下游分析等优点，在CTCs 检测分析中显示了巨大优势。

1. 基于物理特性的富集方法研究表明，CTCs 比造血细胞更大、更硬。

基于这些物理特性的差异，已经开发了许多技术来提高CTCs 富集率，其中膜过滤分离肿瘤细胞技术（isolation by size of epithelial tumor cells，ISET）系统是最早基于尺寸过滤的CTCs 分离的技术之一。

在该系统中，血液被稀释，然后用8 μm 孔径过滤器过滤。

CTCs 由于体积较大而被过滤器保留，红细胞和白细胞由于体积小于孔径而可以通过随机分布的孔。

但由于CTCs 和白细胞的大小重叠，依赖大小的过滤系统捕获目标细胞的效率有限。

因此，Sun 等提出了一种增加细胞大小的策略，即在细胞过滤前利用修饰过的微珠来特异性结合CTCs，以提高捕获效率。

使用该微流体捕捉系统以1 ml/min 的流速可以从全血样本中分离出高达91%的靶细胞。

与ISET 系统类似，Screen Cell 系统通过使用微孔膜过滤器，通过筛孔大小分离CTCs。

该系统基于微过滤技术的过滤膜，可以使有核细胞通过，而CTCs 被拦截。

Screen Cell 系统具有高通量持续处理大量血液的潜力，并且具有相关的细胞和分子生物学技术，以及与CTCs 及其潜在基因异常的图形和鉴定相关的技术，可以方便地分析提取到过滤器上的肿瘤细胞。

此外，从血液中分离出来的细胞能最大程度地保存其活性和完整性，为CTCs 的体外培养奠定了基础。

流体辅助分离技术（fluid-assisted separation technique，FAST）是一种新型的离心微流控系统。

肺癌外周血液体活检：如何选择ctcs与ctDNA课件

将一个标准PCR反应分配到大量微小的反应器中，在每个反应器中包含或不包含一个或多个拷贝的目标分子( DNA模板) ，实现“单分子模板PCR扩增”，扩增结束后，通过阳性反应器的数目“数出”目标序列的拷贝数。
●: 阳性微滴（ : 靶标分 1） ○: 阴性微滴（ 0） : 子
有限稀释
一个待分析的PCR反应体系成千上万个独立的PCR反应体系
ctcs检测技术
♠目前常见免疫捕获技术（一代技术）
免疫捕获法依靠抗体与细胞表面特定抗原结合进行分离只能分离具有特定表面抗原（如EpCAM）的 CTC
滤膜法依据细胞大小进行分离全面分离各类型CTC 其他依据其他特征（如核质比、细胞密度等）进行分离
ctcs检测技术
CanPatrolTM—技术原理
肺癌外周血液体活检：如何选择ctcs与ctDNA
肺癌外周血液体活检
“液体活检” 无创肿瘤筛查方法。其来源主要分为：循环肿瘤细胞（circulating tumor cells,CTCs）循环肿瘤DNA（circulating tumor DNA, ctDNA）
ctcs与ctDNA检测意义
♠
ctDNA检测技术
已知突变位点检测
未知突变位点检测
（突变率> 2%）
（突变率< 2%）
l数字PCR lBEAMing技术 l标记扩增深度测序（TAM-Seq） l癌症个体化深度测序 (CAPP-Seq)
敏感度
l全基因组测序 l全外显子测序
lRNA末端平行分析
法 l全基因组甲基化测序
数字PCR
泊松分布阴性微滴比例推算起始靶分子的绝对量
优点：可绝对定量，灵敏度可达单个核酸分子，检测限低至0.001%；缺点：只能检测已知的突变位点，通量低；

循环肿瘤细胞(CTC)

循环肿瘤细胞(CTC)循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cell; CTC)通常是指因自发或诊疗操作引起的从原发灶或转移灶侵入人体外周血的肿瘤细胞1。

此概念是在1869年由Ashworth等首次提出的2。

CTC一般以单细胞或者细胞团的形式存在于循环系统中。

大部分侵入循环系统的肿瘤细胞会在短期内死亡，只有极少数具有高度转移倾向和活力的CTCs才能存活下来，相互聚集成团，并在一定条件下发展为转移灶3。

进入外周血循环是发生肿瘤转移的必要条件，因此在外周血中检测到肿瘤细胞预示着将有可能发生肿瘤转移，目前临床已经采用CTC作为评估肿瘤预后的参考指标之一4。

近年来，CTCs在临床应用的研究获得了长足的发展，越来越的研究表明其可以为多种肿瘤提供重要的预后信息，如转移性乳腺癌5，直肠癌6，前列腺癌7等。

由于CTCs检测的对象是血液标本，取材比传统意义上的组织活检更方便，而且可重复性强，而被称之为“液态的活检”8。

多项研究发现CTCs作为肿瘤个体化治疗的一个重要靶标，在肿瘤转移起始中发挥重要作用9。

除了有助于肿瘤转移外，CTCs还具有上皮细胞-间充质转化(EMT)的特征，使得CTCs细胞具有一定的生存优势能够成功入侵新的组织位点并形成转移灶10。

Huang CH等研究发现血液中CTCs的数量与肿瘤的恶性程度有关，细胞数量的变化程度可反映治疗的效果9。

间变性淋巴瘤激酶(Anaplasticlymphomakinase, ALK)基因是一种致癌驱动基因。

突变、基因扩增或染色体重排均可以导致ALK基因异常激活，从而促进肿瘤生长12。

在3-7%的非小细胞肺癌患者中ALK基因重排是一个独特的分子子集，主要是由于该基因发生重排并与其他基因进行了融合。

Vincent Faugeroux等证实在ALK阳性的非小细胞肺癌患者中通过检测CTCs发现了ALK重排，这项研究为ALK阳性的患者在使用ALK抑制剂治疗诊断方面提供了新的观点10。

外周血循环肿瘤细胞(CTC)检测对早期发现乳腺癌术后转移的作用分析

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2023版《循环肿瘤细胞检测在胃肠道肿瘤诊疗中的应用中国专家共识》解读ppt课件

供更为精确的个体化治疗方案。
02
在预后评估中的应用
共识指出，CTC检测可用于胃肠道肿瘤患者的预后评估。通过定期监测
患者CTC水平，可实时了解患者病情变化，为医生提供有力依据，进而
调整治疗方案。
03
在疗效监测中的应用
在治疗过程中，共识推荐定期进行CTC检测，以评估治疗效果。通过比
较治疗前后的CTC水平变化，可及时发现治疗反应，为医生调整治疗方
CTC检测在胃肠道肿瘤预后评估中的案例分享
案例三：CTC检测评估胃癌患者预后
• 预后判断。CTC检测在胃癌患者预后评估中发挥重要作用，通过检测循环肿瘤细胞的数量和活性，可为医生提供患者预后的参考信息。
案例四：CTC检测监测胃肠道肿瘤复发
• 复发监测。对于胃肠道肿瘤患者，CTC检测可用于监测肿瘤复发，及时发现并采取干预措施，提高患者的生存率。
专家共识的目的和意义
总结词
指导实践、推动研究、提高诊疗水平
详细描述
专家共识的目的在于指导临床实践，推动相关领域的进一步研究，并提高胃肠道肿瘤的诊疗水平。通过明确CTC 检测在胃肠道肿瘤诊疗中的价值和地位，共识有助于规范临床操作，提高诊疗的准确性和效率。同时，共识的发布也将促进国内外学术交流和合作，推动胃肠道肿瘤诊疗技术的创新和发展。
2023版《循环肿瘤细胞检测在胃肠道肿瘤诊疗中的应用中国专家共识》解读
汇报人：XXX 2023-11-17
目录
• 介绍 • 循环肿瘤细胞（CTC）检测的基础理
论与技术 • CTC检测在胃肠道肿瘤诊疗中的应用
价值 • 专家共识解读与临床实践建议 • 案例分享与讨论
01 介绍
共识概述
总结词

循环肿瘤细胞检测原理及其应用

02
CellSearch检测结果
CTCs： DAPI + CK- PE+ CD45- APC-
02
CellSearch CTC 检测结果 Cutoff 值
Unfavorable
≥5 CTCs/7.5ml
Favorable
0-4 CTCs/7.5ml
优点：血液中捕获肿瘤细胞的效率达到70%；无标记，细胞保存良好活性不足之处：细胞的介电性能会逐渐变化，必须在较短的时间内完成；承载介质的电导率必须适当的控制在一个较低的范围
02
基于分子生物学特性的分离捕获方法
免疫磁珠分离：最常见且有效地检测捕获脱落肿瘤细胞的方法阳性富集—捕获肿瘤细胞负性筛选—去除非肿瘤细胞（如白细胞、红细胞）
基线 CTC 检测结果大于等于5个细胞病人预后不好，总生存期和无进展生存期较短基线 CTC 检测结果小于5个细胞的病人预后良好，总生存期和无进展生存期较长此 Cutoff 值基于临床研究实验得出，并已被 FDA 和 CFDA 批准用于临床实践
临床应用转移性癌症的监护无进展生存期总生存期未来: 疾病管理
肿瘤细胞
白细胞
抗 EpCAM 磁珠
EpCAM 抗原
CD45 抗原
CK 抗原
抗 CD45-APC 染料
抗 CK-PE 染料
荧光染料
EpCAM – 上皮细胞粘附分子 APC – 异藻蓝蛋白荧光染料 CK – 细胞角蛋白 PE – 藻红蛋白荧光染料 DAPI – 4,6-二脒基-2-苯基吲哚（DNA荧光染料）
种子和土壤学说
循环肿瘤细胞的存在正是实体恶性肿瘤远处转移的根源
02
循环肿瘤细胞CTC
癌细胞从原位脱离侵犯血液循环，在循环中存活渗出进入远端器官在继发部位增殖

外周血中循环肿瘤细胞标志物的筛查及分析

外周血中循环肿瘤细胞标志物的筛查及分析循环肿瘤细胞（circulating tumor cells，CTCs）是指在血液循环中存在的、来自原发肿瘤的恶性细胞。

CTCs的检测可以帮助医生评估患者肿瘤治疗的疗效和预后。

因此，外周血中循环肿瘤细胞标志物的筛查及分析技术的研究和应用备受关注。

一、循环肿瘤细胞标志物的种类循环肿瘤细胞标志物是指CTCs的表面分子、代谢产物或DNA/RNA等，在CTCs检测中用于准确鉴定和筛查细胞的指标。

一些常用的循环肿瘤细胞标志物包括：上皮细胞间黏附分子（epithelial cell adhesion molecule，EpCAM）、细胞集落识别分子1（cluster of differentiation 44，CD44）、cytokeratins（CKs）、CD133、糖类抗原125（carbohydrate antigen 125，CA125）、糖类抗原199（carbohydrate antigen 199，CA199）。

这些标志物的检测通常采用免疫分离、荧光原位杂交或聚合酶链式反应等技术手段。

二、CTCs的检测技术目前，CTCs的检测技术主要包括免疫分离、细胞种植、荧光原位杂交、数字化PCR、流式细胞术、微流控芯片等技术。

而免疫分离技术是目前使用最广泛、最常见的一种技术。

免疫分离技术利用免疫磁珠的高度特异性与细胞表面标志物进行结合，以实现对细胞的捕获。

通过激光共聚焦显微镜或荧光显微镜对捕获到的细胞进行检测，可以获取CTCs的数量、形态、表面标志物等信息，进而完成检测和分析。

三、CTCs的临床应用CTCs的检测可以帮助医生评估患者肿瘤治疗的疗效和预后，特别是在术后复发及转移的监测中具有重要意义。

此外，CTCs的检测还可以为肿瘤的个体化治疗提供借鉴和指导。

当前，CTCs的应用呈现多样化态势，如在肝癌、乳腺癌、结直肠癌、肺癌、胃癌等多种恶性肿瘤的筛查、诊断和监测中逐步得到广泛应用。

CTC循环肿瘤细胞详解及应用_20231031

CTC(循环肿瘤细胞)详解及应用9肿瘤异质性——肿瘤耐药的罪魁祸首之一空间异质性时间异质性疗程1疗程2疗程3液体活检- 动态监控- 实时调整用药方案- 及时进行疗效评估10液体活检技术——肿瘤精准治疗的指南针循环肿瘤细胞 (CTC)外泌体临床需求Ø癌症预警早诊Ø肿瘤预后复发监控Ø肿瘤耐药位点筛查Ø药敏筛查Ø药物疗效持续评估液体活检循环肿瘤细胞u 在肿瘤组织的全生命周期，特别是在极早期，就开始有完整的肿瘤细胞进入人体外周血，这些细胞成为循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cell,简称CTC)。

CTC以单个细胞或细胞团（又称循环肿瘤微栓子，CTC-microemboli，CTC-cluster，简称CTM）的形式存在于循环系统中。

u 循环肿瘤细胞(CTC)检测是一种非侵入性的液体活检技术，相比于组织活检，具有无创，可重复采样，可实时长期跟踪，可克服肿瘤异质性，结果准确等优势，目前已经越来越广泛地应用于肿瘤疗效监测、预后评估、复发监测等场景，成为辅助指导癌症患者的个体化治疗的一大“利器”，被麻省理工评为2015年“10大全球突破性技术”。

u 肿瘤细胞在进入外周血循环的过程中会发生上皮-间质转变（EMT，Epithelial Mesenchymal Transition），故CTC存在不同类型，包括上皮型、间质型和上皮-间质混合型。

CTM和间质细胞表型CTC具有更强的转移潜能。

u 研究表明，检测出CTM的患者平均PFS时间比仅有单个CTC的患者短。

同样，与只有单个CTC的患者相比，在多个时间点上检测出CTM的患者平均OS更短，死亡风险显著增高。

Clotilde Costa, et.al., Analysis of a Real-World Cohort of Metastatic Breast Cancer Patients Shows Circulating Tumor Cell Clusters (CTC-clusters) asPredictors of Patient Outcomes. Cancers (Basel). 2020 Apr 29;12(5).间质型CTC上皮型CTC混合型CTC上皮型CTM混合型CTM间质型CTMCTC检测优势显著12广阔的临床应用前景1314广泛的临床适用人群无药可用人群高危人群难取样人群复发人群用药方案筛选药敏筛选及疗效评估免疫抑制剂用药评估癌前筛查肝硬化、肺部结节、乳腺结节等辅助诊断鉴定原发灶；个性化用药指导复发监控靶向用药；耐药评估；NCCN乳腺癌临床实践指南正式引入含有CTC 的cM0(i+)分期。

2024版ctc循环肿瘤细胞ppt课件

2024/1/27
9
CTC与肿瘤转移的关系
CTC与肿瘤转移潜能
CTC数量与肿瘤患者的预后密切相关，高数量的CTC往往预示着更高的转移潜能和更差的预后。
CTC在肿瘤转移中的作用
CTC可作为肿瘤转移的“种子”，在适宜的微环境下重新生长形成转移灶。同时， CTC还可通过分泌生长因子、促血管生成因子等促进肿瘤转移。
流式细胞术
将血液样本通过高速流动的细胞悬液，利用光学、电学等原理对细胞进行快速检测和分类。该方法可实现对CTC的定量分析和多参数检测，但操作复杂且成本较高。
2024/1/27
微流控芯片技术
利用微流控芯片模拟人体微环境，实现CTC的高效捕获和检测。该技术具有高通量、高灵敏度和低成本的优点，是未来CTC检测的重要发展方向。
对未来CTC研究的展望与建议
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深入研究CTC的生物学特性及其与肿瘤转移的关系，为肿瘤
治疗提供新靶点。
开发高效、灵敏的CTC检测技术，提高检测准确性和可重复
性。
开展大规模、多中心的临床研究，验证CTC检测在肿瘤诊疗
中的价值。
加强跨学科合作，推动CTC研究在临床转化和应用方面的发
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CTC检测技术的改进与创新
提高检测灵敏度
通过改进现有技术或开发新技术，提高CTC检测的灵敏度，降低假阴性率。
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提高检测特异性
针对CTC的特异性标志物进行深入研究，开发高特异性的检测方法，减少假阳性结果。
实现无创检测
探索基于血液或其他体液的无创检测技术，减轻患者痛苦，提高检测便利性。
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CTC在肿瘤研究中的重要性
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血液肿瘤PPT课件

临床表现与诊断
临床表现
血液肿瘤的临床表现多样，包括发热、贫血、出血、淋巴结肿大、肝脾肿大和骨痛等症状。
诊断方法
血液肿瘤的诊断依赖于临床表现、实验室检查和影像学检查等多种手段的综合分析。常用的检查方法包括血常规、骨髓穿刺、淋巴结活检和影像学检查等。
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常见血液肿瘤类型
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常见血液肿瘤类型
白血病
急性淋巴细胞白血病
起源于淋巴细胞的B系或T系细胞在骨内异常增生的恶性肿瘤性疾病。急性髓系白血病
髓系造血干/祖细胞恶性疾病，以骨髓与外周血中原始和幼稚髓性细胞异常增生为主要特征。
慢性粒细胞白血病
影响血液及骨髓的恶性肿瘤，它的特点是产生大量不成熟的白细胞，这些白细胞在骨髓内聚集，抑制骨髓的正常造血；并且能够通过血液在全身扩散，导致病人出现贫血、容易出血、感染及器官浸润等。
在医疗过程中，医护人员需遵循无菌操作规范，减少外源性感染
的风险。
合理使用抗生素
根据患者的实际情况和病原菌特点，合理选择和使用抗生素，以
预防和治疗感染。
加强患者免疫力
通过营养支持、免疫调节等手段，提高患者的免疫力，降低感染发
生率。
感染防控策略
严格执行无菌操作
在医疗过程中，医护人员需遵循无菌操作规范，减少外源性感染
适应症与禁忌症
手术过程与注意事项
造血干细胞移植术适用于部分血液肿瘤患者，但对于存在严重并发症或感染的患者可能不适用。
包括干细胞采集、处理、回输等步骤，需严格遵守无菌操作规范，并密切监测患者的生命体征和移植效果。
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并发症预防与处理措施
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并发症预防与处理措施
感染防控策略
严格执行无菌操作