CTC循环肿瘤细胞检测-培训
ctc循环肿瘤细胞课件
ctc循环肿瘤细胞课件一、教学内容本节课的教学内容选自人教版小学科学六年级下册第五单元《生物与生活》的第三课时《细胞的生活》。
本节课主要学习细胞的基本结构和功能，重点掌握细胞膜、细胞质、细胞核等结构，以及它们在维持细胞生命活动中的作用。
二、教学目标1. 了解细胞的基本结构，认识细胞膜、细胞质、细胞核等组成部分。
2. 理解细胞各部分结构的功能，掌握细胞膜的作用以及细胞质和细胞核在细胞生命活动中的重要性。
3. 培养学生的观察、思考和动手能力，提高他们对生物学知识的兴趣。
三、教学难点与重点重点：细胞膜、细胞质、细胞核等结构的功能。
难点：细胞膜的作用以及细胞质和细胞核在细胞生命活动中的重要性。
四、教具与学具准备教具：PPT、细胞模型、显微镜等。
学具：笔记本、彩色笔、显微镜等。
五、教学过程1. 实践情景引入：邀请一位同学分享他在生活中观察到的细胞现象，如种子的发芽、伤口的愈合等。
2. 知识讲解：通过PPT展示细胞的基本结构，讲解细胞膜、细胞质、细胞核等组成部分，以及它们在细胞生命活动中的作用。
3. 例题讲解：以洋葱表皮细胞为例，引导学生观察细胞结构，理解细胞膜、细胞质、细胞核等功能。
4. 随堂练习：让学生分组观察不同植物细胞的结构，填写观察记录表，巩固所学知识。
5. 动手实践：让学生用显微镜观察洋葱表皮细胞，并尝试绘制细胞结构图。
六、板书设计板书内容：细胞的基本结构：细胞膜：保护、控制物质进出细胞质：含有细胞器，维持细胞生活活动细胞核：储存遗传信息，控制细胞生长、分裂七、作业设计1. 作业题目：观察身边的植物细胞，描述细胞膜、细胞质、细胞核等结构的特点及功能。
2. 答案：请根据观察结果，描述细胞膜、细胞质、细胞核等结构的特点及功能。
八、课后反思及拓展延伸1. 课后反思：本节课通过实践情景引入、知识讲解、例题讲解、随堂练习、动手实践等环节，让学生掌握了细胞的基本结构和功能。
在教学过程中，要注意关注学生的学习情况，及时解答他们的疑问，提高教学效果。
循环肿瘤细胞CTC检测 PPT
阴性富集流程图
全亚型、高效率、非依赖
通用于绝大部分实体肿瘤、非血源性循环稀有细胞的富集
我们的选择
imFISH
imFISH技术将基因水平的FISH技术与蛋白水平的 免疫荧光染色技术相结合,是兼具核遗传信息及细 胞形态改变的精准CTC鉴定分析方法。
技术优势： ➢ 核酸水平稳定性、灵敏度高（80％） ➢ 引入CD45染色，提高特异性（97％) ➢ 细胞计数、核型分析、表型分析、分子分型
便捷性
CTC只需采集少量外周静脉血便可进行检测，对人体基 本无创，取样便捷，适于动态连续性监测。
循环肿瘤细胞CTC临床应用方向
CTC临床重点应用：一、辅助诊断
判断病灶良恶性 无创便捷，发现早期隐匿转移
辅助传统TNM参考分期 提供适时诊断信息，实现精准治疗
辅助诊断
CTC检测应用于辅助诊断
诊断难
异常占位，良性? 恶性? 病灶位置不宜活检怎么办? 有创操作，是否有瘤细胞种植？
诊准难
肿瘤异质性的影响? 临床分期与病理分期不一致?如何针对肿瘤时空信 Nhomakorabea变化提供
即时诊断信息?
辅助诊断
CTC功能：
对尚未完善病理诊断的患者，CTC 可联合影像学、血清学作为辅助判断病灶良恶性的指标。 同时,CTC是对原发灶与转移灶信息的全面反映，可弥补现有传统TNM 分期的不足，提示早 期微转移的存在风险，指导临床调整诊疗策略，制定更加合理的个体化诊疗方案（如进一 步筛查转移、拟定新辅助化疗、辅助化疗方案等。
联合影像学更客观评价疗效 监测耐药发生
疗效评估、耐药性监测
胰腺癌
49.00% （单8）
75.49%
72.39% 70.3% 70.92%
（8+17） （8+17） （1+8） （8+3）
人外周血循环肿瘤细胞(CTC)
人外周血循环肿瘤细胞(CTC)检测技术的研发及临床应用开发美国肿瘤协会于2006 年发表的年度报告指出，目前全世界范围内每3 人中就有1 人在其一生中会患有某种肿瘤，而且肿瘤发病率在发展中国家随着污染程度的增加，患病几率还会高于1/3 的比例。
现今全世界用于肿瘤治疗与防治的费用每年以16.5% 的比例递增。
仅用于乳腺癌，结直肠癌及前列腺癌（还不包括发病率最高的肺癌）的投资，目前世界范围内已达每年92 亿美元。
目前全世界用于肿瘤诊断的方法可归为三大类：病理学（活检切片）；影像学（超声，X光，CT, PET 等）和血清学（血清肿瘤相关蛋白，如CA-125, CA-199, CEA 等），但所有这些方法都有不可避免的缺点，例如灵敏性及特异性差，过于依赖医生判断的主观性等。
因此目前临床急需一种能够为医生及病人提供准确，快速的肿瘤检测手段。
经过长时间的大量研究，美国FDA 认证的人外周血循环肿瘤细胞（Circulating Tumor Cell, CTC）检测目前已被公认为最好及最可观的检测手段之一。
目前已有越来越多的国内外医生开始应用此技术作为肿瘤检查的重要辅助手段。
不仅于此，CTC 检测也被公认为是目前国外新近流行的肿瘤治疗方法-即阻断肿瘤细胞入血转移的唯一有效检测指标。
除了上述CTC可作为肿瘤检测手段外，CTC还可成功应用于以下一系列其它方面的用途：(1)个体化治疗的体外肿瘤药物筛选；(2)体内化疗药物药效的快速评估: 相对于每12周一查的CT 诊断，CTC在第1-2周即可显示药效结果，这一点对临床医生和病人尤为重要；(3) 根据CTC数目，判断病人愈后状况及存活时间；（4）肿瘤病人复发的监测与及时诊断；及（5）正常人群体检普查以利于尽可能的肿瘤早期诊断。
除了应用于临床外，CTC 亦可应用于众多药厂和科研机构的基础研究，包括寻找新的肿瘤标识物以及开发新的抗肿瘤药物等。
目前美国FDA已于2004年认证了美国上市公司Immunicon/Veridex的CTC检测技术及其临床应用。
ctc循环肿瘤细胞检测
CTC循环肿瘤细胞检测循环肿瘤细胞（CTC）是一种罕见的血液中的癌细胞，可以从原发肿瘤脱落，并通过血液循环传播到其他部位。
CTC的检测对于癌症的早期诊断、治疗选择和预后判断具有重要意义。
CTC循环肿瘤细胞检测是一种非侵入性、无创的方法，可以提供关于肿瘤发展和蔓延的有价值的信息。
本文将介绍CTC循环肿瘤细胞检测的原理、方法和应用。
原理CTC循环肿瘤细胞检测的原理基于CTC的特殊性质。
CTC具有一定的生物特性，如细胞形态学特征、表面标记、核酸和蛋白质表达等，使其能够与正常血液细胞区分开来。
通过对CTC进行特异性标记和分离，可以将其从血液中分离出来，并进行进一步的表征和分析。
目前，CTC的检测方法大致可以分为两类：物理方法和生物学方法。
物理方法包括密度梯度离心、滤膜分离和微流控芯片等，通过差异化的物理性质实现CTC的分离。
生物学方法则利用CTC与正常血液细胞之间的生物学区别，如表面标记的差异、特定蛋白和核酸标记等，通过生物学分子靶向的方式进行CTC的富集和分离。
方法CTC循环肿瘤细胞检测的方法多样，具体的选择取决于实验室的设备和研究目的。
下面将介绍几种常见的CTC检测方法：密度梯度离心法密度梯度离心法是最早用于CTC检测的方法之一。
该方法通过利用瘦脂蛋白或葡聚糖等高分子物质在不同浓度下形成的梯度来分离CTC。
通过对梯度离心后，在不同密度层次上找到CTC，并进行进一步的分析和鉴定。
滤膜分离法滤膜分离法基于滤膜的孔径大小来分离不同大小的细胞。
通过选择合适的滤膜孔径，可以将CTC与正常血液细胞分离开来。
然后，通过对滤膜上沉积的细胞进行进一步的标记和分析，即可获得CTC的信息。
微流控芯片法微流控芯片法是一种新兴的CTC检测方法。
该方法利用微流控技术，在芯片上制造出复杂的细流体网络，并通过微米级别的微通道将CTC富集和分离。
微流控芯片法具有高通量、高灵敏度和高特异性的优点，被广泛应用于CTC的检测。
应用CTC循环肿瘤细胞检测在临床和研究领域具有广泛的应用前景。
2023版《循环肿瘤细胞检测在胃肠道肿瘤诊疗中的应用中国专家共识》解读ppt课件
CTCs具有稀有性、异质性和动态变化的特点，是一种非侵入性的“液态活检”手 段。
检测原理及技术方法
检测原理
基于物理、生化及免疫学方法对血液中的CTCs进行富集和鉴 定。
技术方法
包括大小、密度、电荷等物理特性差异进行富集的方法（如 滤膜法、微流控芯片技术等）、利用抗体与抗原特异性结合 进行捕获的方法（如免疫磁珠法）以及其他新兴技术（如基 于核酸适配体的方法等）。
2023版《循环肿瘤细胞检测在胃 肠道肿瘤诊疗中的应用 中国专家共识》解读
汇报人：XXX 2023-11-17
目 录
• 引言 • 循环肿瘤细胞检测的基本原理与技术 • 循环肿瘤细胞检测在胃肠道肿瘤诊疗中的应用 • 专家共识详细解读 • 未来展望与研究方向
01 引言
背景介绍
癌症负担
胃肠道肿瘤是我国常见的恶性肿瘤之一，严重威胁着人民的健康和生命安全， 给社会和家庭带来巨大的负担。
VS
早期发现
CTC检测有助于胃肠道肿瘤的早期发现， 从而提高治疗的成功率和患者的生存率。
在胃肠道肿瘤分期中的应用
判断肿瘤侵袭程度
通过CTC检测可以判断胃肠道肿瘤的侵袭程度，有助于准确分期。
指导治疗方案
准确的分期信息有助于医生为患者制定更合适的治疗方案。
在胃肠道肿瘤预后评估中的应用
预测生存时间
CTC检测可用于预测胃肠道肿瘤患者的生存时间，为患者提供更个性化的治疗建议。
探索循环肿瘤细胞检测在其他肿瘤类型中的应用
拓宽应用领域
基于现有研究基础，进一步探索循环肿瘤细胞检测在 其他肿瘤类型（如肺癌、乳腺癌等）中的应用，为更 多肿瘤患者提供个体化诊疗服务。
跨瘤种比较
开展循环肿瘤细胞检测在不同肿瘤类型中的比较研究 ，揭示其在各类肿瘤中的共性与特性，为临床提供更 多维度的参考信息。
循环肿瘤细胞(CTC)检测 (2)
循环肿瘤细胞(CTC)检测引言循环肿瘤细胞（CTC）是指从原发肿瘤中脱落并进入血液循环中的癌细胞。
它们是肿瘤转移和复发的主要起源，能提供重要的生物学信息和预测患者预后的依据。
因此，CTC检测对于肿瘤的早期诊断、治疗监测以及指导个体化治疗具有重要意义。
在过去的几十年中，CTC检测技术得到了快速发展和广泛应用。
通过利用特定的标记物（如抗原、RNA或DNA等），结合高灵敏的检测方法，可以在血液样本中检测到极低浓度的CTC。
本文将介绍CTC检测的原理、常用的检测方法以及其在临床上的应用。
原理CTC检测的原理基于以下几个关键步骤：1.血液样本采集：通过采集患者的外周血样本，包括血浆或全血。
2.CTC富集：为了提高CTC的检测灵敏度，需要将CTC从血液中富集出来。
一种常用的方法是通过利用CTC表面标记物的特异性，使用磁珠、细胞捕获装置或微流体装置等实现。
3.CTC检测：将富集后的CTC进行分离和检测。
目前常用的检测方法包括免疫细胞荧光染色、聚合酶链反应（PCR）、流式细胞术（FACS）等。
这些方法可以通过检测CTC表面标记物的存在与否，或者检测CTC特异基因、蛋白质或RNA等分子标记来确定CTC的存在。
4.CTC鉴定和计数：根据CTC的特征，如核形态、大小、核质比等特征，对CTC进行鉴定和计数。
一些图像处理和自动化技术也可以用来提高鉴定的准确性和效率。
常用的CTC检测方法免疫细胞荧光染色法免疫细胞荧光染色法是目前最常用的CTC检测方法之一。
该方法利用免疫荧光染色技术，通过将CTC与特定的抗原结合，然后使用荧光染料进行标记。
通过在荧光显微镜下观察，可以准确识别CTC的存在与否。
PCR法PCR法通过扩增CTC特异基因的片段，来快速检测和鉴定CTC。
该方法的优点是灵敏度高、检测速度快，然而由于PCR 技术的特点，可能存在假阳性结果的问题。
FACS法FACS法通过流式细胞仪对CTC进行快速分离和检测。
该方法可以同时检测多个标记物，提高检测的准确性和灵敏度。
循环肿瘤细胞CTC检测及临床应用
循环肿瘤细胞C T C检测及临床应用Prepared on 22 November 2020循环肿瘤细胞检测及临床应用中文摘要：循环肿瘤细胞是从原发肿瘤扩散，进入到血液或淋巴系统的肿瘤细胞。
循环肿瘤细胞在血液中含量稀少，一般先将循环肿瘤细胞富集，然后再进行检测，现在已经开发了多种细胞富集和检测技术。
本文主要对CTCs的富集和检测技术研究进展，以及CTCs在临床分析和研究上的应用进行了综述。
关键词：循环肿瘤细胞富集检测临床Abstract:Circulatingtumorcellscomefromtheprimarytumorproliferation,andprolife ration,癌症转移的过程是循环肿瘤细胞(CirculatingTumorCells，CTCs)从原发肿瘤分离，通过循环系统扩散，进入血液或者淋巴系统，在远处形成新的肿瘤，最终导致大多数的癌症病人死亡。
1869年，Ashworth在一例癌症死亡患者的外周血中发现了类似肿瘤的细胞，并首次提出了CTCs的概念。
从此，越来越多的研究表明，CTCs的出现与癌症密切相关。
通过上皮-间质转化(EMT)，实体瘤的上皮细胞进行细胞的变化，使他们通过增加流动性和侵袭性脱离组织，进入到血液中，附着，、发展成远端转移。
由于CTCs能够代表原发肿瘤的表型和遗传组成，并能够作为任何转移性肿瘤的”液体活检”，CTCs的富集分离和特征研究，十分具有吸引力。
CTCs的富集和计数技术已经建立，其中CTCs的计数可以成为预测指标，当其大于已知的阈值时，就预示着病人就患有转移性乳腺癌，、前列腺癌，、结直肠癌等。
基于临床试验，美国FDA批准了一种临床检测CTCs的CellSearch技术，用于上述癌症的CTCs的富集和计数。
CellSearch技术成功的证明了CTCs确实表征了疾病的活跃，CTCs数量的增加预示着病情的恶化，可以通过CTCs了解原发性和转移性肿瘤，以CTCs为基础的分析，可以帮助人们实时诊断和预测，对病情做出决定，并取样检测耐药性。
循环肿瘤细胞(CTC)检测
循环肿瘤细胞（CTC）检测一、什么是循环肿瘤细胞（CTC）？循环肿瘤细胞（Circulating Tumor Cell，CTC）是存在于外周血中的各类肿瘤细胞的统称，因自发或诊疗操作从实体瘤病灶（原发灶、转移灶）脱落，进入外周血循环的肿瘤细胞。
CTC非常稀少，每毫升血液中109血细胞只有几个CTC。
大部分CTC在进入外周血后会发生凋亡或被吞噬，少数能够逃逸并发展成为转移灶，增加恶性肿瘤患者的死亡风险。
二、肿瘤的发生及检测诊断全国肿瘤登记中心发布的2015年年报显示，2011年我国新增癌症病例约337万例，比2010年增加28万例——这相当于每分钟有6人被诊断为癌症。
然而，令人担忧的是这样的情势似乎仍未到达峰顶，未来可能还会不断增加。
美国约翰-霍普金斯大学Kinmel 癌症中心的Bert-Vogelstein 等专家在2013年3月份的一篇综述文章中写道：在今年将死于癌症的一百万人里，绝大部分是因为他们的癌症没有在发生、发展的前90%的时间内被发现。
因此，我们需要明确一点：癌症是一种慢性病，它只是被突然发现，并非是突然发生的。
我们需要尽可能早的发现它，从而提高治愈率。
伴随肿瘤的发生过程，肿瘤细胞的大小也随之增大。
传统方法诊断出癌症的时候，大部分已经是晚期。
晚期癌症的治愈率极低，其五年生存率也很低。
在肿瘤的发生过程中，早期到中期之间是最佳治疗期，因此，如果在早期就可以发现肿瘤的存在，必然可以提高治愈率。
临床癌症研究（Clinical Cancer Research）杂志上发表的荟萃分析（Meta-analysis）证实CTC在乳腺癌预测中的价值，结果表明早期和转移性乳腺癌患者的循环肿瘤细胞CTC检测是一个稳定的预测和预后工具。
如果将肿瘤易感性基因检测和循环肿瘤细胞检测完美结合，那么能够将肿瘤的早期发现率提高数倍。
肿瘤易感性检测是对未来可能患有癌症的一种风险预测。
如果风险等级高，除了改变生活方式外，还可以定期做循环肿瘤细胞检测，即CTC检测，而且检查频率可以适当增加，每2-3个月检查一次，从而达到实时监控的目的。
文档：循环肿瘤细胞(CTC)
循环肿瘤细胞(CTC)循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cell; CTC)通常是指因自发或诊疗操作引起的从原发灶或转移灶侵入人体外周血的肿瘤细胞。
此概念是在1869年由Ashworth等首次提出的，2015年研究人员成功培育出第一株由CTC产生的永生细胞株。
CTC一般以单细胞或者细胞团的形式存在于循环系统中，大部分侵入循环系统的肿瘤细胞会在短期内死亡，只有极少数具有高度转移倾向和活力的CTCs才能存活下来，并在一定条件下发展为转移灶。
一般在外周血中大约105~107个单核细胞中才有一个CTCs，因此为获得更好的灵敏度和特异性，对检测技术的要求极高。
由于CTCs检测的对象是血液标本，取材比传统意义上的组织活检更便捷且重复性强，属于“液态活检”的一种。
就概念而言，广义液体活检指从血液、尿液、唾液甚至脑脊液等人体体液中获取相关疾病信息的技术。
临床科研中应用的液体活检，主要是通过检测并分析血液中的循环肿瘤细胞（circulating tumor cells，CTCs）、游离肿瘤脱氧核糖核酸片段（Circulating Tumor DNA ，ctDNA）、外泌体(exosomes)、分泌物（secretomes）等组分对患者进行早期筛查、诊断并监测癌症发展演变的技术。
近年来，CTCs在临床应用的研究获得了长足的发展，积累的研究表明CTCs可更有效的反应肿瘤在机体内的发生、发展、转移、复发的情况，对预后判断、疗效检测及转移机制研究有更切实的指导意义。
间变性淋巴瘤激酶(Anaplasticlymphomakinase, ALK)基因是一种致癌驱动基因。
突变、基因扩增或染色体重排均可以导致ALK基因异常激活，从而促进肿瘤生长。
在3-7%的非小细胞肺癌患者中ALK基因重排是一个独特的分子子集，主要是由于该基因发生重排并与其他基因进行了融合。
Vincent Faugeroux等证实在ALK阳性的非小细胞肺癌患者中通过检测CTCs发现了ALK重排，这项研究为ALK阳性的患者在使用ALK抑制剂治疗诊断方面提供了新的观点。
ctc培养方法
ctc培养方法CTC培养方法CTC（循环肿瘤细胞）是指从肿瘤组织或肿瘤患者的外周血中检测到的脱落的肿瘤细胞。
CTC的检测和分离是目前肿瘤临床诊断和治疗中的热点研究方向之一。
下面将介绍一种常用的CTC培养方法。
一、细胞准备在进行CTC培养之前，需要从肿瘤患者的外周血中分离出CTC。
首先，采集患者的外周血样本，并利用血液分离管或密度梯度离心法将血液分离为上清液和红细胞沉淀。
然后，使用CTC捕获技术，如磁珠捕获、细胞过滤或微流控芯片等方法，将CTC从上清液中富集出来。
最后，使用显微镜或流式细胞术确认CTC的存在并计数。
二、细胞培养基准备为了成功培养CTC，需要准备适用的细胞培养基。
常用的细胞培养基包括DMEM、RPMI-1640等。
在培养基中加入适当浓度的胎牛血清、抗生素和生长因子，以提供细胞所需的营养物质和生长环境。
三、细胞培养条件将分离出的CTC转移到预先准备好的细胞培养基中。
将细胞培养皿置于恒温培养箱中，保持适宜的温度（通常为37℃）。
此外，还需提供适当的CO2气体环境以维持细胞的酸碱平衡。
四、细胞培养监测在CTC培养的过程中，需要定期观察和监测细胞的生长情况。
使用显微镜观察细胞的形态和数量，并记录相关数据。
此外，还可以通过免疫组化染色、蛋白质检测等方法，对CTC的特征和功能进行进一步分析。
五、细胞培养维持为了维持CTC的生长和增殖，需要定期更换培养基，以提供新鲜的营养物质。
同时，还需注意细胞密度的控制，避免细胞过度生长或过度稀释。
此外，还需注意细胞的传代问题，及时进行细胞的传代以保持CTC的活性和稳定性。
六、细胞培养应用通过CTC的培养，可以进一步研究肿瘤细胞的生物学特性、耐药机制和转移能力等。
此外，还可以利用培养的CTC进行药物敏感性测试，评估不同药物对肿瘤细胞的作用效果，为个体化治疗提供参考依据。
CTC培养是一种重要的肿瘤研究方法，通过适当的细胞准备、细胞培养基准备和培养条件控制，可以成功培养出CTC，并利用其进行肿瘤研究和个体化治疗的相关应用。
2023版《循环肿瘤细胞检测在胃肠道肿瘤诊疗中的应用中国专家共识》解读ppt课件
供更为精确的个体化治疗方案。
02
在预后评估中的应用
共识指出，CTC检测可用于胃肠道肿瘤患者的预后评估。通过定期监测
患者CTC水平，可实时了解患者病情变化，为医生提供有力依据，进而
调整治疗方案。
03
在疗效监测中的应用
在治疗过程中，共识推荐定期进行CTC检测，以评估治疗效果。通过比
较治疗前后的CTC水平变化，可及时发现治疗反应，为医生调整治疗方
CTC检测在胃肠道肿瘤预后评估中的案例分享
案例三：CTC检测评估胃癌 患者预后
• 预后判断。CTC检测在胃 癌患者预后评估中发挥重 要作用，通过检测循环肿 瘤细胞的数量和活性，可 为医生提供患者预后的参 考信息。
案例四：CTC检测监测胃肠 道肿瘤复发
• 复发监测。对于胃肠道肿 瘤患者，CTC检测可用于 监测肿瘤复发，及时发现 并采取干预措施，提高患 者的生存率。
专家共识的目的和意义
总结词
指导实践、推动研究、提高诊疗水平
详细描述
专家共识的目的在于指导临床实践，推动相关领域的进一步研究，并提高胃肠道肿瘤的诊疗水平。通过明确CTC 检测在胃肠道肿瘤诊疗中的价值和地位，共识有助于规范临床操作，提高诊疗的准确性和效率。同时，共识的发 布也将促进国内外学术交流和合作，推动胃肠道肿瘤诊疗技术的创新和发展。
2023版《循环肿瘤细胞检测在胃 肠道肿瘤诊疗中的应用中国专家共 识》解读
汇报人：XXX 2023-11-17
目录
• 介绍 • 循环肿瘤细胞（CTC）检测的基础理
论与技术 • CTC检测在胃肠道肿瘤诊疗中的应用
价值 • 专家共识解读与临床实践建议 • 案例分享与讨论
01 介绍
共识概述
总结词
循环肿瘤细胞CTC检测-医学课件-新版.ppt
流式正向富集技术荧 免疫磁珠负向富集、
ISET（滤膜）
光标记
Fish技术
原位杂交RNA分析
CTC-BiopsyⓇ （武汉友之友)
ISET（滤膜) 荧光标记
80%
83%
30%
腺癌：46%
全自动
半自动
7.5mL
4mL
晚期乳腺癌、结直肠癌、晚期肺癌、胰腺癌、乳
前列腺癌
腺癌
75% 30% 半自动 5mL 晚期癌肿
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原发肿瘤血管生成 侵润
上皮－间质转化 （EMT）
侵润
转移
侵入血管内
循环肿瘤细胞 （CTC）
循环肿瘤 微栓 （CTM）
凋亡的CTC
肿瘤细胞 扩增 血管生成
间质－上皮转化 （MET）
侵入血管外 (CTC)
转移到骨髓 和其他器官
检测方法
特异度（%）
约登指数 I期NSCLC灵敏度（%）
AUC（95%CI）
CTC
84.1
0.573
67.2
0.823 (0.773-0.874)
ctc检测技术ppt课件
CTC检测技术在心血管疾病诊断和治疗中的应用
心血管疾病风险评估
CTC检测技术能够检测心血管疾病患者血液中的循环肿瘤细胞，为心血管疾病的风险评估 提供重要依据。
个性化治疗方案制定
通过分析CTC的基因和蛋白表达谱，可以为心血管疾病患者制定个性化的治疗方案，提高 治疗效果。
心血管疾病复发和并发症监测
CTC检测技术能够实时监测心血管疾病患者的循环肿瘤细胞数量变化，为心血管疾病的复 发和并发症的预测提供重要信息。
CTC检测技术的意义和应用价值
癌症早期诊断
预后评估和复发监测
CTC检测技术能够在癌症早期发现血 液中的肿瘤细胞，为早期诊断提供了 有力手段。
CTC检测技术可用于评估患者的预后 情况，及时发现复发迹象，为临床医 生提供决策支持。
个性化治疗指导
通过分析CTC的基因表达谱和蛋白质 组学特征，可以为患者提供个性化的 治疗方案，提高治疗效果。
存分析等。
可视化展示
利用图表、图像等方式 将数据结果进行可视化 展示，便于理解和解释
。
CTC检测技术实验设计和数据分析的注意事项
实验设计方面 严格控制实验条件，减少误差和干扰因素对实验结果的影响。
合理设置实验对照组，以便对实验结果进行准确评估。
CTC检测技术实验设计和数据分析的注意事项
根据实验目的选择合适的样本类型和处理方法。
化，为药物疗效的评估提供重要信息。
04
CTC检测技术的实验设计和数据 分析
CTC检测技术的实验设计
01
02
03
04
实验目的
明确实验目的，如检测特定类 型的CTC、评估CTC数量与疾
病进展的关系等。
样本收集
选择合适的样本类型（如血液 、组织液等），并确定采集时
CTC循环肿瘤细胞详解及应用_20231031
CTC(循环肿瘤细胞)详解及应用9肿瘤异质性——肿瘤耐药的罪魁祸首之一空间异质性时间异质性疗程1疗程2疗程3液体活检- 动态监控- 实时调整用药方案- 及时进行疗效评估10液体活检技术——肿瘤精准治疗的指南针循环肿瘤细胞 (CTC)外泌体临床需求Ø癌症预警早诊Ø肿瘤预后复发监控Ø肿瘤耐药位点筛查Ø药敏筛查Ø药物疗效持续评估液体活检循环肿瘤细胞u 在肿瘤组织的全生命周期，特别是在极早期，就开始有完整的肿瘤细胞进入人体外周血，这些细胞成为循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cell,简称CTC)。
CTC以单个细胞或细胞团（又称循环肿瘤微栓子，CTC-microemboli，CTC-cluster，简称CTM）的形式存在于循环系统中。
u 循环肿瘤细胞(CTC)检测是一种非侵入性的液体活检技术，相比于组织活检，具有无创，可重复采样，可实时长期跟踪，可克服肿瘤异质性，结果准确等优势，目前已经越来越广泛地应用于肿瘤疗效监测、预后评估、复发监测等场景，成为辅助指导癌症患者的个体化治疗的一大“利器”，被麻省理工评为2015年“10大全球突破性技术”。
u 肿瘤细胞在进入外周血循环的过程中会发生上皮-间质转变（EMT，Epithelial Mesenchymal Transition），故CTC存在不同类型，包括上皮型、间质型和上皮-间质混合型。
CTM和间质细胞表型CTC具有更强的转移潜能。
u 研究表明，检测出CTM的患者平均PFS时间比仅有单个CTC的患者短。
同样，与只有单个CTC的患者相比，在多个时间点上检测出CTM的患者平均OS更短，死亡风险显著增高。
Clotilde Costa, et.al., Analysis of a Real-World Cohort of Metastatic Breast Cancer Patients Shows Circulating Tumor Cell Clusters (CTC-clusters) asPredictors of Patient Outcomes. Cancers (Basel). 2020 Apr 29;12(5).间质型CTC上皮型CTC混合型CTC上皮型CTM混合型CTM间质型CTMCTC检测优势显著12广阔的临床应用前景1314广泛的临床适用人群无药可用人群高危人群难取样人群复发人群用药方案筛选药敏筛选及疗效评估免疫抑制剂用药评估癌前筛查肝硬化、肺部结节、乳腺结节等辅助诊断鉴定原发灶；个性化用药指导复发监控靶向用药；耐药评估；NCCN乳腺癌临床实践指南正式引入含有CTC 的cM0(i+)分期。
2024版ctc循环肿瘤细胞ppt课件
2024/1/27
9
CTC与肿瘤转移的关系
CTC与肿瘤转移潜能
CTC数量与肿瘤患者的预后密切相关，高数量的CTC往往预示着更高的转移潜能和 更差的预后。
CTC在肿瘤转移中的作用
CTC可作为肿瘤转移的“种子”，在适宜的微环境下重新生长形成转移灶。同时， CTC还可通过分泌生长因子、促血管生成因子等促进肿瘤转移。
流式细胞术
将血液样本通过高速流动的细胞悬液，利用光学、电学等原理对细胞进行快速检测和分类。 该方法可实现对CTC的定量分析和多参数检测，但操作复杂且成本较高。
2024/1/27
微流控芯片技术
利用微流控芯片模拟人体微环境，实现CTC的高效捕获和检测。该技术具有高通量、高灵敏 度和低成本的优点，是未来CTC检测的重要发展方向。
对未来CTC研究的展望与建议
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深入研究CTC的生物学特性及 其与肿瘤转移的关系，为肿瘤
治疗提供新靶点。
开发高效、灵敏的CTC检测技 术，提高检测准确性和可重复
性。
开展大规模、多中心的临床研 究，验证CTC检测在肿瘤诊疗
中的价值。
加强跨学科合作，推动CTC研 究在临床转化和应用方面的发
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CTC检测技术的改进与创新
提高检测灵敏度
通过改进现有技术或开发 新技术，提高CTC检测的 灵敏度，降低假阴性率。
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提高检测特异性
针对CTC的特异性标志物 进行深入研究，开发高特 异性的检测方法，减少假 阳性结果。
实现无创检测
探索基于血液或其他体液 的无创检测技术，减轻患 者痛苦，提高检测便利性。
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CTC在肿瘤研究中的重要性
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循环肿瘤细胞(CTC)检测
循环肿瘤细胞(CTC)检测
循环肿瘤细胞（CTC）检测是通过检测血液中的肿瘤细胞来诊断和监测癌症的一种方法。
CTC是从原发肿瘤中脱落并进入循环系统的癌细胞。
它们可以通过血液样本分离和检测。
CTC检测的目的是实时监测肿瘤的疾病进展、评估治疗效果和预测患者的预后。
它可以提供有关肿瘤性状、转移倾向、治疗响应和耐药性的信息。
以下是CTC检测的一般步骤：
1.血液采集：通过静脉采集血液样本，通常使用抽血针或集
中式采血设备。
采集的血液样本需要尽快送至实验室进行处理。
2.血液处理：采集的血液样本经过预处理，通常包括红细胞
去除和白细胞富集，以减少其他细胞对检测的干扰。
3.CTC分离：采用特定的技术和设备对血液样本进行CTC的
分离。
这些技术包括免疫磁珠法、微流控装置、密度梯度离心或免疫荧光染色等。
通过这些方法，CTC可以从其他血细胞中分离出来。
4.CTC检测：分离的CTC可以通过免疫细胞化学、免疫荧光
染色、PCR、原位杂交等方法进行检测和分析。
这些技术可以检测CTC的表面标记物和基因组变异，以确认其为肿瘤细胞，并评估其数量和特征。
CTC检测的优势在于其非侵入性和实时性。
它可以通过反复检测来监测肿瘤的进展和治疗的效果。
这种检测方法仍在不断发
展和改进中，面临一些技术挑战和标准化的需求，但已被广泛应用于临床研究和患者管理中，对癌症的早期诊断、治疗监测和个体化治疗具有潜在的重要意义。
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安龙CTC检测技术
检测流程
CTC检测临床应用
• 辅助诊断
适用人群：
• 影像学发现异常占位且良恶性倾向不明，难以通过组织活检进行分子分型的患者 • 需要进一步监测患者是否存在隐匿微转移灶或潜在转移的患者 • 对肿瘤细胞是否入血进行判断并提供治疗依据
CTC检测临床应用
• 疗效评估及监测
通过对晚期胃癌患者的8号染色体倍性 检测分析，将化疗患者分为3组（PR： 部分缓解；SD：病情稳定；PD：恶 化），发现8号染色体3体CTC具有内源 性耐药特征，而4体及≥5体CTC具有继 发性耐药特性。
合解聚间的平衡和其复杂的磷酸化形式可能是vimentin
参与肿瘤转移过程及细胞-细胞间相互作用的调节机制。
Vimentin在肿瘤中的功能提示，其可能是抗肿瘤转移治
疗药物研究的新靶点。
安龙CTC检测技术
细胞程式死亡-配体1（PD-L1）
PD-L1在多癌组织中过量表达。 其参与免疫细胞的PD-1/PD-L1通 路，激活和启动免疫逃逸机制， 同时也抑制免疫细胞的增值。 PD-L1的表达水平与临床特征和 预后相关。同时对后续治疗也 具有临床指导意义。
CTC计数持续下降
维持原治疗方案
CTC计数波动或维持不变 参考现有临床标准评估
CTC计数持续上升
参考NCCN指南综合其他检查（如CT、PET/CT、MRI等）考 虑是否更换治疗方案
适用人群：需要跟进放化疗、靶向治疗、生物治疗、中西医治疗等各种治疗手段疗效的肿瘤患者
CTC检测临床应用
• 术后复发转移风险预测
安龙CTC检测技术
波形蛋白vimentin(Vim)
vimentin是存在于间充质细胞中的一种中间丝蛋白，近
些年研究显示vimentin与肿瘤发生、转移密切相关。波
Vim
形蛋白调节细胞骨架蛋白、细胞粘附分子等蛋白间的相
互作用，参与肿瘤细胞和肿瘤相关内皮细胞、巨噬细胞
的粘附、迁移、侵袭和细胞信号转导。其高度动态的聚
循环肿瘤细胞特征
CTC检测临床意义
Nature,Vol 450 20/27 12.2007
CTC检测的优势
常见CTC检测技术比较
• 分离富集技术
阴性富集
常见CTC检测技术比较
• 鉴定分析技术
免疫荧光染色
FISH 安龙的优势：1、可以达到原位、同步检测CTC的瘤标蛋白表达、染色体倍体及细胞形态的目的；
• 循环肿瘤微栓子
循环肿瘤微栓子（CirculatingTumor Microemboli，简称CTM），又称CTC细胞团（CTC-cluster），通常包含≧2个 CTC， 往往数量少但形成转移灶能力更强。CTM可抵御失巢凋亡、耐受细胞毒药物、比单个肿瘤细胞具有更强的转移潜能， 因此，CTM与间质细胞表型CTC（EMTCTC）、单个普通CTC相比，与预后的相关性可能更强。
鉴 别
亚 类
识别、鉴定出具有不同临床意义（如耐药、肿 瘤转移与复发等）的CTC亚类细胞
细
胞
优
势
更高的灵敏性、特异性、临床相关性
安龙CTC检测技术
HER2 (Human Epidermal Growth Factor Receptor-2):
肿瘤组织细胞与CTC上的HER2蛋白表达虽有关联，但 并不一致。鉴于常用的靶向药物抗体赫赛汀 （Herceptin）是与肿瘤细胞（包括CTC）表面的HER2 蛋白相结合而产生药效，所以相对于目前常规的肿瘤 组织细胞HER2基因检测，借助免疫荧光染色检测CTC 表面的HER2蛋白表达，以监测、评估赫赛汀疗效则更 具临床意义。
循环肿瘤细胞检测
Circulating Tumor Cell
安徽安龙基因科技有限公司
循环肿瘤细胞介绍
• 循环肿瘤细胞（Circulating Tumor Cell，简称CTC），是自发或因诊疗操作进入外周血中的各类肿瘤细胞的统称，肿 瘤细胞不仅可以从实体瘤原发灶或转移灶脱落入血，也可以在形成可见实体瘤病灶前入血，大部分CTC在进入外周 血后发生凋亡或被吞噬，少数能够逃逸并锚着发展成为转移灶，增加恶性肿瘤患者死亡风险。 CTC是肿瘤转移的 关键，也是肿瘤复发的起源。
CTC检测临床应用
• 肿瘤早期预警
取样要求
• 使用专用采血管(BD ACD管)采集外周血6mL • 为防止上皮细胞污染，应将前2.0mL血液弃去，再用规定采血管采集 • 完成采血后，采血管头尾轻柔地颠倒混匀8次 • 保存条件：常温避光运输/保存，最佳处理时间为24 h 内，最晚处理
时间为48 h。 • 需要邮寄的血样，请安排好采血时间，顺丰快递或于11:00前到高铁站，
安龙CTC检测技术
角蛋白CK18 (Cytokeratin 18)
肿瘤细胞（包括CTC）内CK18蛋白表达量的高低 与乳腺癌和结直肠癌的肿瘤进展、细胞迁移、分 期、转移与复发等有着紧密关联。已有很多报道 指出，肿瘤细胞内CK18蛋白表达的升高与多种肿 瘤的低分化、快速进展至晚期密切相关，这些肿 瘤包括了肺癌、食管癌、肾细胞癌、口腔癌、鼻 咽癌及肝癌等。
不依赖于肿瘤细胞表面标示物的表达
捕
Байду номын сангаас
获 技
有效检测循环肿瘤癌栓及各种大、小不同的CTC
术 优
获取的肿瘤细胞具有很好的细胞形态与状态
势
各种瘤标染色及鉴定特殊临床意义的CTC亚类细胞
可对同一份标本进行其它一系列的检查
可用于干细胞，血管内皮细胞及血中稀有淋巴细胞的 提取与研究
i•FISH CTC
同步实施瘤标染色及iFISH检测，以有效鉴别非 血源性染色体数目异常且表达不同肿瘤标示物 的细胞
发送次晨达业务快递。
2、可以同时做多通道、多瘤标表达鉴定。
实验对比
优势：可以达到原位、同步检测CTC的瘤标蛋白表达、染色体倍体及细胞形态 的目的
CTC CTC
其
安
他
龙
公
基
司
因
检
检
测
测
技
技
术
术
优势：可以同时做多通道、多瘤标表达鉴定
安龙CTC检测技术
方便，高效；适用于任何体积的血液、淋巴液、骨髓、 胸水、腹水、尿液、脑脊液等