cellsearch循环肿瘤细胞CTC试剂盒说明书自译中文版
循环肿瘤细胞(CTC)检测 (2)
循环肿瘤细胞(CTC)检测引言循环肿瘤细胞（CTC）是指从原发肿瘤中脱落并进入血液循环中的癌细胞。
它们是肿瘤转移和复发的主要起源，能提供重要的生物学信息和预测患者预后的依据。
因此，CTC检测对于肿瘤的早期诊断、治疗监测以及指导个体化治疗具有重要意义。
在过去的几十年中，CTC检测技术得到了快速发展和广泛应用。
通过利用特定的标记物（如抗原、RNA或DNA等），结合高灵敏的检测方法，可以在血液样本中检测到极低浓度的CTC。
本文将介绍CTC检测的原理、常用的检测方法以及其在临床上的应用。
原理CTC检测的原理基于以下几个关键步骤：1.血液样本采集：通过采集患者的外周血样本，包括血浆或全血。
2.CTC富集：为了提高CTC的检测灵敏度，需要将CTC从血液中富集出来。
一种常用的方法是通过利用CTC表面标记物的特异性，使用磁珠、细胞捕获装置或微流体装置等实现。
3.CTC检测：将富集后的CTC进行分离和检测。
目前常用的检测方法包括免疫细胞荧光染色、聚合酶链反应（PCR）、流式细胞术（FACS）等。
这些方法可以通过检测CTC表面标记物的存在与否，或者检测CTC特异基因、蛋白质或RNA等分子标记来确定CTC的存在。
4.CTC鉴定和计数：根据CTC的特征，如核形态、大小、核质比等特征，对CTC进行鉴定和计数。
一些图像处理和自动化技术也可以用来提高鉴定的准确性和效率。
常用的CTC检测方法免疫细胞荧光染色法免疫细胞荧光染色法是目前最常用的CTC检测方法之一。
该方法利用免疫荧光染色技术，通过将CTC与特定的抗原结合，然后使用荧光染料进行标记。
通过在荧光显微镜下观察，可以准确识别CTC的存在与否。
PCR法PCR法通过扩增CTC特异基因的片段，来快速检测和鉴定CTC。
该方法的优点是灵敏度高、检测速度快，然而由于PCR 技术的特点，可能存在假阳性结果的问题。
FACS法FACS法通过流式细胞仪对CTC进行快速分离和检测。
该方法可以同时检测多个标记物，提高检测的准确性和灵敏度。
cellserch循环肿瘤细胞CTC试剂盒说明书自译中文
790000 116人份试剂盒Cell Search循环肿瘤细胞检测试剂盒（上皮细胞）IVD使用须知本试剂盒仅用于体外诊断CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒用于外周血中循环肿瘤细胞（CTC）的计数，这些细胞来源于上皮细胞，即表现为CD45阴性（CD45-），EpCAM阳性（EpCAM+），细胞角蛋白8,18阳性（CK8,18+）和（或者）CK19阳性(CK19+)的细胞。
用CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒检测的CTC，存在于外周血中，这类细胞与乳腺癌、结直肠癌和前列腺癌*转移患者的无进展生存期和总生存期相关。
因此，CTC可以用来监控乳腺癌、结直肠癌和前列腺癌患者的肿瘤细胞是否发生转移。
CTC应该进行持续检测，并与其他临床诊断方式联合起来监控上述肿瘤细胞的转移。
在肿瘤发生过程中的任何时间段，对CTC数量进行评估，可以预估肿瘤患者治疗后的无进展生存期和总生存期。
*在该研究中，转移性前列腺癌患者定义为血清标志物PSA在标准激素基准上，高于参考水平具有两次连续增加。
这些患者通常描述为具有非雄激素依赖性，激素抗性，或去势抗性的前列腺癌。
摘要说明肿瘤转移是指当肿瘤细胞从原发灶或转移灶剥落后，这些肿瘤细胞进入循环系统并在机体的远端定植生长的情况。
血液循环中的肿瘤细胞源自于上皮细胞，而这类细胞在血液循环系统中是极罕见的。
基于此，本公司推出的细胞自动化捕获仪(CELLTRACKS○R AUTOPREP○R System)通过预设程序并配合使用CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒(CELLSEARCH○R Kit)可以对样本进行标准化和自动化检测。
用CELLTRACKS II分析仪或者CellSpotter分析仪，一种半自动荧光显微镜，可以对肿瘤细胞进行分析和计数。
这种方法只计具有上皮细胞特性（EpCAM+, CK8,18+，和/或者CK19+）的细胞数量。
检测原理CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒包括磁流体捕获试剂和荧光免疫试剂。
人外周血循环肿瘤细胞检测试剂盒使用说明书
人外周血循环肿瘤细胞检测试剂盒使用说明书人外周血循环肿瘤细胞检测试剂盒使用说明书（免疫磁捕获、免疫细胞化学鉴定）简介：本试剂盒利用免疫磁球捕获肿瘤病人全血中极少量的循环肿瘤细胞（Circulating Tumor Cell，CTC），并通过免疫细胞化学鉴定所捕获的细胞，从而实现对CTC的灵敏检测。
其中免疫磁球表面修饰有抗上皮细胞粘附分子（EpCAM）抗体。
免疫细胞化学鉴定是通过异硫氰酸荧光素标记的细胞角蛋白抗体（FITC-anti-CK19）、Alexa Fluor594标记的抗白细胞共同抗原抗体（AF594-anti-CD45）和DAPI对细胞进行免疫荧光染色，DAPI染色阳性，CK19表达阳性，CD45表达阴性（DAPI+/CK19+/CD45-）的细胞被鉴定为CTC。
本试剂盒对目标细胞的捕获效率高达90%，简便快速、特异性强、特别牢靠，可以在3小时内完成对全血中CTC的检测。
试剂盒所含试剂：（10人份/盒）试剂标号组分用途状态规格配制试剂A牛血清白蛋白封闭固体粉末试剂B免疫磁球磁捕获悬液200μL即用型试剂C4%多聚甲醛固定细胞液体5mL即用型试剂D1%Triton X-100通透细胞液体5mL即用型试剂E DAPI细胞染色液体50μL即用型试剂F FITC-anti-CK19细胞染色液体20μL即用型试剂G AF594-anti-CD45细胞染色液体50μL即用型试剂H1×PBS洗涤液体25mL即用型*保存条件：4-8℃用户自备试剂和材料：1.试剂L：通透封闭液于0.05g试剂A中加入0.5mL试剂D溶解待用，或根据此用量比配置所需用量的通透封闭液，标为“试剂L”。
2.试剂M：染色液于0.01g试剂A中加入190μL试剂H溶解后，向其中加5μL的试剂E，2μL 的试剂F，5μL试剂G，或根据此用量比配置所需用量的染色液，标为“试剂M”，4℃避光保存待用。
4.磁力架（推举Dynal公司123-20D）5.移液器（吉尔森）、涡旋仪、超声波清洗器、进口耗材（离心管、枪头等）、恒温水浴摇床、荧光倒置显微镜等。
循环肿瘤细胞多种标志物联合检测试剂盒及其应用的制作方法
循环肿瘤细胞多种标志物联合检测试剂盒及其应用的制作方法随着医学技术的不断发展，对癌症的治疗也得到了很大的进步。
然而，癌症的复发和转移仍然是其治疗的主要障碍。
因此，对于早期发现和治疗的需要，循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cells，CTCs)逐渐成为了癌症早期筛查、治疗和预后评估的新兴技术。
CTCs是指从肿瘤组织中分离出来、侵入循环系统并通过血流传输到身体其他部位，进而引起肿瘤转移的癌细胞。
与组织活检相比，通过检测CTCs可以比较方便地进行疾病监测和治疗响应评估，并且具有非侵入性、定期反复检查等优点。
因此，对于CTCs检测的研究和开发具有非常大的临床应用前景。
本文将介绍一种名为“循环肿瘤细胞多种标志物联合检测试剂盒及其应用的制作方法”的技术，其可以快速并准确地检测CTCs。
下面将按照流程介绍其具体制作步骤：1. 产生单克隆抗体。
先筛选出高度特异的CTCs细胞表面标志靶点，然后通过提纯和鉴定，获得针对这些靶点的单克隆抗体。
2. 制备磁珠。
将荧光标记的磁性珠子与针对CTCs的单克隆抗体进行结合，生成荧光磁珠。
3. 定量分离CTCs。
提取人血样本，将其加入到浓缩的荧光磁珠混悬液中，磁趋动力将CTCs富集到磁珠附近。
4. 检测与分析。
经过一系列样品预处理、细胞溶解，首先通过荧光显微镜和流式细胞术检测和定量测定CTCs，然后利用核酸萃取等技术进一步检测和分析CTCs。
该检测方法具有灵敏度高、特异性强、快速、简单、低成本等优点。
可以广泛应用于早期癌症筛查、肿瘤预后评估、疾病监测和个体化治疗方案的制定等方面。
目前，该技术已经在临床上得到了广泛的应用，并且取得了显著的疗效。
总之，利用“循环肿瘤细胞多种标志物联合检测试剂盒及其应用的制作方法”来检测CTCs是一项非常有前途的技术。
未来，这种技术还可以进一步应用于癌症的治疗和预防，并为我们提供更精确、个性化的医疗服务。
cellsearch循环肿瘤细胞(CTC)试剂盒说明书自译中文版.
16人份试剂盒Cell Search循环肿瘤细胞检测试剂盒（上皮细胞）IVD本试剂盒仅用于体外诊断CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒用于外周血中循环肿瘤细胞（CTC）的计数，这些细胞来源于上皮细胞，即表现为CD45阴性（CD45-），EpCAM阳性（EpCAM+），细胞角蛋白8,18阳性（CK8,18+）和（或者）CK19阳性(CK19+)的细胞。
用CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒检测的CTC，存在于外周血中，这类细胞与乳腺癌、结直肠癌和前列腺癌*转移患者的无进展生存期和总生存期相关。
因此，CTC可以用来监控乳腺癌、结直肠癌和前列腺癌患者的肿瘤细胞是否发生转移。
CTC应该进行持续检测，并与其他临床诊断方式联合起来监控上述肿瘤细胞的转移。
在肿瘤发生过程中的任何时间段，对CTC数量进行评估，可以预估肿瘤患者治疗后的无进展生存期和总生存期。
*在该研究中，转移性前列腺癌患者定义为血清标志物PSA在标准激素基准上，高于参考水平具有两次连续增加。
这些患者通常描述为具有非雄激素依赖性，激素抗性，或去势抗性的前列腺癌。
摘要说明肿瘤转移是指当肿瘤细胞从原发灶或转移灶剥落后，这些肿瘤细胞进入循环系统并在机体的远端定植生长的情况。
血液循环中的肿瘤细胞源自于上皮细胞，而这类细胞在血液循环系统中是极罕见的。
基于此，本公司推出的细胞自动化捕获仪(CELLTRACKS○R AUTOPREP○R System)通过预设程序并配合使用CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒(CELLSEARCH○R Kit)可以对样本进行标准化和自动化检测。
用CELLTRACKS II分析仪或者CellSpotter分析仪，一种半自动荧光显微镜，可以对肿瘤细胞进行分析和计数。
这种方法只计具有上皮细胞特性（EpCAM+, CK8,18+，和/或者CK19+）的细胞数量。
检测原理CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒包括磁流体捕获试剂和荧光免疫试剂。
cellsearch循环肿瘤细胞ctc)试剂盒说明书自译中文版
790000116人份试剂盒Cell Search循环肿瘤细胞检测试剂盒（上皮细胞）IVD使用须知本试剂盒仅用于体外诊断CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒用于外周血中循环肿瘤细胞（CTC）的计数，这些细胞来源于上皮细胞，即表现为CD45阴性（CD45-），EpCAM阳性（EpCAM+），细胞角蛋白8,18阳性（CK8,18+）和（或者）CK19阳性(CK19+)的细胞。
用CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒检测的CTC，存在于外周血中，这类细胞与乳腺癌、结直肠癌和前列腺癌*转移患者的无进展生存期和总生存期相关。
因此，CTC可以用来监控乳腺癌、结直肠癌和前列腺癌患者的肿瘤细胞是否发生转移。
CTC应该进行持续检测，并与其他临床诊断方式联合起来监控上述肿瘤细胞的转移。
在肿瘤发生过程中的任何时间段，对CTC数量进行评估，可以预估肿瘤患者治疗后的无进展生存期和总生存期。
*在该研究中，转移性前列腺癌患者定义为血清标志物PSA在标准激素基准上，高于参考水平具有两次连续增加。
这些患者通常描述为具有非雄激素依赖性，激素抗性，或去势抗性的前列腺癌。
摘要说明肿瘤转移是指当肿瘤细胞从原发灶或转移灶剥落后，这些肿瘤细胞进入循环系统并在机体的远端定植生长的情况。
血液循环中的肿瘤细胞源自于上皮细胞，而这类细胞在血液循环系统中是极罕见的。
基于此，本公司推出的细胞自动化捕获仪(CELLTRACKS○R AUTOPREP○R System)通过预设程序并配合使用CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒(CELLSEARCH○R Kit)可以对样本进行标准化和自动化检测。
用CELLTRACKS II分析仪或者CellSpotter分析仪，一种半自动荧光显微镜，可以对肿瘤细胞进行分析和计数。
这种方法只计具有上皮细胞特性（EpCAM+, CK8,18+，和/或者CK19+）的细胞数量。
检测原理CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒包括磁流体捕获试剂和荧光免疫试剂。
CellSearch系统检测循环肿瘤细胞及其分子标记的研究进展
1
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CellSearch 系统简介
强生CellSearch循环肿瘤细胞检测系统
强生CellSearch循环肿瘤细胞检测系统
佚名
【期刊名称】《中国医疗器械信息》
【年(卷),期】2012(18)10
【摘要】CellSearch循环肿瘤细胞检测系统是计数分析循环肿瘤细胞（CTC）的全新产品，由美国强生公司开发。
它是全球第一个也是唯一经过FDA（2004年获批）和SFDA（2012午获批）批准用于恶性肿瘤疾病管理的检测循环肿熘细胞（CTC）的商业化产品。
【总页数】1页(P99-99)
【关键词】循环肿瘤细胞;美国强生公司;检测系统;疾病管理;恶性肿瘤;商业化;产品【正文语种】中文
【中图分类】R739.91
【相关文献】
1.CellSearch系统检测胃癌患者循环肿瘤细胞及临床意义 [J], 贾海明;米泰宇;杨雯;贾彬彬;张克玲;蒲竞
2.应用cellsearch系统检测循环肿瘤细胞 [J], 丁兢
3.应用cellsearch系统检测循环肿瘤细胞 [J], 丁兢
4.qRT-PCR平台和CellSearch系统检测肝细胞肝癌患者循环肿瘤细胞性能比较[J], 曹旻璐; 沈敏娜; 周琰; 王蓓丽; 张春燕; 潘柏申; 郭玮
5.CellSearch系统检测循环肿瘤细胞预测转移性结直肠癌预后价值的meta分析[J], 侯慧轩;段仁慧;郭伟华;王俊杰
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CellSearch Introduction-20140610
的准确性，或可能更早提示治疗效果。
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治疗基线 CTC 检测结果的预后作用
F Full Set of Data
100 Probability of Overall Survival (%) 90 80 70 60 50 ~10.0 mo ≥5 CTC >18.0 mo <5 CTC
基线 N（%） CTC/7.5ml <5 90(51)
•
试剂盒
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® CELLSEARCH 临床应用
CellSearch 预期用途
• 用于体外诊断 IVD
• CellSearch 循环上皮细胞检测试剂盒（免疫磁颗粒细胞捕获+荧光染色法）（商品名
称 ： CellSearch 循 环 肿 瘤 细 胞 检 测 试 剂 盒 ） 用 于 全 血 中 上 皮 源 性 （ CD45- ， EpCAM+，以及细胞角蛋白8,18+及/或19+）的循环肿瘤细胞（CTC）的计数检测。 由 CellSearch 循环肿瘤细胞检测试剂盒检测到外周血液中的 CTC 与接受治疗的转
存期较长
• 此 Cutoff 值基于临床研究实验得出，并已被 FDA 和 CFDA 批准用于临床实践
—— Cristofanilli M. et al N. Engl. J. Med 2004;35:781-91
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CellSearch CTC 检测结果分布
循环肿瘤细胞CTC检测
CTC质控试剂盒
磁力 捕获
2004年FDA批准
CellTracks Analyzer II
磁巢Magnest
9
CellSearch技术的可重复性和高敏感度
CellSearch系统是CTC检测目前唯一的自动化、标准化平台 减少方法学及人工操作引起的结果差异 实验结果的可重复性 实验室间结果的可比性 系统线性系数：R=0.990，线性范围 0-1238 系统最低检测限度：7.5ml外周血中的1个肿瘤细胞
使用fish方法her2cep1720910转移灶为her2原发灶肿瘤其转移灶为her2患者总数ctc中her2的患者数量ctc中her2的患者数量不一致比率在原发肿瘤和ctc中her2基因扩增192004nengljmedctc升高pfs和os均降低ctc是预后的独立预测因子2005jclinoncolctc在治疗前后都是预后的强烈而独立预测因子2006clincancerresctc在治疗的任何时段升高都预示乳腺癌病情进展预后不良2006clincancerresctc计数对于乳腺癌病情状态判断要比当前的影像学方法更早且更具有可重复性2008annoncol治疗中ctc的变化提示疾病对于治疗的反应2009jclinoncolctc检测达到55个或更多对于mbc的治疗监控优于fdgpetct检查2010annoncolctc计数越高越与多处骨转移或多器官转移相关ctc在乳腺癌中的研究结果回顾20回顾cellsearch的研究21利用cellsearch技术研究预后的文献回顾22利用cellsearch技术比较ctc与影像学预后的文献回顾23fda批准的临床应用24切点的意义评估预后?根据肿瘤类型的不同cellsearch对ctc的计数结果参考的切点cutoff也不同?高于等于切点预后不良?低于切点预后良好25ctc数量变化是预后改变的重要预测26任何时段高于切点预后不良任何时段低于切点预后良好cellsearch在基线时检测的ctccellsearch在每个疗程前检测的ctccellsearch在基线时检测的ctccellsearch在每个疗程前检测的ctc27结合ctc检测比单独的影像学检查预后更准确乳腺癌中
CellSearch技术原理和系统简介
主要内容
CellSearch技术原理
CellSearch系统简介
CellSearch循环肿瘤细胞试剂盒介绍
CellSearch系统临床应用 CellSearch送样指南
CellSearch CTC 试剂盒提供的材料
• •
包装说明书 3.0毫升瓶装抗-EpCAM纳米磁颗 粒(黄色瓶盖) 3.0毫升瓶装染色试剂(白色瓶盖) 3.0毫升瓶装核酸染料(蓝色瓶盖) 3.0毫升瓶装捕获增强试剂(透明 瓶盖)
CellSearch™循环肿瘤细胞 试剂盒
CellSearch循环肿瘤细胞质控试剂盒
• 质控试剂盒旨在监控系统运行情况
和操作人员的操方法
• 包含供一次性使用的质控瓶，内装
来自乳腺肿瘤细胞株的固定细胞
• 每个质控瓶含有两种浓度不同的细
胞，用于高水平和低水平质控
• 试剂盒组成
– 24个质控瓶 – 24个条形码 – 包装说明书
• •
3.0毫升瓶装透化试剂(绿色瓶盖) 3.0毫升瓶装细胞固定剂(红色瓶 盖) 2瓶110毫升稀释缓冲液 16支15毫升锥形管(及管盖) 16个样本盒(及塞子)
• • •
• • •
CellSearch CTC试剂盒详细介绍
用于CellTracks® AutoPrep®系统 的试剂托盘。上有数据芯片，自 动记录试剂信息
CTC临床意义
• 辅助诊断手段 从临床来讲，要确定一个病人是不是得了 肿瘤，一直是一个很难明确回答的问题，这就 会对很多病人造成误诊。现在发现，在很多难 以确诊的病人的血液中，如果说能够检查到循 环肿瘤细胞，那对于配合医生下肿瘤诊断的结 论是具有积极意义的。
CTC临床意义
• 根据循环肿瘤细胞的个数判断愈后及存活时间 循环肿瘤细胞的应用使人们第一次可以以 一个量化的指标告诉医生和病人他的存活时间 。
CTC中文说明书01
请在使用前请仔细阅读说明书-细菌染色-C T C快速染色试剂盒————激光共聚焦显微镜、流式细胞仪均可概述：-细菌染色-系列试剂盒提供了多种用于细菌的荧光染料。
除了通常的染色实验，通过其他原理还可以实现微生物细胞活性的检测。
CTC已经被很多科研人员用于微生物细胞呼吸活性的检测。
-细菌染色- CTC快速染色试剂盒提供了快速并且高灵敏度的CTC染色方法。
试剂内含：流式细胞仪用- CTC(5-cyano-2,3-ditolyl tetrazolium chloride) 10mg 3tubes- Enhancing reagent A 100μL(DMSO溶液) 1tube荧光显微镜用- CTC(5-cyano-2,3-ditolyl tetrazolium chloride) 10mg 3tubes- Enhancing reagent B 500μL(水溶液) 1tube贮藏条件：4℃保存。
所需设备和材料：●流式细胞仪（488nm 激光，红光发射滤光片）●荧光显微镜（蓝光激发滤光片，红光发射滤光片）●培养箱●20 µl，1000 µl单枪操作说明书：染色流程：1. 一个CTC tube中加入750µl蒸馏水，缓慢摇匀（终浓度50mM）a）2. 用PBS(-)或生理盐水配制细胞悬液，控制细胞量在106个/ mL(流式细胞仪)或108-108个/ mL(荧光显微镜)b）3. 向1mL细胞悬液中加入试剂缓慢混匀才c），加入试剂及加入量如下：4. 37℃培养30min5. 用流式细胞仪或荧光显微镜检测或观察。
a) 该溶液可以在-20℃保存2周b) 由于样品中残留的培养基也会经过无差异的染色反应，所以应去除培养基c) CTC染色不足的时，可以增加CTC溶液的加入量或者增加培养时间。
但是原则上每个样品溶液中CTC溶液的加入量一般小于等于100µl计数染色：1. 制备适当浓度微生物细胞的悬液，在96孔板内每孔接种190µl该悬液2. 每孔加入10µl的染色溶液3. 将培养板在培养箱中培养（37℃或合适的温度）4. 用酶标仪测定在450nm处的吸光度经本试剂盒测试过的微生物种类：真菌：Candida utilis, Saccharomyces cerevisiae, Zygos accharomyces rouxii, Candida albicans, Candida krusei, Candida parapsilosis革兰氏阳性菌：Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Corynebacterium glutamicum, Enterococcus faecalis,Lactobacillus casei, Listeria monocytogenes, Micrococcus luteus, Staphylococcusaureus, Staphylococcus epidermidis革兰氏阴性菌：Acetobacter sp., Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella enteritidis, Salmonella typhimurium, Serratia marcescens, Vibrioparahaemolyticus, Yersinia enterocolitica药物敏感性测试：革兰氏阴性菌：1. 根据McFarland比浊法制备107CFU/ml的微生物细胞悬液。
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c e l l s e a r c h循环肿瘤细胞C T C试剂盒说明书自译中文版This manuscript was revised by the office on December 22, 2012790000116人份试剂盒Cell Search循环肿瘤细胞检测试剂盒（上皮细胞）IVD使用须知本试剂盒仅用于体外诊断CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒用于外周血中循环肿瘤细胞（CTC）的计数，这些细胞来源于上皮细胞，即表现为CD45阴性（CD45-），EpCAM阳性（EpCAM+），细胞角蛋白8,18阳性（CK8,18+）和（或者）CK19阳性(CK19+)的细胞。
用CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒检测的CTC，存在于外周血中，这类细胞与乳腺癌、结直肠癌和前列腺癌*转移患者的无进展生存期和总生存期相关。
因此，CTC可以用来监控乳腺癌、结直肠癌和前列腺癌患者的肿瘤细胞是否发生转移。
CTC应该进行持续检测，并与其他临床诊断方式联合起来监控上述肿瘤细胞的转移。
在肿瘤发生过程中的任何时间段，对CTC数量进行评估，可以预估肿瘤患者治疗后的无进展生存期和总生存期。
*在该研究中，转移性前列腺癌患者定义为血清标志物PSA在标准激素基准上，高于参考水平具有两次连续增加。
这些患者通常描述为具有非雄激素依赖性，激素抗性，或去势抗性的前列腺癌。
摘要说明肿瘤转移是指当肿瘤细胞从原发灶或转移灶剥落后，这些肿瘤细胞进入循环系统并在机体的远端定植生长的情况。
血液循环中的肿瘤细胞源自于上皮细胞，而这类细胞在血液循环系统中是极罕见的。
基于此，本公司推出的细胞自动化捕获仪(CELLTRACKS○R AUTOPREP○R System)通过预设程序并配合使用CellSearch 循环肿瘤细胞检测试剂盒(CELLSEARCH○R Kit)可以对样本进行标准化和自动化检测。
用CELLTRACKS II分析仪或者CellSpotter分析仪，一种半自动荧光显微镜，可以对肿瘤细胞进行分析和计数。
这种方法只计具有上皮细胞特性（EpCAM+, CK8,18+，和/或者CK19+）的细胞数量。
检测原理CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒包括磁流体捕获试剂和荧光免疫试剂。
磁流体试剂是一种具有磁芯的颗粒。
其表面包被识别EpCAM抗原的抗体，EpCAM 是CTC特异性抗原。
因此，该磁微粒可以捕获CTC。
经过免疫捕获和富集后，荧光试剂用来鉴定CTC和CTC计数。
荧光试剂包括以下组成：抗CK-藻红蛋白（PE）的特异于细胞内蛋白质的细胞角蛋白抗体（上皮细胞特性）；DAPI，用于细胞核染色；和抗CD45-别藻蓝蛋白（APC）白细胞特异性抗体。
试剂/样品混合物被CELLTRACKS○R AUTOPREP○R系统分配到一个插入在MAGNEST细胞呈现装置的暗盒中。
所述MAGNEST装置具有强磁场，能吸引磁微粒标记的上皮细胞在暗盒的表面上。
CELLTRACKS ANALYZERII分析仪，或者CellSpotter 分析仪自动扫描暗盒的整个表面，获取图像并向用户显示所有事件，其中CK-PE和DAPI荧光染料进行共定位。
图像进行最终分类，并以画廊格式呈现给用户。
所检测分析的事件当其形态学特征与肿瘤细胞一致并表现出EpCAM+，CK+，DAPI+和CD45-表型时，才被分类为肿瘤细胞。
试剂盒提供的材料试剂说明1. 3ml 包被抗EpCAM抗体的磁流体：含有浓度为0.022%的磁微粒，这些磁微粒表面偶联有抗表皮细胞表面标志物EpCAM的鼠源单克隆抗体。
缓冲溶液中含有0.03%的BSA和0.05% ProClin 300作为保护剂。
（棕色瓶盖）2. 3ml染色试剂：包含细胞角蛋白特异性鼠源单克隆抗体，该偶联藻红蛋白（PE），浓度为0.0006%和浓度为0.0012%的鼠源抗CD45分子的单克隆抗体，该抗体偶联别藻蓝蛋白（APC），保存在含有0.5％BSA和0.1％叠氮化钠的缓冲溶液中。
（白色瓶盖）3. 3ml核酸染料：浓度为0.005%的4'，6-二脒基-2-苯基二盐酸盐（DAPI）保存在0.05%的Proclin?300缓冲溶液中。
（蓝色瓶盖）4. 3ml捕获增强试剂：包含浓度为0.02％的专有试剂用于限制铁磁流体聚团，保存在0.5％BSA和 0.1％叠氮化钠缓冲溶液中。
（透明瓶盖）5. 3ml通透试剂：含有0.011％的专有通透剂，保存在0.1％叠氮化钠缓冲液中。
（绿色瓶盖）6. 3ml细胞固定液：包含25％的专有固定液成分，保存在0.1％BSA和0.1％叠氮化钠缓冲溶液中。
（红色瓶盖）7. 2 x 110ml/瓶稀释液：含有0.1％叠氮化钠的缓冲溶液。
8. 16支Cellsearch圆锥形管（15ml圆锥形离心管）和管帽。
9. 16个暗盒和暗盒塞子。
未提供的必需材料1. CellSave血液保护管（货号#7900005）2. CELLTRACKS○R AUTOPREP○R系统 (Catalog #9541)3. CELLTRACKS ANALYZER II 分析仪(Catalog #9555)，或者CellSpotter?分析仪(Catalog #9525)4. CELLSEARCH循环肿瘤细胞质控试剂盒(Catalog #7900003)5. CELLTRACKS AUTOPREP 仪器缓冲液 (Catalog #7901003)6. 能提供离心力为800 X g水平离心机。
7. 试管架8. 微量移液器和枪头9. 旋涡混合器警告和注意事项1.本产品仅用于体外诊断。
2.在使用本产品检测样本之前请仔细阅读说明书。
3.注意：只能用 CellSave保护管收集血液。
CTC非常脆弱，需要特别保护才能进行正确分析。
4.注意：从业人员必须遵循全面防护措施，使用实验室的安全设备（例如，护目镜、安全服、安全手套等）。
5.注意：微生物污染会造成获得结果的不正确性，实验中应避免生物污染。
6.警告：所有的生物样本，包括暗盒和其他与生物样本接触的材料，应该认为具有生物危害。
样本如果具有传播感染的能力，必须进行及时处理。
同时，废弃物应根据当地和国家的规定进行正确处理。
禁止用嘴吸液。
7.警告：一些含有叠氮化钠作为防腐剂的试剂。
如果食入，请立即就医。
应放在小孩拿不到的地方。
远离食品和饮料。
使用时，佩戴合适的防护服。
与酸接触会释放剧毒气体。
在处理过程中，叠氮化合物应用大量的水冲洗，并避免放置在铅或铜的容器中，其可形成爆炸的条件。
危险和安全术语R22表示吞咽有害，S28表示与皮肤接触后，用大量肥皂清洗。
8.警告：所用包含Proclin300作为防腐剂的试剂。
过度暴露在Proclin300可引起皮肤和/或眼睛刺激，以及粘膜和上呼吸道刺激的症状。
9.操作人员在实验前应进行培训。
试剂储存和处理1.所以试剂在未开启使用之前，请储存在2-8度。
2.在试剂盒开启后，试剂在2-8度储存时间不超过30天。
为了更好的储存，开启的试剂必须使用相对应的盖子盖上，盖子的颜色与试剂瓶的标签相对应。
这可以避免试剂之间的交叉污染。
3.注意：在试剂盒开启后，稀释缓冲液不属于试剂盒的一部分，应当在室温下储存，且保存时间不能超过30天。
4.避免试剂保存温度超过35度，也不要冰冻。
5.在使用前，试剂需要平衡至室温（15-30度）。
6.目视检查试剂盒包装，并确定试剂在正确的位置。
通过匹配其特有的彩色瓶帽颜色和相应标签，检验每种试剂是否在适当的位置。
请参照以下图片的安置。
如果发现试剂放错了位置，或者存在重复的瓶子，不要使用该试剂盒，并通知客户技术服务进行更换。
7.试剂需避光保存。
8.试剂在正确的保存条件下是稳定的，直到保存到印刷在试剂容器或试剂盒上的失效日期。
不要使用过期试剂。
9.试剂盒组分经过大量的产生和测试。
不同试剂盒之间的试剂不能混合使用。
检测过程样本收集和预处理使用 CellSave保护管收集全血1.初始样样本应在开始治疗方案前进行设计。
后续样本可以在治疗方案开始后进行，在治疗过程中，通常在3至4周的时间间隔内检测CTC水平。
如果患者用阿霉素进行治疗，至少应在用药7天后才能取血检测。
2.只能使用CellSave保存管，通过静脉无菌的采集全血。
3.采血应直到血流停止，以确保血液样本与抗凝剂和保护剂的正确比率。
立即轻柔的倒转采血管8次进行混匀。
采血管反转防止凝血。
采血管颠倒不足或延迟，可能会导致不准确的测试结果。
4.血液样本可被存储在CellSave保护管中并进行输送。
请参阅CellSave保护管使用说明书。
不要冻存样本。
警告：在使用CELLTRACKS AUTOPREP系统检测之前，目视检查每个样本是否凝血。
凝血的样本应被丢弃。
CELLTRACKS AUTOPREP系统检测过程1.手动翻转5次保存样本血液的CellSave保护管。
然后拔出橡胶塞。
2.使用一支新的移液管从CellSave保护管中转移7.5ml血液到CELLSEARCH试剂盒提供的一个相应标记的15ml CELLSEARCH锥形管中。
3.再用一支新的移液管加入6.5ml稀释缓冲溶液到上述锥形管中。
4.盖上管盖，颠倒5次混匀。
5.样本离心，使用水平离心机800 X g离心10min。
该10min离心时间不包括达到800×g所需要的时间。
将离心机刹车“关闭”或者，如果你的离心机提供可变制动功能，设置制动到最低刹车设置。
使用能够在室温下离心的离心机在室温条件下离心。
样本离心后，目视检查每个样品管中血浆和红血细胞是否分离。
6.运行CELLTRACKS AUTOPREP系统之前，上述样本需要1h的准备时间。
请参阅CELLTRACKS AUTOPREP系统用户指南的完整说明。
使用CELLTRACKS 分析仪 IIor CellSpotter?分析仪分析样本CELLTRACKS AUTOPREP系统使用CELLTRACKS分析仪II或CellSpotter分析仪将处理好的样本分配放入到暗盒中准备进行分析。
MAGNEST装置内的放有样本的暗盒应在黑暗中至少孵育20分钟，并在24小时内进行分析。
请参阅CELLTRACKS分析仪II或CellSpotter分析仪用户指南的样本分析和数据审查说明。
质量控制CELLSEARCH循环肿瘤细胞质控试剂盒（目录＃7900003）检查整个系统的性能，包括仪器，试剂和操作。
在病人测试的每一天或使用大量新的CELLSEARCH 试剂盒时，CELLSEARCH循环肿瘤细胞质控应该进行。
请参阅CELLSEARCH循环肿瘤细胞质控试剂盒使用说明书和预期值。
结果解释结果以7.5ml血液中CTC的个数报告。
转移性的乳腺癌（MBC）在治疗过程中的任何时期，7.5ml血液中CTC数量≥5，表示预后差。