实验5分光光度法测定青菜中的叶绿素-江南大学(精)

2019/5/4
江南大学《食品化学》课程小组
青菜叶+ CaCO3 +丙酮，捣碎
匀浆抽滤
85%丙酮洗涤残渣
滤液
定容
滤液
比色，计算叶绿素含量
乙醚萃取 洗去丙酮
定容
2019/5/4
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五、注意事项
使用乙醚萃取时，需在通风橱中操作，实验前 检查好分液漏斗的密封、通畅性，萃取时勿激 烈振摇，以防产生乳化层 叶绿素遇光照和高温不稳，在提取过程中必须 控制好这些因素，尽可能在低温、弱光下进行， 并缩短实验时间，防止叶绿素的破坏 使用分光光度计时，先要预热；测定时要用乙 醚作空白
2019/5/4
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六、思考题
1、测定叶绿素a、b含量为什么要选用红光的波长？ 2、在破碎青菜叶组织时，为什么要加入碳酸钙或碳
酸钠？ 3、为什么叶绿素测定时应尽量可能在低温和避光的
条件下进行？ 4、叶绿素a和叶绿素b的结构有何不同？ 5、叶绿素在酶、热、酸的作用下会发生什么变化？
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二、仪器及材料
天平、组织捣碎机、水循环真空泵、抽滤 瓶、滤纸、布氏漏斗、容量瓶（1000 mL、 100 mL）、分液漏斗2个、尖嘴管、铁架台、 铁圈2个、分光光度计； 青菜叶、碳酸钙、丙酮（80%）、乙醚、 无水硫酸钠。
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三、原理
实验5 分光光度法测定青菜中 的叶绿素
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Biblioteka Baidu 一、目的
了解叶绿素的分子结构、性质，理解叶绿 素性质不稳定的根源，从而提高解决青菜 类蔬菜在加工、储藏等过程中出现问题的 能力。 掌握食品中某些有效成分的提取、分离以 及测定方法。
2019/5/4
组织破碎 青菜叶
叶绿素丙 酮溶液
含量
转移 叶绿素乙 醚溶液
测定
吸光度
总叶绿素 = 7.12 A660.0＋16.8 A642.5 叶绿素a = 9.93 A660.0－0.777 A642.5 叶绿素b = 17.6 A642.5－2.81 A660.0
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四、实验步骤