石蜡切片技术
石蜡切片技术
石蜡切片技术实验实验目的掌握动植物材料石蜡切片的方法及要求。
实验原理石蜡制片法是将材料经固定、脱水、透明、浸蜡后包埋在石蜡里面进行切片的方法。
此法适用范围，制片手段完备，能将材料切成极薄的片子（可切至2-8微米左右），并能制成连续的片子，这是其它制片法难以达到的，因此在光学显微镜的制片技术上它是最常用的一种方法。
除了一些经不住石蜡切片法中所应用的各种药剂处理的材料不能应用石蜡切片以外，一般的材料都可以用此法制片，但有制作时间较长，操作过程复杂以及材料易发硬或发脆等缺点。
该法多采用旋转式切片机进行切片。
实验材料小白鼠各种器官组织试剂１、７０％、８０％、９０％、９５％酒精及无水酒精：９５％以下的各级浓度酒精是用９５％酒精加蒸馏水稀释而成。
简单的稀释方法：所需稀释的浓度是多少，就量取多少毫升原浓度的酒精，再加蒸馏水至该酒精的原浓度即可。
例如，配制７０％酒精，就量取７０ml９５％酒精，然后加入２５ml蒸馏水即成。
２、固定液：常用的固定液有１０％福尔马林、Bouin氏液和Zenker氏液等。
Bouin氏液在组织学切片技术方面应用甚广，配方如下：苦味酸饱和水溶液７５ml福尔马林２５ml冰醋酸５ml３、蛋白甘油：蛋白甘油是粘贴蜡片用的粘片剂。
配方如下：取一新鲜鸡蛋的蛋白，充分搅拌成雪花状泡沫，然后滤去泡沫，加入等量甘油，搅拌均匀，再加入一小粒麝香草酚防腐。
４、染色液：以H.E.染色法为例，需配制苏木精染液和曙红染液。
⑴、苏木精染液：苏木精是一种碱性染料，它可将染色质染成蓝紫色。
配方有多种，现介绍Harris氏苏木精的配制：甲液：苏木精０.５ g９５％酒精５.０ ml乙液：硫酸铝钾（或硫酸铝铵）１０g蒸馏水１００ ml氧化汞０.２５g冰醋酸几滴先将甲液溶解，再将硫酸铝钾溶于蒸馏水中，并加热使溶解，然后将两液混合煮沸，离开火焰后缓缓加入氧化汞。
冷却后过滤，加入几滴冰醋酸即成。
⑵、０.５％曙红酒精溶液：即０.５g曙红溶于１００ml９５％酒精中。
石蜡切片的主要步骤
石蜡切片的主要步骤石蜡切片是一种常用的制备薄片的技术，广泛应用于生物学、医学和材料科学等领域。
本文将介绍石蜡切片的主要步骤，并详细说明每个步骤的操作方法和注意事项。
1. 样品固定和处理在进行石蜡切片之前，首先需要对待切样品进行固定和处理。
固定样品的方法可以根据实验的需要选择，常用的有乙醛固定、冰醋酸固定和福尔马林固定等。
处理样品的方法也根据实验目的而定，可以包括染色、脱水、透明化等步骤，以便更好地观察和研究样品。
2. 包埋将处理好的样品包埋在石蜡中，以便进行切片。
首先，将样品放入石蜡溶液中，使其充分浸泡。
然后，将石蜡溶液转移到恒温水浴中，使其逐渐固化。
在固化过程中，要确保样品均匀分布在石蜡中，避免出现气泡和空洞。
3. 切片切片是石蜡切片过程中最关键的一步。
首先，将固化的石蜡块从模具中取出，并放置在切片机的夹持装置上。
然后，调整切片机的切片厚度和速度，根据需要选择合适的参数。
接下来，使用切片刀将石蜡块切割成薄片。
在切割过程中，要保持手稳定，避免切片厚度不均匀或出现断层。
4. 切片取片切片切割完成后，需要将切片从切片刀上取下。
首先，使用镊子将切片从切片刀上小心取下，避免损坏或弯曲切片。
然后，将切片放置在预先准备好的载玻片上。
在放置切片时，要注意避免气泡的产生，可以使用专门的工具如细管吸气来帮助排除气泡。
5. 去除石蜡和染色切片取片后，需要将切片上的石蜡去除，并进行染色处理。
首先，将切片放入去石蜡剂中，使其充分浸泡。
然后，将切片转移到浸泡染色剂中，进行染色处理。
在去石蜡和染色过程中，要注意时间控制和温度控制，以确保染色效果和切片质量。
6. 封片和封边染色完成后，需要将切片做成封片，以保护切片并便于保存。
首先，将切片用透明胶片或玻璃片覆盖。
然后，使用封片胶或封片胶带将切片和覆盖物固定在一起。
接下来，将切片的边缘进行封边处理，以避免切片脱落或污染。
7. 干燥和贴标封片完成后，需要将切片进行干燥处理，并进行贴标。
快速石蜡切片技术在病理检验中的临床应用分析
快速石蜡切片技术在病理检验中的临床应用分析石蜡切片技术是一种在病理检验中广泛应用的技术，它能够将组织切片固定在载玻片上，为医生提供组织病理学观察和诊断的重要依据。
然而，传统的石蜡切片技术需要较长的处理时间，通常需要数天才能获得可用的切片，对于临床急需的情况来说，时间耗费是不可忽视的。
为了解决这一问题，快速石蜡切片技术应运而生。
快速石蜡切片技术利用特殊的处理方法和设备，能够在短时间内制备出高质量的切片，大大缩短了病理诊断的时间。
这一技术的出现对于临床急诊、手术和治疗计划的制定等环节都具有重要的意义。
快速石蜡切片技术的原理是利用溶胀法将组织中的水分去除，然后用特殊的树脂固化代替水分，最后进行切片。
与传统的石蜡切片技术相比，快速石蜡切片技术在处理过程中更加迅速，并保持了切片的高质量。
尤其是在急诊手术中，往往需要尽快给出病理诊断结果，快速石蜡切片技术具有明显的优势。
快速石蜡切片技术的临床应用主要体现在以下几个方面：首先，快速石蜡切片技术为临床急诊提供了快速而准确的病理诊断。
在急诊手术中，医生需要尽快确认患者是否患有恶性肿瘤等疾病，以便作出相应的治疗方案。
传统的石蜡切片技术往往不能满足这一需求，而快速石蜡切片技术可以在手术进行中迅速制作出切片，帮助医生作出准确的诊断。
其次，快速石蜡切片技术在病例讨论、多学科会诊等情况下能够提供即时的病理结果。
在一些复杂病例的讨论中，医生们常常需要及时获得病理学的结果，以便更好地制定治疗计划。
快速石蜡切片技术的出现使得这一过程更加高效，可以帮助医生及时作出决策，提高患者的治疗效果。
此外，快速石蜡切片技术还在手术导航中发挥着重要的作用。
在一些复杂的手术中，医生需要准确地定位组织病变部位，并进行精确的切除。
快速石蜡切片技术可以在手术过程中快速获得病理学信息，帮助医生实现精准手术导航，提高手术质量和患者的安全性。
最后，快速石蜡切片技术在研究领域中也发挥着重要的作用。
研究者往往需要大量的病理样本来开展实验和研究，传统的石蜡切片技术由于时间耗费较长，限制了研究的进展。
常用的经典组织学技术
常用的经典组织学技术经典组织学技术是研究细胞和组织学形态结构的重要手段，是现代生命科学中不可或缺的一部分。
随着科技的发展和进步，组织学技术不断创新和完善，但是一些经典的组织学技术仍然广泛应用于生命科学的研究领域。
下面将对常用的经典组织学技术进行介绍。
一、石蜡切片技术石蜡切片技术是组织学研究中最常用的技术之一。
它可以将组织切成非常薄的切片，使得组织的形态结构可以在显微镜下观察和研究。
石蜡切片技术的步骤大致如下：首先将组织固定、脱水处理，然后将组织浸入蜡中进行渗透处理，最后将渗透好的组织切出薄片。
石蜡切片技术具有较高的分辨率和生物安全性，因此广泛应用于组织形态学研究、诊断和治疗。
二、冰冻切片技术冰冻切片技术是一种较新的组织学技术，其基本原理是将组织迅速冷冻，然后切成薄片。
与石蜡切片技术相比，冰冻切片技术可以得到更好的组织微观结构和细胞内的亚细胞结构信息，尤其适合于一些对生物体很敏感的组织，如神经组织。
冰冻切片技术可以直接应用于某些特殊的生命科学领域，如蛋白质晶体学和冷冻电镜技术等。
三、光学显微镜技术光学显微镜技术是组织学研究中应用最广泛的技术之一，也是组织学技术学习中最基础的技术之一。
这种技术可以通过灯光和透镜将显微镜下的物体放大，并且在不破坏样品的情况下识别和分析不同的细胞和组织结构。
光学显微镜技术在诊断学、细胞学、解剖学、生物学和化学等领域均有广泛应用。
四、免疫组化技术免疫组化技术是一种基于抗体-抗原相互作用原理的组织学技术，将特定抗原标记着色分析。
通过在组织或细胞上添加合适的抗体，对该抗原特定位置进行标记，从而在显微镜下较为清晰地观察到抗原的位置、形态和分布情况，是现代生命科学中极为重要的分析方法之一，特别适用于组织病理学、免疫学和肿瘤学等领域。
五、原位杂交技术原位杂交技术是一种能够检测基因或RNA等核酸分子的组织学技术。
利用标记着色质和探针的互动，把探针寡核苷酸序列与样品中的核酸混合，然后目视观察其在细胞或组织中的位置、分布和数量来检测其在样品中的表达情况和作用机制的过程。
石蜡切片技术
（6）透明：纯酒精/二甲苯＝1∕1浸渍2小时，再转入纯的二甲苯中二 次，每次1小时，至大体呈明亮感即可。
（7）浸蜡：将组织留在透明剂中，轻轻倒上等体积已熔化的石蜡， 放入40℃的温箱10小时(过夜)，再加入熔化的石蜡至3/4体积，调 节温箱至48℃，透蜡3小时，再经3次纯蜡，温度56℃，每次约1 小时，直至透明剂完全排出。
3.脱水
材料洗涤后，其中含水，水与石蜡不能混合，必须除去。去水 用酒精，材料由水入酒精中，不能操之过急，须由低度酒精渐 至高度酒精。通常由30％、50％、70％、80％、90％、100％， 每次须经半小时或更长时间，材料大的，时间须延长。若暂时 不能埋蜡、材料可放在70％酒精中保存，经久不坏。在高度酒 精中，不能过久．因酒精能使材料硬化，过久则材料由硬而脆， 切时易于粉碎。
石蜡切片技术
植物组织石蜡切片技术
石蜡切片法是显微技术上最重要、最常用的一种 方法。它是把材料封埋在石蜡里面，用旋转切片 机切出很薄（6～8微米）的切片用于显微观察。
石蜡切片的一般步骤：
1．固定 2．洗涤 3．脱水 4．透明 2．封埋 6．切片 7．粘片 8．脱蜡 9．染色 10．脱水 11. 透明 12．封片
水稻幼穗组织爱氏苏木精整染法
（1） FAA固定液固定幼穗组织24小时以上。 （2） 50％酒精洗涤2~3次，每次1小时。 （3）爱氏苏木精稀释液中整染2天 。 （4）水洗，返蓝，换水2～3次，水洗1天。 （5） 脱水及复染 ：经20％，40％，60％，75%（过夜），85%
各级酒精，每级约2小时，0.5％伊红酒精（95％）染液4～6小 时，无水酒精脱水2次，每次1.5小时。
材料透明后，要进行浸蜡，才能进行埋蜡。浸蜡也宜于渐次进行，一般 先用石蜡和二甲苯的混合液（50%级和70%级）浸蜡，再用纯石蜡换三 次，每次的时间，视材料大小而定，通常每次半小时，材料大，时间必 须加长。在浸蜡的过程中，须注意温度，不能超过石蜡熔点2℃以上 。
石蜡切片技术
石蜡切片制作步骤1、洗涤：将固定的样品放入70%的酒精中，数次更换至样品颜色变白。
2、脱水：80%酒精——→90%酒精——→95%酒精——→100%酒精——→100酒精（每步时间为1h）3、透明：酒精二甲苯（1:1）——→纯二甲苯——→纯二甲苯（每步时间为15min）4、透蜡：石蜡二甲苯（1:1）——→纯石蜡——→纯石蜡（每步时间为1h，在恒温箱60℃）5、包埋：将熔化石蜡倒入小盒中，加组织、调整、凝固（4h以上）6、切片：修整包埋好的的石蜡块，切片厚度为5μm（刀放置的倾斜角以10—20°为宜，刀刃与蜡块表面呈5°夹角。
包埋好，放置于4℃冰上，修成梯形。
）7、展片：载玻片加蛋白甘油——→加蜡条——→滴蒸馏水——→展片台加热（55℃水浴中展开，展开程度以带黄颜色的组织完全摊平为准。
）8、烘片：37℃恒温箱烘烤2—3dHE染色：9、脱蜡：纯二甲苯——→纯二甲苯——→二甲苯酒精（每步3min）10、复水：100%酒精——→100%——→95%——→95%——→90%——→80%——→70%——→双蒸水（每步3—5min）11、染色：苏木精——→水浇（10—20min）——→1%盐酸酒精（若干秒）——→水浇（1min）——→1%氨水（1—3min）——→水浇（1min）——→70%酒精——→80%——→90%——→95%——→0.5%伊红——→95%（30s）——→95%（30s）（迅速除去玻片上的伊红染液，迅速！未说明的每步时间为3—5min）12、脱水：100%乙醇——→100%乙醇（每步3—5min）13、透明：二甲苯酒精（1:1）——→纯二甲苯——→纯二甲苯（每步3—5min）14、封藏：切片取出，滴加中性树胶，盖上情结的盖玻片烘干，几天后显微镜下拍照。
石蜡切片的实验报告
石蜡切片的实验报告石蜡切片的实验报告石蜡切片是生物学和医学领域中常用的技术手段，它可以将组织样本固定在切片上，以便于观察和分析。
本次实验旨在探究石蜡切片技术的原理、步骤和应用。
一、石蜡切片技术的原理石蜡切片技术是一种常用的组织学研究方法，它的原理基于石蜡的透明性和稳定性。
石蜡是一种具有较高熔点的蜡状物质，具有良好的剪切性和切片稳定性。
在进行石蜡切片前，需要将组织样本进行固定、脱水和浸渍处理，使其具备适合切片的性质。
然后，将固定好的组织样本浸入石蜡中，石蜡渗透进入组织细胞中，将其包裹在石蜡中形成固定的切片。
最后，使用显微镜对切片进行观察和分析。
二、石蜡切片的步骤1. 组织样本的固定：将组织样本取出后，迅速进行固定处理。
常用的固定剂有福尔马林、乙醛等，可以使组织样本保持原有的形态结构。
2. 脱水处理：将固定好的组织样本进行脱水处理，以去除组织中的水分。
脱水过程中，需要逐渐使用浓度递增的酒精进行浸泡，使组织逐渐脱水至无水状态。
3. 浸渍处理：将脱水后的组织样本浸泡在石蜡溶液中，使其充分浸渍。
浸渍时间根据组织样本的大小和类型而定，一般需要数小时至数天。
4. 石蜡包埋：将浸渍好的组织样本放入石蜡模具中，加热使石蜡融化，将组织样本包裹在石蜡中。
包埋过程中需要控制温度和时间，以确保石蜡充分渗透到组织中。
5. 石蜡切片：使用石蜡切片机将包埋好的组织样本切割成薄片。
切片时需要调整切片机的切割速度和刀片的角度，以获得理想的切片质量。
6. 切片染色：将切好的石蜡切片进行染色处理，以增强组织结构的对比度和可见性。
常用的染色方法有血液学染色、组织学染色等。
7. 显微镜观察：将染色好的石蜡切片放置在显微镜下进行观察和分析。
通过显微镜的放大功能，可以清晰地观察到组织样本的细胞结构和组织构成。
三、石蜡切片技术的应用石蜡切片技术在生物学和医学领域中有广泛的应用。
首先，它可以用于病理学研究，帮助医生诊断和治疗疾病。
通过观察石蜡切片下的组织结构，医生可以了解病变的类型、程度和分布情况，从而制定相应的治疗方案。
石蜡切片技术ppt
石蜡好坏可用以下方法辨别：
a.熔入纸盒中无气泡（挥发物；）
b.无不透明颗粒（灰尘），断裂处无颗粒 （灰尘，切片无细小颗粒（灰尘）
C.在30-35℃放置24小时无气泡或不透明结 晶状小点。
③切片方法
将切片材料的木块夹在刀夹上，厚度一般 6~12um，连续转40~50次，用毛笔挑起蜡 带，平放在蜡光纸上，靠刀的一面较光滑，应 向下。
3.注意问题：
（1）包埋时石蜡不能过早冷却（放在温台上） （2）冷却要快 （3）若出现白色、浑浊结晶，可能是由于：
a.脱水不干净； b.组织内部或石蜡中混有透明剂； c.组织块倒入时，周围蜡已凝固： d.石蜡冷却太慢； e.石蜡质量不好。
（八）切片
1. 目的：将观察的材料变薄，光线容易穿过； 2．方法：
二、石蜡切片技术的优点
为什么选择这一技术呢？主要因为它有 以下优点：便于推广、经济、适用、简 便。
经济,价格低，可反复使用； 技术难度不大，容易掌握，但要精通也不
容易； 设备要求不高 ； 可长期保存； 染色容易，而且都能被染色，形成好的反
差和好的选择性。
三、石蜡切片的主要过程
杀生（取材）——固定——冲洗——脱水— —保存——透明——石蜡透入——包埋—— 切片——复水——染色——脱水——封藏— —观察保存 （一）取材、固定、洗涤、脱水 （二）透明、透蜡、包埋 （三）切片、贴片 （四）染色、封藏
一起进行固定如：
单纯固定：
福尔马林formalin:10%的甲醛（37%—— 40%）
醋酸（0.3%~5%） 苦味酸（饱和溶液，三硝基苯酚） 铬酸0.5~1% 锇酸1~2% 升汞（氯化汞饱和水溶液约7%）
《石蜡切片技术》课件
制备石蜡切片需要复杂的操作和专业设备，同时样本可能发生失真和伪影。
石蜡切片技术的发展前景
科技创新
随着科技的
石蜡切片技术在不同领域的应 用将促进跨学科的合作和创新。
新发现
通过石蜡切片技术，我们将有 机会发现更多细胞和组织的奥 秘，推动科学的发展。
总结和展望
《石蜡切片技术》是一项重要的科学技术，它在医学和科学研究中发挥着重要作用。我们相信随着技术的不断 发展，石蜡切片技术将为我们带来更多的新发现和突破。
《石蜡切片技术》PPT课 件
欢迎来到《石蜡切片技术》的世界！让我们一起探索这个令人着迷的技术， 揭开它的奥秘！
技术背景
在科学研究和医学领域中，石蜡切片技术起着重要作用。了解其背景将有助于我们深入了解该技术的重要性和 应用。
石蜡切片技术的定义与原理
1
定义
石蜡切片技术是一种用于制作细胞切片的方法，它可以保持细胞结构的完整性。
2
原理
该技术的原理是将固定的组织样本浸入石蜡中，使其固化，然后使用显微切片机 切割出薄片。
3
挑战
石蜡切片技术需要严格的控制温度和时间，以确保薄片的质量和细胞结构的完整 性。
石蜡切片制备方法
石蜡切片技术有多种制备方法，包括冷冻切片、热切片和冷热切片等。每种 方法都有其适用的情况和优缺点。
石蜡切片技术的应用领域
医学研究
石蜡切片技术在病理学和生 物医学研究中广泛应用，有 助于揭示疾病发生的机制。
植物学
通过石蜡切片技术，科学家 可以观察植物的细胞结构、 组织构造和生长过程。
材料科学
该技术也用于材料科学中， 用于观察材料的结构和性能。
石蜡切片技术的优势与不足
1 优势
石蜡切片流程
石蜡切片流程一、引言石蜡切片是生物学、医学和材料科学等领域中常用的一种实验技术，用于制备样品的薄片，以便进行显微观察和分析。
本文将介绍石蜡切片的流程及其关键步骤。
二、材料准备1. 石蜡：选择适合的石蜡材料，常见的有硬质石蜡和软质石蜡。
2. 样品：根据需要选择合适的样品，可以是生物组织、细胞、材料等。
3. 切片刀：选择切割尖锐且锋利的切片刀，常见的有玻璃刀片和钢刀片。
4. 切片机：使用专业的切片机设备，保证切片的精准度。
三、石蜡切片流程1. 固定样品：将样品进行固定处理，常用的方法有福尔马林固定、乙醛固定、冷冻固定等。
固定的目的是保持样品的形态结构和生物活性。
2. 除去水分：将固定后的样品通过醇溶液逐渐去除水分，一般采用浓度逐渐降低的醇溶液，如75%乙醇、50%乙醇、30%乙醇等。
3. 渗透石蜡：将去水后的样品用石蜡进行渗透处理。
首先将样品置于较低融点的石蜡中，然后逐渐转移到较高融点的石蜡中，这样可以保证样品逐渐与石蜡融合。
4. 包埋：将渗透后的样品放入石蜡模具中，待石蜡凝固后，取出石蜡块。
5. 切片：使用切片机将石蜡块切割成薄片，切片的厚度根据需要进行调整，一般为4-10微米。
6. 切片处理：将切好的薄片浸泡在温水中，使其展平，并将薄片转移到载玻片上。
7. 固定薄片：将载玻片放入烘箱中，以适当的温度和时间使薄片与载玻片充分固定。
四、注意事项1. 操作环境：保持实验室的清洁和安静，避免灰尘和噪音对实验结果的影响。
2. 刀片处理：在使用切片刀前，先将其清洗干净并消毒，以防止样品污染。
3. 温度控制：石蜡切片的各个步骤中，温度的控制非常重要，可以根据不同的样品选择适当的温度。
4. 切片厚度：不同的样品需要不同的切片厚度，要根据实验需要进行调整。
5. 质量控制：在每个步骤结束后，要对样品的质量进行严格检查，确保切片的质量。
6. 保存条件：切好的石蜡切片应妥善保存，防止受潮或受到外界环境的污染。
五、总结石蜡切片是一种常用的实验技术，通过固定、去水、渗透石蜡、切片等步骤，可以制备出精细的样品薄片，用于显微观察和分析。
石蜡切片技术实习报告
一、实习背景石蜡切片技术是生物学、医学、病理学等领域中常用的技术手段之一，通过将组织或细胞固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色等步骤，制作出可供显微镜观察的切片。
为了提高我的实践能力，我参加了石蜡切片技术的实习。
二、实习目的1. 熟悉石蜡切片技术的原理和操作步骤。
2. 掌握石蜡切片技术的基本操作技能。
3. 提高实验操作规范性和安全性。
三、实习内容1. 实验原理石蜡切片技术是将组织或细胞固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色等步骤制作成可供显微镜观察的切片。
该技术具有切片厚度均匀、保存时间长、操作简便等优点。
2. 实验步骤（1）取材：选取新鲜、无病虫害的组织或细胞。
（2）固定：将组织或细胞浸入固定液中，使蛋白质凝固，防止细胞自溶。
（3）洗涤：用蒸馏水冲洗固定后的组织或细胞，去除固定液。
（4）脱水：将组织或细胞逐步浸入浓度递增的酒精溶液中，去除水分。
（5）透明：将组织或细胞浸入透明液中，使细胞质变得透明。
（6）浸蜡：将组织或细胞浸入熔化的石蜡中，使组织包埋在石蜡中。
（7）包埋：将浸蜡后的组织或细胞嵌入石蜡块中。
（8）切片：使用切片机将包埋在石蜡块中的组织或细胞切成薄片。
（9）脱蜡：将切片逐步浸入浓度递减的酒精溶液中，去除石蜡。
（10）染色：将切片浸入染色液中，使细胞结构着色。
（11）脱水：将切片逐步浸入浓度递增的酒精溶液中，去除水分。
（12）透明：将切片浸入透明液中，使细胞质变得透明。
（13）封片：将切片贴在载玻片上，滴加封片剂，制成永久性玻片标本。
3. 实验操作在实习过程中，我严格按照实验步骤进行操作，注意以下几点：（1）取材要新鲜、无病虫害。
（2）固定液要充分浸渍组织或细胞。
（3）脱水、透明、浸蜡等步骤要逐步进行，避免过度处理。
（4）切片厚度要均匀，避免过厚或过薄。
（5）染色要充分，确保细胞结构清晰。
（6）封片要牢固，避免切片脱落。
四、实习总结通过本次石蜡切片技术实习，我掌握了石蜡切片技术的基本原理和操作步骤，提高了实验操作规范性和安全性。
4 实验三 石蜡切片技术-取材、固定.
混合固定液就是用几种化学药品，按一定的比例混合配制而成的，由于各种药品的优缺点互相弥补，因此可产生较好的效果。良好的固定剂应该具备以下条件：
⑦固定材料适宜浓度为0.5-2%。
锇酸的配制：用重蒸水配成母液2%，使用时，用PH7.0、0.2M磷酸缓冲液稀释一倍到1%。
（2）戊二醛
①穿透速度很快。
②固定微管蛋白，是微管的很好的固定液。
③用PH6.8-7.0、0.2M磷酸缓冲液配成25%母液，固定材料适宜浓度为3-6%。
（3）丙烯酸
①固定蛋白、核酸和聚多糖。
痉挛而死。
上述动物若需麻醉后取材，则可用脱脂棉球蘸氯仿或乙醚、置于动物的鼻尖部，令其吸入麻醉。大动物(狗、猴等)应用氨基甲酸乙酯作静脉注射麻醉．剂量一般为每kg动物体重用1 g。麻醉后的动物也需放血后进行取材固定。
昆虫等小动物可投入充满氯仿或乙醚蒸气的大口瓶中，令其麻醉。若要杀死，可将其投入含氰化钾的毒瓶中。
（2）石蜡块也有一定限制，一般（5-6mm）。2.切割面一般分为两类：
（1）横切面：使用刀横越根、茎的横断面的切面，横切片可观察材料自外向内的各种组织。
（2）纵切面：刀的切向与根、茎的长轴方向平行的切面，这种切面又分为两种：
①半径切面：以刀穿过中心点与其半径吻合的切面，这种切面可观察到茎中各种组织纵走的情形及髓的排列、厚度等。
石蜡切片法步骤
一、取材
二、固定
三、抽气
四、冲洗
五、脱水
六、透明
石蜡切片的原理
石蜡切片的原理
石蜡切片是组织学中常用的一种制备技术，用于观察和研究生物组织的微观结构。
其原理可以分为以下几个步骤：
1. 组织采集：首先，需要将待观察的生物组织（例如动物、植物的器官或细胞等）进行采集和收集。
采集可以通过活体取材或者组织固定的方式进行。
2. 组织固定：为了保持组织的形态和结构不受损失，采集到的生物组织需要进行固定处理。
常用的固定方法包括用福尔马林（formalin）进行固定、液氮冷冻等。
3. 组织处理：固定后的生物组织需要进行一系列的处理步骤，以便使其能够被切割成薄片。
处理步骤包括去水化、透明化和浸渍。
4. 包埋：将处理后的组织用石蜡进行包埋，即将其浸入熔化的石蜡中。
石蜡可以提供支持和保护组织的结构，使得组织在切割过程中不会受损。
5. 切片：经过包埋的生物组织在石蜡硬化后，需要使用显微切片机进行切割。
切片机能够将包埋的生物组织切割成极薄的切片，常见的厚度约为4-6微米。
6. 染色：切片完成后，需要进行染色以增强对组织结构的观察。
常用的染色方法包括常规染色（如血液染色）和免疫组织化学染色等。
7. 观察和分析：最后，将染色后的切片放置在显微镜下观察，并使用显微镜和其他相关设备进行分析和研究。
通过石蜡切片技术，可以观察和研究生物组织的细胞结构、组织类型、细胞分化、病理变化等重要信息，对于医学诊断、疾病研究和药物开发等领域具有重要意义。
石蜡切片实验报告
石蜡切片实验报告石蜡切片实验报告石蜡切片是一种常见的实验技术，广泛应用于生物学、医学和材料科学等领域。
本实验旨在探索石蜡切片的制备方法、切片技术以及应用领域。
一、石蜡切片的制备方法石蜡切片的制备方法主要包括固定、脱水、浸渗和包埋四个步骤。
首先，需要将待切割的样本进行固定处理，常用的方法有福尔马林固定和乙醛固定等。
固定处理的目的是保持样本的形态结构和化学组成，以便后续的处理。
接下来，进行脱水处理，将固定的样本逐渐置于浓度递增的酒精溶液中，以去除样本中的水分。
然后，进行浸渗处理，将脱水后的样本逐渐浸渗于石蜡中，以增加样本的硬度和刚性。
最后，进行包埋处理，将浸渗后的样本置于石蜡中，使其完全包裹。
制备好的石蜡块可以进行切片处理。
二、石蜡切片的切片技术石蜡切片的切片技术主要包括石蜡块修整、切片机操作和切片收集三个步骤。
首先，需要对石蜡块进行修整，将其切割成适当大小的块，以便放置于切片机中。
修整过程需要注意保持切片块的平整和规整，以确保切片的质量。
接下来，进行切片机操作，将石蜡块固定在切片机上，并设置好切片机的切割参数，如切片厚度和切割速度等。
切片机通常使用旋转刀片进行切割，通过旋转刀片与石蜡块的接触，将石蜡块切割成薄片。
最后，进行切片收集，将切割好的石蜡切片收集起来，可以用于后续的染色、观察和分析。
三、石蜡切片的应用领域石蜡切片在生物学、医学和材料科学等领域有着广泛的应用。
在生物学研究中，石蜡切片可以用于组织学研究，通过切割和染色石蜡切片，可以观察和分析生物组织的形态结构和细胞组织的分布情况，从而揭示生物组织的功能和病理变化。
在医学诊断中，石蜡切片可以用于病理学检查，通过切割和染色石蜡切片，可以观察和分析患者组织样本中的异常变化，为医生提供诊断依据。
在材料科学研究中，石蜡切片可以用于材料分析，通过切割和染色石蜡切片，可以观察和分析材料的微观结构和组分分布，从而揭示材料的性质和特性。
总结起来，石蜡切片是一种重要的实验技术，具有广泛的应用领域。
常规石蜡切片检查的技术流程
常规石蜡切片检查的技术流程一、取材。
这就像是一场寻宝之旅呢。
我们要从送检的组织里选取合适的部分。
这个部分得有代表性，就像从一堆水果里挑出最能代表这一堆水果好坏的那一个。
比如说要是检查肿瘤，就得挑肿瘤组织和周围看起来有点不一样的组织一块儿取下来。
取材的时候得小心，不能把组织弄破或者弄变形啦，不然就像把拼图块弄坏了一样，后面就拼不起来了。
而且取的组织块也不能太大或者太小，太大了不好处理，太小了可能就看不到我们想看的东西了。
这一步就像是给后面的工作打下一个好基础，就像盖房子打地基一样重要呢。
二、固定。
取好材之后呢，就该固定啦。
固定就像是给组织拍个快照，让它保持现在的状态。
我们一般用福尔马林来固定，这福尔马林就像个神奇的小卫士，一进去就把组织里的各种东西都稳住了。
它能防止组织腐烂，还能让细胞里的结构保持得好好的。
这个过程得有足够的时间，不能太着急。
就像泡茶叶一样，得泡到一定的程度，茶的味道才正。
如果固定时间不够，那组织就像没泡好的茶，后面做出来的切片就可能不清楚，好多细节就看不到了。
三、脱水。
脱水这个步骤啊，有点像给组织做个“干蒸桑拿”。
因为组织里有很多水分，这对后面做石蜡切片可不好，得把这些水分去掉。
我们会用不同浓度的酒精来逐步把水分吸出来。
这个过程得一步一步来，就像上楼梯，不能一下子跨好几步。
如果太快了，组织可能就会收缩或者变形，那就糟糕了。
这时候就像在照顾一个小宝贝，得小心翼翼的，不然它就“闹脾气”啦。
四、透明。
脱水之后呢，就到透明这一步了。
透明就是让组织变得像玻璃一样透明。
我们会用二甲苯之类的试剂。
这一步就像是给组织穿上一件透明的小衣服，让它看起来更清楚。
不过二甲苯可是有点小脾气的，味道不太好闻，而且还得小心使用，不能让它伤到自己。
这时候就得像对待一个有点危险但又很有用的小助手一样，好好把握。
五、浸蜡。
浸蜡就像是给组织盖一层厚厚的蜡被子。
把组织放到融化的石蜡里，让石蜡慢慢渗透到组织里。
这个时候的石蜡就像一个温暖的小窝，把组织包裹得严严实实的。
石蜡切片技术实习报告
石蜡切片技术实习报告实习目的：通过本次实习，了解石蜡切片技术的原理和操作流程，掌握石蜡切片的基本技巧，培养实验操作能力和观察能力。
实习内容：1. 石蜡切片技术的原理和操作流程介绍2. 实习操作：取材、固定、洗涤和脱水、透明、浸蜡、包埋、切片与粘片、脱蜡、染色、脱水、透明、封片等步骤。
3. 实习结果观察和分析。
实习过程：1. 石蜡切片技术的原理和操作流程介绍石蜡切片技术是一种常用的组织切片技术，它通过将组织样品固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色等步骤，制作出可供显微镜观察的切片。
石蜡切片技术的原理是利用石蜡的特性，使组织样品在切片过程中保持稳定，并且石蜡对组织样品有一定的渗透和固定作用，使切片质量更好。
2. 实习操作（1）取材：根据要求选取材料来源及部位，例如植物细胞有丝分裂多选取洋葱根尖，细胞分裂快又便于切取。
材料必须新鲜，否则会产生蛋白质分解变性，导致细胞自溶及细菌的滋生，不能反映组织活体时的形态结构。
（2）固定：用适当的化学药液——固定液浸渍切成小块的新鲜材料，迅速凝固或沉淀细胞和组织中的物质成分、终止细胞的一切代谢过程、防止细胞自溶或组织变化，尽可能保持其活体时的结构。
（3）洗涤和脱水：用递升浓度的乙醇等对固定后的组织进行洗涤和脱水，去除组织中的水分。
（4）透明：用二甲苯等对脱水后的组织进行透明处理，使组织变得透明，方便切片。
（5）浸蜡：用石蜡对透明处理后的组织进行浸蜡，使组织样品硬化，便于切片。
（6）包埋：将浸蜡后的组织样品放入石蜡中，制成蜡块，用于切片。
（7）切片与粘片：使用旋转式切片机将蜡块切片，并将切片粘贴在玻片上。
（8）脱蜡：使用二甲苯对切片进行脱蜡处理，去除切片表面的石蜡。
（9）染色：根据需要选择适当的染色剂对切片进行染色，突出组织结构。
（10）脱水、透明、封片：使用乙醇等对染色后的切片进行脱水和透明处理，最后封片，制成永久性显微玻片标本。
3. 实习结果观察和分析通过实习，我成功制作了石蜡切片，并使用显微镜观察了切片。
快速石蜡切片技术在病理检验中的临床应用价值
快速石蜡切片技术在病理检验中的临床应用价值1. 石蜡切片技术简介在病理检验中，石蜡切片技术是非常重要的一种技术，能够将组织标本切片，以便进行观察和分析。
石蜡切片技术的基本流程是：组织标本经过固定、脱水、清洗、浸渍和包埋处理后，再用微型切片机将其切成薄片，最后染色并进行显微镜检查。
但是，传统的石蜡切片技术有很多缺点，例如处理时间长、需要使用有毒溶剂和有害气体、操作复杂等。
2. 快速石蜡切片技术的优点为了解决传统石蜡切片技术的缺点，科学家们发明了快速石蜡切片技术。
这种技术的优点非常明显：•处理时间短：快速石蜡切片技术只需要几个小时，就能将组织标本切片完成。
•不需要有毒溶剂和有害气体：快速石蜡切片技术使用的是非常安全的溶液和气体，不会对人体产生危害。
•操作简单：快速石蜡切片技术的操作非常简单，不需要专业技能。
3. 快速石蜡切片技术在病理检验中的应用快速石蜡切片技术在病理检验中有着非常广泛的应用。
以下是其中的一些例子：3.1. 癌症诊断快速石蜡切片技术可以帮助医生快速确定患者是否患有癌症。
在手术中，医生通常需要进行术前冰冻切片检查，以确定肿瘤的边界和深度，以便更好地规划手术方案。
快速石蜡切片技术可以在手术中快速完成这项检查，缩短手术时间，为患者提供更好的治疗体验。
3.2. 神经系统疾病诊断快速石蜡切片技术可以帮助医生快速诊断神经系统疾病，例如多发性硬化症、帕金森病等。
这些疾病通常需要检查脑组织中的神经元或神经纤维，以确定疾病类型和程度。
快速石蜡切片技术可以在几个小时内完成这项检查，使医生能够更快地为患者制定治疗方案。
3.3. 传染病检测快速石蜡切片技术可以帮助医生快速检测传染病病原体，例如流感、肺炎、艾滋病等。
传染病通常需要在患者身上采集样品，并通过实验室检测确定是否存在病原体。
快速石蜡切片技术可以在几个小时内完成这个过程，并且在检测过程中不会造成病原体传播。
4. 结论快速石蜡切片技术是一种在病理检验中非常重要的技术，有着非常广泛的应用。
快速石蜡切片技术在病理检验中的临床应用分析
快速石蜡切片技术在病理检验中的临床应用分析石蜡切片技术在病理检验中是一项重要的实验技术，用于研究和诊断各种疾病。
然而，传统的石蜡切片技术存在时间长、制作周期长、工序繁琐等一系列问题。
为了解决这些问题，快速石蜡切片技术应运而生，它具有时间短、制作周期短、精度高等特点，因此在临床应用中受到了广泛的关注和应用。
本文将对快速石蜡切片技术在病理检验中的临床应用进行分析，并探讨该技术的优缺点。
一、快速石蜡切片技术的原理快速石蜡切片技术是一种改进的石蜡切片技术，通过调整切片温度、切片速度、切片角度等参数，使得石蜡能够在较短的时间内冷却固化。
相比传统的石蜡切片技术，快速石蜡切片技术具有更高的效率和更好的切片质量。
二、快速石蜡切片技术在病理检验中的应用1. 提高工作效率传统石蜡切片技术需要长时间进行切片和固化的过程，给实验人员增加了较大的工作量和时间成本。
而快速石蜡切片技术通过缩短切片时间和固化时间，能够大大提高实验人员的工作效率，节约了宝贵的时间。
2. 保证切片质量快速石蜡切片技术在切片过程中，能够更好地保持样本的形态结构和细胞形态。
传统的石蜡切片技术由于时间较长，样本易受损，容易出现细胞损伤或变性等问题。
而快速石蜡切片技术能够更好地保持样本的完整性和结构特征，提高了切片质量和诊断准确性。
3. 减少实验过程对患者的影响由于快速石蜡切片技术的快速性，减少了病理检验过程对患者的干扰，缩短了患者在手术台上的时间，减少了手术风险和术后并发症的可能性。
三、快速石蜡切片技术的优缺点1. 优点：（1）高效性：快速石蜡切片技术能够在较短的时间内完成切片和固化的过程，提高了实验室的工作效率。
（2）优质性：快速石蜡切片技术能够更好地保持样本的完整性和结构特征，提高了切片质量和诊断准确性。
（3）安全性：由于快速石蜡切片技术的快速性，减少了手术对患者的影响，降低了手术风险和并发症的发生可能性。
2. 缺点：（1）设备费用高：快速石蜡切片技术设备的价格较高，对实验室的经济投入较大。
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石蜡切片制备技术
活的细胞或组织多为无色透明，各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差，在一般光镜下不易清楚区别出；组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败，失去原有正常结构，因此，组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡，而能清晰辨认其形态结构。
石蜡切片是组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。
石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构，也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法，而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。
教学中，光镜下观察切片标本多数是石蜡切片法制备的。
石蜡切片法是将组织经过一系列药品处理，使石蜡渗入组织，包埋成蜡块，再把组织蜡块切成极薄的片子，根据不同的需要用不同的染色方法以显示不同细胞和组织的形态，以及细胞和组织中某些化学或特殊（如抗原）成份含量的变化。
一、所需器材及试剂
1，器材
切片刀，切片机，恒温箱，熔蜡炉，蜡杯，酒精灯，蜡铲，铺片台，冷冻台，解剖刀，镊子，台木，毛笔，染色缸，盖玻片，载玻片，中性树胶，显微镜。
2，试剂
各种浓度的酒精（70%、80%、90%、95%、100%）、二甲苯、石蜡、苏木精染液，0.5%伊红酒精溶液，1%盐酸酒精溶液等。
二、石蜡切片制备过程
1，取材
采集病料要及时，以防组织变质发生自溶。
病理组织材料要采取病变典型突出的部分，最好选病变与健康组织的交界处，以识别和探讨病变的发生和发展。
2，固定
采集样品在滤纸上吸干后迅速放入4％甲醛溶液中固定七天以上，使组织细胞的蛋白质变性凝固，以防止细胞死后的自溶或细菌的分解，从而保持细胞原来的形态结构。
3，洗涤
切取约1cm×1cm×0.3mm固定好的组织，放入带盖的网槽中用自来水冲洗过夜，调节流量使水从底部缓慢流出。
4，脱水透明
组织经固定和水洗后含多量水分，水与透明剂、石蜡不能溶合，因此，在透明、浸蜡前必须进行脱水，把组织中的水份彻底驱除。
酒精为常用脱水剂，它既能与水相混合，又能与透明剂相混，为了减少组织材料的急剧收缩，应使用从低浓度到高浓度递增的顺序进行。
为使石蜡能浸入组织块，组织脱水后，必须经过一种既能与酒精相混合，又能溶解石蜡的溶剂，通过这种溶剂的媒介作用，而达到石蜡浸入组织块的目的。
常用透明剂：二甲苯。
具体流程如下：
70％酒精（1h）--→80％酒精（55min）--→90％酒精（50min）--→95％酒精（45min）--→100％酒精（35min）--→1/2酒精+1/2二甲苯（15min）--→二甲苯1和二甲苯2（数秒）（此时组织光线可以透过，组织呈现出不同程度的透明状态。
）
5，浸蜡
组织经过透明剂的完全透明后，移放于65℃左右熔化的石蜡中，于65℃的电热恒温箱中浸渍4h。
6，包埋
将熔化好的石蜡倒入包埋框约4mm，用加温的镊子将组织块切面朝下放入，按压使其接近底部，加满融化好的石蜡，放置冷冻机上冷却。
7，切片
包埋好的蜡块用刀片修成规整的四棱台，以少许热蜡液将其底部迅速贴附于小木块上，夹在轮转式切片机的蜡块钳内，使蜡块切面与切片刀刃平行，旋紧。
将新切片刀固定在刀夹上，刀口向上。
摇动推动螺旋，使石蜡块与刀口贴近，但不可超过刀口。
调整厚度调节器到所需的切片厚度，先调至20微米，右手摇动转轮，让蜡块切成蜡带，左手持毛笔清扫蜡带，摇转速度不可太急。
等组织出现完全后调至5微米。
观察蜡片，出现完整且不碎裂的蜡片后用毛笔轻轻将蜡带挑起，用沾水的牙签挑至铺片机上。
⑥用涂有蛋白甘油的载玻片捞起展开的蜡片，至中央位置
8，烤片
将载玻片放置恒温箱中50℃，2-3h。
9，HE染色
染色的目的是使细胞组织内的不同结构呈现不同的颜色以便于观察。
常用HE染色法，苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
①脱蜡复水
染色液多数为水溶液，因此，染色前必须将蜡脱去，使切片中的材料由有机相进入到水相。
一般采用二甲苯脱蜡。
脱蜡后切片须经高至低浓度的酒精处理后，水洗，使切片进入水分，才能使苏木精染液染细胞核。
②染色
切片放入苏木精中染色约3min。
③水洗
用自来水流水冲洗三次，将过多的苏木精洗掉。
④分化
将细胞质着的色褪去，使细胞核着色更加鲜明，也称分色。
将切片放入1%盐酸乙醇液（盐酸1份+70%乙醇100份）中褪色，见切片变红，颜色较浅即可，约三十秒钟。
⑤漂洗
切片再放入自来水中去除分化液脱下的染料，终止分化作用。
⑥脱水1
再用酒精从低浓度到高浓度脱去水分。
⑦复染
用0.5%伊红染色。
伊红主要染细胞质。
⑧脱水2
继续高浓度乙醇脱水。
⑨透明
二甲苯透明。
具体流程如下：
二甲苯1（5min）--→二甲苯2（5min）--→100％酒精（5min）--→95％酒精（4min）--→90％酒精（4min）--→80％酒精（4min）--→70％酒精（4min）--→蒸馏水（4min）--→苏木精（3min）--→水洗--→1％盐酸酒精分化（30s）--→自来水中返蓝（30min）--→70％酒精（4min）--→80％酒精（4min）--→90％酒精（4min）--→伊红（30~40s）--→95％酒精（4min）--→100％酒精1（5min）--→100％酒精2（5min）--→二甲苯1（5min）--→二甲苯2（5min）
10，封固
切片经染色后，取出切片，擦去多余二甲苯，滴一滴中性树胶，再将洁净盖玻片倾斜放下，以免出现气泡，晾干即可。
三、显微镜观察
10×，40×镜观察：
本切片为羊的肺部组织。
观察到的结构有：肺静脉，肺泡囊，肺动脉，细支气管，支气管，软骨等。
主要病变有:肺泡融合，破裂，出血；肺泡隔增宽；出现肉芽组织；有炎性细胞浸润；似有化脓灶。