细胞病理学技术制作规范及质量控制标准

细胞病理学技术制作规范及质量控制标准

一、细胞学标本的接收

1.细胞学申请单和标本的验收

（1）细胞病理学室应有专人负责细胞病理学标本及申请单的验收，并严格执行标本验收签名责任制。

验收工作包括以下内容。

①认真核对每例送检标本和申请单，确保标本和申请单一致。发现疑问应及时与送检科室联系并在申请单上注明情况。

②认真检查送检标本及内容物是否完整，盛具是否洁净干燥，识别的标签是否牢附于容器上。

③申请单是否注明送检标本的目的和要求（包括特殊检查要求，如免疫细胞化学染色、分子病理学检测等）。

④仔细查阅申请单上各项是否按要求填写清楚：包括患者的基本情况、送检单位、送检日期、送检标本类别、患者的临床资料、化验室及影像学检查结果、既往细胞病理学检查情况和临床诊断等。

⑤申请单上要详细记录患者或家属的明确联系方式，以便必要时与患者或家属联络。

（2）用于细胞病理学检查的标本必须新鲜，力求有足够数量，临床取材后应尽快送达细胞病理学室。

（3）申请单中由临床医师填写的各项内容不得擅自进行改动。

（4）下列情况者，标本不予接收。

①申请单与相关标本未同时送达细胞病理学室。

②申请单中填写的内容与送检标本不符。

③标本上无患者姓名、科室等标志。

④申请单上填写的内容自己潦草难以辨认。

⑤申请单中漏填重要项目。

⑥没有按照规范的方法进行采集、运送或保存的标本。

⑦出现泄漏、损坏、碎裂，液体标本干涸等不符合送检要求的标本。

（5）细胞病理学室对不能接收的标本及申请单一律当即退还送检人，不予存放。

2.申请单和标本的编号、登记

（1）验收标本的人员应在已验收的申请单上注明收到标本的日期，及时准确地进行细胞病理学编号，并逐项录入登记薄或计算机。

（2）细胞病理学标本、申请单、涂片、标本登记薄或计算机内的编号必须完全一致。

二、细胞病理学基本技术操作

1.取材和制片

标本一定要新鲜，接收标本后应立即涂片、固定和染色。

不能立即涂片时，应将标本置于低温或加入适量95%乙醇，短时间保存。

目前采用的制片方法如下。

（1）传统涂片法将标本直接涂片于载玻片上，涂片面积易占玻片的1/2或2/3。

（2）液基细胞学制片技术目前主要有离心沉降式和过滤膜式液基细胞学制片技术，该项技术是将标本放入特定液体，在相关仪器上制片，可去除黏液、血液、炎细胞，使背景清晰，易于观察。

2.涂片的染色

在宫颈细胞病理学检查中首选染色方法是巴氏染色，非宫颈细胞病理学及穿刺细胞学涂片多选用苏木素-伊红染色（HE染色）或巴氏染色，酌情加做一些特殊染色（如抗酸染色等）和免疫细胞化学染色。

3.细胞学印片

细胞学印片除了可与术中冰冻切片或快速石蜡切片等并用、互补外，也可应用于无冰冻切片机的基层医院。

印片的主要步骤如下。

（1）以锐刀切开新鲜组织（碎小的组织根据情况可不比切开）。

（2）用清洁的载玻片轻压于组织剖面处，垂直适当用力蘸取细胞，避免平行拖拉。

（3）印片应及时固定。

4.细胞学新技术

细胞病理学的制片技术除了传统的手工涂片、液基细胞学制片、细胞学印片等技术外。

还可应用以下技术。

（1）杂交捕获技术。

（2）核酸原位杂交技术。

（3）多聚酶链反应（PCR）技术。

（4）即时荧光定量PCR技术。

（5）流式细胞术。

（6）细胞学自动阅片系统。

（7）全自动细胞DNA定量分析系统等。

三、细针吸取细胞学技术操作

1.适应症

细针吸取细胞学的适应症广泛，任何部位的肿物均可采用，尤其适用于因各种原因难以手术切除或活检的病例，包括体表可触及的病灶及在影像学等的引导下，对颅脑、胸腔、腹腔、盆腔等各深部脏器病变的穿刺。

2.禁忌症

（1）有严重出血倾向或严重出血性疾病的患者（如血友病、血小板极度减少症）及长期应用抗凝血药物的患者。

（2）可疑为动静脉畸形、颈动脉体瘤、嗜铬细胞瘤等患

者。

（3）肝包囊虫病的患者，穿刺可以引起严重的过敏反应，甚至休克致死，应属于禁忌症。

（4）重度肺功能不全，例如肺气肿、肺动脉高压性心脏病、严重低氧血症患者，以及剧烈咳嗽难以控制的患者。

（5）不能配合、过分敏感及顾虑深重的患者慎用。

3.穿刺前的准备

（1）签署知情同意书阅读和在知情同意书上签字是患者在穿刺检查前必须履行的重要手续。在履行此项手续时，细胞病理医师或临床医师可以通过知情同意书向患者解释细针穿刺的操作过程、所达到的目的及诊断的准确度，可以对患者提出的问题进行恰当的解答；患者也可以了解穿刺操作过程中可能发生的意外，配合医师防止穿刺操作过程中的意外发生。

（2）了解并记录患者的家庭住址、电话号码等联系方式，便于随访。

（3）稳定患者情绪，解除恐惧心理和顾虑，了解有无呼吸、循环、神经、造血系统等严重疾病。

（4）了解病变大小、深度、表面是否光滑或粗糙。扪及肿块质地情况，如柔软性、硬度、有无弹性等质感、肿块能否被压缩、有无波动感及体位移动试验状况、是否多个肿块融合、肿块活动度与固定状况、与周围组织位置关系等。

4.细针穿刺操作程序

（1）选择合适的体位及穿刺点坐位适用于头颅部、肩部、躯干等体表肿块。卧位适用于躯干体表或深部器官、四肢病变与重症患者等。胸膝卧位适用于会阴部、直肠内与前列腺病变。穿刺点尽量避开疼痛敏感区域、大血管、神经及易损伤的组织器官。同时有原发灶与转移灶的病变应首选转移灶实施穿刺。

（2）肿物的固定用左手拇指与食指（中指）捏起肿物，右手持针刺入肿块。或用左手拇指或食指压住肿物，使其固定于皮下或被推向一边而不滑动，针头在指尖上方刺入肿块。也可用拇指与食指捏住，或用食指与中指夹压固定肿块，手指尽可能靠近肿物，使皮肤绷紧，肿物突起，利于针刺。

（3）消毒局部皮肤常规消毒可分别选用3%碘酒与75%乙醇溶液。

（4）进针与标本采集固定肿块，绷紧皮肤，手持穿刺器迅速刺入病变内，拉针栓产生并保持负压，朝不同方向提插针数次同时注意针头柄部吸取物的出现。然后拔出穿刺针，压迫局部针刺点数分钟，直至无渗血，然后覆盖创可贴或其他消毒敷料。

（5）标本的移出与涂片拔针后，迅速将吸取物喷射至平放的载玻片上。涂片时标本应涂抹于载玻片的一端，一般不超过2/3，避免在标本原位置上来回涂抹，以免致细胞变形或