【精品】分子生物学习题汇编
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CAP的存在（功能）：能显著提高酶与启动子结合常数。主要 表现以下二方面：CAP通过改变启动子的构象以及与酶的相互作用 帮助酶分子正确定向，以便与-10区结合，起到取代-35区功能的作 用。CAP还能抑制RNA聚合酶与DNA中其它位点的结合，从而提 高与其特定启动子结合的概率。
下图为人类基因的各部分结构，请结合所学知识 写出图中A—O字母所代表的具体内容。
大肠杆菌在含有葡萄糖的培养基中长势良好，当 将其接种到只含有乳糖的培养基上时，起初大肠杆菌 的长势很弱，但接种几代之后该菌株又恢复其良好长 势。请运用相关知识解释这一现象。
这是基因的可诱导调节。所谓的可诱导调节是指一些基因在特殊的代 谢化合物的作用下，由原来的关闭状态转变为工作状态，即在某些物质的诱 导下使基因活化。例如，在只有乳糖培养基中，E. coli开始生长不好，直到 合成了利用乳糖的一系列酶，具备了利用乳糖作为碳源的能力，E. coli才能 在这一培养基中生存下来，E. coli获得这一能力的原因就是因为在诱导物乳 糖的诱导下，开动了乳糖操纵子基因，表达了它编码的酶：β-半乳糖苷酶， 这一类基因称为可诱导基因，这类酶称为诱导酶
①转化后涂皿时应加什么样的抗生素？②培养后长出的菌落具有
什么样的抗性基因型？③如何利用抗性变化筛选到含有插入片段
的重组体？
• 答：1）5’-GACCTGTGGAAGC 上游引物； 5’-CAATCCCGTATG 下游引物。
• 2）①加氨苄青霉素；②Tetr Ampr；Tets Ampr；③选择只能在氨苄青霉素平板上生 长，而不能在四环素平板上生长的菌落。
1）哪一条链为反义链？哪一条链为有意链？ 2）mRNA的顺序是什么？并请标出第二个密码子的 位置。 3）此mRNA能形成二级结构吗？若能，请写出此结 构。 4）翻译从哪里开始？朝哪个方向进行？ 5）此DNA最可能是从原核细胞还是真核细胞中分离 的？为什么？
假定有一种大肠杆菌，其甲硫氨酸操纵元只由衰减子机制 调控而没有阻遏蛋白。在这种操纵元模型中，甲硫氨酸衰减子 同大肠杆菌的色氨酸衰减子机制十分类似，在mRNA链上衰减 子的部分序列如下：
5’-GACCTGTGGAAGC
5’-GTATGCCCTAAC
5’-CGAAGGTGTCCAG
5’-CTTACCCGATAG
5’-GCTTCCACAGGTC
5’-CAATCCCGTATG
2）某一质粒载体具有Tetr和Ampr的表型，在Tet抗性基因内有一
BamHⅠ的切点。现用BamHⅠ切割该载体进行基因克隆，问：
分子生物学习题
答：（1）5' -CCTATGGGTAGGCTAC- 3' （2）5' -GUAGCCUACCCAUAGG- 3'
（3）如果从RNA的5'段开始翻译，合成出来的蛋白质应为Val-AlaTyr-Pro(VAYP)。只有在Ala和Tyr 见的肽键形成后，tRNAAla才会离 开核糖体。这样，在tRNAAla离开后，与核糖体结合的下一个tRNA 为tRNAPro。当Ala的氨基形成肽键，Val和tRNAVal间的酯键就会断 裂，tRNAVal离开核糖体，同时tRNAAla从A位移到P位。 （4）因为有3种不同的可读框，所以这个段RNA可编码3个不同的肽。 在第二个读码框，第一个密码子是终止密码子UAG，但是，随后的密 码子可被翻译。 （5）由于没有AUG甚至GUG，这个序列不可能来自一个基因编码区 的起始部分。如果用第一个或第二个可读框，它可能来自基因的末端； 如果用第三个可读框，它可能来自基因的中部。
1）你打算扩增下图所示的两段序列之间的DNA，请在下列序列
中选择合适的两条作为上、下游引物。
5’-GACCTGTGGAAGC------CATACGGGATTG- 3’
3’-CTGGACACCTTCG--- ---GTATGCCCTAAC- 5’
可供选择的序列：
5’-CTGGACACCTTCG
5’-CATACGGGATTG
答：A：转录区域 B：下游区域 C：上游区域
D：模板链（或反义链、非编码链） E：有意链（或编码链）
F：外显子 G：内含子 H：ATG I：起始点
J：启动子（TAwenku.baidu.comA盒） K：上游增强子 L：TAA
M：多聚A位点
N：终止点 O：下游增强子
现分离了一段DNA，含有编码多肽的基因的前几个密码 子，该片段的序列组成如下：5′-CGCAGGATCAGTCGATG TCCTGTG-3′3′-GCGTCCTAGTCAGCTACAGGACAC-5′回答 以下问题并作说明。
激活蛋白（CAP）对转录的正调控作用？
答：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein）， cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP （cAMPactivated protein ）。当大肠杆菌生长在缺乏葡萄糖的培 养基中时，CAP合成量增加，CAP具有激活乳糖（Lac）等启动子 的功能。一些依赖于CRP的启动子缺乏一般启动子所具有的典型的 -35区序列特征（TTGACA）。因此RNA聚合酶难以与其结合。
5’-AAAAUGAUGAUGAUGAUGAUGAUGAUGGACUAA- 3’
翻译的起点位于这一序列的上游，且给出的序列是一正 确的阅读框。当mRNA发生下列情况的突变时，大肠杆菌 的甲硫氨酸操纵元的表达情况如何（组成型、野生型、或 Met¯）？并请说明原因。
（1）斜体的A缺失；（2）斜体A及带下划线的A都缺失； （3）序列中的前三个A都缺失。
答：（1）组成型表达UGA：因为斜体A缺失后会引起移框突变， 由原来的AUG AUG，等等变为UGA UGA等等。UGA是终止密码 子，所以衰减子不能继续翻译，结构基因可继续转录。 （2）Met¯：当斜体A及带下划线的A都缺失后，同样会引起移框突 变，由原来的AUG AUG，等等变为GAU GAU，等等，GAU是天 冬氨酸密码子，这样，即使在培养基中甲硫氨酸的含量很低，衰减 子序列的翻译也会继续下去，操纵元的结构基因的转录就会终止。 （3）野生型：当前三个A都缺失时，阅读框并不会发生改变。 注：AAA：Lys（赖氨酸）；GAU：Arp（天冬氨酸）
下图为人类基因的各部分结构，请结合所学知识 写出图中A—O字母所代表的具体内容。
大肠杆菌在含有葡萄糖的培养基中长势良好，当 将其接种到只含有乳糖的培养基上时，起初大肠杆菌 的长势很弱，但接种几代之后该菌株又恢复其良好长 势。请运用相关知识解释这一现象。
这是基因的可诱导调节。所谓的可诱导调节是指一些基因在特殊的代 谢化合物的作用下，由原来的关闭状态转变为工作状态，即在某些物质的诱 导下使基因活化。例如，在只有乳糖培养基中，E. coli开始生长不好，直到 合成了利用乳糖的一系列酶，具备了利用乳糖作为碳源的能力，E. coli才能 在这一培养基中生存下来，E. coli获得这一能力的原因就是因为在诱导物乳 糖的诱导下，开动了乳糖操纵子基因，表达了它编码的酶：β-半乳糖苷酶， 这一类基因称为可诱导基因，这类酶称为诱导酶
①转化后涂皿时应加什么样的抗生素？②培养后长出的菌落具有
什么样的抗性基因型？③如何利用抗性变化筛选到含有插入片段
的重组体？
• 答：1）5’-GACCTGTGGAAGC 上游引物； 5’-CAATCCCGTATG 下游引物。
• 2）①加氨苄青霉素；②Tetr Ampr；Tets Ampr；③选择只能在氨苄青霉素平板上生 长，而不能在四环素平板上生长的菌落。
1）哪一条链为反义链？哪一条链为有意链？ 2）mRNA的顺序是什么？并请标出第二个密码子的 位置。 3）此mRNA能形成二级结构吗？若能，请写出此结 构。 4）翻译从哪里开始？朝哪个方向进行？ 5）此DNA最可能是从原核细胞还是真核细胞中分离 的？为什么？
假定有一种大肠杆菌，其甲硫氨酸操纵元只由衰减子机制 调控而没有阻遏蛋白。在这种操纵元模型中，甲硫氨酸衰减子 同大肠杆菌的色氨酸衰减子机制十分类似，在mRNA链上衰减 子的部分序列如下：
5’-GACCTGTGGAAGC
5’-GTATGCCCTAAC
5’-CGAAGGTGTCCAG
5’-CTTACCCGATAG
5’-GCTTCCACAGGTC
5’-CAATCCCGTATG
2）某一质粒载体具有Tetr和Ampr的表型，在Tet抗性基因内有一
BamHⅠ的切点。现用BamHⅠ切割该载体进行基因克隆，问：
分子生物学习题
答：（1）5' -CCTATGGGTAGGCTAC- 3' （2）5' -GUAGCCUACCCAUAGG- 3'
（3）如果从RNA的5'段开始翻译，合成出来的蛋白质应为Val-AlaTyr-Pro(VAYP)。只有在Ala和Tyr 见的肽键形成后，tRNAAla才会离 开核糖体。这样，在tRNAAla离开后，与核糖体结合的下一个tRNA 为tRNAPro。当Ala的氨基形成肽键，Val和tRNAVal间的酯键就会断 裂，tRNAVal离开核糖体，同时tRNAAla从A位移到P位。 （4）因为有3种不同的可读框，所以这个段RNA可编码3个不同的肽。 在第二个读码框，第一个密码子是终止密码子UAG，但是，随后的密 码子可被翻译。 （5）由于没有AUG甚至GUG，这个序列不可能来自一个基因编码区 的起始部分。如果用第一个或第二个可读框，它可能来自基因的末端； 如果用第三个可读框，它可能来自基因的中部。
1）你打算扩增下图所示的两段序列之间的DNA，请在下列序列
中选择合适的两条作为上、下游引物。
5’-GACCTGTGGAAGC------CATACGGGATTG- 3’
3’-CTGGACACCTTCG--- ---GTATGCCCTAAC- 5’
可供选择的序列：
5’-CTGGACACCTTCG
5’-CATACGGGATTG
答：A：转录区域 B：下游区域 C：上游区域
D：模板链（或反义链、非编码链） E：有意链（或编码链）
F：外显子 G：内含子 H：ATG I：起始点
J：启动子（TAwenku.baidu.comA盒） K：上游增强子 L：TAA
M：多聚A位点
N：终止点 O：下游增强子
现分离了一段DNA，含有编码多肽的基因的前几个密码 子，该片段的序列组成如下：5′-CGCAGGATCAGTCGATG TCCTGTG-3′3′-GCGTCCTAGTCAGCTACAGGACAC-5′回答 以下问题并作说明。
激活蛋白（CAP）对转录的正调控作用？
答：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein）， cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP （cAMPactivated protein ）。当大肠杆菌生长在缺乏葡萄糖的培 养基中时，CAP合成量增加，CAP具有激活乳糖（Lac）等启动子 的功能。一些依赖于CRP的启动子缺乏一般启动子所具有的典型的 -35区序列特征（TTGACA）。因此RNA聚合酶难以与其结合。
5’-AAAAUGAUGAUGAUGAUGAUGAUGAUGGACUAA- 3’
翻译的起点位于这一序列的上游，且给出的序列是一正 确的阅读框。当mRNA发生下列情况的突变时，大肠杆菌 的甲硫氨酸操纵元的表达情况如何（组成型、野生型、或 Met¯）？并请说明原因。
（1）斜体的A缺失；（2）斜体A及带下划线的A都缺失； （3）序列中的前三个A都缺失。
答：（1）组成型表达UGA：因为斜体A缺失后会引起移框突变， 由原来的AUG AUG，等等变为UGA UGA等等。UGA是终止密码 子，所以衰减子不能继续翻译，结构基因可继续转录。 （2）Met¯：当斜体A及带下划线的A都缺失后，同样会引起移框突 变，由原来的AUG AUG，等等变为GAU GAU，等等，GAU是天 冬氨酸密码子，这样，即使在培养基中甲硫氨酸的含量很低，衰减 子序列的翻译也会继续下去，操纵元的结构基因的转录就会终止。 （3）野生型：当前三个A都缺失时，阅读框并不会发生改变。 注：AAA：Lys（赖氨酸）；GAU：Arp（天冬氨酸）