BG11液体培养配方

BG11液体培养基就是：

Stock1 定容100mL

柠檬酸0.3g

柠檬酸铁胺0.3g

EDTANa2 0.05g

Stock2 定容1000mL

NaNO3 30g

K2HPO4 0.78g

MgSO4·7H2O 1.5g

Stock3 定容100mL

CaCl2·2H2O 1.9g

Stock4 定容100mL

Na2CO3 2g

Stock5 定容1000mL

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H3BO3 2.86g

MnCl2·4H2O 1.81g

ZnSO4·7H2O 0.222g

Na2MnO4·2H2O 0.391g

CuSO4·5H2O 0.079g

Co(NO3)2·6H2O 0.049g

Stock1 取用2mL

Stock2 取用20mL

Stock3 取用2mL

Stock4 取用1mL

Stock5 取用1mL

总定容1000mL

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D1 (Diatom medium)

Component Amount Stock Solution

(1) NaNO3 1 mL/L 12 g/100ml dH2O

(2) K2HPO4 1 mL/L 4 g/100 mL dH2O

(3) MgSO4·7H2O 1 mL/L 7g/100 mL dH2O

(4 ) CaCl2·2H2O 1 mL/L 2 g/100 mL dH2O

(5 ) KH2PO4 1 mL/L 8 g/100 mL dH2O

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(6 ) Na2SiO3.9H2O 1 mL/L 10g/100ml dH2O

(7) MnSO4 0.1mL/L 0.2g/100ml dH2O

(8) 柠檬酸铁 1 mL/L 0.5g/100ml dH2O

(9) A5 （Trace mental solution）1ml/L

H3BO3 2.86g/L dH2O

MnCl2·4H2O 1.86g/L dH2O

ZnSO4·7H2O 0.22g/L dH2O

Na2MoO4.2H2O 0.39g/L dH2O

CuSO4. 5 H2O 0.08g/L dH2O

Co(NO3)2.6 H2O 0.05g/L dH2O

(10) 土壤提取液20 mL/L

土壤提取液配制方法:

取花园土未施过肥200g置于烧杯或三角瓶中，加入蒸馏水1000毫升，瓶口用透气塞封口，在水浴中沸水加热3小时，冷却，沉淀24小时，此过程连续进行

3次，然后过滤，取上清液，于高压灭菌锅中灭菌后于4℃冰箱中保存备用。

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f/2 medium

Component Amount

(1) NaNO3 75 mg/L

(2) NaH2PO4 · 2H2O 0.6 mg/L

(3) Vitamin B12 0.5 μg/L

(4) Biotin 0.5 μg/L

(5) Thiamine HCl 100μg/L

(6) Na2SiO3 · 9H2O 10 mg/L

(7) f/2 metals 1 mL/L

Na2EDTA · 2H2O 4.4g

FeCl3 · 6H2O 3.16 g

CoSO4 · 7H2O 0.012g

ZnSO4 · 7H2O 0.021g

MnCl2 · 4H2O 0.18 g

CuSO4 · 5H2O 0.007g

Na2MoO4 · 2H2O 0.007g

Distilled water 1000 mL

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(8) Seawater 1000 mL

BG-11是培养蓝藻使用最广泛的培养基，微量元素溶液A5 是BG-11培养基微量元素的重要组成部分。

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一、目的要求

了解培养基的配制原理。

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了解培养基常规配制程序。

了解培养基配制过程各环节的要求和注意事项。

二、基本原理

正确掌握培养基的配制方法是从事微生物学实验工作的重要基础，由于微生物种类及代谢类型的多样性，因而用于培养微生物培养基的种类也很多，它们的配方及配制方法虽各有差异。但一般培养基的配制程序却大致

相同，例如器皿的准备，培养基的配制与分装，棉塞的制作，培养基的灭菌，斜面与平板的制作以及培养基的无

菌检查等基本环节大致相向。

三、实验材科

(一)药品

待配各种培养的组成成分，琼脂，1mol/L NaOH溶液，1mol/L (升，统一用大写)HCl溶液。

(二)仪器

天平或台秤，高压蒸汽灭菌锅。

(三)玻璃器皿

移液管、试管、烧杯、量筒、锥形瓶、培养皿、玻璃漏斗等。

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(四)其他物品

药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报纸等。

四、实验内容

(一)玻璃器皿的洗涤和包装

1．玻璃器皿的洗涤

玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。将锥形瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中，用毛刷刷洗，然后用自来水及蒸馏水冲净。移液管先用含有洗涤剂的水浸泡。再用自来水及蒸馏水冲洗，洗刷干净的玻璃器皿

置于烘箱中烘干后备用。

2．灭菌前玻璃器皿的包装

(1)培养皿的包装培养皿由一盖—底组成一套。可用报纸将几套培养皿包成一包，或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内，加盖灭菌。包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用。

(2)移液管的包装在移液管的上端塞入—小段棉花(勿用脱脂棉)。它的作用是避免外界及口中杂菌吹入管内，并防止菌液等吸入口中。塞入此小段棉花应距管口约0.5cm左有。棉花自身长度约1-1．5cm。塞棉花时，可用一

外圈拉直的曲别针，将少许棉花塞入管口内。棉花要塞得松紧适宜，吹时以能通气而又不使棉花滑下为准。先将报纸裁成宽约5cm左右的长纸条，然后将已塞好棉花的移液管尖端放在长条报纸的一端，约成45度角，折

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