植物总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒

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植物总酚(TP)检测试剂盒(比色法)说明书

植物总酚(TP)检测试剂盒(比色法)说明书
本产品仅供体外研究使用，不得用于临床诊断
产品简介：
植物组织或果实中存在花青素、叶绿素、类胡萝卜素、类黄酮、酚类等物质，这些物质与果实等样品衰老过程密切相关，对其加工性能、存储、营养价值等都有重要影响。

植物酚类物质具有清除自由基，抗氧化抗衰老的作用，具有较高的营养价值和医疗保健作用而广泛应用于化妆品、食品、医药等领域。

植物总酚检测试剂盒(比色法)检测原理是总酚(Total Phenol)溶于有机溶剂，以有机溶剂粗提总酚，根据提取液的吸收光谱特性，可利用分光光度计在特定波长(280nm)处测定其吸光度，通过与标准曲线比较，计算出总酚含量，该试剂盒主要用于植物组织或果实中总酚的提取以及定量检测总酚含量。

该试盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

产品组成：
产品名称规格保存条件说明书有效期
植物总酚(TP)检测试剂盒(比色法)50T RT1份1年
试剂(A):总酚标准(1mg/ml)5ml4℃避光1份1年
试剂(B):TP Assay Buffer500ml RT1份1年。

总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法)

总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法)产品编号产品名称包装S0116 总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法) 100次产品简介：总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法)，即Total Antioxidant Capacity Assay Kit with FRAP method，简称T-AOC Assay Kit，是一种采用Ferric Reducing Ability of Plasma (FRAP)方法，可以对血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力进行检测的试剂盒。

活性氧(Reactive oxygen species, ROS)主要包括羟基自由基、超氧自由基和过氧化氢。

在细胞或组织的正常生理代谢过程中会产生活性氧，同时一些环境因子例如紫外照射、γ射线照射、吸烟、环境污染等也可以诱导活性氧的产生。

活性氧产生后，可以导致细胞内脂、蛋白和DNA等的氧化损伤，诱发氧化应激(Oxidative stress)，继而导致各种肿瘤、动脉粥样硬化、风湿性关节炎、糖尿病、肝损伤、以及中枢神经系统疾病等。

机体中存在多种抗氧化物，包括抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶等，可以清除体内产生的各种活性氧，以阻止活性氧诱导的氧化应激(oxidative stress)的产生。

一个体系内的各种抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶的总的水平即体现了该体系内的总抗氧化能力。

因此测定血浆、血清、尿液、唾液等各种体液，细胞或组织等裂解液中的总抗氧化能力具有非常重要的生物学意义。

植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物溶液的总抗氧化能力的检测可以用于检测各种溶液的抗氧化能力的强弱，可以用于筛选强抗氧化能力的药物。

FRAP法测定总抗氧化能力的原理是酸性条件下抗氧化物可以还原Ferric-tripyridyltriazine (Fe3+-TPTZ)产生蓝色的Fe2+-TPTZ，随后在593nm测定蓝色的Fe2+-TPTZ即可获得样品中的总抗氧化能力。

食物总抗氧化能力(TAC)比色法(DPPH)定量检测试剂盒

3
9．可以使用比色皿检测 10．如果样品抗氧化剂浓度过高或过低，建议稀释或增加样品容量或浓度 11．如果测试样品很多，建议使用排枪移液 12．本公司提供系列抗氧化分析试剂产品
质量标准
1．本产品经鉴定性能稳定 2．本产品经鉴定检测敏感
4
2、液态食品处理 1．移取 5 毫升待测液态食品到 15 毫升锥形离心管 2．放进台式离心机离心 10 分钟，速度为 1500g 3．移取上清液到新的 15 毫升锥形离心管 4．（选择步骤）可以加入适量的清理液（Reagent A） 5．（选择步骤）过滤纸过滤（如果离心处理，样品仍然不清澈） 6．置于冰槽里备用或放进-20 冰箱里保存
二、标准液准备
1．准备好 5 个 1.5 毫升离心管，标记为 1 至 5 号管 2．移取 xx 微升标准液（Reagent D）到 1 号管 3．小心移取 xx 微升缓冲液（Reagent B）和 xx 微升标准液（Reagent D）到 2 号管，混匀 4．小心移取 xx 微升缓冲液（Reagent B）和 xx 微升标准液（Reagent D）到 3 号管，混匀 5．小心移取 xx 微升缓冲液（Reagent B）和 xx 微升标准液（Reagent D）到 4 号管，混匀 6．小心移取 xx 微升缓冲液（Reagent B）到 5 号管 7．将 1 至 5 号管放进冰槽里备用，避免光照；标准管浓度见下表
实验开始前，将－20 冰箱里的试剂置于室温下融化，实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂置于室温下融化，移取 xx 毫升染色液 B（Reagent C2）到 xx 瓶染色液 A（Reagent C1）里，混匀，置于暗室里，标记为染色工作液，避免光照。然后进行下列操作。
1．准备 1 个 96 孔板，做好标记：空白对照孔、标准对照孔、样品孔 2．分别移取 xx 微升缓冲液（Reagent B）到 96 孔板里的每个孔里 3．分别加入 xx 微升染色工作液 4．加入 xx 微升缓冲液（Reagent B）到空白对照孔 5．加入 xx 微升上述配制的标准液（Reagent D）到相应标准对照孔里 6．加入 20 微升裂解样品（100 微克食品总量）到样品孔里 7．轻轻摇动 96 孔板，使其混匀 8．室温下孵育 15 分钟 9．即刻放进酶标仪里测读：515nm 波长 10．分析结果：

抗氧化剂总状态测定试剂盒(ABTS法)产品技术要求九强

抗氧化剂总状态测定试剂盒（ABTS法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆中总抗氧化能力。

1.1包装规格包装规格见表1。

表1 包装规格1.2 组成成分组成成分见表2。

表2 组成成分2. 性能指标2.1 外观试剂1为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂2无色或浅黄色粉末状物质，复溶后为无色或浅黄色液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂3为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；校准品为无色或浅黄色粉末状物质，复溶后为无色或浅黄色液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；质控品为无色或浅黄色粉末状物质，复溶后为无色或浅黄色液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂盒标签标识清晰，外包装完整无损。

2.2 净含量液体试剂的净含量应不少于标称量。

2.3 试剂空白吸光度A600nm下测定空白吸光度应≤ 1.0000。

2.4 准确度与已上市产品进行比对试验：在[0.10，2.50] mmol/L区间内，相关系数r≥0.975，在[0.10，1.00] mmol/L区间内测定的偏差应不超过±0.10mmol/L，在（1.00，2.50] mmol/L区间内测定的偏差应不超过±10%。

2.5 分析灵敏度样本浓度为2.3mmol/L时，其吸光度变化在0.1000～0.6000之间。

2.6 线性区间在[0.10，2.50] mmol/L区间内，线性相关系数r≥0.990，在[0.10，1.00]mmol/L 区间内测定的线性偏差应不超过±0.1mmol/L，在（1.00，2.50] mmol/L区间内测定的线性偏差应不超过±10%。

2.7 测量精密度2.7.1 重复性对高、低不同浓度的血清样本或质控品重复测定10次，其测定值的变异系数（CV％）应不大于10％。

2.7.2 批间差随机抽取三批试剂盒的批间相对极差（R）应不大于10%。

2.8 瓶间差试剂2、校准品、质控品的瓶间差应≤10%。

总抗氧化能力(T-AOC)比色法测试盒(ABTS酶催化法)

用途本试剂盒适用于检测血清（浆）、尿液、动植物组织、细胞等样本中总抗氧化能力。

检测范围及灵敏度检测范围：0.047-1.50 mmol/L灵敏度：0.047 mmol/L背景介绍机体存在两类抗氧化系统，一类是酶抗氧化系统，包括超氧化物歧化酶(SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px）；另一类是非酶抗氧化系统，包括尿酸、维生素C、维生素E、谷胱甘肽、胆红素、α-硫辛酸、类胡萝卜素[1-3]。

抗氧化能力被认为是血液和体液中所有抗氧化剂的累积效应[3]。

检测原理ABTS在适当的氧化剂作用下氧化成绿色的 ABTS●+，在抗氧化物存在时ABTS●+的产生会被抑制，在414 nm测定ABTS●+的吸光度即可测定并计算出样本中的总抗氧化能力。

Trolox是一种维生素E的类似物，具有和维生素E相近的抗氧化能力，用作其他抗氧化物总抗氧化能力的参考。

例如，Trolox的总抗氧化能力为1，相同浓度情况下，其他物质的总抗氧化能力用其抗氧化能力和Trolox相应的倍数来表示。

本试剂盒测组织和细胞样本时，需测定总蛋白浓度，推荐使用BCA法（货号：E-BC-K318-M）。

提供试剂和物品注：试剂严格按上表中的保存条件保存，不同批次试剂盒中的试剂不能混用。

Focus on your research Service for life science 耗材：枪头（1000 μL ，200 μL ，10 μL ）。

仪器：酶标仪（405-425 nm ）、微量移液器（1000 μL ，200 μL ，100 μL ，10 μL ）。

所需自备物品配制试剂之前，请穿戴好防护装备。

试剂盒中部分试剂含有危险性物质。

禁止食入，吸入，直接接触眼睛、皮肤和衣物。

使用完后的试剂瓶经彻底清洗后再处理。

安全提示试剂：双蒸水、生理盐水（0.9% NaCl ）、PBS （0.01 M，pH 7.4）、80%乙醇。

实验关键点ABTS工作液配制完成后，室温避光保存，在30 min内使用完毕。

总抗氧化能力(T-AOC)定量检测试剂盒

大鼠总抗氧化能力(T-AOC)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书【大鼠总抗氧化能力(T-AOC)Elisa试剂盒试剂盒名称】大鼠总抗氧化能力(T-AOC)定量检测试剂盒(ELISA)【大鼠总抗氧化能力(T-AOC)Elisa试剂盒试剂盒用途】定量检测大鼠血清、血浆及相关液体样本中总抗氧化能力(T-AOC)的含量。

【大鼠总抗氧化能力(T-AOC)Elisa试剂盒检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。

将标准品、待测样本加入到预先包被大鼠总抗氧化能力(T-AOC)单克隆抗体透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。

依次加入底物A、B，底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中大鼠总抗氧化能力(T-AOC)浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中大鼠总抗氧化能力(T-AOC)含量。

【大鼠总抗氧化能力(T-AOC)Elisa试剂盒试剂盒组成】备注：标准品(1号→6号)浓度依次为：1600、800、400、200、100、50 U/L.【大鼠总抗氧化能力(T-AOC)Elisa试剂盒需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【大鼠总抗氧化能力(T-AOC)Elisa试剂盒操作步骤】1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。

2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。

3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍)；空白对照孔不加。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

植物总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒

植物总抗氧化能力（TAC）比色法（ABTS）定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途植物总抗氧化能力（TAC）比色法（ABTS）定量检测试剂盒是一种旨在通过过硫酸钾的参与，使染料ABTS 氧化，在抗氧化剂的存在下，通过分光光度仪，观察其峰值下降的变化，来定量检测对应于标准水溶性生育酚Trolox的总抗氧化能力，即抑制氧化等值浓度的权威而经典的技术方法。

该技术经过精心研制、成功实验证明的。

适用于各种体液包括血浆、血清、尿液、脑脊液、唾液、精液等各种体液的总抗氧化能力检测。

产品严格无菌，即到即用，操作简易，性能稳定。

技术背景超氧自由基阴离子（superoxide radical；O2-）、过氧化氢（hydrogen peroxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxyl radical；OH-）、过氧化基（peroxyl radical；ROO-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite anion；ONOO-）次氯酸（hypochlorous acid；HOCl）、半醌自由基（semiquinone radical）、单线态氧气（singlet oxygen）等细胞内活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡，甚而导致诸如冠心病、风湿性关节炎、肿瘤、退行性病变等各种病理状况。

在生物系统内，通过抗氧化酶例如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶等，大分子，例如白蛋白、铜蓝蛋白（ceruloplasmin；CER）、铁蛋白（ferritin）和抗氧化因子，例如生育醇、类胡萝卜素、抗坏血酸、还原性谷胱甘肽和尿酸胆红素（bilirubin）等，产生抗氧化能力，即捕获自由基的能力，达到消除或降低ROS的损害。

S0121 总抗氧化能力检测试剂盒_ABTS快速法_

¾ 机体中存在多种抗氧化物，包括抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶等，可以清除体内产生的各种活性氧，以阻止活性氧诱导的氧化应激(oxidative stress)的产生。一个体系内的各种抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶的总的水平即体现了该体系内的总抗氧化能力。因此测定血浆、血清、尿液、唾液等各种体液，细胞或组织等裂解液中的总抗氧化能力具有非常重要的生物学意义。
细胞或组织裂解液等，例如某裂解液样品的蛋白浓度为0.15mg/ml，测定获得的抑制率和0.3mM Trolox相同，则该裂
解液样品的总抗氧化能力为0.3mM/0.15mg/ml，即为2mmol/g。对于植物或中草药抽提物，例如某样品的浓度为
0.1mg/ml，测定获得的抑制率和0.5mM Trolox相同，则该样品的总抗氧化能力为0.5mM/0.1mg/ml，即为5mmol/g。对
1/1000 过氧化氢溶液
8微升
40微升
80微升
160微升
ABTS工作微升
3400微升
注意：ABTS工作液配制后，室温避光保存，宜在30分钟内使用完毕。
2. 待测样品的准备：
(1) 血清、血浆、唾液或尿液样品的准备：
血清、血浆、唾液或尿液样品每个样品需要10微升，都可以直接用于测定。血清、血浆、唾液或尿液样品都可以使
用新鲜样品进行测定，也可以-80℃冻存后再进行测定。-80℃冻存的样品至少在一个月内所测定获得的数据没有显
著变化。注意：血浆制备时可以使用肝素或柠檬酸钠抗凝，不宜使用EDTA抗凝。根据文献报道，人血清或血浆中
的总抗氧化能力为0.5-2mM，人唾液中的总抗氧化能力为0.3-1mM，人尿液中的总抗氧化能力为0.2-3mM。
Antioxidant ABTS·+ ——————> ABTS

ABTS法体外测定果蔬类总抗氧化能力的研究进展

以也把该方法称为 T EAC( T rolox equivalent ant iox-i dant capacity ) 法[ 2] , 也有研究者提出用抗坏血酸作为对照标准, 将该方法称为 V CEA C 或者 A EA C 法[ 3] 。
相对于抗氧化能力测定的体内方法( 主要是动物实验和流行病学调查) , ABT S 法这种体外测定方法
物质抗氧化能力测定的根本标准和目的就是最高限度地、客观地反映被测物质的抗氧化作用, 测定方法在抗氧化物质的抗氧化能力研究中有 3 个要素: ( 1) 是以什么作为基质体系来测定, ( 2) 是以什么方式来加速, ( 3) 是用什么来指示反应终点[ 33] , 这 3 要素中的任何一要素改变都会使测定结果发生变化, 要针对不同用途和目的的抗氧化剂, 选择相适应的测定方法, 在对抗氧化剂的抗氧化活性下结论时, 要限定其应用范围。ABT S 法作为近几年兴起的一种相对简便的用于体外测定物质总抗氧化能力的方法就上述 3 点而言已有了一定的基础, 关键还在于建立一个相对完善的标准, 尽可能地与一些相对成熟的新技术连用, 以求该方法更为广阔、灵活的应用。
稳定的 ABT S#+ , 进一步简便了操作步骤。Campos 等人[ 29] 提出事先加热 ABT S2- 和不耐热的含氮物质 A BAP 产生 A BT S#- 再加入测试物质, 可避免中间产
78 2005 Vol1 31 No1 8 ( Total 212)
物的干扰。 Cano 等人[ 30] 建立使用 HRP / ABT S/ H2O 2 体系, 为避免外来物质的干扰, 选择在 400~ 750 nm 间的一个波长来检测。最近 O zcan[ 25] 提出用 H2O 2/ A BT S/ 醋酸缓冲液体系, 其测定结果与 F RAP

总抗氧化能力(T-AOC)比色法测试盒(ABTS酶催化法)

用途本试剂盒适用于检测血清（浆）、尿液、动植物组织、细胞等样本中总抗氧化能力。

抗氧化能力被认为是血液和体液中所有抗氧化剂的累积效应[3]。

Trolox是一种维生素E的类似物，具有和维生素E相近的抗氧化能力，用作其他抗氧化物总抗氧化能力的参考。

例如，Trolox的总抗氧化能力为1，相同浓度情况下，其他物质的总抗氧化能力用其抗氧化能力和Trolox相应的倍数来表示。

本试剂盒测组织和细胞样本时，需测定总蛋白浓度，推荐使用BCA法（货号：E-BC-K318-M）。

提供试剂和物品注：试剂严格按上表中的保存条件保存，不同批次试剂盒中的试剂不能混用。

Focus on your research Service for life science 耗材：枪头（1000 μL ，200 μL ，10 μL ）。

仪器：酶标仪（405-425 nm ）、微量移液器（1000 μL ，200 μL ，100 μL ，10 μL ）。

所需自备物品配制试剂之前，请穿戴好防护装备。

试剂盒中部分试剂含有危险性物质。

禁止食入，吸入，直接接触眼睛、皮肤和衣物。

使用完后的试剂瓶经彻底清洗后再处理。

安全提示试剂：双蒸水、生理盐水（0.9% NaCl ）、PBS （0.01 M，pH 7.4）、80%乙醇。

实验关键点ABTS工作液配制完成后，室温避光保存，在30 min内使用完毕。

S0119 总抗氧化能力检测试剂盒_ABTS法_[1]

使用说明：
1. ABTS工作液的配制：
(1) 参考下表，根据待测定样品的数量(含标准曲线)配制适量的ABTS工作液：
待测定样品数
约20-30个
约50-75个
约100-150个
ABTS溶液40微升源自100微升200微升
氧化剂溶液
40微升
100微升
200微升
ABTS工作母液
80微升
200微升
400微升
约200-300个 400微升 400微升 800微升
说明书
包装 1ml 1ml 0.5ml 1份
保存条件：
-20℃保存，一年有效。其中S0119-1 ABTS溶液和S0119-3 Trolox溶液 (10mM)需避光保存。
注意事项：
¾ 样品中不能添加DTT、巯基乙醇等影响氧化还原反应的物质，也不宜添加Tween、Triton和NP-40等去垢剂。 ¾ 测定时需可以测定A734的酶标仪一台(测725-745nm也可以)或可以测定微量样品的分光光度计一台。 ¾ ABTS对人体有刺激性，请注意适当防护。 ¾ 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
¾ 活性氧(Reactive oxygen species, ROS)主要包括羟基自由基、超氧自由基和过氧化氢。在细胞或组织的正常生理代谢过程中会产生活性氧，同时一些环境因子例如紫外照射、γ射线照射、吸烟、环境污染等也可以诱导活性氧的产生。活性氧产生后，可以导致细胞内脂、蛋白和DNA等的氧化损伤，诱发氧化应激(Oxidative stress)，继而导致各种肿瘤、动脉粥样硬化、风湿性关节炎、糖尿病、肝损伤、以及中枢神经系统疾病等。
¾ 植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物溶液的总抗氧化能力的检测可以用于检测各种溶液的抗氧化能力的强弱，可以用于筛选强抗氧化能力的药物。

总抗氧化能力总抗氧化能力T-AOC测定试剂盒

总抗氧化能力总抗氧化能力（（T －AOC ）测定试剂盒说明书修改日期说明书修改日期：：2015.11.06 Cat number ：KGT009 Store at 4 for for one year ℃ For Research Use Only一、测定意义机体防御体系的抗氧化能力的强弱与健康程度存在着密切联系，该防御体系有酶促与非酶促两个体系，许多酶是以微量元素为活性中心，例如：超氧化物岐化酶（SOD ）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX ）、过氧化氢酶（CAT ）、谷胱甘肽S-转移酶（GST ）等，非酶促反应体系中主要为维生素、氨基酸和金属蛋白质。

例如：VE 、胡萝卜素、VC 、半胱氨酸、蛋氨酸、色氨酸、组氨酸、葡萄糖、铜兰蛋白、转铁蛋白、乳铁蛋白等。

这个体系的防护氧化作用主要通过三条途径：（1）消除自由基和活性氧以免引发脂质过氧化：（2）分解过氧化物，阻断过氧化链；（3）除去起催化作用的金属离子。

防御体系各成分之间相互起到了协同作用，以及代偿作用与依赖作用。

二、测定原理机体中有许多抗氧化物质，能使+3Fe 还原成+2Fe，后者可与菲啉类物质形成稳固的络合物，通过比色可测出其抗氧化能力的高低。

三、所需仪器设备721或722分光光度计、水浴箱。

四、试剂盒组份组份 KGT009（25 assays ）保存条件 Buffer A 60.0 mL 4℃ 试剂 B 粉剂1支 RT 20×Buffer C 3.0 mL 4℃避光 Buffer C 稀释液30.0 mL 4℃ Buffer D 12.0 mL RT Buffer E 12.0 mLRT注意事项1． Buffer B ：试剂B 用时每支加双蒸水至120mL ，RT 保存。

2．1×Buffer C ：用前用Buffer C 稀释液按1︰19稀释至1×Buffer C （现配现用）。

五、操作（一、）、血清血清血清（（浆）中总抗氧化能力的测定中总抗氧化能力的测定：（：（样本前处理见附录样本前处理见附录样本前处理见附录（（一）中的第一点中的第一点）） 1、操作表操作表：：对照管测定管 Buffer A （mL ） 1.0 1.0 待测样本（mL ） a Buffer B （mL ） 2.0 2.0 1×Buffer C （mL ）0.50.5漩涡混匀器充分混匀，37℃水浴30分钟Buffer D （mL ） 0.10.1 待测样本（mL ）*a漩涡混匀器充分混匀，放置10分钟，蒸馏水调零，1cm 光径，520nm 处测各管吸光度。

ABTS汇总

ABTS法抗氧化能力检测试剂配制方案汇总基于不同原理的各种体外抗氧化活性检测方法已广泛用于抗氧化剂的检测，这些方法虽然能够在不同的条件下反映抗氧化剂的多种功能特性，但也各有其局限性。

下面是ABTS法抗氧化法的一些基本原理：ABTS的英文全名为2'-Azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate)，中文名为2 ,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐，CAS号为：30931-67-0，分子式：C18H24N6O6S4，分子量548.68。

ABTS与过硫酸钾反应生成稳定的蓝绿色阳离子自由基ABTS·+，向其中加入被测物质，如果该物质中存在抗氧化成分，则该物质会与ABTS·+发生反应而使反应体系褪色，然后在ABTS·+这种自由基的最大吸光波长下(一般选择734nm或405nm)检测吸光度的变化来反映物质的抗氧化能力。

根据实验的需求收集查阅的部分文献基本上得出三个比较常用的ABTS的配置方法以及所需要的浓度和测试仪器。

如下：1.ABTS自由基清除实验参照文献[1]方法。

用pH 7．4的PBS配制5 mmol·L_1的ABTS储液，与MnO2反应后用0．2 tan的PVDF膜过滤，再用PBS(pH 7．4)稀释到734nm处吸光度为0．70士0．02，--20℃保存备用。

在反应体系中，于10 m-L比色管中加入50vL不同浓度的样品或参比溶液(DMSO)，再加入3mL的ABTS反应溶液，振荡摇匀，于室温下避光静置6min，测定溶液在734nm处的吸光值，并扫描UV-Vis光谱。

ABTS自由基清除率：(J％)=(1一瓜他)×100％，其中As为样品管的吸光值；Ao为对照管的吸光值。

2.[2]ABTS·+ 法测定葡萄酒抗氧化活性的研究ABTS工作液的配制。

将5mL7mmol/L ABTS和88μL140mmol/L过硫酸钾溶液混合,在室温、避光条件下静置过夜,形成ABTS·+储备液,该储备液在室温、避光的条件下表现稳定[3],使用前用无水乙醇稀释成工作液,要求其在734nm波长下的吸光度为0.70 ±0.02。

总抗氧化能力(总抗氧化能力(T-AOC)测定试剂盒

总抗氧化能力总抗氧化能力（（T－AOC ）测定试剂盒说明书修改日期说明书修改日期：：2015.11.06 Cat number ：KGT009 Store at 4 for for one year ℃ For Research Use Only一、测定意义机体防御体系的抗氧化能力的强弱与健康程度存在着密切联系，该防御体系有酶促与非酶促两个体系，许多酶是以微量元素为活性中心，例如：超氧化物岐化酶（SOD ）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX ）、过氧化氢酶（CAT ）、谷胱甘肽S-转移酶（GST ）等，非酶促反应体系中主要为维生素、氨基酸和金属蛋白质。

例如：VE 、胡萝卜素、VC 、半胱氨酸、蛋氨酸、色氨酸、组氨酸、葡萄糖、铜兰蛋白、转铁蛋白、乳铁蛋白等。

防御体系各成分之间相互起到了协同作用，以及代偿作用与依赖作用。

二、测定原理机体中有许多抗氧化物质，能使+3Fe 还原成+2Fe ，后者可与菲啉类物质形成稳固的络合物，通过比色可测出其抗氧化能力的高低。

三、所需仪器设备721或722分光光度计、水浴箱。

四、试剂盒组份组份 KGT009（25 assays）保存条件 Buffer A 60.0 mL 4℃ 试剂 B 粉剂1支 RT 20×Buffer C 3.0 mL 4℃避光 Buffer C 稀释液30.0 mL 4℃ Buffer D 12.0 mL RT Buffer E 12.0 mLRT注意事项1． Buffer B ：试剂B 用时每支加双蒸水至120mL ，RT 保存。

2．1×Buffer C ：用前用Buffer C稀释液按1︰19稀释至1×Buffer C （现配现用）。

总抗氧化能力 (ABTS 法)试剂盒说明书

总抗氧化能力(ABTS 法)试剂盒说明书微量法100T/96S注　意：正式测定之前选择2-3 个预期差异大的样本做预测定。

研究意义：测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。

在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。

测定原理：ABTS 法是使用最广泛的间接检测方法，可用于亲水性和亲脂性物质抗氧化能力测定。

ABTS经氧化后生成稳定的蓝绿色阳离子自由基ABTS+，能溶于水相或酸性乙醇介质中，在734nm 处有最大吸收。

被测物质加入ABTS+溶液后，所含抗氧化成分能与ABTS+发生反应而使反应体系褪色。

在734nm 检测吸光度的变化，并以Trolox 作为对照体系量化抗氧化物质的抗氧化能力。

自备实验用品：恒温水浴锅、低温离心机、酶标仪、96 孔板和蒸馏水。

试剂组成和配制：提取液：液体120mL×1 瓶，4℃保存。

试剂一：液体24mL×1 瓶，4℃避光保存。

试剂二：粉剂×2 瓶，4℃避光保存。

样品的制备：(1) 血清、血浆、唾液或尿液等液体样品血浆（制备时可以使用肝素或柠檬酸钠抗凝，不宜使用EDTA 抗凝）4℃，5000rpm 离心10min，取上清待测。

血清、唾液或尿液样品直接用于测定，也可以-80℃冻存（不宜超过30 d）后再测定。

(2) 组织样品按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL 提取液）进行冰浴匀浆，然后10000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

(3) 细胞样品按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1 的比例（建议500 万细胞加入1mL 提取液），冰浴超声波破碎（功率200W，超声3s，间隔10s，重复30 次）；10000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

索莱宝 ABTS 自由基清除能力检测试剂盒说明书（可见分光光度法）

ABTS自由基清除能力检测试剂盒说明书可见分光光度法货号：BC4770规格：50T/24S产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体60 mL×1瓶4℃保存试剂一液体80 mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1瓶4℃保存试剂三液体20 μL×1支4℃保存试剂四液体1.5 mL×1支-20℃保存试剂五粉剂×1支4℃保存溶液的配制：1、试剂二：临用前加入3 mL蒸馏水，充分溶解；用不完的试剂可分装-20℃保存，-20℃可保存两周；2、试剂三工作液的配制：液体置于棕色试剂瓶中EP管内，临用前根据样本量按试剂三（μL）：蒸馏水（mL）=1μL:12 mL的比例配成试剂三工作液，现用现配，用不完的试剂放于4℃保存；3、试剂四工作液的配制：可先将试剂四-20℃分装保存。

临用前根据样本量按试剂四：试剂一（V:V）=1:9的比例配成试剂四工作液，现配现用。

4、试剂五：粉剂置于试剂瓶内EP管中，含有5 mg维生素C。

临用前加入2.8 mL提取液，充分振荡溶解；配成10 mmol/L维生素C溶液，用于阳性对照。

4℃可保存一周。

5、ABTS工作液的配制：临用前根据样本量按试剂一：试剂二：试剂三工作液（V:V:V）=76:5:4的比例配成ABTS工作液，现用现配，室温避光保存，务必在30分钟内使用。

产品说明：ABTS法可用于亲水性和亲脂性物质抗氧化能力测定，是使用最广泛的间接检测方法。

ABTS经氧化后生成稳定的蓝绿色阳离子ABTS自由基，在405 nm或734 nm处有最大吸收峰。

被测物质加入ABTS自由基溶液后，所含抗氧化成分能与ABTS自由基发生反应而使反应体系褪色，405 nm的吸光度下降，在一定范围内其吸光度的变化与自由基被清除的程度成正比。

本试剂盒中，通过测定吸光度下降的程度来反映样本清除ABTS自由基的能力。

总抗氧化能力(TAC)终点比色法定量检测试剂盒使用说明

总抗氧化能力（TAC）终点比色法定量检测试剂盒使用说明货号：BC130保存：保存在－20℃冰箱里，染色液A（Reagent B1）和氧化液（Reagent C），严格避免光照和室温空气中久置；有效保证3月。

产品内容：缓冲液（Reagent A）10ml染色液A（Reagent B1）1管染色液B（Reagent B2）1ml氧化液（Reagent C）500μL标准液（Reagent D）50μL产品说明：总抗氧化能力（TAC）终点比色法定量检测试剂是一种旨在通过过硫酸钾的参与，使染料ABTS 氧化，在抗氧化剂的存在下，通过分光光度仪，观察其峰值下降的变化，来定量检测对应于标准水溶性生育酚Trolox的总抗氧化能力，即抑制氧化等值浓度的权威而经典的技术方法。

通过过硫酸钾氧化2,2’-连氮-双（3-乙基苯并噻唑-6-磺酸）产生的ABTS自由基，衡量体系中抗氧化剂捕获自由基、消耗抗氧化剂的能力，在分光光度仪（730nm波长）的帮助下，观察其峰值下降的变化，并与标准化抗氧化剂水溶性生育酚Trolox对照。

适用于各种细胞、组织、血液、体液等样品的总抗氧化能力检测。

产品严格无菌，即到即用，操作简易，性能稳定。

用户自备：1. 1.5毫升离心管：用于标准样品配制的容器2.96孔板：用于比色的容器3.分光光度仪或酶标仪：用于比色分析实验步骤：一、标准液准备1．准备好5个1.5毫升离心管，标记为1至5号管2．分别加入20μL缓冲液（Reagent A）到2至5号管3．移取40μL标准液（Reagent D）到1号管，混匀4．小心移取20μL1号管的标准液（Reagent D）到2号管，混匀5．小心移取20μL2号管稀释的标准液（Reagent D）到3号管，混匀6．小心移取20μL3号管稀释的标准液（Reagent D）到4号管，混匀7．将1至5号管放进冰槽里备用，避免光照；标准管浓度见下表管号缓冲液（Reagent A）标准液（Reagent D）测定体系标准Trolox浓度1040μL25μmol/L220μL20μL1号管12.5μmol/L320μL20μL2号管 6.25μmol/L420μL20μL3号管 3.125μmol/L520μL00二、样品测读实验开始前，将－20冰箱里的试剂置于室温下融化，移取1ml染色液B（Reagent B2）到1管染色液A（Reagent B1）里，混匀，置于暗室里室温下孵育过夜（16小时）后，标记为染色工作液，避免光照。

植物总抗氧化能力检测试剂盒

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注意：样品管应保持于干冰上，同时加入珠子和丙酮。 4.样本离心（在 4℃下，4500g 离心 30min），将 2ml 上清液转移至新的收集管中。注意：抽提后，应立即进行检测，抗氧化能力会迅速发生变化。 5.在离心期间，每个样本准备 4 个离心管，用于稀释样本。分别将每个样本进行 10 倍、20 倍、40 倍及 80 倍的稀释。在每个离心管中分别加入 90μl、190μl、390μl、790μl 的分析缓冲液。待将上清液转移至新的收集管后，迅速在每个离心管中加入 10μl 待测样本。 6.在黑色的 96 孔板的每孔中加入 150μl 荧光素工作液。在每孔中分别加入 25μl 分析缓冲液（空白），trolox 标准品（6.25~50μM）或样品（20~100 稀释系列）。建议板布局见表 1。注意：每个样本的系列稀释是非常重要的，以确保读数在标准品范围之内。对于大豆，20mg 叶片组织，最佳稀释范围为 1:20~1:100（表 1）。 7.将 96 孔板在 37℃下预热 10min。 8.在每孔中加入 25μl AAPH，然后立即进行荧光分析。二 ORAC 计算 9.每孔的 AUC 计算（图 1a）。注意：1 小时后检测，荧光不能衰减到零，不用于计算。 10.从每个样品和标准品的 AUC 中减去空白的 AUC，得到净 AUC（图 1a）。注意：空白和 Trolox 标准品的变异系数都应很低（＜10%）。 11.通过 Trolox 标准品与平均 AUC 值，绘制标准曲线（图 1b）。用 Trolox 当量和净 AUC 值之间的回归方程计算 ORAC 值。
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样本 9 (40) 样本 10 (40) 样本 11 (40) 样本 12 (40) 样本 13 (40) 样本 14 (40) 样本 15 (40) 样本 16 (40)

abts抗氧化实验步骤

abts抗氧化实验步骤ABTS抗氧化实验步骤引言：抗氧化实验是研究食物、药物或其他化合物抵抗氧化应激的能力的重要方法之一。

ABTS（2,2'-联氨基二(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)）是一种常用的抗氧化实验试剂，通过测定其与自由基的反应来评估物质的抗氧化能力。

本文将介绍ABTS抗氧化实验的步骤。

一、实验前准备1. 准备所需试剂和仪器：ABTS、过氧化氢、乙酸乙酯、磷酸盐缓冲液、离心管、离心机、分光光度计等。

2. 预热分光光度计：将分光光度计设定在所需的波长（通常为734 nm），并预热至稳定状态。

二、制备ABTS溶液1. 称取适量ABTS粉末，并加入适量磷酸盐缓冲液，溶解后稀释至所需浓度（通常为7 mM）。

2. 加入相同体积的过氧化氢溶液（通常为 2.45 mM），混匀后静置室温下30分钟，使ABTS与过氧化氢反应生成自由基。

三、样品预处理1. 根据需要，将待测样品（食物、药物或其他化合物）制备成适当的浓度溶液。

2. 对样品进行必要的预处理，如过滤、离心等，以去除杂质。

四、测定抗氧化能力1. 取适量ABTS溶液，并加入等体积的样品溶液，混匀后静置室温下反应一段时间（通常为6分钟）。

2. 将反应液倒入离心管中，离心5分钟使样品沉淀。

3. 取上清液，用离心机离心5分钟，以去除残留的样品颗粒。

4. 用预热好的分光光度计测定上清液的吸光度（OD值）。

5. 测定空白对照组，即只加入样品溶液的ABTS溶液的吸光度。

6. 根据所测得的吸光度计算样品的抗氧化能力。

一般来说，吸光度越低，抗氧化能力越强。

五、数据分析1. 计算样品的抗氧化能力指数（TEAC值），通常使用标准曲线法或对照差法。

2. 根据所使用的方法，将样品的TEAC值转化为抗氧化能力指数单位，如mmol TE/100 g。

六、结果与讨论1. 根据实验结果，评估样品的抗氧化能力。

2. 结果的解释应结合样品的特性和实验条件，进行合理的讨论。

结论：ABTS抗氧化实验是一种常用的评估物质抗氧化能力的方法，通过测定样品与ABTS自由基的反应来评估其抗氧化活性。