液相色谱柱使用及保养(戴安公司)
色谱柱的使用和维护
色谱柱的使用和维护色谱柱是一种用于分离混合物的重要工具，广泛应用于化学分析、环境检测、药物研发等领域。
为了保证色谱柱的正常使用和延长其寿命，以下将介绍色谱柱的使用和维护方法。
一、色谱柱的使用1.色谱柱的激活新购买的色谱柱通常需要进行激活处理，以去除柱内杂质和保证柱的稳定性。
常见的激活方法包括使用最终使用的溶剂/流动相进行洗脱或者使用强极性溶液进行反向激活。
激活后，需用洗脱溶剂或流动相进行平衡。
2.样品的前处理样品的前处理对色谱柱的使用和维护至关重要。
首先，要确保样品的纯度和浓度，以避免对色谱柱产生污染。
其次，对于有机溶剂溶解的样品，最好使用过滤器进行过滤，以防止固体颗粒和杂质进入色谱柱。
3.流动相的选择正确选择和配置流动相对于色谱柱的使用非常重要。
根据需要分离的组分特性，选择合适的流动相性质和组成，并根据需要进行酸碱调节、添加缓冲剂等。
此外，注意保持流动相的流速稳定，并定期更换或再生。
4.检测器的设置根据需要检测的组分，选择合适的检测器并进行适当的设置。
常见的检测器包括紫外-可见吸收光谱仪（UV-Vis）、荧光检测器、质谱仪等。
在使用检测器前，要确保其正常工作并进行校准。
5.流量控制使用色谱仪时，应保持流量的稳定性。
定期检查和校准流量控制器，并调整至适当的设置，以确保色谱柱正常运行。
6.色谱条件的优化根据分析需要，在保证分离效果的前提下，进行色谱条件的优化。
包括优化流速、温度、柱渗透性、梯度洗脱程序等，以提高分离效果和保护色谱柱。
二、色谱柱的维护1.洗脱和平衡每次使用完色谱柱后，应进行洗脱以去除残留的样品和杂质，并用适当的溶剂进行平衡。
洗脱和平衡步骤的操作要轻柔，避免使用高压流动相进行冲洗。
对于一些特殊样品，如蛋白质和多肽，可以使用具有较强亲和性的溶剂进行洗脱和平衡。
2.色谱柱的储存条件当色谱柱暂时不使用或需要长期储存时，应注意以下几点：首先，将色谱柱从设备上拆卸下来，用纯净溶剂充分洗脱并平衡，保证柱内干净；其次，封闭柱两端，避免进入灰尘和空气，可以使用柱塞或盖子进行封闭；最后，将柱放置在干燥、阴凉的地方存放，避免受到阳光直射和高温。
液相色谱柱的维护与保养
液相色谱柱的维护与保养
液相色谱柱的维护与保养非常重要，可以延长柱的使用寿命并保证分离效果的稳定性。
以下是液相色谱柱的维护与保养的一些建议：
1. 保持柱的洁净：在使用结束后，及时用纯水和有机溶剂洗净色谱柱。
可以采用逆向流动的方法，即用纯水从柱底往上流动直到洗净。
避免使用酸碱溶液以及有机溶剂中的含有杂质的溶液来清洗，避免杂质残留。
2. 避免干燥：柱在储存或者不使用时要避免干燥。
可以用保湿的方式，例如在储存时使用密封塑料袋或保湿剂。
避免长时间暴露在空气中，避免干燥引起的柱损坏。
3. 正确使用柱：避免使用超过柱最大压力或流速的方法进行色谱分离，这会导致柱壁破裂或分离效果恶化。
遵守柱的使用说明和规格。
4. 定期检查：定期检查柱的使用情况，例如检查是否有柱壁表面损坏或吸附物的形成。
如果发现有问题，应及时更换色谱柱。
5. 柱的再生：某些类型的液相色谱柱可以通过柱的再生来延长使用寿命。
具体的再生方法可以参考柱的使用说明书或与供应商咨询。
6. 注意避免柱受到冲击：在搬运和使用过程中要轻拿轻放，避免柱受到冲击造成损坏。
总之，正确的维护与保养可以延长液相色谱柱的使用寿命并保证其分离效果的稳定性。
根据柱的材质和类型，还可以采取适当的措施进行再生以延长柱的使用寿命。
戴安液相色谱操作手册
1.用途用于非挥发性物质的分析。
2.部件组成P680A LPG四元低压梯度泵ASI-100自动进样器TCC-100柱温箱PDA-100二极管阵列检测器RF 2000荧光检测器UCI-50数模转换器3.操作步骤3.1准备工作3.1.1打开稳压电源开关。
3.1.2更换泵头里清洗瓶中去离子水3.1.3更换托盘里洗针瓶中的洗液，洗液一般为：50%的甲醇。
3.1.4流动相的混匀与过滤：若流动相为非单一溶剂，配好后要用璃棒或其它工具搅匀。
如果使用的流动相非色谱纯的、水相或配好的混合溶液，需要用0.45μm的一次性过滤膜过滤。
3.1.5流动相的超声脱气：过滤后的流动相需要超声脱气，一般超声约10～20分钟。
3.1.6排泵内的气泡：打开仪器后面板的电源。
拧松泵右侧的快速清洗阀（反时针两圈左右）。
按下泵前面板右下方的“Purge”键，仪器将以6.0 ml的速度自动快速清洗泵内残留的气泡，5分钟将自动停止。
若想想手动停止，则再按再按“Purge”键，将停止清洗。
将每个需要使用的通道分别排完气泡后，拧紧快速清洗阀(顺时针拧紧，注意不要拧得过紧。
)。
3.2联机3.2.1打开进样器、柱温箱、检测器电源开关。
3.2.2打开变色龙软件。
进入合适的仪器面板界面，联机。
在“PROGRAM”中设置泵、进样器、柱温、检测器参数。
在“METHOD”中设置数据分析参数，在“SEQUENCE”编辑进样次序。
3.2.3点工具栏中蓝色小圆点，开始设置采集基线。
3.3分析样品3.3.1系统的准备：3.3.1.1分析样品前先用甲醇或乙腈冲洗流路约20分钟，平衡活化色谱柱，并赶走管路中的杂质和水分。
3.3.1.2若流动相为有机相与水相的混合物，则第1步完成后，按照分析样品的需要调节比例阀的比例后冲洗流路约20分钟后，待基线走平后即可进样。
3.3.1.3若流相相中含有缓冲盐溶液、有机/无机酸或其它电解质，则第1步完成后用95%的去离子水冲洗流路约20分钟后，再按照分析样品的需要调节比例阀的比例后冲洗流路约20分钟后，待基线走平后即可进样。
液相色谱柱安全操作及保养规程
液相色谱柱安全操作及保养规程液相色谱柱是一种常见的分析仪器，在化学、生化、食品、药品、环境等领域得到广泛应用。
因为该分析仪器设备复杂、性能优越、分析精度高，所以在使用时需要注意安全操作和保养规程。
本文将从以下几个方面详细介绍：•操作前准备•操作过程注意事项•操作后的清洗和保养操作前准备在开始操作前，第一步必须检查液相色谱柱的状态，避免因使用中出现损坏等问题影响分析结果。
首先要检查柱罐和柱床是否正常。
若柱床内出现裂缝、变形或渗漏现象，柱就已损坏，不能再继续使用。
其次需要确认流量计、泵、检测器等其他连接设备是否正常，以免造成柱损坏或分析结果失真。
接下来，需要准备相关耗材和溶液，耗材包括固相保护罐、固相萃取柱、色谱柱、纯水、甲醇、乙醇、氨水等。
使用前，要确保各种溶剂都为新开封的纯溶液。
在操作前准备中，还应注意操作手套的使用。
液相色谱柱是高精度分析设备，因此在安全操作中必须佩戴手套，避免因手上油脂、灰尘或细菌等的污染而引起柱床阻塞或色谱杂质的产生。
操作手套应该选用热塑性弹性体材料制作的，手套的外表面需要干爽、无粉、不胶着。
操作手套更换频率应视实际操作情况而定，但至少要每小时更换一次，以保证色谱柱系统的稳定性。
操作过程注意事项在进行液相色谱柱分析前，必须注意以下事项：1. 注入样品时必须注意准确注入样品时必须严格按照固定的容积，并尽可能使样品溶剂与色谱柱中的溶剂相同。
如果溶剂不同，会使分析结果产生偏移和误差。
2. 溶剂配制要准确在制备溶剂时，必须准确控制各浓度和体积，防止出现误差。
为了避免混杂、污染等情况发生，液相色谱柱系统的各项操作必须迅速和准确，尽量避免无意义而又不必要的搅动和震动。
3. 流量、温度要控制恰当液相色谱柱系统，包括液相色谱泵、流量计、检测器、自动采样器等，为了得到可靠数据，必须准确和恰当地控制它们。
流量、温度、进样量等参数的不正确设置，可能会导致实验失误或者测量数据不准确。
流量控制器的精度一般设为0.1%，进样器量程要与所确定体积相吻合，保持恰当的温度，则可以避免柱床挤压和杂质的产生。
液相色谱柱的使用及保养
C18, C18, C18, C18,
phenyl, CN, NH2, Silica C8, phenyl, CN, Silica C8, Silica C4 C18, C8
色谱柱的清洗
对所做的样品要有充分的了解
用对该样品洗脱能力最强的流动相清洗
硅胶柱的一般方法
先用甲醇洗去极性杂质
回收率低，不出峰
“不可逆”吸附 固定相过强或流动相过弱 非特异性吸附
色谱柱以外的因素（一）
“柱效”问题，不一定是色谱柱问题！
仪器问题：连接不好造成死体积
进样器
检测器
管路，连接口 保护柱 在线过滤器堵塞
流动相问题：色谱柱未平衡好 进样量太大
色谱柱与仪器的联接
影响实验结果好坏的最重要因素
是决定性的步骤
样品预处理常用的方法
高速离心 过滤、超滤 选择性沉淀 衍生反应 液-固萃取 其他
/ 液-液萃取
Sep-Pak样品处理小柱
样品预处理的过程
去除微粒
过滤
过滤膜/过滤装置
有机(0.5m)/无机(0.45m)
膜片可更换
流速∶1.0 ml/min 纸速∶20 cm/min (用记录仪时，接检测器10mV档) 检测器灵敏度∶0.5-1.0AUFS (用记录仪时) 检测器时间常数∶小于0.2
谱带展宽（ml） =1000×W（cm）/20 （记录仪） =1000×W（min） （工作站）
液相色谱实用技术（二）
样品衍生∶氨基酸分析
PT法 IA CG O方 NS C
R
-
N C H O CO ຫໍສະໝຸດ 2氨 基 酸异酯 硫 氢 酸 苯
S R N H O H C C H NC O
液相色谱柱的使用和维护保养
液相色谱柱的使用和维护保养液相色谱柱是一种广泛使用的分离技术，可用于分离和测定复杂混合物中的组分。
由于液相色谱柱具有精确分离、操作简便、分离效率高等特点，因此，越来越多的实验室都开始使用该技术。
在使用液相色谱柱时，正确的维护保养非常关键。
本文将介绍液相色谱柱的使用方法和维护保养技巧，以便确保您的分离实验能够得到最佳的结果。
一、液相色谱柱的使用1. 准备工作使用液相色谱柱之前，必须先进行预备工作。
这包括：清洗和准备液相色谱柱以免携带有污染物。
准备需要分离和测定的样品。
准备适当的流动相。
流动相必须符合样品的性质。
液相色谱柱的流动相应该是无色的，纯净的水或相应的缓冲液，并具有必要的缓冲能力。
根据柱的尺寸来选择适当的样品注射量。
2. 柱的装配通常情况下，液相色谱的柱是由管状的柱壳、填充柱节、柱端固定件和柱段之间的密封件组成。
在对柱进行装配的时候，对组件应该加强检查以保证每一个元件的质量。
柱被放置在可控压力的色谱装置中，直到达到设定的温度，流动相通过柱床高度。
在样品通过柱床的过程中，要确保流动相的速度恰好足够将所有的组分都分开并在规定的时间内溶出。
3. 分析过程准备工作完成后，可以开始进行样品的分离实验。
在整个过程中，以下措施应予以注意：在样品从样品室进入色谱柱之前，流动相必须在柱中流动。
否则，在注入样品时，将有空气囤积在柱床中，会在透射检测器处产生噪音。
更换液相色谱柱的流动相时需要小心，因为对于一些化学品来说，即使是微量的杂质也会对结果产生影响。
如果发现柱床粘住或困住，不应使用力量来拉动柱子，而应该使用相反方向的流动相，以使样品回到某一个位置，并反向流动一会，这样可以避免样品损坏柱子床。
二、液相色谱柱的维护保养液相色谱分析的成功与否，除了预备工作和分析过程外，还与样品的制备、取样位置以及样品进入液相色谱柱中的流动相的条件等因素有关。
因此，经常做好液相色谱柱的保养工作，可以有效防止柱子损坏，延长其寿命并保证实验结果的准确。
液相保护柱安全操作及保养规程
液相保护柱安全操作及保养规程液相保护柱是一种重要的分析仪器，承担着保护液相色谱柱和延长使用寿命的重要任务。
液相保护柱使用时需要严格遵守安全操作规程和进行定期保养，以确保其正常运行和延长使用寿命。
本文将介绍液相保护柱的安全操作规程和保养规程，旨在提高使用者的安全意识和保护仪器的维护质量。
安全操作规程1. 仪器安装液相保护柱应安装在一个干燥、通风、远离水源和化学品的地方。
在安装液相保护柱时，应确保仪器与色谱柱和检测器之间的连接正确且紧固，以避免连接处泄漏。
2. 操作前的准备在使用液相保护柱前，首先要检查保护柱的状态是否正常。
应检查保护柱是否清洁，有无损坏或磨损，保护柱内部是否存在杂质，并进行必要的清洁。
此外，还应检查保护柱的连接是否紧固，以确保其正常运行。
3. 操作过程在使用液相保护柱时，应注意以下几点：•使用液相保护柱前，应先进行洗脱，以保证样品不会粘附在柱子表面；•液相保护柱要与样品充分接触，可采用多种方法如插管或长针头等；•使用液相保护柱时不要超过其最大流量，以免影响保护柱的使用寿命；•液相保护柱使用一段时间后，应及时更换，以确保保护液相色谱柱的效果。
4. 操作后的处理在使用液相保护柱后，应立即清洗保护柱，以避免保护柱内部的杂质对色谱柱造成污染。
清洗液相保护柱的方法包括：用甲醇、乙醇或水洗，然后用纯水清洗干净并放置在自然通风处待干燥。
保养规程1. 周期性检查液相保护柱在使用一段时间后，应进行常规的检查。
检查内容包括：•检查保护柱连接处是否有泄漏；•检查保护柱是否有磨损或损坏；•检查内部填充物是否存在杂质或缺失；•检查保护柱表面是否清洁。
2. 常规维护液相保护柱在日常使用中，应做好以下几点常规维护：•定期清洗液相保护柱，以保证柱内无杂质或残留物；•定期更换液相保护柱，以确保保护柱的有效期；•定期检查保护柱连接处是否紧固；•避免液相保护柱受到高温、高压、振动或较强的机械冲击，以避免损坏保护柱。
3. 不良情况处理如果发现液相保护柱发生不良情况，如柱子表面出现损伤或污垢、柱子内部出现杂质、连接处泄漏等情况，应立即停止使用，并采取以下处理措施：•清洗和更换液相保护柱，如柱子表面出现损伤或污垢；•检查、清除杂质或更换液相保护柱，如柱子内部存在杂质；•确认连接处是否正确，如连接处泄漏，应及时紧固。
液相色谱柱的使用和维护
前言液相色谱的分离原理是,在色谱柱流动相中样品的不同组分与固定相发生吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和等作用,由于作用力的大小、强弱不同,各种组分在固定相中滞留的时间也不同,因而先后从以固定相中流出而得到分离。
因此液相色谱分离的关键之一是色谱柱中的固定相。
柱效的好坏直接影响目标化合物的分析和检测。
但在液相色谱运行过程中,色谱柱极易发生问题,因此掌握正确使用和维护色谱柱的知识非常必要。
色谱柱使用过程中容易发生柱堵塞引起系统压力过高;柱效低引起峰拖尾、变宽;柱污染、损坏导致鬼峰等问题。
引起这些问题的内在原因有:(1) 硅羟基的死吸附。
色谱柱的基材硅胶粒子表面存在硅胶羟基。
任何物质在色谱柱中都存在双分配效应,即在流动相与固定相之间进行分配,又在流动相与硅羟基之间进行分配。
被分析物质被硅羟基吸附称为非特异性吸附,或称死吸附。
当硅羟基对被分析物质的吸附趋近于饱和状态时,色谱柱柱效下降,峰形出现拖尾、变宽。
(2)重金属。
色谱柱的基材硅胶粒子无论纯度多高，无论怎样处理,都会有不少于5x10- 6的重金属以金属氧化物的形式残存在硅胶粒子的表面,这些金属氧化物很容易与其它化合物形成螯合物,使其被氧化,产生不对称峰或拖尾峰。
例如儿茶素和大多数中药,因含有多酚结构,极易被金属氧化物氧化,影响其分离效果。
(3) 碳流失。
固定相经长期使用,会有部分碳链被流动相洗脱下来,随流动相一起流出色谱柱外, 造成碳流失。
(4)缓冲液中盐的析出。
在做色谱分析时,有时流动相中会含有缓冲盐溶液。
分析结束后,如果没有先用含一定配比的水相流动相冲洗,而直接用纯有机相冲洗,瞬间柱子中的微环境是高有机相、低水相。
这时流动相中的缓冲盐溶液极易析出盐,将柱子堵塞,使柱压升高,柱效下降。
(5)色谱柱变干。
如果对色谱柱保存不当,使色谱柱中的保存液全部挥发,柱子内部变干,造成色谱柱的损伤,影响分离效果。
2色谱柱的使用新柱使用前应先检查产品包装、外观是否完好。
(完整版)色谱柱使用维护保养操作规程
目的：建立色谱柱使用维护保养操作规程，规范色谱柱的使用、维护行为。
范围：适用于色谱柱的使用、维护和保养。
依据：责任：药分部内容:1.操作规程一般要求是一根柱子用于同一个系列的产品，稳定性试验用专用柱。
1.1.新色谱柱在使用之前，首先应查看说明书，检查柱子的pH值范围是否与待验产品的要求相一致，确认柱子和仪器的接头以及管路是否相匹配，并注意柱子上标示的流向箭头，一切确认无误后，编上编号，在《色谱柱启用、报废台帐》上登记开始使用时间、生产厂家、型号规格等。
1.2.使用时，应按各色谱柱的要求进行色谱柱的维护保养，并在色谱柱使用登记表中登记使用日期、所测产品的名称及批次、使用前后维护保养的具体内容；1.3使用后，及时填写《色谱柱使用台帐》。
2.维护规程2.1.液相色谱柱的维护2.1.1. 色谱柱使用时，确认柱子的编号、型号规格与待验产品的要求相一致，流动相的pH值应与柱子说明书上规定的pH值相适应，然后旋开两端的封头，接到高效液相色谱仪上，使色谱柱的箭头指向与流动相流向一致。
2.1.2.流动相应经过0.45um滤膜过滤并脱气后使用，柱压不要超过300bar（3000psig），最高操作温度不得超过60℃。
2.1.3.流动相如果是非盐类的，用流动相冲洗约30min，按《高效液相色谱仪操作规程》进行操作，然后进行样品的检验。
如果是盐类的，用有机相：水=10：90的溶液冲洗约10min，再换上相对应的流动相，按《高效液相色谱仪操作规程》进行操作，然后进行样品的检验。
2.1.4.检验完毕，如流动相中含有盐类物质，应先用有机相：水=10：90的溶液以1ml/min的流速冲洗约40min，然后用HPLC级的乙腈或甲醇以1ml/min的流速冲洗约30min，关闭液相色谱仪，取下色谱柱，在柱两端旋上封头，以防止柱内的有机溶剂流失而使柱内填料发干变松，柱效下降。
不用的色谱柱放入液相色谱分析室的专用贮存柜中。
2.1.5.拿用时要轻拿轻放，避免剧烈震动。
高效液相色谱仪色谱柱的维护与保养
高效液相色谱仪色谱柱的维护与保养一、高效液相色谱仪色谱柱的维护与保养1. 注意安全在进行高效液相色谱仪色谱柱的维护和保养时，应注意安全，不要将手放在柱子上或柱子的内部，以免受到电击。
同时，也要注意防止外界的杂质进入柱内，避免影响柱子的性能。
2. 清洁色谱柱首先，使用湿抹布将色谱柱表面清洁干净，然后使用笔刷和溶剂将柱子内壁清洁干净。
清洁完毕后，需要将柱子放置在洁净的空气中，以便完全自然晾干。
3. 保养色谱柱在保养色谱柱时，需要注意柱子的密封，定期检查柱子的密封情况，如果发现柱子有渗漏现象，及时采取措施进行修理。
另外，还需要定期检查柱子的耐压强度，以免因耐压强度不足而造成柱子的破裂。
4. 定期更换色谱柱定期更换色谱柱是高效液相色谱仪色谱柱的保养工作之一。
色谱柱的使用寿命一般为2-3年，随着使用时间的延长，色谱柱的性能会发生变化，从而影响测试结果的准确性。
因此，需要定期更换色谱柱，以保证测试结果的可靠性。
二、色谱柱的存储1. 色谱柱应存放在干燥、无污染的环境中，避免阳光直射，以免受到湿气和污染物的侵害。
2. 色谱柱应放置在室温下，避免高温环境，以免影响色谱柱的性能。
3. 色谱柱应存放在通风良好的环境中，避免过多的湿气，以免影响色谱柱的密封性能。
4. 色谱柱应存放在有足够空间的地方，以免柱子撞击，造成损坏。
5. 色谱柱应存放在牢固的架子上，以免柱子受到重力的影响，造成损坏。
6. 色谱柱应存放在有足够防护措施的地方，以免受到杂质的污染，影响柱子的性能。
三、总结高效液相色谱仪色谱柱的维护与保养是高效液相色谱仪色谱柱使用的必要措施，既要注意安全，又要注意清洁和保养，定期更换柱子，并且要认真维护存储环境，以确保高效液相色谱仪色谱柱的正常使用。
液相色谱柱空柱管安全操作及保养规程
液相色谱柱空柱管安全操作及保养规程液相色谱柱是分析化学中经常使用的重要设备，其常用的配件之一是空柱管（Guard Column）。
空柱管可以保护主色谱柱，延长柱的寿命，同时也能提高柱的效率和稳定性。
本文将介绍液相色谱柱空柱管的安全操作及保养规程。
安全操作1. 安装空柱管液相色谱柱空柱管安装时，应先检查空柱管是否与主柱相匹配。
安装时，必须将空柱管正确地插入到接头处，并根据需要使用节流器或其他辅助装置。
2. 清洗空柱管清洗空柱管前，应注意不要将空柱管曝露在环境中，以免产生污染或其他影响。
清洗前必须确保气泡全部排出，并注意规定好的洗涤程序和清洗方法。
在空柱管使用前，一定要彻底清洗干净以避免污染主柱。
3. 更换空柱管在某些情况下，空柱管需要更换。
更换空柱管时，必须按照规定程序操作，并注意不要弄掉其他柱的接头，否则会影响色谱的稳定性和准确性。
在更换空柱管后，要重新安排柱的顺序，并按照规定的程序对色谱仪进行校准。
保养规程1. 常规检查为了保证色谱柱的稳定性和可靠性，需要对色谱柱进行常规检查。
检查时，应注意柱是否完好无损，是否存在破损或者漏气现象。
如发现异常情况，则需要进行下一步的清洗或维护。
2. 空柱管更换周期空柱管的更换周期需要根据具体情况而定。
一般情况下，建议每60-80次分析进行一次空柱管的更换，以保证样品的准确性和色谱分离的稳定性。
3. 定期清洗为了保证色谱柱的性能稳定，还需要对色谱柱进行定期清洗。
在正常使用情况下，建议每30天对色谱柱进行一次清洗，以确保色谱柱的稳定性和可靠性。
4. 保护柱柱罐为了避免磕碰或者其他损伤情况的发生，建议在移动柱柱罐时，在外部加上一层保护罩或者泡沫垫，使柱罐更加稳定、更加可靠。
5. 清洗柱柱罐在某些情况下，柱柱罐需要进行清洗。
清洗柱柱罐时，一定要使用专业工具和清洗液，不要随意选择清洗方法，以免对柱柱罐产生影响。
总结液相色谱柱空柱管是液相色谱技术中的重要设备之一，其保养和操作都非常重要。
【液相色谱】液相色谱柱的正确使用和维护 液相色谱维护和修理保养
【液相色谱】液相色谱柱的正确使用和维护液相色谱维护和修理保养色谱柱的正确使用和维护特别紧要，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。
在色谱操作过程中，需要注意下列问题，以维护色谱柱。
①避开压力和温度的急剧变化及任何机械震动。
温度的蓦地变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充情形；柱压的蓦地上升或降低也会冲动柱内填料，因此在调整流速时应当缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓（如前所述）。
②应渐渐更改溶剂的构成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂更改为全部是水，反之亦然。
③一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。
否则反冲会快速降低柱效。
④选择使用适合的流动相（尤其是pH），以避开固定相被破坏。
有时可以在进样器前面连接一预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”，避开分析柱中的硅胶基质被溶解。
⑤避开将基质多而杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。
保护柱一般是填有相像固定相的短柱。
保护柱可以而且应当常常更换。
⑥常常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。
在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂渐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右，即常规分析需要50～75ml。
下面列举一些色谱柱的清洗溶剂及次序，作为参考：硅胶柱以正已烷（或庚烷）、二氯甲烷和甲醇依次冲洗，然后再以相反次序依次冲洗，全部溶剂都必需严格脱水。
甲醇能洗去残留的强极性杂质，已烷使硅胶表面重新活化。
反相柱以水、甲醇、乙腈、一氯甲烷（或氯fang）依次冲洗，再以相反次序依次冲洗。
假如下一步分析用的流动相不含缓冲液，那么可以省略最后用水冲洗这一步。
一氯甲烷能洗去残留的非极性杂质，在甲醇（乙腈）冲洗时重复注射100～200？l四氢呋喃数次有助于除去强疏水性杂质。
四氢呋喃与乙腈或甲醇的混合溶液能除去类脂。
液相色谱柱的使用与维护
液相色谱柱的使用与维护1.使用前准备（1）确认实验装置是否正常，检查电气安全及实验条件是否达到要求；（2）检查手套、眼罩、口罩、护目镜、头盔等安全防护用品，并穿戴安全；（3）熟悉使用液相色谱柱研究的内容，编写实验方案；（4）安装相关器材及检查运行情况，如液相色谱泵，移液器，真空调节器等，使其达到正常的使用状态；（5）准备色谱柱、测定样品及色谱溶液等材料，并确认其质量；（6）清洁色谱柱，安装液相色谱柱，确认连接胶管处没有泄漏，柱入口与移液器或洗涤器处接口无漏液，连接胶管处紧固牢靠；（7）置入样品，手部操作，开启移液器及真空调节器，检查运行情况是否正常，确认各进样口及各接口运行正常；（8）准备测定条件，设定运行参数；连接测定仪器，开启泵，恒压泵调节到要求压力；（9）检查样品是否适宜测定，如检测到有杂质，及时清洗液相色谱柱；（10）实验后，对液相色谱柱进行清洗与保养；2.保养及维护（1）液相色谱柱需要定期进行清洗，完成液相色谱实验后，清洗液相色谱柱需要加入适当的溶剂或表面活性剂，并应按照规定的顺序逐级清洗，以去除杂质，保持高效率；同时，需要密切关注泵密封面和胶管是否损坏，如果出现损坏，应及时修复；（2）清洗有杂质的液相色谱柱，可以加入适量的溶剂或表面活性剂，可以有效的清除杂质；（3）紧固液相色谱柱内各部分的连接处，并及时检查消耗的部分，如O环、胶管、密封围边等，并及时更换；（4）应及时检查液相色谱柱的铝箔制动器等部件，如果损坏及时更换，以保证液相色谱柱正常使用；（5）经常检查液相色谱柱运行状态，保持液相色谱柱正常温度和正常压力，并及时发现异常情况，及时清除故障；（6）定期进行专业检查，以确保液相色谱柱状态正常；（7）当色谱柱停用时，应及时移除色谱柱上的样品，并清洗液相色谱柱，避免长时间停用造成部件老化及不良反应；（8）定期维护，将专业技术人员带入实验室，对色谱柱进行定期的检测、维护及升级，保证液相色谱柱状态正常。
色谱柱的维护和使用指南(一)2024
色谱柱的维护和使用指南（一）引言概述：色谱柱是色谱分析领域中至关重要的工具，它的维护和正确使用对于保证分析结果的准确性和重复性至关重要。
本文将从色谱柱的贮存、装配、使用、保养和维修等方面，给出一系列关键的指导方法和技巧。
正文：一、色谱柱的贮存1. 为避免柱内填充物受潮、污染和老化，柱在未使用时应密封保存；2. 长时间不使用时，应将柱内填充物取出，用洗涤液洗净并储存于干燥的环境中；3. 柱外表面应保持干净，防止灰尘和污垢对柱的质量造成影响；4. 避免将柱存放在高温或低温环境中，以免影响填充物的稳定性；5. 定期检查柱的阀门、接头和连接件，确保其正常运作和密封性。
二、色谱柱的装配1. 柱的装配应在洁净无尘的环境中进行，避免异物进入柱内；2. 使用合适的工具装配柱体和连接件，避免过度紧固导致损坏；3. 注意不同类型柱的装配顺序和注意事项，确保正确安装；4. 检查柱连接处的密封性，避免漏气或漏液的情况；5. 建议使用柱头盖保护柱口，防止污染和损坏。
三、色谱柱的使用1. 在使用前用适当的流体进行平衡，以保持柱内压力的稳定；2. 操作前确认柱的运行条件和方法，确保按照要求进行；3. 控制进样量和流速，避免超过柱的容量和承受能力；4. 避免使用不合适的溶剂和试剂，以免对柱和填充物造成损害；5. 及时清洗柱，避免堵塞和交叉污染的问题。
四、色谱柱的保养1. 每次使用后，应彻底清洗柱，避免残留物污染下次分析；2. 定期进行柱的回收和再填充，保证填充物的质量和性能；3. 避免柱暴露在强光、高温或化学腐蚀环境中，以免影响使用寿命；4. 使用前检查柱的状态，确保柱体没有磕碰、损坏和变形；5. 常规检查涂层是否完整，避免涂层剥落影响分析结果。
五、色谱柱的维修1. 出现柱内压力异常、流速不均匀等问题时，应及时检查柱的连接和阀门；2. 检查柱的阀门和连接件是否松动或损坏，进行紧固或更换；3. 遇到柱寿命结束、填充物老化或损坏等情况时，需进行柱的更换；4. 遇到柱头堵塞或堵塞的预警，应进行柱的清洗和维护；5. 建议定期请专业技术人员进行柱的维修和检测。
常用液相色谱柱原理及使用与维护保养
新型液相色谱柱的开发
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环境监测领域
液相色谱柱在环境监测领域的应用不断拓展，用于检测水、土壤、空气等样品中的有机污染物和农药残留。通过高效分离和灵敏检测，能够提供准确的污染源定位和污染程度评估。
食品药品安全领域
液相色谱柱在食品药品安全领域的应用也日益广泛，用于检测食品中的添加剂、农药残留，以及药品中的杂质和降解产物。通过严格的分离和检测，能够保障食品药品的安全性和有效性。
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液相色谱柱的维护保养
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常用液相色谱柱使用与维护保养
常用液相色谱柱使用与维护保养液相色谱柱是一种重要的分析仪器，在化学、药物研发、环境科学等领域广泛应用。
正确的使用和维护保养可以延长色谱柱的寿命，提高色谱分离的效果。
一、使用液相色谱柱的注意事项1.选择合适的柱使用液相色谱柱前，需要根据分析目标和样品性质选择适合的柱型和填料。
常用的柱型有反相柱、离子交换柱、正相柱等。
不同的柱具有不同的分离机理和性能，选择合适的柱可以提高分离效果。
2.准备好适当的溶剂系统液相色谱的溶剂系统通常由溶剂A和溶剂B构成。
在使用液相色谱柱之前，需要准备好适当的溶剂系统，并将溶剂通过泵送到色谱柱中。
溶剂的选择应根据柱和样品性质来确定，通常要尽量避免对柱产生腐蚀或损害的溶剂。
3.校准柱的流速在使用液相色谱柱之前，需要对柱进行流速校准。
根据柱的规格和品牌，确定适当的流速范围。
过高或过低的流速都会影响分离效果和柱的寿命。
通常，可以通过控制泵的流速和封堵时间来调整柱的流速。
4.准备样品在使用液相色谱柱进行分析之前，需要准备好样品。
样品可以是纯净物质，也可以是复杂的混合物。
样品的准备和预处理会影响分离效果和柱的寿命。
合适的样品准备方法包括稀释、过滤、目标成分的预处理等。
5.正确设置色谱仪的条件在使用液相色谱柱之前，需要根据柱的特性和样品的性质，正确设置色谱仪的条件。
包括流速、柱温、检测器、梯度和等时并行等。
设置合适的条件可以提高柱的寿命和分离效果。
二、液相色谱柱维护保养1.定期保养色谱柱为了保证液相色谱柱的寿命和分离效果，需要定期进行柱的保养。
在每次使用完柱后，需要冲洗柱，将样品和残留物彻底清除。
冲洗柱时可以使用适当的溶剂或清洗液，根据需要选择正向或反向洗涤。
一般推荐用高纯度的有机溶剂冲洗柱。
2.避免柱的过载和超压过载和超压是液相色谱柱常见的问题。
过高的样品浓度或过高的流速都可能导致浓度过载，产生色谱峰畸变或柱堵塞。
超压则会导致柱的损坏或泄漏。
需要根据柱的规格和样品的性质，控制样品浓度和流速，避免过载和超压。
戴安液相色谱仪安全操作及保养规程
戴安液相色谱仪安全操作及保养规程戴安液相色谱仪是一种重要的科学仪器，广泛应用于药物分析、环境检测、食品安全等领域。
为了保证仪器的安全运行和正常使用寿命，必须严格按照操作规程进行使用和保养。
本文将介绍戴安液相色谱仪的安全操作及保养规程。
操作前准备在使用戴安液相色谱仪之前，必须进行以下操作前准备：1. 仪器检查检查仪器是否正常工作，包括检查电源、空气源、进样口、气泵、泵头、检测器等。
对于各部件的工作状况如有不正常情况，应当及时通知维修工程师处理。
2. 样品准备样品应从样品接点中准确取样，并且保持不变。
样品准备过程应当严格按照实验要求进行操作。
3. 试剂准备试剂的准备应当遵循实验室安全操作规程，严禁使用过期或未标识的试剂。
4. 化学废物处理使用后的化学废物应当严格按照实验室安全操作规程处理。
5. 个人防护在进行实验操作时，操作人员应当佩戴实验室安全所需的防护装备，如实验手套、防护眼镜等。
操作规程1. 启动和关闭仪器在启动仪器之前，应当按照仪器使用说明书进行操作。
在启动仪器之后，应当进行参数设置，并进行数据采集和记录。
在关闭仪器之前，应当将各部件清洁干净，关闭电源和气源。
2. 样品进样在进行样品进样之前，应当进行样品预处理，包括样品的过滤、稀释等操作。
在进行样品进样时，应当按照实验操作规程进行，避免样品进入到仪器的各个部件中。
3. 柱组件的更换在进行柱组件的更换时，应当先关闭气源和泵头，并且注意更换时不要让样品进入到柱组件中。
4. 液路维护在使用仪器过程中，应当定期对液路进行维护，包括换液、清洗、消毒等操作，确保液路畅通和干净。
5. 检测器维护在使用仪器过程中，应当注意定期对检测器进行维护，包括清洗、校准等操作。
保养规程1. 仪器清洁仪器使用完毕后应当进行清洁，包括液路和仪器表面。
注意避免清洗液进入到仪器内部。
2. 柱组件的保养在柱组件使用完毕后，应当及时清洁并进行保养。
注意在清洗过程中，避免使用含有酸碱性的化学品。
液相色谱柱子使用及保养
2 星期 1 星期
1天 1 小时 新鲜配制
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10 分
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20
25
保存于标准棕色玻璃瓶中的超纯水
测试条件 水样: 40ml trace enrichment @ 2.0 ml/min 色谱柱: C18 反相柱 (Waters) 梯度: 线性 100% 水－ 100% 乙腈 波长: 254 nm
1星期
溶剂准备：过滤
选择合适的滤膜
聚四氟乙烯滤膜：适用于所有溶剂，酸和盐，并无任何可 溶物。
醋酸纤维滤膜：适用于水基溶剂，不适用于有机溶剂，推 荐用于蛋白质和其相关的样品。
尼龙66滤膜：适用于绝大多数有机溶剂和水溶液，可用于 强酸、70%乙醇、二氯甲烷、不适用于DMF二甲基甲酰胺 再生纤维素滤膜：具有蛋白质吸收低，同样适用于水溶性 样品和有机溶剂。
不要高压冲洗柱子
色谱柱保护
在线的保护装置
给色谱柱提供物理的保护 除去样品及流动相中的颗粒 给色谱柱提供化学的保护 防止分析柱被化学污染
装置
在线过滤器
自装填料保护柱
预装保护柱
新型的保护柱
特点 高质量, 高效填料 - 不损失柱效 增加分析柱效 - 增加适应范围 20mm柱长 - 脏样品载荷能力大，能延长保护柱 寿命 手可拧紧接头，安装时不需要工具
溶剂过滤-除去微粒
不干净的溶剂或在溶剂瓶中长菌的溶剂会阻塞溶 剂过滤器以及色谱柱。
遵从下列建议可以提高性能，延长溶剂过滤器和 色谱柱的寿命：
������ 使用无菌溶剂瓶避免溶剂长菌。
������ ������ ������ ������
用滤膜过滤溶剂去除微生物。 每两天更换或过滤溶剂。 避免溶剂瓶直接日照。 向溶剂中加入0.0001-0.001M的叠氮化钠。
常用液相色谱柱使用与维护保养
常用液相色谱柱使用与维护保养液相色谱柱是分离和分析中常用的仪器配件之一，它的使用和维护保养对于实验结果的准确性和可靠性有着至关重要的作用。
本文将介绍常用液相色谱柱的使用和维护保养方法。
一、液相色谱柱的使用方法1.准备工作：在使用前，需要对液相色谱柱进行准备工作。
首先，检查柱的外观是否完好无损，如果发现任何损坏或污染，应立即更换。
其次，检查柱装置是否牢固，连接是否紧密。
最后，将固定相和移动相装入柱中，确保固定相充分均匀地填充在柱内。
2.柱的条件调节：根据实验需要，调节液相色谱柱的柱温、流速和柱压等参数。
在调节柱温时，应注意避免温度过高或过低对柱的损害。
调节流速时，应根据样品性质和分离效果选择合适的流速。
控制柱压时，要确保柱内压力稳定在可接受范围内，避免超过柱的承压能力。
3.样品进样：将待测样品注入进样口或进样器中，注意避免空气进入柱，避免对柱的污染。
可以选择外部进样或直接进样的方法，具体方法根据实验要求和样品性质进行选择。
4.运行柱：在启动液相色谱仪前，先将柱进行预冲洗。
预洗液可以选择与移动相相同的溶剂。
启动液相色谱仪后，根据实验要求设定好运行条件，开始进行实验。
在实验过程中，要及时观察色谱图的变化，根据实验需要调节柱温、流速等参数。
5.柱的保存：在柱使用完毕后，将固定相充分冲洗干净，保证柱内固定相的干燥和保存。
然后，将柱装入保护柱架中，避免碰撞和损坏。
柱的保管环境要保持清洁、干燥、避光和稳定的温度。
二、液相色谱柱的维护保养方法1.柱的清洗：在使用液相色谱柱之前，需要先清洗柱以去除可能存在的污染物。
清洗方法包括预洗和后洗。
预洗可以选择与移动相相同的溶剂，将溶剂通过柱时，将固定相表面的杂质冲洗掉。
后洗可以选择与前一个样品不同的溶剂，将固定相和样品残留物进行清洗。
2.避免柱的干燥：柱在使用过程中，应尽量避免柱的干燥，因为柱的干燥会对固定相造成损害。
在柱停用时，应及时用溶剂进行冲洗并封存起来，以保持柱内的湿润状态。
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柱效低
重复性差
不出峰，回收率低
柱压过高
为什么柱压会过高 微粒堵塞
样品 流动相 密封垫
柱床膨胀
不可逆吸附 细菌生长
柱效低
为什么柱效低 色谱柱被污染 过滤片部分堵塞
样品、流动相或密封垫的细小颗粒造成的堵塞
色谱柱内的死体积
流动相pH值及组成不合适造成固定相流失 流速急剧变化造成固定相物理损坏 机械震动造成固定相产生裂缝 柱床收缩或干枯
用户自装填料 影响柱效同装填技术有关，柱效降低较大
On Guard预装保护柱
有各种填料的预装柱供选择，使用方便。填料容积较小，也 引起柱效降低
新型的保护柱
适应的用户类型 非常脏, 非常复杂的样品本底
生化样品, 溶液 环境样品 食品
不想作太多的固相萃取
不想降低柱效
新型的保护柱
柱头有塌陷，用填料修补
重复性差、回收率低
实验的重复性差 色谱柱被污染 流动相pH值及组成不合适造成键合相流失 样品溶剂不同或样品本身不稳定
回收率低，不出峰
“不可逆”吸附 固定相过强或流动相过弱 非特异性吸附
色谱柱以外的因素（一）
“柱效”问题，不一定是色谱柱问题！ 仪器问题：连接不好造成死体积
进样器 检测器 管路，连接口 保护柱 在线过滤器堵塞
色谱柱的使用及操作
流动相的转换 特别是GPC柱 流速(压力)的变化幅度 温度的变化幅度
专用色谱柱∶样品及溶未 用 过 的 色 谱 柱 时 一 定 要 先 看 其 使 用 说 明 ！
色谱柱的保养（一）
样品方面 除去微粒及杂质 了解样品在流动相中的溶解度
如样品的溶剂不是流动相，一定要用流动相试溶解度，防止 其在流动相中析出
色谱柱维修/再生——物理阻塞
在安装柱前后测试压力差
如果柱压力太高，反装色谱柱，并用10-20倍柱体积的
若出现沉淀 (如：蛋白凝聚、细胞物、聚合物) 设法用
流动相冲洗色谱柱，监测压力变化
相应的可溶性溶剂，如 0.1% TFA/ 80% 乙腈, 6M 盐酸
胍, THF, HFIP
若仍无效，应考虑更换过滤片
流动相问题：色谱柱未平衡好
进样量太大
色谱柱与仪器的联接
不同公司产品，其接头不同。处理不当时，会造 成： 色谱峰展宽（死体积）使柱效下降、或渗漏 解决办法：
自制相应的转换接头
使用“通用”型接头（锥箍及螺母）
这种锥箍在不锈钢管上是活动的，因此可以换接不同的色谱 系统及色谱柱。PEEK工程塑料的接头，可用在所有类型的色 谱柱上的。
记 住 ∶ 每 种 色 谱 柱 可 能 有 特 定 的 方 法 一 定 要 先 看 其 使 用 说 明 ！
色谱柱的存放
存放前的处理 除去杂质、盐 合适的存放溶剂 避免色谱柱床的干枯
避免机械震动
防止细菌生长
注意存放的温度
色谱柱常见毛病
柱压过高 多少才算高?
不同色谱柱有差异 不同系统有差异 不同溶剂有差异
缓冲液的pH值不合适 缓冲液的缓冲能力不足
给色谱柱提供物理的保护 除去样品及流动相中的颗粒 给色谱柱提供化学的保护 防止分析柱被化学污染
装置
在线过滤器
自装填料保护柱
预装保护柱
在线过滤器
在线过滤器 防止颗粒在色谱柱头累积 优点：基本不影响柱效 在需要高柱效的分析时中常用（如：氨基酸分 析） 可更换的消耗品 更换滤芯 更换垫圈
保护柱
可避免化学污染。多数保护柱影响到整个色谱柱 的柱效，特别是在用微柱时 保护柱的种类 普通自装填料的保护柱
了解样品与色谱柱的基质/填料是否相互作用
色谱柱的保养（二）
流动相方面 除去微粒 纯度的要求
超纯水，梯度实验时水中有机杂质含量要低 缓冲液的pH值，在填料的允许范围内 缓冲液（盐）的浓度 溶剂：色谱纯，并与填料相匹配 溶剂中的杂质含量
流动相对样品的溶解度
有机溶剂或水的比例
在线的保护装置
用对该样品洗脱能力最强的流动相清洗
硅胶柱的一般方法
先用甲醇洗去极性杂质 用干燥的二氯甲烷、正庚烷100~200ml依次活化
键合相柱(烷基)的一般方法
20倍柱体积的：甲醇-氯仿-甲醇-水依次冲洗 柱子尺寸 柱子体积 冲洗体积 150x4.6mm 2.5ml 50ml 200x4.6mm 3.3ml 65ml 250x4.6mm 4.2ml 80ml
键合相色谱柱
以硅胶为基质，通过化学键合方式把碳十八、碳 八、胺基等基团联在基质上，作为固定相。
优点∶ 固定相稳定，不易流失 应用广泛，可使用多种溶剂 消除硅羟基的不良影响
缺点∶ pH值不能小于2或大于8 同样填料，各种牌号色谱柱不尽相同
pH对色谱柱的影响
填料的稳定性
硅胶填料 pH：2-8 pH值大于7时 键合相溶解 pH值小于2时 键合相水解 经常用缓冲液 固定相降解
硅 解 胶 曲 的 线 溶
聚合物填料
pH:2-12或0-14
1 3 5 7 9 2 4 6 8 p H
色谱柱的选择
非极性或极性较小的样品可用一般的C18柱
酸碱性的化合物建议选用填料经封尾钝化过的C18 柱，PH范围2-9（12）
糖类，氨基酸，有机酸，多环芳烃，GPC有专用柱
良好的色谱实验习惯
拿到一根新色谱柱时，先测柱效 保留在新色谱柱上测得的色谱图，并记录条件 定期检测柱效
色谱柱以外的因素（二）
柱压过高问题，不一定是色谱柱问题！ 系统反压问题
阻尼器堵塞 进样器堵塞 管路或连接口堵塞 在线过滤器不干净 保护柱
压力传感器不准确
流速是否错误?
色谱柱以外的因素（三）
实验的重复性差 梯度实验时平衡时间不足 温度波动 流动相组成改变
样品溶剂不同
样品稳定性不好 方法的开发不好
液相色谱实用技术
色谱柱的使用和保养
极性问题
分配色谱的分离机理
分配色谱概述
反相色谱的主要类型，基于分子的极性分离 洗脱次序：一般为反相，即极性高的先被洗脱 常用的流动相：
有机溶剂如甲醇、乙腈，四氢呋喃，水 应用添加剂，成为离子对、离子抑制方法
常用固定相：
碳十八、碳八、胺基、氰基，二醇基等基团 反相色谱固定相大多数为键合相
特点 高质量, 高效填料 - 不损失柱效 增加分析柱效 - 增加适应范围 20mm柱长 - 脏样品载荷能力大，能延长保护柱 寿命 手可拧紧接头，安装时不需要工具
通用柱套 - 适用于所有的HPLC柱(3.9及4.6内径) 整体式- 使用方便，容易
各种不同填料配合色谱柱
色谱柱的清洗
对所做的样品要有充分的了解