无菌操作技术
无菌技术操作流程
无菌技术操作流程无菌技术在生物制药、医疗卫生、实验室等领域的应用十分广泛。
无菌技术可以有效避免病原菌和其他微生物的污染，保障产品或实验的质量和安全性。
本文将详细介绍无菌技术操作流程。
一、前期准备1.隔离准备：将操作区域进行物理隔离，确保操作区域的洁净度。
2.检查准备：检查操作室内的所有设备和耗材是否齐备，看是否存在污染或损坏情况。
3.消毒准备：将操作区域、设备和耗材进行彻底消毒。
4.个人卫生准备：穿戴专业的防护服、手套、口罩等卫生用品，确保个人卫生干净。
二、取样1.实验前先进行直接检测，以保证取的物质没有污染，并进行对照。
2.用酒精、火焰或UV紫外线等方式对采集工具进行消毒，以确保操作的无菌化。
3.隔离并涂布取样：将样品放入无菌培养基中，涂布或喷洒到培养基的表面，须在无菌条件下进行。
4.取样后关闭培养器的盖子，并以适当的温度和湿度条件下进行培养。
三、进一步处理1.菌落提取：对于培养出的菌落，用消毒的、过滤的、无菌的三角勺将菌落取出，并将其转移到相应的液体培养基中。
2.培养基物筛选：将样品涂布在不同的选择性培养基或新鲜的有机物含量不高的培养基上，将不同的菌落分离开来并进行培养，以便鉴别和检测。
3.鉴别：用鉴别性培养基进行培养和检测，根据培养结果和生理学方法对菌株进行鉴别。
四、最终检测1.最终检测：对于鉴别得到的菌株，进行最终检测，确定其是否达到无菌水平。
2.环境检测：对于操作区域、设备和耗材，进行定期的环境检测，以确保无菌环境的质量和稳定性。
3.生产过程的监控：在生产过程中，对生产环境、设备和人员进行监控，确保无菌水平的稳定性和质量。
以上就是无菌技术操作流程，无菌技术的实施对产品或实验的质量和安全性至关重要，因此必须进行严格的操作和监测，确保无菌水平和品质。
此外，在操作过程中也必须加强个人卫生和消毒管理，以保证实验环境能够维持高质量和高效率。
无菌技术的操作流程
无菌技术的操作流程无菌技术是现代生物实验室中常用的一项技术，它用于在无菌条件下进行微生物的培养和实验操作。
无菌技术操作流程的规范和正确性对于实验结果的准确性和可靠性至关重要。
下面将详细介绍无菌技术的操作流程。
一、准备工作1. 实验前准备：清洗实验台面、操作台和实验仪器，保持干净整洁，并将所需的培养基、试剂和器械准备齐全。
2. 环境准备：确保实验室的环境无尘、无菌，使用紫外线灯照射操作区域，杀灭空气中的微生物。
二、个人防护1. 穿戴实验服、手套和口罩，避免将自身的微生物带入操作区域，减少对实验的污染。
2. 手部消毒：使用75%酒精或其他有效的手部消毒剂对双手进行彻底的消毒，确保双手洁净无菌。
三、无菌技术操作流程1. 开启无菌工作台或无菌柜，并等待5-10分钟，使其内部环境达到无菌状态。
2. 打开培养基瓶盖前，先对其外表面进行消毒，然后将瓶盖旋开一定角度，以避免瓶口受到外界污染。
3. 取出所需培养基，使用酒精灯或Bunsen燃烧器对瓶口进行消毒，避免外界空气中的微生物进入培养基中。
4. 取出需接种的微生物试管或培养皿，在火焰中将试管口或培养皿盖轻轻烧烤一下，杀灭表面的微生物，避免外界污染。
5. 使用灭菌的移液器或接种环，将微生物接种到培养基上，注意避免接触到瓶口或其他可能污染的物体。
6. 接种完成后，立即将瓶盖或培养皿盖盖好，避免外界的污染。
如果是试管，则立即用胶带封口。
7. 在接种完毕后，将移液器或接种环进行高温烧烤，以保证其表面的无菌状态。
8. 实验结束后，关闭无菌工作台或无菌柜，并对操作区域进行清洁消毒，确保下次实验时的无菌环境。
四、注意事项1. 操作要快且准确，以减少外界污染的可能性。
2. 避免与培养基的瓶口或试管口直接接触，以防止微生物的污染。
3. 注意消毒的方法和时间，确保彻底杀灭微生物。
4. 避免操作时产生气流，以防止空气中的微生物进入操作区域。
5. 定期对无菌工作台或无菌柜进行检测和维护，确保其正常工作和无菌状态。
无菌操作基本技术
无菌操作基本技术1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 %ethanol 擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。
每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。
实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面。
操作间隔应让无菌操作台运转10 分钟以上后，再进行下一个细胞株之操作。
2. 无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。
实验用品以70 % ethanol 擦拭后才带入无菌操作台内。
实验操作应在抬面之中央无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作。
3. 小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。
勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。
容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
4. 工作人员应注意自身之安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。
对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作，并选择适当等级之无菌操作台(至少Class II)。
操作过程中，应避免引起aerosol 之产生，小心毒性药品，例如DMSO 及TPA 等，并避免尖锐针头之伤害等。
5. 定期检测下列项目：5.1. CO2 钢瓶之CO2 压力5.2. CO2 培养箱之CO2 浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水，每周更换)。
5.3. 无菌操作台内之airflow 压力，定期更换紫外线灯管及HEPA 过滤膜，预滤网(300小时/预滤网，3000 小时/HEPA)。
6. 水槽可添加消毒剂(Zephrin 1:750)，定期更换水槽的水。
实验用品1. 种类︰1.1. 细胞培养实验用品均为无菌，除了玻璃容器与pasteur pipet 外，其它均为塑料无菌制品。
无菌技术操作
附件4无菌技术一、无菌持物钳（镊）的使用法（一）目的取用或者传递无菌敷料、器械等。
（二）注意事项1、无菌持物钳（镊）不能夹取未灭菌的物品，也不能夹取油纱布（条、球）；2、取远处物品时，应当连同容器一起移至物品旁进行操作；3、无菌持物钳（镊）使用时不能低于腰部；4、打开包后的干持物筒、持物钳是用的有效期不能超过4小时；5、不可直接从盖孔中取、放无菌持物钳（镊）；6、避免无菌持物钳（镊）在空气中暴露过久。
二、无菌容器的使用法（一）目的保持已经灭菌的物品处于无菌状态。
（二）注意事项1、使用无菌容器时，不可污染容器盖内面、容器边缘及内面；2、无菌容器打开后，须记录开启日期、时间，有效使用期为24小时；3、取、放无菌物品后，立即将无菌容器盖好，避免容器内无菌物品在空气中暴露过久；4、手持无菌容器时，应托住容器底部，手指不可触及容器边缘及内面。
三、铺无菌盘法（一）目的将无菌巾铺在清洁干燥的治疗盘内，形成无菌区，以供实施治疗时放置无菌物品使用。
（二）注意事项1、操作前必须规范洗手；2、操作区域须清洁干燥，无菌巾避免潮湿，符合无菌技术操作原则；3、手及非无菌物品不可触及无菌面4、注明铺无菌盘的日期、时间，无菌盘使用的有效期为4小时，已开启过的无菌治疗包24小时内有效；5、灭菌化学指示物未变色或包布潮湿、破损、灭菌时间过期时不可使用。
四、戴无菌手套（一）目的1、执行无菌技术操作或者接触无菌物品时需戴无菌手套；2、进行严格的医疗护理操作时确保无菌效果，保护患者和医务人员免受感染。
（二）注意事项1、戴手套时须注意未戴手套的手不可触及手套的外面，带手套的手不可触及未戴手套的手或另一手套的里面；2、戴手套后如发现有破洞，应立即更换；3、脱手套时，应翻转脱下；4、注意修剪指甲以防刺破手套，手套的大小要合适；5、戴手套后双手要始终保持在腰部或操作台面以上视线范围内的水平。
哪些技术是无菌操作方法
哪些技术是无菌操作方法无菌操作是一种用于处理和制备无菌条件下的实验样品或制造无菌产品的技术方法。
它可以有效地防止微生物的污染和传播，确保实验结果的准确性和产品的安全性。
以下是一些常见的无菌操作技术：1. 灭菌：灭菌是无菌操作的基础。
它是使实验室设备、培养基、介质等无菌的过程。
灭菌的方法包括高温灭菌、化学灭菌和辐射灭菌。
高温灭菌是通过加热到高温杀灭微生物，常用的方法有干热灭菌和湿热灭菌。
化学灭菌可以使用消毒剂如酒精、过氧化氢和醋酸进行杀灭微生物。
辐射灭菌则利用紫外线、X射线或γ射线辐射杀灭微生物。
2. 空气过滤：空气过滤是一种通过过滤器将空气中的微生物去除的无菌操作方法。
常见的过滤器有HEPA过滤器和微生物过滤器。
空气过滤可以应用于实验室环境中，以保持操作区域的洁净无菌，还可以应用于工业生产过程中，用于防止空气中的微生物污染。
3. 无菌技术柜：无菌技术柜是一种密闭且通过高效过滤器供给无菌气流的设备。
它可以提供无菌操作区域，有效阻止微生物的进入和传播。
无菌技术柜常用于微生物学实验室和制药工厂中，用于处理和制备无菌条件下的试样和产品。
4. 手部消毒：手部是微生物最容易滋生和传播的部位，因此手部消毒是无菌操作中非常重要的步骤。
手部消毒一般可以通过洗手液进行常规清洁，再用含酒精的手消毒剂进行消毒。
在无菌操作过程中，操作人员需要经常进行手部消毒，以保持无菌条件。
5. 工作台消毒：无菌操作中的工作台也需要进行定期的消毒。
消毒可以使用含有酒精或其他消毒剂的湿纸巾或棉球进行，以彻底清除表面的微生物污染。
6. 无菌培养：无菌培养是一种在无菌条件下进行细菌培养的技术。
它可以通过提供无菌的培养基和无菌的操作环境，使细菌在无菌状态下生长。
无菌培养常用于微生物学实验室中研究微生物的生长和代谢特性。
7. 无菌包装：无菌操作在制造无菌产品中也起着至关重要的作用。
无菌包装是将产品包装在无菌条件下，以防止微生物污染。
常见的无菌包装方法包括热灭菌包装和接触无菌包装。
无菌操作技术名词解释
无菌操作技术名词解释无菌操作技术指的是：在医疗卫生实践活动中，医务人员的一项基本的操作技术，就是医务人员必须遵守的、保证医疗安全和患者健康的一些规章制度和操作规程。
简单来说就是不能被细菌或其他微生物污染的操作技术。
那么它的意义何在呢？实施无菌操作的必要性： 1。
保证无菌环境是预防院内感染最有效措施之一，避免院内感染的重要环节，可以有效地控制感染源的传入，防止外源性感染的发生，杜绝传染病扩散，对减少病人的痛苦和缩短住院日期，提高抢救成功率具有重要的临床意义。
2。
手术时，人的血液、体液、分泌物和排泄物等都存在于无菌的环境中，如果用手直接拿东西，就会将细菌带到医疗器械上，或者是把无菌区域的皮肤划破，就会使细菌进入到手术创面，因此，手术前后都要认真洗手，并正确地按步骤做好每一个步骤，防止血液、体液、分泌物和排泄物等污染医疗器械，引起感染。
3。
凡是侵入人体组织间隙内的异物，不管是固体还是液体，都必须经过消毒才能进行清除。
4。
医务人员在为病人治疗疾病时，如果手上沾有病人的血迹、粪便、体液、分泌物等，又直接用手去接触病人的伤口、脓肿、溃疡等部位，很容易造成病原菌感染，导致医院感染的发生。
5。
在临床护理工作中，医护人员的手都直接接触各种无菌器械及被血液、体液、分泌物等污染的物品，如果处理不当，也可以引起医院感染。
为什么无菌技术至关重要呢？原因有三： 1、2、为什么要执行严格的无菌技术操作原则呢？因为医院的环境是由许多相对无菌的环境与大量相对有菌的环境所构成的，虽然这两种环境彼此之间是相对隔离的，但在这种无菌环境里仍然有各种细菌生长繁殖着，如果医护人员在治疗过程中不注意无菌技术，这些细菌就可能通过人与人之间、物与物之间的接触而传播到另一个病人身上，这样既影响了治疗的效果，又增加了病人的痛苦。
因此，我们在进行各种医疗操作时，必须按照各种器械、敷料等的清洁灭菌的操作规程，采取严格的无菌技术操作方法。
只有这样才能确保医护人员不被各种细菌感染，保障病人的健康和安全。
六项无菌技术操作法
六项无菌技术操作法
无菌技术是在实验室和医疗领域中非常重要的操作技术，用于防止微生物的污染。
以下是六项无菌技术操作法的详细介绍：
2.消毒操作：在进行无菌操作之前，需要对操作区域和工具进行消毒处理。
常用的消毒方法包括使用酒精、紫外线、高温等。
消毒操作需要按照规定的时间和方法进行，并保持操作区域的干燥。
3.穿戴无菌衣物：进行无菌操作时，操作人员需要穿戴无菌衣物，以防止人体的微生物污染。
无菌衣物包括无菌手套、无菌帽、无菌口罩等，需要在规定的时间内更换，并保持衣物的干燥和整洁。
4.灭菌操作：对于需要使用的器械和培养基等材料，需要进行灭菌操作，以确保其无菌。
常见的灭菌方法包括高温灭菌、压力灭菌、化学灭菌等。
选择合适的灭菌方法需要考虑物品的特性和要求。
5.无菌操作台：无菌操作台是进行无菌操作的重要设备。
操作台通常采用不锈钢材质制成，具有可拆卸的透明遮挡板和风幕，以保持操作区域的无菌环境。
在进行无菌操作时，需要将材料放置在操作台上，并避免与非无菌区域接触。
6.快速无菌技术：在一些需要快速进行无菌操作的场合，可以使用快速无菌技术。
常用的快速无菌技术包括滤膜法、放射法等。
这些技术可以在相对较短的时间内对样品进行无菌处理，并减少了传统方法中的大部分操作步骤。
总结起来，无菌技术操作法主要包括空气净化、消毒操作、穿戴无菌衣物、灭菌操作、无菌操作台和快速无菌技术。
通过正确使用这些技术和
操作法，可以有效地防止微生物的污染，保证实验和医疗工作的可靠性和有效性。
无菌技术操作
<五>铺无菌盘
概念：铺无菌盘是将无菌巾铺在清洁干燥的治疗盘内，形成一无菌区，
放置无菌物品，以供治疗之用，有效时限不超过4小时。
<六>戴无菌手套
戴手套时应注意未戴手套的手不可触及手套的外面，已戴手套的 手不可触及未带手套的手或另一手套的内面。
谢谢！
四、无菌持物钳的使用
（一）种类：临床上常用的无菌持物钳有卵圆钳、长、短镊子三种。 （二）目的：用于取放和传递无菌物品，保持物品的无菌状态。
1、无菌持物钳的存放方法
（1）经压力蒸汽灭菌后浸泡在内盛消毒液的大口有盖容器内，容器 深度与钳长度比例适合消毒液面浸没轴节以上2-3cm或镊子长 度的1/2，每个容器只能放置一把无菌持物钳。
（4）容器每周灭菌一次
开盖 盖盖
<三>取用无菌溶液
1、取用密封瓶装溶液： 检查：（1）外面：瓶签、瓶盖、瓶口 （2）内面：沉淀、浑浊、颜色 2、取用烧瓶装溶液：不可将无菌物品或非无菌物品伸入无菌溶液瓶 内蘸取或直接接触瓶口倒液，以免污染瓶内的溶液。
<四>无菌包使用
1、包扎发：十字形、一字行。 2、开包法：（1）放在清洁处打开 （2）托在手上打开 （3）一次性无菌物品开包法
一、概念
（一）无菌技术：是指在医疗，护理操作中，防止一切微生物侵入人 体和防止无菌物品，无菌区域被污染的操作技术。 （二）无菌物品：是指经过灭菌处理后未被污染的物品。
（三）无菌区域：是指经过灭菌处理后未被污染的区域。
（四）有菌区域：是指未经过灭菌处理或是经过灭菌处理而被污染的 区域。 （五）污染区：是指凡是直接或间接的与致病微生物相接触。
5、戴、脱无菌手套
<一>无菌持物钳的使用
无菌操作技术图文.
(3)第一遍刷完后,用流水冲净；共刷 洗3遍，每遍约3min，共约10min。
(4) 刷洗时应稍用力 ，并特别注意指甲 、 指间、手背、手掌等处。流水冲洗时， 双肘弯曲，手指向上，让水由手指处向 肘部流下，不得返流。
（5）在刷洗过程中，如果怀疑手、臂被 污染，应重新从第一遍开始刷洗。
（6）取消毒毛巾、擦干双手，将毛巾 对折，底口向肘部，用另一手拉对角， 缓缓向左右移动，然后将毛巾对折处 翻转，用毛巾另一面如上法擦干另一 手臂，高度应低于肘部7cm以下。
(2) 用戴着手套的右侧手指、插入左手套的 翻折处脱去左手套至手掌部 ( 勿触及左手 的皮肤 ),再用左手拇指、伸入右手套掌部 之下, 提起右手套的翻折部,将左右手手套 依此脱下。
(3)用流水冲洗掉手上的滑石粉，取消毒巾 擦干手及手臂，重新消毒手及手臂。 (4)如果手套已破裂或在脱手术衣时，手臂 不慎被污染，须重新刷洗、消毒手臂。
（4）末戴手套的手，不得拉衣袖或接触 其他处。
（5）手术进行中、参加手术人员如需互
换位置，须背对背转动。
2.连台手术脱手术衣法
(1)第一台手术结束后，洗净手套上的血迹， 先脱去手术衣，再脱去手套。脱手术衣时， 由他人解开背部带子，将手术衣自背部向 前反折脱下（将衣袖自腕部向手的方向翻 转脱下），使手套自然由腕部翻转于手上。
4.无菌物品-----指经过物理或化学方法 灭菌后, 保持无菌状态的物品。
无菌技术操作原则
操作前准备 保持操作的无菌性 无菌物品管理
（一）操作前准备
1.环境准备 进行无菌操作时，环境要清洁，操 作区要宽敞，安静，严禁人员频繁 走动。
2.操作者准备 (1)要有科学严谨的态度和认真求实的精神.
2. 手臂的消毒
无菌技术六项基本操作
日期、消毒效果
注意事项
无菌持物钳只能用于夹取无菌物品，不能触及非无菌物品。 无菌持物钳不能夹取无菌油纱布，也不能用于换药或消毒皮肤。 到远处夹取无菌物品，应同时搬移无菌持物钳和浸泡溶液，以免无菌持物钳在空气中暴露过久而污染。 使用无菌容器时，不可污染盖的内面、容器边缘及内面。 无菌容器一经打开，使用时间最长不得超过24h。 取用无菌溶液时，不可将无菌敷料、器械直接伸入瓶内蘸取，也不可将无菌敷料接触瓶口倒液。 已倒出的无菌溶液，不可再倒回瓶内。 打开的无菌溶液，如未污染可保存24h。 打开无菌包时，手不可触及包布的内面，操作时手臂勿跨越无菌区。 无菌包过期、潮湿或包内物品被污染时，均须重新灭菌。包布有破损时不能使用。 打开过的无菌包，如包内物品一次未用完，在未污染的情况下，有效期为24h。 治疗台及治疗盘清洁干燥 操作者的手、衣袖及其他非无菌物品不可触及无菌面。 无菌盘有效时限不超过4h。 戴手套时，避免手套外面（无菌面）触及任何有菌物品。 未戴手套的手不可触及手套的外面，已戴手套的手不可触及未戴手套的手或另一手套的内面（非无菌
上物置治疗车上层
弯盘（三个）：一个放治疗车上层方盘外（操作时 放操作台上），另两个放车下层（操作时一个放污 染的手套，一个放其他污物）
连贯动作
铺无菌盘（内放：无菌弯盘、无菌纱布、小 无菌镊）→取无菌碗→取无菌溶液→戴无菌手套
操作流程
仪表→评估环境（擦治疗车→擦操作台） →洗手（六步洗手法） →戴 口罩→准备用物（评估用物是否可用并报告） →摆台→报告开始 →铺无菌盘（查无菌巾包名称、灭菌日期、消毒效果→开治疗巾 包→取治疗巾→包按原痕包好→记录开包时间→包归位→扇形打 开治疗巾→取无菌弯盘→取无菌纱布→取无菌镊→折好无菌巾→ 记录铺盘时间→放好盘） →取无菌碗（查名称、灭菌日期、消毒 效果→开包→手托碗底→置桌面） →取无菌溶液（检查标签、溶 液质量→消毒瓶口和盖→取纱布→开瓶盖→标签对掌心冲瓶口→ 倒液→盖好瓶盖→记录开瓶时间→液归位） →戴无菌手套（查名 称、灭菌日期、消毒效果、手套型号→开包→查手套反折面→扑 粉→手拿反折面取手套→检查是否成对→戴好一手→戴好手套的 手插入反折面里→戴另一只→整理反折面→十指交叉相握→展示） →脱手套（洗手→拈住腕处手套外面→翻转脱下一只→拇指插入 另一只里翻转脱下） →整理手套、袋→报告操作完毕→整理操作 台、用物→打包→放置用物台
无菌操作技术3篇
无菌操作技术第一篇：无菌操作技术的定义和原理无菌操作技术，简称无菌技术，是指在无菌环境下进行的一系列操作方法。
它是现代微生物学和生物医学等领域必不可少的技术之一，特别是在制药、生物制品等领域中得到广泛应用。
因为微生物的生长繁殖具有极强的适应性，它们能在各种环境中生存，并通过空气、物品、人员等途径进行传播，因此要想有效地控制微生物的传播和污染，必须采用无菌技术进行操作。
无菌技术的原理是通过一系列的物理和化学手段，尽可能的将微生物污染源去除或消灭。
然后在无菌环境中进行操作，以确保所操作的样品和容器等物品不被新的微生物污染。
一般来说，无菌技术主要包括以下的操作步骤：1、物品的清洗：把操作所需的物品或器具放置在无菌过滤的水中清洗，以去除表面的污物和细菌。
2、灭菌处理：使用高温高压灭菌机、滤器或紫外线杀菌器等对物品进行灭菌处理，以杀灭在物品表面的细菌和病毒。
3、穿戴无菌制服：将所需的无菌制服穿戴干净，以降低人员对无菌环境的破坏。
4、工作台及器具无菌处理：将操作所需的操作台面、器具、试剂瓶、离心管等物品用70%的乙醇或其他无菌溶液进行清洁，保证操作区域的无菌性。
5、操作人员手部无菌处理：使用消毒液或洗手液洗手，穿戴手套，并保证手部的无菌性。
6、采集样本：使用经过无菌处理的工具，如针头、牙签等取样，保证样品的无菌性。
7、实验环境无菌清洁：对操作区域的环境进行彻底的清洁和消毒，确保实验环境的无菌性。
总之，无菌技术的入门是要注意细节，从物品的清洗、灭菌处理，到工作台及器具无菌处理、操作人员手部无菌处理，再到采集样本和实验环境的无菌清洁，每一个环节都需要特别关注，只有做到每一个细节的精细，才能达到真正意义上的无菌操作。
第二篇：无菌采样技术的方法和操作步骤在临床医学、生物学等领域中，采集微生物样本是检测和诊断的重要环节。
无菌采样技术是指在无菌环境下采集微生物样本的方法。
它可以有效防止微生物的污染和人为干扰，确保采集到的样本符合检测和诊断的要求，因此具有重要的临床应用价值。
无菌操作技术PPT课件
THANKS
感谢观看
建立质量监控机制
02
设立质量监控岗位，对实验过程进行全程监控和记录，及时发
现并纠正问题。
实施定期培训和考核
03
对实验人员进行定期的无菌操作培训和考核，提高实验人员的
技能水平和无菌意识。
持续改进方向和目标设定
1 2
优化无菌操作流程
根据实验反馈和质量监控结果，对无菌操作流程 进行持续优化和改进，提高操作效率和可靠性。
02
无菌操作前准备工作
实验室环境要求
实验室应保持整洁、干燥，避免尘埃飞扬。 01
实验室温度、湿度应控制在适宜范围内，避免微 02 生物滋生。
实验室应定期进行空气消毒，确保空气洁净度。 03
实验器材准备及消毒处理
01 实验器材应选用耐高温、高压的灭菌材料，如玻 璃器皿、金属器械等。
02 实验器材在使用前应进行严格的清洗和消毒处理 ，以杀灭可能存在的微生物。
实验器材使用注意事项
01 实验器材准备
选择适当的实验器材，如无菌试管、培养皿、移 液器等。在使用前需对器材进行灭菌处理，确保 无菌状态。
02 器材使用
在实验过程中，需严格遵守无菌操作规范，避免 器材与非无菌物品接触。使用后需及时对器材进 行清洗和消毒。
03 器材维护
定期对实验器材进行维护和保养，确保其性能和 精度。如发现器材损坏或污染，需及时更换或处 理。
对于不能耐受消毒剂的材料或设备，应 采用无菌布进行覆盖或使用其他无菌技 术。
人员需穿戴无菌手套，并定期更换。
清除技巧
使用消毒剂对操作台面和设备表面进行 定期清洁和消毒。
交叉污染避免策略
避免策略
交叉污染来源：主要来源于不同 操作间的相互干扰，如同一操作 区域内进行不同种类的操作。
无菌操作技术
无菌操作技术第一篇：无菌操作技术的概述无菌操作技术是指在无菌环境下对微生物进行操作的技术，广泛应用于医学、药学、食品工业等领域。
无菌操作的目的是保证操作过程中不引入外来微生物，以提高制品的安全性和可靠性。
无菌操作技术包括以下步骤：1.筛选和准备无菌工具和材料。
无菌操作需要使用无菌工具和材料，如培养皿、移液器、镊子、超净室、无菌过滤器、无菌衣物等。
这些工具和材料需要经过严格的消毒和灭菌处理，以保证无菌状态。
2.消毒准备操作区域和手部。
在无菌环境下进行操作前，需要对操作区域和手部进行消毒处理。
消毒常用的方法包括紫外线辐射、酒精消毒、热消毒等。
3.打开无菌操作区域，并进行操作。
在消毒后，打开无菌操作区域的门，进入操作区域进行实验。
操作过程中需要注意避免操作区域受到外界干扰，以保证操作的无菌性。
4.操作结束后进行无菌处理。
操作结束后需要对操作区域和工具进行无菌处理，以防止可能残留在工具和区域中的微生物污染其他制品。
无菌处理的方法包括高温高压灭菌、气体灭菌和化学消毒等。
无菌操作技术的应用范围广泛。
医学领域中，无菌操作技术应用于手术、病房和实验室等方面。
在药学领域中，无菌操作技术用于生产药品和试剂的制备。
在食品工业中，无菌操作技术应用于食品加工和贮藏等方面。
因此，无菌操作技术对保障制品的安全性和可靠性具有重要意义。
无菌操作技术的发展离不开现代技术的支持。
如超净室技术、无菌过滤技术和哌嗪酮灭菌技术等都为无菌操作技术的发展提供了可靠的保障。
无菌操作技术既是一种理论的知识，也是一种实践技能。
在实践操作中需要注意诸多细节，如操作步骤的顺序、工具的正确使用以及无菌操作区域的正确保持等。
只有在严格遵守无菌操作技术的要求下，才能确保微生物的无菌性，保障制品的质量和安全性。
无菌操作技术ppt课件
无菌操作制度
六. 无菌包应按日期先后顺序放置在柜中，并保持清洁 干燥，与非无菌物品分开放置，不得存放过期物品。 七. 灭菌物品（棉球、纱布等）及无菌液体须注明启用 日期与时间，启封后使用时间不得超过24小时。容器内 敷料，如干棉球、纱布块等，不可装得过满。 八. 抽出的药液、开启的静脉输入用无菌液体须注明开 启日期和时间，放置时间超过2小时后不得使用。 九. 使用中碘伏、酒精等消毒液密闭保存，一次性小包 装碘伏使用时间≤7天；500ml装碘伏及酒精开启后使用 时间为≤30天。
无菌操作技术
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无菌操作制度
一. 在执行无菌操作时，明确物品的无菌区和非无菌区。 二. 执行无菌操作前，先戴帽子、口罩、洗手、并将手擦干， 注意空气和环境清洁。 三. 夹取无菌物品、必须使用无菌持物钳。使用中持物钳（镊 ）干式保存，每4小时更换。 四. 进行无菌操作时、凡未经消毒的手、臂均不可直接接触无 菌物品或超过无菌区取物。操作者应与无菌区保持一定的距离 、以免污染无菌区。 五. 无菌物品必须保存在无菌包或灭菌容器内。无菌包一经打 开应尽快使用，凡已取出的无菌物品虽未使用也不可再放回无 菌容器内。
3பைடு நூலகம்
取无菌物品 （取出包内部分物品）
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取无菌物品 （取出包内部分物品）
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取无菌物品 （取出包内全部物品）
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取无菌物品 （取出包内全部物品）
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戴无菌手套
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戴无菌手套
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戴无菌手套
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脱无菌手套
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脱无菌手套
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无菌操作技术名词解释
无菌操作技术名词解释无菌操作是一种严格的无菌技术。
正确地掌握无菌技术是对操作人员的最基本要求，它不仅关系到能否防止感染，而且也影响到手术的效果。
为了防止感染和确保病人安全，必须遵守无菌技术操作原则。
无菌操作技术的主要内容有：戴口罩、帽子的重要性，消毒、灭菌方法的掌握，常用物品的处理，手术中各种器械、敷料的更换及手术人员的个人卫生，以及操作时的基本操作等。
无菌器械是指不带入活菌和无生长力、无致病性的一次性使用的医疗器械。
主要包括刀片、钻头、针头、导管、持针器、扩张器、探针、吸引器、注射器、输液器、呼吸机管道、穿刺针、输血器、器官钳、镊子、各种弯盘、皮肤小包、铺无菌巾用具等。
凡在空气中被污染或与体液、血液接触过的物品都称为污染物品。
这些物品都要经过清洗、干燥和灭菌三个步骤，达到清洁的目的。
1。
无菌技术操作规程是无菌操作的基本法则，它由几部分组成：包括标准无菌器械名称、配制浓度、稀释倍数；清洁器械浸泡及清洗要求；一次性物品的分类、取用量；所有操作人员一律不准戴首饰、戒指、手表等，进入无菌区，每位操作者均应认真阅读此规程，熟悉其内容。
2。
无菌技术操作的六大基本原则：（ 1）无菌区内禁止非无菌人员进入；（ 2）无菌区内不准带入无菌物品，也不准存放无菌物品；（ 3）凡接触无菌物品的人员均需戴无菌手套，不戴手套者不得接触无菌物品；（ 4）无菌物品一经开启，即使未用，也不能再放回无菌容器中；（ 5）换下的一次性无菌物品应立即放入无菌容器中，以免干燥后再用；（ 6）不可重复使用的无菌物品用后应直接放入无菌容器中。
无菌技术操作规程是无菌操作的基本法则。
因为无菌技术操作是整个外科手术成功与否的重要环节之一，直接影响着患者的生命安全和预后。
因此，无菌技术是外科医生应该具备的最起码的技术。
没有无菌观念，不能执行无菌技术操作，就谈不上消毒灭菌。
当前在我国执业医师资格考试中有很多人都通不过实践技能考试，一个主要的原因就是缺乏无菌观念，以为只要器械台上无菌，手术室内无菌，就万事大吉，忽视了无菌操作。
无菌操作技术名词解释
无菌操作技术名词解释无菌技术是指在执行医疗、护理操作过程中，防止一切微生物侵入人体和防止无菌物品、无菌区域被污染的操作技术。
无菌技术操作原则，是指在执行医疗护理操作的过程中，防止一切微生物侵入机体和保持无菌物品及无菌区域不被污染的操作技术和管理方法。
减少病人感染的发生，提高护理服务的质量。
原则：1.操作前准备工作（1）操作环境应清洁、宽敞、定期消毒；物品布局合理；无菌操作前半小时应停止清扫工作、减少走动、避免尘土飞扬。
（2）工作人员应当搞好个人准备工作，穿不好帽子、口罩，浇水指甲并刷牙，必要时穿着无菌衣、拎无菌手套。
2.操作中保持无菌（1）工作人员应当面向无菌区，手臂应当维持在腰部或操作台台面以上，不容横跨无菌区防止直面无菌区谈笑、呕吐、喷嚏。
（2）用无菌持物镊取用物品；无菌物品一经取出，即使未用，也不可放回无菌容器内；一套无菌物品仅供一位患者使用，避免交叉感染。
（3）无菌操作中，无菌物品因有污染或已被污染，应予以更改并再次杀菌。
3.无菌物品保管（1）无菌物品必须与非无菌物品分离置放。
（2）无菌物品不可暴露于空气中，应存放于无菌包或无菌容器中，无菌包外须标明物品名称、灭菌日期，并按失效期先后顺序排放。
（3）定期检查无菌物品的杀菌日期及留存情况。
无菌黏在未被污染的情况下保存期通常为7天，过期或变色应当再次杀菌。
无菌物品的管理应按医院内部规定进行。
所有无菌物品要标明灭菌日期与灭菌标记，和非无菌物品分开放置，无菌物品要放置在干燥清洁的屋子内，放置无菌物品的容器要定期消毒；各类无菌物品应有规定的存放地点，每天检查。
通常一块双层州列的无菌黏在没有污染的情况下可以维持7d，用密封的包装纸或者塑料袋可以维持半年或者一年；放置无菌干棉球、棉签和盐水棉球等没消毒液在内的容器，必须每天杀菌。
无菌操作技术
（五）倒取无菌溶液法
1、查对：无菌溶液的名称，是否在有效期内，瓶口有无松 动，瓶身有无裂缝，液体有无浑浊、沉淀、变质 2、倒溶液：瓶签朝向掌心，倒出少量溶液旋转冲洗瓶口， 再由原处倒出溶液至无菌容器中 3、盖瓶塞：倒好溶液后立即塞好瓶塞 4、记录：在瓶签上注明开瓶日期及时间并签名，放回原处
（五）倒取无菌溶液法
常用的有三叉钳、卵圆钳和长、短镊子四 种，每个无菌干罐只放一把无菌物钳
4－13
（一）使用无菌持物钳法
注意事项
1、严格遵循无菌操作原则 2、取、放无菌持物钳时应闭合钳端，不可触及 容器口边缘使用 3、使用过程中始终保持钳端向下，不可触及非 无菌区
（一）使用无菌持物钳法
注意事项
4、到距离较远处取物时，应将持物钳和容器一 起移至操作处，就地使用； 5、不可用无菌持物钳夹取油纱布； 6、不可用无菌持物钳换药或消毒皮肤； 7、干燥法保存时应4小时更换1次。
（六）戴、脱无菌手套法
（六）戴、脱无菌手套法
调整：将手套的翻边扣套在工作服衣袖外面，双 手对合交叉检查是否漏气，并调整手套位置
脱手套 处置：弃置手套于黄色医疗垃圾袋内。
（六）戴、脱无菌手套法
注意事项
1、严格遵循无菌操作原则 2、戴手套时手套外面（无菌面）不可触及任何 非无菌物品；已戴手套的手不可触及未戴手套的 手及另一手套的内面；未戴手套的手不可触及手 套的外面； 3、选择合适手掌大小的手套尺码；修剪指甲以 防刺破手套
如包内物品未用完，按原折痕包盖并记录签名， 使用时间不得超过24小时
如包内物品用完，将包布折叠放妥
（三）使用无菌包法
4－20
（三）使用无菌包法
4－21
（三）使用无菌包法
注意事项
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花药 胚及胚乳
果实及种 子
①70% 酒精浸泡数秒；②无菌水冲洗 2～3次；③饱和漂白粉滤液中浸泡 10min; ④无菌水漂洗 2～3次。
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一、组培灭菌方法
（一）物理灭菌
?
利用高温、射线
等杀菌或滤膜过滤除菌
等物理措施而实现无菌
目的。
? 1、高温湿热灭菌
? 条件：在0.105MPA 下，温度121℃下，保 持15-20分钟。
? 适用范围：培养基、无
菌水、接种工具、玻璃 器皿等均用高压蒸汽灭 菌。
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2、灼烧灭菌
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项目3-3 无菌操作
技能要求
? 操作程序正确，接种用具摆放合理，操作规范、准 确、协调、迅速；
? 容器内的外植体布局合理；
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三、重瓣长寿花初代接种操作流程
1 接种室、 超净台灭菌、
清洗材料
接种室
2手及台面消毒 培养材料灭菌
3灼烧灭菌 接种工具
6瓶口火焰灭菌 封口
? 操作：
? 一般将与接种材料直接接触的部分，在酒精灯的外焰上 灼烧充分，一般达到尖端部分烧红为止，可有效杀菌。
? 适用范围：
? 主要适用于金属器械。
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3、过滤灭菌
分为：空气过滤灭菌、液体过滤灭菌。
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4、射线灭菌
?射线灭菌直接、容易，可杀死空气中的微生物。 ?适用范围：常用于培养室、接种室的空气紫外线
方法一：①成熟或未成熟的种子消毒后剥离出胚或胚乳。 方法二：①去除种皮后，用 4% ～8% 的次氯酸钠溶液浸泡 8～10min ；②无菌
水漂洗 3～5次。
①根据果实和种子清洁度，流水冲洗 10～20min 或更长时间；② 70% 酒精漂洗 几秒到几十秒钟 (取决于果实和种子的成熟度与果皮、种皮的厚薄 )；③果 实用2% 次氯酸钠溶液浸泡 10min 后，无菌水冲洗 2～3次；④种子用 10% 的 次氯酸钠溶液浸泡 20～30min ，或用0.1% 升汞溶液浸泡 5～15min 后，无菌 水漂洗 3～5次。
照射灭菌。
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（二）化学方法
主要应用于外植体、实验室的灭菌 一、实验室灭菌 二、外植体灭菌 1、灭菌剂的要求 （1）有良好的灭菌效果； （2）不损伤植物材料或轻微损伤； （3）容易被清洗或能自行分解。
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各种消毒剂的特点
消毒剂 次氯酸钙 次氯酸钠
H 2O 2 氯化汞
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熟练。
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一、外植体的修整方法
外植体类型 根及地下部
器官
茎尖、茎段 叶片
花器
修整方法
剪除老根、烂根；切除损伤及污染严重部位；用软毛刷刷洗， 去除泥土、虫卵等附属物；幼根剪或切成 1至几厘米长的 根段
剪或切除枝条上的叶片、叶柄及刺、卷须等附属物；软质枝 条用软毛刷蘸肥皂水刷洗、硬质枝条用刀刮除枝条表面 的蜡质、油质、茸毛等；枝条剪成带 2～3个茎节的茎段， 长约4～5cm。
叶片带油脂、蜡质、茸毛，可用毛笔蘸肥皂水刷洗；较大叶 片可剪成若干带叶脉的叶块，大小以能放入冲洗用容器 即可。
一般不用修整，直接冲洗消毒。
果实、种子、 一般不用修整，直接冲洗消毒。种子、胚或胚乳培养时，对 胚、胚乳 于种皮较硬的种子，可去除种皮或预先用低浓度的盐酸 浸泡或机械磨损。
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5接种
4材料修剪
7标识
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培养室
8摆放培养瓶
重瓣长寿花初代接种操作流程图片
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重瓣长寿花初代接种操作流程图片
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重瓣长寿花初代接种操作流程图片
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项目展示
?重瓣长寿花初代接种的成活率 （每位同学接种外植体20 ～30 个）。
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2. 外植体消毒
（1）以小组为单位，识别各种灭菌剂，并配制各种消毒液。 （2）根据不同的外植体类型，对外植体消毒处理，并比较不同灭菌剂
的灭菌效果。
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不同外植体的消毒方法
外植体
根及地下 部
茎尖、茎 段及 叶片
消毒方法
流水冲洗；②纯酒精漂洗；③用 0.1% ～0.2% 升汞液浸 5～10min 或2% 次氯酸 钠溶液浸泡 10～15min; ④无菌水漂洗 3～5次。
酒精
使用 浓度%
9～10
去除 难易
易
消毒 消毒时间 min 效果
5～30
很好
是否毒害 植物
低毒
2
易
5～30
很好
无
10～12 最易
5～15
好ห้องสมุดไป่ตู้
无
0.1～1 较难
2～10
最好
剧毒
70～75 易
0.2～2
好
有
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项目3-2 外植体的选择与处理
技能目标：
? 能够准确识别植物器官，并正确选择外植体 . ? 外植体修整、预处理和消毒方式恰当、有效，操作规范、
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项目三 无菌操作技术
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项目导入
项目名称：重瓣长寿花的初代接种 项目合作单位：山西林业职业技术学院园艺系
太原市金语华科贸有限公司
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重瓣长寿花
项目3-1 灭菌技术
? 问题： ? 如何区分有菌和无菌？无菌操作技术的主要
环节包括哪些？ ? 项目解析： 1 能准确区分有菌和无菌的概念。（理解） 2 重瓣长寿花外植体的选择和处理。（掌握） 3 实验室消毒。（掌握） 4 重瓣长寿花初代接种操作技术。（掌握）