DNA测序样品要求

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附:测序样品的要求

一、PCR原液

∙片断通常大于200bp;

∙提供浓度大于50ng/ul,体积大于50ul;

∙2ul电泳检测条带清晰无杂带。

二、PCR已纯化

∙PCR产物溶于超纯水中;

∙浓度大于50ng/ul,体积大于20ul;

∙电泳检测条带单一。

三、质粒要求

∙质粒浓度大于100ng/ul,体积大于20ul;

∙建议使用相关试剂盒提取;

∙建议同时提供1ml菌液;

∙大质粒需要注明载体长度。

四、菌液模板要求

∙说明载体的抗性,我们提供Amp 、kan、chl、tet四种抗生素;

∙对于低拷贝质粒请直接提供1ug纯化质粒;

∙提供1ml左右的过夜培养菌液,加15%灭菌甘油,于离心管中封口保存,防止交叉污染或泄漏;∙建议尽量提供穿刺培养的菌种。

五、引物要求

∙浓度5umol/l,体积大于20ul;

∙随机引物和兼并引物不适合测序;

∙尽可能提供引物全序列,PCR退火温度;

∙T7、SP6、M13(+)、M13(-)、T3等通用引物我们免费提供。

样品类型及注意事项

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