DNA测序样品要求
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附:测序样品的要求
一、PCR原液
∙片断通常大于200bp;
∙提供浓度大于50ng/ul,体积大于50ul;
∙2ul电泳检测条带清晰无杂带。
二、PCR已纯化
∙PCR产物溶于超纯水中;
∙浓度大于50ng/ul,体积大于20ul;
∙电泳检测条带单一。
三、质粒要求
∙质粒浓度大于100ng/ul,体积大于20ul;
∙建议使用相关试剂盒提取;
∙建议同时提供1ml菌液;
∙大质粒需要注明载体长度。
四、菌液模板要求
∙说明载体的抗性,我们提供Amp 、kan、chl、tet四种抗生素;
∙对于低拷贝质粒请直接提供1ug纯化质粒;
∙提供1ml左右的过夜培养菌液,加15%灭菌甘油,于离心管中封口保存,防止交叉污染或泄漏;∙建议尽量提供穿刺培养的菌种。
五、引物要求
∙浓度5umol/l,体积大于20ul;
∙随机引物和兼并引物不适合测序;
∙尽可能提供引物全序列,PCR退火温度;
∙T7、SP6、M13(+)、M13(-)、T3等通用引物我们免费提供。
样品类型及注意事项