12分光光度法测铁条件实验
邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁优秀文档
为从使吸3测 收）定曲稳线装定上，选溶将择电测液源定开铁时关的打适，开宜，波先使长仪，用器一预般该热选用溶最大液吸收润波长洗λm比ax为色测定皿波长内。 壁2～3次，被测溶液以装
3．试样中微量铁的测定
轻不轻测盖 定上时吸必至收须池将比盖比（色色将皿参暗皿比箱溶盖的液打置开3于，/4光使高路光）路度，切断为，以宜延长，光电并管使用用寿滤命。纸轻轻吸去比色皿外部的液 附打7开2吸2型收分池体光暗光室，度盖计（再简光要门用操自作动擦方关法闭镜：），纸使读小数 心擦拭透光面，直到洁净透明；
2．标准曲线的绘制和铁含量的测定 4）测定系列溶液时，通常按由稀到浓的顺序测定；
若由标准曲线上查出对应的铁含量为cx ， 则原试样中铁含量的浓度cFe计算：
cFe(g/mL)10.c0xmL
六、思考题
1．参比溶液的作用是什么？
2．溶液酸度对测定有何影响？ 3．制作标准曲线和进行其他条件实验时，加入试剂的
如果铁以Fe3+的形式存在，应预先加入盐酸羟胺将 Fe3+还原成Fe2+。
三、主要仪器与试剂
1．仪器 722型分光光度计、 10mL吸量管，50mL容量瓶。
2．试剂 (1) 铁标准溶液（含铁 100μg/mL）； (2) 0.1%邻菲罗啉溶液 ； (3) 5%盐酸羟胺溶液 ； (4) HAc-NaAc缓冲液（pH=4.6）。
模式调至[T]上，在调节[0% T]旋钮，使数字显示为“00.0”； ④调节T=100％。轻轻盖上吸收池盖（将参比溶液置于光路），
调节透光率[100% T] 旋钮，使数学显示为“100.0” ； ⑤测定。使读数模式调至[A]，轻轻拉动比色皿座架拉杆，使被
测溶液进入光路，此时显示屏所示数据为该溶液的吸光度A； ⑥测量完毕，取出比色皿洗净，晾干，存于专用盒内。关机，拔
可见分光光度法测定水样中微量铁的含量
实验三 可见分光光度法测定水样中微量铁的含量一、实验目的：1、掌握722型分光光度计构造及使用方法。
2、掌握标准曲线的绘制，并通过标准曲线测出水样中Fe3+的含量。
二、实验原理：在可见光区的吸光光度测定中，若被测组份本身有色，则可直接测定。
若被测组份本身无色或色很浅，则可利用显色剂与其反应（即显色反应），使生成有色化合物，进行吸光度的测定。
大多数显色反应是络合反应。
对显色反应的要求是：1、灵敏度足够高，一般选择产物的摩尔吸光系数大的显色反应，以适合于微量组份的测定；2、选择性好，干扰少或容易消除；3、生成的有色化合物组成恒定，化学性质稳定，与显色剂有较大的颜色差别。
在建立一个新的吸光光度方法时，为了获得较高的灵敏度和准确度，应从显色反应和测量条件两个方面，考虑下列因素：1、研究被测离子、显色剂和有色化合物的吸收光谱，选择合适的测量波长；2、溶液PH值对吸光度的影响；3、显色剂用量、显色时间、颜色的稳定性及温度对吸光度的影响；4、被测离子符合比尔定律的浓度范围；5、干扰离子的影响及其排除的方法；6、参比溶液的选择。
此外，对方法的精密度和准确度，也需进行试验。
铁的显色试剂很多，例如硫氰酸铵、巯基乙酸、磺基水杨酸钠等。
邻二氮菲是测定微量铁的一种较好的试剂，它与二价铁离子反应，生成稳定的橙红色络合物（l g K稳=21.3），最大吸收波长入max=510nm。
Fe2+ + 22+此反应很灵敏，摩尔吸光系数ε为1.1×104。
在PH2~9之间，颜色深度与酸度无关，颜色很稳定，在有还原剂存在的条件下，颜色深度可以保持几个月不变。
本方法的选择性很高，相当于铁含量40倍Sn2+、A13+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32-；20倍的Cr3+、Mn2+、VO3—、PO43—；5倍Co2+等均不干扰测定，所以此法应用很广。
分光光度法中，当入射光波长一定，溶液的温度一定，液层厚度一定时，根据Beer定律可得：A=K c即在一定条件下，吸光度与溶液的浓度成正比。
实验分光光度法测定络合物稳定常数
校正？ 4.若络合物的n不等1时，络合物稳定常数K
的计算公式应如何推导？
•2
•FUN
最后，R 设定波长：
•λ/GO
•波
TO
长
C
•ENTE R
•ENTE R
•ENTE R
消光值的测定
四个比色皿装入蒸馏水，放置于R
，待数显稳定后，按•OA1S0B0. 键，自动调零 。保留R比色皿，另%三T 个比色皿分别放置
于S1~S2，待数显稳定后，按•OA1S0B0. 键， 自动调零。S1~S2比色皿蒸馏%T水倒掉，依 次装入被测溶液，在•DAT 方式下，每按
本实验用硫酸铁铵和铁钛试剂摩 尔分数比为3.3/6.7的络合物，在723 分光光度计上寻找最大吸收峰所对应 的波长。在此波长下，硫酸铁铵、铁 钛试剂和缓冲溶液的吸收很小。
根据朗伯-比耳（Lambert-Beer）定律： 消光值D=εlC
其中：ε---吸光系数；
l----比色皿光径长度； C----络合物浓度。
x的合理范围，在该范围内取一x0进行迭代求x 。
药品仪器
1. 723型可见分光光度计； 2.硫酸铁铵（AR）、铁钛试剂（AR）
； 3. H2SO4溶液； 4.醋酸—醋酸铵缓冲溶液； 5.移液管、容量瓶；等等。
723型可见分光光度计
实验步骤
•预热723 分光光度
计
•设 定波
长
•配制硫酸 铁铵铁钛试
Fe3+(以下用M表示)与配位体铁钛试 剂(以下用L表示)在不同pH的溶液中形 成不同配位数、不同颜色的络合物。在 用缓冲溶液(醋酸--醋酸铵)保持溶液pH 不变的条件下，可用等摩尔递变法测定 络合物组成n和络合物稳定常数K。
微量铁的分光光度测定概述
文章编号:1006-446X(2005)09-0005-06微量铁的分光光度测定概述王爱荣 谷永庆 王少冷(河南科技学院化工系,河南 新乡453003)摘 要:对近年来我国测定微量铁的各种分光光度法发展状况及灵敏度、选择性、应用等方面进行了概述。
关键词:微量铁;分光光度法;灵敏度;选择性中图分类号:O65713 文献标识码:A铁在地壳中含量丰富,分布广泛。
铁又是人体不可缺少的微量元素之一,若机体铁的携氧能力受阻或铁的数量不足,则直接影响人体健康。
因此在食品、医药、卫生等方面对铁的含量测定均有严格要求,对铁的测定方法研究有着重大意义。
本文仅就我国微量铁的分光光度测定方法的新近发展状况及相应光度分析的灵敏度、选择性及应用等方面进行评述。
光度法测铁按其反应原理不同,可以分为以下几种方法。
1 二元配合物分光光度法111 磺基水扬酸分光光度法磺基水扬酸分光光度法是测定铁最普遍的方法,在pH9～11的条件下,铁(Ⅲ)与磺基水扬酸生成黄色的二元配合物[1]。
应用在循环水中铁含量测定,与邻菲罗啉光度法相比,测定灵敏度有不同程度的提高,也有很好的选择性,结果准确可靠。
其主要干扰元素有铜、铋、锰、钴、镍等。
112 邻二氮菲分光光度法在pH4～6的溶液中,邻二氮菲与铁(Ⅱ)生成桔红色二元络合物[2]。
邻二氮菲光度法是一种使用多年的方法,很好应用在瓜果蔬菜中对铁含量的测定。
瓜果蔬菜中的三价铁需要用盐酸羟胺将其还原为二价铁,二价铁与邻二氮菲形成络合物,此后可用分光光度法测定。
此法灵敏度较高,选择性好,也是比较广泛使用的铁测定方法。
113 亚硝基-R盐为显色剂的分光光度法亚硝基-R盐在pH4～6的溶液中与铁形成稳定的络合物[3],可在水溶液中直接进行测定。
在酸性镀铜液中铁是最常见的杂质,利用此法可以很好地测定微量铁,在720nm波长下,铁的质量浓度在012～210μg/m L范围内测得吸光度与质量浓度之间的关系遵守比耳定律,平均回收率为9814%。
铁测定方法
铁测定方法溶解性铁地壳中含铁量（Fe）约为 5.6%，分布很广，但天然水体中含量并不高。
实际水样中铁的存在形式是多种多样，可以在真溶液中以简单的水合离子和复杂的无机、有机络合物形式存在。
也可以存在于胶体，悬浮物和颗粒物中，可能是二价，也可能是三价的。
而且水样暴露于空气中，二价铁易被迅速氧化为三价，样品pH>3.5时，易导致高价铁的水解沉淀。
样品在保存和运输过程中，水中细菌的繁殖也会改变铁的存在形态。
样品的不稳定性和不均匀性对分析结果影响颇大，因此必须仔细进行样品的预处理。
铁及其化合物均为低毒性和微毒性，含铁量高的水往往带有黄色，有铁腥味。
如作为印染、纺织、造纸等工业用水时，则会在产品上形成黄斑，影响质量，因此这些工业用水的铁含量必须在0.1mg/L以下。
水中铁的污染来源主要是选矿、冶炼、炼铁、机械加工、工业电镀、酸洗废水等。
1．方法的选择原子吸收法操作简单、快速、结果的精密度、准确度好，适用于环境水样和废水样的分析；邻菲啰啉光度法灵敏、可靠，适用于清洁环境水样和轻度污染水的分析；污染严重，含铁量高的废水，可用EDTA络合滴定法。
避免高倍数稀释操作引起的误差。
2．水样的保存与处理测总铁，在采样后立刻用盐酸酸化至pH1保存；测过滤性铁，应在采样现场经0.45µm的滤膜过滤，滤液用盐酸酸化至pH1；测亚铁的样品，最好在现场显色测定，或按方法（二）操作步骤处理。
（一）火焰原子吸收分光光度法GB11911--89概述1．方法原理在空气—乙炔火焰中，铁的化合物易于原子化，可于波长248.3nm处测量铁基态原子对铁空心阴极灯特征辐射的吸收进行定量。
2．干扰及消除影响铁原子吸收法准确度的主要干扰是化学干扰。
当硅的浓度大于20 mg/L时，对铁的测定产生负干扰；这些干扰的程度随着硅浓度的增加而增加。
如试样中存在200 mg/L氯化钙时，上述干扰可以消除。
一般来说，铁的火焰原子吸收法的基体干扰不太严重，由分子吸收或光散射造成的背景吸收也可忽略。
分光光度法测定水中铁离子含量
分光光度法测定水中铁离子含量专业项目课程课例项目十二分光光度法测定水中铁离子含量一、项目名称：分光光度法测定水中铁离子含量二、项目背景分析课程目标：本课程是培养分析化学操作技能和操作方法的一门专业实践课，以定量分析的基本理论为基础，以实验强化理论，以期提高化工工作者的分析操作能力。
功能定位：在定量分析中我们常常用到分光光度分析法，它具有操作简便、快速、准确等优点，在工农业生产和科学研究中具有很大的实用价值。
是仪器分析的基础实验，也是一种重要的定量分析方法。
分光光度法测定水中铁离子含量的测定项目综合训练了学生分光光度计使用、系列标准溶液配制、标准曲线绘制等多个技能。
学生能力：学生通过相关基础学科的学习已经具备了相应的化学知识和定量分析知识，也具备一定的独立操作和思维能力。
项目实施条件：该项目是仪器分析的基础实验，一般中职学校具备相关的实训实习条件，学生有条件完成相应的实习任务。
三、教学目标1、了解721可见分光光度计的构造2、了解分光光度法测定原理3、掌握721可见分光光度计的操作方法4、掌握分光光度法测定分析原始记录的设计5、掌握分光光度法测定分析报告的设计6、掌握分光光度法测定水中铁离子含量的测定方法7、掌握分光光度法测定水中铁离子含量的分析原始记录和分析报告的填写四、工作任务1、工作任务描述2、工作任务内容组织五、参考方案参考方案一1、邻二氮杂菲-Fe2+ 吸收曲线的绘制用吸量管吸取铁标准溶液（20μg/mL）0.00、2.00、4.00mL，分别放入三个50mL容量瓶中，加入1mL 10%盐酸羟胺溶液，2mL 0.1%邻二氮杂菲溶液和5mL HAc-NaAc缓冲溶液，加水稀释至刻度，充分摇匀。
放置10min，用3cm比色皿，以试剂空白（即在0.0mL 铁标准溶液中加入相同试剂）为参比溶液，在440～560nm波长范围内，每隔20～40nm测一次吸光度，在最大吸收波长附近，每隔5～10nm测一次吸光度。
分光光度法测定铁的含量实验报告
分光光度法测定铁的含量实验报告一、实验目的1、掌握分光光度法测定铁含量的基本原理和方法。
2、学会使用分光光度计进行定量分析。
3、熟悉标准曲线的绘制和应用。
二、实验原理分光光度法是基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法。
在分光光度法中，通常选择一定波长的单色光通过含有被测物质的溶液，测量溶液对该波长光的吸光度，从而确定物质的含量。
本实验中，利用邻二氮菲与二价铁离子在 pH 为 2~9 的条件下形成稳定的橙红色配合物，该配合物在 510nm 处有最大吸收峰。
通过测定不同浓度的铁标准溶液在 510nm 处的吸光度，绘制标准曲线，然后测定未知溶液的吸光度，根据标准曲线计算出未知溶液中铁的含量。
三、实验仪器与试剂1、仪器722 型分光光度计容量瓶（50mL、100mL）移液管（1mL、2mL、5mL、10mL）吸量管（5mL、10mL）比色皿烧杯（50mL、100mL）玻璃棒电子天平2、试剂硫酸亚铁铵（NH₄）₂Fe(SO₄)₂·6H₂O邻二氮菲（15g/L）盐酸羟胺（100g/L）1mol/L 盐酸溶液1mol/L 氢氧化钠溶液四、实验步骤1、标准溶液的配制准确称取 03474g 硫酸亚铁铵（NH₄）₂Fe(SO₄)₂·6H₂O于小烧杯中，用 10mL 1mol/L 盐酸溶液溶解，转移至 100mL 容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，得到浓度为 01000mg/mL 的铁标准储备液。
用移液管分别吸取 000mL、200mL、400mL、600mL、800mL、1000mL 铁标准储备液于 50mL 容量瓶中，各加入 1mL 100g/L 盐酸羟胺溶液，摇匀，放置 2min 后，再加入 2mL 15g/L 邻二氮菲溶液和 5mL 1mol/L 氢氧化钠溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，得到浓度分别为000μg/mL、400μg/mL、800μg/mL、1200μg/mL、1600μg/mL、2000μg/mL 的铁标准系列溶液。
12-水样中铁含量的测定
水样中铁含量的测定1.方法提要试液用盐酸羟胺还原，在pH=5的醋酸-醋酸铵缓冲液中，铁(Ⅱ) 与邻二氮菲形成橙红色的配合物，于分光光度计波长510 nm处测量其吸光度。
2.试剂2.1盐酸(1+1)2.2盐酸羟胺溶液(100g/L，现用现配)2.3邻二氮菲溶液(1g/L，现用现配)2.4铁标准贮备液：100ug/mL准确称取0.8634g铁盐NH4Fe(SO4)2•12H2O，置于烧杯中，加入HCl(1+1) 20mL和少量水，溶解后，定量转入1L容量瓶中，加水定容，摇匀。
2.5铁标准使用液：10ug/mL移取5.00 ml铁标准贮备液(2.4)于50 mL容量瓶中，加HCl(1+1) 1mL，以水定容，摇匀。
3.仪器722S型分光光度计，配有2个1cm比色皿4.分析步骤4.1 吸收曲线的绘制按照4.2配制溶液，选用1# 和3# 容量瓶的溶液来测定吸收曲线。
用1cm比色皿装液，以1# 溶液为参比液，3#做吸收，于分光光度计中，在440-560nm波长范围内，分别测定不同波长下3#的吸光度A。
开始的波长间距为20nm，初步确定某波长下有最大的A值，然后在该波长左右10nm处测定A，最后是5nm间距。
找出最大吸收波长，作为工作波长λmax。
吸收曲线4.2标准曲线的绘制选用50mL容量瓶8个，试漏，洗净，依次编号1-8#。
按照下表顺序加入下列溶液后，用水定容，摇匀。
放置5min。
用1cm比色皿，以1# 溶液为参比液，于分光光度计中，在4.1中选定的λmax下测定2#，4-8#容量瓶溶液的A值。
5.测试程序1)机器开盖预热30min；2)将待测液装入比色池中，一个装入1#，一个装入3#溶液，分别放入比色架上；3)调节波长440nm；4)1号置于光路上(做参比)；5)通过按键“模式”将光点置于透射比；6)开盖调节0%；关闭暗盒盖调节100%；7)将光点至于“吸光度”，显示应为0.0008)推动手柄，将3#置于光路上，记录显示的读数，即吸光度A值。
综合实验报告 邻二氮菲分光光度法测定微量铁
邻二氮菲分光光度法测定微量铁（一）一、实验目的⒈学习确定实验条件的方法，掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理；⒉掌握721型分光光度计的使用方法，并了解此仪器的主要构造。
二、实验原理⒈确定适宜的条件的原因：在可见光分光光度法的测定中，通常是将被测物与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测其吸光度，进而求得被测物质的含量。
因此，显色条件的完全程度和吸光度的测量条件都会影响到测量结果的准确性。
为了使测定有较高的灵敏度和准确性，必须选择适宜的显色反应条件和仪器测量条件。
通常所研究的显色反应条件有显色温度和时间，显色剂用量，显色液酸度，干扰物质的影响因素及消除等，但主要是测量波长和参比溶液的选择。
对显色剂用量和测量波长的选择是该实验的内容。
⒉如何确定适宜的条件：条件试验的一般步骤为改变其中一个因素，暂时固定其他因素，显色后测量相应溶液吸光度，通过吸光度与变化因素的曲线来确定适宜的条件。
⒊本试验测定工业盐酸中铁含量的原理：根据朗伯－比耳定律：A=εbc。
当入射光波长λ及光程b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。
只要绘出以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标的曲线，测出试液的吸光度，就可以由曲线查得对应的浓度值，即工业盐酸中铁的含量。
⒋邻二氮菲法的优点：用分光光度法测定试样中的微量铁，目前一般采用邻二氮菲法，该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点。
⒌邻二氮菲法简介：邻二氮菲为显色剂，选择测定微量铁的适宜条件和测量条件，并用于工业盐酸中铁的测定。
⒍邻二氮菲可测定试样中铁的总量的条件和依据：邻二氮菲亦称邻菲咯啉(简写phen)，是光度法测定铁的优良试剂。
在pH=2～9的范围内，邻二氮菲与二价铁生成稳定的桔红色配合物((Fe(phen)3)2+)。
此配合物的lgK 稳= 21.3，摩尔吸光系数ε510 =1.1×104 L·mol-1·cm-1，而Fe3+能与邻二氮菲生成3∶1配合物，呈淡蓝色，lgK稳=14.1。
实验十二重金属含量测定
试验过程
• 1标准曲线的制作 • 测定前先让仪器稳定。可参考仪器说明书选择
测定Cu、Ni的最佳条件。 • 测定浓度为10μg/ml的标液多次，直至A的读数
改变不大，读出六个吸光度值并计算其标准偏差 (σ)=(x－y)×0.40。x和y分别是6个读数中最大与最 小的值，0.40是计算6个数据值时的因子。
(c)计算
• 样品溶液的读数应先扣除空白值，然后从校准曲 线上查出相应的金属含:μg/ml。
• µg/ml Ni(Cu)=(C×V)/W • C=从曲线上读出的金属含量，以μg/ml表示，V=
样品液的最终体积 (50ml),W=样品量，以g表示。
结果报告
试验报告应包括下列内容： a. 使用的方法； b. 测定的结果(取小数点后一位)； c. 本方法中未规定的或另加的操作； d. 试样的名称和产地； e. 试验日期 f. 操作人员。
99.99%Ni溶解于20ml HNO3中，冷却，用H2O稀 释至1L。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
• (c)带基体的标准溶液：配制含有主要金属基体成
分，浓度分别为0.0，0.2，0.4，0.8，1.6，2.0，4.0， 8.0及10.0μg/ml的Ni和Cu标液: • (1)适合于3g茶叶的基体每ml含180μgCa100μgMg和 40μgAl，HClO4浓度为8%(v/v)。 • (2)适合于6g速溶茶的基体——每m1含7000μgK， 70μgNa，700μgMg和1300μgCa，HNO3浓度(1+9)。
2、仪器
• 原子吸收分光光度计——要求能检出水溶 液中0005μg/ml Cu或Ni的浓度或浓度变化 。
3、试剂
• (a)铜标准溶液：1000μg/ml。将1.000g
实验12-铁的比色测定
实验12-铁的比色测定
本实验是一种基于比色法的定量分析方法，主要用于测定水样中铁离子的含量。
本实
验的基本原理是铁离子在酸性条件下与2,4,6-三(2-吡啶卡宾-5-磺酸钠)联合形成紫色络
合物，通过比色法测定铁离子的含量。
实验步骤：
1.称取一定量的待测水样，加入适量的稀盐酸调节pH值，使其达到5.5-6.5之间，
注意不要加过量的稀盐酸。
2.加入2,4,6-三(2-吡啶卡宾-5-磺酸钠)溶液，混匀均匀，使铁离子与络合剂充分反应，生成紫色络合物。
3.将反应液转移到比色皿中，使用分光光度计在546nm处进行比色测定。
注意，按照
常规比色法的要求，反应液浓度的范围应该是0.1毫摩尔到50毫摩尔。
4.比色测定完毕后，根据标准曲线确定反应液中铁离子的浓度。
标准曲线的制备方法
是使用铁离子标准溶液，按照1, 2, 4, 6, 8, 10毫摩尔浓度递增的顺序，逐一测量比色值，并绘制出比色值和铁离子浓度之间的关系图。
据此可以精确确定待测水样中铁离子的
含量。
实验注意事项：
1.实验中要保证反应液的PH值在5.5-6.5之间，过高或过低都会影响到实验结果的
准确性。
2.实验操作时，仪器的清洗、测量和计量要注意避免干扰。
尤其是铁离子是一种容易
被氧化的元素，因此需要密封保存，避免暴露在空气中。
3.在进行的时候应保证溶液中充分混匀，避免产生异相反应导致结果的存在误差。
4.实验过程中使用的试剂应是高纯度试剂，以此保证实验结果的准确性。
本实验准确、简便、安全、快速，能够很好地应用于制药、食品、生物、环境等领域。
实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁【最新】
实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、目的要求1．学习723型分光光度计的使用方法。
2．学习测绘吸收曲线的方法。
3．掌握利用标准曲线进行微量成分测定的基本方法和有关计算。
二、实验原理微量铁的测定有邻二氮菲法、硫代甘醇酸法、磺基水杨酸法、硫氰酸盐法等。
由于邻二氮菲法的选择性高、重现性好，因此在我国的国家标准（GB）中，许多冶金产品和化工产品中铁含量的测定都采用邻二氮菲法。
邻二氮菲又称邻菲罗啉（简写Phen），在pH值为2—9的溶液中，Fe2+离子与邻二氮菲发生下列显色反应：Fe2+ + 3Phen = [Fe（Phen）3]2+生成的橙红色配合物非常稳定，lgK稳=21.3（20℃），其最大吸收波长为510nm，摩尔吸光系数ε510=1.1×104 L•cm-1•mol-1。
显色反应的适宜pH值范围很宽，且其色泽与pH值无关，但为了避免Fe2+离子水解和其它离子的影响，通常在pH值为5的HAc-NaAc缓冲介质中测定。
邻二氮菲与Fe3+离子也能生成淡篮色配合物，但其稳定性较低，因此在使用邻二氮菲法测铁时，显色前应用还原剂将Fe3+离子全部还原为Fe2+离子。
本实验采用盐酸羟胺为还原剂：4Fe3+ +2NH2OH = 4Fe2+ + 4H++ N2O+ H2O邻二氮菲与Fe2+离子反应的选择性很高，相当于含铁量5倍的Co2+、Cu2+离子，20倍量的Cr3+、Mn2+、V（Ⅴ）、PO43-离子，40倍量的Al3+、Ca2+、Mg2+、Sn2+、Zn2+、SiO32-离子都不干扰测定。
利用分光光度法进行定量测定时，通常选择吸光物质（即经显色反应后产生的新物质）的最大吸收波长作为入射光波长，这样测得的摩尔吸光系数ε值最大，既测定的灵敏度最高。
为了找出吸光物质的最大吸收波长需绘制吸收曲线。
测定吸光物质在不同波长下的吸光度A值，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，描点绘图即得吸收曲线，曲线最高点所对应的波长为该吸光物质的最大吸收波长。
12-水样中铁含量的测定
水样中铁含量的测定1.方法提要试液用盐酸羟胺还原，在pH=5的醋酸-醋酸铵缓冲液中，铁(Ⅱ) 与邻二氮菲形成橙红色的配合物，于分光光度计波长510 nm处测量其吸光度。
2.试剂2.1盐酸(1+1)2.2盐酸羟胺溶液(100g/L，现用现配)2.3邻二氮菲溶液(1g/L，现用现配)2.4铁标准贮备液：100ug/mL准确称取0.8634g铁盐NH4Fe(SO4)2•12H2O，置于烧杯中，加入HCl(1+1) 20mL和少量水，溶解后，定量转入1L容量瓶中，加水定容，摇匀。
2.5铁标准使用液：10ug/mL移取5.00 ml铁标准贮备液(2.4)于50 mL容量瓶中，加HCl(1+1) 1mL，以水定容，摇匀。
3.仪器722S型分光光度计，配有2个1cm比色皿4.分析步骤4.1 吸收曲线的绘制按照4.2配制溶液，选用1# 和3# 容量瓶的溶液来测定吸收曲线。
用1cm比色皿装液，以1# 溶液为参比液，3#做吸收，于分光光度计中，在440-560nm波长范围内，分别测定不同波长下3#的吸光度A。
开始的波长间距为20nm，初步确定某波长下有最大的A值，然后在该波长左右10nm处测定A，最后是5nm间距。
找出最大吸收波长，作为工作波长λmax。
吸收曲线4.2标准曲线的绘制选用50mL容量瓶8个，试漏，洗净，依次编号1-8#。
按照下表顺序加入下列溶液后，用水定容，摇匀。
放置5min。
用1cm比色皿，以1# 溶液为参比液，于分光光度计中，在4.1中选定的λmax下测定2#，4-8#容量瓶溶液的A值。
5.测试程序1)机器开盖预热30min；2)将待测液装入比色池中，一个装入1#，一个装入3#溶液，分别放入比色架上；3)调节波长440nm；4)1号置于光路上(做参比)；5)通过按键“模式”将光点置于透射比；6)开盖调节0%；关闭暗盒盖调节100%；7)将光点至于“吸光度”，显示应为0.0008)推动手柄，将3#置于光路上，记录显示的读数，即吸光度A值。
邻菲罗啉分光光度法测定铁的含量
邻菲罗啉分光光度法测定铁的含量邻菲罗啉分光光度法测定⽔样中的铁⼀、实验⽬的：1、掌握邻菲罗啉分光光度法测定微量铁的原理和⽅法；2、学会标准曲线的绘制⽅法及其使⽤。
⼆、原理：亚铁离⼦（Fe2+）在pH=3~9时与邻菲罗啉⽣成稳定的橙红⾊络合物，应⽤此反应可⽤⽐⾊法测定铁。
橙红⾊络合物的吸光度与浓度的关系符合朗伯-⽐⽿定律。
若⽤还原剂（如盐酸羟胺）把⾼铁离⼦还原为亚铁离⼦，则此法还可测定⽔中的⾼价铁和总铁的含量。
三、仪器：721型分光光度计、1cm⽐⾊⽫、具赛⽐⾊管（50ml）、移液管、吸量管、容量瓶等。
四、试剂：1、铁贮备液（100µg/mL）：准确称取0.7020克分析纯硫酸亚铁铵[（NH4）2Fe（SO4）2·6H2O]于100毫升烧怀中（或0.8640g分析纯的NH4Fe(SO4)2·12H2O，其摩尔质量为482.18g/mol），加50毫升1+1 H2SO4，完全溶解后，移⼊1000ml 的容量瓶中，并⽤⽔稀释到刻度，摇匀，此溶液中Fe的质量浓度为100.0µg/mL。
（实验室准备好）2、铁标准使⽤液（20µg/mL）：准确移取铁贮备液20.00ml于100ml容量瓶中，⽤⽔稀释⾄刻度，摇匀。
此溶液中Fe2+的质量浓度为20.0µg/mL。
（学⽣配制）3、0.5%邻菲罗啉⽔溶液：配制时加数滴盐酸能助溶液或先⽤少许酒精溶解，再⽤⽔稀释⾄所需体积。
（临⽤时配制）4、10%盐酸羟胺⽔溶液：5、醋酸-醋酸钠缓冲溶液（pH=4.6）：称取40克纯醋酸铵加到50毫升冰醋酸中，加⽔溶解后稀释⾄100毫升。
五、测定步骤：1、标准曲线的绘制：（1）分别吸取铁的标准溶液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00ml于7⽀50ml⽐⾊管中，加⽔⾄刻度；（2）依次分别加⼊10%盐酸羟胺溶液1ml，混匀，加⼊5ml醋酸－醋酸铵缓冲溶液，摇匀，加⼊0.5%邻菲罗啉溶液2ml，摇匀，（3）放置15分钟后，在510nm波长处，⽤1cm⽐⾊⽫，以空⽩作为参⽐，测定各溶液的吸光度。
分光光度法测定水中铁的影响因素讨论
分光光度法测定水中铁的影响因素讨论发表时间：2019-01-21T14:41:15.390Z 来源：《防护工程》2018年第31期作者：何建华[导读] 水中铁元素分布范围较为广泛，其存在形式也较为繁多，而我国对水中铁元素的限值要求进行明确规定。
神华榆林能源化工有限公司 719000摘要：文章主要分析了分光光度法对水中铁的影响因素，讨论了水中总铁含量的测量方式以及测定的最佳条件，利用实验的方式分析了解了相关影响因素。
关键词：分光光度法；测定；水；铁；影响因素水中铁元素分布范围较为广泛，其存在形式也较为繁多，而我国对水中铁元素的限值要求进行明确规定，也对对不同类型之下的地下水限制要求进行了明确的规定。
但是在工业生产中铁的腐蚀会导致出现水垢等问题，水垢等问题会影响生产作业，导致出现各种安全隐患问题。
加强对水中铁测定中影响因素的分析，通过分光光度法测定水中铁的影响因素，可以为实践中提供有效参考。
1.分光光度法测定水中铁基础原理分光光度法就是利用测定被测物质在特定的波长位置或者在特定的波长范围中光的吸收度，对物质进行定性以及定量分析的方式。
在水中铁的测定分析中应用此种方式具有高灵敏、操作简单便捷、快速的特征，分光光度法也是一种在生物化学实验中较为常见的方式。
在分光光度计中，将不同波长的光持续的照射在特定浓度的样品溶液之中，可以获得与不同波长对应的吸收强度数值。
在水中铁的测定中其基本原理具体如下：1.1选择吸收利用物质与光作用中的选择吸收的特性进行处理，一些有色物质颜色就是此物质与光共同作用之下产生的，是有色溶液呈现的颜色就是因为溶液中含有的物质对光的一种选择性吸收导致的。
而不同的物质因为分子结构具有一定的差异，在不同波长的作用之下吸收能力也不同。
对此，有此种特征结构的结构基团，具有选择吸收特性的最大实收波长的特征，就会形成了最大吸收峰，这样就会产生特有的吸收光谱。
而相同的物质因为其自身的含量具有一定的差异特征，其对光的吸收程度也是不同的。
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显色温度、溶剂选择
显色温度 大多数显色反应是在常温下进行的，有些反应必须在较高温 度下。 绘制工作曲线和进行样品测定时应该使溶液温度保持一致。
溶剂
有机溶剂常常可以降低有色物质的离解度，增加有色物质的溶解， 从而提高了测定的灵敏度
学生实验操作
准备工作 绘制吸收曲线选择测量波长 显色剂用量试验 溶液pH值的影响 结束工作 注意事项：
显色过程中，每加入一种试剂均要摇匀。 改变波长时应重新校正透射比为100％。 保持仪器的测定条件一致。
总结
请同学们归纳总结今天的实验的收获，尤其是对未知问题 如何采用分析方法？ 最大收获：
入射光波长
一般情况下，应选择被测物质的最大吸收波长的光为入射光。 干扰物质存在时， 依据“吸收最大，干扰最小”。 选择方法：
绘制光的吸收曲线确定最佳波长。
参比溶液、吸光度范围
参比溶液的选择 溶剂参比 试剂参比 试液参比 褪色参比 吸光度范围
测量吸光度过高或过低，误差都很大， 一般适宜的吸光度范围是0.2～0.8。
吸光度与显色剂浓度的关系曲线
溶液酸度
确定方法 选择合适的酸度，可以在不同pH值缓冲溶液中，加入等量的被测 离子和显色剂，测其吸光度，作A-pH曲线，由曲线上选择合适的 pH范围。
吸光度A与pH关系曲线
稳定性、干扰消除
稳定性实验 绘制A对t的曲线，选择吸光度平坦的部分确定最佳的显色时间。 干扰的消除
问 题
工作曲线测铁实验中所选择的工作波长，显色剂用量等分析条件 的依据是什么？ 实验中，经常需要通过实验摸索最佳的显色条件和测量条件， 取得较高的灵敏度和准确度,主要条件包括有：
入射波长 显色剂用量 有色溶swf) 配制一系列被测元素浓度相同不同显色剂用量的溶液，分别测其吸 光度，作A-CR曲线，找出曲线平台部分，选择一合适用量即可。
单元技能训练
分光光度法测铁条件实验
课程任务
职业关键能力： 学习新知识的能力；根据实际问题提出解决 问题的方案。 知识目标： 显色条件、测定条件的选择；测定误差的影响因素
专门技能： 选择合适的显色条件和测量条件 素质目标： 培养学生精益求精的学习态度与实验态度；培养学 生对所做实验结果进行自我评价的能力；培养学生团队合作与竞争 的能力。
保持其它量不变，仅仅改变某一个量时，这种研究方法 称单因素法。单因素法是科研工作中研究某个量对实验结 果影响因素的有效手段之一。