实验室培养基配方
实验室常用培养基的配制方法
实验室常用培养基的配制方法在实验室中，培养基是微生物生长和繁殖的重要物质基础，正确配制培养基对于实验结果的准确性和可靠性至关重要。
不同的微生物对营养物质的需求有所不同，因此需要根据实验目的和微生物的特性选择合适的培养基，并掌握正确的配制方法。
接下来，我将为大家详细介绍几种实验室常用培养基的配制方法。
一、LB 培养基（LuriaBertani 培养基）LB 培养基是一种常用于培养细菌的通用培养基，其成分包括胰蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。
配制 1L 的 LB 培养基，所需材料如下：胰蛋白胨 10g酵母提取物 5g氯化钠 10g配制步骤：1、称取上述成分，将其放入一个干净的 1L 烧杯中。
2、加入约800ml 的去离子水，用玻璃棒搅拌，直至溶质完全溶解。
3、用去离子水将溶液定容至 1L。
4、调节 pH 值至 70（通常使用 1mol/L 的 NaOH 或 1mol/L 的 HCl 进行调节）。
5、将培养基分装到锥形瓶中，每瓶的装液量不要超过锥形瓶体积的三分之二。
6、盖上瓶塞，用报纸或牛皮纸包扎瓶口。
7、放入高压灭菌锅中，在 121℃下灭菌 20 分钟。
二、牛肉膏蛋白胨培养基牛肉膏蛋白胨培养基是一种常用的细菌培养基，适用于多种细菌的培养。
配制 1L 该培养基，需要准备以下材料：牛肉膏 3g蛋白胨 10g氯化钠 5g具体配制步骤如下：1、称取牛肉膏、蛋白胨和氯化钠，放入干净的烧杯中。
2、加入适量的去离子水，搅拌溶解。
3、定容至 1L，搅拌均匀。
4、用 1mol/L 的 NaOH 或 HCl 调节 pH 至 72 74 之间。
5、分装、包扎、灭菌，方法同上。
三、马铃薯葡萄糖培养基（PDA 培养基）PDA 培养基常用于培养真菌，尤其是霉菌。
配制 1L 的 PDA 培养基，材料如下：马铃薯 200g葡萄糖 20g琼脂 15 20g配制流程：1、将马铃薯去皮，切成小块，称取 200g，放入锅中，加入约1000ml 去离子水，煮沸 20 30 分钟，直到马铃薯块变软。
实验室平板培养基配方
实验室用平板培养基配方
1.MRS培养基：
液体：蛋白胨 10g 牛肉膏 10g 柠檬酸铵2g 乙酸钠 5g(无水乙酸钠3g) 酵母粉 5g 葡萄糖 20g
磷酸氢二钾 2g 吐温 1.0ml
盐液甲 5.0ml 蒸馏水： 1000ml
溴甲酚紫 0.8g
[备注]盐液甲的配制：MgSO
4.7H
2
O 11.5g ，MnSO
4
.4H
2
O 2.8g
蒸馏水 100ml
固体：在MRS液体培养基中加入1.6%~2%的琼脂
PH=6.5~7.0 121℃灭菌30min
2.YB培养基：
液体:蛋白胨 5g 葡萄糖 5g 酵母粉 5g 磷酸氢二钾4g
3.08%硫酸锰 1.0ml 蒸馏水 1000ml
固体：在YB液体培养基中加入1.4%~1.7%的琼脂
PH=6.0~7.0 121℃灭菌30min
3.PYD培养基：
液体：酵母粉 10g 蛋白胨 20g
葡糖糖20g 蒸馏水1000ml
固体：在PYD液体培养基中加入2%的琼脂
[备注]灭菌时要将葡萄糖和蛋白胨、酵母粉分开，溶解后单独灭菌，防止三者在高温下发生化学反应。
PH自然121℃灭菌30min
中国农业大学动物科技学院
饲料生物技术实验室
张得龙
2013.10.31。
实验七 培养基的配制和灭菌
（二）培养基灭菌
培养基分装好后，塞上棉塞，外面再包一牛皮纸，便 可灭菌。灭菌的时间和温度按各培养基规定进行，以保证 灭菌效果和不损坏培养基的必要成分。培养基经灭菌后， 可放在37恒温箱培养24小时，无菌者方可使用。 在实验室里用得最多的加热灭菌法是高压蒸汽灭菌 和干热灭菌。一般培养基和水等用高压蒸汽灭菌，而玻璃 器皿常用干热灭菌。蒸汽灭菌为105-121℃，15-20分钟， 干热灭菌为160-170℃，1-2小时。目的都是使细菌体内蛋 白质凝固变性而达到灭菌的目的。 在同一温度下，湿热杀菌效力比干热大，因为在湿 热情况下，菌体吸收水分，使蛋白质易于凝固，同时湿热 穿透力强，而且当蒸汽与被灭菌物体接触凝成水分时，又 可放出热量，使温度迅速增高，从而增加灭菌效力。
高压蒸汽灭菌步骤如下： 高压蒸汽灭菌步骤如下：
灭菌器内加入一定量的水，将包扎好的物品放入其中。 1. 灭菌器内加入一定量的水，将包扎好的物品放入其中。 接通电源， 2. 接通电源，进行加热 排除高压锅内的空气，可将排气阀打开， 3. 排除高压锅内的空气，可将排气阀打开，待排出大气后 关闭排气阀；或关闭排气阀，待压力上升到0.5kg/cm2 0.5kg/cm2时再 关闭排气阀；或关闭排气阀，待压力上升到0.5kg/cm2时再 打开排气阀，待压力回复到0时再关闭排气阀。 打开排气阀，待压力回复到0时再关闭排气阀。 当压力达1.05kg/cm2 1.05kg/cm2时 此时灭菌器内的温度为121℃ 121℃， 4. 当压力达1.05kg/cm2时，此时灭菌器内的温度为121℃， 维持20min 对热不稳定的培养基如含有葡萄糖、 20min。 维持20min。对热不稳定的培养基如含有葡萄糖、氨基酸等 物时，应适当降低压力，延长时间。 物时，应适当降低压力，延长时间。 灭菌时间一到，切断电源，待压力降至零时， 5. 灭菌时间一到，切断电源，待压力降至零时，才能打开 排气阀，然后打开灭菌器盖， 排气阀，然后打开灭菌器盖，取出物品
微生物实验室常见20种培养基配方大全
微生物实验室培养基配方大全一、糖发酵管成分：牛肉膏 5g蛋白胨 10g氯化钠 3g磷酸氢二钠2g0.2％滇麝香草酚蓝溶液 12mL蒸馏水 1000mLPH 7.4制法1. 葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5％加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内，121℃高压灭菌15min。
2. 其他各种糖发酵管可按上述成分配好后，分装每瓶1000 mL，121℃高压灭菌15min。
另将各种糖类分别配好10%溶液，同时高压灭菌。
将5mL糖溶液加入于100 mL培养基内，以无菌操作分装小试管。
蔗糖不纯，加热后会自行水解者，应采用过滤法除菌。
从琼脂斜面上挑取小量培养物接种，于36℃±1℃培养，一般观察2～3d。
迟缓反应需观察14~30d。
二、乳糖胆盐发酵管成分：蛋白胨 20g猪胆盐（或牛、羊胆盐）5g乳糖 10g0.04%滇甲酚紫水溶液 25mL蒸馏水 1000mL制法：将蛋白胨，胆盐及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，分装每管10 mL，并放入一个小倒管，115℃高压灭菌15min。
双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外，其他成分加倍。
三、5％乳糖发酵管成分：蛋白胨 0.2g氯化钠 0.5g乳糖 5g2%溴麝香草酚蓝水溶液 1.2mL蒸馏水 100mLpH 7.4制法：除乳糖以外的各成分：溶解于50mL蒸馏水内，校正pH。
将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内，分别灭菌121 ℃ 15min，将两液混合，以无菌操作分装于灭菌小试管内。
在此培养基内，大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于ld内发酵。
四、缓冲葡萄糖蛋白胨水（MR和VP试验用）成分：磷酸氢二钾 5g多胨 7g葡萄糖 5g蒸馏水 1000mL制法：溶化后校正pH，分装试管，每管1mL ，121℃高压灭菌15min。
甲基红（MR）试验：自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中，于36±1℃培养2～5d，哈夫尼亚菌则应在22～25℃培养。
滴加甲基红试剂一滴，立即观察结果。
实验室常用培养基
．常用培养基的制备（1）马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）和马铃薯蔗糖琼脂（PSA）培养基培养真菌最常用的培养基，成分如下：去皮马铃薯200 g 葡萄糖或蔗糖20g琼脂15－20g 水1000 ml配制方法：将马铃薯洗净去皮，称取200 g，切成小块（不必大小）放入锅中，加水1000ml，煮沸半小时，稍冷后用双层纱布过滤，在滤液中加蔗糖20g，加水补足到1000ml。
配成的培养基一般呈酸性，用于培养真菌，可以不必调pH。
如配制固体培养基，在加蔗糖前先加15－20g 琼胶加热熔化，最后加入蔗糖，混匀并加水补是至1000ml，趁热分装在试管或三角瓶中。
标准试管（15×150mm）分装量如下：一般用作斜面培养的每试管装培养基3－5ml，用作平面培养的每试管约10ml，加棉花塞后灭菌。
培养细菌用的培养基必须调节其酸度值到中性（pH7．0左右）。
（2）牛肉汁蛋白胨培养基（NA）是培养细菌最常用的培养基，又称营养琼脂或肉汤培养基。
成分如下：酵母浸膏1g 牛肉浸膏3g蛋白胨5-10g 蔗糖（或葡萄糖）l0g琼脂15-20g 水1000mlpH7.0配制方法：称取牛肉浸膏及蛋白胨溶于少量热水中备用，在其余水中加入琼脂，加热溶化后将牛肉浸膏和蛋白胨溶液加入混匀，然后加水补足到1000 ml，用NaOH或HCL调整至pH7.0，趁热分装，加棉花塞后灭菌。
（3）玉米叶培养基取一定数量的玉米叶片，洗净后剪成1㎝2左右的小块，放在250ml的三角瓶中，盛放量一般为三角瓶的1／3，然后加少量的水以保持湿润，加棉花塞后灭菌。
天然培养基一般不必调整pH。
（4）查氏（Czapek）培养基查氏培养基是一种组合培养基，其成分如下：NaNO3 2g K2HPO4 1 gMgSO4·7H2O 0．5g KCl 0．5gFeSO4 0．01g 蔗糖30g水1000ml（5）灭菌水的配制蒸馏水（或自来水）经过灭菌处理即成灭菌水，是实验室用量最大的必备品之一，常用于病原菌的分离、稀释、保湿等。
培养基的制作过程
培养基的制作过程培养基是细菌、真菌、细胞等生物体在实验室中进行培养和繁殖所必需的营养物质和环境条件的混合物。
制作培养基是生命科学实验中非常重要的一步，下面将从原材料、制备步骤、注意事项等方面详细介绍培养基的制作过程。
一、原材料1. 离子交换水或双蒸水：用于配制培养基时稀释各种试剂，保证试剂的纯度。
2. 蛋白胨：是从动物肉类或鱼虾等蛋白质含量高的食品中提取出来的，是常用的一种氮源，可供微生物生长使用。
3. 酵母提取物：是从酵母菌体中提取出来含有丰富氮源和多种维生素B族成分的营养液，常用于培养真菌和酵母等微生物。
4. 葡萄糖：是微生物进行代谢反应所必需的碳源。
5. 磷酸盐缓冲液：用于调节培养基pH值，以维持适宜的生长环境。
6. 硫酸镁：是微生物进行代谢反应所必需的微量元素，同时也可用于调节培养基pH值。
7. 染色剂：如溴甘酚、溴蓝等，用于检测微生物在培养基上的生长情况和形态特征。
二、制备步骤1. 称取所需试剂：按照配方要求，精确称取每种试剂，并将其分别加入离子交换水或双蒸水中。
2. 搅拌溶解：将试剂加入水中后，使用磁力搅拌器将其充分搅拌溶解，直至无明显沉淀出现。
3. 调节pH值：使用磷酸盐缓冲液调节培养基的pH值，通常在7.0-7.4之间为宜。
如果pH值过高或过低，会影响微生物的生长和代谢反应。
4. 灭菌：使用高压灭菌器或自制压力锅对培养基进行灭菌处理。
灭菌时间一般为20-30分钟，在121℃下进行高温高压处理。
灭菌后要及时冷却到室温。
5. 包装保存：将制好的培养基分装到无菌瓶中，并在瓶口处加上无菌棉塞或铝箔封口，避免外界污染。
储存温度通常为4℃，可保持较长时间的稳定性。
三、注意事项1. 原材料质量要求高：制备培养基的原材料必须是纯度较高、无污染的试剂，以避免影响微生物的生长和代谢反应。
2. 操作要严谨：在制备过程中要注意操作规范，遵守无菌操作规程，防止微生物污染。
3. 灭菌时间和温度要控制好：灭菌时间和温度是保证培养基无菌的关键因素之一，必须严格按照标准化程序进行操作。
实验室常用培养基的配制方法
实验室常用培养基的配制方法实验室中常用的培养基有很多种，包括通用培养基、选择性培养基、富集培养基等。
下面以常用的LB培养基和M9培养基为例，介绍它们的配制方法。
1. LB培养基（Luria-Bertani agar）LB培养基是一种通用培养基，适用于许多不同类型的细菌。
它由三种主要成分组成：蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。
配方如下：-蛋白胨：10克-酵母提取物：5克-NaCl：10克-精制水：1000毫升步骤如下：1)在一个大容量烧杯中加入蛋白胨、酵母提取物和NaCl。
2)加入适量的精制水，搅拌溶解。
3) 将溶液移至一个继续器中，并用精制水补足至1000ml。
4)蓄满培养基的瓶子，盖上盖子，并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌，或者将瓶子放入高压灭菌器中，将压力调至15磅（每平方英寸）。
2.M9培养基M9培养基是一种无机盐培养基，常用于细菌的生长和培养。
它的配方相对简单，由无机盐、葡萄糖和维生素B1组成。
配方如下：-Na2HPO4：6克-KH2PO4：3克-NaCl：0.5克-NH4Cl：1克-葡萄糖：0.4克-维生素B1：0.1克-精制水：1000毫升步骤如下：1)在一个大容量烧杯中加入Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和NH4Cl。
2)加入一部分的精制水，搅拌溶解。
3)加入葡萄糖和维生素B1，搅拌均匀。
4) 将溶液移至一个继续器中，并用精制水补足至1000ml。
5)蓄满培养基的瓶子，盖上盖子，并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌，或者将瓶子放入高压灭菌器中，将压力调至15磅（每平方英寸）。
以上是LB培养基和M9培养基的配制方法的简要介绍。
当然，实验室中还有很多其他种类的培养基，它们的配制方法也各有不同，需要根据具体的实验目的和细菌类型进行调整。
在培养基配制过程中，应当注意严格按照配方比例配制，保持清洁卫生，避免污染，并注意高压灭菌的操作安全。
MS培养基配方列表
MS培养基配方列表MS培养基是一种经典的植物培养基，广泛应用于细胞、组织和器官培养研究中。
其配方很复杂，包含多种无机盐和有机物，下面就介绍一下MS培养基的配方列表。
1. 硝酸铵 (NH4NO3)硝酸铵作为氮源，在细胞的生长和分化过程中非常重要。
2. 磷酸一氢钾 (KH2PO4)磷酸一氢钾是植物生长的主要磷源。
3. 硫酸镁七水合物(MgSO4·7H2O)硫酸镁七水合物是植物生长中的必需元素，同样也是叶绿素合成的关键。
4. 硝酸钾 (KNO3)硝酸钾是一种重要的氮源，也是蛋白质合成的必需元素。
5. 硝酸钙 (Ca(NO3)2)硝酸钙是植物生长过程中不可或缺的钙源，在细胞分裂和细胞伸长过程中起着重要作用。
6. 硫酸铁 (FeSO4)硫酸铁是植物体内铁元素的重要来源，对叶绿素和细胞色素c等生物化学过程有着至关重要的作用。
7. 乙酸 (CH3COOH)乙酸可以被植物利用作为碳源，同时还可以促进细胞发育和生长。
8. 吲哚-3-乙酸 (IAA)吲哚-3-乙酸是一种重要的生长素，能够影响细胞分裂和扩散，促进细胞分化和器官发育。
9. 6-苄氨基嘌呤 (BA)6-苄氨基嘌呤是一种核酸类似物，可以促进细胞分裂和增殖，对重组DNA和RNA的生成和转录起着关键的作用。
10. 抗生素 (G418)抗生素G418能够抑制细胞生长和增殖，用于防止其它微生物的污染。
以上就是MS培养基的配方列表，每种成分的浓度和配比都需要根据具体的实验室需求进行调整。
在制备MS培养基过程中，需要严格控制pH值和温度，以确保培养基的有效性。
MS培养基是一种经典、可靠的植物培养基，使用得当可以为细胞、组织和器官培养研究提供强有力的支持。
微生物实验室常见20种培养基配方大全
微生物实验室常见20种培养基配方大全1.肉汤培养基成分：牛肉膏或牛肉汤500克，葡萄糖10克，胰蛋白胨10克，NaCl5克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于各种需有机氮源的细菌的培养。
2.十倍腌盐水成分：NaCl300克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于耐盐真菌和嗜盐细菌的培养。
3.果胶培养基成分：果胶5克，葡萄糖5克，NaNO32克，K2HPO40.2克，MgSO4·7H2O0.1克，CaCO30.02克，FeSO4·7H2O0.01克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于果胶酶产生菌的培养。
4.大肠杆菌选择性培养基成分：土豆提取物4克，蛋白胨2克，乳糖10克，NaCl10克，胆盐0.75克，碱性蓝2克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于分离大肠杆菌的选择性培养。
5.卡波培养基成分：石蜡300克，肉浸膏100克，大豆酪蛋白胨20克，NaCl5克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于致病真菌的培养。
6. Nutrient Broth培养基成分：肉膏1克，酵母提取物2克，葡萄糖2克，NaCl5克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于细菌和真菌的常规培养。
7. Luria-Bertani（LB）培养基成分：酵母提取物5克，酪蛋白胨10克，NaCl10克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于E. coli等细菌的培养。
8. Sabouraud葡萄糖琼脂培养基成分：葡萄糖40克，醇20克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于真菌的培养。
9. MacConkey琼脂培养基成分：鱼精膏20克，胆盐胆红素15克，玛琪琼脂25克，NaCl5克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于肠道杆菌的培养、分离。
10.马加提琼脂培养基成分：马加提琼脂50克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于细菌、酵母和霉菌的常规培养。
11.酵母醇葡萄糖琼脂培养基成分：葡萄糖20克，醇30克，琼脂20克，蒸馏水1000毫升。
实验室常用培养基配方
实验室常用培养基配方1. 营养琼脂培养基（Nutrient Agar）营养琼脂培养基是最为常用的一种培养基，用于微生物的一般培养、分离和鉴定，其配方如下：-水：1000mL-肉浸膏或胨：三到五克-水解酪蛋白：五克-氯化钠：五克-琼脂：十五克2. 培养基ONE（BHI Agar）培养基ONE用于灭菌后的微生物收集、保存和复苏，配方如下：-砂糖：十五克-胨：二十克-水：1000mL-酵母膏：二十克-酵母蛋白胨：十克-溶血素：十克-十％NaCl：五百毫升-甘油：百毫升3. 霍乱弧菌选择性琼脂培养基（TCBS Agar）TCBS Agar用于霍乱弧菌的分离和检测，配方如下：-水：1000mL-TCBS粉：一百克4. MacConkey琼脂培养基（MacConkey Agar）MacConkey琼脂培养基是一种选择性琼脂培养基，用于大肠杆菌的分离和检测，配方如下：-水：1000mL-肉浸膏：十七克-水解酪蛋白：十五克-氯化钠：五克-紫蘑菇素：六十毫克-琼脂：十五克5. Sabouraud琼脂培养基（Sabouraud Agar）Sabouraud琼脂培养基用于真菌的分离和培养-水：1000mL-葡萄糖：四十克-琼脂：十五克-氯化钠：五克-氯已二维硫酸钾：二十克这些仅仅是一些常见的培养基配方，实验室常根据不同微生物的要求而有所调整。
此外，还有许多特殊的培养基用于特殊微生物的培养和分离，如MRS培养基用于乳酸菌、EC培养基用于大肠杆菌O157:H7等。
在使用培养基时，需要注意权威的文献和生产厂家的指导。
实验室36种微生物培养基配制方法
实验室36种微生物培养基配制方法实验室养菌基是为微生物的培养和研究提供合适营养和条件的培养基质。
不同微生物对培养基的要求各不相同，因此实验室通常需要配制多种不同的培养基。
下面是36种常用的微生物培养基的配制方法。
一、通用培养基1. 营养琼脂培养基（Nutrient Agar）营养琼脂培养基是一种通用的培养基，适用于大多数微生物的培养。
其配方为：蛋白胨10克、葡萄糖5克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2，加入琼脂，高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。
2. 营养肉膏培养基（Nutrient Broth）营养肉膏培养基是一种通用的液体培养基，适用于大多数微生物的培养。
其配方为：蛋白胨10克、牛肉提取物5克、葡萄糖5克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2，高压灭菌，分装，即可使用。
3. 大肠杆菌选择性培养基（MacConkey Agar）大肠杆菌选择性培养基是一种常用的培养基，用于选择和鉴定大肠杆菌。
其配方为：蛋白胨17克、葡萄糖1.5克、恶瓜胆汁5克、硼酸紫0.5克、亮矾0.09克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2，加入琼脂，高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。
4. Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基（Sabouraud Dextrose Agar）Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基是用于真菌的培养和鉴定。
其配方为：脱氧胆汁10克、蔗糖40克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至5.6-6.4，高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。
二、选择性培养基1. VC菌属选择性平皿培养基（Vogel-Johnson Agar）VC菌属选择性平皿培养基是用于选择和鉴定Voges-Proskauer菌属（如克雷伯菌）的培养基。
其配方为：葡萄糖1克、琼脂15克、盐酸75克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、加热煮沸，冷却至55-60°C，加入胆盐酯高压灭菌，倒入平皿中，待凝固后用。
完全培养基配制操作方法
完全培养基配制操作方法完全培养基（Complete medium）是一种为细胞培养提供所有必需营养物质的培养基。
完全培养基包括有机和无机物质、糖、氨基酸、维生素和激素等物质，可以满足细胞的生长和增殖的需求。
下面是一种常见的制备完全培养基的方法。
1. 准备实验室所需设备和试剂，包括称量器具、移液器、试剂瓶等。
2. 按照预先计算好的配方准备所需的试剂。
完全培养基的配方可以根据具体实验需要调整。
以下为一种常用的完全培养基配方：- DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）培养基- FBS（Fetal Bovine Serum）胎牛血清- L-谷氨酰胺粉末（或谷氨酸盐酸盐）- 青霉素和链霉素（或青霉素和链霉素抗生素混合物）3. 使用称量器具称量所需的DMEM粉末，并将其溶解于无菌蒸馏水中。
根据DMEM培养基的配方指导书，溶解适量的DMEM粉末可以得到一定浓度的DMEM培养基溶液。
4. 将配制好的DMEM培养基溶液过滤器通过0.22微米的滤膜过滤器以去除悬浮物和细菌，得到无菌的DMEM培养基液。
5. 加入适量的FBS胎牛血清到DMEM培养基中。
一般情况下，FBS浓度为10%。
加入FBS胎牛血清的目的是提供细胞生长所需的营养物质和生长因子。
6. 加入适量的L-谷氨酰胺粉末（或谷氨酸盐酸盐）到DMEM培养基中，以提供氨基酸供细胞使用。
L-谷氨酰胺是蛋白质合成的重要组成部分。
7. 加入适量的青霉素和链霉素（或青霉素和链霉素抗生素混合物）到DMEM培养基中，以预防细菌污染。
青霉素和链霉素是在无菌环境中操作时添加的，以防止培养物中细菌的生长。
8. 将配制好的完全培养基溶液分装到无菌的试剂瓶中，并进行无菌操作，以避免污染。
常用的分装方式是使用无菌移液器将培养基吸取到试剂瓶中。
9. 将完全培养基储存在低温干燥的地方，以延长其保存时间。
10. 在使用前，将完全培养基溶液加热到37摄氏度，使其达到体内温度。
各种培养基的配方
各种培养基的配方培养基是科学研究中用于培养和繁殖细胞、组织和微生物的基础性工具。
不同类型的细胞和微生物需要不同的培养基来提供适宜的环境和营养物质。
下面将介绍几种常用的培养基的配方。
1. LB培养基（Luria-Bertani培养基）：成分：-蛋白胨：10g-酵母提取物：5g-NaCl：10g-纯水：1L2.硫酸亚铁葡萄糖培养基：成分：-硫酸亚铁：0.2g-葡萄糖：1g-磷酸二氢钠：0.5g-硫酸镁：0.1g-硫酸铵：0.5g-氯化钠：5g-纯水：1L3.TSB培养基（液体肉汤培养基）：成分：-蛋白胨：17g-酵母提取物：3g-NaCl：5g-纯水：1L4.TSB培养基（固体肉汤培养基）：成分：-蛋白胨：30g-酵母提取物：5g-NaCl：5g-琼脂：15g-纯水：1L5.M9盐基培养基：成分：-Na2HPO4：6g-KH2PO4：3g-NaCl：0.5g-NH4Cl：1g-MgSO4：0.1g-纯水：1L6.YPD培养基（酵母精蛋白培养基）：成分：-蛋白胨：10g-酵母提取物：20g-葡萄糖：20g-纯水：1L7. DMEM培养基（Dulbecco's修改Eagle's培养基）：成分：-高糖DMEM：950mL-胎牛血清：50mL- L-谷氨酰胺：2 mmol/L-纯水：1L8.RPMI-1640培养基：成分：-RPMI-1640培养基：950mL-胎牛血清：50mL- L-谷氨酰胺：2 mmol/L-纯水：1L9.MRS培养基（乳酸杆菌选择性培养基）：成分：-蛋白胨：10g-肉汤：10g-葡萄糖：20g-红茶提取物：1g-醋酸钠：5g-硫酸锌：0.5g-纯水：1L10.TSA培养基（肉汤琼脂培养基）：成分：-肉汤：30g-琼脂：15g-纯水：1L这些是常用的一些培养基的配方，不同细胞和微生物所需的培养基配方可能会有所不同。
在实验室中，根据研究的需要，可以根据具体要求对培养基进行调整和改良。
实验室常用培养基
实验用培养基配制>1 ．牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养）牛肉膏 3g ，蛋白胨 10g ， NaCl 5g ，水 1000mL ，～2. 高氏 1 号培养基 ( 用于放线菌培养 )可溶性淀粉 20g ， KNO 3 1g ， NaCl ， K 2 HPO 4- · 3H 2 O ，MgSO 4 · 7H2 O , ，FeSO4 · 7H 2 O ，水 1000mL ，～。
配制时注意，可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。
3 ．马丁氏（ Martin ）培养基（用于从土壤中分离真菌）K 2 HPO 4 1g ，MgSO 4 · 7H 2 O ，蛋白胨 5g ，葡萄糖 10g ， 1/3000 孟加拉红水溶液 100mL, 水 900mL ，自然 pH ，121 ℃ 湿热灭菌 30min 。
待培养基融化后冷却 55 ～60 ℃ 时加入链霉素 ( 链霉素含量为30 μg/mL).4. 马铃薯培养基 (PDA)( 用于霉菌或酵母菌培养 )马铃薯 ( 去皮 )200g, 蔗糖 ( 或葡萄糖 ) 20g, 水 1000mL配制方法如下 : 将马铃署去皮 , 切成约 2cm 2 的小块 , 放入 1500mL 的烧杯中煮沸 30min, 注意用玻棒搅拌以防糊底 , 然后用双层纱布过滤 , 取其滤液加糖 , 再补足至 1000mL, 自然 pH. 霉菌用蔗糖 , 酵母菌用葡萄糖 .5. 察氏培养基 ( 蔗糖硝酸钠培养基 )( 用于霉菌培养 )蔗糖30g, NaNO 3 2g, K 2 HPO 4 1g, MgSO 4 · 7H 2 O, KCl , FeSO4 · 7H2 O , 水 1000mL, ～6. Hayflik 培养基 ( 用于支原体培养 )牛心消化液 ( 或浸出液 )1000mL, 蛋白胨 10g, NaCl 5g, 琼脂 15g, ～ ,分装每瓶70mL, 121 ℃ 湿热灭菌 15min, 待冷却至80 ℃ 左右 , 每 70mL 中加入马血清 20mL,25% 鲜酵母浸出液 10mL, 15 醋酸铊水溶液 , 青霉素 G 钾盐水溶液 (20 万单位以上 ), 以上混合后倾注平板 . 注意 : 醋酸铊是极毒的药品 , 需特别注意安全操作 .7 ．麦氏 (McCLary) 培养基 ( 醋酸钠培养基 )葡萄糖 , KCl ，酵母膏，醋酸钠 , 琼脂，蒸馏水 l00mL 。
几种主要培养基配方
几种主要培养基配方培养基是在实验室中用于培养和繁殖微生物的一种基质。
它提供了微生物生长所需的营养物质和环境条件。
不同的微生物需要不同的培养基配方。
本文将介绍几种主要的培养基配方。
琼脂培养基是最常用的固体培养基。
它主要由琼脂、蔗糖、肉浸膏、氯化钠、磷酸二氢钠和硫酸镁等组成。
其中针对特定微生物的需求，可以添加一些特殊的营养物质，比如氨基酸、维生素和抗生素等。
酵母提取物培养基适用于对酵母菌进行培养。
它主要由酵母提取物、葡萄糖、硫酸铵和磷酸盐等组成。
酵母提取物提供了酵母菌所需的多种营养物质和生长因子。
化学合成培养基是一种通过化学方法合成的培养基，不含任何有机物质。
它主要由无机盐、氨基酸、维生素和糖等组成。
这种培养基可以根据需要调整各种成分的浓度，以满足特定微生物的生长要求。
牛肉酪蛋白培养基适用于许多细菌的培养。
它主要由牛肉提取物、酪蛋白、硫酸钠、磷酸二氢钾和氯化钠等组成。
牛肉提取物和酪蛋白提供了微生物生长所需的有机营养物质。
血琼脂培养基广泛用于分离和鉴定细菌。
它主要由琼脂、羊血或马血和其他常规培养基的成分，比如氯化钠、肉浸膏和磷酸二氢钠等组成。
血液提供了细菌生长和培养的一系列营养物质。
酶消化培养基用于细菌的鉴定。
它主要由蛋白胨、肉汤、葡萄糖和其他常规培养基的成分，比如氯化钠、磷酸二氢钠和硫酸镁等组成。
蛋白胨提供了氨基酸和氮等营养物质，促进细菌的生长和繁殖。
以上是几种主要的培养基配方，它们可以满足不同微生物的生长要求。
根据实验需要，可以根据不同微生物的生长特性调整培养基的成分和浓度。
除了上述提到的配方，实际上还有许多其他不同的培养基配方，用于不同微生物的培养和繁殖。
实验室36种微生物培养基配制方法
实验室36种微生物培养基配制方法1.牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养）牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，水1000mL，pH7.4～7.6。
2.高氏1号培养基(用于放线菌培养)可溶性淀粉20g，KNO₃ 1g，NaCl 0.5g，K2HPO4•3H2O 0.5g，MgSO4•7H2O0.5g，FeSO4•7H2O0.01g•水1000mL•pH7.4～7.6。
配制时注意：可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。
3.马丁氏（Martin）培养基（用于从土壤中分离真菌）K2HPO 41g，MgSO4•7H2O 0.5g，蛋白胨 5g，葡萄糖 10g，1/3000孟加拉红水溶液100mL，水900mL，自然pH，121℃湿热灭菌30min。
待培养基融化后冷却55～60℃时加入链霉素(链霉素含量为30μg/mL)。
4.马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养)马铃薯(去皮) 200g，蔗糖(或葡萄糖)20g，水1000mL，配制方法如下：将马铃署去皮，切成约2cm²的小块，放入1500mL的烧杯中煮沸30min，注意用玻棒搅拌以防糊底，然后用双层纱布过滤，取其滤液加糖，再补足至1000mL，自然pH，霉菌用蔗糖，酵母菌用葡萄糖。
5.察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养)蔗糖 30g，NaNO3 2g，K2HPO4 1g，MgSO4•7H2O 0.5g，KCl 0.5g，FeSO4•7H2O 0.1g，水1000mL，pH7.0～7.2。
6.Hayflik培养基(用于支原体培养)牛心消化液(或浸出液) 1000mL，蛋白胨 10g，NaCl 5g，琼脂15g，pH7.8～8.0，分装每瓶 70mL，121℃湿热灭菌15min，待冷却至80℃左右，每70mL中加入马血清20mL，25%鲜酵母浸出液10mL，15醋酸铊水溶液2.5mL，青霉素G钾盐水溶液(20万单位以上) 0.5mL，以上混合后倾注平板。
实验室培养基配方
蔗糖
5.0g/L
MgSO4溶液
5ml/L
LB培养基（E.coli） HB101
酵母浸出液（yeast extract）
5g/L
Agar 12-15g/L
pH=7.0
蛋白胨（tryptone）
10g/L
NaCl
10g/L
YEP培养基（A.t） LBA4404
酵母浸出液
10g/L
Agar 12-15g/L
0.05% KT
0.05% ZT（玉米素）
配法同6-BA。
实验室常用抗生素配制
氨苄青霉素(Amp)
水溶
超滤
贮存浓度50 mg.mL-1
-20℃避光保存
羰苄青霉素(Cab)
水溶
超滤
贮存浓度50 mg.mL-1
四环素(Tet)
溶入乙醇
超滤
贮存浓度5 mg.mL-1
卡那霉素(Kan)
水溶
超滤
贮存浓度10 mg.mL-1
1.25mg
6号母液
烟酸
25mg
盐酸吡哆醇（B6）
25mg
盐酸硫脂素（VB1）
5mg
甘氨酸
100mg
7号母液
肌醇
5g
注： 配制每种母液时，都应按药品顺序依次溶化后再加入后一种药品。每种母液分别贴上标签，注明母液编号，倍数，配制日期，于4度冰箱中冷藏，4度下可保存2月，如有霉菌或沉淀时不能使用。
加完母液，蔗糖 30g/L，定容，调pH值至5.8。加琼脂糖 7-8g/L。
细菌培养基
YEB培养基（A4，R1000，
C 58C1）
牛肉浸膏（beef extract）
5.0g/L
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蛋白胨
10g/L
NaCl
5g/L
高压灭菌，不加抗生素,倒平板之前加相应抗生素。
注：应在培养接种前1-2h从冰箱中取出平板（细菌），细菌在37℃温育时会“发汗”，导致细菌克隆在平板表面交互扩散而增加交叉污染的机会，为避免这一问题，可拭去平皿内部的冷凝水，并把平板倒置于37℃温育，2小时方可使用，也可快速甩一下平皿除去冷凝水。
氯霉素(Cm)
溶入乙醇
超滤
贮存浓度34 mg.mL-1
利福平（Rif）
溶于甲醇
超滤
乙酰丁香酮（AS）
溶于DMSO
超滤
链霉素（Str）
水溶
超滤
头孢霉素（Cef）
水溶
超滤
潮霉素（hygr）
将原溶液超滤，不需配制
0.05% KT
0.05% ZT（玉米素）
配法同6-BA。
实验室常用抗生素配制
氨苄青霉素(Amp)
水溶
超滤
贮存浓度50 mg.mL-1
-20℃避光保存
羰苄青霉素(Cab)
水溶
超滤
贮存浓度50 mg.mL-1
四环素(Tet)
溶入乙醇
超滤
贮存浓度5 mg.mL-1
卡那霉素(Kan)
水溶
超滤
贮存浓度10 mg.mL-1
植物激素母液配制
1.ml 95%乙醇中微热溶解，冷后定容至100ml，棕色瓶中备用。
0.05% NAA，GA，IAA
配法同2.4-D
0.05% 6-BA
50mg 6-BA以少量HCl（0.5N）微热溶解，冷却室温定容至100ml。
0.05% 6-FA（KT）
FeSO4.7H2O
1.39g
5号母液
KI
41.5mg
定容至500ml，为100倍液，取10ml/L。
H3BO3
310mg
MnSO4.4H2O
（MnSO4.H2O）
1115mg
（845mg）
ZnSO4.7H2O
430mg
Na2MoO4.2H2O
12.5mg
CuSO4.5H2O
1.25mg
CoCl2.6H2O
细菌培养基
YEB培养基（A4，R1000，
C58C1）
牛肉浸膏（beef extract）
5.0g/L
MgSO4储备液：2×10-3MMgSO4.7H2O（4.9296g/50ml）
固体培养基：Agar 12-15g/L pH=7.2
酵母粉（yeast extract）
1.0g/L
蛋白胨（peptone）
1.25mg
6号母液
烟酸
25mg
盐酸吡哆醇（B6）
25mg
盐酸硫脂素（VB1）
5mg
甘氨酸
100mg
7号母液
肌醇
5g
注：配制每种母液时，都应按药品顺序依次溶化后再加入后一种药品。每种母液分别贴上标签，注明母液编号，倍数，配制日期，于4度冰箱中冷藏，4度下可保存2月，如有霉菌或沉淀时不能使用。
加完母液，蔗糖30g/L，定容，调pH值至5.8。加琼脂糖7-8g/L。
MS培养基母液配方
1号母液
NH4NO3
41.25g
定容至500mL，为50倍母液，取20mL/L。
KNO3
47.5g
MgSO4•7H2O
9.25g
2号母液
CaCl2•2H2O
22g（或CaCl216.6g）
定容至500 ml，为100倍液，取10ml/L。
3号母液
KH2PO4
8.5g
定容至500 ml，为100倍液，取10ml/L。
4号母液
Na2-EDTA
1.865g
定容至500 ml，为100倍液，取10ml/L,pH=5.5(8点1MNaOH)
说明：将两种药品分别在约230ml重蒸水中加热搅拌，待其完全溶解后混合两种溶液，再加热30min左右，使Fe与EDTA稳定螯合，调pH值至5.5，加重蒸水定容至500ml，盛于棕色瓶中。
5.0g/L
蔗糖
5.0g/L
MgSO4溶液
5ml/L
LB培养基（E.coli）HB101
酵母浸出液（yeast extract）
5g/L
Agar12-15g/L
pH=7.0
蛋白胨（tryptone）
10g/L
NaCl
10g/L
YEP培养基（A.t）LBA4404
酵母浸出液
10g/L
Agar12-15g/L