丙肝抗体阳性者血清中HCV论文

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浅谈丙肝抗体阳性者血清中HCV 摘要:目的:探讨丙肝抗体阳性者血清中hcv-rna的阳性率,为临床诊断、治疗hcv感染提供依据。方法:采用pcr实时荧光定量法对36例丙肝抗体阳性患者进行丙型肝炎病毒rna检测。结果:36例丙肝抗体阳性患者中,20例hcv-rna阳性,阳性率为55.56%。结论:抗-hcv和hcv-rna的联合检测,对于丙型肝炎的诊断及治疗具有重要的价值及临床意义。

关键词:丙型肝炎病毒;抗丙肝病毒抗体;pcr实时荧光定量法【中图分类号】r564【文献标识码】b【文章编号】1672-3783(2012)11-0128-01

丙型肝炎病毒(hcv)是一种经血传播的疾病,临床以elisa法检测的抗-hcv抗体为主,但抗体阳性并不能说明病人携带丙型肝炎病毒,也不能反映其是否具有传染性。为了更好指导临床用药,现就在我院就诊的36例丙肝抗体阳性患者血清进行hcv-rna检测,现报告如下。

1资料与方法

1.1对象:自2011年1月~2012年12月,在我院就诊并经elisa 法检测为抗-hcv抗体阳性的患者标本,采集静脉血5ml,及时分离血清,若不能当日检测冰冻保存。

1.2方法及仪器

1.2.1检测抗-hcv抗体:试剂由山东潍坊3v生物工程公司提供,仪器选用mk3酶标仪及普朗洗板机,操作严格按标准的操作规程进

行,并进行室内质量控制。

1.2.2丙型肝炎病毒rna测定:试剂由中山达安基因有限公司提供,仪器为美国abi 7300实时荧光定量分析仪,采用pcr实时荧光定量法对36例丙肝抗体阳性患者进行丙型肝炎病毒rna的检测。

2结果

36例抗-hcv抗体阳性患者中,其中20例hcv-rna阳性,阳性率为6667%,病毒量为1.0×103-5.0×106 iu/ml。

3讨论

丙型肝炎病毒(hcv)属于黄病毒科,丙型肝炎病毒属,单股正链rna病毒。hcv感染人体后,有将近一半的人会变为慢性肝炎,并且慢性hcv患者可能发展为肝硬化,并可能导致肝细胞癌。目前认为,对hcv复制活跃的患者,尽早开始抗丙肝病毒治疗可望中止或延缓病变发展,从而改善患者预后。因此,hcv感染的早期诊断显得十分重要和迫切。很多患者感染hcv多年,但在临床上并无明显的症状和体征。对此类患者,hcv感染的病原学检测往往是确定诊断和治疗决策的唯一依据。

抗-hcv抗体检测是目前常用的筛查和诊断hcv感染的检测方法。应用elisa检测抗-hcv存在的一大缺陷是“窗口期”长,约为50 d,且存在漏榆现象。这可能与方法学敏感性、病毒感染所处的临床阶段、基因的突变及抗病毒药物的应用相关。而hcv-rna是丙型肝炎病毒复制最直接、可靠的指标,而pcr实时荧光定量法是目前检测hcv-rna最佳的手段,定量的准确率极高,可真实反应hcv的复制

情况,是完善hcv诊断的重要手段。hcv-rna在感染一周即可被检出,是hcv感染的直接依据,对丙肝的早期诊断具有重要意义,可以缩短感染后血清阳转前的检测窗口期,以实现hcv感染的早期诊断,只有确诊为血清hcv-rna阳性的丙型肝炎患者才需要抗病毒治疗。有资料显示,elisa检测抗-hcv阳性而采用pcr实时荧光定量法检测hcv-rna阳性的符合率为62.5%,本研究中,36例有20例阳性,为55.56%,与报导相近。抗-hcv阳性、hcv-rna阴性患者,可能由于以下各种原因造成:1)急性丙型肝炎恢复期hcv被清除后,血清中hcvrna即消失,而抗-hcv抗体则消失较慢,可继续在一段时间呈阳性。2)慢性丙型肝炎治疗后慢性丙型肝炎经抗病毒治疗,有反应的病例,血清hcv rna转阴。3)抗-hcv假阳性尽管改进后的第二代和第三代elisa试剂,特异性与敏感性提高,但仍有一定的假阳性。特别是自身免疫性疾病或高免疫球蛋白血症病人可出现假阳性,如自身免疫性肝炎、系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等。4)hcv -rna假阴性虽然检测hcv- rna的敏感性很高,但若选用的引物不匹配,或由于丙型肝炎病毒发生变异,以及实验因素等影响,均可造成假阴性。5)hcv-rna十分脆弱,易被血细胞含有的rna酶降解。6) hcv-rna不想hbv-dna那样不受进食的影响,hcv易与迅速增多的血中脂肪及脂蛋白结合,从而降低检出率,出现假阴性。7)hcv-rna的pcr包括从rna到dna的转录,第一次pcr及第二次pcr,其中任何步骤的问题均影响其检出。

综上所诉,丙肝抗体阳性者血清中hcv-rna的联合检测,及时发现

早期感染者,而且能够明确抗-hcv阳性的感染者体内病毒的复制水平,以便确定是否需要进行抗病毒治疗,或预测及评价抗病毒治疗的效果,具有重要的价值及临床意义。

参考文献

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