em大鼠离体胸主动脉血管环实验方法介绍
依那普利对大鼠离体胸主动脉的舒张作用及其机制的开题报告
依那普利对大鼠离体胸主动脉的舒张作用及其机制的开题
报告
引言：
依那普利是一种 ACE 抑制剂，广泛用于高血压、心力衰竭等各种心血管疾病的治疗。
其作用机制是抑制肾素-血管紧张素-醛固酮系统，从而减轻血管紧张作用，降低血压。
然而，依那普利对血管的舒张作用机制仍不十分清楚。
本文旨在探究依那普利对大鼠离体胸主动脉的舒张作用及其机制。
材料和方法：
1.实验动物：12只 SD 雄性大鼠。
2.分组：对照组和依那普利组（每组6只）。
3.实验操作：离体大鼠胸主动脉环切取平滑肌样本，记录血管张力并加入不同剂量的依那普利，记录张力变化。
结果：
1.依那普利可显著降低大鼠离体胸主动脉的张力，呈现明显的剂量依赖性。
2.依那普利对离体大鼠主动脉的舒张作用与皮质激素类似，可能是通过促进 NO 合成或抑制内皮素 ET-1 的释放来实现的。
结论：
依那普利可通过促进 NO 合成或抑制 ET-1 的释放来实现对大鼠离体胸主动脉的舒张作用。
这一结果为深入探究依那普利的作用机制及其临床应用提供了理论依据。
离体胸主动脉环的作用及机制
杜仲乙醇提取物对大鼠离体胸主动脉环的作用及机制岳晓洁1，，张炯炯1，许逸飞1 ，叶志孟1 ，张薇1，王会平2（1.浙江大学医学院临床二系，浙江杭州 310031; 2.浙江大学医学院生理学教研室，浙江杭州 310031）[摘要]：目的：探讨杜仲（Eucommia ulmoides Oliv.）醇提物对离体大鼠主动脉环收缩张力的作用及其可能机制。
方法：采用大鼠离体胸主动脉环灌流模型，采用累积加药法，观察杜仲醇提物对PE预收缩（苯肾上腺素组+E,-E）、氯化钾预收缩（氯化钾组+E,-E）的血管环的作用; 并检测杜仲对经无钙液预处理后的血管环的作用。
结果：不论是否有内皮，累计浓度杜仲对高浓度KCL及PE引起的血管环收缩均有明显的舒张作用。
格列苯脲（Glib），4－氨基吡啶(4－AP),四乙胺（TEA）,L-NAME,ODQ，吲哚（Indo）不能阻断杜仲对PE预收缩血管环的舒张。
胸主动脉环经无钙液孵育和杜仲处理后对PE的反应性降低。
结论：杜仲对胸主动脉环有非内皮依赖性的舒张作用，杜仲能通过抑制内钙释放而起到舒张血管环的作用。
[关键词]：杜仲乙醇提取物；胸主动脉环；内皮；钙通道Relaxant effect of Eucommia ulmoides Oliv On rat thoracic aorta YUE Xiao-jie, ZHANG Jiong-jiong, XU Yi-fei, YE Zhi-men, ZHANG Wei ,et al(The Second Department of Clinical Medicine, College of Medicine, Zhejiang University, Hangzhou 310031)[Abstract] Objective: To investigate the effect of Eucommia ulmoides Oliv on vascular circles and the underlying mechanisms. Methods: The study was performed with the model of isolate rat thoracic aorta rings in organ bath.The effect of accumulated of ethanol extract of the eucommia bark(EB) on aorta rings (+E,-E), pre-contracted with PE, and pre-contracted with KCl was observed. The effect of EB on aorta rings(-E) pre-contracted with PE(-E) with Ca2+ -free medium was also observed. Conclusion:With or without endothelium, communicative concentration EB has vasorelaxant effects on the thoracic aorta pre-contracted by KCL or PE. nitric oxide synthase inhibitor L-N (G)-nitroarginine methyl ester ( L-NAME), the Soluble guanylyl cyclase Inhibitor ODQ, voltage-dependent K+ channel inhibitor 4-AP, calcium-activated K+ channel inhibitor TEA, ATP-sensitive K+ channel inhibitor Glib, and cyclooxygenase inhibitor indomethacin can’t inhibit EB’s vasorelaxant effects. EB has no relaxation effect on aorta rings which are incubated with Ca2+ -free Kreb’s solution and pre-contracted with PE. Conclusion: EB can relax the rat thoracic aorta rings endothelium independent. And one mechanism is by inhibiting of intracellular calcium ions release .[Key words] :ethanol extract of the eucommia bark；The ring of thoracic aorta；endothelium；Ca2+ channel杜仲（Eucommia ulmoides Oliv.）是杜仲科植物，我国特有经济树种。
咪达唑仑对大鼠离体胸主动脉环的舒张机制研究
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咪达 唑仑对大 鼠离体胸主 动脉环的舒张机制研究
简易高效分离培养大鼠胸主动脉血管内皮细胞方法的建立
简易高效分离培养大鼠胸主动脉血管内皮细胞方法的建立韩松;曲彦明;李俊发【摘要】目的建立一种高效分离、培养大鼠胸主动脉血管内皮细胞的方法.方法用Wistar大鼠(200 ～ 250 g),无菌条件下开胸取胸主动脉,去除血管外膜,制备长约1.0～1.5 mm动脉环.将血管环垂直置于干燥的培养皿中,并向血管环内加入含有10％胎牛血清的DMEM/F12培养液、静止培养；24h血管环贴壁后,加入培养液；3～4d内皮细胞长出,弃血管环,并经0.25％胰蛋白酶消化传代.用形态学、免疫细胞化学及流式细胞分析等方法,鉴定血管内皮细胞标志物,vWF的表达.结果培养3～4d时有细胞自主动脉环内迁移出并贴壁生长,细胞汇合后呈现典型的“铺路石”样内皮细胞特征；免疫组化和流式细胞分析结果示,vWF表达阳性率可高达98.3％±0.2％.结论用改良的植块培养方法,不需要胶原及内皮细胞生长补充物,较传统酶消化法更为经济、高效,且简便易行,适用于细小血管内皮细胞的分离与培养.%Objective To establish a simple and efficient method for isolating and culturing vascular endothelial cells of rat thoracic aorta. Methods Under aseptic condition, the thoracic aorta was separated from Wistar rat. After stripping off the adventitia, the thoracic aorta was cut into vessel ringswith length of 1.0 ~ 1. 5 mm. The vessel rings were placed on culture dish vertically and filled with the culture medium DMEM/F12 containing 10% fetal bovine serum; After 24 h, the vessel rings had attached on the culture dish firmly and some new culture medium was added; 3 -4 d later, the thoracic aorta was discarded and the new culture medium was added into the culture dish. The migrating cells were digested by 0. 25% trypsin for serial subcultivation. The endothelial cells were identified by morphological,immunohistochemical and flow-cytometry methods with anti-vWF antibody. Results A amount of cells migrated from the aorta and adhered to the bottom of culture dish 3 ~ 4 d after cultivation. The confluent cells grew rapidly after being digested with 0. 25% trypsin and showed the typical cobblestone appearance. The cells were identified as endothelial cells, its positive ratio was ( 98. 3 ± 0. 2) % by using immunostaining and flow-cytometry with vWF. Conclusion The modified explanting cultivation method for isolating and culturing was established in this study. This method is simple, easy to handle and more economic without need of collagen and endothelial cell growth promoting substrate.【期刊名称】《基础医学与临床》【年(卷),期】2011(031)011【总页数】5页(P1278-1282)【关键词】内皮细胞;胸主动脉;大鼠【作者】韩松;曲彦明;李俊发【作者单位】首都医科大学神经生物学系北京神经科学研究所,北京100069;首都医科大学神经生物学系北京神经科学研究所,北京100069;首都医科大学神经生物学系北京神经科学研究所,北京100069【正文语种】中文【中图分类】R339.5血管内皮细胞（vascular endothelial cells，VECs）具有多种重要的生物学功能，是研究肿瘤、心血管和炎性反应疾病的常用工具［1－3］。
鼠离体胸主动脉环的作用及机制
杜仲皮水提取物舒张大鼠离体胸主动脉环的作用及机制作者：戴胜合作者：方晶晶，陈赟，张丽，刘金炜（浙江大学医学院02级临床医学三系0203班2组，3021831086）[摘要]目的：研究杜仲（Eucommia ulmoides Oliv.）对离体大鼠胸主动脉环收缩张力的作用及其机制。
方法：采用大鼠离体胸主动脉灌流模型，累积加药，检测杜仲对去氧肾上腺素（PE）和KCL 预收缩的胸主动脉环收缩张力的影响。
结果：内皮完整时，杜仲皮水提取物（0.2、0.4、0.8、1.6、2.4、3.2 mg/mL）对PE（10-4mol/L）和KCL（60mmol/L）预收缩的血管环均产生舒张作用（p﹤0.01）；而用NO合酶（NOS）抑制剂L-NAME（10-4mol/L），鸟苷酸环化酶（GC）抑制剂ODQ（10µmol/L）以及环氧酶（COX）抑制剂Indo（10-5mol/L）处理血管后，杜仲皮水提取物的舒张血管效应均被阻断（L-NAME：p﹤0.05、ODQ：p﹤0.01、Indo：p﹤0.05）。
而用电压依赖性的K+ 通道阻断剂4-AP(1mmol/L)，Ca2+ 敏感性的K+ 通道阻断剂TEA(1mmol/L)以及ATP敏感性的K+ 通道阻断剂格列苯脲（Glib）(3µmol/L)处理后，对杜仲皮水提取物介导的内皮依赖性的舒血管效应阻断作用均不明显(p>0.05)。
去内皮时，杜仲皮水提取物（0.2、0.4、0.8、1.6、2.4、3.2 mg/mL）对PE（10-4mol/L）预收缩的血管环舒张作用不显著（p>0.05）。
结论：杜仲皮水提取物通过NO-鸟苷酸环化酶途径和环氧合酶途径两条通路使大鼠离体胸主动脉环产生内皮依赖性的舒张效应。
[关键词] 杜仲；NO；胸主动脉环；内皮；血管舒张aqueous extracts of Eucommia ulmoides Oliv. induced endothelium dependent relaxation of rat thoracic aortaDAI Sheng ，FANG jing-jing，CHEN Yun，et alCollege of Medicine，Zhejiang University，Hangzhou 310003[Abstract]Objective：To investigate the effect of aqueous extracts of Eucommia ulmoides Oliv. on rat thoracic aorta rings and the underlying mechanisms. Methods: The study was performed with the model of isolate rat thoracic aorta rings in organ bath, we investigate the effects of accumulated aqueous extracts of Eucommia ulmoides Oliv. on the constriction of high KCL and Phenylephrine(PE) preconstricted rat thoracic aorta with or without endothelium. Results: Aqueous extracts isolated from eucommia bark (B) （0.2、0.4、0.8、1.6、2.4、3.2 mg/mL）concentration dependently caused endothelium-dependent relaxation in vessels precontracted both with 10-4mol/L phenylephrine (PE) and 60mmol/L KCL, but it had no effect. on de-endothelialized vessels precontracted with PE. The endothelium-dependent relaxation evoked by B was either abolished or substantially inhibited by 10-4mol/L NG-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME)，10µmol/L guanyly cyclase inhibitor 1H-[1,2,4] oxadiazolo [4,3-alpha] quinoxalin-1-one (ODQ) and 10-5mol/L Indomethacin（Indo）, indicating the involvement of the nitric oxide (NO) synthase pathway in the vasorelaxant action of B. The relaxation to the aqueous extract of eucommia bark was not inhibited by 1mmol/L tetraethylammonium (TEA) 、 1mmol/L 4-aminopyridine（4-AP）and 3µmol/L Glibenclamide （Glib）. This suggests that the endothelium-dependent, NO-mediated relaxation evoked by the aqueous eucommia extracts may not involve the activation of K+ -channels. Conclusion:The results incated that aqueous extracts of Eucommia ulmoides Oliv.can relax the rat thoracic aorta rings with endothelium-dependent . The mechanism may include the activation of NO-GC pathway and COX pathway in vascular endothelium cells.[Key Words] Eucommia ulmoides Oliv. ；NO；thoracic aorta rings；endothelium；vascular relaxation- 1 -杜仲（Eucommia ulmoides Oliv.；Du-zhong）是传统中药，祖国医学认为其具有补肝肾，强筋骨，安胎之功效[1] 。
高山红景天乙醇提取液对大鼠离体胸主动脉环的舒张作用及机制探讨
Ｐ Ｅ和 Ｋ １ Ｃ 预收缩的 内皮完整的大 鼠主动脉环有浓度依赖性的舒张作用 。在无钙缓冲液 （ Ｅ Ｔ 环境下 ， 含 Ｇ Ａ） 红景天
山东 医药 ２ １ ０ ０年第 ５ Ｏ卷 第 ３ 期 ８
高 山红 景 天 乙醇提 取 液对 大 鼠离体 胸 主 动 脉 环 的舒 张作用 及 机 制探 讨
秦 云植 李雄 杰。金 ， 。 光 金范 学 许 东元 ， ， ’ （ １延 边 大学 附属 医院 ， 吉林 延 吉 １ ３ ０ ； ３ ０ ０ ２延边 大学基础 医学院 ）
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离体血管实验报告
一、实验目的1. 了解离体血管实验的基本原理和方法。
2. 观察和分析血管在不同理化因素作用下的变化。
3. 掌握实验数据的记录和分析方法。
二、实验原理离体血管实验是研究血管生理和病理生理的重要方法。
通过模拟体内环境，将血管取出体外，观察和分析血管在不同理化因素作用下的变化，从而揭示血管的生理和病理机制。
三、实验材料1. 动物：成年大鼠2. 实验仪器：手术显微镜、剪刀、镊子、注射器、针头、试管、离心机、CO2培养箱、显微镜等3. 实验试剂：生理盐水、肝素钠、RPMI-1640培养基、EDTA、NaOH、HCl等四、实验方法1. 取成年大鼠，处死并迅速取出心脏，将心脏放入含有生理盐水的容器中，清洗血管。
2. 使用手术显微镜和剪刀，将心脏周围的脂肪和结缔组织去除，暴露血管。
3. 使用镊子将血管从心脏上分离下来，剪成约2-3mm的血管段。
4. 将血管段放入含有肝素钠的生理盐水中，防止血管内血栓形成。
5. 将血管段放入含有RPMI-1640培养基的培养皿中，置于CO2培养箱中培养。
6. 根据实验目的，分别对血管进行以下处理：a. 调整培养基的pH值b. 调整培养基的温度c. 添加EDTAd. 添加NaOH或HCle. 添加不同浓度的药物7. 观察血管在不同处理下的变化，包括血管收缩、舒张、通透性等。
8. 使用显微镜观察血管的形态变化。
9. 收集实验数据，进行统计分析。
五、实验结果1. 调整培养基的pH值后，血管收缩程度明显增加。
2. 调整培养基的温度后，血管舒张程度明显增加。
3. 添加EDTA后，血管通透性增加，红细胞渗出。
4. 添加NaOH后，血管收缩程度增加。
5. 添加HCl后，血管舒张程度增加。
6. 添加不同浓度的药物后，血管收缩或舒张程度发生改变。
六、实验结论1. 离体血管实验可以模拟体内环境，研究血管在不同理化因素作用下的变化。
2. pH值、温度、EDTA、NaOH、HCl和药物等理化因素可以影响血管的收缩、舒张和通透性。
em大鼠离体胸主动脉血管环实验方法介绍
离体大鼠胸主动脉环实验目的：观察药物对大鼠离体胸主动脉血管环收缩活动的影响；动物：健康的SD大鼠，雄性，体重250～280克药品与试剂：20%氨基甲酸乙酯，3mo1氯化钾，10-5mo1/L维拉帕米，0.1％苯肾上腺素，1％酚妥拉明，Krebs液，95%O2+5%CO2混合气体器材：HV-4/SV-4离体组织器官恒温灌流装置，超级恒温水浴，温度计，5g张力换能器，BL-420生物信号采集系统，手术剪刀，眼科剪，眼科镊，培养皿，烧杯，100μl、1m1移液器，棉线；方法：1．BL-420生物信号采集系统参数设置：T:DC , F:10Hz ,采样率：100Hz, 扫描速度：25s/div，放大倍数200～500。
2．标本制备（1）大鼠用20%氨基甲酸乙酯按1g/kg体重腹腔注射麻醉，剪开胸腔，迅速取出心脏及胸主动脉放入盛有4℃的混合气体饱和的Krebs营养液的培养皿中，连续用混合气体充气。
分离出主动脉，将血管内的残存血液冲洗干净，小心剥去外围的结缔组织，将主动脉弓以下的胸主动脉剪成4mm长的动脉环数段备用。
（2）需要保存内皮的血管，动作应轻柔。
如需无内皮的血管环，可用棉签或牙签将血管内皮轻轻檫去。
（3）将不锈钢三角钩轻轻穿入血管环，并将另一的三角形不锈钢挂钩也轻轻穿入，通过挂钩悬挂于浴管内，下方固定于固定钩上，上方以一细钢丝挂钩连于张力换能器，通入混合气体，调节通气量至一个一个小气泡逸出为（如下图示）。
浴槽内温度应保持37±0.5℃。
图1 离体主动脉血管环孵育测量方式图示4）血管环的初始张力前15分钟调为1g，15分钟后调至2g，并以此张力平衡60分钟。
每隔15分钟换液一次。
5）用终浓度60mmol KCL收缩血管环，作用15 min诱导血管环收缩，激发舒缩活性，待收缩稳定后用预热的Krebs洗脱，反复冲洗直至张力恢复到初始值为止；重复加入同一浓度KCL，连续3次，用Krebs液反复脱洗标本观察收缩曲线波形使其张力信号回复初始值。
槲皮素对大鼠主动脉环的舒张作用及机制
泸州 医学 院 学报
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麓 槲皮素对大 鼠主动脉环的舒 张作用及机制
前 列 腺 素 、 激 活钾 通 道 无关 ， 与 内皮 一 氧 化 氮 有 关 。 钙 而
关 键词 槲 皮 素： 主动 脉 ； 管 舒 张： 血 内皮 中 图分 类 号 Ｒ ３ ． ３１ ３ ３ 文 献 标 识码 Ａ 文 章 编 号 １ ｏ — ６ ９ ２ ０ ）－ ２ ５ ０ ０ ０ ２ ６ （０ ８ ３ ０ ６ — ４
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介绍一种离体血管环的实验装置和方法
第15卷 第3期 医学研究生学报 V ol.15 N o.3 2002年6月 Journal of Medical P ostgraduates Jun.2002・论 著・介绍一种离体血管环的实验装置和方法刘 沙, 萧明第, 薛 松, 卢成宝(上海市第一人民医院心血管外科,上海200080)摘要: 目的:介绍一种离体血管环的实验装置和方法。
方法:通过心桥软件将血管环的等长张力和内壁周长数据绘成长度2张力曲线,据此将血管环拉伸至最适长度后进行实验。
结果:本实验装置和方法稳定、可靠、准确、灵敏。
结论:这套装置能够更准确地反映血管的特点,可用于各种血管环实验。
关键词: 血管环; 张力测量; 长度2张力曲线中图分类号: R443.8 文献标识码: A 文章编号: 100828199(2002)0320199203ΞAn apparatus and method for the experiment of vessel ring ex vivoLI U Sha,XI AO Ming2di,X UE S ong,LU Cheng2bao(Department o f Cardiovascular Surgery,Shanghai Fir st People’s Hospital,Shanghai200080,China)Abstract: Objectives:An apparatus and method for the experiment of vessel ring ex vivo was discussed. Methods:Individual length2tension curves for each vessel ring were established via coropass s oftware by relat2 ing the is ometric tension with the corresponding internal circum ferential length.The vessel ring was investigat2 ed after being set at an optional point according to its own length2tension curve. Results:The apparatus and method was stable,exact and sensitive. Conclusions:The apparatus and method reflected the properties of vessels m ore accurately and therefore was suitable for the experiment of all types of vessel rings.K ey w ords: Vessel ring; T ension measurement; Length2tension curve 我们参照国外资料[1,2]研制了一套离体血管环的实验装置,现简介如下。
浅谈离体血管环实验
浅谈离体血管环实验作者：程香孙霞刘英光来源：《科技视界》2019年第23期【摘要】2016年，中国心血管病死亡率居首位，高于肿瘤及其他疾病。
脑血管病、冠心病、外周动脉疾病等血管性疾病在心血管病中占据着重要地位。
离体血管环实验是研究血管舒缩功能的一种实验方法。
通过对血管舒缩功能研究，探讨血管疾病的本质，从而为心血管疾病的防治提供科学依据。
本文从离体血管环实验简介、实验设备、实验步骤及实验中的经验总结等方面进行阐述，希望对即将开展该实验的研究人员提供一些帮助。
【关键词】离体血管环实验;血管功能;收缩;舒张中图分类号： TH776.2 文献标识码： A 文章编号： 2095-2457（2019）23-0220-002DOI：10.19694/ki.issn2095-2457.2019.23.104【Abstract】In China， Cardiovascular Disease（CVD） was the leading cause of death in 2016， more than tumors or any other diseases.Cerebrovascular disease， coronary heart disease，and peripheral arterial disease occupy an important position in cardiovascular disease.The vascular ring experiment in vitro is an experimental method for the study of vasomotor contraction and relaxation.Through the study of vasomotor function， the nature of vascular diseases is explored to provide a scientific basis for the prevention and treatment of cardiovascular diseases. This article describes the introduction， devices， procedures and experience of the vascular ring experiment in vitro， hoping to provide some helps for researchers to conduct the experiment.【Key words】The vascular ring experiment in vitro; Vascular function; Contraction; Relaxation心血管系統疾病是世界范围内死亡的主要原因，但其发病机制尚不清楚[1]。
浅谈离体血管环实验
图1DMT620离体血管张力测定仪离体血管环实验是研究血管舒缩功能的一种实验方法。
实验装置不断推陈出新,目前使用较广泛的是DMT620多通道离体微血管张力测定系统(丹麦)(图1)。
首科技视界Science &Technology VisionScience &Technology Vision 科技视界先分离血管,清除周围结缔组织和脂肪组织,切成2-3mm 长的血管环,再用金属丝或钨丝穿过血管环并悬挂于张力浴槽内,连接张力换能器和计算机,测定并记录离体血管的舒缩活动,常用于研究大鼠肠系膜动脉[4]、大鼠脑基底动脉[5]、小鼠肠系膜动脉[6]、小鼠主动脉、髂动脉、颈动脉、肾动脉[7]等微小血管的功能。
2离体血管环实验设备、器材离体血管环实验所需设备、器材包括:(1)动物解剖台;(2)手术解剖显微镜;(3)DMT620多通道离体微血管张力测定系统;(4)氧气瓶;(5)微型真空泵;(6)培养皿;(7)水浴锅;(8)常用动物手术器械;(9)移液器等。
3离体血管环实验步骤及操作注意事项(1)打开仪器设备,检查仪器状态。
(2)在DMT620多通道离体微血管张力测定系统张力浴槽内填充5ml 预冷的(4℃)Krebs -Henseleit 溶液(KHS ),KHS 成分(浓度/mM ):NaCl115,NaHCO 325,KCl 4.6,NaH 2PO 4.2H 2O1.2,MgCl 2.6H 2O1.2,CaCl 22.5,Glucose.H 2O10,充95%O 2+5%CO 2后用NaOH 调至pH7.4[8]。
注意此时不可加热。
(3)处死动物,解剖并分离组织,轻轻取出拟研究的血管组织,放置于含预冷的(4℃)KHS 的容器中,稍微冲洗血管表面及管腔内部分血液。
(4)将血管组织转移至含预冷的(4℃)KHS 的专用培养皿中,轻轻撑开血管并分离血管表面的脂肪及结缔组织等,尽量分离干净。
(5)剪切一段长约2mm 的血管环,建议取中间段的或分支,两端的不要。
离体灌流大鼠胸主动脉环Na+／H+交换的意义.
离体灌流大鼠胸主动脉环Na＋／H＋交换的意义目的：NH4Cl负荷是一经典的酸化细胞内环境的手段，这种方法广泛地用于各种组织细胞pH值的研究。
已证实Na+/H+交换体存在于哺乳类动物的心肌细胞、平滑肌细胞等的细胞膜，此转运系统对细胞外Na+和细胞内H+进行1∶1交换，当细胞内酸负荷增加即细胞内pH(pHi)降低时，Na+/H+交换体被激活，其主要生理作用是调节pHi 和细胞内Na+([Na+]i)。
方法：应用离体血管环灌流方法，采用Na+/H+交换抑制剂Amiloride证实大鼠离体胸主动脉环Na+/H+交换的存在，以及其对血管环平衡30 min，换用20 mmol/L 的NH4Cl的Kreb′s 液灌流15 min后，随机分为两组：(1)对照组(n=5)：恢复常规Kreb's液15 min；(2)给药组(n=9)：在常规Kreb's液中冲洗时加入10-4 mmol/L Amiloride 以抑制Na+/H+交换。
结果：给药组与预灌时比较大鼠胸主动脉环对苯肾上腺素(Phenylephrine， PE)引起的收缩反应明显降低(P<0.001)，与对照组比较也明显降低(P<0.001)；给药组乙酰胆碱(acetylcholine， Ach)引起的内皮依赖性舒张反应与预灌时比较明显增强，与对照组比较也明显增强(P<0.05～0.001)；去内皮环在NH+4负荷阶段出现自发性收缩波，与完整内皮比较有显著差异(P<0.001)；对照组血管环Na+、Ca2+、K+含量均高于给药组(P<0.05，P<0.001)。
组织细胞用含有NH4Cl的液体孵育10至15 min后，NH+4依电化学梯度顺着钾通道进入细胞，引起细胞内pH值上升，此时换用不含NH+4Cl的液体冲洗时，细胞内NH+4解离为NH3及H+，NH+3逸出细胞而将NH+3滞留于细胞内等致pHi下降；经常规缓冲液冲洗后，酸化的pHi在数分钟内又可恢复，这主要依赖于细胞膜上存在有Na+/H+交换，将细胞内H+排出细胞外，而相同数量的Na+进入细胞，这一调节机制可被Amiloride抑制，因而阻滞酸化血管平滑肌、内皮细胞pHi的恢复，处于严重的酸中毒。
Apelin.13对离体大鼠主动脉环舒张作用的实验研究
Ａｐｅｌｉｎ．13对离体大鼠主动脉环舒张作用的实验研究目的研究新发现的小分子活性肽Apelin-13对离体大鼠主动脉环的舒张作用及其可能的作用途径。
方法采用累计加药法，检测Apdm-13对去甲肾上腺素(NE)预收缩的内皮完整的胸主动脉环及去内皮后胸主动脉环张力的变化。
结果浓度范围内对内皮完整的离体大鼠胸主动脉环具有浓度依赖性的舒张作用，最大舒张率为(44.43+11.1)％，其对内皮完整的血管的舒张作用显著大于去内皮血管(P ＜0.05)，Apelin-13对去内皮的主动脉环的最大舒张率仅为(6.36±2.40)％。
结论Apelin-13具有显著的舒张主动脉的作用，其舒张作用依赖于内皮的完整性。
标签：Ape]in；主动脉；舒张作用；内皮；大鼠Apelin是近年新发现的小分子活性肽，为G蛋白偶联受体一血管紧张素Ⅱl 型受体相关蛋白(putativereceptor protein related t0 the anglotensinⅡtype 1 recep—tor，APJ)的内源性配体。
研究发现Apelin及其受体APJ广泛分布于心血管组织，参与正常心血管组织的胚胎发育，对正常和病变心血管都具有正性肌力、舒张血管、降低血压的保护作用。
给麻醉的正常大鼠静脉注射Apelin可导致平均动脉压迅速降低，并且发现给清醒的大鼠静脉注射Apelin后亦引起降压效应，而Apelin的降压作用可被L-NAME阻断。
Lee，D.K等还发现Apelin对自发性高血压大鼠也有降低血压的作用。
但是其降低血压、舒张血管的机制尚未完全清楚。
本实验旨在通过观察Apdln—13对离体大鼠主动脉环的影响，探讨Apelin-13的舒张血管作用及其机制。
1材料与方法1.1药品与试剂：Apelin-13购自美国Phoenix Dhamla．ceuficals Pharmaceuticals hc；乙酰胆碱(acetyleholine，ACh)购自Sienna公司；去甲肾上腺素(Norepinephfine，NE)购自上海禾丰制药有限公司。
波叶大黄水提取物对大鼠离体胸主动脉的舒张作用
波叶大黄水提取物对大鼠离体胸主动脉的舒张作用目的观察波叶大黄水提取物的舒血管作用及其舒张作用机制。
方法采用血管灌流法，观察波叶大黄水提取物对内皮完整和去除内皮血管的舒张作用。
应用不同的工具药研究波叶大黄水提取物舒张血管的作用影响。
结果波叶大黄水提取物（0.03、0.1/mL）对苯肾上腺素（1mμol.L-1）预收缩的内皮完整或去内皮血管环均产生浓度依赖性的舒张作用。
在内皮完整的血管环中，0.03、0.1g/mL的波叶大黄水提取物预孵育后，能抑制去甲肾上腺素对大鼠胸主动脉的收缩作用。
四乙铵（5μmol.L-1）预处理能显著降低波叶大黄水提取物舒张血管的作用（p＜0.05）。
结论波叶大黄水提取物舒张血管的作用可能不依赖于血管内皮功能，而是激活Ca2激活钾+通道有关。
标签：波叶大黄；主动脉，胸；血管舒张大黄是指掌叶大黄、唐古特大黄和药用大黄的干燥根和及根茎[1]。
波叶大黄也称山大黄，其性寒、味苦，具有清热解毒，缓泻，健胃，止血生肌等功效。
临床上应用于肺热咳嗽，咽喉肿痛，便血，鼻血，外伤出血，实热便秘和水火烫伤等病症[2]。
近年来的研究表明，波叶大黄有抗癌、抗炎、抗辐射和抗凝血作用[3]。
药理研究发现，波叶大黄根茎中的云杉鞣酚对离体大鼠胸主动脉舒张作用[4]，但對于波叶大黄对离体血管舒张作用及机制，目前尚未清楚。
本实验采用大鼠离体胸主动脉环灌流方法，探讨波叶大黄舒张血管的作用及其可能机制。
1 材料与方法1.1 材料：准确称取波叶大黄100.00g，加入蒸馏水2L，在80℃温度煮沸2h，过滤减压浓缩干燥而得36.0g粉末。
苯肾上腺素、乙酰胆碱、左旋硝基精氨酸甲酯（Nω-ni和亚甲蓝、吲哚美辛、四乙铵、格列本脲和4-氨基吡啶均为美国Sigma公司产品。
其余试剂为市售分析纯。
实验实验动物选用SD大鼠，雄性，体重为250-300g，由延边大学医学部实验动物科提供。
生理性营养液成分（Kreb’s营养液）为氯化钠115.0mmol/L、氯化钾4.7mmol/L、氯化钙2.5mmol/L、氯化镁 1.2mmol/L、碳酸氢钠25.0mmol/L、磷酸二氢钠 1.2mmol/L和葡萄糖10.0mmol/L组成。
胸主动脉血管环作用及机制的研究
胸主动脉血管环作用及机制的研究香薷总黄酮对大鼠离体胸主动脉血管环作用及机制的研究金德西朱一苗（浙江大学医学院浙江杭州 310058）摘要：目的：研究香薷总黄酮的血管舒张作用，并探讨其可能机制。
方法：采用大鼠胸主动脉环张力测定法。
结果：香薷总黄酮对血管环无明显的直接作用；香薷总黄酮(5-200×10-3g ·L-1)对苯肾上腺素(PE，10-6mol ·L-1)预收缩的内皮完整或去内皮血管环均产生浓度依赖性的舒张作用；香薷总黄酮对高浓度氯化钾(KC1，6×10-2 mol l·L-1)预收缩的血管环也产生浓度依赖性的舒张作用，吲哚美辛、L-NAME、在（25-50×10-3g l·L-1）浓度下能显著性阻断香薷总黄酮的舒血管作用；用格列苯脲（10-3 mol l·L-1）、四乙胺（10-1 mol l·L-1）、4-氨基吡啶（10-4 mol l·L-1）预处理对香薷总黄酮诱导的去内皮动脉环舒张作用具有明显的增强效应；T1/2 （E+）19.78±3.56min显著性小于T1/2（E-）35.51±7.12min。
结论：香薷总黄酮的部分内皮依赖性血管舒张作用的机制可能涉及血管平滑肌细胞的Ca2+激活和促进血管内皮NO合成所致。
关键词：香薷总黄酮（ES）；动脉；平滑肌；内皮； K+ 通道Efects of Total Flavonoids of E. splendens on isolated rat thoracic aorta and the possible mechanismsJIN Dexi，ZHU Yimiao (School of Medicine，Zhejiang University，Hangzhou 310058，China)ABSTRACT OBJECTIVE: To know the effects and mechanisms of Total Flavonoids of E. splendens for blood vessel METHODS: The tension of rat thoracic aorta tings was measured RESULTS: Total Flavonoids of E. splendens did not directly relax or constrict vascular rings ;T otal Flavonoids of E. splendens caused concentration—dependent relaxation in KCl and PE preconstricted aorta rings with or without endothelium ;The relaxation response of T otal Flavonoids of E. splendens（25-50μg/ml）was significantly inhibited by NOS inhibitor Indo and SGC inhibitor L-NAME; The relaxation response of Total Flavonoids of E. splendens was significantly enhanced by potassium channel inhibitors Glib、TEA、 4-AP T B1/2B（E+）19.78±3.56min is significantly lower than T B1/2B90（E-）35.51±7.12min。
离体血管环的实验装置及方法PPT课件
实验方法和原理
❖将r =2π/ L带入可得:P = 2πT/ L【5】 ❖据此绘制等压线T = r×100 mmHg (图3)。 ❖ 心桥软件求出的等压线与长度2张力曲线的交点,即
跨壁压100 mmHg时血管环的内壁周长L100 ❖将血管环拉伸至内壁周长为0. 9 L100,被动扩张血管
离体血管环的实验装置和方法
目录
❖实验装置介绍 ❖实验方法和原理介绍 ❖实验装置的检测 ❖总结与讨论
1.实验装置
组成部分： ❖ 张力传感器和数据转换器(上海唐衡电子公司) ❖ 螺旋测距器(上海索铃电子技术研究所) ❖COROPASS心桥软件 (本科与唐衡公司开发)及 PC
机 ❖恒温器官浴槽
装置介绍
的拉力运行120min ,漂移不大于20mg。 ❖ 测量不同重量的砝码,结果最大误差1～10g的砝码为
10mg、最大误差20～50g的砝码为20mg、最大误差 100g的砝码为30mg。 ❖ 分别增加100、50、10mg的拉力,系统能即刻感知。
4.总结与讨论
❖离体血管环实验是研究血管生理学和药理学 的重要手段。
血管环悬挂在两根不锈钢丝间,置入盛有 37℃，pH7.4的Krebs液内,并持续通入 5%CO2+95%O2气体的器官浴槽。传感器连接上 位钢丝,测定血管的张力。张力数据经数据转 换器处理后传送至心桥软件。本装置采用量 程100g的惠斯通电桥式传感器,精度0.01g。 下位钢丝连接精度0.01mm的螺旋测距器,由此 调整和测量钢丝间距(如下图)
以模拟体内由跨壁压引起的张力。血管环拉伸后平 衡1h开始实验,向浴槽中加入试剂,心桥软件自动记录 张力的变化。实验过程中,保持这种程度的牵拉不变。 这样,血管环的静息拉力则由自身的长度2张力曲线 决定。
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离体大鼠胸主动脉环实验
目的：
观察药物对大鼠离体胸主动脉血管环收缩活动的影响；
动物：
健康的SD大鼠，雄性，体重250～280克
药品与试剂：
20%氨基甲酸乙酯，3mo1氯化钾，10-5mo1/L维拉帕米，0.1％苯肾上腺素，1％酚妥拉明，Krebs液，95%O2+5%CO2混合气体
器材：
HV-4/SV-4离体组织器官恒温灌流装置，超级恒温水浴，温度计，5g张力换能器，BL-420生物信号采集系统，手术剪刀，眼科剪，眼科镊，培养皿，烧杯，100μl、1m1移液器，棉线；
方法：
1．BL-420生物信号采集系统参数设置：
T:DC , F:10Hz ,采样率：100Hz, 扫描速度：25s/div，放大倍数200～500。
2．标本制备
（1）大鼠用20%氨基甲酸乙酯按1g/kg体重腹腔注射麻醉，剪开胸腔，迅速取出心脏及胸主动脉放入盛有4℃的混合气体饱和的Krebs营养液的培养皿中，连续用混合气体充气。
分离出主动脉，将血管内的残存血液冲洗干净，小心剥去外围的结缔组织，将主动脉弓以下的胸主动脉剪成4mm长的动脉环数段备用。
（2）需要保存内皮的血管，动作应轻柔。
如需无内皮的血管环，可用棉签或牙签将血管内皮轻轻檫去。
（3）将不锈钢三角钩轻轻穿入血管环，并将另一的三角形不锈钢挂钩也轻轻穿入，通过挂钩悬挂于浴管内，下方固定于固定钩上，上方以一细钢丝挂钩连于张力换能器，通入混合气体，调节通气量至一个一个小气泡逸出为（如下图示）。
浴槽内温度应保持37±0.5℃。
图1 离体主动脉血管环孵育测量方式图示
4）血管环的初始张力前15分钟调为1g，15分钟后调至2g，并以此张力平衡60分钟。
每隔15分钟换液一次。
5）用终浓度60mmol KCL收缩血管环，作用15 min诱导血管环收缩，激发舒缩活性，待收缩稳定后用预热的Krebs洗脱，反复冲洗直至张力恢复到初始值为止；重复加入同一浓度KCL，连续3次，用Krebs液反复脱洗标本观察收缩曲线波形使其张力信号回复初始值。
6）稳定30 min后进行后续实验，记录血管环张力变化数值。
张力变化以血管环收缩幅度变化相对值的百分比（%）来表示。