荧光探针汇总
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1.Fluo-3 AM （钙离子荧光探针）
原理Fluo-3 AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fluo-3 AM的荧光非常弱，进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-3，从而被滞留在细胞内，和细胞内游离
的钙离子结合，结合钙离子后可以产生较强的荧光。
生理意义细胞内钙离子增多是细胞损伤的结果，因此此探针能表征细胞损伤程度
激发波长506nm 发射波长526nm （绿色）
备注推荐使用
2.Mag-fura-2 AM（钙离子荧光探针）
原理Fura-2 AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fura-2 AM进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fura-2，从而被滞留在细胞内。Fura-2可以和钙离子结合，结合
钙离子后在330-350nm激发光下可以产生较强的荧光，而在380nm激发光下则会
导致荧光减弱。这样就可以使用340nm和380nm这两个荧光的比值来检测细胞内
的钙离子浓度，可以消除不同细胞样品间荧光探针装载效率的差异，荧光探针的渗
漏，细胞厚度差异等一些误差因素。
生理意义细胞内钙离子增多是细胞损伤的结果，因此此探针能表征细胞损伤程度
激发波长为340nm和380nm 发射波长510nm （蓝色）
备注仪器滤光片不适用
3Fluo-4-AM （钙离子荧光探针）
原理Fluo 4 是一种将Fluo 3结构中的Cl替换成F的钙荧光探针。由于将Cl替换成了电子吸引力更强的F，它的最大激发波长会向短波长处偏离10 nm左右。所以用氩
激光器激发时，Fluo 4的荧光强度比Fluo 3强1倍。由于Fluo 4与钙离子的亲和力
和Fluo 3近似，所以使用上和Fluo 3也基本相同
生理意义细胞内钙离子增多是细胞损伤的结果，因此此探针能表征细胞损伤程度
激发波长494nm 发射波长516nm （绿色）
备注用激光器激发时荧光强度强，因此不推荐
4.DCFH-DA （活性氧荧光探针）
原理DCFH-DA本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜，从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。
生理意义检测细胞内活性氧表征细胞损伤程度
激发波长485nm 发射波长520nm （绿色）
备注推荐使用
5.DHR 123 （活性氧荧光探针）
原理本身无荧光, 在超氧化酶存在时可被过氧化氢(H2O2)氧化, 转变成发射绿色荧光的罗丹明123 (Rhodamine 123), 因此广泛应用于检测细胞内活性氧(ROS), 如过氧化物, 次氯酸和过氧亚硝基阴离子等。
生理意义检测细胞内活性氧表征细胞损伤程度
激发波长507nm 发射波长529nm （绿色）
备注氧化后成罗丹明123，荧光强度可能受到线粒体膜电位的影响
6.RhodamineI23 （线粒体膜电位荧光探针）
原理细胞膜通透的阴离子绿色荧光染料, 能够迅速被活线粒体摄取, 而无细胞毒性。
生理意义标记线粒体膜电位
激发波长488nm 发射波长515 ~ 575nm （绿色）
生理意义检测线粒体膜电位
备注正在使用
7.Hoechst 33342 （DNA荧光探针）
原理Hoechst 33342是一种可对DNA 染色的细胞核染色试剂，常用于细胞凋亡检测。
Hoechst染料可透过细胞膜在聚AT序列的富集区域的小沟处与DNA结合并对
DNA染色而发出强烈的蓝色荧光。
生理意义标记双链DNA
激发波长355nm 发射波长465nm （蓝色）
备注正在使用
8.FDA
原理FDA可透过细胞膜并作为荧光素积蓄在活细胞内。
生理意义反映细胞膜完整性和细胞活力
激发波长495nm 发射波长520nm （绿色）
备注正在使用
9.PI （DNA荧光探针）
原理它不能透过完整的细胞膜，但能透过凋亡中晚期的细胞和死细胞的膜而将细胞核染红，与细胞核中的DNA结合的PI发出的荧光，与未结合的PI相比，强度会增
强20-30倍。
生理意义检测死细胞及凋亡晚期细胞
激发波长530nm 发射波长615nm （红色）
备注尝试过，但效果不好
10.EB （核酸荧光探针）
原理EB，不能透过细胞完整的细胞膜。溴化乙锭含有一个可以嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团。它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性。在高离子
强度的饱和溶液中，大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。当染料分子插入
后，其平面基团与螺旋的轴线垂直并通过范德华力与上下碱基相互作用。这个基
团的固定位置及其与碱基的密切接近，导致与DNA结合的染料呈现荧光，其荧
光产率比游离溶液中染料有所增加。
生理意义检测死细胞
激发波长545nm 发射波长605nm （红色）
备注有强致癌性，不推荐
11.DAPI （DNA荧光探针）
原理DAPI可以穿透细胞膜与细胞核中的双链DNA结合而发挥标记的作用，产生比自身强20多倍的荧光，且对活细胞无毒副作用。和EB相比，对双链DNA的染色
灵敏度要高很多倍。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双
链DNA染色。
生理意义标记凋亡和死细胞的DNA
激发波长364nm 发射波长454nm （蓝色）
备注与Hoechst功能相近，可以尝试
12. Calcein AM
原理Calcein-AM由于在Calcein(钙黄绿素)的基础上加强了疏水性，因此能够轻易穿透活细胞膜。当其进入到细胞质后，酯酶会将其水解为Calcein(钙黄绿素)留在细胞
内,发出强绿色荧光，且细胞毒性很低，适合用于活细胞染色。
生理意义检测细胞膜完整性
激发波长494nm 发射波长517nm （绿色）