制备色谱技术
快速制备色谱
快速制备色谱
快速制备色谱是一种快速、灵活、有效的色谱分析方法，它可以在较短的时间内对物质的性质进行准确的测定和分析。
快速制备色谱技术的原理是将含有不同物质的样品分离成单个或多个具有明显不同颜色的溶液，然后将这些溶液涂在一张灰度色谱上，其中每一种物质都会呈现出不同的颜色，从而形成一条色谱线，通过对色谱线的分析就可以得出样品中不同物质的组成比例，从而快速准确测定样品中的物质。
快速制备色谱的步骤包括：
1. 样品准备：将样品精细剂量，加入适量的水，搅拌至样品完全溶解。
2. 颜料制备：将各种颜料按照需要的比例混合制备，如青色染料和红色染料。
3. 样品分离：将所制备的样品按照需要的比例混合，并用离心机进行分离，使各种物质分离成不同的溶液。
4. 制备色谱：将各种溶液涂在一张灰度色谱上，每种物质涂一种颜色，形成一条色谱线，从而可以快速准确地测定样品中的物质组成。
5. 解读：通过对色谱线的评价，可以准确地测定样品中不同物质的含量，从而获得样品的性质信息。
快速制备色谱技术具有快速、灵活、有效的特点，可以快速准确地测定物质的性质，因此在化学、生物、食品分析等领域都有广泛的应用。
此外，由于快速制备色谱技术的操作简便，耗时短，所以也被广泛应用于实验室的日常工作中。
现代分离方法与技术第7章 制备色谱技术
7.1 制备薄层色谱技术 7.2 常规柱色谱技术 7.3 加压液相色谱技术 7.4 逆流色谱法 7.5 超临界流体色谱法 7.6 模拟床移动色谱法 7.7 制备气相色谱法 7.8 径相色谱法 7.9 顶替色谱法 7.10 离子交换与吸附
制备色谱技术
制备色谱的特点：
最有效的制备性分离技术；
实验室规模、小批量生产、产业化制备；
不同领域产品量不一样，阐明化学结构和
生物活性，30－50 mg足够，分析用标准
品100 mg以上，有机合成通常需要g级以
上；
薄层色谱
柱色谱
制备色谱技术
7.1 制备薄层色谱技术
设备简单，操作方便、分离快速、灵敏度及 分辨率高； a. 切割谱带更加方便； b. 自动化：自动点样仪、自动程序展开仪、 薄层扫描仪、多种强制流动技术、多种联 用技术如傅立叶变换红外、拉曼、质谱等。
50-300
2-7
50-500
2-12
制备色谱技术
7.2 常规柱色谱技术
可使用较大直径的色谱柱，更多的固定相，
因此样品量可以更大；
分离速度较慢，样品可能被不可逆吸附；
不适合小颗粒的吸附剂？
改进方法：减压、加压等
制备色谱技术
柱色谱常用固定相
(1)硅胶：官能团和分子的几何形状，对异构
比表面积
制备色谱技术
大孔吸附树脂使用：
用前需预处理除去杂质：
回流法、水蒸气蒸馏法；
渗漉法----乙醇丙酮等有机溶剂湿法装柱，浸泡12
h后洗脱2-3倍柱体积，再浸泡3-5 h后洗脱2-3倍柱体
积，重复直到流出的有机溶剂与水混合不呈现白色乳 浊现象为止，用大量蒸馏水洗去乙醇即可。如单独采 用有机溶剂洗不尽杂质，则可用酸碱处理，2-5%盐 酸、2-5%NaOH溶液浸泡，洗脱，水洗。
制备色谱技术原理及其在天然产物提取分离中的应用
摘要：制备色谱技术是用于分离提取天然产物有效成分的一种重要技术。
现简要综述了各类制备色谱技术的原理，介绍了各类制备色谱技术在天然产物提取分离中的应用情况。
关键词：制备色谱技术；应用；天然产物；原理0 引言制备色谱技术发展至今已有100多年历史，其目的在于分离制备一种或者多种纯组分。
从最早的常压柱色谱技术、薄层色谱技术，到后来发展起来的加压液相色谱技术、高速逆流色谱技术、模拟流动床色谱技术等，制备色谱技术已经成为现代科学研究和生产实践中分离多组分化合物的一个重要技术手段，尤其在自然界中天然产物活性成分的提取和纯化中起着重要作用。
本文主要介绍几种重要的制备色谱技术的原理及其在天然产物分离纯化中的应用情况。
1 制备色谱技术的原理1.1 薄层色谱薄层色谱技术属于液相色谱技术的范畴，经典的制备型薄层色谱设备简单，投资较少，但处理量较小，通常用来分离毫克级的样品，且被分离的化合物需要从薄层板上刮下，并将其从吸附剂中提取出来。
薄层色谱中常用的是硅胶吸附色谱，其次是氧化铝吸附薄层色谱。
1.2 常压柱色谱常压柱色谱应用较为广泛，技术也相对成熟，主要包括吸附柱色谱、分配柱色谱、离子交换色谱、凝胶色谱、亲和色谱、干柱色谱等。
其中，吸附柱色谱中的硅胶吸附柱色谱是目前应用最为广泛的一种常压柱色谱。
吸附柱色谱的技术原理是不同化合物由于分子结构不同，与吸附剂表面作用力的大小也不同，同一种冲洗溶剂对不同分子结构的化合物溶解度不同，致使冲洗溶剂在冲洗时，不同化合物组分在色谱柱中的流动速度不同，从而将复杂混合物分离。
1.3 加压制备色谱加压制备色谱技术是一种使用较为广泛的色谱分离纯化技术，它是将分离填料填装在色谱柱内，用液体流动相进行洗脱，利用药物中不同活性成分与填料相互作用力的差异来分离混合物。
一般将压力0.2 MPa 左右的称为快速色谱；压力低于0.5 MPa的称为低压制备色谱；压力在0.5～2 MPa的称为中压制备色谱；压力大于2 MPa的称为高压制备色谱，也叫高效液相色谱。
制备液相色谱技术(LC-MS)
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结束
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... ...
重复性
选择性要求
色谱柱吸附等温线
正常载荷(loading)：
色谱柱吸附等温线
超载(overloading)：
纯度（purity)、产量（throughput） 和收益（yield）（PTY）三者的关系
浓度过载和体积过载
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浓度过载和体积过载色谱示意图
什么时候使用浓度过载?
影响到馏分的纯度； 参数设置方便； 需配备MS检测器，设备费用投入较大。
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Mass-based
当使用按质量进行馏分收集时，只有当 MSD检测到色谱峰含有目标质量数，且该目 标质量数的强度超出特定的阈值时，馏分收 集才被触发。这就确保了在每次进样中只收 集含目标化合物的馏分。大部分情况下只有 一个馏分。
1. 基于时间（Time-based） 2. 基于峰（peak-based） 3. 基于质量（Mass-based）
基于时间（Time-based）
根据馏分的保留时间及其色谱峰宽， 以时间作为馏分收集器动作的指令参数。
特点：
参数设置方便，样品收益高、损失少。
色谱保留时间的不稳定会影响到馏分 的纯度和收益。
高效制备液相色谱技术
高效制备液相色谱的原理：
色谱分离原理无论是分析型色谱还是制备型色谱都是相同的 ，那就是色谱理论。
但是在理论的遵循上，制备型有时需打折扣。 这是由于两种类型的色谱最终的目的是不同的。 分析型色谱：分离度高，灵敏度高，以含量测定为目的。 制备型色谱：要求纯度、产量和收益。
工艺制备色谱技术的优缺点及应用
工艺制备色谱技术的优缺点及应用
工艺制备色谱技术是一种分离技术，用于分离和纯化化合物或混合物中的成分。
它的优点和缺点如下：
优点：
1. 高效分离：工艺制备色谱技术能够实现高效的分离，对于复杂混合物中的成分进行有效的分离并纯化。
2. 高选择性：通过选择不同的色谱柱和条件，可以实现对特定成分的高选择性分离，提高纯度。
3. 处理大样品量：相比于常规色谱技术，工艺制备色谱技术能够处理更大的样品量，适用于工业生产和大规模纯化。
4. 可逆性：工艺制备色谱技术通常是可逆的，可以多次使用，在一定程度上节约成本。
缺点：
1. 设备费用高：工艺制备色谱技术设备和耗材的成本较高，需要较高的投资。
2. 操作复杂：相比于常规色谱技术，工艺制备色谱技术的操作相对更加复杂，需要专业的技术和经验。
3. 时间消耗较长：由于处理大样品量，工艺制备色谱技术的分离和纯化过程通常需要较长的时间。
应用：
1. 制药工业：工艺制备色谱技术广泛应用于药物分离和纯化，用于制备高纯度药物原料和活性成分。
2. 化工工业：工艺制备色谱技术用于分离和纯化化工产品，提高产品的纯度和质量。
3. 食品工业：工艺制备色谱技术用于分离和纯化食品添加剂、色素和营养成分等。
4. 环境分析：工艺制备色谱技术可用于环境样品中有毒有害物质的检测和分离。
需要注意的是，工艺制备色谱技术在不同应用领域的具体操作和条件可能有所不同，需根据实际情况进行调整和优化。
sfc超临界制备色谱
sfc超临界制备色谱
SFC（Supercritical Fluid Chromatography，超临界流体色谱）是一种基于超临界流体作为流动相的色谱技术。
它结合了液相色谱和气相色谱的优点，具有高效、快速、环境友好等特点。
SFC超临界制备色谱是在SFC技术基础上进行的制备级别的分离和纯化。
下面是SFC超临界制备色谱的详细步骤：
1. 准备样品：将需要分离和纯化的化合物溶解在适当的溶剂中。
2. 准备流动相：选择适当的超临界流体作为流动相，常用的超临界流体有二氧化碳（CO2）和乙醇等。
将超临界流体通过压缩和升温使其达到超临界状态。
3. 准备色谱柱：选择适当的色谱柱，常用的填料材料有硅胶、炭、硅胶凝胶等。
色谱柱的尺寸和填料粒径根据需要进行选择。
4. 装载样品：将准备好的样品溶液通过自动进样器或手动装载器装载到色谱柱中。
5. 进行分离：打开流动相的阀门，使超临界流体通过色谱柱，样品在超临界流体中进行分离。
通过调整流动相的温度、压力和流速等参数，控制分离过程。
6. 收集分离物：根据需求，设置适当的检测器来监测分离
物的出 eluent。
根据分离物的特性，可以选择采用紫外检测器、质谱仪等进行检测。
7. 分析和纯化：根据分离物的特性和纯化要求，对分离物进行进一步的分析和纯化。
可以采用旋转蒸发、结晶、溶剂萃取等技术来获得纯化的化合物。
需要注意的是，SFC超临界制备色谱的操作条件和参数需要根据具体的样品和分离要求进行优化和调整，以获得最佳的分离效果和纯化效果。
制备型高效液相色谱法及其在中药研究中的应用
制备型高效液相色谱法及其在中药研究中的应用一、本文概述制备型高效液相色谱法（Preparative High Performance Liquid Chromatography, Prep-HPLC）是一种重要的色谱分离技术，以其高效、快速、自动化的特点在多个领域，特别是中药研究中发挥着越来越重要的作用。
本文旨在全面介绍制备型高效液相色谱法的基本原理、技术特点以及其在中药研究中的应用情况。
文章将概述制备型高效液相色谱法的基本原理和操作流程，包括色谱柱的选择、流动相的优化、样品的制备和分离等关键环节。
文章将重点讨论制备型高效液相色谱法在中药研究中的应用，包括中药成分的分离纯化、质量控制、药物代谢动力学研究等方面。
文章还将对制备型高效液相色谱法在未来的发展趋势和挑战进行展望，以期为相关领域的科研人员提供有益的参考和启示。
二、制备型高效液相色谱法的基本原理与技术制备型高效液相色谱法（Preparative High Performance Liquid Chromatography，Prep-HPLC）是高效液相色谱法（HPLC）的一个重要分支，它主要用于大规模分离、纯化和制备样品。
其基本原理基于混合物中各组分在固定相和流动相之间的分配平衡，通过高压泵将流动相推动，使待测样品在固定相和流动相之间不断进行吸附、解吸、再吸附的分配过程，从而实现各组分的有效分离。
制备型高效液相色谱法通常使用更粗的色谱柱和更高的流速，以实现更大规模的分离和制备。
与分析型高效液相色谱法相比，制备型高效液相色谱法更注重样品的纯度和回收率，而不仅仅是各组分的定性和定量分析。
在制备型高效液相色谱法中，选择合适的固定相和流动相至关重要。
固定相的选择应根据样品的性质和目标组分的特性来确定，常用的固定相包括硅胶、氧化铝、聚合物等。
流动相的选择则要考虑其与固定相的相容性、对目标组分的洗脱能力以及分离效果等因素。
制备型高效液相色谱法还涉及到柱层析、梯度洗脱、循环洗脱等技术。
药物分离纯化技术-制备色谱分离技术
适用范围广
制备色谱分离技术适用于各种类型的 混合物，包括有机物、无机物、生物 大分子等。
可重复性高
制备色谱分离技术具有较高的可重复 性，能够保证分离结果的稳定性和可 靠性。
制备色谱分离技术的缺点
01
02
03
成本较高
制备色谱分离技术需要使 用专门的仪器和耗材，成 本较高。
需要专业操作
制备色谱分离技术需要专 业人员进行操作和维护， 操作难度较大。
适用范围广
制备色谱分离技术适用于各种 类型的药物，包括小分子化合 物、大分子蛋白质、多糖等。
操作简便
制备色谱分离技术的操作相对 简单，易于实现自动化和规模
化生产。
制备色谱分离技术的未来展望
新型材料的研发
随着材料科学的不断发展，未来将会有更多新型的色谱填 料和介质被研发出来，进一步提高制备色谱分离技术的效 果和效率。
可能造成样品损失
在制备色谱分离过程中， 可能会造成目标成分的损 失或降解，影响产物的纯 度和产量。
制备色谱分离技术的发展趋势
1 2
新型固定相的开发
随着材料科学的不断发展，新型固定相的研发和 应用将进一步提高制备色谱分离技术的效率和纯 度。
连续色谱分离技术
连续色谱分离技术能够实现连续进样和分离，提 高分离效率，是未来发展的重要趋势。
智能化和自动化
未来制备色谱分离技术将更加智能化和自动化，能够实现 实时监测、自动控制和调整，提高生产效率和产品质量。
绿色环保
随着环保意识的不断提高，未来制备色谱分离技术将更加 注重绿色环保，减少对环境的污染和资源消耗。
联合应用
未来制备色谱分离技术将与其他分离技术联合应用，形成 多级分离流程，进一步提高药物的纯度和收率。
制备色谱技术资料
有些搞分析色谱的朋友，对制备色谱这个名词比较陌生。
其实，在化学化工医药等广泛采用的层析法以及薄层色谱就是最为典型的制备色谱。
下面对制备色谱与分析色谱不同之处，作一些比较。
(1)制备色谱的目的制备色谱的目的，是以较低的成本从混合物中得到纯净物。
制备色谱要争取少用填料，少用溶剂，尽可能多的拿到产品。
而分析色谱的目的，是对样品进行定性或含量。
因而，制备色谱的进样里比较大，柱子的分离负荷的加大。
而为了保证组分完全分离，增加制备色谱的柱子直径和柱子长度也就是必然。
(2)样品的前处理：因为色谱填料的价格相对来说，比较贵。
由于不可逆吸附等原因，制备色谱柱子由于处理的样品多，寿命较短。
在工艺的安排上，要尽量把色谱分离操作放到后面;在色谱柱之前，要加预柱以延长色谱填料的寿命。
(3)制备色谱柱的材质以前因为条件限制，用玻璃柱子做层析。
玻璃除了易碎外，当压力增大的时候，密封就是较大的问题。
有机玻璃的柱子在密封和抗压方面有优势，但是有机玻璃应对有机溶剂时，稳定性不是很好。
不锈钢柱子具有良好的耐腐蚀、抗压力性能，虽然价格稍微贵点，但越来越受欢迎。
当然，玻璃和有机玻璃的有机玻璃柱子也能抗压力耐腐蚀，相对不锈钢柱子而言，它是半透明的，可以看到液体的运行状态，对有色的物质其特点就更为突出，但现在多数的化学物质往往是无色的。
(4)固定相的选择硅胶、键合固定相(如C18)、离子交换树脂、聚酰胺、氧化铝、凝胶等都可以作为色谱柱的填料。
对于同一种固定相来说，粒径和孔径是最为重要的参数。
粒径越小，价格越高。
一般制备色谱，高精度的分离推荐的填料为10um,低精度的分离可以采用20-45um的填料。
(7)加样的方法进样方式有多种，①注射器+螺口针头+定量管②注射器+高压旋转阀③通过主泵或辅泵进样④固体上样。
方案①最省，实验室多采用;而工厂用泵进料为多。
(8) 泵的选用根据流量、脉冲大小、能承受的最大压力、精度、是否需要梯度、售后服务等因素来选择泵。
制备色谱分离技术
特点：吸附性能好，对有机成分选择性较高，机械强度高，价格低廉，
再生处理方便。
应用：目前大孔吸附树脂色谱被广泛引用于天然药物有效部位
及有效成分的分离和纯化。
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五：大孔吸附树脂分离技术的应用
2.被分离物质的性质的影响
（1）被分离物质极性大小的影响
由于极性大小是一个相对的概念，应根据分子中极性基团（如羧基， 羟基，羰基等）与非极性基团（如烷基等）的数目和大小来综合判断。
（2）被分离物质分子大小的影响
化合物的分子体积越大，疏水性增加，对非极性吸附树脂的吸附能 力越强。分子体积大的化合物应选择大孔径树脂。
超临界流体色谱
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四：色谱的分类
超临界流体色谱 用超临界流体（处于临界温度、临界
压力以上的流体）作为流动相进行的 色谱即为超临界流体色谱。
由于超临界流体的特性使得溶质在超临界流体 中具有较大的溶解度和扩散系数，从而促进了 组分的分离，具有较高的分离度。
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五：大孔吸附树脂分离技术的应用
大孔吸附树脂（macroporous adsorption resin）
制备色谱分离技术
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一.制备色谱简介
色谱法
利用不同物质在两 项中具有不同分配 系数
｝实现分离
通过两相不断的相 对运动
色谱的分类
操作方式
— 分析型
分析工具
— 制备型
分离技术
.
制备色谱
制备色谱：是能分离纯化制备一定量样品
的色谱分离技术
相间的吸附 分配系数 离子交换平衡值
相间 滞留 时间 不同
制备薄层色谱的操作步骤
制备薄层色谱的操作步骤引言薄层色谱（Thin Layer Chromatography, TLC）是一种常见的分离和鉴定化学物质的技术方法。
它基于化学物质在固定相表面上的不同吸附性质，通过溶剂的上升过程，将混合物中的成分分离开，并且通过比较吸附位置的方式进行鉴定。
本文将介绍制备薄层色谱的详细操作步骤。
材料和仪器•薄层色谱板•密封槽•滤纸•玻璃饼干•吸附剂（例如硅胶或氧化铝）•溶剂槽•注射器•光源（例如紫外灯）操作步骤步骤一：制备色谱板1.清洗玻璃饼干：将玻璃饼干浸泡在去离子水中，然后用有机溶剂（例如醋酸乙酯）进行清洗，并在通风环境中晾干。
2.准备色谱板：将吸附剂（硅胶或氧化铝）与适量的粘合剂混合，均匀涂抹在玻璃饼干上，并确保厚度均匀。
然后将其放入密封槽中，在室温下静置几小时，使其干燥。
步骤二：样品制备1.样品准备：根据需要分析的化合物的特性，选择适当的溶剂将其溶解。
确保样品溶解度适宜，以便在色谱板上形成好的色谱带。
步骤三：样品上样1.在色谱板上标记样品的起点位置，并在距离起点1-2厘米处进行上样。
对于液体样品，可使用微量注射器，在指定位置上滴上一定量的样品。
对于固体样品，可将其溶解后使用同样的方法上样。
步骤四：上样溶剂系统1.准备溶剂槽：根据需要选择双向开发或单向开发的方式，准备两种不同极性的溶剂。
通常，使用两种不同极性溶剂的混合物作为上样溶剂，以便在色谱板上产生良好的色谱分离。
步骤五：色谱开展1.上样溶剂系统：将装有上样溶剂的溶剂槽放置在密封槽中，让溶剂槽底部与槽盖上的孔相连。
2.开展色谱：将准备好的色谱板竖直放入溶剂槽中，确保样品不与溶剂接触。
然后将密封槽盖上，并允许溶剂通过色谱板。
在溶剂往上升的过程中，化合物将在色谱板上分离出不同的色谱带。
步骤六：色谱带展现1.取出色谱板：当溶剂上升到一定高度时，可以将色谱板从溶剂槽中取出。
使用滤纸轻轻擦去多余的溶剂。
步骤七：鉴定结果1.利用可见光或紫外灯照射色谱板，观察和记录色谱带的展现情况。
制备色谱技术与操作资料
制备色谱技术与操作半制备HPLC：仪器管路粗，进样体积大（可达1mL以上），进样量大（一般可达到几十毫克），检测池大，泵耐压大，流速高（可达10mL/min甚至更高），柱子内径3cm~100cm，含馏分收集器，可以制备样品进行其它定性检测，或接分析柱也可进行HPLC分析。
制备色谱柱和填料：玻璃柱和不锈钢柱，填料可为硅胶、键合固定相（如C18）、离子交换树脂、聚酰胺、氧化铝、凝胶，对硅胶进行硝酸银（或缓冲液）处理可提高分离效果。
疏水样品选择反相固定相亲水样品选择正相固定相大分子选择离子交换色谱固定相碳水化合物选择疏水色谱固定相无机离子选离子色谱固定相合成聚合物选凝胶色谱固定相立体异构样品选环糊精固定相外消旋样品选手性固定相样品前处理：萃取、过滤、结晶、固相萃取。
装柱方法：颗粒直径小于20－30um的固定相采用湿法装填，使相对稀松的固定相悬浆以高速装入色谱柱子，从而减少空隙的形成。
柱直径大于20mm，所加压力为30－40bar时，采用柱长压缩技术，先将固定相悬浆（或偶尔是干填充物）装入柱中加压，利用物理方法将其压紧，如径向压缩和轴向压缩。
流动相：色谱分离后要旋转蒸发溶剂，不宜采用高毒性溶剂，少用多元溶剂，溶剂的纯度也要考虑。
碱性流动相不能用于硅胶柱，酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统，离子交换树脂＆排阻色谱遇到某些有机溶剂会膨胀或收缩，从而改变柱床的性质。
流动相中加入有机胺可以减弱碱性溶质与残余硅醇基的强相互作用，减轻或消除峰拖尾现象。
流动相选择方法（1）由强到弱：一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验，这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。
（2）三倍规则：每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量，保留因子约增加3倍，此为三倍规则。
（3）粗调转微调：当分离达到一定程度，应将有机溶剂10%的改变量调整为5%，并据此规则逐渐降低调整率，直至各组分的分离情况不再改变。
药物分离纯化技术-制备色谱分离技术
亲疏水性选择，一般分离大分子时，选 择疏水性的基质，活性易保持；
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制备色谱技 术
常规柱色谱的操作
(1)装柱：干法和湿法；
(2)上样：液体上样和拌样上样，样品带尽 可能窄；
(3)洗脱：始终保持洗脱剂液面高于柱床表 面，可梯度洗脱；
(4)流分收集：常采用固定体积收集法，结 合TLC检验；
21
(6)
网吸 酰极 中 或非 骨 和
制
状附 结和 构分 ，子 大筛 比分 表离 面相 积结
合 ：
胺性 基、 、强 氮极 氧性 等 基 团含 ；氧
硫 基
----
----
等 极 性 甲 基 丙 烯 酸 酯
二极 乙性 烯、 基弱 苯极 聚性 合 而 成苯 ；乙
烯
----
架 结 构 决 定 树 脂 的 极 性 ：
R
制备色谱技术 Si O H+R O H
Si O R
Si OH + SOCl2
Si Cl
(2) 健合硅胶
Si Cl + RNH2
Si NHR
Si Cl + RX M g
Si R
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制备色谱技术
(3) 氧化铝 碱性氧化铝：其水提取液为pH9-10，常用于碳氢化合物的分离，从碳氢化
合物中除去含氧化合物。 中性氧化铝：5%乙酸处理，水提取液为pH7.5，适用于醛、酮、醌、某些
切割谱带更加方便；
a. 自动化：自动点样仪、自动程序 展开仪、薄层扫描仪、多种强制 流动技术、多种联用技术如傅立 叶变换红外、拉曼、质谱等。
2
制备色谱技术
常规制备薄层色谱PTLC 薄层板制备 为了增大上样量，增加了吸附剂用量。 固定相：硅胶、氧化铝、纤维素、C2、
7.1 制备薄层色谱技术
7.1.2.1 薄层板的制备
（5 ）PTLC分离的化合物中可能混有的杂质 PTLC吸附剂中含有粘合剂及荧光指示剂，其化学组成 有时难以搞清楚。在提取PTLC板分离的化合物的过程中， 吸附剂中的一些杂质很可能也被提取出来。实际上，提取 溶剂的极性越高，被提取出的杂质的量就越大。这些杂质 通常没有紫外吸收。在对纯化合物进行最后的薄层检测时， 人们通常难以发现这些杂质的存在。 Szekely(1983) 对从 空白硅胶板提取出的杂质进行了重量、红外及1H-NMR谱分 析，结果明显地显示了邻苯二甲酸盐及聚酯的存在。因此， 作者建议以Sephadex LH一20过滤作为最后的纯化手段。
7.1.1 常规制备薄层色谱法(PTLC) 经典的制备型薄层色谱与现代制备液相色谱
法相比,具有设备简单，所需资金投入最少
(Sherma 和 Fried ， 1987) 。 PTLC 可以用来分离毫 克量级到克级的样品。 在许多有关天然产物分离的文章中，与常压 柱色谱配合使用的制备型薄层色谱方法仍在使用， 尤其是在一些没有现代分离手段的实验室。然而， PTLC具有许多不便之处，现介绍如下。
7.1.2.1 薄层板的制备
（3）色谱条件的选择 展开剂的选择是能否达到理想分离的关键。 Nyiredy 等 (1988) 介绍了一个建立在 Snyder(1978) 溶剂选择三角基础上 的方法 (PRISMA 模型 ) ，采用该方法可优化所选择的展开剂条 件。 。 经常被用于PTLC的溶剂系统：正己烷一乙酸乙酯，正己烷-丙酮和氯仿一甲醇。在溶剂系统中加入少量的乙酸或二乙胺 可改进对酸性或碱性化合物的分离效果。。 通过采用多次展开的方法可以提高PTLC的分离效果。在 PTLC一次展开结束后，先将板干燥，再放人容器内展开。根 据色带的Rf值，可多次重复上述操作，该过程需花费较长的 时间。
制备色谱技术及应用
制备色谱技术是一种分离和纯化化合物的方法，它利用不同化合物在色谱柱中的不同亲和性，通过物理或化学作用将混合物分离成各自成分。
制备色谱技术广泛应用于药物、食品、环境等领域中。
制备色谱技术的主要分类包括液相色谱、气相色谱和固相色谱。
其中，液相色谱是应用最广泛的一种方法，它利用液体色谱柱中的不同分配系数或吸附能力将混合物分离。
气相色谱则是利用气体色谱柱中不同挥发性化合物的分离。
固相色谱则是利用固体色谱柱中不同吸附能力将混合物分离。
制备色谱技术的优点是分离效率高、操作简便、自动化程度高，且可以在实验室内进行高通量分离。
此外，制备色谱技术还可以用于定量分析、结构鉴定等方面。
总之，制备色谱技术是一种重要的分离和纯化化合物的方法，它在药物、食品、环境等领域中具有广泛的应用前景。
药物分离纯化技术制备色谱分离技术
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集成化：将多个色谱单元集成在一 个系统中实现连续高效的分离过程。
应用领域：药物分离纯化、食品安 全、环境保护等领域。
色谱分离技术的智能化和自动化
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智能化色谱分离技术：利用人工智能和机器学习算法优化分离过程提高分离 效率和准确性。
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自动化色谱分离技术：通过自动化设备实现分离过程的连续化和远程控制提 高生产效率和降低人为误差。
药物分离纯化技术中的色谱分 离技术
汇报人：
单击输入目录标题 色谱分离技术概述 色谱分离技术的原理 色谱分离技术的操作流程
色谱分离技术在药物分离纯化中的应用 色谱分离技术的最新进展和未来发展方向
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色谱分离技术概述
定义和原理
定义：色谱分离技术是一种基于不同物质在固定相和流动相之间分配 平衡的差异实现混合物中各组分分离的物理分离方法。
新型色谱材料的研发和应用
新型色谱材料的种类和特点 新型色谱材料的制备方法和工艺 新型色谱材料在药物分离纯化中的应用实例 新型色谱材料的未来发展方向和趋势
色谱分离技术的联用和集成化
联用技术：将两种或多种色谱技术 联用提高分离效果和分离效率。
优势：提高分离纯度、分离效率和 分离范围降低能耗和试剂消耗。
THNK YOU
汇报人：
在疫苗的分离纯化中色谱分离技术可以根据疫苗成分的大小、电荷、疏水性等性质进行分离从而 实现高效、高纯度的分离效果。
色谱分离技术可以去除疫苗中的杂质和有害物质提高疫苗的安全性和有效性。
在疫苗的分离纯化中色谱分离技术可以与其他技术结合使用如离心、过滤、超滤等进一步提高疫 苗的纯度和质量。
制备型色谱
制备型色谱是一种色谱技术，用于分离、纯化和制备化合物。
与分析型色谱不同，制备型色谱通常需要分离大量的化合物，并获得高纯度的目标化合物。
制备型色谱通常用于制备药物、生物制品、有机合成产物等高纯度化合物。
制备型色谱通常使用大型色谱柱和高压泵，以较高的流速和压力进行操作。
制备型色谱的分离原理与分析型色谱类似，但在分离的目标化合物方面有所不同。
制备型色谱通常需要选择适当的色谱柱、流动相和温度等参数，以获得最佳的分离效果。
制备型色谱的步骤通常包括样品预处理、样品注入、分离、洗脱、收集和纯化等步骤。
在样品预处理过程中，需要去除杂质和不纯物质，以便更好地进行分离和纯化。
在样品注入后，分离过程会根据化合物在色谱柱中的移动速度和保留时间进行分离。
在洗脱过程中，需要逐渐改变流动相的组成，以将不同的化合物从柱子中洗出来。
最后，收集和纯化步骤用于获得高纯度的目标化合物。
制备型色谱在制药、生物技术、化学合成等领域中得到广泛应用，是制备高纯度化合物的重要手段之一。
中压制备色谱
中压制备色谱是一种介于常压和高压液相色谱之间的色谱技术。
它主要用于制备规模较大的化合物纯化和分离，广泛应用于医药、天然产物、化工等领域。
中压制备色谱和高压液相色谱（HPLC）相比，操作压力较低，设备相对简单，但仍保留了高压液相色谱的高效分离能力。
中压制备色谱常用的操作压力范围为10-1500 psi（约0.7-103 bar），相比之下，HPLC的压力范围通常在2000-6000 psi（约138-414 bar）。
中压制备色谱通常使用大颗粒（10-50 μm）的填料，以提高样品负荷和分离效果。
常用的填料材料包括硅胶和碳氢化合物。
此外，中压制备色谱也常用于分离手性化合物，使用手性固定相填料。
中压制备色谱的操作步骤与HPLC类似，包括样品预处理、装填填料、流动相选择、进样、洗脱和检测等。
它可以通过控制流速、溶剂梯度和进样量等参数来实现目标化合物的纯化和分离。
需要注意的是，中压制备色谱虽然比HPLC的操作压力较低，但仍然需要一定的仪器和设备来支持。
在操作过程中，应根据具体的色谱条件和实验需求，合理选择和配置色谱柱、泵浦、检测器等设备。
此外，中压制备色谱的溶剂流动速率较低，因此需要更大容量的溶剂储罐和泵浦来保证持续的溶剂供应。
总之，中压制备色谱是一种适用于大样品量纯化和分离的色谱技术，可以满足研究和生产过程中对纯度和产量的要求。
它兼具高效分离和相对低成本的特点，在复杂混合物的纯化和分离方面有着广泛的应用前景。
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制备色谱技术
1.常压柱色谱有哪些种类？说出不同之处。
→见书第三章
（1）吸附柱色谱：硅胶吸附柱色谱、氧化铝吸附柱色谱、活性炭吸附柱色谱、聚酰胺吸附柱色谱、大孔吸附树脂色谱
（2）分配柱色谱
（3）萃取柱色谱
（4）离子交换柱色谱
（5）凝胶柱色谱
（6）亲和柱色谱
（7）干柱色谱
（8）并联多柱色谱
2.分配色谱、吸附色谱、凝胶色谱的分离原理各是什么？
分配色谱：
吸附色谱：
凝胶色谱：凝胶是一类具有三维空间的多孔网状结构的物质，其中以有机凝胶应用得较多，无机填料中，有硅胶和玻璃珠。
有机填料中，有天然和合成两大类
3.反相色谱的分离原理是什么？
4.如何利用Rf值来鉴定化合物？
5.非线性色谱：在制备色谱中进样量一般都比较大（克量级），这时样品在流动相与固定相中的浓度关系不再是一条直线，在此种条件下发生的色谱过程，就称之为非线性色谱。
6.吸附柱色谱：
7.分离因子α：是两种组分的质量分配比之比，一般根据两个组分的色谱峰的调整保留时间相比而得
8.高速逆流柱色谱：书P142
9.渗滤法：书P217
10.制备色谱的最佳制备量与哪些因素有关？书P6
11.商品硅胶中的字母符合G.P.F254,M.F.F354各表示什么意思？书P13/PPT→P4
12.大孔吸附树脂分离原理及应用:书P43+P46
13.液-液吸附色谱中固定相及其基本原理？PPT张→P3
14.高效液相色谱仪检测器种类：PPT张→P2
15.模拟移动床色谱原理:书P175
16.叙述柱层析中溶剂的选择原则
17.叙述制备分离的策略:PPT→P3
18.叙述硅胶柱色谱的操作步骤::PPT→P6
19.叙述高压制备色谱的分类、优点、局限性以及组成部分：PPT张→P1
20.高效液相色谱柱的保养方法。