反刍动物营养消化代谢试验手册
反刍动物营养试验手册
-------消化代谢试验部分(修改版)
反刍动物营养研究室
中国农业科学院畜牧研究所
二〇〇四年六月一日
前言
2003年在本研究室进行了为期四个月的奶牛消化代谢实验，实验操作过程中，采用了许多方法，成功失败皆有。每每在失败之后方知实验操作之重要，经验积累之难得，于是便有了将这些看似简单的方法和提示落实于文字的想法，希望能给做相关实验的人员些许提示和帮助。但毕竟能力有限，在实验过程中因力求细致准确而有因简就繁之嫌，有些文字表达方面过于累赘，错误和不当之处在所难免，同时，由于实验内容要求，所涉及的方法有限，所以这只能是抛砖引玉，希望大家能够不吝指出，并不断改进，使之逐渐完善！
手册的形成是在导师王加启研究员指导督促以及实验室各位老师同学帮助下，集实验小组各成员（王吉峰博士、汪水平硕士和姚美蓉硕士）的工作结果而成！
2002级博士研究生李树聪 2004年7月13日
于反刍动物营养研究室
目录
饲料及其剩余料样品的采集______________________________________________1瘤胃液pH，NH3-N和VFA样品采集和保存__________________________________2瘤胃动态食糜样品采集和保存____________________________________________3分离瘤胃微生物样品采集________________________________________________4瘤胃原虫计数用样品的采集和保存________________________________________5乳样的采集和保存______________________________________________________6小肠液采集及其预处理__________________________________________________7粪样采集及其预处理____________________________________________________8尿样采集及其预处理____________________________________________________9瘤胃原虫计数方法_____________________________________________________10酸性洗涤不溶灰分的测定_______________________________________________12氨氮测定方法--氧化镁直接蒸馏法________________________________________13瘤胃液氨氮检测方法－靛酚比色法_______________________________________15瘤胃液VFA测定---气相色谱法___________________________________________18瘤胃微生物量测定方法-嘌呤碱基法______________________________________21 Co—EDTA 配制_______________________________________________________24铬染纤维的制备_______________________________________________________25原子吸收测定用容器洗涤方法___________________________________________27干法灰化食糜流量监测用指示剂（Co Cr Yb）测定________________________28湿法消化食糜流量监测用指示剂（Co Cr Yb）测定_________________________29瘤胃液中Co浓度的测定_________________________________________________30指示剂的配合和使用方法_______________________________________________31
饲料及其剩余料样品的采集
一、采样方法
预试期每天饲喂时准确记录饲喂量，观察饲料采集速度，记录采食完85～95%饲料所需时间，调整剩余料采集时间。
每天早晨采集饲料样，采集量为精料5%，苜蓿干草10%，羊草10%，青贮饲料10%。精料可以在配合完成时采集，但注意和配合好的饲料一同保存，在规定采样时间取回处理，以保证样品和实际摄入日粮成分一致。采样过程中精料、苜蓿干草、羊草在常温保存；青贮料采样称重后及时65℃烘干测定初水份后保存，如不能及时烘干，及时密封放入冰箱冷冻保存。采集完成后，各样品混合均匀，适当四分法缩样，风干，全部2mm筛粉碎，混合均匀，室温保存备用。
采集饲料样的同时收集剩余料，收集时间根据情况可定为采食完成后半小时至饲喂前半小时，准确称重，记录，取10-20%立即密封放入冰柜－20 ℃保存，四天采样完成后，混合均匀，65℃烘干，计算初水分后2mm粉碎，然后根据剩余料数量适当缩小样品，室温保存备用。
二、采样时间
进入正试期后收粪或采集肠液之前一天开始采样，连续采集三～四天。
瘤胃液pH，NH3-N和VFA样品采集和保存
一、采样方法
各时间点从瘤胃均匀选取三----四个位点，共抽取瘤胃液200-300ml至抽滤瓶，轻轻摇匀，取约100ml，直接测定pH值后，四层纱布过滤。其余瘤胃液倒回瘤胃（过量抽出主要为保证采样代表性）。
准确量取过滤后瘤胃液20ml，加入7.2N硫酸0.2ml，摇匀，分装为两份－20℃冷冻保存，用于测定VFA及其备用。
另取过滤后瘤胃液10ml，4℃保存，尽快用于测定NH3-N浓度。
二、采样时间
早7:30(采食前)，9:30，11:30，13:30，15:30，17:30，19:30（采食前）。
瘤胃动态食糜样品采集和保存
一、采集时间：
第一天：07:30（采食前）， 08:30， 09:30，10:30， 11:30， 13:30， 15:30，17:30， 19:30（采食前），23:30
第二天：07:30（采食前），11:30， 19:30（采食前）
第三天：07:30（采食前），19:30（采食前）
二、采集量及方法
各时间点，瘤胃均匀选取四个位点，总共取瘤胃固相内容物500g左右到一洁净小桶中，搅拌均匀，再从中取100g，－20 ℃保存备用，其余放回瘤胃。
各时间点，瘤胃均匀选取四个位点，抽取瘤胃液500ml，摇匀后量取50ml，－20 ℃冷冻保存，其余瘤胃液倒回瘤胃。
备注：由于奶牛采食量及饮水量均很大，瘤胃内容物极其不均匀，采样时要严格操作，同时，注意每次采完样品的用具清洁干净，下次才可继续使用。
分离瘤胃微生物样品采集
一、采集时间点：
13:30 19:30 01:30
第一天：07:30
15:30 21:30 03:30
第二天：09:30
17:30 23:30 05:30
第三天：11:30
二、采集量及方法
各时间点，瘤胃均匀选取四个位点，取瘤胃固相内容物约100g，-20℃保存。
各时间点，瘤胃均匀选取四个位点，抽取瘤胃液100ml，－20 ℃冷冻保存。
瘤胃原虫计数用样品的采集和保存
一、采样方法
从瘤胃均匀选取四个位点，抽取瘤胃液200ml至抽滤瓶，轻轻摇匀，取约30ml四层纱布过滤，其余瘤胃液倒回瘤胃。准确量取过滤后瘤胃液10ml，加入20mlM.F.S.，轻轻摇匀，室温下保存备用。
注意：整个操作尽量在短时间完成；加入MFS液后能保存十周左右。二、采样时间
根据试验要求确定，以饲喂后二到三为佳。
乳样的采集和保存
一、采样方法
采样前搅拌均匀，乳样采样器缓慢插入奶桶，保证采样器内外样品一致，提起取样器取样，每头牛每次采集乳样总量1%（根据产奶量确定，大约0.5-1%），立即用乳品分析仪测定乳成分。其余样品放入冰箱4 ℃保存，连续采集两天，每头牛两天样品混合均匀
注意乳中脂肪比重较小，乳汁容易分层，操作要细致快速，混合均匀后尽快根据需要分装多份。
二、采样时间
连续两～三天。
三、样品保存
在－20 ℃冷冻保存。
小肠液采集及其预处理
一、采集时间点：
根据试验安排确定
二、采集量
十二指肠液100 ～150ml，回肠液50 ～100ml
三、采集方法
清洗瘘管口，打开塞子，将肠道内瘘管附近积存的食糜丢弃，然后开始采集肠液，手持烧杯，小心收集，尽量不要多采。采集回肠液时间较长，可将烧杯悬挂到瘘管上，注意观察等待，足量后及时收集。
立即测定pH值后，装入贴好标签的塑料瓶中，正放入冰柜中－20 ℃冷冻保存。全部采样结束后，混合均匀，取50ml立即用于测定氨氮，其余冻干保存。
粪样采集及其预处理
一、采集时间：
根据试验安排确定
二、采集量及方法
全收粪法：全量收集牛粪，测定重量，搅拌均匀，取20%放入塑料桶中搅匀，加6N盐酸10%（酒石酸等有机酸较好）。定时按加酸粪量的20%采集样本，0~4 ℃冷冻保存。
直肠取粪：在采样时间点前后30分钟，奶牛排粪，则从无污染粪中搅拌均匀取样200g，否则在各时间点直肠取粪200g，搅拌均匀后，测定pH值。此后，100g直接装入贴好标签的塑料袋中，放入冰柜中－20 ℃冷冻保存。
每期实验结束后，同一头牛所有样品混合均匀，取鲜样测定氨态氮及总氮。其余样品65 ℃烘干，2mm粉碎，－20℃冰箱冷冻保存。
尿样采集及其预处理
一、采集时间：
连续全量收集两至三天。
每天缩样三～四次。
二、采集方法
采用全收尿法，连续收集试验动物尿样。收尿前先在集尿器内加入200ml6N盐酸，收尿期间适当摇动集尿器，在缩样时间点准确称量尿液重量，搅拌均匀后，润洗塑料量桶，用量桶准确取纱布过滤后样5%，装入贴好标签的塑料瓶中，4 ℃冰箱保存。其余尿液丢弃，尿箱加酸后继续收集。
缩样前注意观察尿样，发现被粪污染或有阴道排出的粘液等时，该次样品只记录重量，不采样，同时做好记录。
采样结束后，将每头牛所有尿液混合均匀，留取200ml尿液，分装，-20℃冷冻保存。
瘤胃原虫计数方法
一、试剂：
染色液M.F.S. (Methyl green-formalin-sodium chloride)：35%福尔马林100ml、NaCl 8.0g、甲基绿0.6g、蒸馏水900ml。
磷酸缓冲液：氯化钠0.50%；无水乙酸钠0.13%；磷酸二氢钾0.03%；磷酸氢二钾0.10%；七水硫酸镁0.01%；pH6.9～7.2
二、试验用品和设备
大口吸管管口口径在1mm以上吸管
计数板计数室深度约0.2mm以上（以保证大体积原虫正常进入）
显微镜普通显微镜
手动计数器
吸水纸，擦镜纸，洗瓶，废液收集用烧杯等
三、瘤胃液样品采集
一般在采食后两小时，自瘤胃取样，也可根据试验安排定时取样，试验结果中须注明样品采集条件。
从不同位点（网胃、前背盲囊、背囊和腹囊），采用真空吸滤装置采集瘤胃液，再进行混合，放入50~100ml塑料试管中。
样品尽快送到实验室处理！
四、计数样品准备
分别吸取5-10ml瘤胃液和2-9倍体积的M.F.S.混合均匀，放置至少4h 后（过夜染色效果更佳）进行计数，原虫被固定染色后能保持数个星期。注意记录稀释倍数！
1mm
五、原虫计数：
将经过染色处理的样品液充分混和均匀，注意轻轻摇动，马上吸取适量点加在原虫计数器上，让液体充满计数室，小心盖上盖玻片，不要在计数区内产生气泡，静置10分钟让原虫细胞充分沉降；如果细胞浓度过大，在计数前用磷酸缓冲液进行稀释（大约每格约7~8个原虫细胞为最适浓度）；用10×显微镜观察计数。
上图为本实验室使用计数板，规格为0.2mm深，每小格，1/16mm2，九个大方块，每个大方块又被分为十六个小方块，计数过程中，可采用全部9个大方格计数，或对角线5个方格计数。计数过程中采用计上不计下，计左不计右的原则次序技术。
常数和计算（以计数5大格为例）。
常数：
计数区单个方格标准面积 1 mm2
计数室深度0.2mm
单个方格标准体积0.2mm3
计数区5个方格体积1mm3
计算：
每ml或g所含原虫数＝5个方格内总数×稀释度×1000 六、参考文献：
Boyne, A. W., J. M. Eadie and K. Raitt. 1957. J Gen Microbiol. 17:414.
Dehority, B. A. 1984. Appl Environ Microbiol. 48:182.
卢德勋，谢崇文，1991，现代反刍动物营养研究方法和技术，农业出版社
酸性洗涤不溶灰分的测定
一、试剂
2N盐酸：
用1L容量瓶，加入约700ml蒸馏水，缓慢加入166.7ml浓盐酸，最好在通风橱中操作。
摇匀，定容至1L
二、程序
洁净瓷坩埚500 ℃灼烧30min，干燥器冷却后，称重。
称取3-5g样品（同时测定105 ℃干物质），设重复，放入已知重量的瓷坩埚
电炉上炭化完全后，转入茂福炉500 ℃灼烧灰化至恒重（5-10小时）完全转入600-800ml烧杯中，加入100ml2N盐酸，煮沸5min
趁热用定量滤纸过滤，并用热蒸馏水洗涤至中性
按照D步骤操作
干燥器冷却后，称重。
三、计算
（含灰分坩埚重量-坩埚重量）/（样品DM重量）=%酸性洗涤不溶灰分 四、备注
Van Soest （1991，J. Dairy Sci. 74:3583）推荐使用酸性洗涤纤维灼烧后残渣为酸性洗涤不溶灰分。
此外也可以用4N盐酸消煮3-5g样品30min后，热水（80-100 ℃）洗涤至中性后，650 ℃灰化的残渣作为酸性洗涤不溶灰分（卢德勋）。
五、参考文献
Van Keulen，J.V. and B.A. Young. 1977. Evaluation of acid insoluble ash as a natural marker in ruminant digestibility studies. J. Animal. Sci. 44:282.
卢德勋谢崇文等现代反刍动物营养研究方法和技术
氨氮测定方法--氧化镁直接蒸馏法
一、原理
通过弱碱（氢氧化镁）对铵态氮的作用，NH 4+转换成NH 3释放出来，通过硼酸吸收，标准酸滴定后可以计算出样品中NH 3-N 的量。
本方法中弱碱对有机态氮有一定水解能力，一般可忽略不计，但为提高测定精度，在确保蒸馏完全的前提下，每样品的蒸馏时间尽量保持一致。
二、试剂
氧化镁 化学纯。购买时注意选择高温灼烧的产品（灼烧过的产品质地疏松，轻质）。否则需经500-600茂福炉灼烧后使用。
液体石蜡油，化学纯或医用。
2%硼酸溶液，调节pH 约等于4.5使之与指示剂混合呈淡红色。
指示剂：分别称取0.1g 甲基红和0.5g 溴甲酚绿指示剂，放入研钵中，并用100ml 无水乙醇研磨溶解，在阴凉处保存期为三个月。
0.01-0.15M HCL 标准溶液。邻苯二甲酸氢钾法标定，按GB601制备。
三、仪器
凯氏定氮蒸馏装置，酸式滴定装置，250ml 三角瓶若干等。
四、方法步骤
量（称）取样品至蒸馏反应管中。推荐取样量瘤胃液10-15ml ，十二指肠液 10-15ml （g ）、回肠液10g ，粪10-15g 。
加入氧化镁0.8-1.2g ，液体石蜡1ml ，蒸馏水约25ml 。
按照凯氏定氮法操作蒸馏，蒸馏时间为硼酸变色后继续蒸馏7-8分钟。滴定。
结果计算：
样品NH3-N %=
100
m
014
.0)(12×××?C V V V 2-滴定试样时所需要的标准酸溶液体积 ml V 1滴定空白时所需要的标准酸溶液体积，ml M 样品质量或体积g 或ml
0.0140 每毫克当量氮的克数
五、重复性
每个试样取两个平行样进行测定，以其算数平均值为结果
氨氮含量在以下时，允许相对偏差为3%
氨氮含量在以上时，允许相对偏差为3%
注：本文主要参考中国农业大学畜牧系养牛教研组编写的《反刍动物营养学试验指导》及其GB/T6432-94饲料中粗蛋白测定方法。
瘤胃液氨氮检测方法－靛酚比色法
一、原理
氨和次氯酸钠及苯酚在亚硝基铁氰化钠(Na2Fe(CN)5NO.2H2O)催化下反应生成兰色靛酚A(Berthelot反应).氨的浓度以靛酚的分光光度计吸收值按比例换算。
二、试剂配制
A液：苯酚显色剂(2L)
1、称取0.1g亚硝基铁氰化钠(Na2Fe(CN)5NO.2H2O)溶解于1L蒸馏水中。
操作：用折好的硫酸纸称取亚硝基铁氰化钠，伸入容量为1L的烧杯中，轻弹，使样品全部移入烧杯，用500ml蒸馏水溶解，再500ml蒸馏水少量多次的洗烧杯，洗液小心转移至2L的容量瓶，暂不需定容。注：此过程应戴防护手套，药品为毒性物质。
2) 小心称取20g干燥苯酚(C6H5OH)，移入上述2L的容量瓶中，摇匀，用蒸馏水定容至2L。
3) 将上述2L溶液小心移入棕色瓶中，在2-10oC下避光贮存，保质期6个月。
B液：次氯酸盐试剂(2L)
1、10g氢氧化钠(NaOH)溶于烧杯中，加入1300ml蒸馏水，溶解。
2、75.7g磷酸氢二钠(Na2HPO4?7H2O)加入另一烧杯，200-300ml蒸馏水加热溶解摇匀。
3、上述2溶液冷却后，加100ml次氯酸钠（含氯5.25%，确保新鲜！）混匀。
4、1和3溶液转移至2L容量瓶中，用蒸馏水定容至2L。
5、#1滤纸过滤后，在2-10oC下，避光贮存于聚乙烯瓶中，保质期6个月。
三、氨标准溶液
贮备液为32mg/dl。
1、计算氯化铵(NH4Cl)需要量:
N=14.01 H=1.01 Cl=35.45 NH4Cl分子量为53.48
NH4Cl中NH3的含量为 17.04÷53.49＝31.86%
配置100ml含NH3量为32mg/dl的溶液需要的NH4Cl为
0.3186X=0.032g
X=0.10045gNH4Cl
1.0045gNH4Cl溶于1L蒸馏水中。
2、1.0045gNH4Cl溶于800ml蒸馏水中。
3、用稀释的盐酸滴定至pH为2。
4、用蒸馏水定容至1L。
5、用贮备液配制以下溶液：32mg/dl，16mg/dl，8mg/dl，4mg/dl，2mg/dl，1mg/dl，0mg/dl(只有蒸馏水)。
四、样品采集
1、取用两层精细纱布（50级）过滤的瘤胃液6ml于试管或离心管中。
2、加入2ml新配制的25%偏磷酸，封盖，摇匀。
3、若不立即测定在-20℃保存。
4、分析前，在11，000-12，000g下离心20min。保留上清液用于分析。
五、测定程序
1、漩涡振荡瘤胃液上清液。
2、用微量移液枪或微量取液器，吸取40μl瘤胃液或标准液，至贴好标签的试管中，加40μlH2O，同时设重复。
3、吸取A液（苯酚试剂）2.5ml加入每个试管，漩涡振荡均匀。
4、吸取B液（次氯酸钠试剂）2.0ml加入每个试管，漩涡振荡均匀。
5、37℃水浴加热30min。
6、550nm下读数(波长为500—660nm)。若显色太重，用较小的波长测定，或将样品用蒸馏水1：1稀释。
7、用线性回归估测标准曲线。标准曲线举例
标准mg/dl吸收值
0 .003
1 .047 y = mx + b
2 .092 b = -0.108
4 .192 m = 21.37
8 .392 x=吸收值
16 .762 y=浓度
32 1.496
8、吸收值代入方程，计算瘤胃液NH3，计算结果*1.25校正偏磷酸误差。
9、瘤胃氨浓度预期在1-25mg/dl范围内。
六、参考文献
Smith， F.E. and Murphy，T.A. Analysis of Rumen Ammonia & Blood urea Nitrogen March 10，1993
Berthelot MPE: Violet D’aniline. Repert Chim Appl. 1:284 (1859)
Broderick， G.A. and Kang，J.H. Automated simultaneous determination of ammonia and total amino acids in ruminal fluid and in vitro media. J. Dairy Sci. 63:64 (1980)
Chaney， A.L. and Marbach， E.P. Modified reagents for determination of urea and ammonia. Clin Chem. 8:130 (1962)
蛋白质分解代谢习题答案
第七章蛋白质分解代谢习题 问答题 1.试述氨的来源和去路。 1．来源：氨基酸脱氨基作用(体内氨的主要来源);肠道吸收的氨(血氨的主要来源),由蛋白质的腐败作用和肠道尿素经细菌脲酶水解产生的氨;肾小管上皮细胞分泌的氨,主要来自谷氨酰胺;嘌呤和嘧啶的分解代谢。去路：合成尿素;合成非必需氨基酸;合成谷氨酰胺,合成嘌呤或嘧啶。 2.试述尿素的合成过程。 2．尿素主要在肝细胞内合成,其过程有四：(1)氨基甲酰磷酸的合成。(2)瓜氨酸的生成；氨基甲酰磷酸在肝线粒体与鸟氨酸缩合成瓜氨酸。(3)精氨酸的生成：瓜氨酸进入胞液与天冬氨酸缩合后,释放延胡索酸生成精氨酸。(4)精氨酸水解成尿素。 3.试述谷氨酰胺生成和分解的生理意义。 3.谷氨酰胺生成的意义：（1）防止氨的浓度过高。(2)减少对神经细胞的损害。(3)便于运输至组织参与蛋白质、嘌呤、嘧啶的合成。分解意义；利用释放氨生成铵离子而排出过多的酸。它不仅是氨的解毒形式, 也是氨在血中存在和运输形式,同时也是维持酸碱平衡的重要因子。 4.为什么血氨升高会引起肝性脑昏迷(肝昏迷) 4．血氨升高进入脑内的量增多,可与脑内谷氨酸、α‐酮戊二酸结合,不利于α‐酮戊二酸参与三羧酸循环,导致循环阻塞,阻止ATP的生成,脑细胞因能量供应不足而昏迷。 5.试述α-酮酸的代谢去路。 5.α-酮酸有三条代谢途径：(1)合成非必需氨基酸,α‐酮酸可通过转氨基作用重新合成氨基酸。(2)转变为糖和酮体,除亮氨酸和赖氨酸只生成酮体外,其他相应的酮酸均可生成糖、脂肪或酮体。(3)氧化供能,α-酮酸脱羧后生成脂肪酸,后者按脂肪酸分解途径分解为水和CO2,并释放能量。
代谢组学——广泛靶向代谢组
一、研究概述 20世纪80年代，英国帝国理工大学Nicholson教授首次提出了代谢组学的概念，被誉为“国际代谢组学之父”。2005年，加拿大基因委员会投资750万美元创建了“人类代谢组计划”(HMP)，最终构建了HMDB代谢组数据库。在这十年来，代谢组学检测技术也经历了由核磁(NMR)转向气质联用(GCMS)再到液质联用(LCMS)的发展历程，检测结果的有效信息量也有了10倍的提升。代谢组学相较于其他组学的优势在于：（1）据估计，人类含有约6500种小分子代谢物，尽管新的和更灵敏的测量技术正逐步揭示更多的化学物种，然后代谢物的数量仍然可能比在人类中发现估计的25000个基因、100000个转录组和1000000个蛋白质少；（2）代谢组检测的是基因组、转录组和蛋白组的可变性下游表型，从而可以提供高度整合的生物学状态概况；（3）代谢组学是一种精确和无创的工具，用于识别药物治疗作用和可能的毒理学效应，并分离遗传学、微生物活性和营养对整体代谢表型的作用 二、广泛靶向代谢组 目前，代谢组学的研究主要包括靶向代谢组和非靶向代谢组。靶向代谢组（Targeted metabolomics）：少数已知代谢物定性和定量检测，具有灵敏度高、定性定量准确的特点；非靶向代谢组（Untargeted metabolomics）：同时检测数百乃至数千种代谢物（包括已知和未知代谢物），但其灵敏度较之靶向代谢组低1-2个数量级，定性定量准确性也相对较差。今天小编介绍的就是一种整合了非靶向和靶向代谢物检测技术优点的新型代谢组检测技术——广泛靶向代谢组（Widely Targeted Metabolome）。 广泛靶向代谢组（Widely Targeted Metabolome）作为第二代或者新一代靶向代谢组（Next Generation Metabolome）技术，区别于现有代谢物检测方法，该技术平台建立了LC-MS/MS代谢物标品数据库，整合了非靶向和靶向代谢物检测技术的优点，可以检测覆盖18大类，2500多个代谢物，实现了高通量、高灵敏、广覆盖的靶向代谢物检测。广靶技术作为一项核心专利技术，早于2013在《Molecular Plant》（IF：9）杂志上发表题为《A Novel Integrated Method for
反刍动物瘤胃微生物及其作用
学号：TS09028 反刍动物瘤胃微生物及其作用 （动物消化道微生物考试论文） 耿文诚 微生物是动物消化道内不可缺少的重要组成成分。初生幼畜的消化道是无菌的，数小时后随着吮乳、采食等过程，在消化道内即出现了微生物，其中如大肠杆菌（Escherichia coli）便从此在动物肠道内与寄主共处终生。 1 反刍动物消化的主要特征 反刍动物是哺乳动物中比较特别的一个类群，他们的日粮主要由植物材料组成。反刍动物即使在不进食时也频繁地咀嚼，这一咀嚼活动称为“反刍”。反刍是反刍动物从植物细胞壁（即纤维）中获得能量过程的一个步骤。反刍减小了纤维颗粒的尺寸，暴露出糖以供微生物发酵；另外，唾液中缓冲物质（碳酸盐和磷酸盐）中和了微生物发酵产生的酸，以便维持一个有利于纤维降解和瘤胃微生物生长的中性偏酸的环境。 与单胃动物不同，反刍动物的胃由4部分组成，即网胃、瘤胃、瓣胃、真胃。瘤胃是反刍动物特有的消化器官，它是反刍动物体内的饲料处理工厂，饲料中约有70～85%可消化物质和50%粗纤维在瘤胃内消化，因此，瘤胃（包括网胃）消化在反刍动物整个消化过程中占有特别重要的地位。瘤胃和网胃是位于反刍动物消化道最前端的2个胃，网胃内含物几乎持续地与瘤胃内含物相混合（每分钟混合1次），这两个胃常又称为网-瘤胃，他们共同具有高密度的微生物群系（细菌、原生动物、真菌）。瓣胃是个具有极大吸收能力的小器官，水和矿物质如钠和磷在瓣胃中吸收，经唾液重回到瘤胃中。由于瘤胃和真胃的消化方式有极大的不同，瓣胃是一个连接瘤胃和真胃的过渡器官。真胃相当于非反刍动物的胃，分泌强酸和许多消化酶。非反刍动物摄取的食物首先在胃中被消化，但是进入反刍动物真胃中的食糜主要由未被发酵的饲料颗粒、一些微生物发酵终产物以及生长在瘤胃中的微生物有机体本身所构成。 反刍动物与非反刍动物另一个重要区别是反刍动物能大量利用纤维或半纤维并消化吸收，而非反刍动物在这方面的能力很有限（盲肠等器官可消化分解部分纤维）。存在于植物细胞壁中的复杂糖（纤维或半纤维）不能被非反刍动物利用，相反，在瘤胃和网胃中生活的微生物群系则可使反刍动物从纤维中获得能量。还有，非蛋白氮不能被非反刍动物利用，但可被瘤胃细菌用以合成蛋白质；瘤胃中合成的细菌蛋白是反刍动物所需氨基酸的主要来源。 2 瘤胃的主要特点
生物化学第八章蛋白质分解代谢习题
第八章蛋白质分解代学习题 (一)名词解释 1．氮平衡(nitrogen balance) 2．转氨作用(transamination) 3．尿素循环(urea cycle) 4．生糖氨基酸： 5。生酮氨基酸： 6．一碳单位(one carbon unit) 7．蛋白质的互补作用 8．丙氨酸–葡萄糖循环(alanine–ducose cycle) (二)填空题 1．一碳单位是体甲基的来源，它参与的生物合成。 2．各种氧化水平上的一碳单位的代载体是，它是的衍生物。 3.氨基酸代中联合脱氨基作用由酶和酶共同催化完成。 4.生物体的蛋白质可被和共同降解为氨基酸。 5.转氨酶和脱羧酶的辅酶是 6.谷氨酸脱氨基后产生和氨，前者进入进一步代。 7.尿素循环中产生的和两种氨基酸不是蛋白质氨基酸。 8.尿素分子中2个氮原子，分别来自和。 9.氨基酸脱下氨的主要去路有、和。 10.多巴是经作用生成的。 11.生物体中活性蛋氨酸是，它是活泼的供应者。 12.氨基酸代途径有和。 13．谷氨酸+( )→( )+丙氨酸，催化此反应的酶是：谷丙转氨酶。 (三)选择题 1．尿素中2个氮原子直接来自于。 A．氨及谷氨酰胺B．氨及天冬氨酸C．天冬氨酸及谷氨酰胺 D．谷氨酰胺及谷氨酸E．谷氨酸及丙氨酸 2．鸟类和爬虫类，体NH3被转变成排出体外。 A．尿素B．氨甲酰磷酸C．嘌呤酸D．尿酸
3.在鸟氨酸循环中何种反应与鸟氨酸转甲氨酰酶有关? 。 A．从瓜氨酸形成鸟氨酸B．从鸟氨酸生成瓜氨酸 C．从精氨酸形成尿素D．鸟氨酸的水解反应 4．甲基的直接供体是。 A．蛋氨酸B．半胱氨酸 S腺苷蛋氨酸D．尿酸 C．- 5．转氨酶的辅酶是。 A．NAD+D．NADP+C．FAD D．磷酸吡哆醛 6．参与尿素循环的氨基酸是。 A．组氨酸B．鸟氨酸C．蛋氨酸D．赖氨酸 7．L–谷氨酸脱氢酶的辅酶含有哪种维生素? 。 A．维生素B1B·维生素B2C维生素B3D．维生素B5 8．磷脂合成中甲基的直接供体是。 A．半胱氨酸B．S–腺苷蛋氨酸C．蛋氨酸D．胆碱 9．在尿素循环中，尿素由下列哪种物质产生? 。 A．鸟氨酸B．精氨酸C瓜氨酸D．半胱氨酸 10．组氨酸经过下列哪种作用生成组胺的? 。 A．还原作用B．羟化作用C．转氨基作用D．脱羧基作用 (四)完成反应式 1．谷氨酸+NAD(P)++H2O→()+NAD(P)H+NH3；催化此反应的酶是：( ) 2．谷氨酸+NH3+A TP→()+( )+Pi+H2O；催化此反应的酶是：( ) 3．谷氨酸+( )→()+丙氨酸；催化此反应的酶是：谷丙转氨酶 (七)问答题 1．举例说明氨基酸的降解通常包括哪些方式? a酮戊二酸是如何转变成谷氨酸的，有哪些酶和辅因子参与? 2．用反应式说明- 3．什么是尿素循环，有何生物学意义? 4．什么是必需氨基酸和非必需氨基酸? 5．为什么说转氨基反应在氨基酸合成和降解过程中都起重要作用?， 6．为什么细胞没有一种对所有的氨基酸都能作用的氧化脱氨基酶? 7．提高天冬氨酸和谷氨酸的合成会对TCA循环产生何种影响?细胞会怎样应付这种状况?
脂质代谢组学及在水产动物研究中的应用
Open Journal of Fisheries Research 水产研究, 2019, 6(2), 19-22 Published Online June 2019 in Hans. https://www.360docs.net/doc/3a207524.html,/journal/ojfr https://https://www.360docs.net/doc/3a207524.html,/10.12677/ojfr.2019.62003 Lipid Metabolomics and Its Application in Aquatic Animal Research Min Song, Haishen Wen* Fisheries College, Ocean University of China, Qingdao Shandong Received: May 10th, 2019; accepted: May 24th, 2019; published: Jun. 3rd, 2019 Abstract The concept and analytical methods of lipid metabolomics (lipidomics) were reviewed in this pa-per, and gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) was considered as the mainstream me-thod. This paper reviews the research literature on lipid metabolomics in the field of fish, espe-cially the research progress in fish reproduction. This paper provides scientific reference for the rearing of fish parents and the breeding of young and juvenile fish. Keywords Lipid Metabolomics, Fish, Breeding 脂质代谢组学及在水产动物研究中的应用 宋敏，温海深* 中国海洋大学水产学院，山东青岛 收稿日期：2019年5月10日；录用日期：2019年5月24日；发布日期：2019年6月3日 摘要 本文综述国内外有关脂质代谢组学(lipidomics)概念、分析方法，认为气相色谱质谱联用法(GC-MS)为目前主流方法。综述了脂质代谢组学在鱼类领域的研究文献，特别突出了在鱼类繁殖学中的研究进展。该论文为鱼类亲鱼饲养与仔稚鱼培育提供科学参考。 *通讯作者。
动物营养学课程论文
提高反刍动物饲料转化效率的措施 摘要：为了更深入的了解提高反刍动物饲料转化效率的措施；为了更好的掌握查阅、收集、整理、归纳与分析《动物营养学》相关资料的方法；为了对《动物营养学》的最新研究进展有一个更全面的了解；同时也为了毕业论文的写作打好基础。故而归纳各家对提高反刍动物饲料转化效率的措施的研究写了这篇综述论文。 关键词:转化；措施；效率；反刍动物 引言 反刍动物属哺乳纲，偶蹄目，反刍亚目。我们在生活中所熟知的反刍动物以牛、羊为最。其他不怎么常见的如骆驼、鹿、长颈鹿。这类动物都生有复杂的反刍胃，可以反刍食物，即可以把吞入胃中的食物呕到嘴部咀嚼充分后再吞入腹中。反刍动物一般都有四个胃骆驼较为特殊有三个胃。四个胃分别为瘤胃、网胃、瓣胃以及皱胃。不同的胃对饲料的消化、吸收和利用具有不同的功能与作用[1]。我国作为一个世界上首屈一指的农业大国，具有丰富的饲料资源。这对我们研究提高反刍动物饲料转化效率的措施具有重要的意义。对我国的畜牧业来讲同样具有重要的意义。 正文 1提高植物性饲料转化效率的方法 我国作为世界上首屈一指的农业大国，秸秆饲料资源相当丰富。如何很好的利用这些饲料资源成为我们必须要认真面对的问题。由于秸秆类饲料中各有机物质的消化率普遍较低，一般很少超过50%[2]。其中粗蛋白在3%~6%不等。粗灰分含量很高，对动物有营养意义的矿物元素很少。矿物质和维生素的含量都很低，尤其是钙和磷的含量很低[3]。含磷量在0.02%~0.16%，而日粮配方所需的含磷量都在0.2%以上。远低于动物的日需要量。于是如何提高饲料的转化效率成为动物科学工作者的重中之重。 1.1 物理法 我国作为世界上首屈一指的农业大国，秸秆饲料资源相当丰富。如何很好的利用这些饲料资源成为我们必须要认真面对的问题。由于秸秆类饲料中各有机物质的消化率普遍较低，一般很少超过50%。其中粗蛋白在3%~6%不等。粗灰分含量很高，对动物有营养意义的矿物元素很少。矿物质和维生素的含量都很低，尤其是钙和磷的含量很低。含磷量在0.02%~0.16%，而日粮配方所需的含磷量都在0.2%以上。远低于动物的日需要量。于是如何提高饲料的转化效率成为动物科学工作者的重中之重。 对于植物饲料在我国主要就是各种秸秆，且多为农作物秸秆。提高饲料的转化效率不外乎破坏植物细胞壁，弱化或破坏木质素与纤维素或半纤维素之间的结构，使饲料主要是
反刍动物营养消化代谢试验手册
反刍动物营养试验手册 -------消化代谢试验部分(修改版) 反刍动物营养研究室 中国农业科学院畜牧研究所 二〇〇四年六月一日
前言 2003年在本研究室进行了为期四个月的奶牛消化代谢实验，实验操作过程中，采用了许多方法，成功失败皆有。每每在失败之后方知实验操作之重要，经验积累之难得，于是便有了将这些看似简单的方法和提示落实于文字的想法，希望能给做相关实验的人员些许提示和帮助。但毕竟能力有限，在实验过程中因力求细致准确而有因简就繁之嫌，有些文字表达方面过于累赘，错误和不当之处在所难免，同时，由于实验内容要求，所涉及的方法有限，所以这只能是抛砖引玉，希望大家能够不吝指出，并不断改进，使之逐渐完善！ 手册的形成是在导师王加启研究员指导督促以及实验室各位老师同学帮助下，集实验小组各成员（王吉峰博士、汪水平硕士和姚美蓉硕士）的工作结果而成！ 2002级博士研究生李树聪 2004年7月13日 于反刍动物营养研究室
目录 饲料及其剩余料样品的采集______________________________________________1瘤胃液pH，NH3-N和VFA样品采集和保存__________________________________2瘤胃动态食糜样品采集和保存____________________________________________3分离瘤胃微生物样品采集________________________________________________4瘤胃原虫计数用样品的采集和保存________________________________________5乳样的采集和保存______________________________________________________6小肠液采集及其预处理__________________________________________________7粪样采集及其预处理____________________________________________________8尿样采集及其预处理____________________________________________________9瘤胃原虫计数方法_____________________________________________________10酸性洗涤不溶灰分的测定_______________________________________________12氨氮测定方法--氧化镁直接蒸馏法________________________________________13瘤胃液氨氮检测方法－靛酚比色法_______________________________________15瘤胃液VFA测定---气相色谱法___________________________________________18瘤胃微生物量测定方法-嘌呤碱基法______________________________________21 Co—EDTA 配制_______________________________________________________24铬染纤维的制备_______________________________________________________25原子吸收测定用容器洗涤方法___________________________________________27干法灰化食糜流量监测用指示剂（Co Cr Yb）测定________________________28湿法消化食糜流量监测用指示剂（Co Cr Yb）测定_________________________29瘤胃液中Co浓度的测定_________________________________________________30指示剂的配合和使用方法_______________________________________________31
浅谈反刍动物营养
学号：14720210 姓名：徐修志专业：养殖 反刍动物营养浅谈 摘要：本文通过查阅各种资料，对小肽、蛋白能量比、碳水化合物、粗纤维等物质对反刍动物的作用进行综合性总结，进而更深刻了解反刍动物营养的各方面机理。蛋白质的营养实际上就是小肽和氨基酸的营养，经过深入研究，人们认识到动物对蛋白质的需要完全由游离氨基酸来满足，小肽的营养起着重要的补充作用。能量是评价饲料的重要指标，饲料能量浓度高低决定动物采食量。因此，蛋白质和能量水平是决定动物生产性能的重要因素。但两者之间并不是孤立的，也不是二者水平越高，动物的生产性能和健康状况越好。反刍动物日粮中的碳水化合物可分为纤维性和非纤维性碳水化合物。调整反刍动物日粮中纤维的组成和含量，可以调控瘤胃中碳水化合物的分解速度和程度、pH值和挥发性脂肪酸产生的量和比例，调节氮源的利用，最终影响微生物的合成和动物的生产性能。 关键词：反刍动物营养小肽蛋白能量比碳水化合物粗纤维 以往的观点都认为，蛋白质在肠道中都被消化成氨基酸，然后通过肠壁被机体吸收，为使畜禽获得最佳生产性能，饲粮中只要提供各种必需氨基酸，就能达到目的。事实上，许多试验表明，饲粮中粗蛋白含量过低，既使添加足够的必需氨基酸也不能获得预期的结果。近几十年的研究表明，当动物采食按理想氨基酸模式配制的纯化日粮或氨基酸平衡的低蛋白日粮时，不能获得最佳生产性能和饲料效率。为了达到最佳生产性能，必须有一定数量的小肽（二、三肽）。 1 小肽在反刍动物营养中的应用 1.1 小肽对反刍动物瘤胃微生物的调控作用 由于小肽对反刍动物具有特殊的调控作用，这使肽营养研究成为瘤胃微生物氮素营养研究的新热点。尽管大多数瘤胃微生物能利用氨和氨基酸作为氮源生长，但是肽合成微生物蛋白质的效率高于氨基酸。肽对瘤胃微生物生长的主要效应是加快微生物的繁殖速度、缩短细胞分裂周期，瘤胃细菌的生长速度在有肽时比有氨基酸时快70％。 1.2 小肽在瘤胃内的代谢主要由瘤胃微生物的肽酶完成 最新研究发现，瘤胃内的肽酶以外切酶为主。肽分子量的大小对其利用途径有影响，细菌对大分子肽的摄取速度比对小分子肽和氨基酸的摄取速度快，使大分子的肽更易于转化为菌体蛋白（Broderick等，1988），研究发现，氨基酸残基大于3和4时，肽的摄取速度下降。因此，分子量大小对肽代谢有影响。而且肽链的氨基酸序列对肽的利用效率也有影响。 1.3小肽的吸收机制和特点 反刍动物吸收的主要部位是瓣胃，其次是瘤胃等其他非肠系膜和肠系膜组织。小肽的吸收是一个主要依靠H+或Ca2+浓度电导而进行的消化能量的转运过程。由于小肽的吸收具有耗能低、不易饱和且各种肽之间运转无竞争性与抑制性的特点，再加上肽本身对于氨基酸或肽的转运的促进作用，动物对肽中氨基酸残基的吸收比对游离氨基酸的吸收更迅速、更有效。 1.4 小肽对瘤胃微生物生态体系的影响 肽能底否对微生物生长有促进作用，主要取决于碳水化合物的发酵速度。
沉痛悼念冯仰廉教授
Ⅰ 沉痛悼念冯仰廉教授 中国反刍动物营养学科奠基人与开拓者、著名动物营养学家、中国农业大学动物科学技术学院教授冯仰廉先生，因病医治无效，于2016年11月26日15时53分在北京逝世，享年85岁。 冯仰廉先生，1931年4月2日生于江苏徐州，汉族，中共党员。1953年南京农学院毕业后留校任教，1956年调入北京农业大学畜牧系从事教学科研工作，历任讲师、副教授、教授，直到 70岁退休。曾多年担任畜牧系总支副书记，1964—1966年受国家派遣在中国驻荷兰、丹麦大使馆做科技工作，1980—2000年多次在英国、法国等国科研机构开展合作研究。在60多年从 教工作中，冯仰廉先生曾任农业部动物营养学重点开放实验室学术委员会副主任、动物营养学国家重点实验室顾问、中国畜牧兽医学会名誉理事长、中国畜牧兽医学会动物营养学分会理事长、养牛学分会理事长、《中国畜牧杂志》和《动物营养学报》主编等职务。 冯仰廉先生是一位卓越的科学家，开创并发展了我国反刍动物营养学科，创建了以奶牛能量单位（N N D）、肉牛综合净能（R N D）、小肠蛋白质营养新体系为核心的中国特色反刍动物营养需要体系；创造性地自主研制了我国第一个自控大型双呼吸测热室，系统揭示了反刍动物能量转化代谢规律；主持制定了中华人民共和国农业行业标准《奶牛饲养标准》、《肉牛饲养标准》，获得多项国家级和省部级科技奖项，发表学术论文数百篇，编著如《实用肉牛学》、《反刍动物营养学》等多部著作，其中《反刍动物营养学》是国内第一部反刍动物营养学专著，已成为国内研究生教材，为我国反刍动物营养学科和产业发展做出了杰出贡献。 冯仰廉先生是一位杰出的教育家，恪守为人师表、教书育人之道，一丝不苟、兢兢业业致力于我国养牛学、反刍动物营养学的学科建设和人才培养，培育了一批肩负中国反刍动物营养科学研究、教书育人、产业发展的科学家、学者、企业家。1989年获农业部“部属院校优秀教师”称号，1990年被国家教委和科委联合授予“全国高等学校先进科技工作者”光荣称号，2009年被评为中国畜牧兽医学会“先进工作者”，2010年被中国奶业协会授予“中国奶业终身贡献奖”，2015年被中国畜牧兽医学会养牛学分会授予“终身成就奖”，2016年被中国畜牧兽医学会动物营养学分会授予“终身成就奖”。 冯仰廉先生一生成绩卓著，为人谦逊，平易近人。他曾自评，“我不是什么天才，我是一个苦学派”。冯仰廉先生严谨治学的态度、勇于创新的学术思想、率先垂范的工作作风、诲人不倦的高尚情操、宽厚慈爱的长者风范为年轻一代树立了人生典范，永远值得我们学习和敬仰！ 让我们牢记先生的教诲，继承和发展先生的事业！ 追忆往昔，峥嵘岁月；还看今朝，桃李芬芳。 音容宛在，馨香不散；德范长存，流洒人间！ 中国农业大学动物科技学院
代谢组学的定义(1)
代谢组学的定义 代谢组学(metabolomics/metabonomics)[1, 2]是上世纪90 年代中期发展起来的一门新学科，它是研究生物体系受外部刺激所产生的所有代谢产物变化的科学，所关注的是代谢循环中分子量小于1000 的小分子代谢物的变化，反映的是外界刺激或遗传修饰的细胞或组织的代谢应答变化。代谢组学的概念来源于最初人们提出的“代谢物组”(metabolome)，即指某一生物或细胞所有代谢产物，后来发展为代谢组学的概念。其最主要的特征是通过高通量的实验和大规模的计算，从系统生物学的角度出发，全面地综合地考察机体的代谢变化。作为一种崭新的方法学，代谢组学已成为国际上疾病与健康研究的一个重要热点。 Nicholson 研究小组于1999 年提出了metabonomics 的概念[1]，并在疾病诊断、药物筛选等方面做了大量的卓有成效的工作[3, 4]。Fiehn 等[5]提出了metabolomics 的概念，第一次把代谢产物和生物基因的功能联系起来。之后很多植物化学家开展植物代谢组学的研究，使代谢组学得到了极大的发展，形成了当前代谢组学的两大主流领域：metabolomics 和metabonomics。前者是对生物系统整体的、动态的认识(不仅关心代谢物质的整体也关注其动态变化规律)，而后者强调分析且是个静态的认识概念，因此可以认为metabolomics 是metabonomics 的一个组成部分。代谢组学经过不断的发展，一些相关层次的定义已被学术界广泛接受。第一个层次为靶标分析，目标是定量分析一个靶蛋白的底物和/或产物；第二个层次为代谢轮廓分析，采用针对性的分析技术，对特定代谢过程中的结构或性质相关的预设代谢物系列进行定量测定；第三个层次为代谢指纹，定性或半定量分析细胞内外全部代谢物；第四个层次为代谢组分析，定量分析一个生物系统全部代谢物，其目前还难以实现。 目前，代谢组学已在药物毒性和机理研究[6-7]、微生物和植物研究[8,9]、疾病诊断和动物模型[10, 11]、基因功能的阐明[12]等领域获得了较广泛的应用，在中药成分的安全性评估[13]、药物代谢分析[14]、毒性基因组学[15]、营养基因组[16]、药理代谢组学[17-19]、整合药物代谢和系统毒理学[20, 21]等方面也取得了新的突破和进展代谢组学的具体研究方法是：运用核磁共振(NMR)、质谱(MS)、气质联用(GC-MS)、高效液相色谱(HPLC)等高通量、高灵敏度与高精确度的现代分析技术，通过对细胞提取物、组织提取物、生物体液(血浆、血清、尿液、胆汁、脑脊液等)和完整的脏器组织等随时间变化的代谢物浓度进行检测，结合有效的模式识别方法进行定性、定量和分类，并将这些代谢信息与生理病理过程中的生物学事件关联起来，从而了解机体生命活动的代谢过程[22]。 基于核磁共振的代谢组学 作为众多化学分析方法中的一种，NMR 在代谢组学的研究中起着非常重要的作用。首先，NMR 分析生物体液或活体组织等复杂样品时，预处理过程简单，测试手段丰富，包括液体高分辨NMR、高分辨魔角旋转(HRMAS) NMR 和活体磁共振定域谱(MRS)，因此能够在最接近生理状态的条件下对不同类型的样品进行检测。其次，NMR 是一种无创性的多参数动态分析技术，同时具有定性分析和定量分析的能力；NMR 谱本身携带有丰富的分子结构和动力学信息，通过扫描生物样品可以得到其所有含NMR 可观测核的、且含量在NMR 检测限上的代谢物的特征NMR 谱。再次，NMR 检测可以在很短的时间内完成(一般5 ~ 10 分钟)，这对于实现高通量样品检测，并保证样品在检测期内维持原有生化性质至关重要。此外，低温探头、自动进样技术的出现和日趋完善，也使检测灵敏度和速度不断提高。最
反刍动物蛋白质的营养调控
反刍动物营养!饲料研究!!够 收稿日期：#$$%+$%+#,满足代谢与生产的需要。但高产奶牛却是例外（杨赵军，*"">）。随着产奶量的提高，日粮中精粗比例增加及饲料加工过程对烟酸和体内可以合成烟酸的色氨酸的破坏，奶牛会缺乏烟酸。@<8+8277等人进行的体内与体外试验发现，烟酸可以促进瘤胃微生物合成蛋白质。在以玉米、棉籽饼和粗料为日粮条件下，向牛的瘤胃液中分别添加维生素A 、维生素B 、维生素C ，在各自适宜浓度下能促进瘤胃微生物的生长（林海，*""’）。 *?*?#!硫化物 硫是反刍动物所必需的矿物质之一。瘤胃微生物合成某些氨基酸、维生素、酶时需要硫。硫化物是合成菌体蛋白硫的主要来源（D<11E;=，*",%；FG;=H I23，*">#）。日粮中适宜的硫水平可促进瘤胃内细菌蛋白质的合成（J<21K ，*""(）。 *?*?(!肽与氨基酸 肽是瘤胃微生物合成蛋白质的重要底物（A3EH 912;821K ，*""(）；@099277等（*"’(）和:<=6等（*"’>）的研究结果均表明，肽的摄取是瘤胃蛋白质降解的限速因素，它能够刺激瘤胃微生物的生长。A3I472等（*"’"）证明，用肽或肽和氨基酸的混合物作氮源比单独以氨作为氮源更能促进微生物的生长。*?*?%!酵母培养物 通过酵母活细胞或酵母中的某些微生物生长促进因子对瘤胃微生物的作用，可促进瘤胃中纤维分解菌、乳酸菌等有益微生物的生长繁殖。日粮中添加酵母培养物，能促进纤维素分解菌生长，使瘤胃厌氧菌增加/倍（B;L96=，*"’>，*""(）；补饲酵母培养物能显著地增加进入真胃的微生物蛋白量。
!反刍动物营养!!"饲料研究!!
反刍动物饲料营养价值表
反刍动物常用饲料营养价值表 饲料名称干物质% 粗蛋白% 粗脂肪% 粗纤维% 无氮浸出 物% 钙% 磷% 消化能（兆焦/千克）综合净能（兆焦/千克） RND千克 NND千克产奶净能（兆焦/千克） 大麦青割 甘薯藤 黑麦草 苜蓿 沙打旺 象草 野青草 狗尾草 玉米秸青贮 冬大麦青贮 苜蓿青贮 甘薯蔓青贮 甜菜叶青贮 甘薯片 胡萝卜 马铃薯 甜菜 羊草 苜蓿干草 野干草 干黑麦草 碱草 大米草 玉米秸 小麦秸 稻草 谷草 甘薯蔓 花生蔓 玉米 高梁 大麦 稻谷 燕麦 小麦 小麦麸 玉米皮
高梁糠 黄面粉 大豆皮 豆饼 菜籽饼 胡麻饼 花生饼 棉籽饼 向日葵饼高梁酒糟玉米酒糟啤酒糟 粉渣 马铃薯粉渣甜菜渣 酱油渣15.7 13.0 18.0 26.2 14.9 20.0 18.9 25.3 22.7 22.2 33.7 18.3 37.5 24.6 12.0 22.0 15.0 91.6 88.7 85.2 87.8 91.7 83.2 90.0 89.6
90.7 88.0 91.3 88.4 89.3 88.8 90.6 90.3 91.8 88.6 88.2 90.2 91.1 87.2 91.0 90.6 92.2 92.0 89.9 89.6 92.6 37.7 21.0 26 15 15 8.4 24.3 2.0 2.1 3.3 3.8 3.5 2.0 3.2 1.7 2.4 2.6 5.3 1.7 4.6
1.1 1.6 2.0 7.4 11.6 6.8 17.0 7.4 12.8 5.9 5.6 2.5 4.5 8.1 11.0 8.6 8.7 10.8 8.3 11.6 12.1 14.4 9.7 12.1 9.6 9.5 18.8 43.0 36.4 33.1 44.6 32.5 46.1 9.3 4.0 8.10 2.8 1.0 0.9 7.1 0.5
反刍动物瘤胃的四种疾病诊疗
反刍动物瘤胃的四种疾病诊疗 1.前胃弛缓 症状：前胃弛缓按其病情发展过程，可分为急性和慢性两类。急性型：急性消化不良，食欲减退或消失、反刍减少或停止，听诊瘤胃收缩能力减弱，蠕动次数减少，瓣胃蠕动音低沉，瘤胃内容物充满、黏硬，或呈粥状。便秘或下痢。如伴发前胃炎或酸中毒时，排棕褐色糊状粪便、恶臭，精神高度沉郁，发生脱水现象。 慢性型：常为继发性因素引起。食欲不定，常需嚼，磨牙，反刍间断或停止，嗳气减少，病情弛缓，周期性消化不良，瘤胃蠕动音减弱或消失，内容物稀软或黏硬。瘤胃轻度臌胀，肠蠕动音微弱或低沉。便秘，粪便干硬，呈暗褐色，附着粘液；时有下痢，或下痢与便秘交替发生。 诊断：根据临床表现，结合病史与瘤胃内容物性质的变化，作为诊断依据。 瘤胃液PH6.5-7.0，前胃弛缓时，PH下降至5.5以下，个别病例升至8.0或更高，纤毛虫存活率显著降低或消失。 鉴别诊断：注意与酮病、创伤性网胃腹膜炎、皱胃变位、瘤胃积食和迷走神经消化不良等疾病区别。 治疗：前胃弛缓的治疗原则，在于排除病因，增强神经体液调节，健脾胃，促进反刍，防腐止酵，消导，强心补液，防止脱水和自体中毒的综合疗法。 2.瘤胃臌胀 症状：常发生于大量采食易发酵的饲料后不久。病畜腹围急剧增大，腹旁窝突出，严重者可高出脊背。叩诊瘤胃紧张而呈鼓音。腹痛不安，回头顾腹，摇尾，后肢踢腹，频繁起卧。 诊断：根据临床症状，结合病史不难诊断，但应注意区别原发性和继发性的原因，继发性的瘤胃臌胀还表现原发病的病症，还应注意确诊是泡沫性还是非泡沫性的瘤胃臌胀。 治疗：本病得治疗原则是着重排气消胀，理气止酵，强心输液，健胃消导。治疗中，根据情况，采用强心补液，增进疗效，当泡沫性瘤胃臌胀用药无效时，应及时采取瘤胃切除术，取出其内容物，按照外科手术要求处理，可获良好效果。 3.瘤胃积食 症状：通常在过量采食后数小时内发病，病情发展迅速。初期神情不安，回头顾腹；食欲、反刍消失，嗳气、流延，有时候逆呕或呕吐，呼吸促迫。腹部膨胀。 诊断：依据过食发病，瘤胃内容物充满而黏硬或坚实，腹围增大，呼吸急促且具有腹痛表现，容易确诊。 治疗：本病得治疗原则增强前胃运动机能，促进瘤胃内容物的运转，消积化滞，防止脱水与自体中毒及对症治疗。先绝食，并进行瘤胃按摩；清肠消导。在药物治疗无效时，即应进行瘤胃切除手术，取出内容物。 4.瘤胃酸中毒 症状：急性病例常在采食后无明显病症，于3-5h内突然死亡。病情轻的神情恐惧，食欲反刍减退，瘤胃运动减退，肚腹胀满，粪便灰色，松软或下痢。间或后肢踢腹，呈现腹痛。 诊断：应根据过食含碳水化合物的谷物类饲料的病史及其临床症状和实验室检测，瘤胃胀满，卧地不起，具有蹄液炎和神经症状。瘤胃液PH下降至5.0下降；酸血症血液PH降至7.0以下，血清转氨酶显著增高，碱储减低，尿呈酸性反应等进行综合分析与论证，即可作出正确诊断。 治疗：首先是抑制乳酸产生和酸中毒，其次应用抗组织胺制剂，消除过敏性反应，第三强心输液，调节电解质，维持循环血量，第四促进前胃运动，增强胃肠机能，排除有毒物质，第五保护肝脏，增强解毒功能，第六镇静安神，降低颅内压，防止脑水肿。此外应加强饲养和护理。
反刍动物非蛋白氮研究进展
收稿日期:2008212218 3资金项目:公益性行业(农业)科研专项经费资助(nyhyzx072036206)33通讯作者 徐作明,男,1983年生,硕士研究生,研究方向:反刍动物营养。 反刍动物非蛋白氮研究进展 3 徐作明 夏 科 郗伟斌33 (辽宁省沈阳农业大学畜牧兽医学院,沈阳110161) 摘要 主要是对非蛋白的种类、非蛋白氮的降解机制、非蛋白氮利用的影响因素以及缓解方法进行综述。关键词 非蛋白氮;反刍动物 蛋白质是反刍动物营养的主要限制因素,而富含蛋白质的豆科牧草却不能被广泛的种植,植物蛋白补充剂又通常非常昂贵,不适合用于大规模饲养生产。随着奶牛养殖业的不断发展,对饲料的需要量也随之增加。饲料原料的不足,特别是蛋白质饲料短缺与饲养需求之间的矛盾已经暴露的十分明显。因此,寻找新型蛋白质原料成为生产中需要解决的首要问题。而众多研究结果表明,非蛋白氮饲料原料是最直接、有效的蛋白质饲料替代品。 1 现有非蛋白氮种类 1.1 尿素及其衍生物类 尿素、缩二尿、缩三脲、磷酸尿、羟甲基尿素,其中羟甲基尿素是比较新型的非蛋白氮产品。2007 年李伟华等研究发现羟甲基尿素是稳定的化合物不但可以在瘤胃内缓慢释放自我调节瘤胃微生物菌群状态,还可以使高效蛋白质受到保护直接被机体利用。 1.2 氨及铵盐类 液氨、农用氨水、磷酸铵、硫酸铵、氯化铵、甲酸铵、乙酸铵、丙酸铵、硝酸铵、聚磷酸铵、乳酸铵、氰酸铵、碳酸氢铵、氨基甲酸铵等。1.3 酰胺化合物类 谷酰胺、天门冬酰胺、双氰胺等。 2 非蛋白氮在反刍动物体内的降解 反刍动物有一个类似于发酵罐作用的瘤胃,在这个大发酵罐中充满着各种微生物。而在这些种类 繁多的瘤胃微生物当中有80%能够以尿素等非蛋白氮等化合物为唯一氮源,26%的细菌离不开氨,50%的细菌即可以以氨也可以以氨基酸为氮源(Bryant ,1961)。当非蛋白氮饲料进入瘤胃,就被微 生物分泌的各种蛋白酶、肽酶、脱氨酶等降解酶所包围,而迅速地溶解和水解,分解成氨气和二氧化碳。同时碳水化合物在微生物酶的作用下生成挥发性脂肪酸和酮酸,紧接着氨气又与酮酸在微生物酶的作用下结合成氨基酸。新合成的氨基酸被瘤胃微生物所吸收利用转化为菌体蛋白。瘤胃微生物随着食糜和瘤胃液进入真胃和小肠,被胃蛋白酶和肠蛋白酶 分解为游离氨基酸进而被小肠所吸收提供给反刍动 物个体。 Clark (1992)研究表明,奶牛食糜蛋白质中的59%为微生物蛋白质[1] 。由此可见瘤胃微生物 蛋白为反刍动物机体起着提供主要蛋白来源的重要作用。在非蛋白氮的代谢过程中氨是主要的形式, 瘤胃内的氨除了被微生物利用合成蛋白质外,其余部分被吸收经血液循环至肝,在肝内经鸟氨酸循环变为尿素,这种内源性尿素,一部分经血液分泌于唾液重新进入瘤胃;另一部分通过瘤胃上皮扩散到瘤胃内,其余随尿排出体外[2]。而进入瘤胃内的氨又 ? 95?养殖与饲料2009年第3期专论综述
蛋白质分解代谢习题答案知识交流
蛋白质分解代谢习题 答案
第七章蛋白质分解代谢习题 问答题 1.试述氨的来源和去路。 1．来源：氨基酸脱氨基作用(体内氨的主要来源);肠道吸收的氨(血氨的主要来源),由蛋白质的腐败作用和肠道尿素经细菌脲酶水解产生的氨;肾小管上皮细胞分泌的氨,主要来自谷氨酰胺;嘌呤和嘧啶的分解代谢。去路：合成尿素;合成非必需氨基酸;合成谷氨酰胺,合成嘌呤或嘧啶。 2.试述尿素的合成过程。 2．尿素主要在肝细胞内合成,其过程有四：(1)氨基甲酰磷酸的合成。(2)瓜氨酸的生成；氨基甲酰磷酸在肝线粒体与鸟氨酸缩合成瓜氨酸。(3)精氨酸的生成：瓜氨酸进入胞液与天冬氨酸缩合后,释放延胡索酸生成精氨酸。(4)精氨酸水解成尿素。 3.试述谷氨酰胺生成和分解的生理意义。 3.谷氨酰胺生成的意义：（1）防止氨的浓度过高。(2)减少对神经细胞的损害。(3)便于运输至组织参与蛋白质、嘌呤、嘧啶的合成。分解意义；利用释放氨生成铵离子而排出过多的酸。它不仅是氨的解毒形式, 也是氨在血中存在和运输形式,同时也是维持酸碱平衡的重要因子。 4.为什么血氨升高会引起肝性脑昏迷(肝昏迷)?
4．血氨升高进入脑内的量增多,可与脑内谷氨酸、α‐酮戊二酸结合,不利于α‐酮戊二酸参与三羧酸循环,导致循环阻塞,阻止ATP的生成,脑细胞因能量供应不足而昏迷。 5.试述α-酮酸的代谢去路。 5.α-酮酸有三条代谢途径：(1)合成非必需氨基酸,α‐酮酸可通过转氨基作用重新合成氨基酸。(2)转变为糖和酮体,除亮氨酸和赖氨酸只生成酮体外,其他相应的酮酸均可生成糖、脂肪或酮体。(3)氧化供能,α-酮酸脱羧后生成脂肪酸,后者按脂肪酸分解途径分解为水和CO2,并释放能量。 6.试述半胱氨酸在体内能转变成哪些物质。 6．半胱氨酸可转变成胱氨酸;参与巯基酶的组成;参与谷胱甘肽的组成和维持其活性;转变成为牛磺酸,与游离胆汁酸结合成结合胆汁酸;转变成PAPS,提供硫酸根参与生物转化。 7.何谓葡萄糖-丙氨酸循环？有何生理意义? 运输形式之一,肌肉中的氨基酸经转氮基作用将氨基转给丙酮酸7．是NH 3 生成丙氨酸,后者经血液运至肝脏,再经联合脱氨基作用，释放出NH3，用于合成尿素。转氨后生成的丙酮酸可经糖异生作用转变为葡萄糖。葡萄糖由血液运到肌肉组织，沿糖分解代谢途径生成丙酮酸，然后再接受氨变为丙氨酸。丙氨酸和葡萄糖反复地在肌肉与肝脏之间进行氨的转运，故将这一途径成为丙氨酸-葡萄糖循环。通过此循环,既使肌肉中的氨以无毒的丙氨酸形式运输到肝,同时,肝又为肌肉提供了生成丙酮酸的葡萄糖,因此具有重要的意义。
反刍动物碳水化合物代谢及瘤胃调控技术研究进展
反刍动物碳水化合物代谢及瘤胃调控技术研究进展 杨在宾 (山东农业大学动物科技学院, 泰安, 271018) 摘要本文综述了碳水化合物被瘤胃微生物降解成单糖，并进而分解成VFA的途经。反刍动物葡萄糖来源主要是丙酸糖异生。综述还阐述了甲烷能产生量估测、控制和过瘤胃碳水化合物调控技术。 关键词：碳水化合物，代谢规律，调控技术，反刍动物。 RECENT DEVELOPMENT ON METABOLISM AND CONTROL TECHNOLOGY OF CARBOHYDRATES FOR RUMINANTS (College Of Animal Science And Technology, Shandong Agricultural University, Taian 271018,China) YANG Zai-bin Abstract: This paper briefly reviewed the metabolic pathways that all the dietary carbohydrates are converted to glycoses, and the glycoses are promptly converted to VFA, propionate acid is largely converted to glucose by the liver, and it is the primary source of glucose for ruminants. This paper also discussed the ways of estimate and control on methane energy produced in rumen and the technology of by pass carbohydrates. Key words: carbohydrate, metabolism, control technology and ruminant 改革开发20余年,我国畜牧业发展迅速,生产结构已改变了长期以来以猪为首的传统饲养格局,实现了猪、鸡、牛、羊全面发展的新局面。然而由于饲料资源的限制，迅速发展的牛、羊业仍然以低质秸秆为主要饲料，奶牛主要靠提高精饲料维持产奶量，因此，能量饲料的均衡供应是制约牛、羊业生产水平的主要因素。碳水化合物是最低廉的供能物质，根据反刍动物消化生理特点，弄清碳水化合物的代谢规律，对提高反刍动物生产水平和饲料转化效率意义重大。 1.瘤胃碳水化合物代谢机理 碳水化合物在瘤胃中的代谢可分为两个阶段，第一个阶段是将各种复杂的碳水化合物降解成各种单糖，这一过程是在细胞外微生物酶催化下完成的；第二阶段是微生物将第一阶段降解产生的各种单糖立即吸收进入细胞内进一步分解。 1.1瘤胃微生物细胞外消化 饲料中的各种复杂碳水化合物，包括结构性和非结构性碳水化合物均被瘤胃微生物分泌至细胞外的各种酶，进行不同程度降解，最终形成各种单糖（如图1所示）。饲料中的纤维素被一种或几种β—1，3—葡萄糖苷酶降解成纤维二糖，并进一步分解成葡萄糖或在磷酸化酶的作用下转变成葡萄糖—1—磷酸。淀粉和糊精经淀粉酶作用转变成麦芽糖，再经麦芽糖酶、麦芽糖磷酸化酶或1，6—葡萄糖苷酶催化生成葡萄糖或葡萄糖—1—磷酸。果聚糖被相应酶水解成果糖。饲草中的半纤维素、戊聚糖和果胶，可被相应酶降解为木糖及其他戊糖或糖醛酸，并进一步进入糖代谢。木质素是一种特殊结构物质，基本上不能被分解。