灭菌方法与生物指示剂

合集下载

3M压力灭菌用生物指示剂的使用方法

3M压力灭菌用生物指示剂的使用方法压力灭菌用生物指示剂1262该压力蒸汽灭菌生物培养指示剂用于压力蒸汽灭菌效果的生物监测(包括下排气锅和预真空锅);通过培养基颜色变化，反应嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活，从而判断压力蒸汽灭菌生物监测结果。

1. 将压力蒸汽灭菌生物培养指示剂放于一标准测试包中;2. 按照国家规范, 分别将测试包放于锅内不同位置;3. 灭菌完毕, 取出该生物指示剂;4. 挤破内含的安瓿, 与一支对照管一起放于56℃培养锅内培养;48小时后阅读结果。

结果阅读：1.培养后指示管不变色(呈紫色), 表示灭菌通过;2.培养后指示管变色(呈黄色), 表示灭菌不通过,(必须及时查出灭菌失败原因)。

3.同时培养的对照管应为阳性(呈黄色), 如阴性,可能的原因为: 培养条件不符合要求; 生物指示剂有问题; (应及时查出阴性原因)。

注意事项：1. 灭菌完毕, 含生物指示剂的包裹很热并有一定压力; 需至少冷却10分钟以上, 否则可能引起塑料管内的安瓿破裂, 飞溅的碎片导致损伤;2. 只有对照管为阳性, 其生物监测结果才算有效。

3. 贮存于室温: 15-30℃; 相对湿度为35-60%;避免靠近灭菌器和化学消毒剂。

1292该生物指示剂可用以121℃下排气和132℃预真空压力蒸汽灭菌锅。

3MATTESTTM压力蒸汽灭菌生物培养指示剂(快速)在与3M ATTEST 290 培养锅共用时, 通过酶活性的灭活与否，探测嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活，从而判断压力蒸汽灭菌结果。

使用方法:1、在生物指示剂标签上注明灭菌器锅号, 负荷数量, 灭菌日期; 不要在指示剂的瓶或盖上另贴一个标签。

将生物指示剂放于一个标准测试包内，并置于最难灭菌的位置。

2、将含有生物指示剂的测试包放在灭菌器最难灭菌的位置，通常是灭菌器底层，近门或排气口上面。

3、正常装载。

4、灭菌循环完毕, 取出生物指示剂。

5、灭菌结束后，从灭菌器内取出含有生物指示剂的测试包，打开散热5分钟后才能取出生物指示剂。

高压灭菌生物指示剂使用说明

高压灭菌生物指示剂使用说明一、高压蒸汽灭菌器使用方法（1）在外层锅内加适量的水，将需要灭菌的物品放入内层锅，盖好锅盖并对称地扭紧螺旋。

（2）加热使锅内产生蒸气，当压力表指针达到33、78kPa时，打开排气阀，将冷空气排出，此时压力表指针下降，当指针下降至零时，即将排气阀关好。

（3）继续加热，锅内蒸气增加，压力表指针又上升，当锅内压力增加到所需压力时，将火力减小，按所灭菌物品的特点，使蒸气压力维持所需压力一定时间，然后将灭菌器断电或断火，让其自然冷后再慢慢打开排气阀以排除余气，然后才能开盖取物。

二、高压蒸汽灭菌器注意事项：（1）待灭菌的物品放置不宜过紧。

（2）必须将冷空气充分排除，否则锅内温度达不到规定温度，影响灭菌效果。

（3）灭菌完毕后，不可放气减压，否则瓶内液体会剧烈沸腾，冲掉瓶塞而外溢甚至导致容器爆裂。

须待灭菌器内压力降至与大气压相等后才可开盖。

又名:高压灭菌器,高压灭菌锅,高压蒸汽灭菌锅,手提高压灭菌器,手提高压灭菌锅,手提式高压灭菌器,手提式高压灭菌锅,手提式高压蒸汽灭菌器,手提式高压蒸汽灭菌锅（4）装培养基的试管或瓶子的棉塞上，应包油纸或牛皮纸，以防冷凝水入内。

（5）为了确保灭菌效果，应定期检查灭菌效果，常用的方法是将硫磺粉末（熔点为115℃）或安息香酸（熔点为120℃）置于试管内，然后进行灭菌试验。

如上述物质熔化，则说明高压蒸气灭菌器内的温度已达要求，灭菌的效果是可靠的。

也可将检测灭菌器效果的胶纸（其上有温度敏感指示剂）贴于待灭菌的物品外包装上，如胶纸上指示剂变色，亦说明灭菌效果是可靠的。

（6）现在已有微电脑自控型高压蒸气灭菌器，只需放去冷气后，仪器即可自动恒压定时，时间一到则自动切断电源并鸣笛，使用起来很方便。

灭菌操作中生物指示剂的相关研究

22
四、小结
• 保证无菌产品无菌是产品质量保证的核心问题。无菌生产工艺是保障产品无菌的关键手段。而只有经过充分验证后的灭菌（无菌）生产工艺，才能保证生产出无菌的产品。微生物挑战试验是无菌生产工艺验证的重要环节。而选择适当的生物指示剂则是微生物挑战试验结果获得认可的关键。选择恰当的生物指示剂，执行正确的步骤，并提供系统完整的信息，才能使无菌生产工艺验证结果令人信服。
14
三、在无菌生产工艺验证中的应用
• 验证过程：将一定量已知耐热性的孢子接入产品中, 用设定的灭菌程序灭菌, 以确认设定的灭菌工艺是否符合标准。 • P.S.研究灭菌程序之前, 必须了解生物指示剂在产品或替代产品中的耐热性
“The requirements of the test are met if the determined D value is within 20% of the labeled D value for the selected sterilizing temperature and if the confidence limits of the estimate are within 10% of the determined D value.”——USP
13
三、在无菌生产工艺验证中的应用
• 菌株的“抗力”指标：D值（微生物耐力系数）、存活时间和杀灭时间 eg:对湿热灭菌（121℃）的工艺验证用菌株均应证明“具备合乎要求的抗力”；通常应满足以下要求： D值在1.5～3.0之间；存活时间在4.5～14.0min之间；完全杀灭时间在13.5～32.0剂验证实例
• 验证时，腔室内的物品应按实际生产时的要求进
行装载，生物指示剂的使用数量应足以反映整个物品内、外部的灭菌状况，生物指示剂既要遍布整个腔室，又要尽可能地放在热效应最差的部位，如物品中央、管路拐角以及腔室的排水口（干热灭菌的排风口）等。

生物指示剂

生物指示剂：1.芽孢悬液CICC芽孢悬液采用国际通用标准菌株，参照国家药典、相关标准、卫生部《消毒技术规范》等、经严格质量控制制备而成。

芽孢悬液中含有一定数量、具有特定抗性的细菌芽孢，可直接接种，也可用于自制生物指示剂。

萎缩芽孢杆菌芽孢悬液产品名称芽孢悬液菌种名称萎缩芽孢杆菌（B. atrophaeus）ATCC 9372（曾用名：枯草芽孢杆菌黑色变种）产品规格B9372-9 芽孢数：109CFU/ml；包装：5 ml/瓶B9372-8 芽孢数：108CFU/ml；包装：5 ml/瓶B9372-7 芽孢数：107CFU/ml；包装：10 ml/瓶B9372-6 芽孢数：106CFU/ml；包装：10 ml/瓶用途可用于各种化学消毒剂、干热、环氧乙烷等灭菌效果的验证和评价，无菌冷灌装生产线的性能验证，染菌载片的制备以及生物安全柜灭菌效果的验证等。

贮藏条件2~8℃，避免阳光直射和接触灭菌剂。

有效期生产日起12个月嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢悬液短小芽孢杆菌芽孢悬液注：CICC亦可按照客户要求提供不同规格包装。

另外根据客户要求可提供：生孢梭菌（Clostridium sporogenes），枯草芽孢杆菌（B. subtilis），巨大芽孢杆菌（B. megaterium），蜡状芽孢杆菌（B. cereus）等的芽孢悬液。

2.工业生物指示剂工业生物指示剂是根据工业企业实际情况，按照标准要求定制加工而成，以满足企业的特殊需求，通常采用不同的载体材料和包装形式，例如钢片、钢线、纸片、棉线、塑料片和滑石粉等，它与芽孢条、自含式等标准生物指示剂相比更具优势。

CICC可按照客户要求提供定制工业生物指示剂。

染菌滑石粉CICC研制的标准专用染菌滑石粉，以符合标准要求的滑石粉为载体，选用CICC 自行生产的微生物材料萎缩芽孢杆菌ATCC 9372芽孢悬液，按标准要求精制而成，每批染菌滑石粉产品均经过芽孢含量检验，确保质量稳定。

微生物实验常用的灭菌、消毒方法及效果监测

微生物实验常用的灭菌、消毒方法及效果监测因为微生物广泛存在于环境中，从预防交错污染的角度动身，微生物试验必需遵循无菌操作的原则，采纳多种物理、化学或是生物的办法，确保全部的物品和工作环境符合用法要求。

常用以下术语表示杀灭微生物的程度。

消毒：杀灭或(和)清除致病微生物，使其数量削减到不再能引起人发病。

用于消毒的化学药品称为消毒剂。

灭菌：将全部微生物所有杀灭或(和)清除掉，包括细菌芽孢和非致病微生物。

灭菌比消毒更彻底。

无菌：不含活菌，是灭菌的结果。

防止细菌进入人体或其他物品的操作技术称为无菌操作。

(一)常用的灭菌、消毒办法常用的灭菌或消毒办法分为4类：热力灭菌法、化学消毒法、辐射法和过滤除菌法。

普通按照物品的种类和污染后的危害程度来挑选消毒、灭菌办法。

消毒首选物理办法，不能用物理办法消毒的方可选化学办法。

1.热力灭菌法高温对微生物具有显然的杀伤作用，这是因为热能可变性蛋白质、核酸及破坏细胞膜等。

热力灭菌法按照有无水蒸气的参加分为干热灭菌法和湿热灭菌法两种。

热力灭菌法的种类及用法范围详见表4-4。

表4-4 热力灭菌法的种类及用法范围 2.化学消毒法无数化学药物能够影响微生物的物理结构和生理活动，从而达到消毒的作用。

化学消毒剂普通都对人体组织有害，因此，只能外用或用于环境的消毒，常用化学消毒剂的种类、作用机理及用法范围见表4-5。

表4-5 化学消毒剂及用法范围 3.辐射法辐射法中紫外线杀菌最为常用。

紫外线的穿透能力很弱，简单被固形物汲取，不能透过一般玻璃，因此，它只适用于空气、水及物体表面的杀菌。

无菌室、超净工作台、生物平安柜内都装有紫外灯，用来举行空气消毒，消毒时光普通为30min。

应用紫外线杀菌时，必需防止紫外线对人体的挺直照耀，以免损害眼睛和灼伤皮肤。

4.过滤除菌法指将含菌的液体或气体通过一个称作细菌滤器的装置，使细菌受到机械的阻力而留在滤器或滤板上，从而达到除菌的目的。

此法常用于不宜加热灭菌的液体物质，如培养基添加剂、抗生素、血清等。

生物实验室灭菌方式

生物实验室里常用的灭菌方法汇总微生物实验室常用的器材一般包括玻璃器材、金属器械、橡胶制品及塑料制品等，每类器材的处理及消毒措施都有不同。

严格的消毒灭菌工作极为重要，直接影响着整个实验能否顺利进行。

1.消毒灭菌方法目前，常用的消毒灭菌方法多采用物理方法(如，干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法等)和化学方法(消毒剂、抗生素)两大类。

1.干热灭菌法是利用恒温干燥箱内120℃-150℃的高热，并保持90-120分钟，杀死细菌和芽孢，达到灭菌目的的一种方法。

主要适用于不便在压力蒸汽灭菌器中进行灭菌，且不易被高温损坏的玻璃器皿、金属器械以及不能和蒸汽接触的物品的灭菌。

用此方法灭菌的物品干燥，易于贮存。

酒精灯火焰烧灼灭菌法也是属于干热灭菌的方法之一，在进行动物细胞体外培养工作时，常须利用工作台面上的酒精灯火焰对金属器具及玻璃器皿口缘进行补充灭菌。

2.湿热灭菌法压力蒸汽湿热灭菌法是目前最常用的一种灭菌方法。

它利用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力，使菌体蛋白质凝固变性而使微生物死亡。

适合于布类工作衣、各种器皿、金属器械、胶塞、蒸馏水、棉塞、纸和某些培养液的灭菌。

高压蒸汽灭菌器的蒸汽压力一般调整为1.0-1.1 kg/cm2，维持20-30min即可达到灭菌效果。

3.射线灭菌法利用紫外线灯进行照射灭菌的方法。

紫外线是一种低能量的电磁辐射，可以杀灭多种微生物。

紫外线的作用机制是通过对微生物的核酸及蛋白质等的破坏作用而使其灭活。

适合于实验室空气、地面、操作台面灭菌。

灭菌时间为30min。

用紫外线杀菌时应注意，不能边照射边进行实验操作，因为紫外线不仅对人体皮肤有伤害，而且对培养物及一些试剂等也会产生不良影响。

4.过滤除菌法是将液体或气体通过有微孔的滤膜过滤，使大于滤膜孔径的细菌等微生物颗粒阻留，从而达到除菌的方法。

过滤除菌法大多用于遇热易发生分解、变性而失效的试剂、酶液、血清、培养液等。

目前，常用微孔滤膜金属滤器或塑料滤器正压过滤除菌，或用玻璃细菌滤器、滤球负压过滤除菌。

灭菌测定方法和步骤

微生物存活率测定
1. 准备一定数量的微生物样本，确保它们对辐射敏感且易于计数。2. 将样本暴露于预定剂量的辐射下。3. 辐射后，将样本在适宜条件下培养。4. 计算并比较辐射前后的微生物存活率，以评估灭菌效果。5. 根据需要，调整辐射剂量并重复测试以优化灭菌条件。
灭菌测定方法和步骤
灭菌方法
测定方法
步骤
热灭菌（如蒸汽剂（如耐热的细菌孢子）。2. 将生物指示剂放置在待灭菌物品中或附近。3. 进行灭菌处理（如蒸汽灭菌）。4. 灭菌后，将生物指示剂取出，在适宜条件下培养。5. 观察并记录培养结果，评估灭菌效果。
化学灭菌（如使用消毒剂）
中和试验法
1. 准备测试样本和对照样本。2. 将消毒剂应用于测试样本，同时确保对照样本不受影响。3. 使用适当的中和剂来停止消毒剂的活性，同时不破坏潜在的微生物。4. 将处理后的样本在适宜条件下培养。5. 观察并记录培养结果，比较测试样本和对照样本的微生物生长情况，评估灭菌效果。
辐射灭菌（如紫外线、γ射线）

小型压力蒸汽灭菌器灭菌效果监测方法和评价要求

小型压力蒸汽灭菌器灭菌效果监测方法和评价要求
小型压力蒸汽灭菌器是一种常见的灭菌设备，用于消毒医疗器械、药品以及实验室材料等。

为确保其灭菌效果符合标准，需要对其进行监测和评价。

监测方法：
1. 生物指示剂法：将生物指示剂放置于灭菌器中，进行灭菌操
作后进行培养以检测其生长情况，以验证灭菌器的灭菌效果。

2. 物理指标法：测量灭菌器内部的温度、压力、湿度等物理指标，以判断其是否符合灭菌要求。

评价要求：
1. 灭菌效果符合国家标准，达到无菌状态。

2. 灭菌器的温度、压力、湿度等物理指标符合国家标准。

3. 灭菌操作符合操作规程，并有相应的记录。

4. 生物指示剂法检测结果合格，并有相应的记录。

5. 完善的质量管理体系，确保灭菌器的持续稳定性能。

以上评价要求应定期检测和验证，以确保小型压力蒸汽灭菌器的灭菌效果和安全性。

- 1 -。

常见的五种灭菌方法解析及比较

常见的五种灭菌方法解析及比较不同灭菌方式对于器械要求不同，如具有很长导管的医疗器械，环氧乙烷灭菌可能难以达到官腔中心，从而影响灭菌效果；一些具有灵敏电子器件的医疗器械在伽马辐射或电子束灭菌时，可能就会受到影响。

为了不让错误的灭菌方式毁了你的医疗器械，我们来详细讲解常见的五类灭菌方法吧<1>干热灭菌法将物品置于干热灭菌柜（箱）内，利用干热空气达到杀灭微生物或消除热原物质的方法。

适用范围：玻璃器具、金属器具，耐高温但不宜采用湿热灭菌法灭菌的物品，均可采用本法灭菌。

干热灭菌条件一般为（160～170℃）×120min以上、（170～180℃）×60min以上或250℃×45min以上。

采用干热灭菌时，被灭菌物品应有适当的装载方式，不能排列过密，以保证灭菌的有效性和均一性。

干热灭菌法最常用的生物指示剂为枯草芽孢杆菌孢子。

<2>湿热灭菌法将物品置于灭菌柜（锅）内，利用高压饱和蒸汽使微生物菌体中的蛋白质、核酸发生变性从而杀灭微生物的方法。

该法灭菌能力强，为热力灭菌中最有效、应用最广泛的灭菌方法。

适用范围：缓冲液、培养基、洁净服、部分手术器械、器具、传染性污物以及其他遇高温高湿不发生变化或损坏的物品。

湿热灭菌通常采用121℃×15min或121℃×30min，灭菌时，被灭菌物品应有适当的装载方式，不能排列过密，以保证灭菌的有效性和均一性。

湿热灭菌法最常用的生物指示剂为嗜热脂肪芽孢杆菌孢子。

<3>气体灭菌法气体灭菌法又可以细分为臭氧杀菌消毒和环氧乙烷灭菌，消毒供应中心常见环氧乙烷灭菌法，是利用环氧乙烷气体进行灭菌，是一种传统的灭菌方法。

适用范围：可应用于工服灭菌、不耐加热灭菌的医疗器械、设施、设备等灭菌。

环氧乙烷灭菌系统，主要有下列四项互相制约的重要因素影响灭菌效果：①湿度；②温度；③气体浓度；④灭菌时间。

环氧乙烷具有非常强的渗透和扩散能力，其灭菌的机理主要是强氧化，因此具有广谱杀菌，灭菌能力强的特点，对微生物的繁殖体、芽孢有较强的杀灭效果。

过氧化氢低温等离子体灭菌1小时极速生物指示剂

过氧化氢低温等离子体灭菌1小时极速生物指示剂1. 简介过氧化氢低温等离子体灭菌技术是一种常用于医疗器械和生物实验室的高效灭菌方法。

而生物指示剂则是用于监测灭菌过程中是否有效杀灭细菌孢子的重要指标。

过氧化氢低温等离子体灭菌1小时极速生物指示剂就是一种用于此类灭菌技术的生物指示剂。

2. 技术原理该生物指示剂使用了一种特殊的细菌孢子作为指标，这种孢子具有较强的抗性，能够代表其他病原微生物在灭菌过程中的抵抗能力。

当这些孢子暴露于过氧化氢低温等离子体灭菌技术中，如果灭菌有效，孢子将被杀灭，无法再生长。

通过监测孢子的生长情况，可以确定灭菌技术的有效性。

3. 产品特点过氧化氢低温等离子体灭菌1小时极速生物指示剂具有以下特点：3.1 高效快速：该生物指示剂仅需1小时的灭菌时间就能够显示出结果，很大程度上提高了灭菌技术的效率。

3.2 灵敏度高：该产品对灭菌技术的监测灵敏度极高，能够准确反映灭菌过程中的微小变化，确保灭菌的可靠性。

3.3 安全可靠：严格安全规范下生产，并通过严格的质量控制，确保产品的可靠性和安全性。

4. 应用领域过氧化氢低温等离子体灭菌1小时极速生物指示剂主要应用于医院、生物实验室等需要高效灭菌的场所。

其快速、安全、可靠的特点使其在医疗器械消毒、生物实验室灭菌等方面有着广泛的应用前景。

5. 结语过氧化氢低温等离子体灭菌1小时极速生物指示剂是一种高效的生物指示剂，在医疗和生物领域有着广泛的应用前景。

它的快速、灵敏、安全可靠的特点使其成为了医院和实验室灭菌技术中不可或缺的重要组成部分。

希望该技术能够得到更广泛的应用，为医疗卫生和生物科学领域带来更大的便利和保障。

过氧化氢低温等离子体灭菌技术是一种高效的灭菌方法，被广泛应用于医疗器械的消毒和生物实验室的灭菌。

在实际的应用中，如何监测灭菌过程中是否有效杀灭了细菌孢子成为了一项重要任务。

过氧化氢低温等离子体灭菌1小时极速生物指示剂就是一种用于监测该类灭菌技术效果的生物指示剂。

压力灭菌用生物指示剂的使用方法

3M压力灭菌用生物指示剂的使用方法压力灭菌用生物指示剂1262该压力蒸汽灭菌生物培养指示剂用于压力蒸汽灭菌效果的生物监测包括下排气锅和预真空锅;通过培养基颜色变化,反应嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活,从而判断压力蒸汽灭菌生物监测结果;1.将压力蒸汽灭菌生物培养指示剂放于一标准测试包中;2.按照国家规范,分别将测试包放于锅内不同位置;3.灭菌完毕,取出该生物指示剂;4.挤破内含的安瓿,与一支对照管一起放于56℃培养锅内培养;48小时后阅读结果;结果阅读：1.培养后指示管不变色呈紫色,表示灭菌通过;2.培养后指示管变色呈黄色,表示灭菌不通过,必须及时查出灭菌失败原因;3.同时培养的对照管应为阳性呈黄色,如阴性,可能的原因为:培养条件不符合要求;生物指示剂有问题;应及时查出阴性原因;注意事项：1.灭菌完毕,含生物指示剂的包裹很热并有一定压力;需至少冷却10分钟以上,否则可能引起塑料管内的安瓿破裂,飞溅的碎片导致损伤;2.只有对照管为阳性,其生物监测结果才算有效;3.贮存于室温:15-30℃;相对湿度为35-60%;避免靠近灭菌器和化学消毒剂; 1292该生物指示剂可用以121℃下排气和132℃预真空压力蒸汽灭菌锅;3MATTESTTM压力蒸汽灭菌生物培养指示剂快速在与3MATTEST290培养锅共用时,通过酶活性的灭活与否,探测嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活,从而判断压力蒸汽灭菌结果;使用方法:1、在生物指示剂标签上注明灭菌器锅号,负荷数量,灭菌日期;不要在指示剂的瓶或盖上另贴一个标签;将生物指示剂放于一个标准测试包内,并置于最难灭菌的位置;2、将含有生物指示剂的测试包放在灭菌器最难灭菌的位置,通常是灭菌器底层,近门或排气口上面;3、正常装载;4、灭菌循环完毕,取出生物指示剂;5、灭菌结束后,从灭菌器内取出含有生物指示剂的测试包,打开散热5分钟后才能取出生物指示剂;同时在压碎安瓿之前,让生物指示剂在培养锅外再冷却10分钟后才能压碎,然后进行生物培养;6、检查生物指示剂标签上的化学指示剂,颜色由玫瑰色变成棕色证明生物指示剂经过压力蒸汽灭菌过程的处理;该颜色的变化并非表明该处理达到灭菌的目的,如果化学指示剂没有变化,请检查灭菌过程;7、戴上防护眼镜,挤碎安瓿,然后培养生物指示剂;详细步骤请参阅3MATTEST290培养锅操作说明;8、每次培养须同时培养一个未灭菌过的生物指示剂进行阳性对照,阳性对照生物指示剂与经过灭菌处理的生物指示剂为相同生产日期和批号;阳性对照的目的是保证：1正确的培养条件2指示剂的活性不适当的贮存条件可能影响有效期内的指示剂活性33MATTEST290培养锅功能完好9、在3MATTEST290培养锅培养温度62+/-20C内,培养阳性对照和已处理的指示剂3小时,读出最终结果;阳性对照必须得出荧光阳性结果阅读器显示为红灯或+,如阳性对照读出荧光阴性绿灯或-,应检查培养锅温度和操作过程,直至阳性对照为阳性结果,生物监测的结果才是有效的;对于经过灭菌处理的指示剂,荧光阳性红灯或+表明灭菌过程失败,荧光阴性绿灯或-表明灭菌过程合格;10、如果需要通过颜色变化检测生物监测结果,应将生物指示剂放在培养锅内继续培养;同时随时监测阳性结果的出现,如8、12、24,直至168小时7天,最终视觉效果应在168小时7天得出;黄色表明细菌生长,灭菌过程失败;168小时7天没有颜色变化培养基为紫色表明灭菌过程合格;11、对任何为阳性生物监测结果应立即采取行动,如追回同锅次的灭菌物品,和寻找原因;直至生物指示剂的结果呈阴性;注意事项:冷却之前压碎或过度处理生物指示剂可能导致玻璃安瓿的破碎,飞溅的碎屑会使人员受伤;因此建议在从灭菌器内取出生物指示剂时戴防护眼镜和手套,在压碎生物指示剂时也需要戴防护眼镜;禁忌：该生物指示剂不能用于121℃预真空和132℃下排气压力蒸汽灭菌锅,及干热、化学蒸汽、环氧乙烷和其他的低温灭菌过程的生物监测;。

环氧乙烷灭菌生物指示剂测试方法

环氧乙烷灭菌生物指示剂测试方法环氧乙烷灭菌是一种非常常见的灭菌方法，广泛应用于医疗、制药、食品等领域。

然而，为了确保灭菌效果，常常需要使用生物指示剂进行验证。

本文将介绍环氧乙烷灭菌生物指示剂测试方法。

一、环氧乙烷灭菌原理环氧乙烷灭菌是利用环氧乙烷气体杀灭细菌、病毒等微生物的方法。

环氧乙烷具有强烈的化学反应性和渗透性，能够在较低的温度下杀灭微生物。

因此，环氧乙烷灭菌广泛应用于医疗、制药、食品等领域。

二、生物指示剂的作用生物指示剂是一种用于验证灭菌效果的工具。

它们包含一定数量的微生物，例如芽孢，这些微生物在灭菌条件下能够存活或死亡。

通过检测这些微生物的存活情况，可以判断灭菌效果是否良好。

三、生物指示剂测试方法1. 选择适当的生物指示剂生物指示剂应根据灭菌条件选择。

对于环氧乙烷灭菌，常用的生物指示剂是芽孢杆菌，例如Bacillus atrophaeus。

2. 准备生物指示剂将生物指示剂接种于培养基中，培养一段时间后取出，制成生物指示剂片。

生物指示剂片应储存于干燥、阴凉处，避免受潮。

3. 灭菌操作将生物指示剂片与需要灭菌的物品一起放入灭菌器中，按照灭菌器的要求进行灭菌。

灭菌时间和温度应根据灭菌器的要求进行调整。

4. 检测生物指示剂灭菌结束后，取出生物指示剂片，将其接种于富含营养物质的培养基中，培养一段时间后观察生长情况。

如果生物指示剂中的微生物死亡率高于一定比例，说明灭菌效果良好。

否则，需要重新进行灭菌操作。

四、注意事项1. 生物指示剂应选择与灭菌条件相适应的菌株。

2. 生物指示剂应在灭菌前进行验证，确保其质量合格。

3. 在进行灭菌操作时，应根据灭菌器的要求进行调整，确保灭菌效果良好。

4. 在进行生物指示剂测试时，应严格遵守操作规程，避免误操作。

5. 生物指示剂测试结果应记录并储存，以备日后参考。

生物指示剂是一种用于验证灭菌效果的工具，对于环氧乙烷灭菌，常用的生物指示剂是芽孢杆菌。

在进行生物指示剂测试时，需要严格遵守操作规程，并根据结果进行灭菌效果的判断。

无菌医疗器械的常用灭菌方法及验证

引言概述：无菌医疗器械是在医疗领域中广泛应用的一类器械，其安全性和有效性对于患者的健康具有至关重要的影响。

为了确保无菌医疗器械的质量，灭菌是必不可少的步骤。

本文将介绍无菌医疗器械的常用灭菌方法及验证。

正文：一、热湿灭菌方法1. 蒸汽灭菌- 原理：利用高温高压的蒸汽直接对细菌进行热杀灭。

- 程序与时间：常用程序包括预真空，重力排气和慢速排气，时间因器械类型和包装形式而异。

- 验证方法：包括物理监测和化学监测，如温度、压力、湿度、时间和气体浓度的监测。

2. 热气灭菌- 原理：通过热空气对细菌进行热杀灭。

- 程序与时间：常用程序包括预热、灭菌和冷却，时间取决于器械类型和包装形式。

- 验证方法：与蒸汽灭菌类似，需要进行物理和化学监测。

二、干热灭菌方法1. 热空气烘烤灭菌- 原理：通过高温高干热灭菌的方式对细菌进行灭菌。

- 程序与时间：常用程序包括预热、灭菌和冷却，时间取决于器械类型和包装形式。

- 验证方法：同样需要进行物理和化学监测。

2. 红外线灭菌- 原理：利用红外线辐射对细菌进行灭菌。

- 程序与时间：常用程序包括预热、辐射灭菌和冷却，时间取决于器械类型和包装形式。

- 验证方法：同样需要进行物理和化学监测。

三、化学灭菌方法1. 气体灭菌- 原理：利用氧化剂或亚氧化剂对细菌进行灭菌。

- 常用气体：常见的气体包括乙烯氧化物、过氧乙酸和臭氧。

- 验证方法：包括气体浓度监测、亚氧化物残留物分析等。

2. 清洗灭菌- 原理：通过使用特定的清洁剂对细菌进行灭菌。

- 验证方法：包括清洗剂的浓度、清洗时间、冲洗和烘干等参数的监测。

四、辐射灭菌方法1. 紫外线灭菌- 原理：通过紫外线辐射对细菌进行灭菌。

- 验证方法：包括辐射剂量的监测和辐照时间的监测。

2. 电子束灭菌- 原理：利用高能电子束对细菌进行灭菌。

- 验证方法：包括剂量的监测和辐照时间的监测。

五、灭菌验证方法1. 生物指示物监测- 原理：使用具有辐射或热敏感生物指示物对灭菌效果进行验证。

消毒与灭菌效果的评价方法与标准

消毒与灭菌效果的评价方法与标准消毒与灭菌是保障公共卫生和个人健康的重要手段，而评价其效果的方法与标准则是确保消毒与灭菌工作质量的关键。

本文将介绍消毒与灭菌效果的评价方法与标准，以期为相关工作提供参考和指导。

一、微生物浓度检测法。

微生物浓度检测法是一种常用的评价消毒与灭菌效果的方法。

通过取样检测被消毒或灭菌的物品或场所中的微生物浓度，可以客观地评价消毒与灭菌的效果。

通常采用培养基培养法或PCR法进行微生物浓度检测，其中培养基培养法具有操作简便、成本低廉的特点，而PCR法则能够快速准确地检测微生物的DNA，具有高灵敏度和特异性。

二、生物指示剂法。

生物指示剂法是一种直接评价灭菌效果的方法。

通过将含有高浓度孢子的生物指示剂置于被灭菌物品或场所中，再进行灭菌处理，最后检测生物指示剂的存活情况，可以评价灭菌效果。

生物指示剂法具有直接、准确的特点，能够客观地评价灭菌效果，是一种常用的灭菌效果评价方法。

三、化学指标法。

化学指标法是一种通过检测消毒剂残留量评价消毒效果的方法。

通过检测消毒剂在被消毒物品或场所中的残留量，可以客观地评价消毒效果。

常用的消毒剂残留检测方法包括高效液相色谱法、气相色谱法等，这些方法能够准确地检测各种消毒剂的残留量，为评价消毒效果提供了可靠的依据。

消毒与灭菌效果的评价标准主要包括国家标准、行业标准和企业标准。

国家标准是指国家制定的关于消毒与灭菌效果评价的标准，具有普适性和权威性；行业标准是指某个行业制定的关于消毒与灭菌效果评价的标准，具有针对性和实用性；企业标准是指某个企业制定的关于消毒与灭菌效果评价的标准，具有针对性和操作性。

这些评价标准为消毒与灭菌效果的评价提供了具体的指导和要求，有助于保障消毒与灭菌工作的质量。

在实际工作中，需要根据被消毒或灭菌物品的特点和使用要求，选择合适的评价方法和标准，并严格执行，以确保消毒与灭菌效果的可靠性和有效性。

同时，还应定期对消毒与灭菌效果进行评价，及时调整消毒与灭菌措施，确保工作质量和效果。

汽化过氧化氢空间灭菌效果生物指示剂

汽化过氧化氢在空间灭菌中的应用一直备受关注，其灭菌效果对生物指示剂也有着重要的影响。

本文将从以下几个方面展开讨论汽化过氧化氢在空间灭菌中的效果和其对生物指示剂的影响。

一、汽化过氧化氢空间灭菌的原理汽化过氧化氢是通过将过氧化氢（H2O2）蒸发成气体，利用其具有的优秀灭菌性能对空间进行灭菌的一种方法。

过氧化氢本身具有很强的氧化能力，可以破坏微生物的细胞膜和DNA，从而达到杀灭微生物的目的。

在空间灭菌中，将过氧化氢汽化后，其气体能够充分散布在整个空间内，进而对其中的微生物进行灭菌。

二、汽化过氧化氢的灭菌效果1. 高效杀灭微生物汽化过氧化氢在空间灭菌中表现出了较高的灭菌效果。

由于其具有的强氧化能力，能够对各类微生物起到较好的杀灭作用。

实验证明，汽化过氧化氢对细菌、真菌等微生物均有很好的灭菌效果，可以满足各种场合的空间灭菌需要。

2. 快速、彻底与其他灭菌方法相比，汽化过氧化氢的灭菌速度较快，且能够更加彻底地杀死微生物。

由于其为气态，在灭菌过程中可以充分深入到空间的每个角落，对其中的微生物进行全面灭菌。

研究表明，汽化过氧化氢的灭菌速度可以做到迅速、高效。

三、汽化过氧化氢对生物指示剂的影响1. 影响灭菌效果验证生物指示剂作为对灭菌效果的验证工具，在汽化过氧化氢空间灭菌中也具有重要的作用。

汽化过氧化氢对生物指示剂的影响会直接影响到灭菌效果的验证结果。

在进行汽化过氧化氢空间灭菌时，需要考虑生物指示剂的选择和其在该环境中的表现情况。

2. 选择合适的生物指示剂针对汽化过氧化氢空间灭菌，需要选择合适的生物指示剂来进行灭菌效果验证。

有些生物指示剂对过氧化氢的抵抗能力较弱，可能无法有效验证其灭菌效果。

在选择生物指示剂时需要考虑其对汽化过氧化氢的敏感度，并选择适合的生物指示剂进行验证。

3. 确保灭菌效果的准确性汽化过氧化氢对生物指示剂的影响也可能会影响到灭菌效果的准确性。

在进行灭菌效果验证时，需要充分考虑汽化过氧化氢对生物指示剂的影响，并做好相应的控制措施，以确保灭菌效果验证的准确性和可靠性。

压力蒸汽灭菌生物指示剂

压力蒸汽灭菌生物指示剂压力蒸汽灭菌生物指示剂是由嗜热指肪杆菌(ATCC 7953)芽孢菌片、恢复培养基和外管组成。

菌片含菌量为5.0× ,5.0× cfu/片。

生物指示剂的抗力符合国际标准和国家标准的规定:既在121?饱和蒸汽作用下，存活时间?3.9min，杀灭时间?19min，D 10 值1.3,1.9min。

【适用范围】适用于 121?下排气式压力蒸汽灭菌器、132?,134?预真空或脉动真空压力蒸汽灭菌136?台式或卡式压力蒸汽灭菌器灭菌效果的监测和制药工业、医院制剂生产等器、134?,各行业使用的压力蒸汽灭菌器灭菌效果的监测。

【使用方法】，，，1 使用时，将生物指示剂放入标准检测包的中心或待灭菌物品包的中心，置于灭菌器的难消毒的位置按规定的灭菌温度和时间进行灭菌处理。

2 灭菌完毕，即刻将生物指示剂取出，盖朝上垂直握于手中，用专门工具夹碎管内安瓶，让培养液流出浸没菌片，置于56?恒温培养箱内或配套的微型培养器内培养24小时观察初步结果，48小时观察最终结果，按规定每月至少用生物指示剂进行一次灭菌效果监测。

【结果判定】培养后生物指示剂中的溴甲酚紫培养液由紫色澄清液体变为黄色澄清液体即表示有菌生长，判定为灭菌不合格;培养液仍为紫色澄清液体为无菌生长，同时阳性对照管中的嗜热脂肪杆菌生长正常即培养液由紫色澄清液体变为黄色澄清液体，判定为灭菌合格。

【注意事项】1将生物指示剂管从灭菌器内取出或从冰箱内取出后，需在室温下放10min左右，再夹碎安瓿，以免过热或过冷夹碎外管。

2液体培养基的pH值低于7.0或高于7.5，均可使嗜热脂肪杆菌不能生长;3 培养温度须在56?,65?之间，否则可导致嗜热脂肪杆菌生长不良，或不能生长。

4 灭菌处理后，生物指示剂中的液体培养基颜色与压力蒸汽灭菌前比较会变浅，呈显浅紫色，这种变化属正常现象。

5 用恢复培养液在56?培养时间过长(72小时以上)，阳性对照管中培养液的黄色容易消退，培养液逐渐干燥，应注意每天观察，随时记录培养结果。

关于生物指示剂

应通过监控每批灭菌前的微生物污染的数量、耐受性和灭菌程序验证所获得的数据进行评估。

常用的生物指示剂1、湿热灭菌法：湿热灭菌法最常用的生物指示剂为嗜热脂肪芽孢杆菌孢子，如NCTC10007、NCIMB8157、ATCC7953。

D值为1.5—3.0min，每片（或每瓶）活孢子数5*10（5）—5*10（6）个，在121℃、19min下应被完全杀灭。

此外，还可使用生孢梭菌孢子如NCTC8594、NCIMB8053、ATCC7955，D值为0.4—0.8min。

2、干热灭菌法：干热灭菌法最常用的生物指示剂为枯草芽孢杆菌孢子，如NCIMB8058、ATCC9372。

D值大于1.5min，每片活孢子数5*10（5）—5*10（6）个。

去热原验证时使用大肠杆菌内毒素，加量不小于1000细菌内毒素单位。

3、辐射灭菌法：辐射灭菌法最常用的生物指示剂为短小芽孢杆菌孢子，如NCTC10327、NCIM10692、ATCC27142。

每片活孢子数10（5）—*10（6），置于放射剂量25kGy条件下，D值约3kGy。

但应注意灭菌产品中所负载的微生物可能比短小芽孢杆菌孢子显示更强的抗辐射力。

因此短小芽孢杆菌孢子可用于监控灭菌过程，但不能用于灭菌辐射剂量的建立。

4、气体灭菌法;环氧乙烷灭菌最常用的生物指示剂为枯草芽孢杆菌孢子，如NCTC10073、ATCC9372。

气态过氧化氢灭菌最常用的生物指示剂为嗜热脂肪芽孢杆菌孢子，如NCTC10007、NCIM8157、ATCC7953。

每片活孢子数1*10（5）—5*10（6）个。

环氧乙烷灭菌中，枯草芽孢杆菌孢子D值大于2.5min，在环氧乙烷浓度为600mg/l，相对湿度为60%，温度为54℃下灭菌，60min应被杀灭。

5、过滤除茵法：过滤除菌法最常用的生物指示剂为缺陷假单胞菌(如ATCC19146），用于滤膜孔径为0.22um的滤器；黏质沙雷菌（ATCC14756），用于滤膜孔径为0.45um的滤器。

高压灭菌生物化学指示剂

高压灭菌生物化学指示剂
高压灭菌生物化学指示剂通常是由一种特定的微生物培养基制成，这种培养基中含有一种或多种特定的微生物菌种，这些微生物
对高压力和高温非常敏感。

在高压灭菌过程中，将这种指示剂置于
被灭菌物品的不同位置，然后进行灭菌处理。

处理完成后，通过观
察指示剂培养基是否有生长，可以判断高压灭菌是否彻底、有效地
杀灭了微生物。

高压灭菌生物化学指示剂的使用对于确保高压灭菌的有效性至
关重要。

如果指示剂培养基中的微生物在灭菌过程中存活，那么被
灭菌物品很可能也存在微生物残留，从而可能对人体健康造成威胁。

因此，高压灭菌生物化学指示剂的使用可以帮助医疗机构、制药企
业和食品加工厂等单位确保其产品的安全性和质量。

总之，高压灭菌生物化学指示剂在高压灭菌过程中扮演着至关
重要的角色，它的使用可以有效监测和验证灭菌过程的有效性，帮
助确保被灭菌物品的无菌状态，从而保障人们的健康和安全。