循环肿瘤细胞CTC

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ctc循环肿瘤细胞课件

ctc循环肿瘤细胞课件

ctc循环肿瘤细胞课件一、教学内容本节课的教学内容选自人教版小学科学六年级下册第五单元《生物与生活》的第三课时《细胞的生活》。

本节课主要学习细胞的基本结构和功能,重点掌握细胞膜、细胞质、细胞核等结构,以及它们在维持细胞生命活动中的作用。

二、教学目标1. 了解细胞的基本结构,认识细胞膜、细胞质、细胞核等组成部分。

2. 理解细胞各部分结构的功能,掌握细胞膜的作用以及细胞质和细胞核在细胞生命活动中的重要性。

3. 培养学生的观察、思考和动手能力,提高他们对生物学知识的兴趣。

三、教学难点与重点重点:细胞膜、细胞质、细胞核等结构的功能。

难点:细胞膜的作用以及细胞质和细胞核在细胞生命活动中的重要性。

四、教具与学具准备教具:PPT、细胞模型、显微镜等。

学具:笔记本、彩色笔、显微镜等。

五、教学过程1. 实践情景引入:邀请一位同学分享他在生活中观察到的细胞现象,如种子的发芽、伤口的愈合等。

2. 知识讲解:通过PPT展示细胞的基本结构,讲解细胞膜、细胞质、细胞核等组成部分,以及它们在细胞生命活动中的作用。

3. 例题讲解:以洋葱表皮细胞为例,引导学生观察细胞结构,理解细胞膜、细胞质、细胞核等功能。

4. 随堂练习:让学生分组观察不同植物细胞的结构,填写观察记录表,巩固所学知识。

5. 动手实践:让学生用显微镜观察洋葱表皮细胞,并尝试绘制细胞结构图。

六、板书设计板书内容:细胞的基本结构:细胞膜:保护、控制物质进出细胞质:含有细胞器,维持细胞生活活动细胞核:储存遗传信息,控制细胞生长、分裂七、作业设计1. 作业题目:观察身边的植物细胞,描述细胞膜、细胞质、细胞核等结构的特点及功能。

2. 答案:请根据观察结果,描述细胞膜、细胞质、细胞核等结构的特点及功能。

八、课后反思及拓展延伸1. 课后反思:本节课通过实践情景引入、知识讲解、例题讲解、随堂练习、动手实践等环节,让学生掌握了细胞的基本结构和功能。

在教学过程中,要注意关注学生的学习情况,及时解答他们的疑问,提高教学效果。

循环肿瘤细胞CTC检测 PPT

循环肿瘤细胞CTC检测 PPT

阴性富集流程图
全亚型、高效率、非依赖
通用于绝大部分实体肿瘤、非血源性循环稀有细胞的富集
我们的选择
imFISH
imFISH技术将基因水平的FISH技术与蛋白水平的 免疫荧光染色技术相结合,是兼具核遗传信息及细 胞形态改变的精准CTC鉴定分析方法。
技术优势: ➢ 核酸水平稳定性、灵敏度高(80%) ➢ 引入CD45染色,提高特异性(97%) ➢ 细胞计数、核型分析、表型分析、分子分型
便捷性
CTC只需采集少量外周静脉血便可进行检测,对人体基 本无创,取样便捷,适于动态连续性监测。
循环肿瘤细胞CTC临床应用方向
CTC临床重点应用:一、辅助诊断
判断病灶良恶性 无创便捷,发现早期隐匿转移
辅助传统TNM参考分期 提供适时诊断信息,实现精准治疗
辅助诊断
CTC检测应用于辅助诊断
诊断难
异常占位,良性? 恶性? 病灶位置不宜活检怎么办? 有创操作,是否有瘤细胞种植?
诊准难
肿瘤异质性的影响? 临床分期与病理分期不一致?如何针对肿瘤时空信 Nhomakorabea变化提供
即时诊断信息?
辅助诊断
CTC功能:
对尚未完善病理诊断的患者,CTC 可联合影像学、血清学作为辅助判断病灶良恶性的指标。 同时,CTC是对原发灶与转移灶信息的全面反映,可弥补现有传统TNM 分期的不足,提示早 期微转移的存在风险,指导临床调整诊疗策略,制定更加合理的个体化诊疗方案(如进一 步筛查转移、拟定新辅助化疗、辅助化疗方案等。
联合影像学更客观评价疗效 监测耐药发生
疗效评估、耐药性监测
胰腺癌
49.00% (单8)
75.49%
72.39% 70.3% 70.92%
(8+17) (8+17) (1+8) (8+3)

ctc循环肿瘤细胞检测

ctc循环肿瘤细胞检测

CTC循环肿瘤细胞检测循环肿瘤细胞(CTC)是一种罕见的血液中的癌细胞,可以从原发肿瘤脱落,并通过血液循环传播到其他部位。

CTC的检测对于癌症的早期诊断、治疗选择和预后判断具有重要意义。

CTC循环肿瘤细胞检测是一种非侵入性、无创的方法,可以提供关于肿瘤发展和蔓延的有价值的信息。

本文将介绍CTC循环肿瘤细胞检测的原理、方法和应用。

原理CTC循环肿瘤细胞检测的原理基于CTC的特殊性质。

CTC具有一定的生物特性,如细胞形态学特征、表面标记、核酸和蛋白质表达等,使其能够与正常血液细胞区分开来。

通过对CTC进行特异性标记和分离,可以将其从血液中分离出来,并进行进一步的表征和分析。

目前,CTC的检测方法大致可以分为两类:物理方法和生物学方法。

物理方法包括密度梯度离心、滤膜分离和微流控芯片等,通过差异化的物理性质实现CTC的分离。

生物学方法则利用CTC与正常血液细胞之间的生物学区别,如表面标记的差异、特定蛋白和核酸标记等,通过生物学分子靶向的方式进行CTC的富集和分离。

方法CTC循环肿瘤细胞检测的方法多样,具体的选择取决于实验室的设备和研究目的。

下面将介绍几种常见的CTC检测方法:密度梯度离心法密度梯度离心法是最早用于CTC检测的方法之一。

该方法通过利用瘦脂蛋白或葡聚糖等高分子物质在不同浓度下形成的梯度来分离CTC。

通过对梯度离心后,在不同密度层次上找到CTC,并进行进一步的分析和鉴定。

滤膜分离法滤膜分离法基于滤膜的孔径大小来分离不同大小的细胞。

通过选择合适的滤膜孔径,可以将CTC与正常血液细胞分离开来。

然后,通过对滤膜上沉积的细胞进行进一步的标记和分析,即可获得CTC的信息。

微流控芯片法微流控芯片法是一种新兴的CTC检测方法。

该方法利用微流控技术,在芯片上制造出复杂的细流体网络,并通过微米级别的微通道将CTC富集和分离。

微流控芯片法具有高通量、高灵敏度和高特异性的优点,被广泛应用于CTC的检测。

应用CTC循环肿瘤细胞检测在临床和研究领域具有广泛的应用前景。

2023版《循环肿瘤细胞检测在胃肠道肿瘤诊疗中的应用中国专家共识》解读ppt课件

2023版《循环肿瘤细胞检测在胃肠道肿瘤诊疗中的应用中国专家共识》解读ppt课件
特点
CTCs具有稀有性、异质性和动态变化的特点,是一种非侵入性的“液态活检”手 段。
检测原理及技术方法
检测原理
基于物理、生化及免疫学方法对血液中的CTCs进行富集和鉴 定。
技术方法
包括大小、密度、电荷等物理特性差异进行富集的方法(如 滤膜法、微流控芯片技术等)、利用抗体与抗原特异性结合 进行捕获的方法(如免疫磁珠法)以及其他新兴技术(如基 于核酸适配体的方法等)。
2023版《循环肿瘤细胞检测在胃 肠道肿瘤诊疗中的应用 中国专家共识》解读
汇报人:XXX 2023-11-17
目 录
• 引言 • 循环肿瘤细胞检测的基本原理与技术 • 循环肿瘤细胞检测在胃肠道肿瘤诊疗中的应用 • 专家共识详细解读 • 未来展望与研究方向
01 引言
背景介绍
癌症负担
胃肠道肿瘤是我国常见的恶性肿瘤之一,严重威胁着人民的健康和生命安全, 给社会和家庭带来巨大的负担。
VS
早期发现
CTC检测有助于胃肠道肿瘤的早期发现, 从而提高治疗的成功率和患者的生存率。
在胃肠道肿瘤分期中的应用
判断肿瘤侵袭程度
通过CTC检测可以判断胃肠道肿瘤的侵袭程度,有助于准确分期。
指导治疗方案
准确的分期信息有助于医生为患者制定更合适的治疗方案。
在胃肠道肿瘤预后评估中的应用
预测生存时间
CTC检测可用于预测胃肠道肿瘤患者的生存时间,为患者提供更个性化的治疗建议。
探索循环肿瘤细胞检测在其他肿瘤类型中的应用
拓宽应用领域
基于现有研究基础,进一步探索循环肿瘤细胞检测在 其他肿瘤类型(如肺癌、乳腺癌等)中的应用,为更 多肿瘤患者提供个体化诊疗服务。
跨瘤种比较
开展循环肿瘤细胞检测在不同肿瘤类型中的比较研究 ,揭示其在各类肿瘤中的共性与特性,为临床提供更 多维度的参考信息。

关于循环肿瘤细胞(CTC)的一些认识

关于循环肿瘤细胞(CTC)的一些认识

关于循环肿瘤细胞(CTC)的一些认识摘要:通常把进入人体外周血的肿瘤细胞称为循环肿瘤细胞(circulating tumor cell)。

随着人们对循环肿瘤细胞研究的深入,尤其是伴随现代检测技术的广泛应用,CTC逐渐被人们所重视。

循环肿瘤细胞的检测可有效地应用于体外早期诊断,化疗药物的快速评估,个体化治疗包括临川筛药、耐药性的检测,肿瘤复发的监测以及肿瘤新药物的开发等。

检测CTC 有着良好的应用前景,随着这一研究领域的不断发展,必将产生新的诊疗手段,从而使肿瘤的治疗提高到一个崭新的阶段。

关键词:循环肿瘤细胞;CTC;检测方法;临床意义早在1896年,Ashworth曾报道1例因癌症死亡的患者外周血中发现了类似肿瘤的细胞,并首次提出循环肿瘤细胞(circulating tumor cell, CTC)的概念[1]。

随着人们对循环肿瘤细胞研究的深入,尤其是伴随现代检测技术的广泛应用,CTC逐渐被人们所重视。

1、概述CTC指自发或因诊疗操作进入外周血循环的肿瘤细胞。

随着肿瘤细胞的不断增殖,部分细胞可以通过分泌一种抑制黏附因子表达的物质,增加其运动能力并使之与肿瘤母体脱离。

这些脱落的肿瘤细胞再分泌一种蛋白溶解酶,以破坏周边宿主结缔组织并进入脉管系统。

诊疗操作也可使肿瘤细胞扩散进入外周血循环。

2、检测方法2.1免疫细胞化学(immunocytochemistry, ICC)这一检测方法基于抗原抗体结合反应的原理,利用单克隆抗体(McAb)与特异的肿瘤标记物结合,并通过酶与底物反应显色来判断肿瘤细胞的存在。

检测的肿瘤标志物主要分三类:①上皮细胞角蛋白(CK),如CK19;②上皮细胞膜特异性抗原,如黏蛋白类,包括EMA、HMFG、HEA125等;③肿瘤相关糖蛋白(TAG),如TAG12。

1980年,Sloane等首次采用ICC的方法检测乳腺癌患者骨髓中的肿瘤细胞。

该方法可以进行形态学分析,但是检测的细胞量少,敏感性只有10-4~10-5(即在1万~10万个单核细胞中发现一个肿瘤细胞),而且许多分化差的肿瘤不能表达目标抗原,而非上皮细胞中细胞角蛋白和上皮细胞抗原亦可能阳性,故特异性不高。

循环肿瘤细胞CTC检测及临床应用

循环肿瘤细胞CTC检测及临床应用

循环肿瘤细胞C T C检测及临床应用Prepared on 22 November 2020循环肿瘤细胞检测及临床应用中文摘要:循环肿瘤细胞是从原发肿瘤扩散,进入到血液或淋巴系统的肿瘤细胞。

循环肿瘤细胞在血液中含量稀少,一般先将循环肿瘤细胞富集,然后再进行检测,现在已经开发了多种细胞富集和检测技术。

本文主要对CTCs的富集和检测技术研究进展,以及CTCs在临床分析和研究上的应用进行了综述。

关键词:循环肿瘤细胞富集检测临床Abstract:Circulatingtumorcellscomefromtheprimarytumorproliferation,andprolife ration,癌症转移的过程是循环肿瘤细胞(CirculatingTumorCells,CTCs)从原发肿瘤分离,通过循环系统扩散,进入血液或者淋巴系统,在远处形成新的肿瘤,最终导致大多数的癌症病人死亡。

1869年,Ashworth在一例癌症死亡患者的外周血中发现了类似肿瘤的细胞,并首次提出了CTCs的概念。

从此,越来越多的研究表明,CTCs的出现与癌症密切相关。

通过上皮-间质转化(EMT),实体瘤的上皮细胞进行细胞的变化,使他们通过增加流动性和侵袭性脱离组织,进入到血液中,附着,、发展成远端转移。

由于CTCs能够代表原发肿瘤的表型和遗传组成,并能够作为任何转移性肿瘤的”液体活检”,CTCs的富集分离和特征研究,十分具有吸引力。

CTCs的富集和计数技术已经建立,其中CTCs的计数可以成为预测指标,当其大于已知的阈值时,就预示着病人就患有转移性乳腺癌,、前列腺癌,、结直肠癌等。

基于临床试验,美国FDA批准了一种临床检测CTCs的CellSearch技术,用于上述癌症的CTCs的富集和计数。

CellSearch技术成功的证明了CTCs确实表征了疾病的活跃,CTCs数量的增加预示着病情的恶化,可以通过CTCs了解原发性和转移性肿瘤,以CTCs为基础的分析,可以帮助人们实时诊断和预测,对病情做出决定,并取样检测耐药性。

循环肿瘤细胞(CTC)检测

循环肿瘤细胞(CTC)检测

循环肿瘤细胞(CTC)检测一、什么是循环肿瘤细胞(CTC)?循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cell,CTC)是存在于外周血中的各类肿瘤细胞的统称,因自发或诊疗操作从实体瘤病灶(原发灶、转移灶)脱落,进入外周血循环的肿瘤细胞。

CTC非常稀少,每毫升血液中109血细胞只有几个CTC。

大部分CTC在进入外周血后会发生凋亡或被吞噬,少数能够逃逸并发展成为转移灶,增加恶性肿瘤患者的死亡风险。

二、肿瘤的发生及检测诊断全国肿瘤登记中心发布的2015年年报显示,2011年我国新增癌症病例约337万例,比2010年增加28万例——这相当于每分钟有6人被诊断为癌症。

然而,令人担忧的是这样的情势似乎仍未到达峰顶,未来可能还会不断增加。

美国约翰-霍普金斯大学Kinmel 癌症中心的Bert-Vogelstein 等专家在2013年3月份的一篇综述文章中写道:在今年将死于癌症的一百万人里,绝大部分是因为他们的癌症没有在发生、发展的前90%的时间内被发现。

因此,我们需要明确一点:癌症是一种慢性病,它只是被突然发现,并非是突然发生的。

我们需要尽可能早的发现它,从而提高治愈率。

伴随肿瘤的发生过程,肿瘤细胞的大小也随之增大。

传统方法诊断出癌症的时候,大部分已经是晚期。

晚期癌症的治愈率极低,其五年生存率也很低。

在肿瘤的发生过程中,早期到中期之间是最佳治疗期,因此,如果在早期就可以发现肿瘤的存在,必然可以提高治愈率。

临床癌症研究(Clinical Cancer Research)杂志上发表的荟萃分析(Meta-analysis)证实CTC在乳腺癌预测中的价值,结果表明早期和转移性乳腺癌患者的循环肿瘤细胞CTC检测是一个稳定的预测和预后工具。

如果将肿瘤易感性基因检测和循环肿瘤细胞检测完美结合,那么能够将肿瘤的早期发现率提高数倍。

肿瘤易感性检测是对未来可能患有癌症的一种风险预测。

如果风险等级高,除了改变生活方式外,还可以定期做循环肿瘤细胞检测,即CTC检测,而且检查频率可以适当增加,每2-3个月检查一次,从而达到实时监控的目的。

循环肿瘤细胞CTC检测

循环肿瘤细胞CTC检测

光标记
Fish技术
原位杂交RNA分析
CTC-BiopsyⓇ (武汉友之友)
ISET(滤膜) 荧光标记
80%
83%
30%
腺癌:46%
全自动
半自动
7.5mL
4mL
晚期乳腺癌、结直肠癌、晚期肺癌、胰腺癌、乳
前列腺癌
腺癌
75% 30% 半自动 5mL 晚期癌肿
70% 30% 全自动 10mL 晚期癌肿
0%
20%(2/10)
V3,V4)
390*9=3510
CTC
84.1
0.573
67.2
0.823 (0.773-0.874)
NSE CEA CA125 Cyfra21-1 SCC-Ag
95.9 94.9 97.6 90 93.8
0.055 0.25 0.175 0.352 0.15
4.6 18.5 4.6 32.3 12.3
0.585 (0.495-0.675) 0.76 (0.69-0.83)
0.505 (0.417-0.592) 0.716 (0.615-0.816) 0.624 (0.535-0.713)
天津市肿瘤医院 成都大学附属医院 重庆市肿瘤医院 苏州大学第一附属医院 西安交大一附院 陕西省人民医院 西京医院 长安医院等
精准 分子 检测
中心
认证的标准的
基因扩增实验
适应症
早期(I期) 敏感性
中晚期敏感 性
报告时间
可视化
CytoploRare®
(格诺) 免疫磁珠负向富集 靶向配体PCR技术
半自动
早、中和晚期肺癌
89% 6h/12样本
CellSearch®

CTC,ctDNA,循环miRNA相关知识整理

CTC,ctDNA,循环miRNA相关知识整理

循环肿瘤细胞(CTC)CTC(循环肿瘤细胞,Circulating Tumor Cell)是存在于外周血中的各类肿瘤细胞的统称,因自发或诊疗操作从实体肿瘤病灶(原发灶、转移灶)脱落,大部分CTC 在进入外周血后发生凋亡或被吞噬,少数能够逃逸并锚着发展成为转移灶,增加恶性肿瘤患者死亡风险。

通过美国食品药品监督管理局和我国国家食品药品监督管理局批准的唯一的循环肿瘤细胞检测设备—cellSearch系统,通过上皮细胞黏附分子标记磁珠对上皮细胞进行富集,4’,6-二脒基-2-苯基吲哚阳性、CD45阴性、细胞角蛋白和上皮细胞黏附分子阳性的细胞定义为循环肿瘤细胞。

CTC检测通过捕捉检测外周血中存在的CTC,检测CTC类型和数量变化的趋势,以便实时监测肿瘤动态、评估治疗效果,实现实时个体治疗。

恶性肿瘤都会通过血液传播转移到身体的其他器官,而肿瘤转移是导致肿瘤患者死亡的主要原因。

肿瘤细胞侵入到原发肿瘤细胞的周围组织中,进入血液和淋巴管系统,形成循环肿瘤细胞CTC,并转运到远端组织,再渗出,适应新的微环境,最终"播种"、"增殖"、"定植"、形成转移灶。

因此早期发现血液中的CTC,对于患者预后判断、疗效评价和个体化治疗都有着重要的指导作用。

循环肿瘤DNA (ctDNA)人体血液循环系统中,含有不断流动的携带一定特征(包括突变,缺失,插入,重排,拷贝数异常,甲基化等)的循环DNA,来自肿瘤基因组的DNA称为循环肿瘤DNA,其来源于四个部分:1、坏死的肿瘤细胞;2、凋亡的肿瘤细胞;3、循环肿瘤细胞;4、肿瘤细胞分泌的外排体。

ctDNA在恶性肿瘤患者外周血中的含量明显高于健康人,ctDNA所占比例与癌组织的大小和状态有关,可以反映出癌组织DNA 的特征,在肿瘤生长早期,患者临床表现不明显且影像学发现较困难,ctDNA被认为可以用于检测肿瘤早期诊断,进展过程,预后判断及个性化用药指导。

循环肿瘤细胞 C T C检测ppt课件

循环肿瘤细胞 C T C检测ppt课件
V4) 390*9=3510
THANKS
SUCCESS
THANK YOU
2019/5/28
流式正向富集技术荧 免疫磁珠负向富集、
ISET(滤膜)
光标记
Fish技术
原位杂交RNA分析
CTC-BiopsyⓇ (武汉友之友)
ISET(滤膜) 荧光标记
80%
83%
30%
腺癌:46%
全自动
半自动
7.5mL
4mL
晚期乳腺癌、结直肠癌、晚期肺癌、胰腺癌、乳
前列腺癌
腺癌
75% 30% 半自动 5mL 晚期癌肿
循环肿瘤细胞指从实体瘤中脱离 出来并进入外周血液循环的肿瘤细 胞。
原发肿瘤血管生成 侵润
上皮-间质转化 (EMT)
侵润
转移
侵入血管内
循环肿瘤细胞 (CTC)
循环肿瘤 微栓 (CTM)
凋亡的CTC
肿瘤细胞 扩增 血管生成
间质-上皮转化 (MET)
侵入血管外 (CTC)
转移到骨髓 和其他器官
血管内增殖 (CTM)
0.585 (0.495-0.675) 0.76 (0.69-0.83)
0.505 (0.417-0.592) 0.716 (0.615-0.816) 0.624 (0.535-0.713)
天津市肿瘤医院 成都大学附属医院 重庆市肿瘤医院 苏州大学第一附属医院 西安交大一附院 陕西省人民医院 西京医院 长安医院等
转移
播散肿瘤细胞 (DTC)微转移休 眠灶
CTCS
取样简单、创伤小
基因检测准确性高 可评估肿瘤的侵袭 性
放 化 疗 患 者
手 术 患 者

循环肿瘤细胞检测技术在肝癌诊断和预后判断的应用

循环肿瘤细胞检测技术在肝癌诊断和预后判断的应用

中国是肝病高发区,肝癌的发望在未来为广大患者带来便利。

明确的方法有肝脏动脉造影或肝脏病率很高。

早期发现肝癌至关重穿刺活检。

这些有创检查不利于接2.CTC检测在肝癌中的应用要。

随着液体活检技术的日臻成受治疗后的预后评估和监测,而肝癌起病隐匿,很多肝癌患者熟,尤其是循环肿瘤细胞检测在肿CTC检测实时、高效、可重复性发现已是晚期,失去了外科手术切瘤诊断、预后及疗效评估领域的突高。

所以对于肝癌诊断和预后评估除肿瘤灶的机会,而只能采取治飞猛进。

监测CTC不失为一种很有前景的疗、局部栓塞等其它治疗方法,导检测形式。

1.何谓循环肿瘤细胞致整体预后差。

临床工作中为了早 3.存在的问题循环肿瘤细胞(CTC)检测是指发现、早诊断、早治疗,以便为患从肿瘤原发灶或者转移性病灶脱落者提供最优的个体化方案需要定期CTC未来普及可能性很大,进入外周血液里肿瘤细胞的一种液复查,尤其是那些已经发展成为肝但也存在一些问题。

其一,目前国体活检技术,国际上Cell Search系硬化或有肝癌家族史的高危患者。

内CTC检测现成仪器尚未批量生统利用上皮细胞黏附分子的免疫磁目前应用最为广泛的肝癌筛查有甲产和推广,对于真实世界该技术检性富集技术成熟,已经实现胎蛋白(AFP)和腹部B超,但是临测效度有待进一步验证。

其二,CTC半自动化检测,具有较高的床工作中,上述肝癌筛查目前仍存CTC检测对于靶向治疗作用位点可重复性和准确性。

国内由中山医在缺陷,腹部B超针对极早期的肝及耐药监测作用可能不足,需待进院樊嘉院士、周俭教授团队自主研脏占位难以明确诊断,AFP阴性的一步优化。

其三,囿于肝癌分子生发了多种CTC分选检测技术,同肝癌也屡见不鲜,从而为肝癌早期物学水平机制未能完全明确,故是时也取得了CTC“全自动循环肿诊断带来了障碍。

其次对于难以确否存在比CTC更优的液体活检有瘤细胞分选检测系”相关专利,有诊的肝脏占位性病变,现在进一步待进一步挖掘。

循环肿瘤细胞检测技术在肝癌诊断和预后判断的应用贺凡(重庆医科大学附属第二医院感染科)37。

循环肿瘤细胞检测原理及其应用

循环肿瘤细胞检测原理及其应用

02
CellSearch检测结果
CTCs: DAPI + CK- PE+ CD45- APC-
02
CellSearch CTC 检测结果 Cutoff 值
Unfavorable
≥5 CTCs/7.5ml
Favorable
0-4 CTCs/7.5ml
优点: 血液中捕获肿瘤细胞的效率达到70%; 无标记,细胞保存良好活性 不足之处: 细胞的介电性能会逐渐变化,必须在较短的时间内完成; 承载介质的电导率必须适当的控制在一个较低的范围
02
基于分子生物学特性的分离捕获方法
免疫磁珠分离:最常见且有效地检测捕获脱落肿瘤细胞的方法 阳性富集—捕获肿瘤细胞 负性筛选—去除非肿瘤细胞(如白细胞、红细胞)
基线 CTC 检测结果大于等于5个细胞病人预后不好,总生存期和无进展生存期较短 基线 CTC 检测结果小于5个细胞的病人预后良好,总生存期和无进展生存期较长 此 Cutoff 值基于临床研究实验得出,并已被 FDA 和 CFDA 批准用于临床实践
临床应用 转移性癌症的监护 无进展生存期 总生存期 未来: 疾病管理
肿瘤细胞
白细胞
抗 EpCAM 磁珠
EpCAM 抗原
CD45 抗原
CK 抗原
抗 CD45-APC 染料
抗 CK-PE 染料
荧光染料
EpCAM – 上皮细胞粘附分子 APC – 异藻蓝蛋白荧光染料 CK – 细胞角蛋白 PE – 藻红蛋白荧光染料 DAPI – 4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DNA荧光染料)
种子和土壤学说
循环肿瘤细胞的存在正是实体恶性肿瘤远处转移的根源
02
循环肿瘤细胞CTC
癌细胞从原位脱离 侵犯血液循环,在循环中存活 渗出进入远端器官 在继发部位增殖

循环肿瘤细胞CTC检测-医学课件-新版.ppt

循环肿瘤细胞CTC检测-医学课件-新版.ppt

流式正向富集技术荧 免疫磁珠负向富集、
ISET(滤膜)
光标记
Fish技术
原位杂交RNA分析
CTC-BiopsyⓇ (武汉友之友)
ISET(滤膜) 荧光标记
80%
83%
30%
腺癌:46%
全自动
半自动
7.5mL
4mL
晚期乳腺癌、结直肠癌、晚期肺癌、胰腺癌、乳
前列腺癌
腺癌
75% 30% 半自动 5mL 晚期癌肿
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精准 分子 检测
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术人员上岗证
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原发肿瘤血管生成 侵润
上皮-间质转化 (EMT)
侵润
转移
侵入血管内
循环肿瘤细胞 (CTC)
循环肿瘤 微栓 (CTM)
凋亡的CTC
肿瘤细胞 扩增 血管生成
间质-上皮转化 (MET)
侵入血管外 (CTC)
转移到骨髓 和其他器官
检测方法
特异度(%)
约登指数 I期NSCLC灵敏度(%)
AUC(95%CI)
CTC
84.1
0.573
67.2
0.823 (0.773-0.874)

2024版ctc循环肿瘤细胞ppt课件

2024版ctc循环肿瘤细胞ppt课件

2024/1/27
9
CTC与肿瘤转移的关系
CTC与肿瘤转移潜能
CTC数量与肿瘤患者的预后密切相关,高数量的CTC往往预示着更高的转移潜能和 更差的预后。
CTC在肿瘤转移中的作用
CTC可作为肿瘤转移的“种子”,在适宜的微环境下重新生长形成转移灶。同时, CTC还可通过分泌生长因子、促血管生成因子等促进肿瘤转移。
流式细胞术
将血液样本通过高速流动的细胞悬液,利用光学、电学等原理对细胞进行快速检测和分类。 该方法可实现对CTC的定量分析和多参数检测,但操作复杂且成本较高。
2024/1/27
微流控芯片技术
利用微流控芯片模拟人体微环境,实现CTC的高效捕获和检测。该技术具有高通量、高灵敏 度和低成本的优点,是未来CTC检测的重要发展方向。
对未来CTC研究的展望与建议
01
02
03
04
深入研究CTC的生物学特性及 其与肿瘤转移的关系,为肿瘤
治疗提供新靶点。
开发高效、灵敏的CTC检测技 术,提高检测准确性和可重复
性。
开展大规模、多中心的临床研 究,验证CTC检测在肿瘤诊疗
中的价值。
加强跨学科合作,推动CTC研 究在临床转化和应用方面的发
19
CTC检测技术的改进与创新
提高检测灵敏度
通过改进现有技术或开发 新技术,提高CTC检测的 灵敏度,降低假阴性率。
2024/1/27
提高检测特异性
针对CTC的特异性标志物 进行深入研究,开发高特 异性的检测方法,减少假 阳性结果。
实现无创检测
探索基于血液或其他体液 的无创检测技术,减轻患 者痛苦,提高检测便利性。
4
CTC在肿瘤研究中的重要性
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概述
生物标记物(Biomarker)是近年来随着免疫学、分子生物 学和基因组学技术的发展而提出的一类与细胞生长、增殖、 疾病发生等有关的标志物。生物标志物能反映正常生理过程 或病理过程或对治疗干预的药物反应,在早期诊断、疾病预 防、药物靶点确定、药物反应以及其他方面发挥作用。寻找 和发现有价值的生物标记物已经成为目前肿瘤领域研究的一 个重要热点。
科学问题: 耐药的分子模式尚未明确 研究方法: ARMS检测技术结合ddPCR技术
研究目的: 非小细胞肺癌EGFR突变阳性患者经TKI治疗失 败后,观察: 血浆游离肿瘤DNA中T790M突变频率及丰度 不同进展模式下突变频率及丰度的差异
ctDNA检测
研究方案
筛选入组
• 男性或女性患者 (>18岁)
假阳性 1%; 假阴 性56.9% 97.3%
88%
与预后的相关性
外周血EGFR突变 预示对TKI良好的 ORR与PFS 外周血EGFR突变 与不良的预后有关
外周血EGFR突变 患者与ORR/PFS显 著相关 TKI治疗进展时 44%伴有耐药突变
血浆EGFR突变是 生存结果的有力预 测因素
ctDNA检测 外周血检测EGFR突变与TKI治疗疗效
靶人群
靶向目的 基因药物
延长有效率 延长生存 改善生活质量
临床获益
概述
基于临床分期的经典NSCLC治疗方案
Ⅰ期(IA - IB):
手术,IA不需要辅 助化疗,IB有高期:
手术+手术后辅助 化疗
III期:
手术、放疗及化疗 相结合的多学科综
合治疗
IV期:
药物治疗为主,如 有EGFR突变或ALK (+)患者,优先
但灵敏度从43-100%不一 尚有提升的空间
对现有方法的进一步优化, 探索高灵敏度 的检测方法, 以提高血液检测的灵敏度
积累前瞻性的临床研究数据,以进一步推 动血液检测在临床的应用
实现动态实时血液活检, 更好预测疗效或 耐药是方向
二、CD-DST技术(胶滴肿瘤药敏检测技术)
传统化疗的困境与挑战 经验性多药联合方案,方案的合理、有效性无法预见。 同病不同治、同人不同治如何判定? 在取得疗效的同时,如何避免或减轻副作用? 成本和疗益相关性不好,加重国家和个人经济负担。
血液样 本 血浆 血清
血清 血浆 血浆
检测方 法 DHPLC
PCR
DxS ARMS EGFR array Cobas
外周血 突变率 34.3% 59.1%
23.7% 90.2% 33.6%
肿瘤组 织突变 率 33.5%
100%
61.5%
86.5%
43.7%
突变阳性 检出一致 性 79.7%
59.1%
ctDNA检测
组织与血液配对标本EGFR突变的研究回顾
研究项目 情况
Bai etal
Rosell SLCG 研 究 2009 NEJM IPASS 2012 JTO
Yam 2012 JTO
FASTACT 2015 CCR
样本量
230
164
194(91 例有肿瘤 组织) 51(37例 有肿瘤组 织) 238配对 样本
• 组织或细胞学确诊 NSCLC
• TKI治疗前为IIIB-IV期 • TKI治疗有效后出现
PD(符合Jackman耐 药标准)
N=300
入组后处理
取外周血5ml X 4管
T790M突变检测
ARMS法检测 ddPCR法检测
• 收集患者临床病理资 料
• 记录肿瘤不同进展模 式 – 无症状疾病进展 – 有症状疾病进展 a) 胸内局部进展 b) 颅内进展 c) 其它进展
外周血(DHPLC)检测与 组织检测EGFR突变及其与 TKI靶向药物治疗的疗效
Bai , et al. J.Clin.Oncol:2009
外周血(ARMS)检测与组 织检测EGFR突变及其与TKI 靶向药物治疗的疗效
Mok T, et al. 2013 Lancet Oncology
Overall Survival
考虑靶向治疗
概述 驱动基因分型成就NSCLC个体化精准治疗
肺癌分期从组织分型到分子分型 的变革,以EGFR突变为代表的TKI 治疗是靶向治疗前驱与典范 易瑞沙对EGFR突变患者受益率达 71.2%,效果明显优于化疗,对无 突变患者受益率仅为1.1%
Li TH et al. J Clin Oncol 2013 31 1039-1049
结果分析
数据分析
➢ 主要指标:观察TKI治疗失败后患者血浆游离肿瘤DNA中T790M突变频率及丰 度,并比较不同进展模式下突变频率及丰度的差异
➢ 次要指标:评估T790M突变频率及丰度与患者临床病理特征的相关性
ctDNA检测
ctDNA检测
小 结 (1)
现有方法血液检测特异性90%以上 假阳性率低
一、ctDNA检测技术 作为金标准的组织靶基因检测亦存在局限性
ctDNA检测 外周血中游离肿瘤DNA的来源
➢患 者 血 浆中的游离 DNA 大约 是正常人的10倍 ➢ctDNA (Circulating Tumor DNA )主要由凋亡和坏死的肿瘤 细胞产生,以及肿瘤细胞分泌的 外排物,其遗传学特性与肿瘤基 因组DNA相似
• 针对VEGFR-2的有雷 莫芦单抗
(ramucirumab);针对 Her-2通路的有赫赛汀。
胃癌的靶 向治疗
肠癌的靶 向治疗
• 针对EGFR通路的有 西妥西单抗;针对
VEGF的有贝伐单抗。
概述 靶基因检测是实现精准个体化治疗的关键
敏感高效的 驱动基因检测
靶向治疗:有明确的靶向目的基 因的药物、靶人群及有效的检测 方法。而准确的检测是实现精准 治疗的基础与关键
概述
基于分子标志物的肿瘤靶向治疗
• EGFR突变患者给予 EGFR TKI治疗;ALK (+)、ROS1(+) 患者,给予克唑替尼 治疗。针对微环境的 有抗血管生存治疗, 贝划单抗联合化疗一 线用于晚期肺腺癌患 者。
非小细胞 肺癌的靶 向治疗
乳腺癌的 靶向治疗
• 针对Her-2通路的有赫 赛汀;针对HER2和 HER1通路的有拉帕替 尼。
ctDNA检测 ARMS技术:血液ctDNA基因检测
ctDNA检测
非小细胞肺癌EGFR突变阳性患者经TKI治 疗失败后血浆游离肿瘤DNA中T790M突
变频率及丰度的前瞻性观察研究
多中心研究 PI: 马胜林教授 研究发起方:杭州市第一人民医院集团
ctDNA检测
TKI治疗失败的不同临床模式下的耐药分子模型
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