非洲爪蟾蝌蚪脑神经元原代培养方法的优化

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高中教材非洲爪蟾核移植实验

高中教材非洲爪蟾核移植实验
非洲爪蟾核移植实验是一个经典的生物学实验，主要涉及细胞核移植技术以及细胞全能性的研究。

以下是关于高中教材中非洲爪蟾核移植实验的简要介绍：
实验材料：
非洲爪蟾的早期胚胎细胞
去核的卵细胞
实验步骤：
准备实验材料：获取非洲爪蟾的早期胚胎细胞和去核的卵细胞。

细胞核移植：将早期胚胎细胞的细胞核注入到去核的卵细胞中。

培养与观察：将移植后的细胞在适宜的环境下培养，观察其发育情况。

实验结果：
部分移植后的细胞能够正常发育，成为成体的非洲爪蟾。

实验结论：
该实验证明了细胞核具有全能性，即一个细胞核内包含了发育成
一个完整个体的全部遗传信息。

通过核移植技术，可以实现在去核的卵细胞中重新编程细胞核，从而发育成一个新的个体。

实验意义：
非洲爪蟾核移植实验对于理解细胞核与细胞质之间的关系、细胞全能性的本质以及核移植技术的发展等方面都具有重要意义。

同时，该实验也展示了生物技术的巨大潜力和应用前景。

全氟辛磺酸对于爪蟾甲状腺激素的干扰效应

全氟辛磺酸对于爪蟾甲状腺激素的干扰效应刘俊奇;刘青坡;曹庆珍;钱丽娟;郭素珍;施华宏【期刊名称】《华东师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2010(000)004【摘要】运用两栖类变态实验(AMA)研究了全氟辛磺酸(PFOS)对于非洲爪蟾(Xenopus laevis)蝌蚪的生长、变态和甲状腺组织结构的影响.结果显示,与对照组相比,7 d后,10,50和250 μg·L-1 PFOS暴露组蝌蚪的后肢长分别减小了17%,11%和18%,蝌蚪的发育延缓了1～2个阶段;19 d后,10,50和250 μg·L -1 PFOS组蝌蚪的体重分别增加了17%,10%和20%,体长分别增加了5%,4%和6%,而10 μg·L -1和250 μg·L -1 PFOS组蝌蚪的后肢长分别减小了12%和13%;暴露组甲状腺组织结构出现滤泡数目减少、上皮细胞增生、胶质减少甚至滤泡溶通等现象.结论是,在本实验浓度下,PFOS对于非洲爪蟾的蝌蚪生长有促进作用,对于变态发育过程却有抑制作用.参照AMA的方法,可以判断PFOS为抗甲状腺激素干扰物.【总页数】7页(P118-124)【作者】刘俊奇;刘青坡;曹庆珍;钱丽娟;郭素珍;施华宏【作者单位】华东师范大学,环境科学系,上海市城市化过程与生态恢复重点实验室,上海,200062;华东师范大学,环境科学系,上海市城市化过程与生态恢复重点实验室,上海,200062;华东师范大学,环境科学系,上海市城市化过程与生态恢复重点实验室,上海,200062;华东师范大学,环境科学系,上海市城市化过程与生态恢复重点实验室,上海,200062;华东师范大学,环境科学系,上海市城市化过程与生态恢复重点实验室,上海,200062;华东师范大学,环境科学系,上海市城市化过程与生态恢复重点实验室,上海,200062【正文语种】中文【中图分类】Q948【相关文献】1.全氟辛基磺酸及其替代产品的内分泌干扰效应评价 [J], 杨蓉;李娜;马梅;王子健2.全氟辛烷磺酸盐(PFOS)、全氟己烷磺酸盐(PFHS)和全氟丁烷磺酸盐(PFBS)对非洲爪蟾胚胎的发育毒性 [J], 韦荣国;苏红巧;秦占芬3.全氟辛磺酸(PFOS)对非洲爪蟾(Xenopus laevis)生长发育、甲状腺和性腺组织学的影响 [J], 刘青坡;钱丽娟;郭素珍;施华宏4.氟表面活性剂和氟聚合物（Ⅸ）--全氟磺酸树脂和全氟磺酸离子交换膜 [J], 窦增培;白富栋;邢航;肖进新5.运用爪蟾变态实验检测镉的甲状腺激素干扰效应 [J], 钱丽娟;郭素珍;曹庆珍;刘俊奇;施华宏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

胚鼠大脑皮层神经元培养方法的改进

胚鼠大脑皮层神经元培养方法的改进
李红;陈晓蓉;赵正梅;思盼盼;张金秋;汤俊峰
【期刊名称】《四川解剖学杂志》
【年(卷),期】2009(017)002
【摘要】目的建立一种简单、高效的胚鼠大脑皮层神经元原代培养的方法 .方法17 d胎鼠大脑皮质,直接机械切碎后经200目滤网研磨过滤,得到细胞悬液进行培养.结果神经元生长良好,相邻细胞的突起交错形成网络,鉴定神经元纯度为(94.7±5.6)%.结论本方法简单可行,可以获得高纯度的胚鼠大脑皮层神经元.【总页数】2页(P8-9)
【作者】李红;陈晓蓉;赵正梅;思盼盼;张金秋;汤俊峰
【作者单位】安徽医科大学组织胚胎学教研室,合肥,230032;安徽医科大学组织胚胎学教研室,合肥,230032;安徽医科大学组织胚胎学教研室,合肥,230032;安徽医科大学组织胚胎学教研室,合肥,230032;安徽医科大学组织胚胎学教研室,合
肥,230032;安徽医科大学组织胚胎学教研室,合肥,230032
【正文语种】中文
【中图分类】R813.11
【相关文献】
1.鼠胚脑皮质及海马神经元原代培养方法的改进 [J], 孙海梅;季凤清;赵天德;岳旭;郭崇洁
2.苯丙氨酸对胚鼠大脑皮层神经元Rho GTPases基因表达的影响 [J], 张拥军;张
惠文;顾学范
3.鼠胚脊髓运动神经元原代培养方法的改进 [J], 鄂玲玲;周长满;徐忠涛;王常利;文天秀;苏剑斌
4.胚鼠大脑皮质神经元的最佳分离和培养方法的探讨 [J], 李胜富;毛萌;周晖;李幼平;孙明菡
5.新生大鼠大脑皮层和海马神经元体外培养方法及改进 [J], 付丽娟;苗巍;常彦忠;张宏丽
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原代神经元培养培训课件

精品文档神经细胞原代培养的胚胎或新生动物的脑组织取下某一局部区域，分离细胞，培养在从动物（大鼠或小鼠等）培养容器后不再移植，常称为原代神经细胞培养。

一、培养前准备1. 器械和器皿器械：外科剪、镊子、虹膜剪等、小剪刀、细镊子和虹膜小刀等℃烘干，各种金属器械如解剖器械，使用后及时刷洗干净，60用酒精棉球擦拭后晾干，或经以防生锈。

由于湿热消毒对手术器械容易可用70－小时以上消毒。

80％酒精浸泡1 器皿：1) 2) 3)玻璃瓶及相应的胶塞或胶木螺旋盖，用于分装血清、多聚赖氨酸、解剖液、各种盐溶液和培养液等。

5)培养瓶、盖玻片次，盐酸浸泡可用0.2N10分钟，用蒸馏水洗2培养用的盖玻片必须不含铅、不发霉，分钟，10分钟，再用双蒸水洗2次，每次1010每次分钟，然后移入丙酮或乙醇浸泡烘干待消毒。

凡组织学用过的旧盖玻片一般不用。

6)7)移液管、吸管、烧杯、离心管和培养皿。

8)。

孔）、、、塑料培养板（35mm9)塑料培养皿（）62496精品文档．精品文档辅助工具：放置试管、吸管和玻璃瓶等的架子。

2. 培养基和培养用液的配制多7-1400001) 培养基质：有多聚赖氨酸、牛皮胶原和鼠尾胶原。

本室目前常用分子量为0.1mg/ml，浓度为。

聚赖氨酸（Poly-L-lysineNaCl主要以无机盐和葡萄糖配制而成。

各种平衡盐溶液主要的不同点在于2) 平衡盐溶液：的浓度、离子浓度及缓冲系统的不同，可根据实际需要选用适当的平衡盐溶液。

培养液：目前已有现成的干粉出售，按说明书进行配制即可。

神经细胞培养需高糖，培3)无血清培养液。

养液应含有或加葡萄糖至6g/L。

目前培养海马神经元可选用B27℃564) 血清：有胎牛血清、小牛血清和马血清等。

分装成小瓶，4℃保存备用（分装前需。

灭活30分钟）胰蛋白酶溶液：用于分离细胞。

先用少量灭菌三蒸水将胰蛋白酶粉末溶成糊状，然后补5) 冻℃过夜，待完全溶解后用滤器过滤灭菌，并分装成1-2ml水至2.5%浓度，振荡摇匀，4。

7种农药助剂对非洲爪蟾蝌蚪的室内急性毒性研究

7种农药助剂对非洲爪蟾蝌蚪的室内急性毒性研究陈红英;张燕;韩先国;刘潇;袁善奎;姜辉;郝身伟;瞿唯钢【期刊名称】《农药科学与管理》【年(卷),期】2015(0)4【摘要】本文测定了7种常见农药助剂和7种水稻田常用农药原药对非洲爪蟾(Xenopus laevis)蝌蚪的急性毒性,并根据其毒性范围进行分级,评价了其对环境的安全性.结果表明:有3种助剂的LC50在1.0～10mg/L之间,对非洲瓜蟾蝌蚪的毒性较大,属中等毒级;4种助剂的LC50＞10mg/L,对非洲爪蟾的毒性较小,属低毒级;不同助剂对非洲爪蟾蝌蚪的急性中毒症状相似,主要症状表现为身体发白,尾部弯曲,沉于缸底,游动缓慢等;7种农药原药对非洲爪蟾蝌蚪LC50＞ 100mg/L,均属低毒级,并未表现出明显中毒症状.上述结果说明农药助剂对非洲爪蟾蝌蚪的毒性＞7种供试的水稻田使用农药品种.【总页数】3页(P28-30)【作者】陈红英;张燕;韩先国;刘潇;袁善奎;姜辉;郝身伟;瞿唯钢【作者单位】农业部农药检定所,北京100026;农业部农药检定所,北京100026;农业部农药检定所,北京100026;山东农业大学农药环境毒理研究中心,山东泰安271018;农业部农药检定所,北京100026;农业部农药检定所,北京100026;农业部农药检定所,北京100026;农业部农药检定所,北京100026【正文语种】中文【中图分类】S481+.1;S482【相关文献】1.黑斑蛙与非洲爪蟾蝌蚪急性毒性试验方法敏感性的比较 [J], 苏红巧;张银凤;秦占芬;李建中2.非洲爪蟾蝌蚪脑神经细胞体外培养方法的建立 [J], 颜世帅;徐海明;李岩;秦占芬3.重金属镉离子对斑腿泛树蛙蝌蚪的急性毒性研究 [J], 任珂;陈钰婷;罗连;冯霞;李远航;林石狮4.农药助剂和实验室常用有机溶剂对大型溞的室内急性毒性研究 [J], 宋伟华;刘茜;张燕;姜辉;林荣华5.重金属Cu2+对棘腹蛙蝌蚪的急性毒性研究 [J], 张小琴;覃仙凤因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

Sox1基因在爪蟾早期发育中的时空表达图式

Sox1基因在爪蟾早期发育中的时空表达图式马莉;赵树华;孔清华;毛炳宇【期刊名称】《动物学研究》【年(卷),期】2007(028)004【摘要】克隆了非洲爪蟾的Sox1基因并研究了它在非洲爪蟾早期发育过程中的时空表达图式,比较了Sox1-3基因在发育的脑和眼中的表达图式.序列比对分析显示Sox1-3蛋白在其HMG框结构域具有高度的保守性.通过RT-PCR方法分析了Sox1基因在爪蟾早期不同发育时段的表达情况,结果显示Sox1基因从未受精卵到尾芽期均有表达,但表达强度有所差异.原位杂交结果显示,在早期卵裂阶段和囊胚期,Sox1基因主要在动物极表达;从神经板期开始,Sox1基因主要在中枢神经系统和眼原基中表达.在蝌蚪期,Sox1与Sox2、Sox3在脑部和眼睛的表达区域有所不同.对于爪蟾Sox1基因时空表达图式的研究将有助于阐明SoxB1基因家族在脊椎动物神经系统发生过程中的作用.【总页数】6页(P403-408)【作者】马莉;赵树华;孔清华;毛炳宇【作者单位】中国科学院昆明动物研究所发育生物学马普青年科学家小组,云南,昆明,650223;中国科学院研究生院,北京,100049;中国科学院昆明动物研究所发育生物学马普青年科学家小组,云南,昆明,650223;中国科学院研究生院,北京,100049;中国科学院昆明动物研究所发育生物学马普青年科学家小组,云南,昆明,650223;中国科学院研究生院,北京,100049;中国科学院昆明动物研究所发育生物学马普青年科学家小组,云南,昆明,650223【正文语种】中文【中图分类】Q344;Q593.4;Q786【相关文献】1.卵泡抑素在爪蟾胚胎发育过程中的时空表达模式及在早期心形成过程中的作用[J], 赵勇;周影;付晶京;秦书剑;张东生2.Rap1基因在斑马鱼胚胎早期发育过程中的时空表达谱研究 [J], 杨小燕;何志旭;舒莉萍;金皎;黄璟;吴莎莎;马健娟3.热带爪蟾Dmrt3基因的克隆及在早期胚胎发育中的表达 [J], 陆怡;李政;朱晓龙;章骥;黄晓4.银鲫pou2基因在胚胎发育过程中的时空表达图式 [J], 尹隽;周莉;刘军;杜新征;桂建芳5.trp14基因在文昌鱼早期发育阶段的时空表达及免疫活性初步研究 [J], 蒋圣娟因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

非洲爪蟾相关问题及解答

非洲爪蟾相关问题及解答一、非洲爪蟾（Xenopus laevis）作为模式生物的优势与缺陷从20世纪50年代以来，非洲爪蟾已经成为胚胎学、发育生物学、细胞生物学、功能基因组学等研究的重要模式生物（Caroline W Beck, Slack J M. An amphibian with ambition: A new role for Xenopus in the 21st century. Genome Biology, 2001, 2: 1029-1029）。

爪蟾作为模式生物，适合建立多种人类疾病模型进行疾病发病机制和治疗等相关研究"还可以结合生物信息学分析进行高通量药物筛选及药物开发等研究"另外在发育生物学和基因功能研究方面也发挥重要作用（来松涛，于全，邓洪新等. 模式生物—爪蟾在生物医学上的应用[J]. 自然科学进展. 第16第9期2006年9月. ）爪蟾成为重要的模式生物主要有如下优点：（1）爪蟾是脊椎动物，比果蝇、线虫等更适合于作为人类疾病的模式生物开展研究；（2）产卵量很大，体外受精，胚胎体外分化很快，整个器官发育过程都可以体外观察；（3）卵较大，适合显微操作和胚层分割移植；（4）利用Morhpolino oligonucleotide（MO）微注射技术可以特异性抑制特定基因的表达；（5）养殖本低，通过注射人绒毛膜促性腺激素（hCG）可以一年四季产卵，适合于大量繁殖；（6）许多重要基因与人类之间有同源性，如骨形成蛋白（BMP）这为人类基因功能研究奠定了坚实的基础（Brown D D. A tribute to the Xenopus laevis oocyte and egg. The Journal of Biological Chemistry, 2004, 279(44): 45291-45299）。

非洲爪蟾作为模式生物存在的缺陷：难以进行遗传学研究，主要由于其生命周期过长，从受精发育至成熟具有升值能力的成蛙需要一年时间。

一种简单的原代神经元培养及转染方法

一种简单的原代神经元培养及转染方法甘娜;尹飞;彭镜;吴丽文;何芳;陈晨【期刊名称】《广西医学》【年(卷),期】2015(037)003【摘要】目的建立一种简单、高效、稳定的原代神经元培养及转染方法. 方法无菌条件下分离生后2 d内SD大鼠海马,经消化、反复沉淀后获得海马组织细胞悬液,利用差速贴壁法对神经元进行纯化,采用神经元专用无血清培基进行培养,并于倒置显微镜下观察神经元形态的变化, 采用微管相关蛋白( MAP2 )抗体对细胞进行鉴定;利用慢病毒转染神经元,观察神经元转染效率. 结果体外培养的原代神经元,在培养第10~15天可以形成密集的神经元网络,细胞健壮,神经元特征明显;经MAP2鉴定,神经元纯度达95%以上;利用慢病毒转染神经元,转染效率达95%以上. 结论采用该方法进行原代神经元培养,能够获得高纯度的原代神经元;慢病毒是神经元转染的理想载体.%Objective To establish a simple,efficient and stable method of primary neurons′culture and transfection.Methods The hi ppocampus of SD rats within 2 days after birth was separated under aseptic condition, which was digested and received repeated deposition to gain the hippocampus cell suspension.The neurons were purified by differential adhension method and were cultured with serum-free medium.The morphological changes of neurons were observed by inverted microscope.Microtubule-associated protein(MAP2) antibodies were used to identify the cells.The lentiviral transfected neurons were used to observe the efficiency of neuron transfection. Results The dense networks of primary neurons,whichwere cultured in vitro,were formed 10 to 15 days after culture,with healthy cells and specific characteristics of the neurons.The purity of neurons was more than 95% identified by MAP2.The transfection efficiency achieved more than 95%using lentiviral transfected neurons.Conclusion The method we have used to culture primary neurons can be adopted to obtain highly purified neurons.The lentiviral is an excellent carrier for neuron transfection.【总页数】3页(P289-291)【作者】甘娜;尹飞;彭镜;吴丽文;何芳;陈晨【作者单位】广西卫生职业技术学院临床医学教研室,南宁市,530021;中南大学湘雅医院儿科,长沙市,410008;中南大学湘雅医院儿科,长沙市,410008;中南大学湘雅医院儿科,长沙市,410008;中南大学湘雅医院儿科,长沙市,410008;中南大学湘雅医院儿科,长沙市,410008【正文语种】中文【中图分类】R329.2【相关文献】1.一种简便的皮层神经元原代培养方法的建立及其培养结果分析 [J], 唐仕军;赵冬;朱立仓;李晓天;朱文学;杨鹏;王业忠2.一种高纯度原代神经元培养和高效率转染的方法 [J], 李兴统;汤红艳;马微;杨金伟;王先斌;代云飞;李俊彦;郭建辉;李力燕3.一种高纯度原代神经元培养和高效率转染的方法 [J], 李兴统; 汤红艳; 马微; 杨金伟; 王先斌; 代云飞; 李俊彦; 郭建辉; 李力燕4.一种同时培养原代神经元和原代星形胶质细胞的实验方法 [J], 薛建锋;魏娜;杨淳5.一种乳鼠海马神经元原代培养方法的优化与鉴定 [J], 吴倩;穆婷婷;汪宁因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

非洲爪蟾肢的再生机制研究

非洲爪蟾肢的再生机制研究非洲爪蟾是一种生活在非洲大陆上的两栖动物，在其肢体受伤时，会触发肢体自动再生的机制。

在过去的几十年里，科学家们对这种再生机制进行了广泛研究，并从中发现了一些有趣而且有潜力的应用。

首先，了解非洲爪蟾肢体再生机制的研究对于人们在医疗领域的应用非常有帮助。

许多人在自然灾害、交通意外等事件中失去肢体，这给他们的生活带来很大的不便。

目前，医院已经开始使用再生医学的技术来帮助这些患者重获新生。

众所周知，人体的细胞可以分化成不同的类型。

因此，科学家们一直在寻找一种能够促进人类身体组织再生的技术。

在非洲爪蟾的研究中，科学家们发现，它们的肢体再生机制与人体的再生过程非常相似。

通过对非洲爪蟾进行深入研究，科学家们希望能够找到一种可以促进人体组织再生的新方法。

其次，非洲爪蟾肢体再生机制的研究对于保护我们的环境也很有意义。

生态环境受到很多因素的破坏，包括自然灾害、人类活动以及全球气候变化等因素。

因此，保护自然生态系统的重要性愈加凸显。

非洲爪蟾利用其肢体自动再生机制来提高其存活率，这表明肢体再生具有重要的生态学意义。

如果我们能够借鉴这一机制，通过提高其他动植物的再生能力，就可以让它们适应已经受到污染或破坏的环境。

最后，非洲爪蟾肢体再生机制研究还有潜力应用于食品产业。

在我们的生活中，对于一些动物和植物来说，它们的肢体对于其生存至关重要。

如果肢体受到严重破坏，那么这种生物可能会死亡或无法正常生长。

非洲爪蟾的自动再生机制向我们展示了一条获得新型食品生产方法的可能路径，有可能以更强大的能力再生掉落的肢体。

将这种再生机制应用于舌头、鲍鱼、龙虾等高价海产的捕捞中，可以促进食品生产的创新，保护其可持续发展。

总之，非洲爪蟾的肢体再生机制博大精深，不仅仅是一个科学研究问题，而且环环相扣，影响着我们生命科学的进展、生产和环境保护。

随着科学技术的不断发展，相信人们会找到越来越多的方法，将这种再生现象应用于不同的领域，从而实现更好的生态、健康和经济效益的平衡。

非洲爪蟾卵母细胞内源性及外源性ATP和GABA受体介导的膜反应比较

非洲爪蟾卵母细胞内源性及外源性ATP和GABA受体介导的膜反应比较X杨青1徐怡1李之望2魏劲波1王钦文31武汉大学医学院生理学教研室武汉4300712华中科技大学同济医学院分子及细胞神经生物学教研室武汉4300223武汉市儿童医院武汉430013摘要目的:对非洲爪蟾卵母细胞表达的ATP和GABA激活电流进行比较。

方法:包括mRNA和cDNA的提取、卵母细胞的微量注射及双电极电压钳技术。

结果:¹在表达P2X2或P2X4的卵母细胞上,外加ATP可分别诱导一被Zn2+增强的内向电流。

º在表达鸡脑mRNA的卵母细胞上,可记录到GAB A激活电流,且此电流可被bicucu-l line(一种GABA A受体选择拮抗剂)所阻断。

»在表达了人视网膜Q1亚基cRNA的卵母细胞上,外加GAB A可引起一不被bicuculline阻断的内向电流,后者可被I4AA(一种GABAC受体特异性拮抗剂)阻断。

¼在具有滤泡膜的卵母细胞上可记录到3种形式的ATP激活电流和一外向的慢的GABA激活电流。

½在除去滤泡膜的卵母细胞上均未记录到ATP和GABA激活电流。

结论:卵母细胞上存在内源性的嘌呤受体、GABAB 和GABAC受体;且此内源性受体存在于滤泡膜上;P2X2、P2X4嘌呤受体及GAB A A和GABA C受体均可在卵母细胞上表达,表达的受体所介导的激活电流与内源性受体介导的激活电流有明显区别。

关键词非洲爪蟾卵母细胞;P2X;GABA受体;双电极电压钳记录中图分类号Q424非洲爪蟾卵母细胞目前是一种常规用于表达膜受体和通道基因蛋白的标本。

迄今发表的文献表明此细胞本身也存在有许多内源性受体和通道,如ACh、C A、5-HT、ATP、GAB A等受体通道[1~6]。

但是早期的这方面的研究工作彼此间有些矛盾,因此,对内源性存在的和外源性表达的受体P通道出现了一些混淆。

根据笔者在研究内源性和外源性ATP、GAB A 受体方面的工作,结合近年来的研究进展,对卵母细胞内源性和外源性受体P通道的特点加以比较,以澄清这方面的一些概念。

一种非洲爪蟾的人工繁殖方法[发明专利]

专利名称：一种非洲爪蟾的人工繁殖方法
专利类型：发明专利
发明人：潘晓赋,张源伟,杨君兴,王晓爱,吴安丽申请号：CN202210052571.4
申请日：20220118
公开号：CN114342876A
公开日：
20220415
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提供了一种非洲爪蟾的人工繁殖方法，属于水产动物繁殖技术领域。

非洲爪蟾人工繁殖的方法，通过严格控制亲蛙培育的环境条件和饲喂方法使非洲爪蟾在人工培育条件且不使用催产素的情况下实现自然产精产卵的目的，且可获得较高的受精率和孵化率，从根本上解决了塘养环境下非洲爪蟾雌雄不发育或发育不同步的问题；减少了对非洲爪蟾蛙种蛙的损耗，特别是雄蛙杀蛙取精消耗雄蛙的问题，同时大幅度降低了养殖成本；更加合理、高效，提高了孵化率并减少了蛙卵资源的浪费，满足用户对不同发育时期蛙卵和不同时期蝌蚪的需求；经过特殊的孵化和蝌蚪饲养步骤大大提高了受精卵的孵化率和蝌蚪的存活率和变态率，同时也降低了蝌蚪的畸形率。

申请人：中国科学院昆明动物研究所
地址：650223 云南省昆明市五华区教场东路32号
国籍：CN
代理机构：北京高沃律师事务所
代理人：薛红凡
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中华大蟾蜍胚后原始大脑皮层神经元自发电活动的发育变化

中华大蟾蜍胚后原始大脑皮层神经元自发电活动的发育变化彭霞;郑妍;王云;王畅;梁传成;王丽文【摘要】应用微电极电生理技术对中华大蟾蜍(Bufo bufo gargarizans)胚后端脑原始大脑皮层神经元的自发放电活动进行在体胞外记录,探讨其胚后端脑原始大脑皮层神经元自发电活的电生理学特性的发育变化.结果表明原始大脑皮层神经元的自发放电有5种形式.胚后发育的早期为4种放电类型,以簇状放电和连续放电为主;胚后发育的后期为5种放电类型,以簇状和连续簇状放电为主.随着原始大脑皮层的发育,单个放电的动作电位时程缩短,连续单个放电和连续簇状放电频率降低,连续放电、簇状放电和连续簇状放电的持续时间延长.随着端脑原始大脑皮层的发育,神经元的兴奋性逐步提高,神经元电活动形式逐渐呈现多样化.【期刊名称】《沈阳师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2014(032)002【总页数】4页(P135-138)【关键词】中华大蟾蜍;原始大脑皮层;自发电活动【作者】彭霞;郑妍;王云;王畅;梁传成;王丽文【作者单位】沈阳师范大学实验教学中心,沈阳110034;沈阳师范大学化学与生命科学学院,沈阳110034;辽宁中医药大学附属第二医院,沈阳110034;沈阳师范大学化学与生命科学学院,沈阳110034;沈阳师范大学化学与生命科学学院,沈阳110034;沈阳师范大学化学与生命科学学院,沈阳110034【正文语种】中文【中图分类】Q955;Q424中华蟾蜍（Bufo gargarizans）隶属于两栖纲，无尾目，蟾蜍科，蟾蜍属，在我国栖居广泛，数量多，最为常见［1］，是生态环境的重要指示动物。

目前对蟾蜍及近缘种端脑发育的研究多在形态学和组织学上［2－5］，有关其发育电活动的研究尚未见报道。

笔者应用微电极电生理学技术，对中华蟾蜍胚后6个典型时期端脑原始大脑皮层进行了电生理研究，探讨中华蟾蜍胚后各阶段端脑原始大脑皮层的发育特性，以期充实无尾两栖动物神经系统资料，为进一步的研究工作奠定基础。

非洲爪蟾的基因组演化过程

作者：无
作者机构：不详
出版物刊名：科学中国人
页码： 6-6页
年卷期： 2016年第12期
主题词：基因组复制非洲爪蟾演化过程发育生物学基因组测序基因组序列模式生物动物细胞
摘要：Nature封面：非洲爪蟾。

Nature杂志第7625期讲述非洲爪蟾的基因组演化。

非洲爪蟾（Xenopus laevis）是脊椎动物细胞和发育生物学研究中的重要模式生物．它是一种古四倍体——数百万年前基因组复制的产物，这使得非洲爪蟾成为了理想的多倍体研究目标，但同时也大大增加了基因组测序的复杂性。

DanielRokhsar及同事报告了非洲爪蟾的基因组序列，并与其近亲热带爪蟾（Xtropicalis）的基因组进行了比较。

实验一爪蟾人工繁殖、受精和胚胎发育

实验二爪蟾人工繁殖、受精和胚胎发育一、实验目的：了解爪蟾的生活和繁殖习性，掌握爪蟾人工繁殖技术；通过对爪蟾从受精卵经卵裂、囊胚、原肠胚到神经胚的系列发育过程的观察，了解其胚胎早期发育过程和形态模式形成的特征。

二、爪蟾的生活和繁殖习性非洲爪蟾（Xenopus laevis）原产非洲南部的一种水生蛙类，又名光滑爪蟾，属于两栖纲（Amphibia）、无尾目（Anura）、负子蟾科（Pipidae）、爪蟾属（Xenopus）。

其头部及身体扁平，没有外耳或舌头，其后脚上3趾有短爪。

雌性成蛙体长9-14cm，在身体尾端的泄殖腔上方有分列左右的两瓣膜。

雄性成蛙体长7-11cm，性成熟的雄蛙前肢有黑色婚垫，便于交配，泄殖腔上方无瓣膜。

图2-1 非洲爪蟾和热带爪蟾成体形态非洲爪蟾产卵量很大，为多次产卵类型的蛙类。

在25℃养殖条件下可以不受季节限制而常年产卵。

其卵子和胚胎体积较大，便于进行实验胚胎学操作，如显微注射、胚胎切割和移植等。

受精后胚胎发育很快，在24℃下受精后2天左右就可以孵化成可以游动的蝌蚪。

非洲爪蟾蝌蚪在早期是透明的，能够看清楚它内部的结构。

因此，非洲爪蟾长期以来被作为实验胚胎学和脊椎动物胚胎形体模式形成的模式动物。

但由于其基因组是在进化上二倍体化了的四倍体，多数基因存在四个拷贝，很难进行遗传突变实验。

因此，近年来非洲爪蟾的近亲——二倍体的热带爪蟾Xenopus tropicalis被引入发育生物学的研究中。

热带爪蟾其外型与非洲爪蟾类似，但体型较小（图2-1）。

几乎所有使用在非洲爪蟾的研究技术都可在热带爪蟾上应用，而且热带爪蟾的基因组测序计划已在2010年基本完成。

因此，热带爪蟾成为了功能基因组学和发育生物学研究的优良的实验动物模型。

三、实验器材和材料爪蟾养殖系统，小型塑料整理箱（直径约58cm）两个，加热棒，加气泵，12cm培养皿若干，9cm培养皿若干，数个胶头滴管，0.5ml (U-40)注射器、绒毛膜促性腺激素（HCG），曝气水10L，琼脂糖，0.1×MMR, 半胱氨酸(L-Cysteine Free Base),性成熟雌、雄性热带爪蟾。

爪蟾胚胎脊髓胆碱能神经元上两类非去极化激活的钙通道

爪蟾胚胎脊髓胆碱能神经元上两类非去极化激活的钙通道王晋辉;杨世若;谢佐平
【期刊名称】《生理学报》
【年(卷),期】1991(43)5
【摘要】用膜片箝方法,在标定的爪蟾胚胎脊髓胆碱能神经细胞膜上记录钙离子单通道电流。

结果显示,在静息膜电位时钙通道即有开放活动。

根据通道的电导及动力学等特性,我们将其分为两种类型:NS 型钙通道,斜率电导7.5pS,静息膜电位时平均开放时间0.58ms,其活动受牵张膜片的影响;NL 型钙通道,斜率电导16.7pS,静息膜电位时二级平均开放时间分别是2ms 和19.3ms。

鉴于它们在膜静息以及负电位相的显著活动,我们推测这两类钙通道可能参与神经元静息膜电位时钙依赖的细胞活动过程。

【总页数】7页(P436-442)
【关键词】脊髓;胆碱能;神经元;钙通道;爪蟾
【作者】王晋辉;杨世若;谢佐平
【作者单位】华西医科大学生理学教研室;清华大学生物科学与技术系
【正文语种】中文
【中图分类】R338.21
【相关文献】
1.M胆碱能受体和GABAB受体在脊髓背角Ⅱ板层神经元上的表达 [J], 王秀丽;张奇;郭跃先
2.非洲爪蟾卵细胞膜去极化后由超极化激活的瞬间内向电流 [J], 叶江鸿
3.胚胎大鼠脊髓神经干细胞体外培养向胆碱能神经元的分化 [J], 张潇;张金枝;刘真真;林艳
4.非去极化停搏液对缺血再灌注心肌细胞L-型钙通道的影响 [J], 吴蓓;黑飞龙;孙亮;陈蒙蒙;于坤;龙村
5.胚胎大鼠脊髓神经干细胞体外培养与定向分化为胆碱能神经元的研究 [J], 李鹏飞;王春芳
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非洲爪蟾早期发育中的转录后调控机制及眼睛发育相关基因的表达研究的开题报告

非洲爪蟾早期发育中的转录后调控机制及眼睛发育相关基
因的表达研究的开题报告
一、研究背景
非洲爪蟾（Xenopus laevis）是一个重要的实验动物模型，因其广泛应用于发育
生物学、神经生物学、遗传学和癌症研究等领域而备受关注。

水生爬行动物的转录后
调控网络在胚胎发育过程中起着关键作用，其中microRNAs (miRNAs) 是一类小分子RNA，主要起到负性调控基因表达的作用。

非洲爪蟾miRNAs在胚胎早期发育中的作
用及其对细胞分化的调控机制还不清楚。

同时，眼睛是爪蟾早期发育的一个重要器官，眼睛发育的基因调控网络对爪蟾生长发育具有重要意义。

因此，本研究旨在探究非洲
爪蟾早期发育中的转录后调控机制及其与眼睛发育相关的基因表达。

二、研究内容
1. 分离非洲爪蟾早期发育中不同组织样本的总RNA，并通过转录组测序进行差
异基因分析。

2. 利用生物信息学和系统生物学方法对差异表达的基因进行分析和筛选，筛选出调控非洲爪蟾早期发育的miRNAs和相关的基因。

3. 利用miRNA块聚法对调控早期发育的miRNAs进行聚类分析，挖掘miRNA作为调控网络的重要节点。

4. 通过实时荧光定量PCR检测筛选出的眼睛发育相关基因在不同发育阶段的表
达量，进一步探究其在调控早期发育中的作用。

5. 通过RNAi或药物干扰等方法对筛选出的miRNAs和基因靶点进行验证，研究
其在胚胎发育中的调控作用。

三、研究意义
本研究将揭示非洲爪蟾早期发育中的转录后调控机制及其与眼睛发育相关的基因表达，为探究生物体发育过程中的调控机制提供新的思路和实验数据，并为生物医学
研究提供有价值的实验模型和工具。