293、293T细胞培养及转染一点经验
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qq :439572370HEK-293是用DMEM 培养基培养吗?
HEK-293细胞是我在锐赛生物实验室做项目时常培养的细胞,DMEM+10%血清+双抗+谷氨酰胺,这类的细胞贴壁性不是太强,所以不要消化过久,容易损伤细胞。
状态较好的293细胞
细胞生长较快,一般1:3~1:5传代,30%~50%融合度2-3
天即可长满。
细胞状态不好后会变瘦、产生大量黑点(细胞碎片)。
网友咨询:我们这里的293转染质粒效率一直不高,
各种方法均试过了,很少能达到50%,老板说他在
国外做293转染很容易达到80%以上。我想问一下哪里有好的293细胞卖?非常感谢。答:293系列的细胞都是非常好转染的:注意点:
1.转染前细胞的铺板密度、细胞状态
2.转染的时间
3.转染试剂与质粒的比值
干扰载体转染293T 细胞48h 的图片,供参考。
293T 细胞生长速度更快,形态较293A 细胞小,贴壁性比293
细胞弱很多,消化时间更要注意,没培养过的刚接手细胞要在注意留种的同时多试验消化几次,掌握经验值。
293
细胞常用于腺病毒包装、293T
细胞常用于慢病毒包装。