293、293T细胞培养及转染一点经验

合集下载
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

qq :439572370HEK-293是用DMEM 培养基培养吗?

HEK-293细胞是我在锐赛生物实验室做项目时常培养的细胞,DMEM+10%血清+双抗+谷氨酰胺,这类的细胞贴壁性不是太强,所以不要消化过久,容易损伤细胞。

状态较好的293细胞

细胞生长较快,一般1:3~1:5传代,30%~50%融合度2-3

天即可长满。

细胞状态不好后会变瘦、产生大量黑点(细胞碎片)。

网友咨询:我们这里的293转染质粒效率一直不高,

各种方法均试过了,很少能达到50%,老板说他在

国外做293转染很容易达到80%以上。我想问一下哪里有好的293细胞卖?非常感谢。答:293系列的细胞都是非常好转染的:注意点:

1.转染前细胞的铺板密度、细胞状态

2.转染的时间

3.转染试剂与质粒的比值

干扰载体转染293T 细胞48h 的图片,供参考。

293T 细胞生长速度更快,形态较293A 细胞小,贴壁性比293

细胞弱很多,消化时间更要注意,没培养过的刚接手细胞要在注意留种的同时多试验消化几次,掌握经验值。

293

细胞常用于腺病毒包装、293T

细胞常用于慢病毒包装。

相关文档
最新文档