噬菌体的检测

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噬菌体侵染大肠杆菌实验

将噬菌体与大肠杆菌混合，一定时间后观察噬菌体的侵染情况。
通过离心去除未侵染的大肠杆菌，洗涤以去除多余的噬菌体。
在适宜条件下培养，观察噬菌体的繁殖情况。
通过显微镜观察、计数等方法检测实验结果。
实验操作注意事项
无菌操作
确保整个实验过程在无菌条件下进行，以避免
污染。
精确测量
确保所有试剂的准确测量，以保证实验结果的
04
结论与展望
实验结论
噬菌体侵染大肠杆菌实验证明了噬菌体的存在和侵染机制。
实验结果证明了噬菌体的专一性，即一种噬菌体只能侵染对应种类的细菌。
通过实验观察到了噬菌体对大肠杆菌的吸附、侵入、复制和释放过程。
实验的优缺点分析
优点
实验操作简单，结果直观，能够很好地展示噬菌体的侵染过程。
缺点
实验过程中无法控制噬菌体的数量和侵染时间，可能会影响实验结果的准确性。
作为宿主细胞，用于噬菌体的侵染。
缓冲液
用于维持实验过程中的pH值稳定。
噬菌体
用于侵染大肠杆菌的病毒。
培养基
用于培养大肠杆菌。
其他试剂
如抗生素、染色剂等。
实验方法与步骤
01
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05
1. ห้องสมุดไป่ตู้备噬菌体和 2. 感染实验宿主…
3. 离心与洗涤
4. 培养与观察
5. 结果检测
将噬菌体稀释至适当浓度，同时培养大肠杆菌至对数生长期。
噬菌体的生命周期包括吸附、注入核酸、复制和组装新噬菌体等步骤。
噬菌体侵染大肠杆菌的过程
噬菌体通过识别大肠杆菌表面的受体，吸附到细菌表面。
噬菌体的核酸利用大肠杆菌的代谢系统和基因表达机制进行复制。

牛分枝杆菌的噬菌体检测方法建立及初步应用研究的开题报告

牛分枝杆菌的噬菌体检测方法建立及初步应用研究的开题报告一、研究背景与意义牛分枝杆菌是一种常见的革兰氏阴性菌，可以引起人和动物的多种疾病，包括细菌性痢疾、肉毒中毒和染色体显性多发性肌萎缩症等。

传统的治疗方法往往会导致抗药性的产生，因此寻找新的治疗方法是非常必要的。

噬菌体是一种能够特异性地感染细菌的病毒，可以用于治疗细菌感染。

噬菌体针对细菌的特异性很高，因此可以减少对宿主细胞的伤害，且通过病毒耐受性等机制，可以避免治疗耐药性的产生。

因此，建立一种高灵敏度、特异性的牛分枝杆菌噬菌体检测方法，可以为寻找新的治疗方法提供有力支持。

二、研究内容及方法1. 研究内容本研究将重点研究以下内容：（1）筛选具有特异性的牛分枝杆菌噬菌体。

（2）建立一种高灵敏度、特异性的牛分枝杆菌噬菌体检测方法。

（3）初步应用该检测方法对临床标本进行检测，并分析其可行性。

2. 研究方法（1）筛选噬菌体：利用牛分枝杆菌的培养基将其培养至对数生长期，然后加入噬菌体进行感染。

根据噬菌体对牛分枝杆菌的特异性和感染效果进行筛选。

（2）建立检测方法：采用PCR技术和免疫学方法，建立一种基于PCR和免疫捕获的牛分枝杆菌噬菌体检测方法，并优化反应体系、探针和引物等参数，提高检测方法的灵敏度和特异性。

（3）初步应用检测方法：将该检测方法应用于临床标本的检测，并分析其效果和可行性。

三、预期结果及意义1.预期结果（1）筛选出一种特异性强、感染效果好的牛分枝杆菌噬菌体。

（2）建立一种高灵敏度、特异性强的牛分枝杆菌噬菌体检测方法。

（3）初步应用该检测方法对临床标本进行检测，并证明其的可行性和有效性。

2.意义（1）该研究将有助于寻找新的治疗牛分枝杆菌感染的方法。

（2）建立的检测方法可以用于临床样本的检测，提高对牛分枝杆菌感染的检测和诊断水平。

（3）该研究可以为噬菌体作为细菌治疗的新型药物开发提供有力的支持。

大肠杆菌噬菌检验操作SOP

1.目的规定新生牛血清中大肠杆菌噬菌体的检测方法。

指导操作者按本程序进行新生牛血清中大肠杆菌噬菌体的检测操作。

2.适用范围本程序包括大肠杆菌菌种培养、样品培养、点样、判定标准和增殖试验。

适用于新生牛血清中大肠杆菌噬菌体检定操作的全过程。

3.职责3.1．质量管理部：负责本程序的起草。

3.2．质量管理部QC：负责本程序的操作。

3.3. 总经理：负责本程序的批准。

4.定义无5.引用标准《中华人民共和国药典》四部 2015版6.材料及设备6.1 供试品及参考品/标准品6.1.1 供试品：新生牛血清。

记录批号。

6.1.2 参考品/标准品：大肠杆菌C3000菌种，记录批号。

6.2 化学药品及试剂6.2.1 普通肉汤培养基， 1-2支/批血清，记录批号、数量及效期。

6.2.2 阳性血清，1-2ml,记录批号、效期。

6.2.3 阴性血清，1-2ml,记录批号、效期。

6.2.4 营养琼脂培养基平皿，1-2个/批，记录批号、数量及效期。

6.3 设备资料整理6.3.1 生物安全柜。

6.3.2 振荡培养箱。

6.4 玻璃器皿及辅助用具/易耗品6.4.1 灭菌效期内的尖毛细吸管1-2支6.4.2 1ml吸管，4-6支/批供试品6.4.3 有效期内的一次性使用无菌注射器，2支/批供试品6.4.4 有效期内的一次性无菌滤器（0.45μm)，1个/批供试品6.4.5 操作服，1件/人6.4.6 无菌帽、无菌口罩和橡胶检查手套，1副/人6.4.7 白金耳1个6.4.8 酒精灯1个6.4.9 砂片1片6.4.10 点火枪一把或火机6.4.11 效期内75%酒精棉（见《75%酒精棉配制程序》）7.流程图无8.内容8.1准备8.1.1 尖毛细吸管﹑1ml吸管、操作服经蒸汽高压灭菌，记录高压设备运行流水号8.1.1.1 将试验所需物料放入物料缓冲间。

8.1.1.2 人员按无菌操作室的要求更衣进入操作室，参见《人员进出QC洁净区程序》。

8.2 检测程序8.2.1 大肠杆菌C3000菌种启封、传代。

噬菌体的鉴定方法

噬菌体的鉴定方法噬菌体是一种有特定的结构和功能的细菌，它可以充当细菌与宿主，或者细菌和其他微生物之间的中介。

噬菌体的一个主要功能是摄取其它微生物，因此它可以在各种环境中发挥重要作用。

噬菌体通常有两种主要类型，即细胞外噬菌体和细胞内噬菌体。

为了鉴定噬菌体，它们必须具有一套确切的标志物和特性。

一些噬菌体的测定方法可用于鉴定噬菌体，以识别出特定的微生物，确定它们的特征，及其在不同环境中的作用。

一般而言，噬菌体的鉴定首先需要采集样本，然后进行形态、培养特性和生化特性的分析，并根据分析结果进行鉴定。

1、形态特征：这是鉴定噬菌体最常见的方法，此方法通过测量和描述宏观上的形态特点，如细菌的大小、形状和生长形态。

此外，利用电镜也可以观察噬菌体的微观特征，如细菌质膜、细胞壁和质质组成。

2、培养特性：噬菌体的鉴定需要在生化培养基上进行培养，这样可以检测出噬菌体的生长特性，如生长温度、pH和盐度等。

在培养中，向培养基中添加特定的营养物质可以试验由噬菌体产生的特定代谢物作为其识别者。

3、生物学特性：在这一方面，噬菌体可能具有多种独特的生物学特性，如表面多糖结合区，免疫原性，抗药性和对抗识别等。

采用这些特征可以进一步鉴定噬菌体，并将其与其他病原微生物区别开来。

4、分子生物学：这是噬菌体鉴定最精确的方法，可以利用核酸测序（如16S rRNA基因测序和变异性Molecular Markers），或者利用蛋白印迹（如Essential proteins, Non-Essential proteins, Peripheral proteins）回应和不同的子类群的分布等方法确定噬菌体的分子标签。

总而言之，噬菌体的鉴定包括了多个步骤，如采集样本、形态特征、培养特性和生物学特性、分子生物学等，都是噬菌体鉴定的重要依据。

结合不同的分析方法，才能有效地识别噬菌体，评估其在不同环境中的作用。

噬菌体的快速检测与防治

噬菌体快速检测方法一、目的要求1.定期检测生产车间空气中和二级种子罐培养液中的噬菌体污染度，观察噬菌斑的形态和大小。

2.学会快速检查发酵液中是否被噬菌体污染的方法。

二、基本原理噬菌体是一类专性寄生于细菌和放线菌等微生物细胞的病毒，某种噬菌体往往只能感染一种或与它相近的某种细菌。

按其感染细菌的过程分两类：大多数烈性噬菌体侵染细菌后迅速引起敏感细菌裂解，释放出大量子代噬菌体，因而可在含有敏感细菌的平板上出现肉眼可见的噬菌斑如图1。

温和噬菌体侵染细菌后呈原噬菌体（或称前噬菌体）状态，一般不引起细菌裂解，使宿主成为溶源性细菌。

在肉膏蛋白胨双层琼脂平板上产生透明噬菌斑中心的菌落，即为溶源性细菌。

了解噬菌体的特性，快速检查噬菌体，在生产和科研工作中防止噬菌体污染具有重要作用。

图1 敏感细菌的平板上出现肉眼可见的噬菌斑空气中和二级种子罐培养液中的噬菌体污染度是预防噬菌体的一个措施。

在连续使用特定菌株进行赖氨酸发酵时，首先是空气中的噬菌体浓度增加，数月后种子罐的噬菌体浓度也急剧增加，随之主发酵罐发酵液中的噬菌体检出浓度也就增加；当空气中的噬菌体浓度上升到每个平板达10～20PFU/ml（噬菌斑生成单位）时，二级种子罐的噬菌体浓度为40～50 PFU/ml；之后迅速增加，达到102 PFU/ml的程度，终于在主发酵罐发生溶菌。

经常检测赖氨酸分厂环境中，特别是空气中与种子罐二级种子液中的噬菌体数，就能知道环境的噬菌体污染程度，也就能预知主发酵罐中会不会发生噬菌体的污染。

噬菌体是病毒的一种，是一种极其微小的生物，体积是细菌的1/1000左右，它可以通过细菌过滤器，只有在电子显微镜下才能看到。

噬菌体具有非常专一的寄生性，只能在特异性寄主细胞中增殖。

由于噬菌体缺乏独立代谢的酶体系，不能脱离寄生而自行生长繁殖，因而噬菌体的繁殖必须依存于寄生菌的繁殖，只能在活的正在繁殖阶段的细胞中进行增殖。

在死的、衰老的、处于休眠状态的细胞中以及在代谢产物或培养基上都无法繁殖。

噬菌体检测方法

一、材料准备
1.LB培养基固体，酵母粉0.5%，蛋白胨1%，氯化钠1%，琼脂粉1.5%。

每个待检测样品50ml，
溶解后分装灭菌。

2.2%琼脂，2%琼脂粉加水，根据平板数决定体积。

3.LB液体培养基，酵母粉0.5%，蛋白胨1%，氯化钠1%。

每个样100ml，大肠杆菌100ml。

4.5ml枪头
5.1ml枪头，每个样品1个。

6.培养皿，每个样品2个。

二、操作步骤
1. 将大肠杆菌培养至对数期（OD600nm1-1.5），约12h；
2. 待测菌株也培养至对数期；
3. 取2%的琼脂用水融化，倒10ml至无菌平板（可用移液枪吸取，枪头提前灭菌），等其完全凝固（注意铺平，超净台吹半小时或室温放置1h）；
4. 取LB固体培养基融化，置于50℃恒温水浴1h（可以与上部同时进行，节省时间，提前备好水浴）；
5. 无菌操作取5ml大肠杆菌菌液及1ml待测菌液，加入恒温水浴的第2瓶融化的固体培养基中，充分混匀；
6. 取上述混合液10ml至上述准备好的平板，保证铺平。

7. 30℃恒温培养12h，观察有无透明圈（噬菌斑），有表示有噬菌体，否则无噬菌体。

噬菌体侵染细菌的试验赫尔希和蔡斯

4.噬菌体在细菌体中合成自己的蛋白质需要:( B ) A.噬菌体的DNA和氨基酸 B.噬菌体的DNA和细菌的氨基酸 C.细菌的DNA和氨基酸 D.细菌的DNA和噬菌体的氨基酸
5.一切生物的遗传物质是:( A )
A.核酸 B.DNA C.RNA D.蛋白质
在杀死加的热S杀型死细的菌S型中细含菌有哪些物质？
DNA是唯一的遗传物质吗？
有些病毒（如烟草花叶病毒），不含有DNA, 只含有RNA。在这种情况下，RNA就起着遗传物质的作用。
目前，已有充分的科学研究资料证明，绝大多数生物的遗传物质是DNA，
所以DNA是主要的遗传物质。
课外提升：
如何验证烟草花叶病毒的遗传物质是RNA。
烟草花叶病毒
RNA 蛋白质
第六章遗传和变异
第一节遗传的物质基础
父本
减数分裂
精子
受精作用
有
受精卵
丝分
子代
母本减数卵细胞
裂
分裂
染色体在生物的遗传中起着重要作用。
染色体
• DNA • 蛋白质
是遗传物质?
20世纪中叶激烈争论实验
1928年
格里菲思肺炎双球菌的转化实验
1944年艾弗里
(一)格里菲思的肺炎双球菌转化实验 1、实验材料：肺炎双球菌
2、实验技术：
同位素标记法
蛋白质的组成元素： C、H、O、N、S （标记35S ） DNA的组成元素： C、H、O、N 、P （标记32P）
（2）实验过程：
①用放射性同位素35S标记噬菌体外壳蛋白质
蛋白质含35S +细菌离心
的噬菌体 (未标记)
上清液(含T2噬菌体颗粒) --含放射性物质35S

噬菌体在医学和生物学中的应用

（1）细菌的鉴定与分型噬菌体的作用具有高度特异性。

一种噬菌体只能裂解一种或与该种相近的细菌，故可用于细菌的鉴定和分型。

目前已利用噬菌体将金黄色葡萄球菌分为四个群数百个型，这种用噬菌体分型的方法，在流行病学调查上，对追查和分析这些细菌性感染的传染源很有帮助。

（2）检测标本中的细菌应用噬菌体效价增长试验检查标本中的相应细菌，若在检材中检出某种噬菌体时，常提示有相应细菌存在。

（3）分子生物学研究的重要工具噬菌体基因数量少，有些噬菌体为某种遗传基因缺陷株，有些噬菌体经人工诱导的变异和遗传容易控制和辩认，并且可用于基因的转导和变换等研究。

近年来，噬菌体已成为遗传研究中的主要的基因载体工具。

检测噬菌体的常用方法

检测噬菌体的常用方法
哇塞，检测噬菌体的常用方法可真是非常重要呢！那咱就来好好聊聊。

首先呢，双层平板法是比较常用的一种。

先把底层培养基倒在平板上，等它凝固了，再把对数生长期的敏感菌和一定稀释度的噬菌体悬液混合，加到上层培养基里，然后倒在底层培养基上。

等培养好了，就能看到噬菌斑啦！这过程中可得注意咯，培养基的质量得保证好呀，不然会影响结果的哟！还有稀释度要把握好，不然可能看不到或者看不清噬菌斑呢。

再来说说这安全性和稳定性哈。

整个过程只要操作规范，还是很安全的呀，不用担心会有啥大问题。

而且只要严格按照要求来，结果的稳定性也是很不错的哟。

那它都有啥应用场景和优势呢？嘿，这可多啦！在微生物学研究里，能帮助咱了解噬菌体的特性和行为呀。

在发酵工业中，可以检测噬菌体污染，及时采取措施呢。

它的优势就是简单易行、直观有效呀，能快速得到结果呢。

咱举个实际案例哈，之前有个生物实验室，就是用这个方法检测到了噬菌体的存在，及时调整了实验方案，避免了更大的损失呀！你说这效果多明显呀。

所以呀，检测噬菌体的常用方法真的是非常实用和重要的呀！它们就像是我们探索噬菌体世界的得力工具，能让我们更好地了解和利用噬菌体呢！。

噬菌体效价的测定方法

噬菌体效价的测定方法噬菌体效价的测定方法1. 引言噬菌体效价的测定方法是研究噬菌体杀菌能力的重要手段。

本文将详细介绍几种常用的噬菌体效价测定方法。

2. 噬菌体效价测定方法斑点法斑点法是最常用的测定噬菌体效价的方法之一。

具体步骤如下：1.准备一系列浓度递减的噬菌体溶液。

2.在琼脂平板上均匀涂敷被测细菌悬浮液。

3.取一定体积的已知浓度的噬菌体溶液滴在已涂敷的平板上，静置一段时间。

4.观察液滴周围是否出现菌落溶解区，根据出现溶解区的数量和大小，推断噬菌体的效价。

流式细胞术法流式细胞术法是一种快速测定噬菌体效价的方法，适合大规模实验。

具体步骤如下：1.准备一系列浓度递减的噬菌体溶液。

2.将被测细菌悬浮液加入流式细胞仪中，通过光散射和荧光信号检测细菌的状态。

3.依据细菌的状态判断噬菌体的效价。

确定感染能力的法确定感染能力的法是一种精确测定噬菌体效价的方法，可以测定细菌在固定时间内被噬菌体感染的能力。

具体步骤如下：1.准备一系列浓度递减的噬菌体溶液。

2.将细菌与噬菌体溶液接触一定时间后，离心沉淀细菌。

3.通过对沉淀细菌进行计数或直接培养识别，确定细菌被感染的数量。

4.根据感染数量和噬菌体浓度计算噬菌体的效价。

3. 结论本文介绍了斑点法、流式细胞术法和确定感染能力的法三种常用的噬菌体效价测定方法。

这些方法各有优缺点，研究者可以根据实际需求选择合适的方法进行噬菌体效价的测定。

4. 斑点法的优点和缺点优点•斑点法操作简单，易于掌握。

•可以同时测定多个噬菌体效价，提高效率。

•结果直观，通过观察菌落溶解区可以准确判断噬菌体效价。

缺点•斑点法需要较长的时间来观察菌落溶解区的形成，耗时较长。

•结果的定量分析相对不准确，只能通过观察溶解区数量和大小来推测效价。

•受到环境因素的影响较大，如温度、湿度等。

5. 流式细胞术法的优点和缺点优点•流式细胞术法速度快，可对大量样本进行高通量分析。

•结果定量准确，可以精确地获得细菌的状态信息。

怎么检测噬菌体

从你描述的现象来看，很可能就是污染了噬菌体，而且噬菌体的量很大，自溶的太快。
பைடு நூலகம்
有一篇关于噬菌体污染的检测方法的文献，供你参考，希望对你有所帮助！《检测牛血清中污染大肠杆菌噬菌体方法的建立》。
噬菌体污染往往是先从发酵罐开始的，然后才波及到种子罐。如果细心观察可以发现：当你的发酵罐不正常的时候往往种子罐的种子在镜检时也有异常菌体出现。
但愿不是噬菌体污染！
顺及：大部分噬菌体都是dsDNA 遗传物质。也有个别不是。对你的宿主不了解，这个不敢说绝对。
温和噬菌体：感染细菌后能使宿主细菌溶源化而不裂解的一种非烈性噬菌体特点：核酸类型为双链DNA;其DNA具有整合能力；整合了的DNA具有同步复制的功能溶源性细菌：一类能与温和噬菌体长期共存，一般不会出现有害影响的宿主细胞特点：自发裂解，诱发裂解，免疫性，重复性，溶源转变
噬菌体污染：一般如果为烈性噬菌体污染很好判断（发酵液不能增菌）你不会来这里问了。但污染了温和噬菌体那就麻烦大了。
证明：拿已知的原始菌株（无噬菌体感染的）作为寄主做平板涂布，将发酵液直接点植在平板上，并做好位置记号，培养观察，在点植处若出现半透明噬菌斑那肯定是温和噬菌体污染了。
噬菌体污染很难清除，一般需要彻底倒灌之后，进行环境和灌内彻底灭菌处理。即便如此也很难保证不再污染。最好的办法是换个对该噬菌体不敏感的菌种那企业损失就大了去了。
另外，若你的电极不能高压灭菌的话，可以选择其他方法来灭菌，若用消毒气体熏。
噬菌体的检测方法很多教材和论文上都可以查到，用双层平板比较可靠。
你说有两次发酵成功，这两次你所用的菌种有可能具有抗性，可以考虑进行进一步的菌种分离。
通气发酵，空气过滤器对噬菌体的截留能力不一定很好。一般噬菌体要比空气过滤器的孔径还小的多，能够完全进入到发酵罐中。一般发酵罐的通气量要比种子罐大，所以也会导致发酵罐比种子罐提前表现出来。

新生牛血清中大肠杆菌噬菌体检测方法的建立

摘
要：本研究用大肠杆菌标准噬茵体株选择确定的大肠杆菌Ｃ３０作为宿主茵，采用增殖法和噬斑法与双一００
层琼脂平板法，对多个厂家的新生牛血清进行了大肠杆菌噬菌体检测，建立了兽用生物制品细胞培养用新生
牛血清中大肠杆菌噬菌体的检测方法。
［１１］ＧｒｙｎＭ，ｅ．ｈｎｔｐｃａｄｍｏｅｕａｈｒｃｅｉａｉｎａｏｔａＰｅｏｙｉｎｌｃｌｒｃａａｔｒｚｔ１ｏ
ｏＢｕｅａｓａｎｉｌｔｄｆｍｎｅｗｈｌＢｌｎｐｅａｆｒｃｌｔｉｓａｅｏａｍｉｋａｅ（ａａｏｔｒａｌｒｏｒｅ
ＩｔｒａｉｎｌｓＥｐｚｏｔｓ２０．ｎｅｎｔｏａｉｏｉ，０９ｄｅｅ
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ａｕｏｏｔｔ）Ｍｉｒｂｏｏｙ］９８１４３６ — ３ｃｔｒｓａａ．ｃｏｉｌｇ［，９，４：７７ｒＪ１２
［２ｍｍｅｚａＡ，ｅＷｉＪ，ｊｓａＴｔａＴｈｔｈＢｕｅｌ１］ＥｒａｌｄｔＪＤｉｔ，ｅ１ｋｒ．ｅＤｕｃｒｃｌａ
关键词：细胞培养；新生牛血清；大肠杆菌噬菌体；检测

噬菌体展示技术及其在食品检测上的应用

噬菌体展示技术在及其在食品检测上的应用摘要：本文介绍了噬菌体展示技术的原理、分类和筛选方法，综述了噬菌体表面展示技术在检测食品有害小分子物质中的应用，展望这种技术目前存在的不足与今后发展的方向。

关键词：噬菌体展示技术、食品检测1噬菌体展示技术的原理和内容作为一项已广泛运用的技术，噬菌体展示是一种将外源肽或蛋白质与特定噬菌体衣壳蛋白融合并展示于噬菌体表面的技术[1]。

它将外源基因插入到噬菌体展示载体的信号肽基因和衣壳蛋白编码基因之间，从而使外源基因编码的多肽或蛋白质与外壳蛋白以融合蛋白质形式展示在噬菌体表面，被展示的外源肽或蛋白质可保持相对独立的空间结构和生物活性。

与其他表达系统相比，噬菌体展示技术可将基因型和表型、分子结合活性与噬菌体的可扩增性结合在一起，实现了基因型和表型的转换，是一种高效的筛选系统。

噬菌体显示技术主要包括三方面内容(图1)：一是通过DNA重组的方法插入外源基因，形成的融合蛋白表达在噬菌体颗粒的表面，同时保持外源蛋白的天然构象，不影响噬菌体的生活周期，也能被相应的抗体或受体所识别；二是筛选目的噬菌体，利用固定于固相支持物的靶分子，采用适当的淘洗方法，洗去非特异结合的噬菌体，筛选出融合噬菌体；三是外源多肽或蛋白质表达在噬菌体的表面，而其编码基因作为病毒基因组中的一部分可通过分泌型噬菌体的单链DNA测序推导出来[2]。

噬菌体亲和筛选的方法包括直接法和间接法，前者是将蛋白质分子偶联到固相支持物上，加入噬菌体肽库，与固相支持物温育，洗去未结合的噬菌体，既获得亲和噬菌体，其中固相支持物有很多，包括树脂、各种尺寸的珠子、96孔板甚至可用于分析的生物传感芯片；后者是将生物素标记的蛋白质分子与文库噬菌体温育后铺在结合有链亲和素的平皿上，洗去未结合的噬菌体，保留结合状态的噬菌体，再洗脱结合的噬菌体，用这部分噬菌体感染细菌，扩增噬菌体，开始新一轮的筛选，通过吸附、洗脱、扩增的重复过程，就能选择性地富集并特异性扩增结合这种蛋白质或DNA分子的噬菌体。

细菌噬菌体应该如何检测

细菌噬菌体应该如何检测噬菌体是一类专性寄生于细菌和放线菌等微生物的病毒，其个体形态极其微小，用常规微生物计数法无法测得其数量。

当烈性噬菌体侵染细菌后会迅速引起敏感细菌裂解，释放出大量子代噬菌体，然后它们再扩散和侵染周围细胞，最终使含有敏感菌的悬液由混浊逐渐变清，或在含有敏感细菌的平板上出现肉眼可见的空斑──噬菌斑。

了解噬菌体的特性，快速检查、分离，并进行效价测定，对在生产和科研工作中防止噬菌体的污染具有重要作用。

检样可以是发酵液、空气、污水、土壤等(至于无法采样而需检查的对象，可以用无菌水浸湿的棉花涂拭表面作为检查样品)。

为了易于分离可先经增殖培养，使样品中的噬菌体数量增加。

采用微生物测定法进行噬菌体检测，约需12h左右，因而不能及时判断是否有噬菌体污染。

通过快速检测可大致确定是否有噬菌体污染，以采取必要的防治措施。

根据正常发酵(培养)液离心后菌体沉淀，上清液蛋白含量很少，加热后仍然清亮;而侵染有噬菌体的发酵(培养)液经离心后其上清液中因含有自裂解菌中逸出的活性蛋白，加热后发生蛋白质变性，因而在光线照射下出现丁达尔效应而不清亮。

此法简单、快速，对发酵液污染噬菌体的判断亦较准确。

但不适于溶源性细菌及温合噬菌体的诊断，对侵染噬菌体较少的一级种子培养液也往往不适用。

噬菌体的效价即1mL样品中所含侵染性噬菌体的粒子数。

效价的测定一般采用双层琼脂平板法。

由于在含有特异宿主细菌的琼脂平板上，一般一个噬菌体产生一个噬菌斑，故可根据一定体积的噬菌体培养液所出现的噬菌斑数，计算出噬菌体的效价。

此法所形成的噬菌斑的形态、大小较一致，且清晰度高，故计数比较准确，因而被广泛应用。

检测材料1.菌种敏感指示菌(大肠杆菌)、大肠杆菌噬菌体(从阴沟或粪池污水中分离)2.培养基两倍肉膏蛋白胨培养液，上层肉膏蛋白胨半固体琼脂培养基(含琼脂0.7%，试管分装，每管mL)，下层肉膏蛋白胨固体琼脂培养基(含琼脂2%)，1%蛋白胨水培养基。