丹参种质资源遗传多样性的AFLP分析_温春秀

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26份海州常山种质资源遗传多样性的AFLP分析

26份海州常山种质资源遗传多样性的AFLP分析
扩 增 片 段 长 度 多 态 性 (amplified fragmentlength polymorphism,简称 AFLP)分子标记技术是一项以 PCR反应 为基础的分子标记技术,具有 DNA用量少、多态性水平高、检 测位点多、分子识别率高等特点[7-9],近年来被广泛应用于鸡 冠花、银杏、珙桐和海棠等观赏植物的遗传多样性研究 。 [10-13] 本研究采用 DNA-AFLP分子标记技术,对来自我国 15个省 (区、市)26份种源的海州常山进行遗传多样性研究,从分子 水平揭示我国海州常山种质资源的遗传多样性水平和遗传进 化关系,为海州常山的良种选育和遗传变异性研究提供理论 基础。
江苏农业科学 2018年第 46卷第 11期
谢福春,曾现艳,程 瑶,等.26份海州常山种质资源遗传多样性的 AFLP分析[J].江苏农业科学,2018,46(11):19-23. doi:10.15889/j.issn.1002-1302.2018.11.005
— 19—
26份海州常山种质资源遗传多样性的 AFLPdau.edu.cn。
1 材料与方法
1.1 试验材料 根据中国数字植物标本馆、《中国植物志》及其他相关文
献记载确定海州常山标本采集地点,结合标本采样地点的地 理位置和 主 要 气 象 因 子 (年 均 温、日 照 时 数、无 霜 期、降 水 量),对海州常山种源分布进行区域划分,根据种源区划确定 15个省(区、市),根据每个省(区、市)资源的分布情况,确定 采集地点,共选取 26个采集地点(表 1),所选采集地点基本 覆盖了海州常山在国内的分布区域。采集的不同地区的海州 常山种源种植于山东农业大学种质资源圃,本试验采集的幼 嫩叶片均是来自不同地区的海州常山 3年生萌蘖苗。 1.2 DNA提取

丹参种质资源研究进展

丹参种质资源研究进展
水溶性成 分 的含量 研究 较少 ,因而有 必要 以水溶 形 成分 为
究概况进 行综述 。
1 种类资源
正 品丹 参来 源 于唇 形 科 植 物 丹 参 S li loria av mi i hz a tr
B ne u g 的干燥根 及根茎 。随着野生 资源的减少 ,0年 代 中期 7 药材丹参 已经供不 应求 , 目前 发现 鼠尾 草 属 S l/ a va共 有 4 0
出水溶性成 分 差 异不 显 著 ,有 药 理研 究 报 道【 , 东烟 台 ]山 产 的栽 培和野 生丹参在改 善家兔 心肌缺血性 心电 图异常 、 缩 小心 肌梗塞范 围 、 低血 压 、 高小 鼠耐 缺氧 能 力等 方 面无 降 提 明显差 异。天津 天士力 集 团在 陕西 商洛地 区建立 了 自己 的
资源 的研究进展 。认为在进行 丹参质 量评价 时 , 水溶性 酚酸类成 分还应 引起更 多的重 视 。在建立 优质 丹参 的规 范 化种植 基地 和新 品种选 育方面 , 仍有大 量基础研究 亟待开展 。
[ 关键 词 ] 丹 参 ; 种质资源 ; 进展
[ 中图分类号 ] 8 [ R22 文献标 识码 ] A [ 文章编 号]10—3220 )7 420 0 1 0 (020— 9— 5 0 4
维普资讯
第2 7卷第 7期
20 0 2年 7月
中 国 中 药 杂 志
Chn o r a fCh n s a e i e ia i aJ u n l iee M traM d c o
VD 2 NO. J 7. 7
Jl , 0 2 u y 2 0
多地 区开展丹参 的引种 栽 培 , 中四川 中江 、 其 山东 烟 台等 地
方制剂如 复方丹参注 射液 、 复方丹参滴 丸 、 复方丹参胶 囊 、 复 方丹参 片等 , 临床广泛用 于冠心病 、 绞痛 、 被 心 心肌梗塞 和脑 血管疾病 的治疗 。丹参 还具有抗 菌消炎 、 保肝 、 改善 肾功 能 、

丹参三倍体育性的细胞学分析

丹参三倍体育性的细胞学分析

丹参三倍体育性的细胞学分析鉴定,再将四倍体丹参与二倍体丹参正、反交(4x♀×2x♂或2x♀×4x♂),结实率都很高,收获种子播种后获得三倍体。

染色体倍性结果显示,丹参染色体基数x为8,二倍体(2n=2x=16)、三倍体(2n=3x=24)、四倍体(2n=4x=32)。

田间观察发现,三倍体丹参地上部分(茎、叶)均比二倍体丹参对照增加1~1.5倍,地下部分(芦头、根)比二倍体丹参增加2倍以上。

进一步分析结果显示,三倍体丹参在侧根数目明显增加,三倍体丹参主要活性成分测定显示,样品中的丹参酮IIA、丹酚酸B、丹参酮I、隐丹参酮等的含量均超过《中国药典》规定的水平。

三倍体(3x)是倍数最低的多倍体,一般是由四倍体(4x)与二倍体(2x)杂交产生的,具有多倍体和杂交种产生的双重优势,在药用植物中具有巨大的生产潜力。

从理论上讲,三倍体高度不育,只能依靠无性繁殖继代。

然而,生产实践中发现大多数三倍体具有部分可育性,其育性机制不清。

本研究以丹参三倍体为材料,通过解剖学、细胞遗传学的方法,分析了育性相关的细胞学特点,为阐明三倍体育性的机制提供实验依据,在丹参远缘杂交和多倍体育种生产实践中具有一定的实用价值。

1 材料与方法1.1 材料丹参三倍体材料由南开大学生命科学学院陈力教授馈赠,植物材料为三倍体组培苗,经炼苗后移栽至天津农学院试验田,常规大田管理,由于是组培苗移栽,在生长季植株陆续开花。

1.2 方法1.2.1 细胞学压片丹参三倍体花蕾生长早期,根据花蕾生长的长短不同进行取材,经卡诺氏固定液固定24 h后转入70%乙醇溶液中,4℃条件下保存备用。

采用常规压片法进行减数分裂染色体压片,选取未成熟的花药(长度在1~3 mm之间),用自来水浸泡、清洗20 min以上,然后用2.5%纤维素酶和2.5%果胶酶的混合酶液(2∶1)在28℃对材料酶解30 min,水洗后用1 mol/L HCl 60℃水解10 min,自來水冲洗3次,浸泡20 min,卡宝品红染色10 min。

丹参的生物学特性研究

丹参的生物学特性研究

丹参的生物学特性研究丹参,作为一种具有悠久药用历史的植物,其在中医药学中具有广泛的应用。

为了更好地了解丹参的生物学特性,本文将从形态特征、生态环境、分布区域、药用价值和研究现状等方面进行阐述,并展望丹参生物学特性研究的未来发展。

1、引言丹参,学名Salvia miltiorrhiza,属于唇形科植物。

丹参具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦等功效,广泛应用于治疗冠心病、心绞痛、心梗等疾病。

现代药理学研究表明,丹参还具有抗炎、抗肿瘤、抗氧化等多种生物活性。

因此,对丹参生物学特性的研究具有重要的理论和实践意义。

2、形态特征丹参为多年生草本植物,主根粗壮,分枝有时有极狭的翅。

茎直立,四棱形,具槽,密被长硬毛,多分枝。

叶状枝窄长圆形,上部渐尖,下部渐狭,基部具浅齿,两面密被柔毛,绿色或稍带紫色。

总状花序很短,具2-4朵花;花梗很短;花萼钟状,绿色;花冠蓝紫色,檐部微呈二唇形。

浆果熟时红色。

3、生态环境丹参生长于海拔1200-1700米的山沟、溪旁、山坡等生境中,适应性较强。

适宜生长的气候条件为温带和亚热带气候,喜欢凉爽、湿润的环境,耐寒、耐旱、喜肥沃的土壤。

4、分布区域丹参主要分布于我国安徽、山西、陕西和甘肃等地,以及其他亚洲国家和地区。

目前,已经有许多地方开始进行丹参的大规模人工栽培,以满足中药材市场的需求。

5、药用价值丹参具有广泛的药用价值,其根部和地上部分均可入药。

丹参含有多种化学成分,包括黄酮类、酚酸类、二萜类等。

药理研究表明,丹参具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗菌等多种生物活性,对于心血管系统、神经系统、免疫系统等疾病均有良好的治疗作用。

在临床应用方面,丹参常用于治疗冠心病、心绞痛、心梗等疾病,以及慢性肝炎、肝硬化等消化系统疾病。

此外,丹参在美容、保健品等领域也有广泛应用。

6、研究现状近年来,国内外学者对丹参的生物学特性进行了深入研究。

在基因组学方面,通过对丹参基因组的测序和分析,发现了许多与丹参药用功能相关的基因及其作用机制。

丹参种质资源研究进展_郭宝林

丹参种质资源研究进展_郭宝林

%
产地
河南1)(野)
河南2)(栽)
山东3)(野)
山东4)(栽)
四川中江(栽) 四川成都(栽) 上海崇明(栽)
陕西西安(栽) 河北 辽宁 江苏(栽) 安徽 湖北 江西 湖南 浙江 山西浦城
第 27 卷第 7 期 2002 年 7 月
中 国
China Journal of
中药杂志
Chinese Materia
Medica
V
ol .27 , N o .7 July ., 2002
·综述·
丹参种质资源研究进展
郭宝林 , 冯毓秀 , 赵杨景
(中国医学科学院 中国协和医科大学 药用植物研究所 , 北京 100094)
总丹参酮
6 .0[ 9]
3 .0 [ 9]
2 .39 ~
7 .0 [ 9 ,11] 0 .92 ~
2 .6[ 9, 11]
1 .4[ 9] 1 .4[ 9]
3 .6[ 9]
0 .16[ 8] 0 .06[ 8]
丹参酮 ⅡА 0 .42 ~
隐丹参酮 0 .135 ~
丹参素
0 .09 ~ 0 .15[ 11] 0 .09 ~ 0 9]
0 .035 ~ 0 .22[ 9, 11] 0 .046 ~ 0 .20[ 9, 11]
0 .015[ 9] 0 .049[ 9]
0 .06 ~ 0 .158 ,10]
0 .06 [ 10]
0 .18[ 8]
0 .07[ 8]
0 .10[ 8]
0 .04[ 8]
0 .8 [ 10]
0 .06 [ 10]
0 .116 [ 10, 13]
0 .05 ~ 0 .12[ 10] 0 .07 ~ 0 .19[8 , 10] 0 .097 ~ 0 .13[ 8, 13] 0 .04 ~ 0 .15[8 , 10]

丹参种质资源与优良品种选育研究进展

丹参种质资源与优良品种选育研究进展

平均每个引物组合产 生 2 . 17条多态 性条带 ,显示 了较 高 多 态 性 ,聚 类 分 析 将 供 试 材 料 分 为 两 大 类 2 )
[ 金项 目] 山东省科技 发展计 划项 目“ 基 山东道地药 材资源质量控制科技平 台建设 ” 课
1 1种 内变 异 . 迄今 报 道 丹 参 种 内有 2个 变 种 1个 变 型 ,包 括
说 明产 地 、环 境 、年 限对 水溶 蛋 白 的种类 与含 量 均
有 影 响 。郭 宝 林 等 采 用 R P A D技 术 对 4 4个 ( 9个
居 群 )丹 参 样 本 进 行 分 析 ,结 果 显 示 不 同 居 群 内 多态 位 点 比率 为 5 . % ,样 本 可 聚 为 6个 主要 分 50
样 本 进 行分 析 ,结 果 显 示 当相 似 系 数 为 0 4 . 8左 右 时 ,样 本 可 聚为 2大类 ,第 1大类 是 白花 丹参 ,第 2大类 是 栽 培 和野 生 样 本 ,提 示 丹 参 和 白花 丹 参 之
原 变 种 Smiir i a mlori 、单 叶 丹 参 & . lor z vr ii h a t h a , tr z
花冠 白色 或 淡 黄 色 、奇 数 羽 状 复 叶 、叶 色 淡 绿 ,为 山东 特产 。三 者根 部形 态 几无 区别 ,均 作药 用 j 。
间亲缘关系较远 。王 冰等 研究 发现 ,2 7个不 同 地 理 居 群 丹 参 多 态 性 带 比率 为 9 . 5 ,N is多 0 1% e’ 样 性 指 数 为 0 2 12 h n o . 6 ,S a n n多 样 性 指 数 , 为
支组和 3 个组外个体 ,遗传差 异的 8 . 4 0 4 %存在于 居 群 内 ,8 2 % 来 自于 组 内居 群 间 ,1 .7 的 遗 .9 2% 1 传差异来 自于组问 ,说 明丹参居群 内遗传多样性十 分丰 富,地 区 间 居 群 遗 传 分 化 不 均 衡 。郝 岗 平 等 采 用 A L F P技 术 对 山 东 l 5个 不 同 产 地 的丹 参

丹参种质资源的遗传多样性研究

丹参种质资源的遗传多样性研究

丹参种质资源的遗传多样性研究丹参(Salvia miltiorrhiza Bge)是我国常用大宗药材,具有广泛的药理作用,药材使用量逐年增加。

随着丹参野生资源的数量逐年减少,栽培面积逐年增大,但是栽培丹参存在严重混杂现象。

目前丹参的种植主要集中于四川的中江、陕西、山东、河南、河北等地。

对各产地丹参种源进行遗传多样性和群体遗传结构分析,明确各产地丹参资源的遗传基础和亲缘关系,可为丹参资源的收集保存、分类鉴定、合理开发利用奠定基础,对解决当前丹参种质资源混杂和指导丹参品种选育具有重要的意义。

本研究以来自山东省内外的9个丹参居群为材料,从形态学、细胞学、分子生物学等方面对其形态性状、开花生物学及繁殖特点进行了鉴定和观测,对供试丹参资源各居群的遗传多样性及亲缘关系进行了分析,对11个丹参分离类型进行了产量和品质性状的评价,从中筛选出适于泰安种植的优良栽培类型。

获得的主要研究结果如下:1.通过对9个居群的丹参种质资源地上部性状分析证明,42个性状中叶柄颜色、叶柄长、叶长、叶宽、叶形指数等叶片性状、花色、花萼颜色、株高、冠幅、分枝数等在丹参种质资源中的多样性较大;其遗传多样性存在于居群内和居群间且两者变异程度相近。

通过各居群的遗传多样性比较发现,泰安地区的丹参居群多样性程度最高,菏泽和四川中江的丹参居群较低,其它居群的多样性指数比较接近;省间材料聚类分析结果表明,河南内乡与河南卢氏丹参居群的亲缘关系最近,山东泰安与其它居群的亲缘关系最远;山东省内潍坊与临沂居群的亲缘关系最近,菏泽与其它居群的距离最远。

42个性状聚类可分成6组,综合为7个主成分,其累积贡献率达70.17%;根据主成分分析的结果与性状间的相关性,选出影响力较大的16个性状,包括花部因子、茎部因子、叶部因子等地上部性状,可较好的代替42个性状用于种质聚类分析。

利用欧式遗传距离进行UPGMA聚类可将90个材料分为6个类群;根据主成分分析结果和各类群特点,提出了丹参的分类标准,该标准对今后丹参种质的评价具有一定的指导意义。

不同种质丹参的药材有效成分比较

不同种质丹参的药材有效成分比较
曹# 珍 ,温春秀 ,赵建成 ,田# 伟 ,刘# 铭 ,周巧梅 ,谢晓亮
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( !: 河北师范大学,河北 石家庄# "?""!& ;%: 河北省农林科学院药用植物研究中心,河北 石家庄# "?""?! )
摘要:采用 /DEF 法,测定了不同地区丹参的丹参酮 ! 3 和丹酚酸 G 含量。结果表明:所检 测的 !? 个丹参品种,仅有 ? 个品种的丹参酮 ! 3 含量达到药典规定标准,而丹酚酸 G 含量 普遍高于药典规定标准;丹参酮 !3 与丹酚酸 G 之间没有正比关系,不能仅以一种含量作为 衡量丹参品质优良指标;河南卢氏皱叶丹参及四川中江丹参的品质较好,性状稳定,可推广 种植。 关键词:丹参;丹酚酸 G ;丹参酮 !3 ; /DEF ;含量 中图分类号: 7?&@: ? H C# # # 文献标识码:3
/:&$*)4$ : O( 0V,-),60 6K0 5(+60+68 (. 6,+8K2+(+0 !3 ,+[ 8,-V2,+(-25 ,52[ G 2+ [2..0*0+6 ,550882(+8 (. 8,-V2, T2-62(**K2Y, ,/DEF T06K([ ],8 )80[: OK0 5(+[262(+8 (. 5K*(T,6(4*,^K :6,+8K2+(+0 !3 : %"ZG3U 7G=F!A ( $: & _ !?" +T ) ]26K , T(12-0 ^K,80 (. F/CI/=/%" ( @? ‘ %? ) : OK0 [060562+4 ],V0-0+46K ],8 %@" +T: 8,-V2,T(-25 ,52[ G:%"ZG3U 7G=F!A ( $: & _ !?" +T )]26K , T(12-0 ^K,80 (. T06K,+(- =,506(+26*2-0=.(*= T25 ,52[=/ % I(C"‘ !"‘ !‘ ?> ) : OK0 [06562+4 ],V0 -0+46K ],8 %A& +T: I+-W ? 5(+60+68 (. 6,+8K2+(+0 ! 3 2+ 6K0 *((68 (. !"#$%" &%#’%())*%+" 5,+ *0,5K 6K0 86,+[,*[ (. 6K0 《 FK2+080 ^K,*T,5(^(02, 》 ( %""? ) : 3-- 6K0 5(+60+68 (. 7,-V2,+(-25 ,52[ G K,V0 *0,5K0[ 6K0 86,+[,*[ (. 6K0 《 FK2+080 ^K,*T,5(^(02, 》 : OK0*0 28 +( -2+0,* *0-,62(+= 8K2^ 106]00+ 6K0 5(+60+6 (. 6,+8K2+(+0! 3 ,+[ 6K0 5(+60+6 (. 7,-V2,+(-25 ,52[ G: OK0 a),-26W (. *((68 (. !"#$%" &%#’%())*%+" 8K()-[ 10 0V,-),60[ 2+ 1(6K (. 6K0 6]( ,8^0568 ;6K0 *((68 (. !"#$%" &%#’%())*%+" .*(T 725K),+ ,+[ /0+,+ K,V0 T(*0 V2*6),- 5(T^(+0+68 6K,+ 6K0 (6K0*8: OK0 6]( .2+0 86*,2+8 5,+ 10 2+6*([)50[: ;%< ="*0&: ,"#$%" &%#’%())*%+" G)+40 ;7,-V2,+(-25 ,52[ G ;O,+8K2+(+0 ! 3 ;/DEF; F(+60+6 丹参( ,"#$%" &%#’%())*%+" G)+40 )为唇形科( #"-%"’".) 鼠尾草属( 7,-V2, )植物,又名紫丹参、赤 参、大红袍,是常用中药之一。现代药理研究表明,丹参对心血管系统作用十分明显,已成为治疗冠 [ !] 心病最常用的中药之一 。丹参还具有抗氧化、抗动脉粥样硬化、降低心肌耗氧量以及抗肿瘤等作

丹参的杂种优势研究

丹参的杂种优势研究

Vol.56,No.05. 202210DOI:10.3969/j.issn.2095-1205.2022.05.04丹参的杂种优势研究何治学(西华师范大学生命科学学院四川南充637001)摘要丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)是唇形科鼠尾草属多年生草本,是我国传统中药材之一,主要分布于中国山西、河北、四川、安徽、山东等省份。

文章通过山东丹参(母本)与白花丹参(父本)的杂交实验得到F1杂交后代,并对杂交F1代在根的农艺性状和根中的主要活性成分含量上的杂种优势进行了分析。

研究结果:(1)杂交F1代在主根长度、主根直径、鲜根重量等方面普遍优于亲本;(2)杂交F1代的有效成分含量与母本和父本在隐丹参酮、丹参酮Ⅰ与丹参酮ⅡA的含量上差异显著。

结论:丹参的杂交F1代与亲本相比具有更好的性状、更优质的成分含量。

关键词农艺性状;有效成分;杂种优势;丹参中图分类号:S567.53文献标识码:A文章编号:2095-1205(2022)05-10-03丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)是双子叶植物唇形科鼠尾草属多年生草本植物,根系肥厚,外红色,内白色,肉质,叶常为奇数羽状复叶,顶生或腋生为总状花序或轮伞花序;花冠为紫蓝色,苞片多为披针形,花萼为钟形,紫色,果实为坚果,黑色,大多为椭圆形,于4月—8月开花。

丹参是我国传统的中药,其干燥的根及根茎主要用于治疗心脑血管疾病、慢性肾衰竭、月经不调等[1-2]。

丹参疗效显著,药理作用广泛,需求量逐年增加。

目前,丹参育种方式以引种和选种为主,但由于其表型受环境的影响较大,从而造成育种效率低、育种进程缓慢。

选育高产品种是丹参的一个重要目标,但由于产量和有效成分含量等农艺性状都是数量性状,其遗传机理复杂,阻碍了育种效率的提高。

本研究旨在通过对丹参形态特征的分析、药用活性成分的测定,探讨丹参的杂种优势,以期为丹参质量性状和有效成分含量的研究提供理论指导,为丹参高产性状的潜在利用与遗传改良奠定理论基础。

不同叶型丹参光合特性研究

不同叶型丹参光合特性研究

丹参 ( a va lirhz ) S li t r ia 为唇形 科 ( a i ee 鼠尾草 属 ( a va 植 物 , 干燥 根 和根茎 是我 国药典 规定 的 mi o L ba a ) c S li) 其 中药丹参 的唯一 正 品来 源 , 心血管 系 统 疾病 、 瘤 等 具 有 良好疗 效 口 。 四川 、 东 、 南 等省 均 有 丹 参栽 培 , 对 肿 ] 山 河 其 中J 产 丹参 因色 红 、 I l 肉厚 、 有效 成分 含 量高 , 在各 产 区丹参 中品质最佳 _ 。川丹参 栽 培集 中于 四川省 中江 县 , 3 ] 丹
第 2 卷第 4 o 期
草 业 学 报 2 1 年 01
型丹 参 与小 叶 型丹参 , 照《 参 中江丹 参标 准化 技术 规程 》 进 行栽 培 管理 。 _ 】
1 2 光 响 应 曲 线 .
20 0 9年 9月选 择 晴朗天 气 , 9 3 —1 :0和 1 : 0 6 。 于 :0 1 3 4 O —1 :0利 用 L 一4 0 T便 携 式 光合 作 用 系 统测 定 仪 i 0X 6 配 置 的人工 光 源 , 定 叶绿 素 吸收 高 峰 的红 蓝 光 , 定 光 照 强 度 为 0 2 , 0 7 , 0 , 5 , 0 , 5 , 0 , 0 , 选 设 , O 5 , 5 1 0 1 0 2 0 2 0 3 0 4 0 6 0 8 0 10 0 14 0 16 0和 2 0 mo/ m。・ ) 使 用 开放气 路 , 0 , 0 , 0 , 0 , 0 0 0 l( s, 由系统 每隔 3mi n自动记 录每 个光 强下试 验 材 料 叶片各 自的净光 合 速率 。测定 期 间空 气 C 浓 度 约为 3 0u lmo , 温 约 为 3 ℃ , 对 湿度 约 为 4 。 O 7 mo/ l气 2 相 5

近五年丹参生药鉴定跟质量评价研究探究 进展定稿

近五年丹参生药鉴定跟质量评价研究探究 进展定稿
1生药研究进展
1.1药材性状
付桂芳等[3]研究了丹参栽培品、野生品及其不同产地丹参药材的性状特征。其中野生品根茎短粗,根有数条,长圆柱形,表面棕红色或暗棕红色,粗糙,老根紫棕色,常呈鳞片状剥落,断面疏松,有裂隙或略平整而致密,皮部棕红色,木部灰黄色或紫褐色。栽培品根粗壮,多分枝,表面砖红色或红棕色,具纵皱纹,外皮紧贴不易剥落。质坚实,断面黄白色。其中四川产栽培品根粗壮肥实,少分枝,断面黄褐色,略呈角质样。
Key words:Salviae miltiorrhiza radix et rhizoma;identification;quality evaluation;review
唇形科植物丹参Salvia miltiorrhizaBge.的干燥根及根茎,是历版《中国药典》丹参的唯一来源。丹参是目前心脑血管疾病的首选药材,药材需求量和药材真伪优劣均受到人们的极大关注。但在部分地方药材标准以及民间用药中,同属多种植物亦被混作丹参药用[2]。由于丹参产地广、家种丹参与野生丹参均药用、丹参种质资源不明确,丹参属植物种类多,变异大。种种原因对市售丹参药材的品质鉴定和质量控制均带来一定的影响。不同产地、不同生境、不同来源丹参药材的成
1.2药材显微
野生与栽培丹参横切面有显著差异[3-4]:野生丹参根的周皮细胞层数多、色重;皮层宽,部分产地的样品有石细胞;维管束4~12个,韧皮部与木质部比值大,木质部由直径较大与直径小的导管束相间排列而成。栽培丹参周皮细胞层数少,色淡;一般无石细胞;维管束8~12个,韧皮部与木质部比值小,导管周围有众多木纤维,导管束非大小相间排列;其中四川产栽培丹参维管束多达19~24束,导管稀疏径向排列,木纤维少。王萌等[5]通过横切面比较,发现不同产地丹参显微结构上存在许多共性,但在落皮层的有无、木栓层厚度及木栓化程度、木质部导管多少、孔径大小及排列方式上存在不同程度的差异。

丹参SmWRKY33基因的克隆与表达分析

丹参SmWRKY33基因的克隆与表达分析

龚 婷,刘灵娣,温春秀,等.丹参SmWRKY33基因的克隆与表达分析[J].江苏农业科学,2024,52(3):53-60.doi:10.15889/j.issn.1002-1302.2024.03.008丹参SmWRKY33基因的克隆与表达分析龚 婷1,2,刘灵娣1,温春秀1,武玉翠2,王 升3,万修福3,孙亚倩1,姜 涛1(1.河北省农林科学院经济作物研究所,河北石家庄050051;2.河北工程大学园林与生态工程学院,河北邯郸056038;3.道地药材国家重点实验室,北京100700) 摘要:为了研究WRKY33基因在丹参非生物胁迫中的作用机制,以白花丹参为试验材料,对丹参转录组数据进行分析,挖掘出丹参WRKY33基因参考序列并设计特异性引物,利用基因克隆技术从丹参中克隆出WRKY33基因的全长cDNA,命名为SmWRKY33。

对SmWRKY33基因进行生物信息学分析,同时利用荧光定量方法探究SmWRKY33基因在逆境胁迫下的表达模式。

结果表明,SmWRKY33基因核苷酸长度为1635bp,编码544个氨基酸。

生物信息学分析显示,SmWRKY33基因的理论相对分子量为60835.66,等电点为7.00,定位于细胞核,不存在跨膜区及信号肽,SmWRKY33蛋白为不稳定亲水蛋白。

亲缘关系显示,SmWRKY33与紫苏、芝麻、白花泡桐的WRKY33亲缘关系较近。

密码子偏好性分析得出拟南芥真核表达最适应丹参SmWRKY33基因的外源表达。

qRT-PCR结果表明,SmWRKY33基因在低温、高温、PEG、NaCl等逆境胁迫诱导下具有不同的表达模式,其中低温、NaCl能显著诱导SmWRKY33基因的高表达,说明该基因对温度调节、盐胁迫较为敏感,猜测其参与温度、盐胁迫调控反应机制。

本试验首次从丹参中克隆出SmWRKY33基因,探讨了该基因在丹参逆境胁迫下的作用机制,旨在为培育丹参的抗逆新品种提供参考基因。

关键词:丹参;SmWRKY33基因;生物信息学;qRT-PCR;基因克隆 中图分类号:S567.5+30.1 文献标志码:A 文章编号:1002-1302(2024)03-0053-08收稿日期:2023-04-11基金项目:中央本级重大增减支项目(编号:2060302);国家现代农业产业技术体系建设专项(编号:CARS-21);河北省重点研发计划专项(编号:22326301D)。

丹参种质资源与优良品种的选育研究

丹参种质资源与优良品种的选育研究

丹参种质资源与优良品种的选育研究作者:王剑来源:《农业灾害研究》2022年第01期摘要作为临床常见中药,丹参的价值十分明显。

丹参属于唇形科鼠尾草属植物,可入药的部分为根茎、干燥根。

目前,我国种植丹参的地区有很多,比如四川、山东、河南等。

丹参的产量和品质保证最关键之处在于优良品种选育。

现阶段,丹参品种选育工作存在着一些问题,制约了丹参产业的发展。

基于此,着重分析了丹参种质资源和优良品种选育的相关内容,旨在提供理论参考。

关键词丹参;种质资源;优良品种选育中图分类号:R282.71 文献标识码:B 文章编号:2095–3305(2022)01–0166–031 丹参资源分布1.1 地域分布我国丹参产地主要包括四川、山东、河南、陕西、安徽、湖北等,国外丹参多集中在地中海、中西亚等温热带地区。

野生丹参喜阳光,大多生长在山坡、草丛、溪旁等有陽光照射的位置,同时,丹参喜温暖湿润,相较于旱地土壤和黏质土壤,在砂质土壤中更利于丹参生长生存[1]。

此外,丹参分布地区从海拔高度来看,跨度较大,在低于1 000 m的地域或2 000~3 000 m的地域都能见到丹参的身影。

虽然丹参喜欢温暖,但却有着较强的抗寒性,其茎叶部分能够承受的最低温度为-5℃,而根部能够承受的最低温度可达-15℃。

1.2 种质资源正品丹参属于唇形科鼠尾草属植物,根茎、干燥根可入药,而与之同属的植物根茎很多也会以丹参的身份入药。

从全球范围来看,在现有的统计数据中,有1 050种鼠尾草属,从其形态特征的不同,又划分为弧隔鼠尾草亚属、荔枝草亚属、美洲鼠尾草亚属以及鼠尾草亚属。

我国目前现有种类有78种,还有24个变种,8个变型,在我国诸多地区都有生长。

2 丹参种质鉴定2.1 性状鉴定丹参根茎短粗,顶端有时残留茎基。

根数条,长圆柱形,略弯曲;表面棕红色或暗棕红色,粗糙,具纵皱纹;质硬而脆,断面疏松有裂隙;皮部棕红,木部灰黄,导管黄白色呈放射状排列。

气微,味微苦涩。

丹参种质资源的数量分类研究_郭林林

丹参种质资源的数量分类研究_郭林林
Guo Linlin1 ,Zong Chengkun1 ,Liu Tian1 ,Liu Zhengbo2 ,Song Zhenqiao1* ,Wang Jianhua1
( 1. College of Agronomy,Shandong Agricultural University,Taian 271018,China; 2. Taian Academy of Agricultural Sciences,Taian 271000,China)
Key words Salvia miltiorrhiza; Numerical taxonomy; Principal component analysis
丹参( Salvia miltiorrhiza Bge. ) 为唇形科鼠尾 草属多年生草本植物,以根及根茎入药。丹参作 为治 疗 心、脑 血 管 病 常 用 的 重 要 原 料,药 用 量 巨 大,是我国重要的大宗药材之一。在多年的丹参 栽培和种植过程中发现丹参种质资源丰富,具有 在生物学性状、农艺性状、根系性状等方面各具特 点的丹参栽培类型,除中国植物志[1]报道的丹参 有两个变种一个变型,即原变种丹参( S. miltiorrhiza var. miltiorrhiza) 、单 叶 丹 参 ( S. miltiorrhiza var. charbommellii) 和白花丹参 ( S. miltiorrhiza f.
在欧氏距离 8. 29 处,性状可被分为两大类, 第一类包括叶长、叶柄长、花序长、叶宽以及复叶 数等数量性状,另一大类包括花部特征如花色、花 器官各部分长度和叶面、叶色、叶形指数等特征以 及分枝数。将欧氏距离定位在 7. 6 左右时,可将 性状分成 8 组,第 1 组包括复叶数、茎生叶叶缘、 株高等性状; 第 2 组主要包括反映叶片大小的性 状,如叶柄长、叶长、叶宽以及叶缘,另外还包括花 部特征花序长、花轮数、雄蕊长 3 个性状; 花部性 状主要集中在第 3 组,包括花色、花径、花长、花梗 长、花药长等; 第 4 组反映了叶片特征中的叶形指 数性状; 第 5 组包括花形指数和茎生叶叶色; 第 6 组包括茎基部颜色、耐涝性以及雌蕊长; 第 7 组包 括下唇裂片深浅及其边缘颜色和冠幅; 第 8 组包 括了茎生叶和基生叶的叶面特征和叶柄颜色,还 包括了基生叶叶色、茎色,以及一级分枝数和二级 分枝数。

玉米育种计划书

玉米育种计划书

玉米育种计划书玉米育种计划书篇一:作物育种计划书篇一:路。

实验一作物育种计划书的制定及实施实验一育种试验计划书的制定及实施进行作物育种试验时,首先必须制定出详细的育种计划和实施方案,使各项工作得以有计划地进行,也便于按阶段或年度检查试验地执行情况。

田间试验计划书的制定及播前试验材料的准备,则是每年度育种试验工作的开始,也是承上启下确保育种工作顺利进行的基础。

由于作物育种是一个连续的过程,试验的项目和材料多,既有室内准备,又有田间实施。

因此,必须遵循一定的方法、步骤和操作规程,以免发生差错,造成难以弥补的损失。

1.1 作物育种计划书的制定一、实验目的学习和初步掌握作物育种试验计划书的制订;通过参加或了解水稻、小麦、玉米等某一个作物育种试验的播种前后准备工作,熟悉和掌握作物育种工作计划的实施。

主要内容包括年度的田间试验计划书的制订及播种前试验材料的准备和田间实施。

二、内容说明(一)播种材料的整理将去年经过分析研究,评选留用的各种试验材料,按照原来试验的种类和小区号码的先后顺序,分别排列于种子箱内,并与上年田间试验计划书或田间记载表核对,检查无误后待用。

(二)种子检验1、种子净度指种子清洁、干净的程度,用目测鉴定法检验。

即种子样品中去除去杂质和废种子后,留下本作物的好种子的重量占样品总重量的百分率。

2、种子发芽力指种子在适宜条件下发芽并长成正常幼苗的能力。

常用发芽势和发芽率表示。

种子发芽势是发芽试验初期(规定日期内)正常发芽种子数占供试种子数的百分率。

发芽势高,种子生活力强,出苗整齐一致。

种子发芽率是发芽试验终期(规定日期) 全部正常发芽种子数占供试种子数的百分率。

种子发芽率高,有生活力的种子多,播种后出苗率高。

发芽势和发芽率以3次重复的平均数表示,计算至整数。

正常发芽种子的标准禾谷类作物种子的幼根达种子长,幼芽至少达种子的1/2长。

正常发芽种子的标准禾谷类作物种子缺根、缺芽或根芽畸形、腐烂。

3、种子水分指种子所含水分的重量占样品重量的百分率。

遗传多样性文献的学习

遗传多样性文献的学习

多样性指数(I)。
安徽及周边地区枣种质资源遗传多样性研究
—2011年
通过对安徽地方枣品种及周边省的枣资源进行 ISSR分析,拟揭示安徽枣种质资源的遗传多样性, 为其分类、育种、资源保护及合理利用提供有力 证据。 从32条随机ISSR 引物中筛选出26条扩增条带清晰、 多态性好的引物对84份枣种质资源进行 扩增分析, 利用Ntsys-pc2.1统计软件,计算遗传相似系数, 然后用UPGMA法进行聚类分析,构建聚类图。根据 聚类结果和相似系数分析各品种间亲缘关系及起 源。
茶树‘黄山种’自然杂交后代遗传多样性分析 —2010年 通过ISSR分子标记结合形态学性状,对‘黄山种’ 自然杂交后代进行研究,分析群体品种内的遗传 多样性,从而为茶树的系统选种提供一定的理论 依据。
进行了形态学性状调查,ISSR标记。 形态学性状的平均变异系数、 Shannon-weave 指 数、多态性信息指数、有效等位基因数(Ne)、 基因多样性指数(H)和Shannon 信息指数(I)。
进行了DNA提取和PCR扩增及数据分析。 计算SM相似指数, UPGMA法进行聚类,同时进行主 坐标分析和Mantel检验聚类结果和相似指数矩阵 之间的相关性。
中国板栗3个野生居群部分表型性状的遗传多样性 —2008年 采用分子系统学的原理,从表型和分子两个层面对 长江流域、华北和西北等中国板栗种下居群群体 遗传结构及遗传多样性进行了研究,为我国野生板 栗资源的保护和持续利用提供科学依据。 对叶片、果实形态和主要营养成分进行了调查研 究。 进行了表型性状与生态因子(经纬度、海拔高度 和年降雨量等)的相关性分析,得到相应的相关 系数, 并进行显著性测验。
荆门棠梨野生居群遗传多样性分析 —2011年

丹参新品系多点品比试验研究

丹参新品系多点品比试验研究

中图分类号: S567 文献标识码: A
丹 参 为 唇 形 科 ( Labiatae ) 鼠 尾 草 属 植 物 丹 参
( Salviae MiltiorrhizaBge ) 的干燥根及根茎
[1]
ꎬ 又名紫
丹参、 红根、 赤参、 血参等ꎬ 始载于 « 神农本草经» ꎬ
好ꎮ 性状总结如下ꎮ
2 1 2 1 品系 DZ - 16 - 03
一级根和二级根根粗较细ꎬ 根外表皮颜色淡红ꎬ
分根 数 少ꎬ 根 幅 深 小ꎬ 根 幅 宽 小ꎬ 根 鲜 重 均 值
177 75gꎮ
2 1 2 2 品系 DZ - 16 - 105
一级根和二 级 根 根 粗 较 粗ꎬ 根 部 外 表 皮 颜 色 红
2 1 2 4 品系 DZ - 16 - 05
颜色ꎬ 叶片裂叶情况ꎬ 叶片颜色ꎬ 叶片粗糙程度和一
值 221 12gꎮ
一级根和二级根根粗细ꎬ 根部外表皮颜色红色ꎬ
冠长ꎻ 质量性状 7 个ꎬ 分别为茎生单复叶情况ꎬ 花冠
级茎分枝数ꎬ 二级茎分枝数ꎮ 进行数据统计ꎬ 并平行
分根数少ꎬ 须根较多ꎬ 根幅深小ꎬ 根幅宽小ꎬ 根鲜重
摘 要: 通过丹参田间多点品比试验研究ꎬ 优选丹参新品种ꎮ 以从丹参种质资源中通过系统选育方法获得的丹参
新品系 ZT-16-15、 DZ-16-03、 DZ-16-105、 DZ-16-05ꎬ 作为品比试验品系ꎬ 以当地大田生产的常规品种为对
照ꎬ 于 2019 年、 2020 年在山东丹参主产区选择临沂市平邑县温水镇太平庄村和宋河村、 临沂市平邑县郑城镇南

2 2 2 4 品系丹参地下部分性状稳定性考察
过数据测定与连续 2 年数据比较ꎬ 见图 2ꎬ 分析可知

四产地丹参主要成分的含量测定与分析

四产地丹参主要成分的含量测定与分析

四产地丹参主要成分的含量测定与分析
卢平;万民;陈洪燕
【期刊名称】《中国药业》
【年(卷),期】2005(014)010
【摘要】目的:测定不同产地丹参的主要化学成分及其含量.方法:采用95%~50%乙醇-水的综合工艺流程提纯丹参的脂溶性和水溶性成分,并用薄层双波长扫描法检测丹参酮ⅡA、丹参素、原儿茶醛的含量.结果:经常规对照检测,各产地丹参的脂溶性成分丹参酮ⅡA、水溶性成分丹参素的含量有显著差异,但水溶性原儿茶醛的含量差异不明显.结论:该测定结果可为临床及科研选用丹参提供参考.
【总页数】2页(P33-34)
【作者】卢平;万民;陈洪燕
【作者单位】湖北省中医药研究院中西药研发中心,湖北武汉430074
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.不同产地的丹参中丹参酮ⅡA的含量测定 [J], 刘铭;彭玮欣;田伟;温春秀;焦永刚;谢晓亮
2.不同产地丹参中丹参酮ⅡA的含量测定 [J], 张坤;王晓东;宋巍;李宏宁;徐山
3.四产地丹参主要成分的含量测定初探 [J], 沈云士
4.不同产地苍耳子HPLC指纹图谱及主要成分含量测定研究 [J], 何钦;郑薇;李伟东;
金俊杰;蔡宝昌;董自波;秦昆明
5.不同产地丹参药材中丹参酮ⅡA与丹酚酸B的含量测定 [J], 霍铭;杨子华
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药用植物种质资源研究进展

药用植物种质资源研究进展

药用植物种质资源研究进展
楚桐丽;丁平
【期刊名称】《广州中医药大学学报》
【年(卷),期】2006(023)002
【摘要】综述了目前药用植物种质资源的研究方法及评价体系,指出当前药用植物种质资源研究中存在的问题是:(1)没有健全的种质资源评价体系;(2)真正的种质资源考察、比较、鉴别研究十分匮乏;(3)"道地药材"这一种质资源缺乏生物学的阐明;(4)种质资源流失严重.认为应重视对药用植物种质资源的系统研究.
【总页数】4页(P172-175)
【作者】楚桐丽;丁平
【作者单位】广州中医药大学,广州,510405;广州中医药大学,广州,510405
【正文语种】中文
【中图分类】R282
【相关文献】
1.我国药用植物种质资源遗传多样性及其研究进展 [J], 刘萍;马宏玮;王掌军
2.药用植物种质资源超低温保存及遗传变异特性研究进展 [J], 王晗;雷秀娟;宋娟;尹红新;王英平
3.我国药用植物种质资源离体保存研究进展 [J], 张俊;蒋桂华;敬小莉;陈佳妮;唐梅;陈琴;朱敏凤
4.药用植物穿心莲种质资源、育种及栽培研究进展 [J], 陈东亮;钟楚;林阳
5.药用植物苦马豆研究进展及种质资源收集的意义 [J], 王亚男;张雨;郑长远;苏丹丹;刘玉萍;苏旭
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药用灵芝遗传多样性的AFLP分析

药用灵芝遗传多样性的AFLP分析

药用灵芝遗传多样性的AFLP分析
郑林用;贾定洪;罗霞;杨志荣
【期刊名称】《中国中药杂志》
【年(卷),期】2007(32)17
【摘要】目的:分析不同药用灵芝栽培菌株的遗传差异,为灵芝道地性研究、种质资源鉴定、亲缘关系研究、品种选育和引种栽培提供分子生物学依据。

方法:以24个来源不同的灵芝及紫芝栽培菌株和野生菌株为材料,采用扩增酶切片断多态性AFLP 方法,用NTSYSpc 2.1软件进行UPGMA法聚类分析,构建遗传系统树。

结果:筛选14对引物,共扩增出177条多态性谱带。

聚类结果表明利用AFLP技术可将全部供试材料区分开。

结论:药用灵芝栽培菌株在分子水平上存在较大差异,并在相似系数0.676水平上聚为赤芝群和紫芝群。

【总页数】4页(P1733-1736)
【关键词】AFLP;灵芝;遗传多样性;聚类分析
【作者】郑林用;贾定洪;罗霞;杨志荣
【作者单位】四川大学生命科学院;四川省农业科学院土壤肥料研究所
【正文语种】中文
【中图分类】S567
【相关文献】
1.南繁区稻瘟病菌遗传多样性和群体遗传结构的AFLP分析 [J], 朱名海;皮磊;舒灿伟;周而勋
2.红麻种质资源遗传多样性和分子鉴定技术研究Ⅱ.红麻种质资源的遗传多样性和亲缘关系的AFLP分析 [J], 程舟;杨晓伶;卢宝荣;鲛岛一彦;陈家宽
3.荧光AFLP和拮抗实验对灵芝菌遗传多样性研究 [J], 潘丽晶;沈汉国;陈继敏;张妙彬;蔡晓平
4.金花茶遗传多样性和遗传结构AFLP分析 [J], 李辛雷;王洁;殷恒福;范正琪;李纪元
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收稿日期:2007-05-30基金项目:河北省科技攻关项目(06276409D)作者简介:温春秀(1965-),女,河北藁城人,研究员,主要从事药用植物种质资源收集、品种选育研究通讯作者:谢晓亮(1962-),男,河北清苑人,研究员,主要从事药用植物栽培育种研究。

丹参种质资源遗传多样性的AFLP 分析温春秀,吴志明,田 伟,刘 铭,周巧梅,谢晓亮(河北省农林科学院经济作物所,河北石家庄050051)摘要:对55份不同来源的丹参材料,采用扩增片段长度多态性(AFLP)标记,对丹参种质资源在DNA 水平上进行遗传多样性研究,利用NTSYSpc 2.1软件采用非加权配对算术平均法(UPGMA)方法进行聚类分析和计算遗传距离,构建遗传系统进化树。

筛选得到的6对引物的扩增片段具有丰富的多态性,丹参种质资源存在很大的遗传变异,它们之间的相似系数为0123~0176,聚类分析将丹参种质资源分为4个主要类群。

丹参种质资源存在丰富的遗传多态性,AFLP 聚类分析结果与表型特征不完全一致,可能是基因型和环境共同作用于表型的结果。

关键词:丹参;种质资源;扩增片段长度多态性(AFLP);遗传多样性中图分类号:S567 文献标识码:A 文章编号:1000-7091(2007)增刊-0122-04AFLP Analysis of Genetic Diversity of Salvia miltiorrhiza BgeWEN Chun -xiu,WU Zh-i ming,TIAN Wei,LIU Ming,Z HO U Qiao -mei,XIE Xiao -liang(Institute of Economic Crop Research,Hebei Academy of Agriculture andForestry Sciences,Shijiazhuang 050051,China)Abstract:Amplified fragment length polymorphism (AFLP)was carried out to analyze genetic variation of 55Salvia miltiorrhiza Bge.collec ted in China,Unweighted pair -group method of with arithmetical avera ges (UPGMA)cluster ana-lysis using NTSYspc 2.1soft was used to construc ted a dendrogram to estimated the genetic distances among the popula -tions.All populations could be uniquely distinguished using 6selec ted primer combinations,similarity coefficients ranged from 0123to 0176among the populations,dendrogram revealed distinct segre gation of all the germplasms into four main groups.There is great genetic diversity within the tested 55collections in Salvia miltiorrhiza B ge,AFLP based phylogeny was not absolutely consistent with the based on morphological c haracters may be due to the interaction effect between genotype and environment.Key words:Salvia miltiorrhiza B ge;Germplasm resourse;AFLP;Genetic diversity 丹参(Salvia miltiorrhiza Bge.)为唇形科(Labi -atae juss )鼠尾草属多年生草本药用植物,以根入药,具有活血调经、镇静安神、消肿止痛等功效[1]。

近年来的研究发现,丹参在治疗心脑血管、降低/氧化疲劳0和抗病毒等方面均具有重要作用,能有效抑制体外肿瘤细胞的增值,能高效拮抗乙肝病毒核心抗原(HBe Ag),有较好的抗艾滋病毒(HI V)作用[2]。

丹参药材使用量越来越大,种植面积逐年增大,广泛分布于华北、华东、西南、西北等地,但是各地栽培的丹参种质资源混杂,而且不同地区的丹参种质资源药用成分含量差别很大,严重影响着丹参药材质量的稳定性,已经成为丹参规范化栽培(GAP)及优良丹参品种(系)大面积推广的瓶颈。

从分子水平上对全国的丹参种质资源进行遗传多样性分析,揭示这些丹参种质资源的遗传基础,对解决当前丹参种质资源混杂和指导丹参品种选育具有重要的意义。

1 材料和方法1.1 材料材料采自河北省农林科学院药用植物种质资源圃,根据植物形态特征初步确定了55个不同种质类型,其中C1-C5,C13,C16,C17,C25来自河北安国,C29来自河北井陉野生;C6,C10-C12,C14-C15,C26-C28,C40-C42,C45-C47,C49-C54来自山东;C7-C9,华北农学报#2007,22(增刊):122-125C18来自甘肃;C19-C24,C43来自陕西;C30-C33来自河南卢氏,C34-C36,C44为河南灵宝;C37-C39,C48来自河南方城,C55来自四川中江。

AFLP 分子标记试剂盒购自鼎国生物技术有限公司。

1.2 方法1.2.1 丹参DNA 提取 采用C TAB 法进行丹参植物总DNA 的提取[8]。

1.2.2 AFLP 分析 采用Eco R I/Mse I 酶切组合进行试验,接头、引物序列以及试验方案按照鼎国公司AFLP 试剂盒的技术说明书进行。

总DNA 以Eco R I 和Mse I 双酶切,然后加入Eco R I 和Mse I 接头和T4DNA 连接酶16e 连接过夜,其中所用的Eco R I 接头为:5c -C TC GTA GAC TGC GTA CC -3c ,Mse I 接头为:5c -GAC GAT GAG TCC TGA G -3c 。

酶切连接产物稀释10倍后用于AFLP 预扩增反应模板,预扩增的引物为Eco R I 预扩引物序列:E1:5c -GAC TGC GTA CCA ATTCA -3c ,Mse I 预扩引物序列:5c -GAT GAG TCC TGA GTA AC -3c 。

扩增反应条件:94e 4min;94e 1min,56e 1min,72e 1min;26个循环后,72e 再延伸10min 。

预扩增产物稀释20倍后用于选择性扩增的模板。

选择性扩增引物序列为Eco R I 和Mse I 的核心引物序列加上3个选择性碱基。

采用的引物组合为Eco R I/Mse I 引物组合。

扩增反应条件:第一轮扩增参数:94e 30s,65e 30s,72e 80s;以后每轮循环温度递减017e ,扩增12轮;.接着按下列参数扩增23轮:94e 30min,55e 30s,72e 80s 。

1.2.3 数据处理与分析 将电泳图谱的同一位置上的条带视为一个性状,有条带记为010,无条带记为/00。

数据分析用GeneScan 和GenotyperTM软件分析处理,峰值大于200的50~500bp 之间条带记为有效带。

运用NTSYSpc 2.1软件分析计算Ne-i Li 遗传距离和相似系数,聚类分析采用UPGMA 方法构建系统发育树。

2 结果与分析2.1 引物筛选Eco R I+3/Mse I+3引物组合对5个差异表现大的丹参种质进行了多态性检测,选择扩增片段数较多和多态位点百分比较高的引物组合(表1)。

结果选择的6对引物组合中,不同的引物组合所得到的扩增片段数在54~108条之间,平均为79条带,多态性扩增片段为45~96条带,平均为68条带,多态位点百分比在7411%~9113%之间,平均达到8617%。

可见,AFLP 检测丹参种质资源的遗传多样性效率很高,也表明丹参种质资源的遗传多样性极为丰富(图1)。

2.2 55份丹参种质资源的聚类分析结果依据55份丹参种质AFLP 分析由上述6套引物组合扩增的DNA 条带的统计数据,计算种质间的遗传相似系数而构建了系统树状图(图2)。

从聚类分析证明丹参种质在遗传上表现出多态性极为丰富。

在系统树状图中55份种质明显分为4组,第1组包括的种质最多,共有28个种质,主要包括了河北安国、甘肃、河南、山东和陕西等地的丹参种质,这个类群最多,种质在相似系数为0171时分为18个亚组。

第2组包括3个种质为河北种质C3,C5和山东种质C6,分为2个亚组。

第3组包括10个种质,按照相似系数为0165分为6个亚组,包括河南种质、陕西种质、山东种质和四川中江种质。

第4组有13个种质,主要是山东种质和河南种质,分为6个亚组。

丹参种质资源变异丰富,即使是同一地区的种质也表现极大的遗传变异,它们之间的相似系数仅为0123~0176,说明丹参的人工选择程度很低,且组内的遗传相似系数高于组间的遗传相似系数。

表1 6个筛选引物组合对5份丹参种质材料的扩增多态性和多态率Tab.1 The polymorphism amplified by 6selected primer combinations from 5Danshen germplasm引物组合Pri mer crosses 扩增片段总数Total bands 多态性片段Polymorphic fragment 多态性位点百分率/%PercentE+ACC/M+CAC7-2544583.3E+ACC/CTC7-6726387.5AAG/CAC 4-2856874.1AAG/CTA4-5585391.3AAG/CTG 4-71089688.8ACG/CA T 8-4998787.8总计/平均Total/Average476/79412/6886.7图1 55份丹参种质AFLP 分析图谱(选择性引物E -AAG/M -CAC)Fig.1 Banding patterns of Danshen materials amplified by the selected primer combinationE -AAG/M -CAC3 讨论AFLP 是一种广泛用于种质遗传多态性研究、作物品种的鉴定、基因定位种质鉴定和标记辅助育种增刊温春秀等:丹参种质资源遗传多样性的AF LP 分析123等方面的研究[3-6]。

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