临床微生物样本采集规范-讲解版本

男性尿道：用泌尿生殖道拭子插入尿道腔 2 ～ 4cm，旋转拭子，至少停留20s，而 使之容易吸收。
生殖道标本的采集方法
女性阴道：擦除过多的分泌物和排出液，用2 支无菌拭子从阴道穹隆部黏膜处获取分泌物。 1支需要涂片,1支拭子做培养。
女性尿道：患者排尿1h后采集，拭去尿道口的 渗出物，用拭子通过阴道，靠着耻骨联合，按 摩尿道，采集尿液。
血培养瓶在采血接种后在室温不超过 数小时。
血培养瓶在接种前和接种后均不得冷 藏或冷冻。
采血量
成人为8～10 ml,儿童3～5 ml
有人引述多篇文章指出:对成人每增加1ml 血量平均能提高阳性率3.2% 。
体重 Kg 抽血量ml
套
<1
1-2
1
1.1-2
4
2
2.1-12.7
6
2
12.8-36.3
5、长期留置导尿管的患者应在更换新管 时留取尿标本。
泌尿标本送检的规范
采集后的标本应立即送检，否则可暂存 于4℃冰箱。室温都有利于病原菌和污染菌 会生长繁殖，因此若30min内不能及时培养 尿液则必须冷藏，但也不能超过24小时。
三、下呼吸道分泌物（痰培养） 标本采集与送检规范
咳痰途经口咽部
抗生素时代，感染仍是 人类健康的主要“杀手”
正确的采取与运送标本 是临床微生物检验成功的关键
如果标本采集与运送不当，即使有经验的实验室工作者 及最好的仪器设备也难以弥补在采集和运送标本时引入 的误差和错误。标本采取与运送的规范化是准确、及时 地向临床提供重要临床感染信息的基础；故标本采集与 运送是细菌培养检验质量保证的重要环节之一。
分泌物采集与送检规范
2、闭锁性脓肿：如淋巴脓肿、肺脓 肿、肝脓肿、腹腔脓肿、盆腔脓肿等 ，对封闭的脓肿常采用穿刺或引流的 的方法采样，应在用药前采集，应注 意脓液的气味、性状、颜色注意厌氧 菌存在的可能。不能及时送检应应用 输送培养基。
分泌物采集与送检规范
3、烧伤伤口：清创，出现渗出液后以拭 子用力采集，仅作需氧培养。也可送检活 检组织标本。
类为合格标本：6类为气管穿刺液，如未见到白细胞，
而扁平上皮细胞>10/低倍镜视野，亦应重新留取标本。
痰培养的送检次数
对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，
连续2 ～ 3天。不建议24h内多次采集，除非
痰液外观性状出现改变； 怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰
液送检； 怀疑军团菌或深部真菌感染，痰标本理想的送
标本的质量检查
于显微镜低倍镜下检查（10x10），观察WBC及扁平上 皮细胞存在情况，作为参考：
痰标本显微镜检查的分类
分类
细胞数/低倍镜视野
(级)
白细胞
扁平上皮细胞
6
<25
<25
5
>25
<10
4
>25
10-25
3
>25
>25
2
10-25
>25
1
<10
>25
分类中1 ～ 3类不做培养，要求重新留取标本：4、5
大便培养标本采集规范
3. 注意事项： ⑴虽然粪便标本本身含很多细菌但也要
用无菌容器。 ⑵在患者病情许可的条件下应在用药前
采集标本。 ⑶应床边接种或置输送培养基送检。
五、脑脊液标本采集与 送检规范
脑脊液培养标本的采集
采集时间：怀疑脑膜炎时应立即采集脑脊 液，最是在应用抗生素之前采集脑脊液。
胸腔积液、腹水可抽取10 ml, 心包液、关节液 等可抽取2 ～ 5 ml 。 ③标本采集后注入无菌密封容器送检也可将抽取 液直接注入血培养瓶,用血培养仪培养。
七、胃液及胆汁培养标本
胃液及胆汁培养标本
抽取空腹胃液5ml，置无菌管内送检； 胆汁的采集方法有三种：十二指肠引流
法（以“B”管—来自胆囊，做细菌培养 意义较大）、胆囊穿刺法及手术采取法 ，由临床医生 采集胆汁量为5ml，放入 无菌密封容器立即送检。
六、穿刺液标本的采集
穿刺液类标本的采集
穿刺液培养标本包括胸水、腹水、 心包液、关节液、鞘膜液等穿刺液 培养标本。
采集时间：一般在用抗生素等抗菌 药物治疗之前，或在停止使用抗菌 药物之后2 ～ 3d采集标本。
穿刺液类标本的采集
采集方法： ①无菌操作穿刺抽取标本或外科手术采集标本； ②标本采集量应＞1ml。
临床标本的分类
带菌体液
痰 咽拭子 尿液 粪便 其他类别
无菌体液
血液 脑脊液 关节腔积液 胸腹水 其他类别
一、血培养采集和运送操作规范
皮肤消毒程序，严格执行三步法:
1、用75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上 2、用1%-2%碘酊作用30s或10%碘伏作用60s，从穿刺点
向外画圈消毒,至消毒区域直径达3cm以上，涂擦穿 刺皮肤2遍，待干燥。 3、75%酒精脱碘：用75%酒精由内向外方向涂抹去碘酒 液 ，待酒精挥发干燥后采血。
脑膜炎奈瑟菌离体后会迅速自溶,肺 炎链球菌和流感嗜血杆菌也很容易 死亡,因此,标本应立即送检,并注意 保温、防干燥。切不可置冰箱保存, 否则会影响检出率。
脑脊液标本的运送
常温立即送检，实验室收到标本后应立即接种。 脑脊液标本送检的理想时间为15分钟内，半小时送
检是可接受的，如果送检时间超过1小时，则会影 响结果，在结果报告时，在备注处注明此情况。 如不能及时送检，可使用血培养瓶（怀疑脑膜炎奈 瑟菌和淋病奈瑟菌感染时，请勿使用血培养瓶）
采集方法：无菌腰穿采集脑脊液3～5ml， 分装到3个无菌小瓶中（各1 ～ 2ml）。
第一管用于细菌培养!
用于细菌和病毒检测时脑脊液量不少于 1ml；用于真菌和抗酸杆菌检测脑脊液量 不少于2ml。
脑脊液培养标本的采集
标本采集后注入无菌管/小瓶中送检 也可将抽取液直接注入血培养瓶,用 血培养仪培养。
染率。如果必须从留置导管内采血，也 应同时从外周静脉采集另外一个血培养 标本以帮助阳性结果的判读提供解释。
血培养假阳性的危害
1、增加患者抗生素用量，破坏其微生态环境 2、延长了住院天数 3、延误病情诊断 4、增加经济负担
防止皮肤寄生菌或环境微生物污染
2017\2018年血培养污染率
二、泌尿标本采集与运送的规范
检次数尚无定论。
痰培养的运送
所有病人的下呼吸道标本应在采集后立即送至 微生物室，并于1小时内接种
如不能及时送达，应将标本暂存于4℃，但放 置时间不可超过24h。运输时勿置于冰块中
痰培养拒收标准
光学显微镜细胞学检查发现口咽分泌物 污染明显。
没有标签或贴错标签。 运送容器选择不当或有渗漏。 标本采集不符合要求。 同一天同一试验重复送检2次。 延时送至实验室的标本。
4、脓疱或水疱：酒精消毒使之干燥，对 于患儿用23号针头挑破脓疱，拭子采集脓 疱液和基底部标本。
5、标记：不要只写“分泌物”标记标本， 应有专门的描述和解剖来源。
九、生殖道标本采集规范
生殖道标本的采集方法
推荐使用男性或女性专用拭子。
男性前列腺：用肥皂和水清洗阴茎头，通 过直肠按摩前列腺，用无菌拭子收集液体 或使液体进入无菌密封容器内。
20
2
>=36.3
40-60
2-3
采血时机
采血培养应该在使用抗生素之前进行 间歇性寒战或发热应在寒战或体温高峰到来 之前0.5小时采集血液，不知发热规律应在寒 战或发热后半小时后进行。
采集部位
推荐从外周静脉采集血液标本。 不推荐动脉血，因其诊断价值没有比静
脉血更大。 不推荐静脉留置导管，因其常伴有高污
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泌尿标本采集的规范
1、标本采集应力争在未使用抗生素之前 2 、 清 洁 中 段 尿 （ 晨 尿 最 佳 ） 约 10 ～
20ml直接排入专用的无菌容器中 多次收集或24小时尿不能用作培养 3、标本管不应含防腐剂和消毒剂
泌尿标本采集的规范
4、采集中段尿时要先用肥皂清洗女性的 外阴和男性的外生殖器包括包皮内，然 后用清水冲洗。
四、大便标本采集与送检规范
大便培养标本采集规范
1.采集时间：腹泻患者应在用药前、急性期采 集；沙门菌感染、肠热症应在2周内采；
2.采集方法：自然排便者可用小木棒挑取有脓 血和黏液的部位的粪便2-3克，如液状粪便取絮 状物盛于无菌的、密封的、不吸水的、容器内 或直接盛于增菌液或保存液中；对不易获得粪 便患者及幼儿，可用直肠拭子采集后置保存液 或输送培养基中送检。
关于咳痰标本
在抗生素应用前采集痰标本; 标本采集后1 ～ 2h内必须立即进行实验室处理； 取标本前应摘去牙托，清洁口腔如刷牙和漱口; 深咳，采集标本过程中要有专业的医务人员指导; 无痰可用3％ ～ 5％NaCl 5ml雾吸约5min导痰； 也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等法取痰；
八、分泌物采集规范
分泌物样本
标本的选择更大程度上依赖于感染的程度和性质而 不是可疑的病原体。
对大多数开放伤口，采集前应先去除表面菌群。 除非有渗出物，干燥、结痂伤口一般不做培养。 闭合脓肿应取渗出物和脓肿壁标本。 开放脓肿处理同开放伤口。 烧伤伤口应在广泛清洗和清创术后采集培养。建议
“正确的微生物学检验始自正确的标本采取。临床医师、护师及检验 技师都必须通晓其要领。”
著名的临床微生物检验专著Manual of Clinical Microbiology 的主编Patrick Murray
微生物样本采样基本原则
1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作 4.采样后立即送检 5.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂。 6.送检标本应注明采集部位和检验目的
临床微生物样本采集规范
“超级病菌”变种袭击英国医 院
2006年12月18 据英国媒体 报道，俗称“ 超级病菌”MRSA的一个变种今年袭击 了英国一家医院，已造成8人感染，其中 2人死亡
2004年受感染死亡的英国士兵坎贝 ，18岁，感染后48h死亡
世界人口死因（1998年） 感染性疾病：25％(1330万/5390万）
不可避免地受到污染 唾液中口咽部定植菌的浓度可达
108 ～ 109/ml。 研究显示，国内常规痰标本中约半
数存在唾液严重污染现象。
咳痰标本的采集
标本采集方法
医师或护士直视下采集标本 病人先漱口，去除表面的菌群 教育病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰
液
临床上约半数咳痰标本不合格！
取活检标本，伤口表面定量培养不一定有意义。 代表性的标本应采自病灶活动区域或基底部有而不
仅仅是脓液。
分泌物采集规范
1、对开放性病灶的采集：如眼结膜脓性分泌 物、扁桃体、外耳道、手术后切口、导管治 疗感染、瘘管内脓液、生殖道分泌物等均属 于开放性病灶。应先用灭菌生理盐水冲洗表 面污染菌，去除旧的分泌物，用灭菌拭子采 集病灶深部或边缘的标本分泌物，也可取感 染部位下的组织送检。
宫颈：用无润滑剂的扩阴器使宫颈可见，用拭 子从宫颈上拭去黏液和分泌物，丢掉拭子，用 新的无菌拭子紧帖宫颈内道轻轻采样。
后穹窿：送抽吸液。
谢谢聆听
徐英春，倪语星等。血培养操作规范，上海科学技术出版社，2002,1-31
培养瓶消毒程序
打开血培养瓶塑料盖用75%酒精消毒血 培养瓶橡皮塞并擦干表面残余酒精→消 毒皮肤后用无菌注射器抽取血液从橡皮 塞处注入血培养瓶内→用75%酒精重新消 毒血培养瓶橡皮塞并盖好塑料盖→立即 送检。
血培养标本的运送
采集后的血培养瓶应在1小时之内送往 实验室。