高压均质机制备两性霉素B纳米结晶

高压均质机制备两性霉素B纳米结晶

房秋雨1，覃玲珍1，吴传斌1,2*，张永明3*

（1.中山大学药学院,广州 510006；2.中山大学药物制剂工程研究开发中心，广州 510006；3.中山大学附属第三医院，广州 510630 ）

摘要：目的 为提高两性霉素B的溶解度和溶出速率，制备两性霉素B纳米结晶。方法 采用高压均质法制备两性霉素B纳米结晶，对其粒径、电位以及晶型进行了表征，并评价了其体外溶出。结果 两性霉素B纳米结晶的平均粒径在200nm 左右，电位与采用的稳定剂有关。XRD证明，纳米结晶可能出现了新物相。与原料药相比，其溶解度和溶出速率大大提高。结论 两性霉素B纳米结晶的溶解度和溶出速率较高，有望提高生物利用度。

关键词：两性霉素B；纳米结晶；粒径；溶出

Preparation and Characterization of Amphotericin B Nanocrystal

Fang Qiuyu1, Qin Lingzhen2, Wu Chuanbin1,2*,Zhang Yongming3*

(1. School of Pharmaceutical Sciences, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510006, China; 2. Research & Development Center of Pharmaceutical Engineering, Sun

Yat-sen University, Guangzhou 510006, China; 3.The Third Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University, Guangzhou 510630, China)

ABSTRACT: OBJECTIVE To improve the solubility and dissolution rate of amphotericin B by using nanocrystal technique. METHODS Nanocrystals were developed by high pressure homogenization and the nanocrystal product were then investigated by mean particle size, zeta potential measurement and XRD. In addition, in vitro saturation solubility and dissolution profile were investigated. RESULTS The mean particle size of amphotericin B nanocrystal is about 200nm. The zeta potencial changed with different stablizers. XRD results revealed that a new cryatal phase may have formed. Compared with raw crystal, the solubility and dissolution rate amphotericin B nanocrystal are increased. CONCLUSION Amphotericin B nanocrystal significantly improved the solubility and dissolution thus oral

bioavailability could be enhanced.

KEY WORDS:amphotericin B; nanocrystal; particle size; dissolution

作者简介：房秋雨，女，在读硕士生，主要研究方向为缓控释制剂

*通讯作者1：吴传斌，男，教授，博士生导师，主要研究方向为缓控释制剂

E-mail: cbwu2000@

*通讯作者2: 张永明，男，主任药师，硕士生导师，主要研究方向为医院药房管理、药物制剂、药物信息

E-mail: zhangym@

两性霉素B是治疗深部真菌感染的金标准，具有广谱抗菌作用，但其溶解度极低，口服吸收差，临床制成脱氧胆酸钠胶束注射使用，使用不便，且毒性较大。将其制成注射型脂质体可以显著减小毒性，提高药效，但成本较高[1]。口服给药是一种理想的给药途径，因它可以减少注射伴随的毒性，降低治疗成本，并改善病人的生命质量[2]。纳米结晶是纯药物的亚微粒胶体分散体系，其最大特点是可以提高难溶性药物的溶解度和溶出速率，从而提高难溶性药物的生物利用度。制备纳米结晶通常有两种方法，即高压均质法和微量沉淀法[3]。由于高压均质法工艺简单，易于放大生产，本文采用高压均质法制备两性霉素B纳米结晶，以粒径和电位为指标，研究了不同工艺和处方对纳米结晶的影响，并对所得样品进行了表征。

1 试药与仪器

1.1试药

两性霉素B原料药，(华北制药厂，批号HAN1102201，纯度99%)，聚乙烯醇（阿拉丁试剂），羟丙甲基纤维素（上海卡乐康），TPGS（广州齐云生物）PVP K90（美国国际特品公司），泊洛沙姆188（德国巴斯夫广州代理）

1.2 仪器

高压均质机（美国PSS 苏州微流纳米代理），冷冻干燥机, （天津天大天发公司），双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用

公司），激光粒度仪（美国PSS 苏州微流纳米代理）2 方

法与结果

2.1 两性霉素B纳米结晶的制备

取适量两性霉素B分散于蒸馏水，高速剪切机10000rpm剪切5分钟，迅速与表面活性剂溶液混合，搅拌10分钟，得粗悬液，将此粗悬液置于高压均质机中，逐步增加压力至800bar，循环均质10次[4] 。

2.2 不同稳定剂对纳米结晶粒径和电位的影响

以纳米粒的粒径、Zeta电位为指标，考察泊洛沙姆188、聚乙烯醇、HPMC、PVP K90、吐温80以及TPGS作为稳定剂对纳米混悬剂粒径和电位的影响（表1）。结果表明，采用高压均质法制备纳米结晶时，应用不同的表面活性剂，得到的两性霉素B纳米结晶粒径差别很小，但纳米粒的电位各有区别。吐温80制备的样品放置即由絮凝产生，其余的表面活性剂稳定性较好，放置一周外观无变化，PVP K90、TPGS制得的样品有少量沉淀，但振摇即可分散。F68的电位最小，粒子间斥力较大，因此采用F68为稳定剂进一步考察均质工艺对粒径的影响。

表1 不同稳定剂制备的纳米结晶的粒径及电位

Table 1 Particle size and zeta potencial of nanocrystal prepared with different

stablizers

compound particle size（nm）PDI Zeta

potencial

（mV）TPGS209.90.132-25

F68 PV A 210.4

235.1

0.188

0.123

-26.7

-13.3

HPMC235.40.145-17.2 PVP K90 222.2 0.150 -24.4

2.3 均质过程对粒径的影响