临床常用免疫学检查
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三、血清补体检测
补体(complement,C)是一组具有酶 原活性的糖蛋白,共有20余种组分,具 有溶细胞、调理作用、中和与溶解病 毒和炎症介质、清除免疫复合物等作 用。是抗体发挥溶细胞作用的必要补充条件,故称为补体。
按功能分为经典途径、旁路激活 途径、膜攻击组分和调节分子4种。
总补体溶血活性检测(CH50)
应用单抗和荧光标 记二抗反应在荧光显 微镜下或流式细胞仪 中计数CD的百分率。
参考值
免疫荧光法(IFA):
CD3 为63.1%±10.8%; CD4 为42.8%±9.5%; CD8 为19.6%±5.9%; CD4 /CD8为(2.2±0.7)/1。
流式细胞术:
CD3 CD4 CD8 CD4 /CD8
抗原:绵羊红细胞 +
抗体:兔抗羊红细 胞抗体(溶血素) + 补体
溶血
溶 血 %
血清(ml)
溶血程度与补体含量的关系
[参考值]试管法:50-100u/ml
[临床意义]主要反映补体传统途径 活化的活性程度.
CH50增高:见于急性炎症、组织损 伤(风湿热急性期、结节性动脉 周围炎、皮肌炎、多发性关节炎、 伤寒)和某些肿瘤。
补体C3检测
C3是补体系统中含量最多的物质, 主要由巨噬细胞和肝脏合成,在C3转 化酶的作用下,裂解成C3a与C3b,在传 统途径和旁路途经中发挥重要作用。
[参考值] [临床意义]
成人:0.82~1.70g/L
增高:
急性炎症、传染病早期、肿瘤、排斥反应。
降低:
①消耗增多:肾炎、活动性SLE、RA。 ②合成不足:肝病。 ③大量丧失:肾病综合症、大面积烧伤等。
第二节 细胞免疫检查
人的淋巴细胞可分为:T、B、NK 等细胞群他们有不同的表面标志和 功能。T、B细胞还分为不同的亚型。
一、淋巴细胞表面标志物检测
E玫瑰花形成试验 : T细胞表面有绵羊红 细胞受体,与SRBC 结合形成花结样的 细胞,可用于T淋巴细胞计数。
分化抗原测定:荧光标记的抗体与T细胞反应,用荧光显微镜或流式细胞 仪计数。
IgG,IgA,IgM,IgE和IgD五类.
IgG IgA IgM测定
IgG:含量最多或最主要的Ig(75%),
唯一能够通过胎盘的Ig
IgA:约占10%,分为分泌型和血清型,
在局部免疫中起重要作用
IgM:分子量最大,是抗原刺激后最早
出现的抗体
检测方法:免疫比浊法 参考值: 成人 IgG:7.0~16.0 g/L
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临床意义
降低:见于免疫缺陷疾病,如恶性肿 瘤、免疫性疾病、某些病毒感染、大 面积烧伤、多发性神经炎、淋巴增殖 疾病。
升高:见于甲亢、甲状腺炎、重症肌 无力、慢性活动肝炎等。
CD4
T细胞亚群检测
CD3
CD3 CD8
CD3代表总T淋巴细胞
CD4是辅助、诱导T细胞 的标志
CD8是抑制、杀伤性T细 胞的标志
IgA:0.7~5.0 g/L IgM:0.4~2.8 g/L
临床意义
免疫球蛋白增高
多克隆增高:常见于各种慢性感染、慢性肝病 肝硬化、淋巴瘤和某些自身免 疫性疾病,如SLE、类风湿关节炎等
单克隆增高:主要见于免疫增殖性疾病,如多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白 血症等
临床意义
免疫球蛋白降低
常见于各类先天性免疫缺陷病、重链病、轻链病、获得性免疫缺陷病、 肾病综合征、联合免疫缺陷病及长期使用免疫抑制剂的病人。
临床常用免疫学检查
苏大附二院检验科 冯萍
掌握: 免疫球蛋白、补体的临床意义 病毒性肝炎血清标记物的检测 肿瘤标记物的检测 熟悉: 感染免疫检查 自身抗体的检测
第一节 体液免疫检查
一、血清免疫球蛋白的检测
免疫球蛋白是指由浆细胞所产生 的,具有抗体活性和(或)抗体样结构 的球蛋白.主要分为:
补体C4检测
C4由肝脏、巨噬细胞合成,为C1s底 物,参与经典激活途径,在补体活化、 促进吞噬、防止免疫复合物沉着和中 和病毒等方面发挥作用。
[参考值] 成人:0.15~0.49g/L [临床意义]
增高:组织损伤性疾病. 降低:狼疮性肾炎、SLE、自身免疫 性肝炎、Ⅰ型糖尿病、胰腺癌、多发 性硬化症、RA、IgA型肾炎、遗传性 IgA缺乏症。
CH50降低:更有意义。见于肾小球 肾炎、自身免疫性疾病(SLE、 RA)、感染性心内膜炎、病毒性肝 炎、慢性肝病和遗传性血管神经水 肿。
在患SLE、RA等自身免疫病时,血清补体水平随病情发生变化。
细菌感染,特别是革兰阴性细菌感染时,常因补体旁路途径的活化过度引起 血清补体水平降低。
心肌梗塞、甲状腺炎、大叶性肺炎、糖尿病、妊娠等情况下血清补体水平常 升高。
61%~85%; 28%~58%; 19%~48%; 0.9~2.0/1
临床意义
①CD3下降:自身免疫性疾病、免疫缺陷病、放疗、化疗后、肾上腺素治疗 后
②CD4下降:恶性肿瘤、免疫缺陷病、免疫抑制剂的使用、病毒感染、严重 创伤、大手术
③CD8下降:自身免疫性疾病、变态反应疾病
④CD4/CD8增高:自身免疫性疾病、恶性肿瘤、病毒感染、变态反应 ⑤CD4/CD8下降:HIV(<0.5)、传单、巨细胞病毒感染等 ⑥器官移植排斥反应的监测:升高预示可能发生排斥发应;持续下降提示感染发
IgG下降:细菌感染 IgA下降:反复呼吸道感染 IgM下降:败血症
二、血清M蛋白检测
M蛋白或称单克隆免疫球蛋白, 是一种单克隆B淋巴细胞异常增殖产 生的,具有相同结构和电泳迁移率 的免疫球蛋白分子或其分子片断, 一般不具有抗体活性.
[参考值] 阴性
[临床意义]见于单克隆免疫球蛋 白增殖病:①MM ②巨球蛋白血症 ③重链病(γ、α、μ重链) ④轻 链病(κ、λ轻链) ⑤半分子病: IgA、IgG型 ⑥恶性淋巴瘤 ⑦良 性M蛋白血症
。 生,<0.2必须停止使用免疫抑制剂
B淋巴细胞表面标志测定
膜表面免疫球蛋白(SmIg)测定:升高 与淋巴细胞恶性增殖有关,降低与体 液免疫缺陷有关
分化抗原的测定:CD19为最重要的B淋 巴细胞标记分子,升高主要见于淋巴 系统的恶性肿瘤
二、淋巴细胞功能检测
T细胞转化试验 原理: 在体外培养时,T细胞在刺激 物的作用下,转化为淋巴母细胞,部 分发生有丝分裂,计数淋巴细胞及转 化的母细胞数,求出转换百分数。 意义:判断机体细胞免疫功能水平、 估计疾病的疗效和预后。