蛋白质连接技术资料讲解

活泼酯法：
蛋白质 伯氨基
连接分子 羧基
多元酸酐法：
蛋白质 伯氨基
连接分子 氨基、羟基
二异氰酸酯法：
蛋白质 伯氨基
连接分子 氨基
偶氮苯甲酸法：
蛋白质
伯氨基
连接分子 苯基
O—羧甲基羟胺法：
蛋白质 伯氨基
连接分子 酮基
对-肼基苯甲酸法：
叠氮化法：
蛋白质 伯氨基
连接分子 羧酸甲酯衍生物
氯乙酸钠法：
连接两个巯基
三氯三嗪试剂法：
蛋白质 伯氨基
连接分子 羟基
必须注意，第一个分子中不能含有氨基及巯基等亲核性较 强的基团，否则，易形成自身聚合
蛋白质 氨基
连接分子 邻二醇
比较温和，可在常温和中性pH的条件下进行
混合酸酐法：
蛋白质 伯氨基
连接分子 羧基
碳二亚胺法：
蛋白质 伯氨基
连接分子 羧基
由于碳二亚胺的缩合反应没有选择性；易形成蛋白分子间的自
身聚合，产生非均一性产物；先将含羧基的药物或半抗原分子 与EDC反应，活化羧基后，再加入蛋白反应物，可以减少蛋白分 子交联
两分子蛋白的连接
马来酰亚胺基类活泼酯法：
蛋白质 伯氨基
连接分子 巯基
SPDP试剂法：异型双功能交联剂N-羟基琥珀亚胺基-3—(2吡啶基二硫)—丙酸酯(SPDP)
蛋白质
连接分子
伯氨基
巯基、氨基
苯丁酸氮芥衍生物法：
蛋白质 伯氨基
连接分子 氨基
卤代乙酰衍生物法：
连接基团：氨基、巯基
双马来酰亚胺试剂法：
蛋白质 伯氨基
连接分子 羟基
亚胺酸酯法：
蛋白质 伯氨基
连接分子 氨基
卤代硝基苯法：
蛋白质 氨基、羟基、巯基
连接分子 氨基、羟基、巯基
Mannich反应法：
蛋白质 伯氨基
连接分子 酮、酚类
苯Baidu Nhomakorabea法：
蛋白质 氨基、羟基、巯基
连接分子 氨基、羟基、巯基
E11man试剂法：
E11man试剂即5．5’—二硫—2，2’—双硝基苯甲酸(DTNB)，该试剂可以与巯基作用
连接分子 含芳香胺的化合物
副反应多，故一般限于人工抗原的制备
戊二醛法：连接两个伯胺
最温和的交联反应之一，可在4~40℃温度范围，pH6.0~8.0 的缓冲水溶液中进行，但是缓冲组份中不得含有氨基化合 物，本交联方法易形成相同蛋白间的连接；产物的均二性 较差。因此，多用于酶标抗体的制备。
过碘酸盐氧化法：
蛋白质连接技术
蛋白质交联系指将小分子物质（如 药物、半抗原等）或大分子物质 (如酶、蛋白毒素等)以共价键的方 式连接于蛋白质分子，以制备人工 抗原、酶标抗体、载体释放药物、 抗体导向药物和免疫毒素等。
交联方法
游离氨基 游离羧基 苯基 酚基 巯基 羟基 咪唑基 吲哚基 胍基
重氮化法：
蛋白质 酚羟基的邻位、咪唑环、吲哚环