细菌学检验-总结

细菌学检验重点

（选择20个20分，填空52个26分，名词解释6个18分，简答6个24分，论述1个12分）

注：以下内容主要是老师的红字部分，可能看的过程有些吃力，大家结合课件和书本看哈，帮助理解，不过老师说过考点重点在红字部分的

第一章细菌学实验的基本要求

1、实验室生物安全(Laboratory biosafety): 实验室的生物安全条件和状态不低于容许水平，可避免实验室人员、来访人员、社区及环境受到不可接受的损害，符合相差法规、标准等对实验室生物安全责任的要求。

2、生物安全防护基本要求

实验室生物安全防护（biosafety protection for laboratories）

–实验对象：致病的微生物及其毒素

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–综合措施：实验室设计建造、个体防护设施、工作及操作程序和规程等

–确保：实验室工作人员不受实验对象侵染，周围环境的生物安全。

实验室生物安全通用原则

•积极防止操作者在污染的环境中接触生物危害物；

•主动封闭生物危害材料产生之源，防止从操作部位向周围环境释放；

•尽量减少生物危害材料向周围环境意外释放所造成的后果。

3、实验室必须设有专职的生物安全负责人

实验室负责人为实验室生物安全的第一责任人。

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生物安全等级

•生物安全防护实验室根据所处理的微生物及其毒素的危害程度分为四级。

–实验室生物安全防护要求：一级最低，四级最高。

4、在主实验室合理设置清洁区、半污染区和污染区

5、各级生物防护实验室特点

•一级生物安全防护实验室（BSL-1/P1）：适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物，如用于教学的普通微生物实验室等。

•二级生物安全防护实验室（BSL-2/P2 ）

实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。

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在处理危险度2 级或更高危险度级别的微生物时，在实验室门上应标有国际通用的生物危害警告标志。

•三级生物安全防护实验室（BSL-3/P3）：适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有预防传染的疫苗。

•四级生物安全防护实验室（BSL-4/P4 ）：适用于对人体具有高度的危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。

6、控制措施

•安全设备和个体防护是实验室工作人员与致病微生物及其毒素直接接触的一级屏障。

•所有可能使致病微生物及其毒素溅出或产生气溶胶的操作，都必须在生物安全柜内进行。

7、生物安全柜（BSC）biosafety cabinet(概念、分级及特点)

•具备气流控制及高效空气过滤装置的操作柜，可有效降低实验过程中产生的有害气溶胶对操作者和环境的危害。(净化排气)

•

•根据生物安全防护水平的差异，生物安全柜可分为I、Ⅱ、Ⅲ级3种类型。

•实验室应按要求分别配备I、Ⅱ、Ⅲ级生物安全柜。

Ⅰ级生物安全柜：外部空气

•保证工作人员不受侵害，但不保证实验对象不受污染。

Ⅱ级生物安全柜：经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气

•既保证工作人员不受侵害，也保证实验对象不受污染；

Ⅲ级生物安全柜：经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气 8、生物安全柜和超净工作台的区别 ；

超净工作台：保护样品，不保护操作者和环境 生物安全柜：保护操作者、环境以及实验材料

正压、简单 负压、复杂

• 不能以净化工作台代替生物安全柜，反之则可以。 9、 标准的细菌等微生物操作要求

• 实验室负责人......工作人员洗手、工作区域不允许吃/喝/抽 ......戴护目镜或面罩、食物储存 • 禁止口吸吸管、减少飞溅物/气溶胶、工作台表面的去污/灭活、废物去污后处理 10、注：高压蒸汽灭菌：负责消毒者不准离开消毒室。

制备培养基..... • 无菌操作.、使用酒精灯、灭菌吸管......10倍递增稀释......无菌操作； ）

三三制：稀释三级，每一稀释度用三个平行平板；取供试液加注于平皿时，供试液须充分混匀。 培养基倾注于平皿：45℃±1℃、整个操作过程应在lh 内完成、无菌检验......

第二章、细菌学检验基本技术 临床样本的采集与送检 1、食品样本采集原则

根据检验目的、食品特点、批量、检验方法、微生物的危害程度等确定采样方案。

• 随机采样→代表性 • 无菌操作，防污染。（外源性污染、样本变质和细菌生长） • 食物中毒时，采集可疑食物样本。 2、食品样本采集种类

• 大样、中样、小样。 –

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– 大样：一整批样本。

– 中样：从样本各部分所取得的混合样本，一般为200g 。 – 小样：分析用，检样，25g 。

注：检验结果报告后，剩余样品或同批样品不进行微生物项目的复检 3、细菌的形态结构检查法

借助显微镜，对细菌形态、大小、排列、结构进行直接观察。

– 在细菌检验中极其重要，是细菌分类和鉴定不可缺少的组成部分。

• 样本中有无细菌及其大致的数量。

样本

采样时间

采样方法

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注意事项

血骨髓

发病早期、急性期或 症状典型时

成人10ml ，儿童3～5ml ；骨髓1～2ml 。 样本切勿冰箱存放；无菌操作； 废弃物高压灭菌。

尿液

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晨起 中段尿

防杂菌污染，无菌操作。尽快送检，不得加防腐剂或消毒剂。 粪便

急性期

脓血、黏液的粪便；絮状物； 直肠拭子

无菌采样；新鲜；立即送检 。

）

痰

上呼吸道样本

晨间 无限制

自然咳痰、支气管镜、 胃内采痰法等； 鼻咽拭子

漱口； …

立即送检或4℃保存。