色谱概论13章

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二、色谱法的缺点 1 . 对所分析对象的鉴别力是较差的。 2 . 一般来说色谱的定性分析是靠保留值定性,但在一定的
色谱条件下,一个保留值可能对应多个化合物。
第三节 色谱法的定义与分类
一、色谱法的定义
色谱法或色谱分析也称之为层析法,是一种物理化学的分 析方法,它利用混合物中各组分在两相间分配系数的差别,当 溶质在两相间做相对移动时,各物质在两相间进行多次分配, 从而使各组分得到分离。分离的仪器即色谱仪。
在此基础上,1957 年,Golay开创了开管柱气相色谱 法,习惯上称为毛细管柱气相色谱法。
1956 年,Van Deemter在前人研究的基础上发展了 描述色谱过程的速率理论,1965 年,Giddings 总结和发 展了前人的理论,为色谱的发展奠定了理论基础。
另一方面早在1944 年,Consden 等发展了纸色谱, 1949 年,Macllean 等在氧化铝中加入淀粉粘合剂制作薄 层板,使薄层色谱法(TLC )得以实际应用,而在1956 年,Stahl 发明出涂布器之后,才使TLC 得到广泛应用。
二、色谱法的发展
1931 年德国的化学家库恩重复了茨维特的某些实验, 用氧化铝和碳酸钙分离了α-、 β -和,γ - 胡萝卜素,此后 用这种方法分离了60 多种此类色素。
英国科学家Martin 和Syng 在1940 年提出液-液色谱 法,即固定相是吸附在硅胶上的水,流动相是某种有机溶 剂。1941 年,Martin 和Synge 提出用气体代替液体作流 动相的可能性,11 年之后,James 和Martin 提出了从理 论到实践较完整的气-液色谱方法,从而获得了1952 年的 诺贝尔化学奖。
在20 世纪60 年代末把高压泵和化学键合相用于液相 色谱,出现了高效液相色谱法(HPLC )。
20 世纪80 年代初超临界流体色谱(SFC ) 兴起。而 在20 世纪90 年代毛细管区带电泳( CZE )得到广泛应用。 同时集HPLC 和CZE 优点的毛细管电色谱在20 世纪90 年 代后期受到关注。
3000多理论板数的柱效。 2 .应用范围广。几乎用于所有化合物的分离和测定。 3 .分析速度快,一般在几分钟到几十分钟就可完成一次复
杂样品的分离和分析。 4 .样品用量少。 5 .灵敏度高,如气相色谱可以分析几纳克的样品。 6 .分离和测定一次完成。可以和多种波谱分析仪器联用。 7 .易于自动化,可在工业流程中使用。
二、色谱法的分类
色谱法可按两相的状态及应用领域的不同分为两大类。 (一)按流动相与固定相的状态分类
1 .气相色谱 气相色谱又可分为气固色谱和气液色谱wenku.baidu.com前者是以气体为
流动相,以固体为固定相的色谱,后者是以气体为流动相,以 液体为固定相的色谱。
2 .液相色谱 液相色谱又可分为液固色谱和液液色谱,前者是以液体为
三、色谱法的现状和未来
色谱法是分析化学领域中发展最快、应用最广的分析 方法之一。这是因为现代色谱法具有分离与分析两种功能, 能排除组分间的相互干扰,逐个将组分进行定性、定量分 析,而且还可制备纯组分。
高效液相色谱近年来以6 %-8 %的速度增长,其中较
活跃的领域是离子色谱、疏水作用色谱、手性分离及反相 色谱。HPLC 除具有GC 的优点外,还具有应用面广,可
流动相,以固体为固定相的色谱;后者是以一种液体为流动相, 以另一种液体为固定向的色谱。
(二)按操作形式
按操作形式可分为柱色谱法、平面色谱法及逆流分配等 类别。
1 . 柱色谱法 柱色谱法将固定相装在色谱柱里,色谱过程在色谱柱内 进行。 按色谱柱粗细,可分为一般柱色谱法、毛细管柱色谱法 及微填充柱色谱法等类别。 气相色谱法与高效液相色谱法及超临界流体色谱法等属 于柱色谱法范围。 2. 平面色谱法 平面色谱法是色谱过程在固定相构成的平面层内进行的 色谱法,又分为纸色谱法、薄层色谱法及薄膜色谱法等。 用滤纸作固定液载体的色谱法称为纸色谱法。 将固定相铺在玻璃板或铝箔板上,构成一定厚度的薄层 板,用这种薄层板进行分离分析的方法称为薄层色谱法。薄 膜色谱法与薄层色谱法类似,主要区别是它的固定相是用高 分子材料制成的薄膜。
(三)按色谱过程的分离机制分类
按色谱过程的分离机制可将色谱法分为:吸附色谱法、 分配色谱法、体积排阻色谱法、离子交换色谱法、亲和色谱 法及毛细管电色谱法等类别。
吸附色谱法:其分离主要是基于组分在固态吸附剂表面 吸附能力的差异。固定相吸附作用强的组分的色谱保留时间 会较长,反之会有较短的保留时间。
分配色谱法:固定相为液态,利用样品组分在固定相与 流动相中的溶解度不同,引起分配系数的差别而分离。流动 相的极性大于固定相的极性的液相色谱法,称为反相色谱法, 常用于极性组分的分离;反之,称为正相色谱法,常用于非 极性组分的分离。
进行制备分离的特点,多维色谱,可用于药物、蛋白质、 多肽结构测定,并使整个操作完全自动化,这是21 世纪色 谱分析的发展方向之一。
第二节 色谱法与其他方法的比较和配合
一、色谱法的特点和优点
(一)色谱法的特点 色谱法是以其高超的分离能力为特点,它的分离效能远远
高于其他分离技术如蒸馏、萃取、离心等方法。 (二)色谱法的优点 1 .分离效能高。30-50m的毛细管气相色谱柱可以到每米
色谱分析 概论
第一章 绪论 第二章 色谱法的原理 第三章 色谱仪
第一章 绪论
1 色谱法的发展简史 2 色谱法与其他方法的比较和配合 3 色谱法的定义与分类
第一节 色谱法的发展史
一、色谱法的出现
1906 年,俄国植物学家茨维特 在研究植物叶子的组成时,用碳酸钙 作吸附剂装于玻璃柱中,石油醚萃取 液倒到管中的碳酸钙上,萃取液中的 色素就吸附在管内上部的碳酸钙里, 再形用成纯3 种净颜的色石的油5醚个洗色其色谱他脱带法方被与法。吸色的当谱比附时法较的与和茨色其配维他合素方法的比较和配合 特把这种色带叫做“色谱”,把玻璃 管称为色谱柱,碳酸钙称为固定相 , 冲洗剂石油醚称为流动相。把茨维特 开创的方法称为液-固色谱法,不仅 用于有色物质的分离,而且大量用于 无色物质的分离。色谱的“色”字虽 已失去原有意义,但色谱名词仍沿用 至今。
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