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灵芝多糖的提取纯论文制作PPT
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2、实验内容
紫外分光光度计
1)多糖含量的测定
根据《中国药典》(2010版)一部灵芝项下规定, 制定标准曲线,得出线性回归方程: y=17.751x+0.0326,R2=0.9991,n=6,线性关系 良好,如下图:
1.2
1 0.8 吸光度A 0.6 0.4 0.2 0 0 0.01 0.02 0.03 多糖浓度mg/ml 0.04 0.05 0.06 0.07 y = 17.75x + 0.032 R² = 0.999
灵芝多糖的提取纯化工艺研究
研究背景
灵芝味甘,性平,归心、肺、肝、肾经。 《中国药典》(2010版)记载灵芝为多孔菌科 真菌赤芝或紫芝的干燥子实体,有补气安神, 止咳平喘的功效,用于心神不宁,失眠心悸, 肺虚咳喘,虚劳短气,不思饮食等。药理试验 证明,灵芝多糖具有抗病毒、抗肿瘤、提高免 疫力、抗氧自由基、抗衰老等生物活性。 随着生活节奏的加快、生活压力的不断攀 升,人们的健康越来越受到威胁,心脑血管、 癌症等疾病的病发率逐年上升,使得具有提高 免疫力、抗肿瘤等功效的灵芝多糖深受重视。
整体框架
1、前言 灵芝多糖的来源与分类 灵芝多糖的主要成分 灵芝多糖的结构分析 灵芝多糖的提取方法 灵芝多糖的纯化方法 灵芝多糖的测定方法
2、实验内容
1)多糖含量的测定
单因素试验 2)提取工艺研究
正交试验设计 3)纯化工艺研究:正交试验设计 3、讨论 4、结论
提取时间 提取温度 提取次数
1、前言
我国已发现灵芝的品种有90多种,包括赤芝、黄芝、 紫芝、黑芝等,多分布于云、贵、冀、吉、苏等省。 灵芝的化学成分复杂,现已发现灵芝含有灵芝多糖、 三萜类化合物、核苷、甾醇、生物碱、氨基酸、微量 元素等多种化学成分。
灵芝多糖制备及药理研究进展_石凤敏
作者简介 收稿日期
石 凤 敏 ( 1983 - ) ,女,河 北 承 德 人,博 士,从 事 药 学 研 究, E-mail: shifengmin318@ 163. com。* 通讯作者,副研究员,从 事植物资源开发研究,E-mial: dzmbj@ sohu. com。 2012-01-11
行比较,发现微波法提取多糖具有操作简便、能耗低、省时且 提取率高等优点,并指出该方法可以广泛用于灵芝多糖的工 业化生产[14]。周明等采用热水浸提和超声波 - 微波协同 2 种方法萃取灵芝子实体中的多糖,并对提取时间和料液比等 因素对灵芝多糖提取率的影响进行了研究,发现与常规热水 提取工艺相比,超声波 - 微波协同萃取法可减少 3 /4 的提取 时 间,提取率更高,同时还可有效降低用水量 ,节约水 资
Research Progress of Polysaccharide from Ganoderma lucidum SHI Feng-min et al ( Institute of Medicinal Plant Development,Chinese Academy of Medical Sciences,Peking Union Medical College, Beijing 100193) Abstract The paper introduced the main research achievements on the preparation and pharmacological effect of Ganoderma lucidum polysaccharides ( GLP) ,and then forecasted its development prospect. It was pointed out that polysaccharide was one of the main active components in Ganoderma lucidum with the medical functions of immune regulation,anti-tumor,anti-aging,antioxidant,anti-lipid,etc. ,it was the medical resources with broad development prospect. Key words Ganoderma lucidum; Polysaccharide; Preparation; Pharmacological effect
灵芝多糖类成分及其生物活性研究进展
灵芝多糖类成分及其生物活性研究进展摘要:灵芝是常用的名贵中药材,药用历史悠久,药用价值高。
多糖类成分是灵芝(赤芝Ganoderma lucidum和紫芝G. sinense)中重要的生物活性成分之一,具有免疫调节、抗肿瘤、保肝、抗氧化、降血糖、心血管系统和神经保护等作用,具有潜在的开发应用价值。
通过对近年来国内外灵芝多糖的结构特征、生物活性以及潜在作用机制的相关文献进行归纳总结,为明确灵芝多糖的现代药用价值提供基础,为灵芝多糖作为治疗药物和辅助性功能食品的开发提供参考和借鉴。
灵芝Ganoderma属于担子菌纲多孔菌科真菌,为我国传统的名贵中药,有着悠久的药用历史。
与人参、何首乌、冬虫夏草并称为“四大仙草”。
据《神农本草经》记载,将灵芝按颜色划分为赤、黑、青、白、黄、紫芝6种,均被列为上品。
谓其“气味苦平、无毒。
久食轻身不老,延年神仙”。
《中国药典》2020年版规定赤芝Ganoderma lucidum (Leyss. ex Fr.) Karst.和紫芝G. sinense Zhao, Xu et Zhang的干燥子实体为灵芝的正品[1]。
现代药理研究表明,灵芝具有广泛的生物活性,能够用于预防和治疗各种内科疾病。
灵芝的化学成分丰富,主要包括多糖、三萜、核苷酸、甾醇、甾体、多肽、脂肪酸和氨基酸等[2]。
灵芝多糖作为灵芝中重要的生物活性成分之一,具有免疫调节、抗肿瘤、保肝、抗氧化、降血糖、心血管系统和神经保护等生物活性。
灵芝常见形态为高度木质化的子实体(fruiting bodies),发育后期弹射释放的种子收集后呈粉状,称为孢子粉(spores),孢子萌发形成菌丝体(mycelium),菌丝继续发育成熟则为子实体,这3种形态即为灵芝的生长周期。
以灵芝的子实体、孢子粉、菌丝体和发酵液为原料,从其中均可提取多糖。
灵芝多糖的提取工艺常用热水提取法[3],而针对细胞壁的多糖则常采用酸提[4]和碱提法[5]。
灵芝多糖的研究进展
2014年9月㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀广西师范学院学报:自然科学版S e p.2014第31卷第3期㊀㊀㊀㊀㊀J o u r n a l o fG u a n g x i T e a c h e r sE d u c a t i o nU n i v e r s i t y:N a t u r a l S c i e n c eE d i t i o n V o l.31N o.3文章编号:1002G8743(2014)03G0048G05灵芝多糖的研究进展∗邹修文,杨啟源,盛家荣(广西师范学院化学与材料科学学院,广西南宁530001)摘㊀要:灵芝多糖是灵芝的主要有效成分之一,具有抗肿瘤㊁免疫调节㊁降血糖㊁抗氧化㊁降血脂与抗衰老作用.因其极具开发利用价值,灵芝多糖已成为近年来的研究热点.本文主要就近年来灵芝多糖的提取㊁分离纯化㊁含量测定㊁结构分析㊁硒化修饰和生物活性等方面进行了系统阐述.关键词:灵芝多糖;结构分析;硒化修饰;生物活性中图分类号:R284.1㊀㊀文献标识码:A1㊀引㊀言多糖(p o l y s a c c h a r i d e)是指10个以上单糖通过糖苷键聚合而成的大分子,通常都由上百个甚至上千个单糖组成,分子量从几千到几万,甚至几千万,亦称为多聚糖.多糖是自然界中普遍存在的资源最丰富的碳水化合物,是构成生物有机体的基本物质之一,同时也是生物体内重要生理活性物质,在生命活动中发挥着重要的作用.随着对多糖药理活性研究的深入,近年来多糖已引起国内外医药学界的重视,成为天然药物研究的一个热点.灵芝,又称仙草㊁瑞草,是多孔菌科植物赤芝或紫芝的全株.作为拥有数千年药用历史的中国传统珍惜药材,具备很高的药用价值.灵芝多糖是灵芝的主要有效成分之一,具有抗肿瘤㊁免疫调节㊁降血糖㊁抗氧化㊁降血脂与抗衰老作用.研究表明硒多糖的药理活性高于多糖和硒,易于被机体吸收和利用,毒性低,具有抗肿瘤㊁抗病毒㊁抗氧化㊁抗重金属㊁调节免疫等作用,还能降低其它化疗药物的毒性.本文就近年来灵芝多糖的提取分离与含量测定以及结构分析㊁硒化修饰和生物活性研究的新进展进行系统阐述.2㊀灵芝多糖的提取分离纯化多糖是极性大分子,一般不溶于有机溶剂,难溶于冷水,中性多糖一般易溶于热水,酸性多糖可溶于稀碱溶液,碱性多糖(含有氨基的多糖)可溶于稀酸,而有些多糖在各种溶剂中均不溶,因此,多糖的提取必须根据分子组成,选择合适的溶剂进行提取.灵芝多糖的提取分离是灵芝多糖研究的首要问题,当前灵芝多糖的提取分离纯化研究主要是采用不同的评价指标进行提取方法㊁技术和工艺研究,以期提高多糖收率.2.1㊀提取方法和工艺优化靳丹虹等[1]比较了索氏㊁超声波㊁微波三种提取方法所得灵芝多糖含量,发现微波提取法最省时㊁提取率最高.付丽丽[2]应用微波预处理㊁超声波协同纤维素酶法对灵芝多糖的提取工艺进行优化,得到最收稿日期:2014G06G20∗基金项目:广西自然科学基金(2013G X N S F A A019033);广西教育厅科研重点项目(2013Z D038);广西研究生教育创新计划项目(Y C S Z2013087)第一作者:邹修文,硕士生,研究方向:高分子化学.通讯作者:盛家荣(1966-㊀),女(瑶族),教授,主要从事天然产物化学研究(s h e n g j i a r o n g99@163.c o m).第3期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀邹修文,等:灵芝多糖的研究进展 49㊀ 佳工艺参数,在此工艺参数下多糖得率可高达16.43m g/g.周吴萍等人[3]通过设计单因素试验来考察提取方法和提取溶剂组合对多糖提取率的影响.温磊等人[4]通过单因素试验分别考察了超声温度㊁超声时间㊁水料比对灵芝多糖提取量的影响,探讨各因素的适宜作用范围,并采用响应面分析法确定了灵芝多糖的最佳提取工艺条件.在此条件下灵芝多糖提取量为3.27%.李靖[5]利用超声波法和正交实验法对灵芝多糖的提取工艺进行了优化,发现采用超声波技术能显著提高灵芝多糖的提取含量.张玉朝等人[6]以苯酚-硫酸法测定灵芝多糖的含量,用正交试验优化灵芝多糖的提取工艺,发现利用超声-微波协同萃取灵芝多糖更省时㊁提取率更高.陈洁等人[7]以脾细胞代谢MT r活力为评价指标,采用正交试验对超声时间㊁水提温度和水提时间等影响因素进行考察,确定最佳的提取工艺.H u a n g S.Q等人[8]研究了微波-超声波辅助提取灵芝多糖,得出最佳的微波-超声波辅助提取灵芝多糖的条件:微波输出功率284w,超声波功率50w,频率40k H z,时间701s,料液比1ʒ11.6.该工艺条件下灵芝多糖产率明显优于经典热水提取法和纯超声提取法.Z h uX.Y等人[9]研究了机械化学法(C M C A)辅助提取灵芝多糖,得出最佳提取工艺条件为:料固比5g g-1㊁球磨时间20m i n㊁料液比20m L g-1㊁提取时间130m i n.产量为(5.92ʃ0.13)%.2.2㊀纯化与含量测定灵芝粗多糖的纯化和多糖含量的测定是进行灵芝多糖活性实验的重要前提.当前灵芝多糖的纯化主要采用S a v a g e法㊁H C l法和柱色谱分离来获得单一组分多糖;含量测定则主要是使用硫酸-蒽酮法和苯酚-硫酸法.杨德等人[10]采用S a v a g e法和H C l法研究了灵芝多糖纯化过程中的去蛋白方法,发现S a v a g e法和H C l法对灵芝多糖提取液中的杂蛋白均能除去,但两种方法的去蛋白效果和多糖损失率差异明显.禹建春等人[11]在进行灵芝多糖提取工艺优化研究时以苯酚-硫酸法测定灵芝多糖含量,并以多糖提取量为工艺优化的考察指标.杨瑞瑞等人[12]对灵芝多糖含量测定方法进行了改进,改进后的含量测定方法操作更简单㊁结果更可靠.3㊀灵芝多糖的结构分析鉴于检测技术的欠缺和多糖的分子量大,当前多糖结构分析多停留在单糖组成㊁分子量和螺旋结构的研究,具体的灵芝多糖分子结构研究报道则甚少.何晋浙等人[13]经H I O4氧化㊁S m i t h降解及甲基化反应,并借助光谱仪器对灵芝水提多糖的结构特征及三螺旋体结构进行分析研究,结果表明:灵芝多糖含有三螺旋体构型,其主要单糖组分为葡萄糖.朱影[14]采用现代光谱技术对雪灵芝多糖的结构进行初步研究,确证AM P I-B和AM P4-A均由鼠李糖㊁阿拉伯糖㊁木糖㊁甘露糖㊁葡萄糖㊁半乳糖组成.何晋浙等人[15]利用苯酚-硫酸法联合多种光谱测试技术进行多糖组分㊁含量㊁结构和分子量分析研究.研究确证灵芝多糖结构主要为βG糖苷键连接的吡喃型葡聚糖,其主要单糖组分为葡萄糖,含量为89%左右.Q i a n Y.等人[16]采用沸水萃取法得到灵芝多糖(G L P),并采用高效液相色谱(H P L C)对其进行分析,分析结果显示G L P由5个单糖和二糖组成,包括:木糖㊁果糖㊁葡萄糖㊁蔗糖和麦芽糖.Z h a oL.Y.等人[17]对其分离纯化所得的灵芝多糖进行了U V㊁I R光谱表征和分子量㊁单糖组成研究.袁红波[18]采用物理方法和化学方法联合使用对得到的灵芝多糖(G L P B S1G1Ga)结构进行了初步解析,最终推出G L P B S1G1Ga主要存在以下结构重复单元:αGLGF u c p1ˌ26)GαGDGG a l pG(1ң6)GαGDGG a l pG(1ң6)GαGDGG a l pG(1ң6)GαGG a l pG(1ң50㊀ ㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀广西师范学院学报:自然科学版㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第31卷4㊀灵芝多糖的硒化修饰在缺硒地区,人群食物中达不到每天每人40微克以上的标准补硒水平,特别是严重缺硒地区人群,很难从食物中摄取硒以达到补硒的目的.作为有机硒化合物,硒多糖具有抗氧化㊁抗衰老㊁提高免疫力㊁降血糖㊁降血脂㊁预防酒精肝㊁抗肿瘤㊁抗金属中毒等多种生理活性,是一种很好的生物补硒剂.尚德静课题组[19~22]从深层加硒培养所得的灵芝菌丝中分离提取得到灵芝硒多糖S e G L PG2A和S e G L PG2BG1,通过S e p h a d e x GG100㊁聚丙烯酰胺凝胶电泳和紫外光谱分析确证S e G L PG2A为均一级分,并由红外光谱分析确定S e G L PG2A为αG糖苷键连接的吡喃多糖.该课题组还进行了S e G L PG2BG1诱导乳腺癌细胞(M C FG7)周期阻滞㊁凋亡机制及凋亡机制中的抗氧化作用的研究.S h a n g D.J等人[23~24]从富硒化的灵芝菌丝中分离提取得到灵芝硒多糖S e G L PG2BG1,并研究S e GGL PG2BG1对六种人类肿瘤细胞K562㊁M C FG7㊁H e l a㊁S K V O4㊁H e p G2和7721抗肿瘤活性,发现S e G L PG2BG1的活性是灵芝多糖G L PG2BG1的10倍.S h a n g D.J等人还进一步研究了S e G L PG2BG1对M C FG7细胞凋亡作用的影响研究,发现S e G L PG2BG1对M C FG7细胞凋亡的潜在机制为通过线粒体介导的途径实现细胞凋亡.5㊀灵芝多糖的生物活性5.1㊀抗氧化活性杨丽娟等人[25]研究灵芝多糖肽对人脐静脉内皮细胞(HU V E C s)氧化损伤的保护作用.结果表明,灵芝多糖具有抗氧化作用,可减少脐静脉内皮细胞氧化损伤引起的细胞凋亡.张志军等人[26]对灵芝多糖清除羟自由基㊁超氧阴离子自由基的能力进行了研究.结果表明,灵芝多糖具有抗氧化的作用和清除自由基的能力,且其清除能力与多糖的浓度呈一定的正相关关系.付欣[22]研究了灵芝硒多糖S e G L PG2BG1诱导M C FG7细胞凋亡机制中的抗氧化作用,发现在S e G L PG2BG1诱导M C FG7细胞凋亡的过程中,抗氧化酶C A T㊁S O D㊁G S HGP x随着作用时间的延长而增加,而细胞内活性氧含量(R O S)则降低.C h e nY.G等人[23]研究了灵芝多糖对卵巢癌小鼠血清中抗氧化酶活性的影响,结果显示灵芝多糖能显著降低MD A含量,提高血清抗氧化酶的活性.5.2㊀免疫作用张莘莘等人[27]研究了黑灵芝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞N O㊁I LG1β㊁T N FGα生成的影响,发现黑灵芝多糖可促进正常巨噬细胞活化并释放N O㊁I LG1β㊁T N FGα,进而增强机体免疫力.耿卫朴等人[28]探讨了灵芝多糖和当归多糖对人外周血活化T淋巴细胞的免疫作用.结果表明,灵芝多糖能下调C a s p a s eG3蛋白表达并抑制T淋巴细胞凋亡,具有确切的促进人外周血T细胞免疫的作用.Z h uX.L等人[29]研究了灵芝多糖对小鼠骨髓造血功能的影响,结果显示灵芝多糖能选择性地结合骨髓基质细胞,刺激造血生长因子的分泌,并增强造血细胞和间质细胞的集落形成活性,进而促进造血.S u nL.X等人[30]进行了灵芝多糖对B16F10细胞激活淋巴细胞的活性研究.结果表明,灵芝多糖能提高B16F10细胞激活淋巴细胞的活性.5.3㊀降血糖作用黄智旋等人[31]通过动物实验的方法研究灵芝多糖对实验性高血糖小鼠及正常小鼠血糖的调节作用,发现灵芝多糖对四氧嘧啶㊁去甲肾上腺素所致的高血糖均有降血糖作用.王艳梅[32]探讨了灵芝多糖对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞表达转化生长因子β1(T G FGβ1)㊁I V型胶原(C o lGI V)表达的影响.结果表明,灵芝多糖以剂量性依赖的方式抑制高糖环境下肾小球系膜细胞的T G FGβ1㊁C o lGI V过度表达.第3期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀邹修文,等:灵芝多糖的研究进展 51㊀ L i F.L等人[33]研究了灵芝多糖(G LGP S)对链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠的降血糖作用,结果显示灵芝多糖(G LGP S)具有降血糖作用.Z h e n g J.S等人[34]研究了灵芝多糖(G LGP S)对链脲佐菌素(S T Z)致糖尿病型大鼠的降血糖作用,发现灵芝多糖能显著降低S T Z诱导的糖尿病鼠的空腹血糖㊁总胆固醇和甘油三酯.C h u nX i a o等人[35]探讨了灵芝多糖(G L P s)对2型糖尿病小鼠的降血糖作用.结果表明, G L P s能显著降低2型糖尿病模型小鼠空腹血糖水平,且呈剂量依赖性.5.4㊀抗肿瘤活性曲红光等人[36]就灵芝多糖对卵巢癌耐药细胞S K O VG3/D D P耐药逆转的作用及机制进行了探讨.结果显示,灵芝多糖具有抗肿瘤的作用,同时对肿瘤细胞的耐药性有改善作用,对肿瘤细胞的化疗药物敏感性也有增强作用.杨淑文等人[37]比较了5种灵芝硒多糖S e G L P对S180肉瘤的抑制作用及其与抗氧化作用的关系,发现5种灵芝硒多糖S e G L P均可有效地抑制S180肉瘤的生长,使血液及肝脏内S O D的活性显著提高,而使血液及肝脏内M D A的含量降低.李颖博等人[38]研究了灵芝多糖(G P L)的抗肿瘤作用及其机制.结果显示,灵芝多糖的抗肿瘤作用是通过抑制肿瘤细胞粘附并迁移穿过内皮细胞来实现的.李建军等人[39]探讨灵芝多糖抗肿瘤作用的免疫学机制,发现灵芝多糖的抗肿瘤作用是通过促进荷瘤小鼠免疫细胞的增殖与分化,增加效应免疫细胞的数量来实现的.李杨[19]研究了灵芝硒多糖S e G L PG2BG1诱导乳腺癌细胞M C FG7凋亡的机制.结果表明,S e G L PG2BG1作用M C FG7细胞24h后即开始出现早期的凋亡,72h后抑制作用达到三个时间点的峰值,抑制率高达80.53%,I C50仅为0.158μM.于志[21]进行了灵芝硒多糖S e G L PG2BG1诱导乳腺癌细胞M C FG7细胞周期阻滞的研究,发现S e G L PG2BG1作用M C FG7细胞后,引起细胞周期G1/S期,S/G2期阻滞.6㊀结㊀语当前,市售的硒多糖类药物有复方硒多糖胶囊㊁香菇硒多糖胶囊等,研究硒多糖的显著成果也越来越多.目前已有硒多糖应用于临床,开发研制硒多糖的药品和保健品已渐渐成为医药开发的主要方向之一.灵芝作为拥有数千年药用历史的中国传统珍惜药材,开发利用灵芝必将前景无限.因此,广泛地开发和利用灵芝多糖具有一定的现实意义,但关于结构复杂的灵芝多糖对机体的作用机制和可能产生的毒副作用尚未完全清楚,还有待于深入研究.可见,深入研究灵芝多糖生物和药理活性,对今后灵芝多糖在保健或药物方面的开发利用方面具有重大的意义.参考文献:[1]㊀靳丹虹,牛艳秋,陈博,等.不同提取方法对灵芝多糖提取率的影响[J].中国药师,2008,05:551G552.[2]㊀付丽丽.灵芝多糖的提取及其在乳品生产中的应用研究[D].吉林大学,2013.[3]㊀李靖.响应面优化灵芝多糖提取工艺研究[J].食品工业,2013,07:22G24.[4]㊀周吴萍,杜文佳.灵芝多糖提取工艺的优化[J].湖北农业科学,2013,15:3632G3634.[5]㊀温磊,尚德静,王伟.灵芝硒多糖的制备及其分离纯化[J].中国食用菌,2005,06:44G46.[6]㊀张玉朝,李小艳,宋强,等.超声G微波协同萃取灵芝多糖最佳工艺研究[J].福建中医药大学学报,2011,02:36G38.[7]㊀陈洁,雷林生,常花蕾.灵芝活性多糖的提取工艺研究[J].广东药学院学报,2009,04:348G351.[8]㊀H u a n g S,N i n g Z.E x t r a c t i o no f p o l y s a c c h a r i d e f r o m G a n o d e r m a l u c i d u ma n d i t s i mm u n e e n h a n c e m e n t a c t i v i t y[J].I n t e r n a t i o n a l j o u r n a l o f b i o l o g i c a lm a c r o m o l e c u l e s,2010,47(3):336G341.[9]㊀Z h uX,C h e nX,X i eJ,e t a l.M e c h a n o c h e m 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o n,b l o o d l i p i dGl o w e r i n g a n d a n t iGa g e i n g.W i t h t h e i n c r e a s i n g v a l u e i n i t s d e v e l o p m e n t a n du t i l i z a t i o n,G a n o d e rGm a l u c i d u m p o l y s a c c h a r i d e s h a sb e c o m e a r e s e a r c hh o t s p o t i nr e c e n t y e a r s.T h e p a p e r s y s t e m a t i c a l l y s u mm a r i z e s t h e r e s e a r c ho nG a n o d e r m a l u c i d u m p o l y s a c c h a r i d e s,i n c l u d i n g t h e e x t r a c t i o n,s e p a r a t i o n a n d p u r i f i c a t i o n,a s s a y,s t r u c t u r a l a n a l y s i s,s e l e n i u m m o d i f i c a t i o na n db i o l o g i c a l a c t i v i t y,e t c.K e y W o r d s:G a n o d e r m a l u c i d u m p o l y s a c c h a r i d e s;s t r u c t u r a l a n a l y s i s;s e l e n i u m m o d i f i c a t i o n;b iGo l o g i c a l a c t i v i t y[责任编辑:黄天放]。
灵芝多糖抗肿瘤靶向作用机制研究进展
灵芝多糖抗肿瘤靶向作用机制研究进展【关键词】灵芝多糖抗肿瘤靶向灵芝在中国已有2000多年的药用历史,大量的民间实践证明灵芝对多种疾病具有明显的疗效,其主要药效成分为(ganoderma lucidum polysaccharides, GLP), GLP存在于灵芝属真菌的菌丝体和子实体中,由肽多糖、葡聚糖、杂多糖等组成的混合物,是灵芝的主要有效成分之一,尤其GLP 药理活性广泛; 具有提高机体免疫功能、抗肿瘤等作用。
1 GLP抗肿瘤的药理研究现状1.1 GLP物质的化学成分《中国药典》2000年版首次收录了灵芝(包括赤芝、紫芝)。
GLP的化学成分主要从赤灵芝(Ganoderma lucidum Karst)的子实体中分离得到一种具有促进T淋巴细胞分裂的多糖,相对分子质量(Mr)为718 000,不含蛋白质,是一种自由D-葡萄糖组成的具有β-(1-6)残基侧链的β-(1→3)-D葡萄糖,与其他多糖相比其分歧程度较低,具有三股螺旋结构,认为其活性与其三股螺旋结构、离子基团及负电荷的密度有关。
从赤芝中分离得到一个水溶性抗肿瘤多糖GL-1,由葡萄糖、木糖=阿拉伯糖组成,该多糖具有抗S180肿瘤细胞的作用,还分离得到抗衰老多糖GLA、GLB、 GLC等[1]; Saito等从灵芝子实体碱性提取物中分得的GLP,由D-葡萄糖、 D-半乳糖、 D-甘露糖、 D-木糖L-岩藻糖、 L-鼠李糖、 L阿拉伯糖等组成; GLP的化学结构、空间构象有明确细致的显示。
黎铁立等从泰山赤芝(ganoderma lucidum karst)中分离得到7个多糖肽,其中二个为TGLP-2和TGLP-3。
TGLP-2的Mr为2.09×105,为β-(1→3)(1→4)苷键连接的甘露葡聚糖肽,含肽量为8.9%。
TGLP-3的Mr为405 000,为β-(1→3)(1→4)(1→6)苷键连接的葡聚糖肽,且有α-苷键存在,含肽量为4%。
灵芝多糖的药效学研究__抗恶性肿瘤_抗血栓和抗凝血作用
灵芝多糖的药效学研究
. 抗恶性肿瘤、抗血栓和抗凝血作用
陈建济 吴志强 王秀敏 李克华 刘广芬 王晴川 ( 福建医科大学蛇毒研究所 350004) 胡 恩 林志伟 杨 亮 王素香 林珉弘 ( 福建中医学院中药系实习生 350003)
C he n J ia n ji, W u Zh iq ia ng , e t a l ( Fu jia n M e d ica l Un ive rs ity , L a bo ra to ry of S na ke V e nom Re s e a rch 350004) Hu En, L in Zh iw e i e t a l (Fu jia n C o lloe ge of T ra d itiona l C h ine s e M e d ic ine 350003)
Stra it Pha rm aceu tica l Jou rna l V o l 12 N o 1 2000
续表 3
Po s.
15 16 17 18 19 20 1’ 2’ 3’ 4’ 5’ OA c
∆1H
∆13C
37. 41
1. 67 s
25. 56
1. 13 s
31. 85
2. 09 s
21. 08
A bs tra c t Study on the an t icancer act ivity and the effect on b lood coagu la t ion of Po ly saccha rides sep a ra ted Ganoderm a lucidum ( ling zh i)w a s repo rted in th is p ap er. Po lysaccha ride of Ganoderm a lucidum (GL PS)w a s
灵芝多糖的研究
灵芝多糖的研究摘要:灵芝多糖是灵芝中的主要有效成分。
本研究对灵芝多糖的分离和纯化方法作了阐述,对其化学结构作了初步分析,并且对工业发酵方法生产的三种灵芝菌粉与相应的野生或栽培的灵芝子实体进行了灵芝多糖含量方面的比较从而说明,利用现代发酵技术生产灵芝菌粉将很有希望成为以后生产灵芝的一种主要方法。
关键词:灵芝多糖;发酵灵芝菌粉;野生灵芝;栽培灵芝引言灵芝的概述灵芝隶属于真菌界,担子菌纲,无褶菌目,猴椅菌科,万年茸(灵芝)属。
学名为Ganoderma fucldlum(Fr.)Karst。
它是观赏、医药兼用的菌类。
由于整个菇体木化,可长久保存不腐败,故有”万年菌”之称。
1.灵芝的保健作用灵芝是我国传统的扶正固本,滋补强壮的中药,历代医书均将之列为中药上品。
早在2千多年前的春秋战国时期《列子,汤问》列御寇中云“朽壤之一,有菌之者”,并总结当时利于灵芝治病保健的经验:“煮百沸其味清芳,饮之明目,脑清,心静,肾坚,其宝物也”。
[1]最早的医学著作《神农草经》把灵芝列为上品,谓其“久味苦平,主治中结,益心气,补中,增智慧,不忘,久服轻身不老”。
李时珍的《本草纲目》中对灵芝药性和功效作了详尽的记述:赤芝,苦平无毒,主治中结,益心气,补中,增智慧,不忘;紫芝,甘温无毒,好颜色,治虚痨,治痔。
[2]现代药理和临床研究证明,灵芝中迄今已分离到150余种化合物,但多数药理活性与灵芝多糖有关。
活性多糖是一种具有某些特殊生理功能的多糖类高分子化合物,广泛存在于植物,动物和微生物组织中。
近年来,多糖结构与功能的关系以及多糖复合物疫苗等研究在国际上受到了较多关注。
灵芝多糖主要以下生理功能:(1)调节免疫功能(2)抗肿瘤作用(3)促进体内核酸与蛋白质的代谢(4)抗氧自由基作用(5)灵芝多糖有镇定作用,强心作用和提高实验动物耐受常压缺氧的能力等其他功能2.实验的材料和方法2.1材料泰山赤芝T-1,韩国灵芝K-1,日本灵芝J-1.三种灵芝菌种均为山东莱芜农科所保存品种。
灵芝多糖的研究及其提取工艺
灵芝多糖提取工艺1、灵芝多糖简介灵芝多糖是一种从灵芝孢子粉或灵芝中提取的物质。
不溶于高浓度的酒精 , 微溶于低浓度的酒精及冷水 , 在热水中能全部溶解。
目前已分离到的有200多种,其中大部分为β–葡聚糖,少数为α–葡聚糖,多糖链由三股单糖链构成,是一种螺旋状立体构形物,其立体构形和DNA、RNA相似,螺旋层之间主要以氢键固定,分子量从数百到数十万,除一小部分小分子多糖外,大多不溶于高浓度酒精,在热水中溶解,大多存在于灵芝细胞内壁。
灵芝多糖都存在于灵芝的细胞壁内壁。
灵芝多糖中除含有葡萄糖外 , 大多还含有阿拉伯糖、木糖、半乳糖、岩藻糖、甘露糖、鼠李糖等单糖 , 但含量较少。
单糖间糖苷键连接有1,3、 1,4 和 1, 6 数种。
大多为β型结构 , 少数为α- 型结构。
α-型多糖没有药理活性 ( 药效 ) 。
多数多糖链有分枝 , 部分多糖链含有小分子肤链。
多糖链分枝密度高或含有肤链的其药理活性也高。
灵芝多糖在水溶液中多糖链一般由三股糖链组成 , 在 o. 1 摩 / 升氢氧化纳溶液中时多糖链的三股糖链离解为单股单糖链。
多糖的药理活性与单糖间糖苷键的结合形式有关。
单糖间以β- 1 , 3 、 1, 6 或β-1,4 、 1, 6-糖苷键连接是有效的即具有药理活性 , 而纯β_-1 ,4- 糖背键连接的则没有药理活性。
此外 , 多糖的药理活性还与其立体构形有关 , 若螺旋形立体结构被破坏 , 其活性则大大下降。
淀粉、纤维素、糊精也是多糖 , 但其构形与灵芝多糖 ( 或其他真菌多糖 ) 不同。
淀粉、纤维素等多糖没有螺旋形立体结构 , 单糖间的连接全是β- 1,4-连接。
纤维素是β-型多糖 , 淀粉、糊精是α-型多糖。
由于其构形不同 , 所以淀粉、糊精、纤维素都没有药理活性。
灵芝多糖是灵芝的最有效成分之一 ,已分离到的灵芝多糖有 200 多种 , 其中有数十种的结构已被搞清 , 分子量已被测定。
现知灵芝多糖有广泛的药理活性,能提高机体免疫力,提高机体耐缺氧能力,消除自由基,抑制肿瘤、抗辐射,提高肝脏、骨髓、血液合成DNA、RNA、蛋白质能力,延长寿命,灵芝多糖还具有刺激宿主非特异性抗性、免疫特异反应以及抑制移植肿瘤生理活性的特性。
灵芝多糖的研究进展_张卫国
中图分类号:R979.1 R730.53;文献标识号:A ;文章篇号:1007-2764(2003)03-0036-85 灵芝多糖的研究进展张卫国1 刘欣2 陈永泉2 (1韶关大学英东生物工程学院 韶关 512005)(2华南农业大学食品学院 广州510642) 摘 要: 灵芝多糖是灵芝中含有的一种高分子活性多糖,具有多种生理功能,国内外对此开展了广泛的研究。
本文对其生理功能、结构特点、发酵生产等方面的研究进行了综述。
关键词:多糖;生理功能;结构;发酵 Research advance of G.japonicum polysaccharideZhang Weiguo1, Liuxin 2, Chen Yongquan2(1 Food Department , Shaoguan University, Shaoguan ,512005)(2 Food college, South-China Agricultural University, Guangzhou 510642)Abtract: G.japonicum Polysaccharide is a high-molecule active material that has many functions. Its research has done widely at home and abroad. The paper reviews its function, structure and fermenting production.。
Key words: polysaccharide; function; structure; fermentation1 灵芝及其医疗保健作用 灵芝是一种营养、保健价值极高的大型担子菌。
目前已知灵芝属约有100多种,其中以赤芝和紫芝的药理价值最高,临床上主要也是使用这两种灵芝[1]。
我国是灵芝真菌资源丰富的国家,它们多生长在浙江、江西、湖南、广西、云南、贵州、福建、海南等地区,紫芝是中国特有的灵芝种类[2]。
多糖的研究方法及其进展 PPT课件
糖醛酸 D-葡萄糖酸,D-半乳糖酸,D-甘露糖酸
去氧己糖 L-鼠李糖,L-岩藻糖,6-去氧-塔罗糖
多糖研究与开发的关键
——多糖均一组分
——深入研究结构分析、构效关系 多糖的纯度标准:
不能用通常小分子化合物的纯度标准来衡量 多糖纯品微观是不均一的,纯度只代表同一种
多糖的相似链长的平均配布
通常符合下列标准即可肯定为均一多糖:
多糖的研究方法及其进展 PPT课件
血型 ----红血球表面糖链末端糖基的不同
恶性肿瘤细胞与正常细胞的不同 ----糖链的不同
1995年Hirabayashi提出 “类似于基因密码, 可 能也存在多糖密码”的论点.
多糖的研究己愈来愈受到人们的关注. ——国内外正在形成热点
生物细胞 特征: 繁殖(复制)⇌凋亡 ----平衡
从高等真菌中获得的β-葡聚糖大多具明显 的免疫活性,但它们在消化道内难以被肠道壁 直接吸收而进入血液,所以必须通过注射才能 发挥作用.如果进行结构修饰,使其能被消化道 吸收,变注射为口服,则将大大简化给药途径.
从植物及海藻中获得的活性多糖一般是杂 多糖
-----它们大多口服也有效.
-----植物及海藻来源的活性多糖可以 作为保健品的优越之处
多糖的构效关系的研究是寻找高活性多 糖及深入研究多糖作用机制的基础
最近 作用机理研究 -------进展快
机体 免疫细胞 多糖 ----分子水平
-------激活 --------释放出细胞间传导的信息Cytokine
-------再作用于免疫细胞 ---------体内协同作用
最终 抑制肿瘤生长
表1记录了来自天然界的一些重要多糖。 天然界存在的单糖种类很多,但组成多糖的单糖大致由表
灵芝多糖抗肿瘤免疫机制的研究进展
灵芝多糖抗肿瘤免疫机制的研究进展I. 概括随着现代医学的发展,肿瘤已成为全球范围内的主要健康问题。
肿瘤免疫治疗作为一种新兴的治疗方法,越来越受到研究者和临床医生的关注。
灵芝多糖作为一种具有广泛生物活性的天然物质,近年来在肿瘤免疫治疗领域取得了显著的研究进展。
本文将概述灵芝多糖抗肿瘤免疫机制的研究进展,包括其对肿瘤细胞的直接作用、调节免疫细胞功能以及与免疫抑制剂的相互作用等方面。
介绍灵芝多糖作为一种天然药物的来源和作用机制,以及其在肿瘤免疫治疗中的应用价值随着肿瘤免疫治疗在肿瘤临床中的应用越来越广泛,灵芝多糖作为一种天然药物的来源和作用机制,以及其在肿瘤免疫治疗中的应用价值也逐渐受到了研究者的关注。
本文将介绍灵芝多糖的来源、作用机制及其在肿瘤免疫治疗中的应用价值。
首先我们来了解一下灵芝多糖的来源,灵芝多糖是一种具有高生物活性的多糖类物质,主要来源于灵芝(Ganodermalucidum)这种珍贵的中草药。
灵芝多糖是灵芝子实体中含量最高的一种活性成分,具有很高的药用价值。
近年来通过对灵芝多糖的研究发现,它具有多种生物学活性,如抗炎、抗氧化、抗肿瘤、增强免疫力等。
接下来我们来探讨一下灵芝多糖的作用机制,研究表明灵芝多糖可以通过多种途径发挥抗肿瘤作用。
首先灵芝多糖可以刺激机体产生更多的天然杀伤细胞(NK细胞),从而提高机体的抗肿瘤能力。
其次灵芝多糖可以激活机体的巨噬细胞,促使其分泌更多的肿瘤坏死因子(TNF),进一步增强机体的抗肿瘤能力。
此外灵芝多糖还可以抑制肿瘤细胞的生长和扩散,从而达到抗肿瘤的目的。
我们来探讨一下灵芝多糖在肿瘤免疫治疗中的应用价值,目前灵芝多糖已经成为肿瘤免疫治疗领域的一个重要研究对象。
通过将灵芝多糖作为免疫调节剂引入到肿瘤免疫治疗中,可以有效地提高患者的抗肿瘤能力,延长患者的生存期,并降低化疗和放疗的副作用。
因此灵芝多糖在肿瘤免疫治疗中具有很大的应用前景。
灵芝多糖作为一种天然药物的来源和作用机制已经得到了广泛的研究和认可。
灵芝多糖的研究进展
灵芝多糖的提取方法
目录
灵芝多糖的分离纯化
灵芝多糖的结构分析
灵芝多糖的生物活性
灵芝多糖
灵芝多糖是多孔菌科灵芝属真菌菌丝体的次生代谢产 物,存在于灵芝属真菌的菌丝体和子实体中。灵芝子实体 粉碎加入少量培养基发酵,发酵后原料离心,上清液低温 真空浓缩,透析,乙醇沉淀,丙酮洗涤,除蛋白,喷雾干 燥,最后加入10%水提干粉混合而成。灵芝多糖为浅棕色 至棕褐色粉末,可溶于热水。
4.降血脂:灵芝多糖可使血脂中的胆固醇和甘油三酯都有明显降低, 而对于脂蛋白,其中高密度脂蛋白没有明显的效果,而低密度脂蛋 白有非常明显的降低。 5.降血糖:灵芝多糖对四氧嘧啶、去甲肾上腺素所致 的高血糖均有降低作用。
展望
由于灵芝多糖的复杂性以及分离和分析方法的种种限制,灵芝 多糖的种类至今尚未探明,其分子结构也未完全确定,灵芝多糖 结构与它药理关系的报道也并不多见。因此,进一步探明灵芝多 糖的化学结构,提高提取效率,浓缩精华,并对灵芝多糖的结构 进行修饰以提高其免疫和抑癌活性等,应是以后的研究方向。
糖苷键分析
灵芝多糖中,单糖之间以糖苷键形式连接,其对多糖分子的生 物活性有着重要意义。目前常用的糖苷键分析方法主要有高碘酸氧 化和 Smith 降解、甲基化、部分酸水解、红外光谱,核磁共振等分 析方法。高碘酸氧化是通过一系列的氧化还原作用,使最终的水解 产物通过紫外检测,得出糖苷键的类型是 l → 4 、1 → 6 、 1 → 2 中的哪种。甲基化法先将多糖衍生化,在与气相色谱、质谱结合使 用,可以准确知道组成多糖的各单糖种类、比例和各单糖的连接位 置。部分酸水解是将多糖分解为一个一个容易检测的小片段,并且 可以在特殊糖苷键处断裂,从而推断出多糖的大概结构。
灵芝多糖的分离纯化
灵芝多糖抗肿瘤免疫机制的研究进展
灵芝多糖抗肿瘤免疫机制的研究进展张华斌【摘要】灵芝多糖因其免疫调节功能、抑制肿瘤生长且无不良反应等特点,被认为是通过调节机体免疫功能达到抗肿瘤目的的一味良好的药物. 其抗肿瘤作用可能通过抑制肿瘤细胞增殖并诱导凋亡、抑制肿瘤血管新生、调节机体免疫等途径实现,其中调节细胞因子、机体固有免疫系统、T/B淋巴细胞及黏膜免疫系统等的免疫机制可能是其发挥抗肿瘤作用的主要机制.%Ganoderma lucidum polysaccharides can regulate the immune function and inhibit the growth of tumor,with no side effects.It is considered as a good anti-tumor drug through immune regulation .The anti-tumor function of Ganoderma lucidum polysaccharides may be inhibiting tumor cell proliferation and inducing apoptosis,and inhibiting tumor angiogenesis,and immune regulation etc.,among which regulating immune mechanisms including cytokines,the innate immune system,T/B lymphocytes and mucosal immune system, may be the main mechanisms of the anti-tumor effect.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2016(022)002【总页数】4页(P259-262)【关键词】灵芝多糖;免疫机制;抗肿瘤【作者】张华斌【作者单位】福建医科大学附属协和医院神经外科,福州350001【正文语种】中文【中图分类】R285.5灵芝多糖主要包含胞内多糖和胞外多糖。
灵芝多糖提取工艺研究进展
第20期宁娜,等:灵芝多糖提取工艺研究进展-63•灵芝多糖提取工艺研究进展宁娜02,3,韩建军7,杨广安7,郁建生013(0铜仁职业技术学院药学院,贵州铜仁554300; 2.民族中兽药分离纯化技术国家地方联合工程研究中心,贵州铜仁554300;3.铜仁职业技术学院中兽药国家民委重点开放实验室,贵州铜仁554300)摘要:灵芝含有多糖、萜类、核苷酸等成分,其中多糖类成分含量较高,具有广泛的药理活性。
灵芝多糖具有降血糖、抗癌、抗氧化等多种活性。
本文对灵芝多糖的提取技术进行了综述,为灵芝的进一步开发利提供依据。
关键词:灵芝;多糖;提取工艺;进展中图分类号:TQ452.7文献标识码:A文章编号:138-921X(2929)29-0066-97ReseercO Praoresu on Extraction Technologyof Polysucchaades fram Ganoderma luciOumNing NcO0,Han Jianjun,h ang Guangan,0u Jiansheng10((.Department oZ Pharmacy,Tongren Vocahonai and Technical College,Tongren554300,China;.Nahonct and Locct Engineering Research Centro for Separa/on and Purification Ethnic Chinese VeteOnara HerUs,Tongren554300,China;3.Key Open LaPomWm oZ TrabiUonai Chinese VeteOnara MeVicinc,Tongren Voca/onai and Technical College,Tongren554300,China)Abstraci:Ganoberma lucidum is rich in a variety of chemical ingrehients,inclubing polysaccharides,(eruencs,nucleo/dcs,etc.Among these ingrehients,the content oZ polysaccharides is higher,which has widely pharmacoloyicai activity-This paper revieweh poCsaccharidcs from Ganoberma lucidum which provideh the basis for beUer development and utilization oZ Ganoberma lucidum.Key words:Ganoberma lucidum;poCsaccharidcs:extraction Wchnoloay,proyress灵芝为多孔菌科植物赤芝Ganoberma lucidum(Leyss.ex Fr.1Karst或紫芝Ganoberma pnenso Zhao,Xu et Zhang的干燥子实体。
灵芝多糖的生物活性研究进展
第24卷 第5期 安 徽 中 医 学 院 学 报 Vol .24 No .5 2005年10月 JOURNAL OF ANHU I TC M COLLEGE Oct .2005 灵芝多糖的生物活性研究进展戴则林,董昌武1(安徽省六安市卅铺医院,安徽六安 237011) 关键词:灵芝多糖;生物活性;药理作用 中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1000-2219(2005)05-0060-03 灵芝多糖(Ganoder ma lucidu m polysaccharides,G LP )存在于灵芝属真菌的菌丝体和子实体中,是灵芝的主要有效成分之一,是由肽多糖、葡聚糖、杂多糖等组成的混合物。
葡聚糖中大部分为β葡聚糖,少数为α葡聚糖,而β葡聚糖是其发挥活性的主要成分。
G LP 药理活性广泛,具有提高机体免疫功能、抗肿瘤、消除机体内自由基、抗辐射、提高肝脏解毒功能等作用。
笔者拟对灵芝多糖的生物活性研究进行述评。
1 G LP 的生物活性研究1.1 免疫调节作用1.1.1 对T 细胞的作用:李明春等[1]研究表明,G LP 能迅速提高静息T 细胞中三磷酸肌醇(I P 3)的浓度,且被Gp 蛋白抑制剂PT X 所抑制,还可显著促进静息T 细胞中二酞基甘油(DAG )的合成,而对活化T 细胞则无作用。
认为G LP 激活T细胞的机制之一是通过I P 32Ca 2+与DAG 2蛋白激酶C (PKC )信号传递途径。
进一步研究[2]证明,G LP 可使小鼠静息T 细胞中蛋白激酶A (PK A )和PKC 活性明显升高,并使PK A 发生质膜转位,并拮抗十字孢碱(Staur os porine )对T 细胞PKC 活性的抑制。
1.1.2 对B 细胞的作用:成熟的B 细胞膜上存在CD 35(C 3b受体)。
刘景田等[3]研究表明,采用G LP 作用过的红细胞做红细胞C 3b 受体花环率试验,其花环形成率明显提高,说明G LP 的作用可能与提高红细胞膜C D 35免疫活性有关。