灵芝多糖抗肿瘤靶向作用机制研究进展
灵芝多糖类成分及其生物活性研究进展
灵芝多糖类成分及其生物活性研究进展摘要:灵芝是常用的名贵中药材,药用历史悠久,药用价值高。
多糖类成分是灵芝(赤芝Ganoderma lucidum和紫芝G. sinense)中重要的生物活性成分之一,具有免疫调节、抗肿瘤、保肝、抗氧化、降血糖、心血管系统和神经保护等作用,具有潜在的开发应用价值。
通过对近年来国内外灵芝多糖的结构特征、生物活性以及潜在作用机制的相关文献进行归纳总结,为明确灵芝多糖的现代药用价值提供基础,为灵芝多糖作为治疗药物和辅助性功能食品的开发提供参考和借鉴。
灵芝Ganoderma属于担子菌纲多孔菌科真菌,为我国传统的名贵中药,有着悠久的药用历史。
与人参、何首乌、冬虫夏草并称为“四大仙草”。
据《神农本草经》记载,将灵芝按颜色划分为赤、黑、青、白、黄、紫芝6种,均被列为上品。
谓其“气味苦平、无毒。
久食轻身不老,延年神仙”。
《中国药典》2020年版规定赤芝Ganoderma lucidum (Leyss. ex Fr.) Karst.和紫芝G. sinense Zhao, Xu et Zhang的干燥子实体为灵芝的正品[1]。
现代药理研究表明,灵芝具有广泛的生物活性,能够用于预防和治疗各种内科疾病。
灵芝的化学成分丰富,主要包括多糖、三萜、核苷酸、甾醇、甾体、多肽、脂肪酸和氨基酸等[2]。
灵芝多糖作为灵芝中重要的生物活性成分之一,具有免疫调节、抗肿瘤、保肝、抗氧化、降血糖、心血管系统和神经保护等生物活性。
灵芝常见形态为高度木质化的子实体(fruiting bodies),发育后期弹射释放的种子收集后呈粉状,称为孢子粉(spores),孢子萌发形成菌丝体(mycelium),菌丝继续发育成熟则为子实体,这3种形态即为灵芝的生长周期。
以灵芝的子实体、孢子粉、菌丝体和发酵液为原料,从其中均可提取多糖。
灵芝多糖的提取工艺常用热水提取法[3],而针对细胞壁的多糖则常采用酸提[4]和碱提法[5]。
灵芝多糖现代药理研究进展
灵 芝 多糖 现 代 药 理 研 究进 展
左 军 , 李忠威 , 马育轩 , 王艳丽
( 1 . 黑龙江 中医药 大学 , 黑龙 江
摘
哈尔滨
1 5 0 0 4 0; 2 . 黑龙 江护理 高等专 科学 校 , 黑 龙江
哈 尔滨
1 5 0 0 8 6 )
要: 灵 芝 多糖 是从 灵芝 中提 取 的主要 功 效成分 。 因其 药理 作 用广泛 , 近年 来 国 内外 学者对其 药理应
自由基 的能力进 行 了研 究 。结果 表 明灵 芝 多糖具有 抗
多糖 对 N B 4细胞 增殖具 有抑 制作 用 并 可促 其 凋亡 , 最
高分 别为 3 3 . 5 %及 1 8 . 7 7 %; 且对 E g显 的促 进 作 用 , 说 明灵 芝 多 糖 在 体外
等症 j 。灵芝 多 糖 是 从 灵 芝 中 提 取 的 主要 功 效 成 分, 具 有 多 种 药 理 作 用 J 。现 将 其 抗 肿 瘤 、 调 节 免
疫, 抗 氧化 , 降血糖 、 血 脂等作 用介 绍如 下 。
1 抗 肿瘤 , 调节 免疫
移 反应 。郝 氏【 1 3 ] 将 灵 芝 多糖 和枸 杞 多 糖 联 合作 用 于 荷 H, , 肝腹 水 瘤 小 鼠模 型 , 并 与 单 独 使 用 作 比较 。结 果 发现 与单独 使用 灵芝 多糖 或 枸杞 多 糖 对 比 , 二 者联 合 使用 能够更 明显 增强 小 鼠免 疫功 能和提 高抗 肿瘤 活
肿瘤 细胞 与 内皮细 胞相 互 作 用 的影 响 , 结 果 发 现灵 芝
关键词 : 灵 芝 多糖 ; 药理 作 用 ; 研 究进展
中图分 类号 : R 2 8
灵 芝为 真菌赤 芝 或 紫芝 的干 燥 子 实体 , 其 性 平 味 甘, 归心、 肺、 肝、 肾经 , 具有 补 气安 神 、 止 咳平 喘之 功 ,
灵芝抗肿瘤机制的相关研究
灵芝抗肿瘤作用机制的相关研究灵芝( Ganoderma lucidum) 作为一种传统中药,在中国传统医学中被用来治疗多种疾病,已有2 000 多年的历史了。
近年来,作为一种膳食补充剂逐渐被西方国家所接受。
国内外许多研究者对灵芝的抗肿瘤作用做了大量研究,证实灵芝提取物在体外及体内均有较强的抗肿瘤作用。
灵芝的化学成分非常复杂,现代药学研究表明,灵芝富含多糖、寡糖、氨基酸、蛋白质、甾体、生物碱等。
其中,从灵芝的子实体、孢子和菌丝体中所提取的多糖类和三萜类被认为是灵芝抗肿瘤作用的主要活性成分。
目前市面上治疗肺癌的中成药清肺XX丸其中就还有灵芝的成分1 灵芝抑制肿瘤细胞的分裂和增殖1. 1 调节肿瘤细胞周期正常细胞的分裂增殖受生长因子等的调控,而肿瘤细胞自主分裂增殖能力增强,失去了对生长因子调节的反应,失去了对细胞周期限制点的控制。
一些研究报道灵芝提取物可以通过调节肿瘤细胞的细胞周期,达到抑制肿瘤细胞增殖的作用。
灵芝能通过调节细胞周期相关基因的表达来阻滞细胞周期,抑制肿瘤细胞的分裂增殖。
1. 2 抑制新生血管形成血管形成在肿瘤生长、浸润、转移中有重要作用。
新生血管能为肿瘤组织提供必需的营养和氧。
在实体瘤组织中,新生血管形成后,肿瘤组织的生长速度大大提高。
阻断肿瘤新生血管的形成就可阻止肿瘤的生长,降低肿瘤浸润转移的发生率。
灵芝能够通过抑制新生血管的形成,减少肿瘤的氧气和营养的供给,以此抑制肿瘤细胞的增殖。
2 灵芝促进肿瘤细胞的死亡2. 1 调节细胞凋亡基因细胞凋亡是一个多基因调控过程。
灵芝提取物能够调节影响细胞凋亡的基因的表达,从而促进肿瘤细胞凋亡。
2. 2 调节细胞凋亡过程细胞凋亡过程中,细胞凋亡信号由信号传递系统进入细胞内,作用于线粒体,进一步引起细胞结构的改变。
一些研究报道,灵芝能够对细胞凋亡的各阶段进行调节,促进细胞凋亡。
2. 3 通过细胞毒作用直接杀伤肿瘤细胞灵芝可以直接损伤肿瘤细胞的DNA,干扰肿瘤细胞的转录和翻译,降低相应蛋白质的合成,从而导致肿瘤细胞的死亡。
《2024年灵芝多糖拮抗黑素瘤细胞上清对同型小鼠淋巴细胞CD71及FasL抑制作用的研究》范文
《灵芝多糖拮抗黑素瘤细胞上清对同型小鼠淋巴细胞CD71及FasL抑制作用的研究》篇一摘要:本研究以灵芝多糖为研究对象,探究其对于黑素瘤细胞上清对同型小鼠淋巴细胞CD71及FasL抑制作用的影响。
研究结果显示,灵芝多糖具有一定的抗肿瘤活性,并能有效减轻黑素瘤细胞对淋巴细胞的抑制作用。
一、引言随着生物科技的不断进步,多糖因其广泛的生物活性和低毒副作用已成为当前研究热点。
其中,灵芝多糖以其卓越的抗肿瘤、免疫调节等特性备受关注。
黑素瘤作为一种常见的恶性肿瘤,其治疗一直是医学领域的难题。
因此,本研究以灵芝多糖为研究对象,探讨其对黑素瘤细胞上清对同型小鼠淋巴细胞CD71及FasL 抑制作用的影响。
二、材料与方法1. 材料:灵芝多糖、黑素瘤细胞、同型小鼠淋巴细胞等。
2. 方法:(1)制备灵芝多糖溶液;(2)培养黑素瘤细胞,收集其上清液;(3)将灵芝多糖溶液与黑素瘤细胞上清液共同作用于同型小鼠淋巴细胞;(4)通过流式细胞术检测淋巴细胞表面CD71及FasL的表达情况;(5)分析数据,得出结论。
三、实验结果1. 灵芝多糖对黑素瘤细胞上清的拮抗作用:实验结果显示,灵芝多糖能够显著降低黑素瘤细胞上清对同型小鼠淋巴细胞的抑制作用。
2. CD71及FasL表达情况:流式细胞术检测结果显示,灵芝多糖处理组小鼠淋巴细胞表面CD71及FasL的表达水平较对照组有所提高。
3. 数据分析:通过统计分析,我们发现灵芝多糖的加入能够显著改善黑素瘤细胞上清对同型小鼠淋巴细胞的抑制作用,提高CD71及FasL的表达水平。
四、讨论本研究结果表明,灵芝多糖具有一定的抗肿瘤活性,能够拮抗黑素瘤细胞上清对同型小鼠淋巴细胞的抑制作用。
这可能与灵芝多糖能够调节淋巴细胞表面CD71及FasL的表达有关。
CD71是一种铁转运蛋白,对于细胞的生长和增殖具有重要作用;而FasL是一种凋亡配体,能够诱导肿瘤细胞的凋亡。
因此,灵芝多糖可能通过调节这两种分子的表达,从而发挥其抗肿瘤作用。
灵芝多糖抗肿瘤作用的免疫学相关性研究
灵芝多糖抗肿瘤作用的免疫学相关性研究一、本文概述《灵芝多糖抗肿瘤作用的免疫学相关性研究》是一篇旨在深入探讨灵芝多糖在抗肿瘤过程中与免疫学之间的密切关系的研究论文。
灵芝,作为一种传统的中草药,自古以来就在东方医学中发挥着重要的作用。
近年来,随着现代生物技术的发展,灵芝中的活性成分——灵芝多糖,因其显著的抗肿瘤效果而备受关注。
然而,灵芝多糖抗肿瘤作用的具体机制仍不完全清楚,尤其是其与免疫系统之间的相互作用。
因此,本文旨在通过一系列的实验和研究,揭示灵芝多糖抗肿瘤作用的免疫学机制,为灵芝多糖在肿瘤治疗中的临床应用提供理论依据。
本文首先将对灵芝多糖的生物学特性进行概述,包括其化学结构、生物合成途径以及已知的生物学功能。
接着,文章将综述灵芝多糖在抗肿瘤作用方面的研究进展,包括其对肿瘤细胞生长、凋亡、侵袭和转移等过程的影响。
在此基础上,本文将重点关注灵芝多糖与免疫系统之间的相互作用,探讨其如何通过调节免疫细胞的功能、促进免疫细胞因子的产生以及调节免疫信号通路等方式,发挥抗肿瘤作用。
本文还将对灵芝多糖在肿瘤免疫治疗中的潜在应用前景进行讨论,以期为未来的研究提供新的思路和方向。
二、灵芝多糖的生物学特性灵芝多糖,作为灵芝的主要活性成分之一,具有独特的生物学特性。
其分子结构复杂,由多种单糖通过糖苷键连接而成,这些单糖的种类和连接方式决定了其生物活性的多样性。
灵芝多糖的主要特性表现在其免疫调节、抗氧化、抗肿瘤等方面。
在免疫调节方面,灵芝多糖能显著增强机体的免疫功能,通过激活巨噬细胞、T淋巴细胞和B淋巴细胞等免疫细胞,促进细胞因子的产生,从而增强机体的免疫应答。
灵芝多糖还能调节免疫细胞的平衡,防止过度免疫反应的发生,有助于维持免疫系统的稳态。
抗氧化方面,灵芝多糖能有效清除体内的自由基,减轻氧化应激对机体的损伤。
其抗氧化作用与多糖的结构和分子量密切相关,通过捕捉自由基、螯合金属离子等机制,保护细胞免受氧化损伤。
抗肿瘤作用则是灵芝多糖最为突出的生物学特性之一。
《2024年灵芝多糖拮抗黑色素瘤细胞上清对腹腔巨噬细胞免疫功能抑制作用的研究》范文
《灵芝多糖拮抗黑色素瘤细胞上清对腹腔巨噬细胞免疫功能抑制作用的研究》篇一一、引言近年来,黑色素瘤作为一种常见的皮肤恶性肿瘤,其发病率逐年上升,成为医学领域亟待解决的难题。
在黑色素瘤的治疗中,其恶性特征之一的免疫抑制性常常困扰着科研工作者。
对此,本论文探讨了灵芝多糖(GLPs)的抗癌效应及其拮抗黑色素瘤细胞上清(MSDC)对腹腔巨噬细胞(APM)免疫功能抑制的作用机制。
该研究为临床治疗黑色素瘤提供了新的思路和方向。
二、材料与方法1. 材料本实验所需材料包括灵芝多糖、黑色素瘤细胞上清、腹腔巨噬细胞等。
所有试剂均为市售合格产品。
2. 方法(1)建立黑色素瘤细胞上清对腹腔巨噬细胞免疫功能抑制的模型;(2)分析灵芝多糖的提取与纯化方法;(3)探讨灵芝多糖对黑色素瘤细胞上清抑制腹腔巨噬细胞免疫功能的影响;(4)通过实验数据,分析灵芝多糖的拮抗作用及其作用机制。
三、实验结果1. 黑色素瘤细胞上清对腹腔巨噬细胞免疫功能的影响实验结果显示,黑色素瘤细胞上清能够显著抑制腹腔巨噬细胞的免疫功能,表现为吞噬能力下降、分泌细胞因子减少等。
2. 灵芝多糖的提取与纯化通过优化提取条件,成功提取并纯化了灵芝多糖。
经检测,纯度达到实验要求,为后续实验奠定了基础。
3. 灵芝多糖对黑色素瘤细胞上清抑制腹腔巨噬细胞免疫功能的影响实验发现,灵芝多糖能够显著拮抗黑色素瘤细胞上清对腹腔巨噬细胞免疫功能的抑制作用。
具体表现为:灵芝多糖能够提高腹腔巨噬细胞的吞噬能力,促进其分泌细胞因子,从而增强免疫功能。
4. 灵芝多糖的拮抗作用及其机制分析通过分析实验数据,发现灵芝多糖的拮抗作用可能与以下机制有关:(1)增强巨噬细胞的抗氧化能力,减轻氧化应激对免疫功能的损害;(2)调节巨噬细胞内的信号传导途径,促进相关基因的表达,从而改善免疫功能;(3)通过增强巨噬细胞的吞噬和杀伤作用,间接抑制肿瘤细胞的生长和扩散。
四、讨论本实验研究表明,灵芝多糖具有显著的拮抗黑色素瘤细胞上清对腹腔巨噬细胞免疫功能抑制的作用。
灵芝多糖类抗肿瘤药研究进展
关键词 : 抗肿瘤 ; 灵 芝 多糖 ; 药 理 作 用 1 灵芝 多糖 的 发 现 有延年益寿之功效 , 久服可使人轻身不老 。实验证 明: 赤芝水提取物 灵芝是一类 大型真菌 , 属 于担 子菌纲 , 多孔菌属 , 灵芝科。我 国 能增加果蝇交配 次数 , 明显 延长果蝇 的平均 寿命 、 最高寿命 和半数 人 民把它用作药 物已有 2 0 0 0多年 的历史 。 近十年来 , 中外学者对从 寿命 。 灵芝增强 恢复) 机体免疫功 能的作用是抗衰老的一个方面 , 另
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科 技论坛
灵芝多糖 类抗肿瘤药研究进 展
杨 振 兴
( 哈 尔滨 誉衡 药 业股 份 有 限公 司 , 黑龙 江 哈 尔滨 1 5 0 0 0 0 )
摘 要: 大量研 究发现, 许 多疾病的发 生均 与 自由基 的损伤及免疫功 能低 下有关。 医学上认为, 人体 自身的免疫 系统 紊乱是慢性病 形 成 的根本原 因。因此, 从根本上提 高人体 免疫力是摆脱ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ性病的有效手段 。近年来植 物多糖类 由于无毒副作用、 具有抗氧化、 调 节免疫 、 多 效性 、 双向调节性 等特点, 成 为开发免疫增强剂 中的一个研究热点。多糖的免疫调 节有 细胞 、 体液及 非特异免 疫等 多个靶点, 而一种 多糖仅 对部分靶点有 明显作用。本文着重介绍 了灵芝 多糖, 包括发现、 作用机制、 药理作用与临床应用等来说 明抗肿瘤 药物 的研 究情 况及 最新进
多糖 抗 病 毒 活 性 和 分 子 量 、 溶解度 、 黏度等物理化学性质有关 。 4 结论 分子量为 9 0 0 0 0左右的右旋糖 具有一定的活性 , 其活性 随着 大于或 由于植物来源抗 肿瘤 药物 的作用机制独特 、 抗癌疗效显著, 如今 小于此分子量而迅速降低。 一般中等分子量 的多糖的活性大于高分 在 临床上 已经逐步 占据 了主导地 位, 达到 4 0 %的市场份额 。通过 药 子量及低分子量的多糖。溶解度对活性的影 响有 时也很显著 。目前 用植物生物技术 与生化 工程 寻找合理有效 的替代资 源, 以解决有 限 为止 , 除了对肝素碎片寡糖 的构效 关系研究得较 为详 细外 , 其它寡 的宝 贵资源与 日益增长 的需 求之间 的矛盾是 当务之急 同时获得 毒 糖 的构效关系研究还极少。为提高多糖的活性 , 对 多糖分子修饰 的 性低 而抗 肿瘤作用显著 的植 物来源抗肿瘤药 物的新衍 生物亦是 今 研究 取得 了很大 的进展 。将多糖进 行衍 生化 , 如 降解 、 硫酸化 、 乙酰 后 努 力 的方 向 。 化、 烷基化等都有 可能大大提高多糖的生物活性 。 参 考 文献 3 . 2免 疫 调 节 作用 [ 1 1 胡 国灿 . 灵 芝 改善 记 忆 作 用 的 观 察 I J I . 浙江 中 医杂志. 2 0 0 3 , 3 8 f 8 ) : 除了可以增强或恢复机体的免疫反应外 , 灵芝 多糖 在机体受 到 3 6 2-3 63 . 抗原 刺激 、 免疫功能异 常亢进 时 , 又可 以抑制过高的免疫反应 , 减少 [ 2 ] 李友 芸, 马跃 荣, 刘建. 激 索联 台中药薄芝注射液 治疗 肾病 综合症 自身因素造成 的免疫损伤 。张罗修等还发现灵芝 可明显抑制 D T H 的 临床 与 实验 研 究『 J ] . 四 川 医学, 2 0 0 3 , 4 ( 5 ) : 4 4 1 — 4 4 3 . 和接触性皮炎及 A r t h u s 反应 ,对 P C A也有抑制趋势。 由此证 明: 灵 [ 3 ] 张爱军, 葛文娱 , 王 宜涛, 复方灵芝乳 膏的制备及 对黄褐斑 的疗效 芝对 I、 Ⅲ及 Ⅳ型变态反应均有抑制作用 。 有研究报 道 , 灵芝水提取 观察『 J ] _ 中国皮肤性病学杂志, 2 0 0 2 , 6 ( 4 ) : 2 3 5 — 2 3 6 . 物与一定 剂量 的环磷酰胺合用 , 能使小 鼠移植 的心肌的存 活期 比单 用环磷酰胺延长( 张罗修 , 1 9 9 4 )  ̄ P 灵芝有协 同低剂量 C T X而抑制 排 异反应的作用 。另有报道 , 灵芝 醇深层 发酵液 对卵蛋 白抗血清及破
灵芝抗肿瘤活性和免疫调节作用的研究进展
·优秀科研工作·灵芝抗肿瘤活性和免疫调节作用的研究进展林志彬■(北京大学基础医学院药理系,北京 100083)[关键词]灵芝/药理学;多糖类/药理学;抗肿瘤药(中药)/药理学;自由基清除剂[摘 要]本文综述灵芝提取物和灵芝多糖的抗肿瘤活性和免疫调节作用及其机制。
灵芝提取物和灵芝多糖在体内显著地抑制动物移植性肿瘤生长,将二者直接加到肿瘤细胞培养基中,既不抑制肿瘤细胞增殖,也不促进其凋亡,灵芝多糖在体内的抗肿瘤机制是由免疫学机制介导的。
最近的研究指出,灵芝多糖肽在体内、外由于清除巨噬细胞中叔丁基氢过氧化物(tBOOH )产生的自由基,而具有抗氧化作用。
此外,灵芝多糖还促进体外培养的鼠骨髓衍生的树突状细胞(DC )成熟,而且还促进由DC 启动的免疫反应。
[中图分类号]R285.5 [文献标识码]A [文章编号]1671-167X (2002)05-0493-06Progress of studies on the anti -tumor activity and immu nomodulating effect of G anodermaLIN Zhi -Bin ■(Depart ment of Pharmacology ,Peking University School of Basic Medical Sciences ,Beijing 100083,China )KEY WORDS Ganodermalucidum /pharmacol ;Polysaccharides /pharmacol ;Antineoplastic durgs (TCD )/pharmacol ;Free radical scavengersSUMMA RY Anti -tumor activity and immunomodulating effect of G anoderma lucidum extract and G anode rma lucidum polysaccharides and their mechanisms were reviewed in this paper .G anoderma lucidum extract and G anoderma lucidum polysaccharides significantly inhibited the implanted animal tumors in viv o .However ,both of them directly added to tumor cells cultured medium neither suppressed tumor cell proliferation nor induced its apoptosis .The anti -tumor activity of Ganoderma lucidum polysaccharides may be mediated by immunological mechanism in vivo .Recent studies indicated that G anode rma luc idum polysaccharide peptides had antioxidant effects by scavenging free radicals derived from tert -butyl hydroperoxide (tB OOH )in macrophages in vivo and in vitro .Ganoderma lucidum polysaccharides was also sho wn to promote not only the maturation of dendritic cells (DC )derived from the cultured murine bone marro w in vitro ,but also the immune r esponse induced by DC .(J Peking Univ [Health Sc i ],2002,34:493-498) 1985年迄今,我们集中进行了灵芝的免疫药理研究和抗肿瘤作用的研究,在整体、细胞和分子水平,探讨了灵芝的有效成分灵芝多糖的抗肿瘤作用和免疫调节作用的机制,特别是探讨了灵芝多糖的抗肿瘤作用的免疫学机制。
《2024年灵芝多糖拮抗黑素瘤细胞上清对淋巴细胞免疫功能的抑制作用的研究》范文
《灵芝多糖拮抗黑素瘤细胞上清对淋巴细胞免疫功能的抑制作用的研究》篇一一、引言黑素瘤是一种常见的皮肤恶性肿瘤,其恶性程度高,对患者的生命健康构成严重威胁。
近年来,随着免疫学和肿瘤生物学研究的深入,人们发现黑素瘤细胞上清液中的某些成分会对机体的免疫功能产生抑制作用,尤其是对淋巴细胞的功能影响显著。
而灵芝多糖作为一种天然的生物活性物质,具有广泛的生物药理作用,包括增强免疫功能、抗肿瘤等作用。
因此,本篇研究旨在探讨灵芝多糖是否能够拮抗黑素瘤细胞上清对淋巴细胞免疫功能的抑制作用。
二、材料与方法1. 材料实验所需的主要材料包括灵芝多糖、黑素瘤细胞、淋巴细胞等。
其中,灵芝多糖的来源、纯度及分子量等信息需详细说明。
2. 方法(1)细胞培养:培养黑素瘤细胞和淋巴细胞,并收集其上清液。
(2)实验分组:将实验动物分为四组,分别为对照组、黑素瘤细胞上清组、灵芝多糖组以及灵芝多糖+黑素瘤细胞上清组。
(3)淋巴细胞免疫功能检测:通过MTT法、流式细胞术等方法检测各组淋巴细胞增殖、分化及细胞因子分泌等情况。
(4)数据分析:将实验数据整理成表格,并进行统计分析。
三、实验结果1. 淋巴细胞增殖情况实验结果显示,黑素瘤细胞上清组淋巴细胞的增殖能力明显低于对照组,而灵芝多糖组的淋巴细胞增殖能力有所提高。
当两者联合作用时,淋巴细胞的增殖能力得到进一步提高,与黑素瘤细胞上清组相比具有显著差异。
2. 淋巴细胞分化及细胞因子分泌情况流式细胞术检测结果显示,黑素瘤细胞上清组淋巴细胞的分化程度降低,分泌的细胞因子水平也较低。
而灵芝多糖组的淋巴细胞分化程度和细胞因子分泌水平均有所提高。
在联合作用组中,这些指标的改善更为明显。
四、讨论本实验结果表明,灵芝多糖能够拮抗黑素瘤细胞上清对淋巴细胞免疫功能的抑制作用。
这可能与灵芝多糖增强机体免疫功能、促进淋巴细胞增殖、分化及细胞因子分泌有关。
此外,灵芝多糖还可能通过调节机体免疫系统的其他方面来发挥抗肿瘤作用。
《2024年灵芝多糖拮抗黑素瘤细胞上清对同型小鼠淋巴细胞CD71及FasL抑制作用的研究》范文
《灵芝多糖拮抗黑素瘤细胞上清对同型小鼠淋巴细胞CD71及FasL抑制作用的研究》篇一一、引言在癌症生物学与免疫学领域,黑素瘤作为一种常见的恶性肿瘤,其治疗一直是研究的热点。
近年来,灵芝多糖因其独特的生物活性,在抗肿瘤、免疫调节等方面展现出显著的效果。
本研究旨在探讨灵芝多糖拮抗黑素瘤细胞上清对同型小鼠淋巴细胞CD71及FasL抑制作用的具体机制,以期为黑素瘤的免疫治疗提供新的思路和方向。
二、材料与方法1. 材料本实验所使用的灵芝多糖购自专业供应商,黑素瘤细胞系来源于标准实验室培养,实验动物为同型小鼠。
2. 方法(1)建立黑素瘤细胞模型,并收集其上清液;(2)将同型小鼠淋巴细胞进行分组,分别进行灵芝多糖及黑素瘤细胞上清液处理;(3)利用流式细胞术检测各组小鼠淋巴细胞表面CD71及FasL的表达情况;(4)通过统计学方法分析各组之间的差异。
三、实验结果1. 黑素瘤细胞上清液对同型小鼠淋巴细胞CD71及FasL的影响通过流式细胞术的检测,我们发现黑素瘤细胞上清液对同型小鼠淋巴细胞的CD71及FasL的表达有一定的抑制作用。
这一结果证明了黑素瘤细胞对同型小鼠淋巴细胞的免疫功能存在潜在的负面影响。
2. 灵芝多糖对黑素瘤细胞上清液抑制作用的拮抗效果在加入灵芝多糖处理后,我们发现其能够有效拮抗黑素瘤细胞上清液对同型小鼠淋巴细胞CD71及FasL的抑制作用。
灵芝多糖处理组的小鼠淋巴细胞CD71及FasL的表达水平明显高于未处理组。
这一结果表明灵芝多糖在抗黑素瘤免疫治疗中具有潜在的应用价值。
3. 统计结果分析通过统计学方法对各组数据进行比较分析,我们发现灵芝多糖处理组与黑素瘤细胞上清液处理组之间存在显著性差异(P<0.05)。
这进一步证实了灵芝多糖拮抗黑素瘤细胞上清抑制作用的有效性。
四、讨论本研究表明,灵芝多糖能够有效拮抗黑素瘤细胞上清对同型小鼠淋巴细胞CD71及FasL的抑制作用。
这一发现为黑素瘤的免疫治疗提供了新的思路和方向。
灵芝多糖抗肿瘤免疫机制的研究进展
灵芝多糖抗肿瘤免疫机制的研究进展I. 概括随着现代医学的发展,肿瘤已成为全球范围内的主要健康问题。
肿瘤免疫治疗作为一种新兴的治疗方法,越来越受到研究者和临床医生的关注。
灵芝多糖作为一种具有广泛生物活性的天然物质,近年来在肿瘤免疫治疗领域取得了显著的研究进展。
本文将概述灵芝多糖抗肿瘤免疫机制的研究进展,包括其对肿瘤细胞的直接作用、调节免疫细胞功能以及与免疫抑制剂的相互作用等方面。
介绍灵芝多糖作为一种天然药物的来源和作用机制,以及其在肿瘤免疫治疗中的应用价值随着肿瘤免疫治疗在肿瘤临床中的应用越来越广泛,灵芝多糖作为一种天然药物的来源和作用机制,以及其在肿瘤免疫治疗中的应用价值也逐渐受到了研究者的关注。
本文将介绍灵芝多糖的来源、作用机制及其在肿瘤免疫治疗中的应用价值。
首先我们来了解一下灵芝多糖的来源,灵芝多糖是一种具有高生物活性的多糖类物质,主要来源于灵芝(Ganodermalucidum)这种珍贵的中草药。
灵芝多糖是灵芝子实体中含量最高的一种活性成分,具有很高的药用价值。
近年来通过对灵芝多糖的研究发现,它具有多种生物学活性,如抗炎、抗氧化、抗肿瘤、增强免疫力等。
接下来我们来探讨一下灵芝多糖的作用机制,研究表明灵芝多糖可以通过多种途径发挥抗肿瘤作用。
首先灵芝多糖可以刺激机体产生更多的天然杀伤细胞(NK细胞),从而提高机体的抗肿瘤能力。
其次灵芝多糖可以激活机体的巨噬细胞,促使其分泌更多的肿瘤坏死因子(TNF),进一步增强机体的抗肿瘤能力。
此外灵芝多糖还可以抑制肿瘤细胞的生长和扩散,从而达到抗肿瘤的目的。
我们来探讨一下灵芝多糖在肿瘤免疫治疗中的应用价值,目前灵芝多糖已经成为肿瘤免疫治疗领域的一个重要研究对象。
通过将灵芝多糖作为免疫调节剂引入到肿瘤免疫治疗中,可以有效地提高患者的抗肿瘤能力,延长患者的生存期,并降低化疗和放疗的副作用。
因此灵芝多糖在肿瘤免疫治疗中具有很大的应用前景。
灵芝多糖作为一种天然药物的来源和作用机制已经得到了广泛的研究和认可。
《2024年灵芝多糖拮抗黑素瘤细胞上清对淋巴细胞免疫功能的抑制作用的研究》范文
《灵芝多糖拮抗黑素瘤细胞上清对淋巴细胞免疫功能的抑制作用的研究》篇一灵芝多糖拮抗黑素瘤细胞上清对淋巴细胞免疫功能抑制作用的研究一、引言随着对生物活性分子的研究日益深入,各种来自中草药的天然成分逐渐成为科研的热点。
其中,灵芝多糖因其具有显著的免疫调节作用,在抗肿瘤、抗病毒、抗氧化等方面表现出强大的生物活性。
然而,黑素瘤作为一种恶性皮肤肿瘤,其生长与淋巴细胞的免疫功能受到抑制有着密切关系。
本文就灵芝多糖拮抗黑素瘤细胞上清对淋巴细胞免疫功能的抑制作用展开研究,为开发新的治疗方法提供理论依据。
二、研究背景1. 灵芝多糖及其作用:灵芝多糖是从灵芝子实体或孢子中提取的天然活性物质,具有提高机体免疫力、抑制肿瘤生长、保护神经元等多种生理作用。
2. 黑素瘤及其对淋巴细胞免疫功能的影响:黑素瘤作为一种恶性肿瘤,在发展过程中常常伴随淋巴细胞的免疫功能下降,这为肿瘤的扩散和转移提供了条件。
三、研究方法1. 实验材料:灵芝多糖、黑素瘤细胞上清液、淋巴细胞等。
2. 实验设计:通过建立黑素瘤细胞上清液对淋巴细胞的影响模型,研究其免疫抑制作用,并观察灵芝多糖的拮抗效果。
3. 实验步骤:首先,将黑素瘤细胞上清液与淋巴细胞共培养,观察其对淋巴细胞增殖、细胞因子分泌等免疫功能的影响;其次,加入不同浓度的灵芝多糖,观察其对黑素瘤细胞上清液引起的免疫抑制的拮抗作用。
四、实验结果1. 黑素瘤细胞上清液对淋巴细胞的影响:黑素瘤细胞上清液可显著抑制淋巴细胞的增殖及细胞因子分泌,降低淋巴细胞活性。
2. 灵芝多糖的拮抗作用:在黑素瘤细胞上清液存在的条件下,加入灵芝多糖可明显缓解其免疫抑制作用。
随着灵芝多糖浓度的增加,其对免疫抑制的拮抗效果更加明显。
五、讨论本研究表明,灵芝多糖具有拮抗黑素瘤细胞上清对淋巴细胞免疫功能抑制的作用。
这可能与灵芝多糖能够提高机体免疫力、增强淋巴细胞活性有关。
此外,灵芝多糖还可能通过其他途径如调节信号通路、影响肿瘤细胞生长等发挥抗肿瘤作用。
灵芝多糖化学结构及药理活性研究进展
灵芝多糖化学结构及药理活性研究进展作者:姚丽萍章真刘晓军张荣庆来源:《中国食品》2022年第20期近几年,人们的健康意识不断增强,对高质量、高营养、高保健产品的需求日益强烈。
灵芝是一种名贵的中药,其药理作用十分广泛,而且由于灵芝中富含多种营养物质,所以包含灵芝的保健品也被越来越多的人接受和认可。
灵芝多糖是灵芝中所含的活性物质,也是灵芝能够发挥多种药理作用的关键。
深入研究灵芝的活性成分发现,灵芝多糖具有增强免疫、抗肿瘤、保肝、抗氧化、降血糖和血脂、镇痛、抗衰老等多种功效,其药用价值很高。
通过对灵芝多糖化学结构和药理作用的研究,能够在食品、医药、保健品等领域为进一步开发和利用灵芝多糖提供科学的依据。
一、灵芝多糖的化学结构1.多糖的组成。
多糖是一种聚合物,由10个或更多的单糖通过糖苷键结合而成,通常存在于植物和动物的细胞中,是人类维持生命的重要物质,在食品、医药等领域有着广泛的应用。
多糖的结构与功能一直是国内外研究的一个重要课题,灵芝多糖的结构决定了其功能特征,因此对其结构进行深入研究是非常有意义的。
单糖、构型、糖苷键、支链、取代基等元素组成了多糖的一级结构,多糖的分子量对多糖的生物活性有很大的影响,多糖的分支程度也因糖苷键数量和结合方式的不同而有所差异。
最常用的单糖是葡萄糖、岩藻糖、甘露糖等,单糖的结构对糖苷键的方位和构象有很大的影响。
常用的糖苷键有α-(1→6)、β-(1→4)、β-(1→6)等,二级结构是由氢键将多糖分子与分子间连结起来,三级和四级结构是基于二级结构并通过非共价态的交互作用而形成的有规律性的构象。
部分多糖的溶解度较低或者分支较多,从而对其生物活性造成了一定的影响,可以在多糖的分子链上取代硫酸基、羧甲基、乙酰基和磷酸基等,从而改善其溶解性。
按相容性原理提取的多糖,是一种在水中溶解但在有机溶剂中不溶解的物质,例如酒精、丙酮中有极性高分子,在提取过程中通常使用热水或亚临界水,然后加入非极性溶剂,使得多糖沉淀,即可以将多糖从提取物中提取出来。
灵芝多糖抗肿瘤免疫机制的研究进展
灵芝多糖抗肿瘤免疫机制的研究进展张华斌【摘要】灵芝多糖因其免疫调节功能、抑制肿瘤生长且无不良反应等特点,被认为是通过调节机体免疫功能达到抗肿瘤目的的一味良好的药物. 其抗肿瘤作用可能通过抑制肿瘤细胞增殖并诱导凋亡、抑制肿瘤血管新生、调节机体免疫等途径实现,其中调节细胞因子、机体固有免疫系统、T/B淋巴细胞及黏膜免疫系统等的免疫机制可能是其发挥抗肿瘤作用的主要机制.%Ganoderma lucidum polysaccharides can regulate the immune function and inhibit the growth of tumor,with no side effects.It is considered as a good anti-tumor drug through immune regulation .The anti-tumor function of Ganoderma lucidum polysaccharides may be inhibiting tumor cell proliferation and inducing apoptosis,and inhibiting tumor angiogenesis,and immune regulation etc.,among which regulating immune mechanisms including cytokines,the innate immune system,T/B lymphocytes and mucosal immune system, may be the main mechanisms of the anti-tumor effect.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2016(022)002【总页数】4页(P259-262)【关键词】灵芝多糖;免疫机制;抗肿瘤【作者】张华斌【作者单位】福建医科大学附属协和医院神经外科,福州350001【正文语种】中文【中图分类】R285.5灵芝多糖主要包含胞内多糖和胞外多糖。
灵芝多糖的研究进展
灵芝(Ganoderma lucidum )又称灵芝草、神芝、芝草、仙草、瑞草,是多孔菌科植物赤芝或紫芝的全株。
按本草纲目记载“灵芝性平,味苦,无毒,主胸中结,益心气,补中,增智慧,不忘,久服轻身不老,延年神仙”。
灵芝中通常含有多种活性物质,包括蛋白质和氨基酸、碳水化合物(主要为多糖)、脂肪和三萜类化合物、维生素和矿物质等[1],具有很高的药用价值。
灵芝多糖(Ganoderma Lucidum polysaccharides ,GLP )是其中主要的一类活性成分,具有免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、抗衰老以及调节血糖等生理功能,是目前灵芝研究领域的一个热点[2]。
本文就近年来灵芝多糖的制备、测定方法、结构分析以及生物活性研究的新进展进行综述。
1 灵芝多糖的提取与分离纯化传统的灵芝多糖提取方法多为热水浸提。
利用多糖溶于热水而不溶于醇、醚、丙酮等有机溶剂的特点,从灵芝中进行提取。
大致的工艺流程为:子实体粉碎→醇提→热水回流→减压浓缩→离心→醇沉→干燥[3]。
目前对于灵芝多糖的制备过程的研究主要包括提取方法(包括原料的预处理)、分离纯化和纯度鉴定。
1.1 灵芝多糖的提取在灵芝多糖的提取过程中,多糖含量受到很多灵芝多糖的研究进展赵岩1 张莹2 初乐1 和法涛1 葛邦国1 宋烨1(1.中华全国供销合作总社济南果品研究院,山东 济南 250014;2.山东省轻工业设计院,山东 济南 250014)摘要:灵芝多糖是灵芝重要的活性物质,具有抗氧化、免疫调节、抗癌等多种生物活性,具有很大的开发利用价值。
本文综述了目前灵芝多糖提取、分离纯化、含量测定、结构分析和生物活性方面的研究现状,并对灵芝多糖的发展利用前景做了展望。
关键词:灵芝多糖;提取;分离纯化;结构分析;生物活性中图分类号:S567.3.l 文献标识码:A 文章编号:1008-1038(2014)01-0027-04收稿日期:2014-1-7基金项目:“十一五”国家科技支撑计划项目(2008BADA1B06)作者简介:赵岩(1980- ),男,助理研究员,主要从事果蔬加工研究,E-mail: ianzhao@Progress on Research of Ganoderma Lucidum PolysaccharidesZHAO Yan 1 ZHANG Ying 2 CHU Le 1 HE Fa-tao 1 GE Bang-guo 1 SONG Ye 1(1. Jinan Fruit Research Institute, All China Federation of Supply & Marketing Co-operatives, Jinan 250014, China ;2. Shandong Design Institute of Light Industry, Jinan 250014, China )Abstract: Ganoderma lucidum polysaccharides (GLP) were extracted from the Ganoderma lucidum and was one of the most important bioactive substances such as anti-oxidant, immunoregulation,anticancer. The research status on extraction, isolation and purification, structural analysis and biological activity of GLP. The development prospects were forecasted in this paper.Key words: ganoderma lucidum polysaccharides; extraction; separation and purification; structural analysis; biological activity中国果菜CHINA FTUIT VEGETABLEV ol.34 No.2 Feb. 2014果蔬加工. All Rights Reserved.因素的影响,通过正交实验筛选,优化后工艺为:料液比1:30,提取时间3 h,提取温度100℃,碳酸钠盐浓度0.5%。
灵芝多糖预防及抑制肿瘤机制研究进展
灵芝多糖预防及抑制肿瘤机制研究进展作者:谭礼浩来源:《科学与财富》2020年第28期摘要:灵芝多糖是灵芝提取物中最关键的药效成分之一,具有免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、降血糖、抗炎、抗菌、抗糖尿病及其并发症等药理作用。
在药用资源和功能食品添加物方面具有很大的开发利用价值。
本文将从动物、临床两方面灵芝多糖的抗肿瘤功效进行阐述,并从分子层面对灵芝多糖抗肿瘤功效机制进展进行介绍。
关键词:灵芝多糖;免疫;抗肿瘤灵芝(Ganoderma lucidum)属于真菌界、真菌门、担子菌亚门层菌纲、非褶菌目、灵芝科、灵芝属真菌。
作为一种药食两用资源,灵芝在东方国家,如中国,韩国,日本使用已经有两千多年的历史。
灵芝多糖(Ganoderma lucidum polysaccharides,GLP)由杂多糖、葡萄糖和肽多糖等组成的混合物,与氨基酸、三萜、甾醇、生物碱、核苷一样,为中药灵芝的主要活性成分之一。
其药理作用广泛,具有活血化瘀、抗辐射、免疫调节、抗衰老、抗肿瘤等作用,其中,灵芝多糖的抗肿瘤作用尤其引人关注。
硏究发现,灵芝多糖对肝癌、肺癌、黑色素瘤、宫颈癌、卵巢癌、胃癌、结肠癌及白血病等肿瘤疾病具有广泛的抑制作用,并且对正常体细胞无毒或低毒,受到了国内外医学界的关注[2]。
1 灵芝多糖的抗肿瘤功效1.1动物模型实验目前,小鼠模型为灵芝多糖抗肿瘤实验的主要实施对象,移植恶性肿瘤细胞进小鼠体内并繁殖;再利用灵芝多糖或灵芝提取物注射进小鼠体内,或对小鼠进行灌胃;数周后观察小鼠体内肿瘤变化情况,以及巨噬细胞、T、B淋巴细胞,NK细胞,DC细胞等细胞因子的活性、增殖变化情况。
高凌等采用小鼠抗移植性肿瘤实验方法,分别以150mg/kg、300 mg/kg、和600 mg/kg剂量灵芝孢子多糖连续12天灌胃给药,结果发现,灵芝孢子多糖对小鼠移植性肝癌Heps的抑瘤率为53.77%-65.25%;连续8天灌胃给药,对小鼠移植性肉瘤S180的抑瘤率为50.39%-55.04%;皆呈良好的抑瘤作用。
灵芝抗肿瘤作用的的研究进展
灵芝抗肿瘤作用的研究进展xx中医药大学生命科学学院摘要:灵芝具有的抗肿瘤作用越来越受到人们的关注。
其具有抗肿瘤作用的有效成分主要为多糖和三萜类化合物等物质,目前对于灵芝抗肿瘤作用的有效成分及机制等的研究越来越多。
本文就灵芝抗肿瘤作用的主要活性成分及其作用机理、特点等方面进行综述,并对灵芝在抗肿瘤方面的应用前景进行展望。
关键词:灵芝抗肿瘤生物活性成分作用机理The Development of Ganoderma lucidum antitumor function study Abstract:Keywords:恶性肿瘤是目前危害人类健康的主要疾病之一,全世界每年死于恶性肿瘤的患者达数百万之众,约占总死亡人数的,近年来我国每年新增肿瘤患者160万~170万,总数估计在450万左右。
因此,恶性肿瘤对人类的威胁日益突出,已成为当前医学领域中重大的研究课题。
天然抗癌药物具有化学合成药无法比拟的优越性,越来越受到人们的青睐。
因此,天然抗癌药物的研究自然就成了现今的一个热点,真菌类药物抗肿瘤的研究是其中的重要组成部分。
真菌类药物应用广泛,通常所说的药用真菌多为生长发育到一定阶段能够形成个体较大的子实体或菌核结构的高等真菌,其中大部分属于担子菌亚门,少数属于子囊菌亚门。
按其功效可分成滋补强壮类:如灵芝、冬虫夏草、银耳、金针菇等;利尿渗湿类:如茯苓、猪苓等;止血活血消炎祛痛类:如麦角、肉球菌、安络小皮伞、马勃、朱红栓菌等。
对药用真菌在抗癌方面的现代研究不断增多,发现多种药用真菌药用成分具有抗肿瘤的作用,灵芝多糖、茯苓多糖、金针菇多糖、姬松茸多糖[1]、银耳多糖、香菇多糖等多糖类,灵芝三萜类成分及多种食药用真菌代谢产生的多肽类物质和萜烯类化合物[2]等都具有抗癌活性。
而灵芝是重要的滋补类药品,对增强人体免疫力,调节机体血糖、血压等的平衡,抗衰老、促睡眠等都具有良好效果,被人们广泛应用于生活中。
近几年对灵芝多糖、三萜类等成分的抗肿瘤作用研究不断受到人们的重视,从灵芝中发掘一类可以治疗人类肿瘤的药物也是人们不断追求的目标。
灵芝的抗肿瘤作用及机制研究进展
灵芝的抗肿瘤作用及机制研究进展随着癌症的发病率不断上升,人们对寻找有效的抗肿瘤药物的需求也越来越迫切。
在中草药中,灵芝因其潜在的抗肿瘤活性而受到了广泛的关注。
本文将探讨灵芝的抗肿瘤作用及其机制的研究进展。
一、灵芝的抗肿瘤作用灵芝是一种广泛用于中药治疗的真菌,被认为具有多种抗肿瘤活性。
已有的研究表明,灵芝能够抑制肿瘤细胞的增殖和扩散,并促使肿瘤细胞凋亡。
此外,它还能够调节免疫系统、抑制血管生成以及抗氧化等。
1.1 抑制肿瘤细胞增殖和扩散研究发现,灵芝内含有多种生物活性成分,如多糖、三萜等。
这些成分能够抑制肿瘤细胞的分裂和增殖,从而阻止肿瘤的进展。
此外,灵芝还能够抑制肿瘤细胞的迁移和侵袭,防止肿瘤转移和扩散。
1.2 促使肿瘤细胞凋亡肿瘤细胞的凋亡是一种重要的防止肿瘤生长的机制。
研究表明,灵芝能够通过调节细胞凋亡相关的信号通路来促使肿瘤细胞凋亡。
这种抗肿瘤作用有助于降低肿瘤的体积和生长速度。
1.3 调节免疫系统灵芝被广泛认为是一种免疫调节剂。
它可以增强机体的免疫功能,增加免疫细胞的活性,提高机体对肿瘤的抵抗力。
此外,灵芝还能够提高抗体的产生和细胞毒性活性,对肿瘤细胞具有直接杀伤作用。
1.4 抑制血管生成肿瘤的生长和扩散需要新的血管供应,这被称为血管生成。
灵芝中的活性成分能够抑制血管生成的过程,从而阻止肿瘤的发展。
这种抗肿瘤机制为灵芝作为抗肿瘤药物的应用提供了新的思路。
1.5 抗氧化作用氧化应激是肿瘤发生和发展过程中的一个重要环节。
灵芝中的抗氧化成分能够清除自由基和氧化物质,减少氧化应激的损害,从而有助于防止肿瘤的发生。
二、灵芝抗肿瘤作用的机制研究进展灵芝的抗肿瘤机制目前尚不完全清楚,但已有一些研究对其机制进行了探索。
2.1 免疫调节作用机制灵芝中的多糖等成分可以调节免疫细胞的产生和功能。
研究发现,灵芝可以增加免疫细胞的数量和活性,增强机体的免疫功能。
此外,灵芝还能够促进免疫细胞释放细胞因子,调节免疫应答,从而达到抗肿瘤的效果。
《2024年灵芝多糖拮抗黑素瘤细胞上清对同型小鼠淋巴细胞CD71及FasL抑制作用的研究》范文
《灵芝多糖拮抗黑素瘤细胞上清对同型小鼠淋巴细胞CD71及FasL抑制作用的研究》篇一一、引言近年来,黑素瘤作为一种常见的皮肤恶性肿瘤,其发病率逐年上升,严重威胁着人们的生命健康。
黑素瘤细胞的增殖与扩散是导致疾病进展的关键因素之一。
在众多抗肿瘤研究中,灵芝多糖因其独特的生物活性备受关注。
其通过调节机体免疫功能,有效抑制肿瘤细胞生长的作用已逐渐被证实。
本篇论文旨在研究灵芝多糖拮抗黑素瘤细胞上清对同型小鼠淋巴细胞CD71及FasL抑制作用,为进一步探讨灵芝多糖的抗肿瘤机制提供理论依据。
二、材料与方法1. 材料(1)细胞株:黑素瘤细胞株、同型小鼠淋巴细胞。
(2)药物:灵芝多糖提取物。
(3)实验动物:同型小鼠。
(4)实验试剂及仪器:包括培养基、血清、流式细胞仪等。
2. 方法(1)培养黑素瘤细胞及同型小鼠淋巴细胞。
(2)制备灵芝多糖上清液,并设置不同浓度梯度。
(3)将灵芝多糖上清液与黑素瘤细胞共培养,观察其对黑素瘤细胞生长的影响。
(4)将灵芝多糖上清液与同型小鼠淋巴细胞共培养,利用流式细胞仪检测CD71及FasL的表达情况。
(5)分析数据,探讨灵芝多糖拮抗黑素瘤细胞上清对同型小鼠淋巴细胞CD71及FasL的抑制作用。
三、实验结果1. 灵芝多糖对黑素瘤细胞的生长具有显著的抑制作用,且呈浓度依赖性。
2. 同型小鼠淋巴细胞在黑素瘤细胞上清的作用下,CD71及FasL的表达受到抑制。
3. 灵芝多糖上清液能够拮抗黑素瘤细胞上清对同型小鼠淋巴细胞的抑制作用,使CD71及FasL的表达恢复至正常水平。
4. 不同浓度的灵芝多糖上清液对CD71及FasL的恢复作用存在差异,高浓度灵芝多糖上清液的效果更为显著。
四、讨论本研究表明,灵芝多糖具有拮抗黑素瘤细胞上清对同型小鼠淋巴细胞CD71及FasL的抑制作用。
这一发现有助于我们更深入地理解灵芝多糖的抗肿瘤机制。
CD71及FasL作为细胞表面的重要分子,在细胞增殖、凋亡及免疫应答中发挥重要作用。
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灵芝多糖抗肿瘤靶向作用机制研究进展【关键词】灵芝多糖抗肿瘤靶向灵芝在中国已有2000多年的药用历史,大量的民间实践证明灵芝对多种疾病具有明显的疗效,其主要药效成分为(ganoderma lucidum polysaccharides, GLP), GLP存在于灵芝属真菌的菌丝体和子实体中,由肽多糖、葡聚糖、杂多糖等组成的混合物,是灵芝的主要有效成分之一,尤其GLP 药理活性广泛; 具有提高机体免疫功能、抗肿瘤等作用。
1 GLP抗肿瘤的药理研究现状1.1 GLP物质的化学成分《中国药典》2000年版首次收录了灵芝(包括赤芝、紫芝)。
GLP的化学成分主要从赤灵芝(Ganoderma lucidum Karst)的子实体中分离得到一种具有促进T淋巴细胞分裂的多糖,相对分子质量(Mr)为718 000,不含蛋白质,是一种自由D-葡萄糖组成的具有β-(1-6)残基侧链的β-(1→3)-D葡萄糖,与其他多糖相比其分歧程度较低,具有三股螺旋结构,认为其活性与其三股螺旋结构、离子基团及负电荷的密度有关。
从赤芝中分离得到一个水溶性抗肿瘤多糖GL-1,由葡萄糖、木糖=阿拉伯糖组成,该多糖具有抗S180肿瘤细胞的作用,还分离得到抗衰老多糖GLA、GLB、 GLC等[1]; Saito等从灵芝子实体碱性提取物中分得的GLP,由D-葡萄糖、 D-半乳糖、 D-甘露糖、 D-木糖L-岩藻糖、 L-鼠李糖、 L阿拉伯糖等组成; GLP的化学结构、空间构象有明确细致的显示。
黎铁立等从泰山赤芝(ganoderma lucidum karst)中分离得到7个多糖肽,其中二个为TGLP-2和TGLP-3。
TGLP-2的Mr为2.09×105,为β-(1→3)(1→4)苷键连接的甘露葡聚糖肽,含肽量为8.9%。
TGLP-3的Mr为405 000,为β-(1→3)(1→4)(1→6)苷键连接的葡聚糖肽,且有α-苷键存在,含肽量为4%。
1.2 GLP的抗肿瘤机制自20世纪70年代以来,国内外研究学者均重视灵芝的抗肿瘤作用。
Miyazaki等从灵芝子实体中分离出一种Mr为40 000的水溶性多糖(GL-1),其单糖组成及为葡萄糖: 木糖、阿拉伯糖,小鼠腹腔注射共10 d,发现有抑制 S-180肉瘤的作用。
李旭生等从灵芝子实体中提取的GLP肽对C3H小鼠的恶性肿瘤有抑制作用,抑制率为55.5%。
林志彬等[2]采用血清药理学实验方法和分子生物学技术,将GLP进行昆明小鼠灌胃亦可显著抑制BALB/c皮下移植的S-180肉瘤生长,其抑制率为52.86%。
可见, GLP对动物移植性肿瘤具有抑制作用,可使瘤重减轻,生存时间延长。
灵芝所含多糖是其抗肿瘤作用的重要组成部分。
Wang等报告中灵芝子实体提取的一种GLP能抑制HL-60细胞增殖并促进其凋亡。
但张群毫等[3]发现灵芝提取物对S-180细胞的增殖无直接抑制作用。
同样,将灵芝提取物的GLP直接加入到培养液中,对HL-60细胞的生长也无直接抑制作用。
林志彬也发现灵芝提取物不能直接诱导S-180细胞凋亡。
以上结果表明,灵芝其所含多糖既不能直接抑制或杀死肿瘤细胞,也不能诱导肿瘤细胞凋亡。
为进一步探讨GLP的抗肿瘤作用机制,将GLPB加入到小鼠腹腔巨噬细胞培养液中,共同培养24 h,然后加入HL-60细胞中,可显著抑制HL-60细胞增殖并促进其凋亡[2]。
这一结果显示,在GLPB作用下, GLP中出现一种能抑制HL-60细胞增殖并促进其凋亡的活性物质。
与此同时,上清液中TNF-α的分泌亦明显增加。
这些结果与Wang等所研究的结果是一致的,他们在HL-60细胞和V937细胞培养液中加入PS-G与人外周血单个核细胞共同培养液则可显著抑制HL-60细胞和V937细胞增殖,并促进其凋亡; 同时还证明,在健康人外周血单个核细胞或T淋巴细胞培养液中加入PS-G的共同培养上清液可明显促进巨噬细胞生成IL-1β、 TNF和IL-6,并促进T淋巴细胞生成IFN-γ等。
GLP并不是直接杀死肿瘤细胞,而是通过介导加强宿主免疫功能而激活机体内各种免疫应答,进而产生抑制肿瘤细胞作用。
但GLP的抗癌构效关系和抗癌机制仍不明了,现有的研究表明,GLP大多是β-(1→3)-D-葡聚糖.β-葡聚糖中分支度不同,均具有较高的抗癌活性, Mr大的也较Mr小的活性强; 由于GLPMr 大,不能透过半透膜,不能直接进入靶细胞,对细胞没有明显的抑制效果。
新近的一些研究发现,含有其他结构的GLP和某些小分子量的也具有免疫调节和抗癌活性。
2 GLP分子质量与纳米活性载体的机制2.1 肿瘤靶向的结构基础病理条件下,肿瘤细胞生长或转移时,病变细胞释放的化学物质和肿瘤衍生的甲状旁腺激素相关肽(parathyroid hormone-related peptide, PTHrP)均通过产生NO和激活KATP来降低集合淋巴管“节律泵”的活性,从而影响了淋巴的生成、转运[4]。
这提示我们,病理条件下,淋巴回流入血速率减小,药物靶向于肿瘤的淋巴系统有利于延长驻留时间,提高药效。
毛细淋巴管由单层内皮细胞构成,其基底膜不完整或缺乏,因而通透性大,存在着淋巴引流的通道,大小约30~120 nm,在癌细胞生长时可进一步扩大为300~500 nm。
这一通道允许大分子或大小适合的胶束随着扩散而被淋巴引流带入,并在流经淋巴结时被巨噬细胞捕获; 纳米活性载体是通过这样的过程实现淋巴肿瘤靶向的。
2.2 GLP纳米活性载体的作用 GLP纳米活性载体具有淋巴趋向性,毛细淋巴管内皮细胞间有1 203 nm的开放间隙,但管壁没有周细胞,也没有连续的基膜。
纳米微粒在药剂学中的尺寸界定在10~1 000 nm,这样的纳米微粒可被巨噬细胞摄取。
这些细胞多存在于血流丰富的肝脏、肺脏、脾脏及淋巴结、肠、骨髓、脑、结缔组织和浆膜腔等[5]。
将大MrGLP改造成纳米微粒具有高的结构稳定性、较为清晰的核壳相分离,疏水链段之间由于疏水相互作用而聚集形成微粒的内核,外壳则由亲水链段形成刷状结构。
这样亲水链段通常具有生物相容性并对纳米微粒分散在水中起立体稳定作用,在亲水链段末端还可引入具有靶向功能的组分[6]。
当GLP纳米微粒用于给药载体时,其特点是内核载药量大,在人体内分布主要由颗粒大小和颗粒表面活性剂相比, GLP纳米微粒的临界胶束浓度很低,在水溶液中离解速度慢,因此纳米活性可在载体内停留较长时间,保证有足够的GLP纳米活性微粒到达人体病灶部位。
这些特性给药输送带来了方便,纳米活性微粒可通过物理的非化学链作用溶解进胶束或化学链合进胶束,同时还可以使纳米活性微粒具有靶向作用。
如孙岚等[7]采用纳米活性炭对小鼠腹腔注射,研究了体内的分布、存留,腹腔内淋巴靶向性十分明显。
这可以是由于活性炭被制备成纳米微粒后,表面结合和化学活性能有显著增高。
多糖类的壳聚糖作为与一种天然的可生物降解的高分子材料,在纳米微粒肿瘤靶向给药中也有报道; 将其制成纳米粒粒径在200~750 nm时,包封了DNA的壳聚糖有效被肠上皮的M细胞摄取,并最终又到了血清产生IgA达到免疫效果[8],有效诱导细胞分化、凋亡、抑制肿瘤生长。
3 GLP纳米活性载运至肿瘤靶点的机制纳米活性载体根据不同的给药方式,可能的机制主要运用如下: (1)GLP纳米活性的消化道给药: 将大分子GLP (数千~数十万不等)改造成(300±50)纳米的微粒后。
经口服时通过小肠上皮细胞中的甘油硬脂酸通路,以乳糜微粒的形式靶向于肠系膜淋巴结。
近年来,纳米载体促进药物的消化道吸收屡见报道,在人和动物的小肠存在着与免疫有关的特定组织区域。
如集合淋巴小结占整个肠道黏膜的1/4左右。
研究发现,口服给药时,微粒剂可透过小肠上皮细胞,经过集合淋巴小结到达脾脏等淋巴系统器官,且粒度越小,吸收效果越好。
(2)GLP纳米活性的组织间隙给药: GLP改造后,当载药纳米微粒进行皮下、肌内、癌周等组织间隙给药时,纳米微粒同时面临着毛细血管和毛细淋巴管的转运和摄取。
其以何种途径为主则取决于载药粒子的性质,如粒径、表面电性等而定。
正如前述,由于内皮细胞间连接松散,常驻有许多开放的间隙存在,微粒和大分子物质可通过毛细淋巴管内皮细胞间间隙和内皮细胞的胞饮及吞噬作用进入毛细淋巴管内,然后通过淋巴引流到达区域淋巴结。
微粒和大分子物质的大小大部分在进入到毛细血管内时,数百纳米内的粒子则可被毛细淋巴管吸收,而数千的粒子则会长时间滞留在组织间隙的空间里。
因此大分子质量物质常常就不直接进入靶细胞,而是首先与分布在靶细胞表面的特异性受体或者配体结合,通过某些特定的信号通路,产生最终的生理效应。
4 GLP纳米活性对抑制肿瘤的靶向性作用GLP纳米活性的淋巴系统给药是以乳剂为载体,该剂型具有淋巴亲和性的特点。
局部注射乳剂后,可以聚集在区域淋巴结内,并有缓释药物的功能。
另有一些方式是针对消化道给药的纳米活性载体。
一般认为,油/水(O/W)型的靶向性要优于水/油(W/O)型,复乳优于单乳,乳剂的稳定性是影响淋巴摄取的一大因素[9]。
(1)GLP纳米活性有药效延长时间作用: GLP纳米微粒具有包含疏水性物质作内核制成的胶束。
一般植物为疏水性物质或半合成的中长链脂肪酸的甘油酯(如Miglyol或Panasate)。
研究表明: 有两种性质,第一种是局部以纳米囊给药,能经过组织靶向到淋巴结; 另一种是局部以纳米微乳给药,是由水相、油相、表面活性剂和助表面活性剂等四种体系组成,粒径在10~500 nm间的纳米乳剂,靶向淋巴后释药更为持久(可维持恒量水平达7 d,远大于参比的乳液和脂质体)。
由于其处方中亲脂性成分比例大,与淋巴具有一定的亲和性,加之粒径小、比表面积大,在淋巴转运时几乎没有障碍,也已被研究用以靶向淋巴肿瘤上。
(2)GLP纳米活性对抑制肿瘤靶向性: GLP纳米微粒是指纳米尺度范围的胶束,纤维素的化学结构和分子构象使其微溶于水和常用的药用有机溶剂,而对于纳米微粒的制备,在常用溶剂中有较高溶解度是必需的; 由于自身的特点,这一类给药方式就是靶向给药。
纤维素分子中存在大量羟基,可发生加成、取代、氧化等反应,从而得到其可溶性衍生物。
王学清等[10]采用羟丙甲纤维素酞酸以溶剂-非溶剂法制备环孢素A纳米微粒,注射入大鼠时相对提高生物利用度。
如壳聚糖-多柔比星(DOX)纳米微粒可包含相当含量的DOX ,该微粒稀释较少,保持了DOX的细胞毒活性。
共聚焦成像表明该微粒是通过胞吞途径进入细胞内,并在胞内释放DOX。
进一步的研究表明: 用微乳法制得的壳聚糖DOX/葡聚糖纳米微粒,粒径为(100±10) nm,可较好地透过实体瘤并保留其内,同时明显降低副作用并提高疗效。
5 结语将高MrGLP改造成(300±50) nm以下的低MrGLP(多肽)抗肿瘤制剂,该微粒具有优于原始分子的靶向性;纳米微粒给药机制相比于载体材料具有生物利用度与提高难溶药物水溶性及相关药代动力学等,载药方式可控,制备工艺简单等优点。