亚硝酸还原酶测定
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土壤亚硝酸还原酶
原理：
此方法基于通过NO2-N与格里试剂反应所产生的颜色深浅测定酶促反应前后NO2-N变化用于表征亚硝酸还原酶活性。
试剂：
1．0.5%NaNO2溶液
2. 1%葡萄糖
3. caco3
4. 铝钾矾饱和溶液
5. 格里试剂
A: 0.1% X-萘胺溶液AB用乙酸相对密度1-04配制（冰乙酸）
B：0.5%对氨基苯磺酸溶液
使用时AB 等体积混合。
6. NaNO2标准溶液
称取 1.500g分析纯亚硝酸纳于烧杯中，加水洗入 1 L定量瓶。用时此溶液配成稀溶液（0.01mg/ml）
步骤
1）称取1g过1mm筛风干土置于100ml减压三角瓶中，加入20mgcaco3和1ml
0.5%NaNO2，摇匀后加入1ml 1%葡萄糖溶液
2）抽真空3min，置于培养箱30度，24h
3）培养结束后，加入50ml水，1ml铝钾矾溶液，摇匀，过滤
4）取1ml滤液至50ml容量瓶中，加入5ml水和4ml格里试剂混匀，显色，定色至50ml、5）在550-600nm处进行比色
6）根据反映前后NO2-N量的差值，计算酶活性。
7）以10g土壤24h还原NO2-N毫g数表示土壤亚硝酸还原酶
8）Mg NO2-N/10g干土24h=（M0-Ma）*10/m
9）无基质对照（与试验同）无土对照2个。