紫外与荧光
紫外吸收光谱和荧光发射光谱的区别
《紫外吸收光谱和荧光发射光谱的区别》紫外吸收光谱呀，那可是挺有意思的一个事儿呢。
它主要说的就是物质对紫外光的吸收情况啦。
想象一下，紫外光就像一群小精灵，往物质那儿跑，有些物质可就不客气啦，会把这些紫外光的一部分给“吃”进去，也就是吸收掉呀。
然后咱们通过仪器去检测，就能看到在不同波长的紫外光下，物质吸收的程度不一样，最后画出的那个光谱图，就反映了这个物质对紫外光吸收的特点呢。
比如说，有的地方吸收得多，光谱上就出现个高高的峰，有的地方吸收少，那就是个矮矮的小坡啦。
荧光发射光谱就不一样咯。
它得先有个激发的过程呀，就好比给物质打一针“兴奋剂”，用特定波长的光去照射这个物质，物质里的那些小粒子呀，就像被叫醒了一样，变得活跃起来啦。
然后呢，这些活跃起来的粒子过一会儿又会把吸收来的能量以光的形式再发射出去，咱们检测这个发射出来的光，画出的光谱就是荧光发射光谱啦。
它的样子和紫外吸收光谱可大不一样哦，荧光发射光谱的峰呀、谷呀，对应的情况都和紫外吸收光谱有着自己的差别呢。
从产生的原理上看呀，紫外吸收光谱就是物质单纯地吸收紫外光，就像肚子饿了吃东西一样简单直接。
可荧光发射光谱呢，先是吸收了能量被激发，再把能量转化成光发出去，就像先充电再放电的感觉呀，多了这么个曲折的过程呢。
再说说它们在实际用处上的区别呗。
紫外吸收光谱常常用来判断物质里有没有某些特定的结构呀，就像侦探一样，靠它能发现物质的一些小秘密呢。
荧光发射光谱呢，在检测一些微量的物质上可有一手啦，哪怕只有一点点物质，它发射出来的荧光有时候也能被检测到，可厉害了。
还有哦，在观察它们的条件上也有不同呀。
紫外吸收光谱一般就是在紫外光照射下看看吸收情况就行啦。
荧光发射光谱呢，除了要选好激发光的波长，还得注意周围环境呀，有时候环境稍微变一变，那荧光发射的强度啥的都会跟着变呢，得小心翼翼地去检测哦。
紫外吸收光谱和荧光发射光谱，各有各的特点，各有各的本事，就像两个不同的小伙伴，在分析物质的这个大舞台上各自发挥着独特的作用，咱们了解它们的区别，就能更好地利用它们去探索物质世界的奥秘啦。
紫外分光光度法和荧光分析法
差示分光光度法
▪ 一般分光光度法一般只适于测定微量组分， 当待测组分含量较高时，将产生较大旳误差。 需采用示差法。
▪ 即提升入射光强度，并采用浓度稍低于待 测溶液浓度旳原则溶液作参比溶液。
▪ 设：待测溶液浓度为cx，原则溶液浓度为 cs(cs < cx)。则：
▪ Ax= εb cx As = εb cs
4.构造分析
▪ 1.鉴别物质旳异构体，如互变异构体， 顺反异构体，开链和成环异构体，旋 光异构体，空间异构体等。反式异构 体空间位阻小，共轭程度较完全。最 大吸收峰波长，最大摩尔吸收系数， 不小于顺式。
▪ 2.推测物质旳共轭体系和部分骨架 ▪ 一般需与色谱，红外，质谱，波谱等
多种仪器联合作物质旳构造分析。
▪ 激发单色器 ： 置于光源和样品室之间旳为激发单色器或第一单
色器，筛选出特定旳激发光谱。
▪ 发射单色器：置于样品室和检测器之间旳为发射单色器或第二
单色器，常采用光栅为单色器。筛选出特定旳发射光谱
▪ 样品室： 一般由石英池(液体样品用)或固体样品架(粉末或片状样
品)构成。
▪ 检测器： 一般用光电管或光电倍增管作检测器。可将光信号放大
并转为电信号。
荧光分析法与紫外-可见分析法异同点
荧光分析法与紫外-可见比较： 均属于分子光谱 仪器构造 基本相同
荧光
可见-紫外
本质
发射光谱
吸收光谱
敏捷度 选择性
10-10-10-12 g/ml 高
10-4-10-7g/ml 一般
应用
硫色素荧光法测定维生素B1
维生素B1 在碱性溶液中被铁氰化钾氧化成硫色素，在紫（365nm）
②物质对光吸收呈加和性旳原理，即在某一样品旳吸收曲线上， 各波长旳吸光度是维生素A与杂质吸光度旳代数和，因而吸收曲线 也是两者吸收旳叠加。
紫外与荧光实验
匹配。
照射时间控制
02
根据样品特性和实验目的，控制紫外照射时间，避免样品受到
过度损伤。
温度控制
03
在紫外照射过程中，应保持样品处于恒温状态，以减少误差。
荧光观察
激发光源选择
选择适当的激发光源，确保能够激发样品的荧光。
滤光片选择
根据实验需求选择合适的滤光片，以减少杂散光 干扰，提高荧光信号的信噪比。
荧光灯用于产生可见光， 激发荧光物质发出荧光。
分类
荧光灯有冷光和热光两种 类型，常用的是冷光荧光 灯。
使用注意事项
荧光灯使用时需要预热， 同时避免频繁开关，以保 持稳定的荧光效果。
样品容器
材质
样品容器一般由玻璃或石英制成， 具有较高的透紫外或荧光性能。
规格
根据实验需求选择不同规格的样品 容器，如试管、烧杯、比色皿等。
实验原理
紫外吸收光谱
物质在紫外光照射下，分子吸收特定波长的光能，由基态跃迁至激发态。不同 物质具有不同的能级结构，因此吸收光谱不同，可用于物质的鉴别。
荧光光谱
某些物质在吸收紫外光后，能够以荧光的形式发射出特定波长的光。荧光光谱 的形状、最大发射波长等特性与物质结构密切相关，可用于物质的鉴别和分类。
实验步骤
准备实验样品
选择待测物质，制备成适当浓 度的溶液。
光谱采集
使用紫外-可见分光光度计或荧光光 谱仪，设置合适的扫描范围和扫描 速度，采集紫外和荧光光谱。
数据处理
对采集的光谱数据进行处理和 分析，提取特征参数，如最大 吸收波长、荧光发射波长等。
结果分析
比较不同物质的紫外和荧光光 谱，进行物质鉴别和分类。
04
实验结果与分析
荧光光谱分析
荧光灯和紫外灯的区别
荧光灯和紫外灯的区别
荧光灯即低压汞灯，如日光灯、节能灯等，它是利用低气压的汞蒸气在放电过程中辐射紫外线，低压汞蒸气主要产生254nm和185nm紫外线，从而使荧光粉发出可见光的原理，因此它属于低气压弧光放电光源。
从荧光灯的发光机制可见，荧光粉对荧光灯的质量起关键作用，日光灯、节能灯灯管采用的是普通玻璃，紫外线不能透出来，被荧光粉吸收后发出可见光，它在灯管外的光线则为可见光，不是“紫外线”，之所以有时候叫“紫外荧光灯”，主要是因为是采用紫外线激发的原因。
紫外灯也是利用低气压的汞蒸气产生254nm和185nm紫外线，但是外壳用的石英玻璃，而且玻壳上没有荧光粉，比如紫外杀菌灯管就是应用的紫外线直接杀菌，所以，它发出的光线
为紫外光，杀菌就是用254nm、185nm波长紫外线。
还有就是武汉尚测试验设备有限公司的UV A-340灯管用于紫外老化试验箱SC/ZN-P试验的，就是采用的340nm波长紫外线作为加速老化的光源。
它们发的光本来应该是看不见的紫外线，可是由于防护的原因，有些使用紫外线的行业还是做成发蓝紫色光的产品，用于起警示和防护的作用。
所以，它们两者都是利用的低气压的汞蒸气在放电过程中辐射紫外线，只是因为透过外壳的方式不一样导致用途也不一样。
紫外线使荧光物质发光原理
紫外线使荧光物质发光原理荧光物质是具有发光性质的化合物。
它们受到紫外线或其它光源的刺激时，会向外部释放出光子而产生发光。
本文将探讨紫外线使荧光物质发光的原理。
一、荧光物质的特点荧光物质通常是有机分子，其中最常见的是苯乙烯及其衍生物。
它们在紫外线的照射下，分子内的电子跃迁到更高的能级上，但很快又会从高能级退回到低能级并释放光子。
这种现象被称为荧光发射。
荧光发射的波长通常比紫外线更长、更安全。
二、紫外线与荧光物质当荧光物质受到紫外线照射时，紫外线能量激发分子的电子跃迁到一个高的电子能级上，这时物质处于激发态。
这种能量被吸收后，荧光物质分子开始从激发态退回到基态，这个过程会释放出能量，这个能量会以荧光的形式发出。
荧光的发射波长是特定的，它只取决于荧光物质的本身性质。
三、荧光光谱及应用荧光光谱通常是用来研究荧光物质的光致发光特性的。
荧光物质的荧光光谱可以被观测到的波长范围、荧光强度和荧光光谱构成等特性综合表示出来。
荧光物质的这些特性能够用在生化和医疗领域，例如制造荧光染料或者用来探测生物活性分子，可以发挥重要的价值。
四、紫外线和荧光物质的应用一些生物分子会发出荧光，通常用于生物的成像。
在这种应用中，荧光染料通常用于活体成像，因为荧光可以更容易地穿透生物组织并被观测。
荧光荧光探针通常具有高度选择性，选择能识别生理条件的特定生化状态，如蛋白质聚集、pH变化、离子浓度变化等。
因此，它们通常被用来探测细胞和组织中代表某些生化状态的生物分子。
五、结论本文介绍了紫外线使荧光物质发光的原理。
荧光物质在紫外线激发下，处于激发态时的电子跃迁导致了荧光发射。
荧光物质的荧光光谱可以被用于生化和医疗应用，荧光物质荧光探针通常用于探测细胞和组织的生化状态。
这些知识对于生物成像、药物研发和疾病诊断等领域具有重要的价值。
紫外光谱和荧光光谱
12
紫外-可见分光光度计
13
基本组成
光源 单色器 样品室 检测器 显示
一、光源
在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光 谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的 使用寿命。
14
波谱分析-UV
可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～ 2500nm。
紫外区：氢、氘灯。发射185～400 nm的连续光谱。
10
因为只有由π→π＊和n→π＊跃迁才能产生紫外可见 吸收，而这两种跃迁均要求有机物分子中含有不饱和 基团，所以这类含有π键的不饱和基团称为生色团。简 单的生色团由双键或叁键体系组成，如乙烯基、羰基 、亚硝基、偶氮基—N＝N—、乙炔基、腈基—C≡N等 。 2、助色团（auxochrome)： 有一些含有n电子的基团(如—OH、—OR、—NH２ 、—NHR、—X等)，它们本身没有生色功能(不能吸收 λ>200nm的光)，但当它们与生色团相连时，就会发生 n—π共轭作用，增强生色团的生色能力
16
五、结果显示记录系统 检流计、数字显示、微机进行仪器自动控制和结果 处理。
17
波谱分析-UV
有机化合物的紫外吸收光谱特征 一、非共轭有机化合物
1、饱和化合物
（1）烷烃 饱和烷烃C—C，C—H 只产生σ→σ* 跃迁， λmax ＜ 150 nm ，在近紫外区无吸收。因而饱和烷 烃可用作紫外吸收测定的溶剂。 如， CH4 λmax=125 nm； CH3CH3 λmax=135 nm
2015-5-6
25
HO
OH
O
O
O O
OH
-
O O-
H+
酸式型体只有一个
碱式型体整个分子是
C=O与苯环共轭，因
紫外荧光原理
紫外荧光原理
紫外荧光原理是指在紫外光照射下，某些物质会发出可见光的现象。
这种现象是由于紫外光的能量足够大，能够激发物质内部的电子，使其从基态跃迁到激发态。
当电子回到基态时，会释放出能量，并以光的形式辐射出来。
紫外荧光物质分子内部有一个或多个能级。
当紫外光照射到物质上时，能量与分子的电子相互作用，使电子跃迁到更高的能级上。
在激发态上的电子会很快退回到基态，发生非辐射跃迁，释放出余下的能量。
这些能量以可见光的形式辐射出来，形成荧光现象。
紫外荧光的颜色取决于物质的化学组成和结构。
不同的物质具有不同的能级结构，因此会发射不同波长的荧光。
通过观察荧光的颜色和强度，可以确定物质的成分和浓度。
紫外荧光在许多领域有广泛应用。
在生物学中，荧光染料可以标记特定的分子或细胞结构，用于观察和研究细胞的结构和功能。
在环境监测中，紫外荧光可以用于检测水中的有机污染物。
此外，紫外荧光还在药物研发、食品安全等领域发挥着重要作用。
总之，紫外荧光是一种基于能级跃迁的物理现象，通过观察荧光可以获得物质的信息。
这一原理的应用广泛，对于科学研究和实际应用具有重要意义。
第六章 紫外光谱与荧光光谱
吸 光 系 数
n=3
n=5
波长
2、超共轭效应
当烷基与共轭体系相连时， σ 电子与共轭体系的p电子
云产生一定程度的重叠，扩大了共轭范围，使跃迁能量
降低，吸收红移。
max（nm） 苯 甲苯 间二甲苯
1，3，5-三甲苯
max 200 300 300 305 300
举例:
如乙烯基、羰基、硝基、偶氮基—N＝N—、 乙炔基、腈基、苯等。
O HC
O C CH3
2、助色团：
有一些含有n电子的基团(如—OH、—OR、—NH２、— NHR、—X等)，它们本身没有生色功能(不能吸收λ>200nm 的光)，但当它们与生色团相连时，就会发生n—π共轭作用， 增强生色团的生色能力(吸收波长向长波方向移动，且吸收 强度增加)，这样的基团称为助色团。
在近紫外或可见光区有吸收，其特点是在 270~350nm ，吸
光系数较小在100以内，为弱带，该跃迁为禁阻跃迁。 如：甲基乙烯基丙酮： λmax为324nm
小结： 紫外光谱一般指近紫外区，即 200-400nm，那 么就只能观察 p p *和 n p *跃迁。也就是说紫外 光谱只适用于分析分子中具有不饱和结构的化合物。
5、肩峰：吸收曲线在下降或上升处有停顿，或吸收稍微 增加 或降低的峰，是由于主峰内隐藏有其它峰。
吸 光 系 数
波长
六、紫外光谱的表示法
紫外光谱图是由横坐标、纵坐标和吸收曲线组成的。
横坐标表示吸收光的波长，用nm为 单位。 纵坐标表示吸收光的吸收强度，可以 用A(吸光度)、T(透射比或透光率或 透过率) T = I / I0。 吸收曲线表示化合物的紫外吸收情况。 曲线最大吸收峰的横坐标为该吸收峰 的位置，纵坐标为它的吸收强度。
紫外分光光度法和荧光分析法..
波长紫外可见分光光度计
主要应用
1、药物的杂质检查
利用药物与杂质对光的选择性吸收性质的差异，若药物在杂质的 最大吸收波长处没有吸收，则可在此波长处测样品溶液的吸收度，通 过控制样品溶液吸收度来控制杂质的量。 例：地蒽酚中二羟基蒽醌的检查 二羟基蒽醌的三氯甲烷溶液 在432nm处有最大吸收，而 地蒽酚在该处几乎无吸收。
双波长分光光度法
不需空白溶液作参比；但需要两个单色器获得两
束单色光(λ1和λ2)；以参比波长λ1处的吸光度Aλ1 作为参比，来消除干扰。在分析浑浊或背景吸收 较大的复杂试样时显示出很大的优越性。灵敏度、 选择性、测量精密度等方面都比单波长法有所提 高。 ΔＡ＝A λ2 －A λ1 ＝（ελ2 －ελ1 ) b c 两波长处测得的吸光度差值ΔＡ与待测组分浓度 成正比 （例子：课本366页）
在溶液中，当荧光物质 的浓度较低时,其荧光强 度与该物质的浓度通常 有良好的正比关系,即
IF=KC
光照 分子基态 辐射跃迁 荧光 激发态
若光源是：
由荧光波长可确定物质分子 可见-紫外光源 分子荧光分析法 具有结构 由荧光强度可测物质的含量 原子特征光谱作光源 原子荧光分析 X射线作光源 X射线荧光分析
其他
卡尔曼滤波法
偏最小二乘法 小波变换
三波长分光光度法
系数倍率法
……
原理 与紫外-可见法异同点
应用
原理
荧光 — 分子吸收电磁波后，从其最低激发 态重新发射紫外线或可见光的现象 利用某些物质被一定波长的光照射后所产 生的，能够反映该物质特性的荧光来进行 定性定量的分析方法——荧光分析法。
导数分光光度法
导数分光光度法在多组分同时测定、浑浊样品分析、
紫外荧光原理
紫外荧光原理紫外荧光原理是指物质在受到紫外光照射后，发出可见光的现象。
这一现象是由于物质受到紫外光激发后，电子跃迁至激发态，再返回基态时释放出能量的结果。
紫外荧光原理在许多领域都有着重要的应用，比如材料科学、生物医学、环境监测等。
首先，我们来了解一下紫外光的特性。
紫外光是指波长在10纳米到400纳米之间的光线，它具有较高的能量，能够激发物质中的电子跃迁。
当物质受到紫外光照射后，内部的电子会吸收光子的能量，从基态跃迁至激发态。
在激发态停留一段时间后，电子会再次跃迁回基态，并释放出能量。
这些能量以可见光的形式发射出来，形成了我们所看到的荧光现象。
紫外荧光原理的应用非常广泛。
在材料科学中，紫外荧光被用来研究材料的性质和结构。
通过观察材料在受到紫外光照射后发出的荧光颜色和强度，可以推断出材料的成分和晶体结构。
这对于材料的研究和开发具有重要意义。
在生物医学领域，紫外荧光被广泛应用于细胞和组织的标记和检测。
通过将荧光染料引入到细胞或组织中，再利用紫外光照射，可以观察到细胞内部的结构和功能。
这对于研究细胞生物学和疾病诊断有着重要的意义。
此外，紫外荧光还被应用于环境监测和食品安全领域。
通过检测环境中和食品中的荧光物质，可以快速、准确地判断出是否存在有害物质或者污染物质。
这对于保障环境和食品安全具有重要的意义。
总的来说，紫外荧光原理是一种重要的物理现象，具有广泛的应用价值。
通过对紫外荧光原理的深入研究和应用，可以推动许多领域的发展，为人类社会的进步做出贡献。
希望本文能够帮助读者对紫外荧光原理有更深入的了解，促进相关领域的研究和应用。
紫外光谱与荧光光谱的区别与联系
紫外光谱与荧光光谱的区别与联系嘿，朋友们！今天咱来唠唠紫外光谱和荧光光谱这俩玩意儿。
你说这紫外光谱啊，就像是个神秘的侦探，能通过对物质吸收紫外线的情况来探究它的秘密。
它能告诉我们物质里都有些啥成分，是不是挺厉害的？就好比你去参加一个聚会，紫外光谱能帮你一眼看穿每个人的独特之处。
那荧光光谱呢，就像是夜晚的萤火虫，闪闪发光，特别显眼。
它能让那些会发光的物质现出原形。
你可以想象一下，在一个黑黑的屋子里，只有那些有荧光特性的东西在那里亮闪闪的，多有意思呀！它们俩有啥区别呢？首先啊，紫外光谱关注的是吸收，而荧光光谱关注的是发射呀。
一个是看物质吸收了啥紫外线，一个是看物质发出了啥光。
这就好像一个人擅长倾听别人说话，另一个人擅长自己表达一样，各有各的本事呢！再说说它们的联系吧，它们就像是一对好兄弟，经常一起出现呢。
有时候知道了紫外光谱的情况，就能猜到荧光光谱大概会是啥样；反过来也一样。
就跟你知道了一个人的性格，大概也能猜到他在某些事情上的反应差不多。
你看啊，在化学研究里，要是没有这俩家伙帮忙，那得有多难啊！就好像你在黑暗中摸索，没有一点亮光。
它们能让我们更清楚地了解物质的性质和结构，为我们打开一扇又一扇科学的大门。
而且啊，在实际应用中，它们的作用可大了去了。
比如在医学上，可以用它们来检测疾病；在环境监测上，能帮我们发现那些有害的物质。
这不就像是我们生活中的好帮手吗？总之啊，紫外光谱和荧光光谱，一个像侦探，一个像萤火虫，它们各有特点，又紧密相连。
它们是科学世界里的宝贝，为我们的探索和发现提供了强大的助力。
没有它们，我们的科学研究可就没那么精彩啦！所以说，我们可得好好珍惜它们，让它们发挥出更大的作用呀！。
紫外与荧光实验讲义
实验一绘制吸收光谱及测定摩尔吸光系数一.实验目的通过紫外吸收光谱的绘制和摩尔吸光系数的测定，掌握Agilent8453 UV-V is的使用方法。
学习导数光谱计算方法及特点。
二.实验原理1．本实验用Agilent8453型分光光度计绘制氨基酸（苯丙氨酸，色氨酸）的紫外吸收光谱，找出它的吸收峰波长并计算摩尔吸光系数。
紫外分光光度法是利用物质对光的选择性吸收而建立起来的一种分析方法，波长范围为200-400nm的紫外光谱。
各种分子都有其特征的吸收光谱，即吸光度与摩尔吸光系数随波长的变化而变化的规律。
吸收光谱的形状与物质的特征有关，以此进行定性分析。
为了清楚地描述各种物质对紫外区域电磁辐射的选择性吸收的情况，往往需绘制吸收光谱曲线，即吸光度对波长的曲线。
在吸收光谱曲线上可以找到最大吸收峰波长。
根据比尔定律：A = ε b c式中A—吸光度ε—摩尔吸光系数b—液槽厚度，单位：厘米c—摩尔浓度，单位：mol/l摩尔吸光系数可按下式计算：ε=A b c实验测得的吸收光谱及摩尔吸光系数与仪器及其狭缝宽度有关。
因此实验结果须注明所用仪器的型号及缝宽条件。
2．导数分光光度法：利用紫外-可见分光光度计软件系统带有的数学处理功能，对吸收光谱进行处理，可以获得导数光谱。
利用导数光谱进行分光光度测定，称为导数分光光度法。
通常可以获得1-4阶导数光谱。
在各阶导数光谱中，吸光度对波长的微分值与溶液中组分的浓度c保持线性关系：ssd Acdλ∝。
其中s为导数的阶数。
因此，可以利用导数光谱进行定量测定。
导数光谱可用于放大图谱间差别，定性分析中分辨重叠谱带，而且还可以减少定量分析中来自散射、基体、及其它吸收物的干扰影响。
由于导数光谱灵敏度高，因此对于试样纯度检验，多组分混合物的测定，消除共存杂质的干扰和背景吸收，测定混合式样都具有特殊的优越性。
三.实验仪器和试剂1.Agilent8453 UV-Vis分光光度计;2.移液枪(德国BRAND公司生产);3.25ml容量瓶，50ml容量瓶10支;4.氨基酸储备液：色氨酸0.400 g/l，苯丙氨酸2.00 g/l;5.去离子水四.实验步骤1.波长测定（1）用氨基酸储备液及去离子水在50ml容量瓶中配置氨基酸溶液，色氨酸浓度为50mg/l, 苯丙氨酸720mg/l；（2）分别取上述溶液，用1cm石英比色皿，以水作参比溶液，在波长范围为190nm——450nm间测定他们的吸收光谱。
紫外可见分光光度法与分子荧光光度法的比较
紫外可见分光光度法与分子荧光光度法的比较定义：紫外可见分光光度法：根据被测量物质分子对紫外-可见波段范围（150～800纳米）单色辐射的吸收或反射强度来进行物质的定性、定量或结构分析的一种方法；分子荧光光度法：利用物质吸收较短波长的光能后发射较长波长特征光谱的性质，对物质定性或定量分析的方法。
可以从发射光谱或激发光谱进行分析。
组成部件：紫外可见分光光度法：①辐射源。
必须具有稳定的、有足够输出功率的、能提供仪器使用波段的连续光谱，如钨灯、卤钨灯（波长范围350～2500纳米），氘灯或氢灯（180～460纳米），或可调谐染料激光光源等。
②单色器。
它由入射、出射狭缝、透镜系统和色散元件（棱镜或光栅）组成，是用以产生高纯度单色光束的装置，其功能包括将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束。
③试样容器，又称吸收池。
供盛放试液进行吸光度测量之用，分为石英池和玻璃池两种，前者适用于紫外到可见区，后者只适用于可见区。
容器的光程一般为 0.5～10厘米。
④检测器，又称光电转换器。
常用的有光电管或光电倍增管。
⑤显示装置。
这部分装置发展较快。
较高级的光度计，常备有微处理机、荧光屏显示和记录仪等，可将图谱、数据和操作条件都显示出来。
分子荧光光度法：激发光源、单色器、样品池、检测器和记录显示部分。
1. 光源能发射紫外到可见区波长的光、强度大、稳定。
常用的有溴钨灯、高压汞灯、氙灯。
2. 单色器，两个单色器。
3. 样品池通常用石英制成。
4. 检测器：光电倍增管。
常见类型：紫外可见分光光度法：1.单光束。
简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。
2.双光束自动记录，快速全波段扫描。
可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。
仪器复杂，价格较高。
3.双波长。
将不同波长的两束单色光(λ、λ1 ) 快束交替通过同一吸收池而后到达检测器。
紫外光谱与荧光光谱
L
A 末端吸收
最强峰
肩峰 次强峰
峰谷
lmax
l min
l
图 紫外可见吸收光谱示意图
A
分析吸收曲线
可以看到：
1.同一浓Leabharlann 的待测溶液对不 同波长的光有 不同的吸光度;
lmax
l min
l
• 2. 对于同一待测溶液，浓度愈大，吸光度也愈大；
• 3. 对于同一物质，不论浓度大小如何，最大吸收峰所对应的波长(最大吸收 波长 λmax) 不变.并且曲线的形状也完全相同。
香族化合物在此区域内有吸收，是紫外光谱讨论的主要对象。
可见光区——波长范围在400nm－800nm之间的区域。 可见光区与普通紫外区基本上没有太大的差别，只是光源不同，
普通紫外区用氘灯，可见光区用钨灯。
当吸收光的波长位于400～800 nm可 见光区内，物质呈现颜色，所显示的颜色是 吸收光的补色。如吸收光（补色）：400～ 465/紫（黄绿），465～480/蓝（黄）， 480～550/绿（红紫），550～580/黄 （蓝），580～600/橙（蓝绿），600～ 800/红（蓝绿）
n→π*跃迁比π→π*跃迁所需能量小,吸收波长 长
常用的是π→π*跃迁和n→π*，这两种跃迁都需要分 子中有不饱和基团提供π轨道。
n→π*跃迁与π→π*跃迁的比较如下：
吸收峰波长
吸收强度 极性溶剂
π→π*
n→π*
与组成双键的
有关
原子种类基本无关
中等吸收 104~105 弱吸收 ＜102
含不饱和键的化合物发生π→π*跃迁
C=O , C=C,
C≡C
275 365紫外线荧光反应
紫外线荧光反应：从物理现象到实际应用的探索紫外线荧光反应是一种物理现象，其中某些物质在受到紫外线（通常波长在10-400纳米之间）照射时会发出可见光（荧光）。
这种反应是由于物质吸收了紫外线的能量，然后这些能量以可见光的形式重新释放出来。
对于“275 365紫外线荧光反应”，这是指使用特定波段的紫外线（如275纳米和365纳米）来激发物质产生荧光。
这两个波段经常被用于荧光检测和分析，因为它们处于紫外光谱的范围内，而且相对安全，不会像更短波段的紫外线那样对人体产生强烈的伤害。
275纳米紫外线：这个波段的紫外线能量较高，能够激发许多物质发出荧光。
但是，它也可能对某些材料造成损害，因此在使用时需要谨慎。
365纳米紫外线：这个波段的紫外线能量较低，但仍然足以激发许多常见的荧光物质。
它经常被用于荧光灯、验钞机以及荧光检测等领域。
当这些紫外线照射到具有荧光特性的物质上时，这些物质会吸收紫外线的能量并跃迁到更高的能级。
当这些物质从高能级回落到低能级时，它们会释放出能量，这种能量以可见光的形式表现出来，即我们看到的荧光。
紫外线荧光反应是一种引人入胜的物理现象，涉及到物质与紫外线之间的相互作用。
当某些物质受到紫外线的照射时，它们会吸收紫外线的能量并转化为可见光，这种现象被称为荧光。
荧光不仅具有独特的色彩和亮度，而且在许多领域都有广泛的应用，从荧光灯到验钞机，从生物医学到环境科学。
本文将深入探讨紫外线荧光反应的原理、应用和前景。
一、紫外线荧光反应的原理紫外线荧光反应的原理基于物质对紫外线的吸收和再发射过程。
当物质受到紫外线的照射时，其原子或分子会吸收紫外线的能量并跃迁到高能级状态。
这些高能级状态是不稳定的，因此原子或分子会迅速回落到低能级状态，同时释放出能量。
这些能量以可见光的形式表现出来，即荧光。
荧光发光的颜色取决于物质的结构和性质。
不同的物质在受到紫外线照射时会发出不同颜色的荧光，这使得荧光成为一种有用的分析工具。
紫外灯照射有荧光反应的原因
紫外灯照射有荧光反应的原因1. 你知道吗，紫外灯照射为啥会有荧光反应？这就好像在黑暗中突然发现了闪闪发光的宝藏！比如说，钞票上的防伪标记，在紫外灯下就会发出神奇的荧光，这多有意思呀！2. 为啥紫外灯一照就有荧光反应呢？这难道不像是打开了一个神秘的魔法盒子吗！就像那些专门用于检测的试剂，在紫外光下展现出独特的荧光，是不是很奇妙呢！3. 想没想过紫外灯照射有荧光反应的原因到底是什么呀？这就如同夜晚天空中突然出现的绚烂烟花！像有些荧光棒，被紫外灯一照，哇，那漂亮的荧光就出现啦！4. 你说紫外灯照射有荧光反应是为啥呢？这简直就像在平凡生活中突然出现的惊喜呀！比如说博物馆里那些会在紫外灯下呈现特别荧光的文物，多让人惊叹啊！5. 到底为什么紫外灯照射会有荧光反应呢？这感觉就像发现了一个隐藏的小秘密！像有些特定的宝石，在紫外灯下会发出迷人的荧光，是不是很神奇呢！6. 你不觉得奇怪吗，紫外灯照射咋就有荧光反应啦？这好比进入了一个奇幻的世界！比如一些特殊的标记物，只有在紫外光下才会亮出它们的荧光，多酷呀！7. 为啥会这样呢，紫外灯照射有荧光反应？这就像开启了一场独特的视觉之旅！像那些用于生物实验的样本，在紫外灯下那独特的荧光反应，真让人着迷！8. 你难道不好奇紫外灯照射有荧光反应的原因吗？这就好像是找到了一把打开神奇之门的钥匙！像某些塑料制品，在紫外灯下会有别样的荧光呈现，太有意思啦！9. 到底是因为什么呀，紫外灯照射有荧光反应？这就如同邂逅了一场美丽的意外！像一些特殊的涂料，在紫外光下的荧光效果，真的让人眼前一亮！10. 哎呀，紫外灯照射有荧光反应到底是咋回事嘛！这就跟发现了一个新奇的玩意儿一样！比如有些海洋生物在紫外光下会发出诡异的荧光，多神奇呀！我的观点结论就是：紫外灯照射有荧光反应真的是一个非常有趣且充满神秘色彩的现象，值得我们去深入探究和了解。
与紫外吸收法相比荧光法的优点
与紫外吸收法相比荧光法的优点
荧光法相比紫外吸收法具有以下优点：
1. 高灵敏度：荧光法可以在较低浓度下检测目标物质，因为荧光信号通常比紫外光吸收信号更强。
2. 高选择性：荧光法可以通过选择合适的激发波长和发射波长来区分不同的分析物质，从而实现高度选择性的检测。
3. 多通道检测：利用不同的激发和发射波长，荧光法可以同时监测多种目标物质，实现多通道检测，提高检测效率。
4. 宽线性范围：荧光法可以在广泛的浓度范围内获得线性响应，从低至高浓度都能够准确测量。
5. 无干扰：荧光法可以避免绝大部分基质和溶剂的干扰，因为它可以选择目标物质的特定荧光信号进行检测。
6. 可定量：荧光法可以通过内标物质进行定量分析，使测量结果更加精确和准确。
7. 实时监测：荧光法具有实时性，可以在短时间内获得目标物质的检测结果，适用于快速分析和在线监测。
总的来说，荧光法在灵敏度、选择性、多通道检测、线性范围、无干扰、定量性和实时监测等方面具有优势，因此在很多分析领域得到了广泛应用。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
1，生色团和助色团
生色团：最有用的紫外-可见光谱是由π→π﹡和n→π﹡跃迁产生的。
这两种跃迁均要求有机物分子中含有不饱和基团。
这类含有π键的不饱和基团称为生色团。
简单的生色团由双键或三键体系组成，如乙烯基、羰基、亚硝基、偶氮基、乙炔基、氰基等。
助色团：有一些含有n电子的基团（如-OH、-OR、-NH2、-NHR、-X等），它们本身没有生色功能（不能吸收波长大于200nm的光），但当它们与生色团相连时，就会发生n—π共轭作用，增强生色团的生色能力（吸收波长向长波长方向移动，且吸收强度增加），这样的基团称为助色团。
2，红移和蓝移
有机化合物的吸收谱带常常因引入取代基或改变溶剂使最大吸收波长和吸收强度发生变化：
最大吸收波长向长波方向移动称为红移，向短波方向移动称为蓝移（或紫移）。
吸收强度即摩尔吸光系数增大称为增色效应，减小称为减色效应。
3，紫外吸收光谱
(1)紫外吸收光谱是由于分子吸收紫外辐射能后引起电子跃迁所产生的，可用于无机和有机物的定性和定量分析。
(2)紫外-可见波长范围：100～800nm
远紫外光区（真空紫外区）：100～200nm；
近紫外光区：200～400nm；
可见光区：400～800nm
紫外光谱、可见光谱和红外光谱一起统称为分子光谱。
（3）吸收曲线的特点
同一种物质对不同波长光的吸光度不同，吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长；
同一种物质不同浓度的吸收曲线形状相似，最大吸收波长不变； 不同浓度的同一物质，在某一定波长下吸光度有差异，在最大吸收波长处吸收度的差异最大，测定最灵敏，此特性可作为物质定性分析的依据。
4，荧光光度法
荧光发射光谱：电子由第一激发单重态的最低振动能级向基态跃迁所发射的光谱。
荧光光谱的特征：
Stokes位移：激发光谱与发射光谱之间的波长差值。
发射光谱的波长比激发光谱的长，振动弛豫消耗了能量。
发射光谱的形状与激发波长无关：用不同波长的激发光激发荧光分子，可以观察到形状相同的荧光发射光谱。
这是由于无论分子被激发到哪一个激发态，处于激发态的分子经过振动弛豫及内转换最终回到第一激发态的最低能级，然后再跃迁回到基态，产生波长一定的荧光。
镜像规则：通常荧光发射光谱与它的吸收光谱成镜像对称关系。