微生物能力验证能力考核要点

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食品微生物检验技能操作考核方案与评分标准

食品微生物检验技能操作考核方案与评分标准

食品微生物检验技能操作考核方案与评分标准食品微生物检验技能操作考核方案与评分标准一、食品微生物检验技能操作试题本次考试有五组技能测试题供学生随机抽取,每一组题满分均为100分,占该门课程总成绩的70%。

第一组:使用高压灭菌锅进行培养基的灭菌,并回答相关问题。

第二组:微生物划线分离技术操作,并回答相关问题。

第三组:食品中细菌总数的测定操作,并回答相关问题。

第四组:食品中大肠菌群测定,并回答相关问题。

第五组:常用仪器的使用二、考试程序1、组织学生抽取考试序号,按照此序号依次进行技能考试。

2、按照考试序号组织学生在考前5分钟抽取试题,拿到试题后可以准备5分钟,然后开始操作和回答。

其他学生集中在另一教室等待。

3、考试完的学生不允许与等待考试的学生接触,要迅速离开考场,防止学生利用通讯工具交流试题内容。

三、评分标准第一组湿热灭菌操作一、一、操作用具及物品:高压灭菌锅、试管培养基、三角瓶、线绳、报纸或牛皮纸等。

二、操作过程及评分标准1.首先将内层灭菌桶取出,再向外层锅内加入适量的水,使水面与三角搁架相平为宜。

(10分)2.放回灭菌桶,并装入待灭菌物品。

注意不要装得太挤,以免防碍蒸汽流通而影响灭菌效果。

三角烧瓶与试管口端均不要与桶壁接触,以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。

(10分)3.加盖,并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内。

再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓,使螺栓松紧一致,勿使漏气。

(10分)4.用电炉或煤气加热,并同时打开排气阀,使水沸腾以排除锅内的冷空气。

(或等压力上升到0.5时,打开放气阀排出冷空气)待冷空气完全排尽后,关上排气阀,让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。

当锅内压力升到所需压力时,控制热源,维持压力至所需时间。

本实验用 1.05kg/cm2,121.3℃,20分钟灭菌。

(10分)提问:1.为什么要放出冷空气?答:因空气是热的不良导体,当高压锅内的压力升高后,它聚集在锅的中下部,使饱和热蒸汽难与被灭菌物品接触。

微生物能力验证能力考核要点

微生物能力验证能力考核要点

微生物能力验证能力考核要点1.样品的选择和准备:选择具有代表性的样品进行分析,样品的选择应该包括正样品和负对照样品,以验证实验室或者人员对微生物的检测能力。

同时,样品的准备过程应该参照标准化的操作程序,确保每个样品都得到一致的处理。

2.测试方法的选择和标准化:选择合适的测试方法进行微生物的检测,方法的选择应该考虑到试剂的可获取性、实验室的设备和仪器的合适性以及方法的准确性和敏感性。

同时,测试方法应该经过标准化,确保每个实验室或者人员都使用相同的方法进行测试。

3.实验操作的规范性:在进行能力验证时,应该确保实验室或者人员按照标准操作程序进行实验操作,包括样品的接触、处理、培养和检测等步骤。

实验操作的规范性是保证结果准确性的基础,同时也方便其他实验室或者人员进行复现和比对。

4.数据的分析和解读:能力验证的结果应该进行统计分析,根据统计结果对实验室或者人员的检测能力进行评估。

同时,根据验证结果,还可以对实验室或者人员的强项和弱项进行分析和解读,以便在需要的情况下进行进一步的训练和提升。

5.质量控制和质量保证:能力验证是实验室或者人员进行质量控制和质量保证的重要环节。

通过能力验证,可以评估实验室或者人员的检测过程中是否存在系统性误差或者操作失误,并进行纠正和改进,以保证检测结果的准确性和可靠性。

6.结果的报告和证明:能力验证的结果应该详细记录并报告,包括微生物检测的数据、分析结果、评估结论等内容。

同时,还可以提供相关证明和证书,用于在实验室或者人员之间进行交流和共享,以及在需要时向外部监管机构或者客户提供。

综上所述,微生物能力验证是对微生物实验室或者人员进行能力考核的一种方法,通过选择合适的样品和测试方法,规范实验操作,进行数据分析和解读,加强质量控制和保证,最终生成能力验证报告和证明,以评估实验室或者人员的微生物检测能力。

这些要点能够确保能力验证的准确性、精确度和可靠性,并帮助实验室或者人员提升检测能力。

微生物实验室检查要点(三)2024

微生物实验室检查要点(三)2024

引言:概述:微生物实验室检查的要点包括样品采集、培养方法、质量控制、解读结果以及报告撰写。

它们是保证实验室检查准确性和可靠性的关键因素。

下面将详细阐述这五个大点,并分别列举其中的小点。

正文内容:一、样品采集1. 样品采集前要完全清洁双手并佩戴一次性手套,以防止细菌或病毒的交叉污染。

2. 样品采集时要使用无菌工具,并遵循特定的采集方法,以保证样品的高质量。

3. 样品采集点应选择代表性的位置,并保证采集样品的充分混合。

4. 样品采集后应立即进行处理,以减少变质的可能性。

5. 所有采集的样品必须正确标识,包括采集时间、地点和样品类型等信息。

二、培养方法1. 根据需要选择适当的培养基和培养条件,以满足不同微生物的生长需求。

2. 培养基的配制应严格遵循标准操作程序,并确保无菌。

3. 培养过程中要进行质量控制,包括对培养基的质量和无菌性进行验证。

4. 培养时间和温度的选择应基于特定微生物的生长速率和最适生长条件。

5. 培养后的菌落要进行鉴定和分类,并记录培养结果和鉴定方式。

三、质量控制1. 实验室应建立完善的质量保证和质量控制体系,并定期进行内部和外部质量评估。

2. 每批培养基和试剂都应进行质量测试,以确保其准确性和无菌性。

3. 实验室技术人员应接受专业培训和能力验证,以确保他们具备正确的操作技能。

4. 实验室设备的校正和维护也是质量控制的关键环节,定期检查仪器的准确性和精度。

5. 记录和跟踪每个实验的结果,以及实验室操作和质量控制的相关数据,以备后续分析和报告。

四、解读结果1. 实验室技术人员应熟悉各种微生物的特征和鉴别方法,以准确解读实验结果。

2. 对于不明确或疑似阳性结果,应进行进一步的鉴别实验,以排除误报。

3. 结果的解读应结合样品采集方法、培养条件和质量控制的数据,以确保结果的可靠性。

4. 解读结果时还应考虑各种可能的污染来源,并排除外部污染的可能性。

5. 实验室应根据检测结果及时向客户或相关部门提供准确和可理解的报告。

微生物检验员考核指标及方案(精选五篇)

微生物检验员考核指标及方案(精选五篇)

微生物检验员考核指标及方案(精选五篇)第一篇:微生物检验员考核指标及方案微生物检验员考核指标及方案一、对公司所有物料、产品的微生物检验工作,并作好记录。

二、对所有微生物检验用仪器、设备的维护保养与清洁,并做好记录。

三、负责对生产洁净车间和无菌室洁净度的测定,并做好记录,出具检验报告。

四、负责对留样样品稳定性考查中的微生物检验。

五、协助相关部门对生产工艺验证、设备验证及质量管理提供微生物检测数据。

六、负责菌种的保管、传代、接种工作,并作好记录;负责微生物检验的准备工作及培养基的配制。

七、及时完成各项检验任务,并于规定的工作日内出具报告。

八、做好上级领导分配的临时性工作。

九、每月至少做到80-90个检品的微生物检验。

十、在车间没有那么多检品时加强学习新技术和新的检验方法。

十一、保证产品检验成功率95﹪。

十二、做好每月一次做好无菌室清洁、消毒灭菌;十三、做好每月一次做好准备室、空调室、培养室清洁维护工作;十四、做好每周一次做好无菌服、工作服、鞋清洗、消毒灭菌;第二篇:微生物检验员培训资料一.基础知识(一)微生物基础知识1.培养基培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。

由于微生物具有不同的营养类型,对营养物质的要求也各不相同,加之实验和研究的目的不同,所以培养基的种类很多,使用的原料也各有差异,但从营养角度分析,培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。

另外,培养基还应具有适宜的pH值、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压。

琼脂是从石花菜等海藻中提取的胶体物质,是应用最广的凝固剂。

加琼脂制成的培养基在98~100℃下融化,于45℃以下凝固。

但多次反复融化,其凝固性降低。

任何一种培养基一经制成就应及时彻底灭菌,以备纯培养用。

一般培养基的灭菌采用高压蒸汽灭菌。

(二)消毒与灭菌知识 5.2灭菌方法灭菌是指杀死或消灭一定环境中的所有微生物,灭菌的方法分物理和化学灭菌法两大类。

《微生物检验技术》考评方式与标准

《微生物检验技术》考评方式与标准

《微生物检验技术》考评方式与标准适用专业:医学检验技术学时:102学分:5一、考核改革的目的课程考核改革的目的是寻求一种科学的考核方式和手段。

根据医学检验技术专业人才培养要求,学生在校学习期间既要掌握专项操作技能,又要具备必要的理论知识,培养学生具备可持续发展的能力,所以,在课程考核改革中,应该即考核学生理论知识应用能力,又要考核学生的专项操作技能。

二、考核目标既考核学生理论知识的掌握及运用程度,又考核学生专业技能,包含微生物检验基本操作技能和综合操作技能。

三、考核的方式1.知识应用能力考核知识应用能力考核成绩=平时成绩(30%)+期末在线测试成绩(70%)平时成绩包含课后作业、上课提问、出勤率和平时课堂上的表现四个部分。

期末采取网上在线测试的方式进行,本课程网站建有在线测试题库,期末结束前学生全部通过网上在线测试系统随机组卷,进行在线测试,自动统计考核成绩。

2.技能考核方案技能考核成绩=项目技能考核成绩(50%)+综合技能考核成绩(50%)(1)项目技能考核考核项目为《微生物检验技术》职业技能考核题库中的基本项目,在实施项目教学过程中,相关项目教学活动完成后,每位学生采取抽签的方法选定考核内容,分口试和操作二个步骤完成,根据学生回答问题及操作完成情况,按照《微生物检验技术》项目操作考核评分标准进行评分。

(2)综合技能考核本课程完全依据临床上微生物检验岗位行业标准设计了综合技能考核方案,即准备若干种待检验的临床标本,学生抽签选定检验标本,按照微生物检验岗位真实工作过程完成临床标本的微生物检验,先制定微生物检验计划,再实施操作,上交综合技能考核记录单,详细记录检验全过程和所有原始记录,并最终上报微生物检验报告。

综合技能考核在本课程学习结束前,由临床一线的工作人员、行业专家及本课程专兼职教师组成的考核团队,在临床岗位上完成考核,按照综合技能考核评分标准,对学生的操作过程及检验结果进行综合评定,全面考核学生的团队合作精神、分析问题、解决问题等岗位综合能力。

食品微生物检验技能操作考核方案与评分标准

食品微生物检验技能操作考核方案与评分标准

食品微生物检验技能操作考核方案与评分标准食品微生物检验技能操作考核方案与评分标准食品微生物检验技能操作考核方案与评分标准一、食品微生物检验技能操作试题本次考试有五组技能测试题供学生随机抽取,每一组题满分均为100分,占该门课程总成绩的70%。

第一组:使用高压灭菌锅进行培养基的灭菌,并回答相关问题。

第二组:微生物划线分离技术操作,并回答相关问题。

第三组:食品中细菌总数的测定操作,并回答相关问题。

第四组:食品中大肠菌群测定,并回答相关问题。

第五组:常用仪器的使用二、考试程序1、组织学生抽取考试序号,按照此序号依次进行技能考试。

2、按照考试序号组织学生在考前5分钟抽取试题,拿到试题后可以准备5分钟,然后开始操作和回答。

其他学生集中在另一教室等待。

3、考试完的学生不允许与等待考试的学生接触,要迅速离开考场,防止学生利用通讯工具交流试题内容。

三、评分标准第一组湿热灭菌操作一、一、操作用具及物品:高压灭菌锅、试管培养基、三角瓶、线绳、报纸或牛皮纸等。

二、操作过程及评分标准1.首先将内层灭菌桶取出,再向外层锅内加入适量的水,使水面与三角搁架相平为宜。

(10分)2.放回灭菌桶,并装入待灭菌物品。

注意不要装得太挤,以免防碍蒸汽流通而影响灭菌效果。

三角烧瓶与试管口端均不要与桶壁接触,以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。

(10分)3.加盖,并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内。

再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓,使螺栓松紧一致,勿使漏气。

(10分)4.用电炉或煤气加热,并同时打开排气阀,使水沸腾以排除锅内的冷空气。

(或等压力上升到0.5时,打开放气阀排出冷空气)待冷空气完全排尽后,关上排气阀,让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。

当锅内压力升到所需压力时,控制热源,维持压力至所需时间。

本实验用 1.05kg/cm2,121.3℃,20分钟灭菌。

(10分)提问:1.为什么要放出冷空气?答:因空气是热的不良导体,当高压锅内的压力升高后,它聚集在锅的中下部,使饱和热蒸汽难与被灭菌物品接触。

微生物检验技术正高考试技巧

微生物检验技术正高考试技巧

微生物检验技术正高考试技巧
1.重点突破知识点
(1)了解微生物检验技术:要了解微生物检验技术的基本要求,例如,温度、湿度、光照、培养基、接种方式等。

(2)熟悉各类检验方法:试验设备的使用、酶活性测定、细菌
分离、血清学鉴定、实验室药物抗菌试验等,了解每种方法的操作步骤及原理。

(3)掌握报告写作要求:报告的书写应符合《中国药典》规定
的格式,注意用词的准确性,报告的排版清晰,引用来源准确。

2.应考技巧
(1)注意细节:复习时要注意细节,知道每一步操作的含义、
实践操作的步骤和注意事项,把每一个小细节都要搞定。

(2)思路梳理:在复习时,要找到考试的思路,总结出每一大
类的重点内容,归纳出考试中微生物检验技术的实践部分和理论部分,把每一大类的知识梳理出来。

(3)实践训练:在复习的过程中,要结合实际,做一些实践训练,把用到的知识点都真实地操作一遍,以增强自己的实战能力。

(4)做好思考题:考试中还会有相应的思考题,考生要把握好
这部分的重点,多做一些实践思考题,及时反思,找到自己的不足,掌握考试思路。

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深圳职业技能鉴定微生物检定工考核大纲

深圳职业技能鉴定微生物检定工考核大纲

深圳市职业技能鉴定微生物检定工考核大纲1、职业概况1.1、职业名称:微生物检定工职业定义:从事药品,食品,化妆品,日常化学品等行业微生物检定工作的人员。

1.2、职业等级:本大纲共设五个等级,分别为:初级工(国家职业资格五级)、中级工(国家职业资格四级)、高级工(国家职业资格三级)、技师(国家职业资格二级)、高级技师(国家职业资格一级)。

1.3、基本文化程度:生物、医药、食品、精细化工等专业及其相关专业中等专业学校(含中技、中职)毕业,或高中毕业经过岗位实践和专业培训。

1.4、培训期限要求:全日制职业学校教育,根据其培养目标和教学计划确定。

晋级培训期限:初级、中级、高级不少于200标准学时;技师和高级技师不少于180标准学时。

1.5、申报条件:参照《关于印发职业技能鉴定各职业报考条件的补充通知》(深职鉴办〔2013〕15号)执行1.6、鉴定方式、鉴定时间:(理论、实际操作考试方式与时间)本工种初、中、高级工采用理论知识笔试和技能操作考核两种形式鉴定,理论知识考试时间为90-120分钟,实际操作考核时间为120-180分钟。

技师考核采用理论知识笔试、技能操作考核和综合评价形式鉴定。

高级技师考核采用理论知识笔试、综合评价和业绩追踪形式鉴定。

本规范中知识要求、技能要求、综合评价和业绩跟踪的成绩各满分为100分,60分及以上者为合格。

1.7、考评人员与考生配比:(理论、实际操作考试考评人员与考生配比)1、理论知识考评原则上每20名考生配备1名考评员(20:1)。

2、实际操作考评原则上按5名考生配备1名考评员(5:1),且不少于2名考评员;每40名考生配备1名实验员。

2、基本要求:2.1、职业道德基本知识:身体健康无传染性疾病,有良好的卫生习惯和质量无差错意识、了解药品管理法、药品生产质量管理规范等法律与法规相关知识;有强烈的责任感。

2.2、基础理论知识:应用化学、应用微生物学、生物化学。

2.3、专业基础知识:药品、食品、化妆品及日化产品卫生标准。

能力验证能力考核要点微生物检测项目篇

能力验证能力考核要点微生物检测项目篇

能力验证能力考核要点---微生物检测项目篇!一、要树立科学必须真实的观念,实验态度要端正。

要怀着一颗为了出具真实、准确,可信数据而敬畏的心去申请能力验证。

实验要求科学严谨,实验要预先充分练习和实践。

能力验证是对实验室综合实验水平(人员,设备,环境等多因素)的评价。

首先要选好实验项目,找到与之配套的方法,进行充分的方法验证,从检测员能力,仪器设备性能,校检结果是否能满足实验需要,实验检测多次实验,检测环境是否进行了充分的考虑,实验确认好实验项目,认真学习标准,理解标准,并做到标准所规范的步骤,并对自己实验有了一定的信心后再去申请能力验证为宜。

举例:某实验室未经过充分实验方法确认,实验平时做的也少,直接申请了能力验证。

实验过程生疏,照方抓药,手忙脚乱,造成稀释梯度不够,平板干燥,菌落蔓延,无法出具具体数值,实验失败。

二、实验室收到盲样菌株标本后,首先应做的事情。

1、检查标本的性状和确认包装情况,然后按照要求去能力验证网站提交收到样品情况。

2、仔细阅读参指导书,包括标本如何保存的信息,进行实验室内部工作分配,明确工作任务和要求。

3、实验前应严格按照作业指导书的要求制订检验流程,认真做好准备工作,包括实验中需要使用的器皿,须提前做好清洁灭菌。

三、能力验证样品处理。

1、定量项目,西林瓶内样品不可分割,应全部用于检测。

一般参考书指导的是加40mL稀释液制成40mL样品。

2、定量项目样品稀释。

指导书标明了稀释范围的,在稀释范围左右各加1个稀释度进行;书上没有稀释范围的,多做稀释倍数,选择合适的稀释倍数计数(一般可稀释至10-8)。

3、定量项目,除了要多做稀释倍数外,同时同一稀释度要多倒几皿,从原理上来讲,检测过程属于随机抽样检查,平板越多,数据越接近真值。

考虑性价比,又不可能一直疯狂一个稀释度很多平板,所以能力验证时候多倒几皿,求好结果。

4、定性项目有一些重要步骤。

a、增菌及分离步骤尤其重要。

选择合适的增菌液和分离用培养基对目标菌的检出非常关键,选择两种以上的增菌液和分离用培养基对菌株作直接分离和增菌后分离。

微生物考核方案

微生物考核方案

微生物考核方案(100分制)
.1.检品:
①规范性:按微生物限度操作规程进行规范操作,当同一检品两人检测时,结果一人检出为合格,另一人检出为不合格,视为不规范操作。

(10)
②全检性:检品(除个别)必须按操作规程进行全检,不漏检。

(10)
③反馈及时性:及时反馈检品信息情况,当检品出现不合格情况时,要第一时间向相关领导汇报,并填写质量信息反馈表及微生物限度调查表。

(10)
2.报告记录:
①准确性和真实性:检品检验合格后,书写报告要真实,准确,不能弄虚作假,由主管监督确认。

(10)
②及时性:检品时间到期,需按时出示检验报告,不拖延。

未及时出示报告,每逾期一天扣1分。

(10)
3.记录:
①登记记录:仪器使用等记录需及时登记,不拖延。

若存在拖延情况,按每逾期一天扣1分。

(5)
②辅助报告:留样、纯化水、沉降菌、浮游菌、悬浮粒子数、细粉等报告及时出具报告,并登记相应记录。

(5)
4.卫生管理:
①个人:自己桌面及当天检测操作台面整理、清洁。

(5)
②公共:分配的区域定责于个人,保持公共区域洁净。

(5)
5.培训:每周一小时组内学习及公司培训,组员必须积极参加。

(10)
6.出勤率:不迟到早退,遵守公司规章制度。

(10)。

能力验证知识简介及注意事项

能力验证知识简介及注意事项
4
能力验证 能力验证 活动的内容
实验室间比对
测量审核
5
2、实验室间比对
• 按照预先规定条件由两个或多个实 • 验室对相同或类似样品进行检测或校准 • 的组织、实施和评价。
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实验室间比对的目的
➢ 确定某个实验室对特定测试或测量的能力,并 监控实验室的持续的能力; ➢ 识别实验室的问题并采取纠正措施,这可能与 人员的能力或仪器的校准有关; ➢ 确定新方法; ➢ 监控已建立方法的有效性和可比性; ➢ 向实验室的客户提供更高的可信度; ➢ 鉴别实验室间的差异; ➢ 确定一种方法的能力特性,通常称共同试验; ➢ 给标准物质赋值,并评价其适用性。
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• (6)部分过程计划 • 这类计划用于评价实验室对检测全过 程的其中一部分或若干部分的执行能力。 该计划无须多个实验室参加。
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• 能力验证的好处
➢直接展示实验室的技术能力 ➢有效地补充和支持评审员的评审工作 ➢证实实验室对程序、方法和其它运作的有效控 制 ➢提高实验室可信度,获取竞争优势 ➢为实验室提供有效的外部质量控制 ➢为量值溯源提供相关性证明 ➢改善实验室质量管理,提高实验室校准/检测能 力 ➢完善认可机构评审技术
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• ➢ • • ➢ • • •
常用术语 协调人 能力验证计划运行过程中所有活动的 组织或人员。 指定值 属某一特定值,对于给定目的具有适 当不确定度的、赋予特定量的值,有时 该值是约定采用的。
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➢公议值 • 从若干个参加者提交的测得值中获 得 • 一个给定值。 • 注:在检测能力验证试验中,一般将各参
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• (2)检测比对计划 • 该计划一般由协调人从待测物品中随 机抽取若干样品,同时分发给各参加实验 室进行检测。协调人从所有检测结果中获 得公议值,再与各检测结果进行比较来评 价各参加实验室的能力。

食品微生物的检测能力验证

食品微生物的检测能力验证

食品微生物的检测能力验证能力验证(proficiency testing)即利用实验室间比对,按照预先制定的准则评价参加者的能力。

通过能力验证能够评定实验室从事特定检测或测量的能力,识别实验室存在的问题并启动改进措施,提高实验室的检测能力等。

因此,参加能力验证活动对实验室质量控制有着非常重要的意义。

上海市闸北区疾病预防控制中心实验室已连续多年参加辽宁出入境检验检疫局食品微生物能力验证计划,现将从中收获的一些经验教训介绍如下,供同行参考。

1.2.2操作步骤①按照PTC-T028参试指导书的要求进行样品水化。

从冰箱取出待测样品,待其恢复至室温后,无菌开启装有样品的西林瓶,立即加入4 mL生理盐水进行再水化,稀释液合计40 mL,待溶解后,吸出放入无菌瓶中,反复用余下的稀释液清洗西林瓶内壁,回收清洗液放入上述无菌瓶中,此溶液即是待测样品原液,全过程20 min内完成。

将上述制备的40 mL待测原液按照标准方法进行后续操作。

②菌落总数检测。

取经水化制备的待测原液25 mL,加入225 mL灭菌生理盐水混匀,制成10-1稀释液,取10-1稀释液1 mL加9 mL灭菌生理盐水混匀,制成10-2稀释液,以此类推稀释至10-4。

每稀释1次,换1次无菌吸管。

每个稀释度样液各取1 mL加入到2个无菌平皿中,同时做空白对照。

及时用15 mL 冷却至45℃左右的平板计数琼脂倾注平皿,摇匀,待培养基凝固后倒置放入培养箱中,36℃培养48 h后进行菌落计数。

③大肠菌群检测。

采用最可能数(most probable number,MPN)法进行大肠菌群计数。

将经水化的待测样品按照菌落总数检测的方法制备10-1~10-6的稀释液。

每个稀释度接种3管LST肉汤,每管接种1 mL,36℃培养48 h后,产气者进行复发酵试验,接种BGLB肉汤管36℃培养48 h后产气者计为大肠菌群阳性,记录每个稀释度的BGLB产气管数。

④金葡菌检测。

微生物检验技术考试要点(整理-中级)【范本模板】

微生物检验技术考试要点(整理-中级)【范本模板】

检验技术资格考试考点精要——微生物学检验(中级)1。

生物学按界门纲目科属种分类,种是最小单位。

病毒分类:目、科、亚科、属、种。

属名—-VRir us结尾的单词,亚科名-—VRir inae结尾的单词,科名—-VRir idae结尾的单词。

目名—VRir ales。

2004年ICTV公布病毒分为:73个科、11个亚种、289个属。

2. 结核菌可利用甘油为碳源,梭状芽胞菌可以氨基酸为碳源,流感嗜血杆菌要Ⅴ,Ⅹ因子才能生长.3. 药物敏感试验:纸碟法、小杯法、凹孔法、试管法。

常用单片纸碟法、试管稀释法(以抗菌药物的最高稀释度仍能抑制细菌生长或杀菌管为终点,该管含药浓度为最低抑菌浓度MIC或最低杀菌浓度MBC),两值越低则表示越敏感。

MIC与抑菌圈呈负相关,即抑菌环直径越大,MIC越小。

各药敏纸片间距不少于24mm,距平板内缘不小于15mm.药物敏感实验判定标准:抑菌圈直径(毫米):20以上极敏、15~20高敏、10~14中敏、10以下低敏。

不同的菌株、不同的抗生素纸片需参照NCCLs的标准或者CLSI标准。

多黏菌素抑菌圈;在9毫米以上为高敏,6—9毫米为低敏,无抑菌圈为不敏。

4。

常用的免疫技术:酶免疫技术(EIA)、协同凝集试验、免疫荧光技术(IF)、对流免疫电泳(CIE)、免疫印迹技术。

5。

病原菌核酸的检测:核酸杂交、PCR技术、基因芯片技术。

PCR技术—是选择DNA或RNA体外扩增技术,用标本提取DNA为扩增模板,选用一对特异寡核苷酸为引物,PCR一般要经历三十多次循环,经不同温度变性93—94℃(作用1min氢键断裂形成单链DNA)、退火40—60℃(迅速冷却30-60s引物与DNA模板结合,形成局部双链)、延伸70—75℃(在TaqDNA聚合酶作用下,以A、T、G、C四种脱氧核苷酸为原料,从引物5’→3’端延伸,合成与模板互补的DNA链。

),扩增产物用溴乙啶染色的凝胶电泳。

其具有特异、快速、灵敏、特异性强、操作简便、能够定量。

食品微生物能力验证霉菌酵母菌计数—检验方法比较

食品微生物能力验证霉菌酵母菌计数—检验方法比较

食品微生物能力验证霉菌酵母菌计数—检验方法比较霉菌酵母菌在自然界中分布极广,种类繁多,食品中易受到不同程度的污染。

食品中霉菌酵母菌的增殖一般会导致营养价值下降、酸败变味或外观恶化等,影响货架期及口感,若霉菌、酵母菌含量较高,且日摄入量较多,会影响人体肠胃内的微生物平衡,甚至造成肠胃不适,可能引起疾病发生。

霉菌对干食品的最大风险主要是在适宜的条件下(产毒株、数量、温度、湿度、水分活度等),能产生霉菌的有毒代谢产物—霉菌毒素,引起过敏反应等各种急、慢性中毒及可能的致癌作用。

因此,人们愈来愈重视食品中霉菌及酵母菌污染对人体造成的危害。

在我国国家部分食品产品及卫生标准中,把霉菌和酵母菌作为常见指示菌进行监测和控制,如饮料、坚果制品、米面制品、糕点类等食品。

霉菌和酵母的检测被列入国标4789 系列食品安全微生物常规检测项目之一 , 霉菌酵母菌的检验方法看似简单,但由于食品种类繁多成分复杂,食品中存在的霉菌种类较多,对环境温湿度及营养成分的要求有所不同,要在同等条件下把所有的霉菌培养出来,反映出样品的真实情况,实属不易,且霉菌前期生长速度缓慢,后期菌丝急剧增加,特别是毛霉的蔓延,给霉菌和酵母菌的同时计数带来一定的困难,如何能更准确、快速提离食品中霉菌检测数目是食品卫生部门面临的一个严峻问题。

能力验证是利用实验室间的比对判定实验室的特定校准、检测能力,以考察实验室检验能力的外部质量活动,组织方提供试验的样本,一般会考虑增加检测难度。

为了更准确更全面得出能力验证结果,本实验室综合了多种方法进行同步检测,主要是考虑霉菌、酵母菌总数检测是通过平板中生长的菌落数目直接计数推算,培养基的质量和培养方式直接影响了检测的结果,因此,选择两种常用的霉菌酵母培养基,采用正置和倒置培养法进行试验,比较分析不同培养基、不同培养方式对霉菌酵母菌计算结果的差异,进而得出较为准确的试验结果进行上报。

2 材料与方法2.1 样品能力验证样品:中国检验检疫科学研究院测试评价中心提供,样品编号为15-G068。

微生物技能考核标准

微生物技能考核标准

食品微生物检验技技能考试
显微镜的使用与维护
班级:姓名:学号:一、实操部分(80分)
食品微生物检验技技能考试
简单染色评分标准
班级:姓名:学号:
食品微生物检验技技能考试
制备无菌平板评分标准(时间5分钟)
班级:姓名:学号:
食品微生物检验技技能考试
血球计数板计数(时间:30min)
班级:姓名:学号:
食品微生物检验技技能考试
食品微生物检验技技能考试
平板划线分离考核标准
食品微生物检验技技能考试
平板涂布分离考核标准(20min)
班级:姓名:学号:
食品微生物检验技技能考试
结果观察
食品微生物检验技技能考试
培养基的制备与灭菌
班级:姓名:学号:
食品微生物检验技技能考试
高压蒸汽灭菌锅的使用与维护
班级:姓名:学号:。

微生物检验重点知识点总结

微生物检验重点知识点总结

微生物检验重点知识点总结微生物检验是临床生物化学检验中的一个重要分支,其主要目的是检测病原微生物的存在和种类,以帮助临床诊断和治疗。

微生物检验涉及到多种技术和方法,包括细菌培养、抗生素敏感性测试、真菌检测等。

在本文中,我们将对微生物检验的重点知识点进行总结,包括微生物培养、菌种鉴定、抗生素敏感性测试等方面。

一、微生物培养1. 细菌培养条件:细菌培养需要适宜的温度、pH值和营养物质。

一般来说,大多数细菌在37摄氏度下生长最适宜,pH值维持在7左右,而营养物质主要包括碳源、氮源和无机盐等。

2. 培养基的选择:根据不同的细菌种类和要求,可以选择不同种类的培养基。

常用的培养基包括营养琼脂、大肠杆菌培养基、葡萄球菌培养基等。

3. 培养方法:常用的细菌培养方法包括平板法、液体培养法和混悬液培养法。

其中,平板法是将含有琼脂的培养基均匀涂抹在培养皿上,使其凝固后可以在上面观察细菌的生长情况。

4. 培养时间:一般来说,细菌培养需要一定的时间来观察其生长情况。

常见的培养时间包括24小时、48小时和72小时等。

二、菌种鉴定1. 形态学鉴定:观察细菌的形态特征,包括细胞形状、大小、颜色等。

常用的方法包括显微镜下观察和染色法。

2. 生理生化鉴定:通过细菌的生理和生化特性来鉴定其种类,包括对碳水化合物的利用、氧气需求、氧化酶活性等。

3. 分子生物学鉴定:采用PCR技术和分子生物学方法对细菌的基因进行检测和分析,以确定其种属和亲缘关系。

三、抗生素敏感性测试1. 纸片扩散法:将含有不同抗生素的纸片放置在琼脂培养基表面,观察其抑菌圈的形成情况,以确定细菌的抗生素敏感性。

2. 微量稀释法:将一定浓度的抗生素溶液与不同浓度的细菌混合,通过改变抗生素浓度来确定最小抑菌浓度,从而确定其抗生素敏感性。

3. 自动化敏感性测试:通过自动化设备和方法对大量细菌菌株进行抗生素敏感性测试,提高测试效率和准确度。

以上是微生物检验的一些重点知识点总结,通过对微生物培养、菌种鉴定、抗生素敏感性测试等方面的了解,可以更好地开展微生物检验工作,为临床诊断和治疗提供有力的支持。

《微生物学》实验课考核细则

《微生物学》实验课考核细则

《微生物学》实验课考核细则《微生物学》实验课考核细则为了提高微生物学实验课的教学质量,使同学们更加注重实验课,真正掌握微生物学最基本的实践操作技能,了解微生物学的基本知识,加深理解课堂讲授的某些微生物学理论,特制订实验课考核标准。

一、考核内容1.显微镜的使用与保养2.简单染色法3.革兰氏染色法4.放线菌的形态观察5.霉菌的形态观察6.微生物计数7.培养基的配制与灭菌8.微生物的分离与纯化二、考核要求1.了解实验的目的、原理、方法及主要操作步骤;2.实验小心仔细,全部操作严格按操作规程进行;3.对消耗材料和药品要力求节约,用毕后放回原处;4.实验完毕,将所用仪器抹净、放妥、将实验台收拾整齐,擦净桌面。

三、考核方法从给定的8项考核内容中任抽一题,给15分钟时间准备,然后按要求进行操作。

四、考核成绩总分15分,成绩计入该门课的总分。

五、注意问题1.要当场完成,不能换考题;2.学生单独操作考试,与其他学生分开;3.当场评分。

六、考核细则及评分标准1.显微镜的使用与保养考核要点掌握标准分值显微镜的基本构造各部件的名称及作用1.00 油镜的原理区分三个物镜镜头及油镜作用 2.00 拿取显微镜右手拿镜臂,左手托镜座 1.00 显微镜的摆放及镜检姿势与观察方式镜座距台边约3.00-4.00cm,镜身倾斜度不大;姿势端正;两眼同时睁开,左眼观察,右眼绘图 1.00 光源调节光圈完全开放;聚光镜升至载物台一样高; 1.00 低、高倍镜观察先用低倍镜,再用高倍镜观察,正确升降镜筒,正确使用粗细调节器 2.00 油镜观察正确降下镜头,使油镜浸在香柏油中及正确上升镜筒 4.00 显微镜保养正确擦洗油镜镜头;各部分正确还原 2.00 卫生工作收拾桌面,保持桌面整洁 1.002.简单染色法考核要点掌握标准分值染色的原理一种染色剂染色 2.00 涂片滴加生理盐水不宜过多;无菌操作;涂片均匀 2.00 干燥与固定玻片不能在火焰上烤,以不烫手为宜 1.00 染色标本水平放置,滴加染液,掌握染色时间 2.00 水洗与干燥冲洗水流不宜过大,水由玻片上端流下,不要冲在涂片处,干燥用吸水纸吸干 2.00 镜检与绘图镜检见考核;绘图是否规范 5.00 卫生工作收拾桌面,保持桌面整洁 1.003.革兰氏染色法考核要点掌握标准分值革兰氏染色的原理细胞壁结构和成分的不同 2.00 涂片滴加生理盐水不宜过多;无菌操作;涂片均匀,不可过浓厚 2.00 干燥与固定玻片不能在火焰上烤,以不烫手为宜 1.00 初染、媒染、复染正确滴加染液,掌握染色时间 1.00 脱色正确掌握脱色时间,以流出酒精刚刚不出现紫色为宜 1.00 水洗与干燥冲洗水流不宜过大,水由玻片上端流下,不要冲在涂片处,干燥用吸水纸吸干 1.00 镜检与绘图同上 4.00 结果阳性菌为蓝紫色、阴性为红色 2.00 卫生工作收拾桌面,保持桌面整洁 1.004.放线菌形态观察考核要点掌握标准分值基本原理观察方法 2.00 涂片正确铲取菌苔,压片用力均匀,不得错位 2.00 干燥与固定玻片不能在火焰上烤,以不烫手为宜 2.00 染色正确滴加染液,掌握染色时间 1.00 水洗与干燥冲洗水流不宜过大,水由玻片上端流下,不要冲在涂片处,干燥用吸水纸吸干 2.00 镜检见考核1.00 4.00 结果正确绘出所观察的放线菌形态 1.00 卫生工作收拾桌面,保持桌面整洁 1.005.霉菌的形态观察考核要点掌握标准分值基本原理观察方法 2.00 挑取菌丝挑取少量带有孢子的菌丝,并使其散开 2.00 冲洗孢子掌握滴加酒精与水的顺序 1.00 加乳酚油盖玻片滴加少量乳酚油,盖玻片时不要产生气泡。

食品微生物的检测能力验证

食品微生物的检测能力验证

食品微生物的检测能力验证发表时间:2018-06-15T10:14:15.750Z 来源:《世界复合医学》2018年第04期作者:李晖[导读] 本文就食品当中微生物检验方面能力验证进行了分析。鸡西市疾病预防控制中心 158100【摘要】为了保证实验室在食品当中微生物检验方面有良好准确度,应认识到实验室方面能力验证的重要性,并能结合实验需要以及能力验证标准,制定科学的食品当中微生物检验方面能力验证方案,使实验室检验能力保持在较高水准。本文就食品当中微生物检验方面能力验证进行了分析。【关键词】微生物;食品;检验;能力验证1材料以及方法1.1材料分析(1)实验样品在本次能力验证操作中以6瓶冻干类型细菌混合物为样品,从样品标示方面来看,这些菌类包括了大肠菌群、智贺菌、金葡菌、单增、菌落总数。(2)实验设备在本次试验中还使用了恒温类型的培养箱设备、显微镜设备、生物安全柜设备。(3)实验试剂平板计数琼脂及生化试剂试纸由中国腹泻病控制上海试剂供应研究中心提供;显色平板及革兰染色液由上海科玛嘉微生物技术有限公司提供;沙门菌属诊断血清由兰州生物制品研究所有限责任公司提供;其他试剂按照1.2.1检测方法中各标准的要求配制。1.2实验操作在对各个小项进行检验的时候需要遵照相应的国家标准进行,并保证操作的规范性。(1)对实验样品进行水处理。将实验样品从冰箱中取出之后要注意样品的温度,只有在实验样品温度恢复到室温条件的时候才能进行后续的操作。在实验样品的温度与室温相同的时候,采用无菌开启方式将西林瓶开启,向瓶子中加入体积为4毫升的生理盐水之后在进行水化处理,直到西林瓶中的稀释液体积达到了40毫升。待实验样品完全溶解之后,将稀释液用相应设备吸出,并将其转移到无菌瓶当中。为了保证实验样品完全被利用,还需要使用剩余稀释液对西林瓶进行清洗,并在最后也要将清洗液倒入到无菌瓶当中。另外,为了保证整个处理操作的质量,需要将整个操作过程对时间长度控制在20分钟以内。(2)菌落总数计量检测定量量取水化处理之后的原液25毫升,向待测原液当中加入225毫升经过灭菌处理的生理盐水,在充分混合之后制成10-1规格的稀释液。在量取10-1规格待测液1毫升,并向其中加入9毫升经灭菌处理的生理盐水,制成10-2规格的稀释液,按照这种操作方式不断循环,直至制成了10-4规格的待测液。为了保证操作的精准性以及有效性,每进行一次稀释操作就需要更换一次无菌类型吸管。之后在各个稀释度样液当中各量取一毫升的稀释液,并将这些量取的稀释液放入到2个无菌类型平皿当中,同时也要做好空白对照组的制作。还要及时的使用15毫升已经被冷却到45摄氏度条件的平板琼脂平皿,就培养皿摇匀,待到培养基完全凝固之后将其倒置于培养箱当中,将培养的温度设定为36摄氏度,在培养48小时之后进行培养基的技术操作。(3)大肠菌群计数检测在对大肠菌群进行技术检测的时候采用的了最可能计数方法。在操作中,将经过水化处理过的待测样品参照菌落总数计量检测方法要求,制备成10-1至10-6规格的稀释液。向每个加工完成的稀释液当中注入3管LST肉汤,将每管稀释液当中注入的肉汤量控制为1毫升,将培养温度设定为36摄氏度,将培养时间长度设定为48小时。如果在培养中某个稀释液出现了气体,那么就需要对相应的稀释液进行复发酵处理,并向其中接种BGLB类型肉汤,将培养液的温度设定为36摄氏度,在经过48小时的培养之后,产生气体的为大肠群阳性,同时还要记录好各个稀释度条件下BGLB产生气体的试管数量。(4)金葡菌检测操准确称量25毫升经过水化处理的原液,将这部分原液加入到体积为225毫升、质量分数为百分之7.5的氯化钠和肉汤的混合液当中。将培养的温度设定为36摄氏度,并将培养时间设备设定为20小时。之后其转移到血平板上,将培养温度设定为36摄氏度,将培养时间设定为24小时,在此基础上挑取较为可以的菌落进行鉴定。(5)沙门菌检测操作准确量取体积为25毫升的原液,向其中加入225毫升由BPW制备而成的悬浊液,将培养温度设定为36摄氏度,并将反应温度设定为18小时。在完成了相应的培养之后,分别量取1毫升培养液并且注入到10毫升的TBB以及10毫升的SC当中,将TBB中的反应的温度设定为42摄氏度,培养时间设定为24小时;将SC中的反应温度设定36摄氏度,并将反应时间设定为48小时。在培养完成后选择较为可以的菌落进行鉴定。(6)单增检测操作准确量取体积为25毫升的原液,向其中加入225毫升由LB1制备而成的悬浊液。将培养温度设定为30摄氏度,培养时间设定为24小时,吸取0.1毫升的悬浊液加入到10毫升的LB2当中,将环境温度设定为30摄氏度,在24小时之后,转种到PALCAM当中,设定环境温度为36摄氏度,并培养48小时,选取其中较为可疑的菌群进行鉴定。(7)智贺菌检测操作准确量取体积为25毫升的原液,向其中加入225毫升由智贺菌制成的悬浊液,在环境温度为41.5摄氏度的条件下进行厌氧培养。在20小时之后转种到XLD以及MAC当中,设定环境温度为36摄氏度,在经过24小时的培养后选取其中可疑类型的菌落进行鉴定。2结果2.1菌落总数菌落总数报告结果为1.1×105cfu/m。

微生物检验技术考试要点

微生物检验技术考试要点

微生物检验技术考试要点微生物检验技术考试要点一、考试概述微生物检验技术是医学检验领域的一门重要技术,要求考生掌握微生物检验的基本理论、实验技能和临床应用。

考试内容涉及微生物学基础、细菌学、病毒学、真菌学以及临床微生物学等方面。

考试形式通常为闭卷笔试,时间一般为120分钟,满分为100分。

二、知识点解析1、微生物学基础:考生需要掌握微生物的基本特征、分类和命名,了解微生物在人体内的分布、微生物与外界环境的关系以及微生物的生长繁殖条件等。

2、细菌学:考生需要掌握常见细菌的生物学特性、分类、致病性以及免疫学检验方法等。

3、病毒学:考生需要掌握常见病毒的生物学特性、分类、致病性以及免疫学检验方法等。

4、真菌学:考生需要掌握常见真菌的生物学特性、分类、致病性以及免疫学检验方法等。

5、临床微生物学:考生需要了解常见感染性疾病的病原微生物、临床表现、诊断与鉴别诊断以及治疗原则等。

三、考试要点1、微生物学基础:掌握微生物的基本特征、分类和命名,了解微生物与外界环境的关系以及微生物的生长繁殖条件等。

2、细菌学:掌握常见细菌的生物学特性、分类、致病性以及免疫学检验方法等。

3、病毒学:掌握常见病毒的生物学特性、分类、致病性以及免疫学检验方法等。

4、真菌学:掌握常见真菌的生物学特性、分类、致病性以及免疫学检验方法等。

5、临床微生物学:了解常见感染性疾病的病原微生物、临床表现、诊断与鉴别诊断以及治疗原则等。

四、复习方法1、理解基本概念:考生需要对微生物学的基本概念进行深入理解,比如微生物的分类、命名、生长繁殖条件等。

2、总结归纳:考生可以将相关知识点进行归纳总结,形成自己的知识框架,便于记忆和理解。

3、实践操作:微生物检验技术是一门实践性很强的学科,考生需要进行实验操作,掌握实验技能,加深对理论知识的理解。

4、练习题训练:多做练习题可以加深对知识点的理解和记忆,同时可以熟悉考试形式和题型,提高应试能力。

五、难点解析1、微生物的分类和命名:微生物的分类和命名比较复杂,需要考生对微生物的生物学特性有一定的了解,才能正确分类和命名。

产品质量检测中的微生物测试要点

产品质量检测中的微生物测试要点

产品质量检测中的微生物测试要点产品质量检测是确保产品符合相关标准和要求的重要环节。

在许多产品中,微生物测试是其中一个不可或缺的部分。

微生物测试可以确定产品是否存在细菌、霉菌和其他微生物的污染,从而保障产品的安全性和稳定性。

在产品质量控制中,微生物测试有一些关键要点需要被重视。

首先,完整的取样过程是微生物测试的关键。

取样过程应该确保能够充分反映产品批次的整体质量。

不同产品的取样方法可能会有所不同。

对于液体产品,可以使用取样管或带有无菌针头的器械进行取样。

对于固体产品,应该在不同位置进行取样,以避免取样偏差。

另外,取样过程应该严格遵循卫生标准,使用无菌技术和器械,以防止外部细菌的污染。

其次,适当的培养基选择对于微生物测试至关重要。

不同的微生物可能需要不同的培养基。

一般来说,培养基应该含有营养物质和适当的pH值,以保证微生物的生长和繁殖。

在选择培养基时,还应考虑产品性质,例如pH、含水量等因素,以确保培养基的适用性。

此外,为了检测不同类型的细菌和霉菌,可以选择含有抗生素或抗真菌剂的培养基,以抑制或选择性培养目标微生物。

第三,合适的培养条件是微生物测试的关键之一。

细菌和霉菌的生长需要适宜的温度和湿度条件。

一般来说,微生物测试应该在适宜的温度下进行,以保证微生物的正常生长和繁殖。

对于不同类型的微生物,可能有不同的适宜温度范围。

此外,在培养过程中,还应注意保持适当的湿度,以避免培养基的干燥或过湿。

此外,合适的培养时间也是微生物测试中必须要控制的因素。

培养时间的长短会对结果产生影响。

过短的培养时间可能导致微生物的数量无法达到检测的标准,从而得到虚假阴性结果。

而过长的培养时间可能导致微生物数量过多,使结果不准确。

因此,在微生物测试中,应该确定适当的培养时间,以确保结果准确可靠。

最后,准确的结果解读是微生物测试中的重要环节。

不同的微生物可能有不同的生长特点和表现形式。

在结果解读时,应该根据各种细菌和霉菌的特性,结合产品的性质和要求,判断测试结果是否合格。

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微生物能力验证能力考核要点
一、要树立科学必须真实的观念,实验态度要端正。

要怀着一颗为了出具真实、准确,可信数据而敬畏的心去申请能力验证。

实验要求科学严谨,实验要预先充分练习和实践。

能力验证是对实验室综合实验水平(人员,设备,环境等多因素)的评价。

首先要选好实验项目,找到与之配套的方法,进行充分的方法验证,从检测员能力,仪器设备性能,校检结果是否能满足实验需要,实验检测多次实验,检测环境是否进行了充分的考虑,实验确认好实验项目,认真学习标准,理解标准,并做到标准所规范的步骤,并对自己实验有了一定的信心后再去申请能力验证为宜。

举例:某实验室未经过充分实验方法确认,实验平时做的也少,直接申请了能力验证。

实验过程生疏,照方抓药,手忙脚乱,造成稀释梯度不够,平板干燥,菌落蔓延,无法出具具体数值,实验失败。

二、实验室收到盲样菌株标本后,首先应做的事情。

1、检查标本的性状和确认包装情况,然后按照要求去能力验证网站提交收到样品情况。

2、仔细阅读参指导书,包括标本如何保存的信息,进行实验室内部工作分配,明确工作任务和要求。

3、实验前应严格按照作业指导书的要求制订检验流程,认真做好准备工作,包括实验中需要使用的器皿,须提前做好清洁灭菌。

三、能力验证样品处理。

1、定量项目,西林瓶内样品不可分割,应全部用于检测。

一般参考书指导的是加40mL稀释液制成40mL样品。

2、定量项目样品稀释。

指导书标明了稀释范围的,在稀释范围左右各加1个稀释度进行;书上没有稀释范围的,多做稀释倍数,选择合适的稀释倍数计数(一般可稀释至10-8)。

3、定量项目,除了要多做稀释倍数外,同时同一稀释度要多倒几皿,从原理上来讲,检测过程属于随机抽样检查,平板越多,数据越接近真值。

考虑性价比,又不可能一直疯狂一个稀释度很多平板,所以能力验证时候多倒几皿,求好结果。

4、定性项目有一些重要步骤。

a、增菌及分离步骤尤其重要。

选择合适的增菌液和分离用培养基对目标菌的检出非常关键,选择两种以上的增菌液和分离用培养基对菌株作直接分离和增菌后分离。

b、划线分离十分重要,要把增菌液中的目标菌尽量多的表达出来,要分出单个菌落并尽可能多挑取可疑菌落,确保分离到目标菌。

c、生化试验和血清学试验以营养琼脂平板上的纯培养细菌为好。

四、实验过程一定要做阴阳对照,全程空白对照。

再厉害的高手也有失手和看走眼的时候,所以阴阳对照就是一面镜子。

对于一些荧光染色后进行判读的实验显得尤为重要。

这里扫盲一个误区,定量计数测菌数时,我们会认为空白就是直接取1mL 无菌水然后加入到平板里,然后混菌倒皿,这是错误的。

因为这样做的话,只能模拟证明稀释后倒平板这一步有没有污染。

而无法证明从样品称取-样品稀释时候的污染质控情况。

所以要做全程空白对照。

全程空白的含义就是把无菌液当成样品,然后走一遍实验过程。

如果严格这么做的话,又会走向另一个极端,所以全程空白只从取样开始至稀释10-1做了简化,而不做后续稀释空白样的混菌实验。

在有些其他实验时候,会有样品空白以及稀释液空白,比如大气环境NOx 和SO2的检测,有兴趣的可以去看看,对于全程空白的意义理解有更好的帮助。

五、培养基方面需要注意的地方。

1、培养基配制充分混匀后再灭菌。

正确做法是用一部分水搅拌均匀后,再加入剩余水量,混匀后灭菌或分装。

2、混菌法倒皿要充分混匀。

培养基倒完要左5圈右5圈(混匀速度一定要慢,目的是——避免培养基波动到二皿接触的缝隙部分造成后续污染),找较水平位置冷却凝固。

3、培养基要不要覆盖问题。

覆盖的目的是为了阻止活菌在培养基表层通过鞭毛移动,造成片状生长,无法计数这一不利现象的发生。

这里可以发挥主观能动性-对于不运动的菌,可以不覆盖,对于运动的菌覆盖。

总结一下:
a长期检测同一种样品,不覆盖并无蔓延现象,不覆盖;长期检测蔓延选择了覆盖,一直覆盖。

b未知样品,进行覆盖和不覆盖的比对实验,然后决定以后同样的样品是否需要覆盖。

养成经验。

c能力验证实验,覆盖和不覆盖的都做,不要吝惜那么一点点培养基或耗材,毕竟能力验证实验做的漂亮才是实验室(是室而不是人!)能力的综合体现。

4、培养过程防止平皿干燥。

培养过程中培养基可以倒的适当厚一些,比如25mL。

培养箱底部接一个不锈钢盆,装上足量无菌水(没有就去买几瓶哇哈哈怡宝什么的水倒里面)。

5、培养完成要保留实验平皿和其他相关材料。

作为能力验证,原始记录及实验报告还没出具完成,各种材料还是保留至数据出具后较好,便于出现问题现查原因,马上补救。

题外话:很多检测员等结果出了问题然后到网络上来求救,结果一问平皿已经洗掉了,那就不知道是什么状况了。

有时候你问她她还会振振有词的讲:10-1,10-2都蔓延了,不洗掉干嘛,10-5,10-6没长菌,不洗掉干嘛?我当时真的无语,也不想多说话就没继续讲了。

现在我回答一下这个问题:我要你一套完整梯度浓度的平皿,可以看出你10倍稀释梯度是不是稳定,还有蔓延是个什么状况,到底有多少,是一片还是局部还是很小一部分,然后根据整体数据估算结果(当然实验做成这样也基本算失败了,因为实验没有做到你可控的范围),是补救的一种(并不可取,属于垂死挣扎)。

定量实验时,当天做完的稀释样品也要放冰箱里,虽然实验要求不能复检或重复检测,但作为微生物专业你是知道菌放在2-8℃下并不会长多少,如果第二天一看数据有蔓延或疑问,马上再做一次,这样也应该在误差范围内出数。

6、实验培养过程勤观察。

微生物培养过程一般需要几小时到几十小时,要利用这段时间观察培养箱及菌生长情况,比如温度是否稳定,培养室内湿度如何等等,多思多看,准备预案。

方有可能得到与盲样一致的实验结果。

原始记录应有条理、思路清晰,完整准确地记录菌株鉴定检验的全过程,原始记录要包含时间、试验现象、试验结果三个要素,方便试验出现问题的查找。

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