实验一 红细胞和白细胞计数

二、白细胞计数
3.器材: 显微镜、改良计数板、试管、微量吸管、 3.器材: 显微镜、改良计数板、试管、微量吸管、 器材 移液管、 移液管、洗耳球 4.试剂: 白细胞稀释液 4.试剂: 试剂 5.标本 EDTA盐抗凝血 标本: 5.标本: EDTA盐抗凝血
5.操作 5.操作
（1）加稀释液：用吸管准确吸取白细胞稀释液0.38ml 加稀释液：用吸管准确吸取白细胞稀释液0.38ml 于小试管中。 于小试管中。 （2）加血：用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血20μl，擦 加血：用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血20μl， 20μl 去管外余血，轻轻加至白细胞稀释液底部， 去管外余血，轻轻加至白细胞稀释液底部，再轻吸上 清液清洗吸管2～3次，混匀。 清液清洗吸管2 混匀。 （3）充池：混匀后用微量吸管将完全变为棕褐色的细胞 充池： 悬液冲入计数池，室温下平放3 分钟， 悬液冲入计数池，室温下平放3～5分钟，待细胞下沉 后于显微镜下计数。 后于显微镜下计数。 （4）计数：低倍镜依次计数4个大方格内白细胞数 计数：低倍镜依次计数4 （5）计算：WBC/L=N/4×10×20×106=N/20×109/L 计算：WBC/L=N/4×10×20× =N/20×
6.注意事项 6.注意事项
(1)在充池时要一次完成，不能产生满溢、 (1)在充池时要一次完成，不能产生满溢、气泡 在充池时要一次完成 或充池不足及充液后玻片移动的现象。 或充池不足及充液后玻片移动的现象。 (2)白细胞在计数池中若分布不均，大方格间细 (2)白细胞在计数池中若分布不均， 白细胞在计数池中若分布不均 胞计数相差一般不超过10% 10%。 胞计数相差一般不超过10%。 (3)白细胞数量过多时， (3)白细胞数量过多时，可采取加大稀释倍数的 白细胞数量过多时 方法。 方法。 (4)白细胞稀释液不能破坏有核红细胞， (4)白细胞稀释液不能破坏有核红细胞，它可使 白细胞稀释液不能破坏有核红细胞 白细胞计数偏高，此时应计算白细胞校正值。 白细胞计数偏高，此时应计算白细胞校正值。
二、白细胞计数
1.目的： 掌握显微镜白细胞计数的方法。 目的： 掌握显微镜白细胞计数的方法。 目的 2.原理： 用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数， 原理： 用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数， 原理 同时破坏溶解红细胞。 同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液冲入计数 池后，在显微镜下计数一定体积内的白细胞数， 池后，在显微镜下计数一定体积内的白细胞数， 经换算求出每升血液中的白细胞数。 经换算求出每升血液中的白细胞数。
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一、红细胞计数
（一）器材： 显微镜、改良计数板、试管、 器材： 显微镜、改良计数板、试管、
微量吸管、移液管、 微量吸管、移液管、洗耳球
（二）试剂： 生理盐水 试剂： 标本： EDTA盐抗凝血 （三）标本： EDTA盐抗凝血
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（四）操作
1.加稀释液: 取小试管1 加稀释液2.0ml 2.0ml。 1.加稀释液: 取小试管1支，加稀释液2.0ml。 加稀释液 2.加血： 用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血10μl 10μl， 2.加血： 用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血10μl， 加血 擦去管外余血，轻轻加至红细胞稀释液底部， 擦去管外余血，轻轻加至红细胞稀释液底部，再轻 吸上清液清洗吸管2 立即混匀。 吸上清液清洗吸管2～3次，立即混匀。 3.充池： 3.充池： 混匀后用微量吸管将红细胞悬液冲入计数 充池 室温下平放3 分钟， 池，室温下平放3～5分钟，待细胞下沉后于显微镜 下计数。 下计数。 4.计数： 用高倍镜依次计数中央大方格内4 4.计数： 用高倍镜依次计数中央大方格内4角和正 计数 个中方格内的红细胞数。 中5个中方格内的红细胞数。 5.计算： RBC/L=N×25/5×10×201× 5.计算： RBC/L=N×25/5×10×201×106 计算 =N/100× ≈N×1010 =N/100×1012
红细胞和白细胞计数
临检教研室
一、红细胞计数
掌握显微镜手工计数的方法。 目的 掌握显微镜手工计数的方法。 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数， 原理 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，冲 入计数池后， 入计数池后，在显微镜下计数一定体积内的红 细胞数量，经换算求出每升血液中的红细胞数。 细胞数量，经换算求出每升血液中的红细胞数。
（五）注意事项
1. 将红细胞稀释液充入计数池时要一次完 不能产生满溢、气泡或充池不足的现象。 成，不能产生满溢、气泡或充池不足的现象。 红细胞在计数池中若分布不均， 2. 红细胞在计数池中若分布不均，每个中方 格之间相差超过20个以上时要重新充池计数。 20个以上时要重新充池计数 格之间相差超过20个以上时要重新充池计数。 正常参考区间范围内， 正常参考区间范围内，2次红细胞计数相差不 得超过5% 5%。 得超过5%。