(瘦肉精)盐酸克伦特罗的理化性质及其主要危害

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第1章盐酸克伦特罗的理化性质及其主要危害

1.1 盐酸克伦特罗的理化性质

盐酸克伦特罗又称“瘦肉精”，是一种从天然儿茶酚胺衍生合成的化合物，化学名称为羟甲叔丁肾上腺素分子式为C12 H19 C13 N20，相对分子质量为313．5，熔点为174 ～175.5 ℃，其制剂常用盐酸盐，又称为盐酸双氯醇胺氨双氯醇胺呈白色或类白色的结晶粉末状，熔点161℃，无臭，味苦，化学性质稳定，溶于水、乙醇，微溶于丙酮。不溶于乙醚，加热到172 ℃才能分解，盐酸克伦特罗的化学结构稳定，在体内不会被破坏分解，能耐受100 ℃高温，126 ℃油煎5min才能破坏减半，常规烹调对盐酸克伦特罗残留起不到破坏作用。

1.2盐酸克伦特罗的主要危害

对人的危害：人食用超过盐酸克伦特罗残留限量的肉及其制品后，会发生急性中毒通常表现为肌肉振颤、心慌、战栗、头疼、恶心、呕吐等症状，特别是原有心律失常的病例会引起心室早搏，ST段与T波幅压低，还可引起代谢紊乱，产生酮体，对糖尿病病人可发生酮中毒或酸中毒，对心律失常、高血压、青光眼、糖尿病、甲状腺功能亢进、前列腺肥大等疾病的患者更容易产生急性中毒症状，严重的可导致死亡，因食用猪肉中残留有盐酸克伦特罗的急性中毒病人，临床症状以交感神经系、统兴奋性增高为主要表现，并在患者血尿中检出较高含量的盐酸克伦特罗。人食用残留有盐酸克伦特罗的畜产品后表现为肌肉兴奋性增强，有的人中毒后表现为肌肉震颤，重症者腓肠肌痉挛；同时引起心肌收缩加强，心率加快；对高血压患者危害更大，盐酸克伦特罗分解脂肪成游离脂肪酸进入血液，使血管壁弹性降低，引起血压升高，微循环血管膨胀，压迫刺激周围的神经，引起头痛头晕；引起人内脏横纹肌和平滑肌+兴奋性增强，表现为呕吐和腹泻。盐酸克伦特罗中毒的患者群中，对患心、脑血管疾病、糖尿病、甲状腺机能亢进、青光眼、前列腺肥大者可造成威胁生命的恶果。孕妇中毒又可导致癌变、胎儿致畸的严重危害性。

对动物的危害:虽然盐酸克伦特罗的毒性并不很强，小鼠、豚鼠静脉注射的半数

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45mg/kg，因而极有可能通过食物链使人体中毒而对健康构成威胁。盐酸克伦特罗的短期毒性以心肌损伤为主要特征，染毒的小鼠心肌纤维排列紊乱，部分肌纤维断裂，心血管扩张和血管周隙增大。心肌细胞横纹模糊，颗粒变性等盐酸克伦特罗可使大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活力显著降低，丙二醛含量明显升高，破坏机体氧化与抗氧化的动态平衡，并对胸腺和脾脏等免疫器官产生不同程度的病理损伤。

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第2章盐酸克伦特罗主要检测方法的研究进展

2.1高效液相色谱法（HPLC）

β-肾上腺素能激动剂分子可与C18或C8固定相分子相互作用，所以反相柱常应用于HPLC技术中检测β-激动剂类物质。HPLC适合测定热不稳定和强极性的β-激动剂及其代谢产物，而且可以与柱前提取、纯化及柱后荧光衍生化反应和质谱（MS）等系统联用，容易实现分析过程的自动化。

运用反相高效液相色谱法测定猪肝中的盐酸克伦特罗，在243nm的检测波长下，用waters-alliance高效液相色谱系统进行检测[1]，流动相为甲醇和磷酸二氢钠水溶液（35+65），最后再根据保留时间 RT 值初步定性，扫描光谱进一步确证，根据试样峰高或峰面积与标准峰高或峰面积比较进行定量。当试样取样量为2.0 g时，该法的最低检出浓度为0.25 mg/kg 。将样品匀浆后用盐酸溶液超声加热提取，再用异丙醇、乙酸乙醋（40∶60）萃取，有机相浓缩后，用弱阳离子交换柱进行分离用乙醉-氨（98∶2）溶液洗脱，洗脱液以流动相（甲醇和0.01mol/LKCl溶液以45：55的比例配合）定容后，用美国Agilent1100 高效液相色谱仪系列进行检测，检测限达0.5μg/kg 。运用高效液相色谱法测定猪组织中盐酸克伦特罗残留量[2]，采用了Dianon sil C18 200×4.6mm 的色谱柱，流动相为 0.01 mol/L NaH2PO4 ：甲醇（67∶33），二极管阵列检测器，检测波长为243nm采用外标法，以保留时间定性，并以盐酸克伦特罗的特征紫外吸收光谱对照样品的扫描光谱进行确认，然后根据样品峰面积计算盐酸克伦特罗含量。还有人先用C18二氧化硅硅胶柱净化，用HPLC分离，再结合HPLC/ELISA 检测、确证。

目前，中国已将HPLC法作为检测盐酸克伦特罗残留的半确证性方法，最低检测限范围为1~15ng/g，其优点是检测精确度高，而且假阳性率低；缺点是检测过程繁琐、检测时间长，需贵重仪器、难于操作、费用昂贵。近年来，液质联用技术也被用来检测瘦肉精，这种方法的准确度较高，检测灵敏度也高。

2.2 气相色谱-质谱法（GC-MS）

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GC-MS法能在多种残留物同时存在的情况下对某种特定的残留物进行定性、定量分析，而且具有较高的灵敏度。用GC-MS法检测牛毛中盐酸克伦特罗的残留[3]，最低检测限为5ng/g。GC-MS法与HPLC法相比，检测灵敏度更高，假阳性率更低。GC-MS法的缺点同HPLC相似。

2.3免疫分析法（IA）

免疫分析法都有固定的试剂盒，因此检测结果便于把握。检测灵敏度高。检测限可达到0.5ng/ml甚至更低。而且样品前处理简单或不需要前处理，成本低，一次可以检测数百份饲料样品或十余份肝脏、肉品及尿样等。有放射免疫分析法（RIA）和酶联免疫吸附测定法（ELISA）。但此类方法的缺点是仍不能实现现场检测，假阳性率高。

2.3.1 酶联免疫分析

目前，检测盐酸克伦特罗较高效的免疫分析技术是酶联免疫吸附测定法（ELISA）[4]。该方法检测下限一般为1.0 μg/L（尿样）、0.5 μg/kg（组织）。使用该法，酶联免疫吸附测定法检测限尿液为0.3～1.0 ng/mL，组织为0.2～1.0 ng/mg。国内外有许多检测试剂盒，但质量不一。酶联免疫吸附测定法作为盐酸克伦特罗残留量的筛选方法具有操作简便、准确、投资小、成本低速度快、灵敏度高、仪器设备简单等优点，适合对活体动物作大批量样品的快速分析；缺点是仍不能实现现场检测且该法检测结果假阳性率较高，尤其当样品中含有抗生素或磺胺类药物时，会使假阳性率进一步提高。

2.3.2 放射免疫分析技术

用于β-2 肾上腺素能激动剂的放射免疫测定程序和动物组织中盐酸克伦特罗的药

理学研究。建立更为特异的放射免疫方法，其中抗盐酸克伦特罗的抗体对其他β-2 肾上腺素能激动剂的交叉反应小于 10%，最低检测限可达到0.5ng/g。目前国外已生产出测定盐酸克伦特罗的试剂盒产品，还建立了类似放射免疫分析法的放射受体分析法，这是用受体代替抗体结合盐酸克伦特罗，检测限可达到2.4 ng/g。放射免疫分析技术虽然具有特异性强、灵敏度高、操作简便、快速、易标准化、技术成熟等优点。