高效液相色谱仪操作规程-岛津

1 技术参数

LC-20AT低压梯度泵

梯度方式：低压混合

混合溶剂数：4液

混合浓度准确度：1%以下

SIL-20AC自动进样器：

进样量：0.1μL~100μL

进样量准确度：1%以下

进样量精密度：RSD：0.3%以下（10mL 进样时指定条件下）

2 适用范围

适用于药物的分离、定性、定量分析

3 操作步骤

3.1 仪器组成：由DGU-20A5脱气机、LC-20AT低压梯度泵、SIL-20AC自动进样器、CTO-20A 柱温箱、SPD-20A紫外-可见检测器、RF-20A荧光检测器、CBM-20A系统控制器、LC Solution 工作站等组成。

3.2 开机

①在开机之前，根据所做样品的方法要求，准备好所用流动相，标样及样品。流动相抽滤后超声脱气15分钟，标样和样品0.45um膜过滤。

②接通电源，依次开启A泵、B泵、柱温箱、自动进样器、检测器、系统控制器，待泵和检测器自检结束后，打开电脑显示器、主机，启动工作站软件。

③泵排空操作：打开LC-20AT泵排空阀（逆时针90度以上），按Purge键，泵开始排空运行。检查流动相入口Teflon管路没有气泡后，再按Purge键停止排空。

自动进样器排气操作：按Purge键，自动进样器开始排气，系统默认排气时间为25min，且自动进样器排气过程中可同时进行其他操作。（除进样外）

压力调零：按LC-20ATvp泵Func键选择CONTROL 项，按FUNC键直至屏幕显示 ***ml ZERO ADJ项，按Enter键，再按CE键，即完成调零。然后关紧排空阀（顺时针旋紧）。

④再双击Operation∈Analysis 1~4进入实时分析窗口：（根据不同的检测器选择）

在开机画面中，User ID选中Admin，不需输入Password，点击OK（可听到峰鸣一声）＊在下面操作中A∈B表示在A菜单下选择B，以此类推。选中□表示在□中打√号。

3.3参数设置

①在左侧助手栏给出了引导顺序操作的图标，自上而下顺序执行即可：（可以跳过执行）●System configuration系统配置（第一次安装或更换检测器时配置，通常跳过不操作）●System Check编辑仪器检查参数：并且RUN运行检查。通常不操作（跳过）

●点击Data acquisition进入采集数据编辑方法界面

点击Instrument Parameter进入仪器参数设置界面：

⊙选中Normal（通用简单）或Advanced（高级详细）项，分别设定Pumps泵参数，Oven柱箱参数，Detecter检测器参数，Controller系统控制器参数，Time Program时间程序参数等。仪器配置不同，控制单元项的数目多少不同。

⊙Pumps泵参数：Mode控制方式，Flow流速，B，C，D C onc各项浓度，P Max最大压力⊙Oven柱箱参数：Oven设定温度，T Max最大保护温度

⊙Detecter检测器参数：Cell设定池温。Wavelength设定波长。

⊙Controller系统控制器参数：

⊙Data acquisition选中Acquisition Time后，设置分析时间，等等

⊙LC Time Prog时间程序参数：编辑泵梯度洗脱程序，也可以控制柱箱，检测器，等等。

●点击Method∈Data Analysis Parameter编辑积分参数：

设置 Width峰宽，Slope斜率，Min Area最小峰面积等等。新建方法推荐使缺省值，待分析完样品后再设置此项参数，得到优化的色谱数据结果后，将参数保存在当前方法中。

●保存方法：点击File∈Save Method as

起文件名*****保存后，该方法即作为当前运行的方法。

下载方法：点击Down Load 键，向仪器传送参数。

3.4运行方法：

点击图标（Instrument On/Off 系统开/关）

系统开始运行，检查各单元参数应与方法设定一致。等待系统平衡。一般情况下，由于流动相不同，交换平衡时间不定。可以观察Detecter检测器吸收变化,如果吸收值稳定不变，即认为接近平衡，可以调零等待，确认不变后，准备进样分析。

可以通过改变衰减⊕或⊕予览基线观察基线变化，待基线平稳，准备进样操作。

3.5进样分析：

⊙单针进样分析：点击Single Start图标：

编辑样品参数：Sample ID样品信息，Method Name 方法文件名，Data Path 数据存储路径，Data Name 数据文件名，Vial样品瓶号(无)，Tray#架号(无)，Injection进样量等。点击OK后，开始进样操作。（★重复单针进样，重复执行此步骤即可★）每个样到时间分析结束，根据方法中的积分参数，所有色谱数据会自动进行积分处理。

⊙批量分析：点击批处理图标 Batch Processing，点击New新建批处理文件，点击向导Wizard，设定新建、文件方法、试样开始位置、进样量，点击下一步；设定试样名、试样瓶数、进样次数，并选择是否打印报告后，点击完成。待系统平衡，基线稳定后，点击批处理开始图标Batch start即可。

需变更在执行中的分析时间时，点击分析时间变更图标，设定数值。

需分析中止时，点击中止图标。

需批处理分析暂停时点击暂停/重开图标，可对批处理表进行变更，点击暂停/重开图标（批处理实时分析重新开始）。

3.6报告预览和打印：

⊙点击Top 返回上级引导操作栏。

点击Post Run Analysis 进入数据后处理界面：

点击report 进入报告界面：

点击report format进入格式界面：

调入报告格式文件，也可以自己编辑报告格式

然后点击Data打开数据文件，将左侧数据文件拖入右侧报告栏即可。

关于报告格式，可以通过内容选择图标，在报告中确定位置后，添加即可。