BIOTEK 50TMTS洗板机作业指导书
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疾病控制中心作业指导书文件编号:
标题:BIOTEK 50TM TS洗板机第 1 页共 2 页
1.适用范围:本仪器用于使用ELISA法检测酶标板的洗涤。
2.技术特性
2.1使用环境:要求桌面平整、无震动。
2.2主要技术参数:孔板类型: 24, 96孔板和板条
震荡:自定义震荡、强度时间,最高30分钟,5种强度可选
浸泡时间:自定义,最高至30分钟
分离方式:磁珠分离,真空抽滤(依型号而定)
操作界面: 4.3”彩色LCD 触摸屏
机载软件: 75个客户定义程序
快速菜单
创建或编辑用户程序
运行机载程序或导入LHCTM 软件程序
软件:可选Liquid Handling Control TM软件用于电脑操作
二、操作方法
1 - 打开仪器旁边的电源,仪器自动进行初始化和系统自检。
2 - 自检结束后,仪器自动显示Main Menu(主界面)。
3 - 洗板前,先进行冲洗程序,清洗管道,方法为:以配好的洗液,运行quick程序,进行清洗。建议重复运行三次。
4 - 如需新建一个Wash(洗板)程序,依次按下Protocol Definition(定义)→CREATE(新建)→Wash (洗板)进行定义。出现NAME(名称),输入洗板程序的名称,按ENTER 键,出现Method(方式),详见第6 条;和Dispense(分液)和Aspiration(吸液),一般无需更改,如需变动,参照具体说明。
例如建立一个HIV洗板程序:开机→MAIN→Protocol→Create→name(HIV) →SAVE→Add a step(wash) →Add a step(aspirate) →exit(home)。
5 - 在Method(方式)选项中,设定以下参数:
选择动作
Number of Cycles(洗板次数)设置洗板循环次数,1~10 次
Wash Strip(洗板条数)定义洗板Strip(条)
Soak/Shake(浸泡/振荡)如果要浸泡就选择Yes,进一步编辑如下选项;否则选择No,
全部编辑完全。
Soak Duration (浸泡时间)浸泡时间范围0~600 秒,一般选择30 或60 秒
Shake Before Soak?(浸泡前选择是否在浸泡前震荡,如选择YES,则需进一步设定
疾病控制中心作业指导书文件编号:
标题:BIOTEK 50TM TS洗板机第 2 页共 2 页是否振荡?)下列参数,否则选择No 完成洗板程序设置。
Shake Duration(振荡时间)设置震荡时间
Shake Intensity(振荡强度)设定酶标板震荡强度,1 最弱,5 最强
Prime After Soak?(浸泡后是否灌注?)选择是否在浸泡完成后填充液体
Prime V olume(灌注体积)选择填充量
Prime Flow Rate(灌注流速)选择真空泵抽吸速度。1 最慢,9 最快
全部设定完毕后,按Main Menu(主菜单)保存,显示OK to save the Program, 选择YES,保存程序即可。
6 - 按“Main”回到主界面下,运行HIV程序,开机→MAIN→HIV→WASH Strip→START。
9 - 洗板结束,按Main Menu 按钮回到主界面,运行quick 程序,进行清洗。重复运行三次。
三、注意事项
1 - 检查洗液瓶,洗液瓶的洗液要足够多,最好超过三分之二,防止在洗板中途用尽。快用尽时,可拧开瓶盖,添加洗液,但是要注意,洗瓶内吸管不能离开液面,防止进气。
2 - 每天实验结束时,倒空废液,防止污染。
6.洗板机的自检自校
6.1机械检查:开机,置96孔酶标板于洗板机上按仪器操作规程(SOP)进行洗板,检查洗板机管道是否畅通,有无漏液现象,检查程序是否运转正常,洗涤时各孔与相应冲洗头对位是否良好,负压是否正常。
6.2 吸光度检查:酶标板,于每孔加入100ul蒸馏水。于第一列每孔加入100ul 100mg/ml浓度的重铬酸钾溶液100ul ,混匀后吸100ul置下一列各孔中,如此倍比稀释至1:2048,稀释度依次为1:2、1:4、 1:8、1:16、1:32、1:64、1:128、1:256、1:512、1:1024、1:2048,置稀释好的96孔板于酶标仪上,在450nm下测吸光度OD值。将此96孔板置洗板机上常规洗板后,每孔加入100ul蒸馏水,再次置于酶标仪上于450nm波长下测吸光度OD值。比较洗板前后相应各孔吸光度值变化情况,判断洗板机工作是否良好。