蛋白质晶体的生长冻存及装载

晶体装载 – 取晶体
晶体装载 – 取晶体
晶体装载 – 装晶体
And you pray again... But...
～8Å
在96孔板中培养得到 的β2肾上腺素G蛋白 偶联受体的晶体
晶体被装载到30或 50μm孔径的MiTeGen MicroMounts loop中 微晶衍射图，由27颗微晶得 到了一套完整的2.4Å的数据
Cherezov et al., Science. 2007 318:1258-1265
谢谢！
晶体冻存 – 材料
空气罐
Cryo Tong Tab
Loop
夹子
冻存架 处理晶体工具 晶体
晶体冻存 – 准备液氮
晶体冻存 – 准备夹子
晶体冻存 – 试保护剂（液氮法）
晶体冻存 – 试保护剂（液氮法）
晶体冻存 – 捞晶体
晶体冻存 – 捞晶体
晶体冻存 – 冻晶体
晶体冻存 – 存晶体
晶体装载 – 原理
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A. McPherson, CHSL 2008
晶体培养 – 材料
池液
真空硅脂 蛋白样品
硅化玻片 16孔板
拭镜布
晶体培养 – 真空硅脂
晶体培养 – 加入池液
晶体培养 – 点蛋白溶液
晶体培养 – 混和池液
God, plz give me a crystal so that I can graduate...
• • • • • Direct mixing to immediately create a supersaturated condition (Batch Method) Alter temperature Alter salt concentration (salting in or out) Alter pH Add a ligand that changes the solubility of the macromolecule Alteration of the dielectric of the medium Direct removal of water (evaporation) Addition of a polymer that produces volume exclusion Addition of a cross bridging agent Concentration of the macromolecule Removal of a solubilizing agent
技术交流
蛋白质晶体的生长、冻存及装载
晶体培养
A. McPherson, CHSL 2008
晶体培养 – 原理
A. McPherson, CHSL 2008
晶体培养 – 原理
A. McPherson, CHSL 2008
晶体培养 – 原理
A. McPherson, CHSL 2008
晶体培养 – 原理
Bernhard Rupp, Crystal 101
晶体装载 – 衍射仪
液氮系统
发射器 准直镜
探 测 屏 测角头
照明灯
晶体装载 – 衍射仪
液氮气
X射线
底座
X、Y轴
Z轴
பைடு நூலகம்
旋转
晶体装载 – 衍射仪（氦气）
晶体装载 – 衍射仪（控制面板）
晶体装载 – 衍射仪
• 记住三点
–检查氦气 –开门摁“DOOR” –别碰紧急按钮，除非很 紧急