建立细胞培养室需购买有关仪器及设备的申请报告

关于建立细胞培养室需购置有关仪器及设备的申请报告由于需建立细胞培养室进行手足口病抗体筛选工作，现将建立细胞培养室需购买仪器设备列表如下(仪器设备的用途见附件)，望能得以批准，谢谢！

仪器设备名称购买数量备注

常用的基本设备仪器

显微镜 1 倒置显微镜

培养箱 1

CO

2

培养箱，带盛CO

2

瓶

子

干燥箱 1

水纯化装置 1 超纯水纯化装置

冰箱 1 低温冰箱（-20℃）

细胞冷冻储存器 2 液氮罐50升、25升各一

天平 1

消毒器 1 手持式消毒器

滤器 1

培养

用器

皿

培养器皿若干

包括培养瓶，培养皿，

多孔培养板等

培养操作其他有关器

皿

若干

包括储液瓶、吸管、加

样器等

器械若干手术剪等超低温冰箱（-85℃） 1

酸缸 1

漩涡振荡器 1

水平振荡器 1

消毒柜 1

低温离心机 1 转速大于1万转

水浴锅 2

空调 4 可从老厂搬用

2011-8-08

附件：

细胞培养室主要仪器及设备的用途

1. 常用的基本设备

（1）仪器：

a）显微镜：倒置显微镜——是组织细胞培养室所必需的日常工作常规使用设备之一，便于掌握细胞的生长情况并观察有无污染等。若有条件，尚可配置带有照相系统的高质量相差显微镜、解剖显微镜、荧光显微镜、录像系统或缩时电影拍摄装置等，以便随时观察、记录、摄影细胞生长情况。

b）培养箱：体外培养的细胞和体内细胞一样，需要在恒定的温度下生存，大多数情况下，最适温度是37℃，温差变化一般不应超过±0.5℃，细胞在温度升高2℃时，持续数小时即不能耐受，40℃以上将很快死亡。因此需要有能控制温度的培养箱，如具有较高灵敏度的恒温培养箱及CO2培养箱。

恒温培养箱——应选隔水式或晶体管自控温培养箱，此类培养箱灵敏度高，温度控制较稳定。一般的恒温培养箱价格较便宜，其缺点是只宜于作密闭式培养。

CO2培养箱——目前多数的细胞培养室已广泛使用。CO2培养箱的优点是能够提供进行细胞培养时所需要的一定量的CO2（常用浓度为5％），易于使培养液的pH保持稳定，适用于开放或半开放培养。培养细胞的器皿可用培养皿、培养板或培养瓶；当使用培养瓶时，可将瓶盖略微旋松，使培养瓶内与外界保持通气状态。由于这种培养方法培养器皿内部与外界相通，培养箱内空气必须保持清洁，应定期以紫外线照射或酒精消毒。同时培养箱应放置盛有无菌蒸馏水的水槽，防止培养液蒸发，使箱内相对湿度始终保持为100％。

c）干燥箱：用于细胞培养箱的有些器械、器皿需要烘干后才能使用，玻璃器皿等须干热消毒。干热消毒时，电热干燥箱升温较高，一般需达到160℃以上。通常使

用鼓风式电热干燥箱。其优点是温度均匀、效果较好，缺点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始，至100℃时，停止鼓风，应避免包裹器皿的纸或棉花烧焦，烧焦的碎屑可影响细胞的生长。消毒后，不能立即打开箱门以免骤冷而导致玻璃器皿损坏，应等候温度自然下降至100℃以下方可开门。

d）水纯化装置（超纯水纯化装置）：细胞培养对水的质量要求较高，细胞培养以及与细胞培养工作相关的液体的配制用水必须事先严格纯化处理。水纯化时可采用离子交换装置或蒸馏器。离子交换纯水尚不能有效去除有机物，因此用水时尚需再次蒸馏。进行细胞培养时配制各种培养液及试剂等均需使用三次蒸馏水：即使是用于玻璃器皿的冲洗，也应使用二次以上蒸馏水。目前国内使用较多的是自动双重纯水蒸馏器（石英管加热），使用方便，安全、蒸馏速度快（1600ml/h）。使用注意：

○a不可采用普通自来水蒸馏，以免蒸馏器内很快结成水垢影响蒸馏效果；同时，还需视蒸馏器内存水垢程度定期彻底清洗蒸馏器。

○b正确的使用方法是将经金属蒸馏器蒸馏的蒸馏水加入玻璃蒸馏器内进行再次蒸馏。一般配制培养液的用水应在配液前蒸馏，不宜使用存放数日的三蒸水，以免影响培养用水的质量。目前市场上供应的是含有各种级别和类型的采用一种或多种纯化方法相结合的使普通水纯化为纯水和超纯水的纯水系统可供选择。例如：设计灵活的可以挂壁、也可为台式，也可以有储水箱、也可直接用分液枪的纯水装置；还可根据各类实验用水需求选择配备有效杀菌或去除DNA酶、RNA酶、蛋白酶等，甚至可有效去除掉热源、内毒素的超滤型纯水器。

e）冰箱：细胞培养室必须配备

○a普通冰箱或冷藏柜,储存培养液、生理盐水、Hank’s液试剂等培养用的物品及短期保存组织标本。

○b低温冰箱（-20℃）、超低温冰箱

——用于储存需要冷冻保存生物活性及较长时期存放的制剂，如酶、血清等。

——细胞培养室的冰箱应属专用，不得存放易挥发、易燃烧等对细胞有害的物质，且应保持清洁。

f）细胞冷冻储存器：储存器常用的是液氮容器。根据使用需要分为不同的类型及多种规格。选择购置液氮容器时要综合考虑容积大小，取放使用方便及液氮挥发量（经济）三种因素。液氮容器的大小可自25L～500L，可以储存1ml的安瓿250～15000个左右。液氮温度可低达-196℃，使用时应防止冻伤。由于液氮不断挥发，应注意观察存留液氮情况，及时定期补充液氮，避免挥发过多而致细胞受损。目前，国内各类实验室已广泛使用新型的细胞冷冻储存器。市场所提供的各种新型的细胞冷冻储存器具有性能优异，使用方便等特点。例如：可通过先进的电子控制器实现冻存自动化并监测液氮水平和样品温度，确保样品温度始终处于设定温度点；可配备先进的报警系统，分别警报液氮液面、温度、电池、电压、电源等失常情况：同时具备热气体旁路系统，防止高于-130℃的暖空气进入液氮罐，从而更有效地保护样品，防止升温。另外，多种规格的先进液氮运输，供应罐系列不仅移动方便，还可通过连接管给储存罐补充液氮，提高工作效率，保证样品安全。

g）离心机：进行细胞培养时，常规需要进行制备细胞悬液、调整细胞密度、洗涤、收集细胞等工作，通常需要使用离心机。

○a一般可常规配置4000rpm的国产台式离心机，例如细胞沉降，使用80～100g 的离心机即可，离心力过大有时可能引起细胞的损伤。

○b另外，可根据需要添置其他类型如大容量或可调节温度的离心机等

○c若需特殊用途，例如某些细胞的分离制备需梯度离心，则需另行配置实验所需的具备其他特殊功能的离心机。

h）天平：常用的有扭力天平、精密天平及各种电子天平。

分析天平的感量为0.1mg、0.01mg和0.001mg。根据称取物质的量和称量精度的要求，选择适宜级别的天平。要求精密称定时，当取样量大于100 mg 选用感量为0.1mg天平，在100－10 mg 选用感量为0.01mg 天平，小于10mg选用感量为0.001 mg天平。