Sureplex法全基因组扩增操作说明
基因扩增实验室常用仪器设备的正确操作
移液器
4.2 注意事项
在使用移液器前：应进行安全检查，确 保其处于正常状态 在吸取和推出液体时：要保持慢速和稳 定，避免产生气泡或溅出液体 在操作结束后：应及时清洗移液器，并 归置到指定位置 在更换吸头时：应确保吸头与移液器紧 密连接，避免漏液或交叉污染
移液器
总之，正确操作基因扩增实验室中的仪 器设备是获得准确、可靠实验结果的关 键
在设置离心机参数时：应根据实验要求 进行设置 在加入样品时：要确保离心管放置平衡 ，避免偏心旋转
4
第4部分
移液器
移液器
移液器是一种用于精确转移 液体的仪器，在基因扩增实 验室中广泛应用于样品的添 加和转移
正确使用移液器可以确保实 验的准确性和重复性
移液器
4.1 操作步骤
确认移液器处于安全状态：检查有无漏液现象 按照实验要求：将正确的吸头安装在移液器上 调整移液器的量程：使其与需要转移的液体体积相 匹配 将移液器竖直：确保吸头完全浸入液体中，缓慢吸 取液体 将移液器水平：缓慢推出液体，将液体转移到目标 容器中 在操作结束后：及时清洗移液器并归置
正确使用电泳仪可以获得清晰、 准确的实验结果
2.1 操作步骤
将电泳缓冲液加入电泳槽中 将样品加入电泳凝胶孔中 连接电源：启动电泳程序 观察电泳结果：记录数据
电泳仪
2.2 注意事项
电泳仪
在使用电泳凝胶时：应根据 实验要求选择合适的浓度和 配方 在加入样品时：要确保样品 在凝胶中分布均匀，避免出 现气泡 在观察电泳结果时：应及时 记录数据，包括迁移率和分 子量等
开始PCR程序：观察实验进程 并记录数据
PCR仪
PCR仪
1.2 注意事项
在设置PCR仪参数时：应参考实验指南或 根据研究人员的要求进行设置
微阵列芯片比较基因组杂交技术在染色体易位携带者胚胎植入前遗传学诊断中的应用论文
万方数据
空堡妲亡型苤圭！Ｑ！！生！旦筮塑鲞笠！塑垦！垫』Ｑｂ坐！堡！！！！！！：丛！望！！Ｑ！！：！！！：垒！：盟！：！
ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ８３．０３％（１ ０５２／ｌ ２６７）ａｎｄ ６７．４３％（４４３／６５７）ｂｙ ＦＩＳＨ（ａｌＩ Ｐ＜０．０５）．Ａｎｄ ｔｈｅ ｒａｔｅ ｏｆ ａｎｅｕ ｐｌｏｉｄｙ ｉｎ ｎｏｎ—ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｅｄ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ｆｒｏｍ ｒｅｃｉｐｒｏｃａｌ ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ ｅｍｂｒｙｏｓ ｗａｓ ２０．１９％（６５／３２２）． ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ １０ｗｅｒ ｔｈａｎ ３８．６２％（１３／１ ８９）ｆｒｏｍ Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎｉａｎ ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ ｅｍｂｒｙｏｓ（Ｐ＜０．０１）． ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ Ｎｏｒｍａｌ ａｎｄ／ｏｒ ｂａｌａｎｃｅ ｒａｔｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｔｗｏ ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｅｄ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ａｒｒａｙ ＣＧＨ Ｗｅｒｅ
【关键词】
易位，遗传；植人前诊断；微阵列分析；核酸杂交；原位杂交，荧光
Ｃｌｉｎｉｃａｌ
ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ
ｔｏ
ｃｏｍｐａｒｅ
ａＣＧＨ
ａｎｄ
ＦＩＳＨ
ｉｎ
ｐｒｅｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎｇｅｎｅｔｉｃ
ｄｉａｇｎｏｓｉｓ
ｏｆ
ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ ｃａｒｒｉｅｒｓ
Ｚｈｏｕ Ｃａｎｑｕａｎ．Ｃｅｎｔｅｒ
ａｃｃｕｒａｔｅ
Ｎｏｒｍａｌ ａｎｄ／ｏｒ ｂａｌａｎｃｅ ｒａｔｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｔｗｏ ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｅｄ Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎｉａｎ ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ ｃａｒｒｉｅｒｓ ｗｅｒｅ ３８．２０％
基因扩增仪操作手册1
HeMa系列基 因 扩 增 仪操 作 手 册1介绍 2 开箱 2 安装 3 面板功能键说明 3操作详解 4 开机4编程基础 4 主菜单 5 编程8存储8 调用9 运行9 暂停10 中止11断电处理11 关机11 系统设置11热盖12 实例13维护18故障排除18系统指标20 仪器示图20 附录一：英文注解20附录二： KP-210KJ基因扩增仪简易操作规程 22 2●本系统提供了一个用户选择编程的变温样品台。
它既可恒定在某个温度设定点上，也可按一定模式在多个温度设定点之间快速升降温。
样品台上精心加工有24个、48个或80个排列的样品井，使用0.2ml或0.5ml标准反应管,从而提供充足的样品批量。
●软件设计上，20×2字符式液晶显示器可以提供完整的实时信息提示。
全数字键操作键盘，使编程快捷方便。
●本系统具有运行状态断电处理和低温样品长期保存的功能，可让操作者无需顾忌仪器的运行过程和担忧扩增程序何时结束的问题。
●国际上首家提供温度循环过程中保温时间可递减功能，尤其适合长链核酸（模板）扩增实验。
●用户若另选配原位PCR附件，可分别进行普通及原位PCR实验。
开 箱●确信包装箱体未倒置后，小心拆箱，按照装箱单清点主机与附件。
●保存好包装材料，以备下次运输之用。
●仔细审视仪器与附件外部，如有运输致损情况，立即通知厂商和运输商。
●请填写仪器保修卡回执，并尽快寄回我公司，以便我们更好地为您服务。
安 装场地请选择较为坚实的、不怕湿的台面安置仪器，台面高度适中，轻松操作。
仪器四周留取一定空间，间隔20cm以上，用于通风和散热。
供电线路需承受10A电流。
提供良好接地将进一步提高电气安全性和系统可靠性。
环境仪器正常工作的环境条件是：环境温度：5℃～40℃；相对湿度：不大于80%；环境清洁少尘，避免阳光直射。
远离热源，水源，强烈的电磁干扰源。
通电将仪器电源线连接上电源，按下电源开关。
3提示：通电开机前，须肯定电源接地良好。
EASYspin Plus大量组织细胞RNA快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书-5页精选文档
EASYspin Plus大量组织/细胞RNA快速提取试剂盒目录号：RN41目录编号包装单位RN4101 10次❖适用范围：适用于快速提取动物细胞和易裂解动物组织总RNA，使用独有基因组DNA清除柱技术确保有效清除gDNA残留，不需要使用DNase消化，RNA可直接用于PCR，荧光定量PCR.。
❖试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒组成保存10次裂解液RLT Plus 室温100 ml去蛋白液RW1 室温120 ml漂洗液RW 室温25 ml X 2第一次使用前按说明加指定量乙醇70%乙醇室温15ml X 2第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O 室温10 ml基因组DNA清除柱和收集管室温10套RNase-free吸附柱RA和收集管室温10套本试剂盒在室温储存6个月不影响使用效果。
储存事项：1.所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。
2.不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
❖注意事项1.所有的离心步骤均可在室温完成，使用可容纳50ml 离心管的离心机。
2.样品处理量绝对不要超过基因组吸附柱DA和和RNA吸附柱RA处理能力，否则造成DNA残留或者产量降低。
不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大，例如胸腺脾脏DNA含量丰富，超过100mg就会超过柱子处理能力。
COS细胞RNA含量丰富，超过6x107细胞就会超过柱子吸附能力。
所以开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量，如细胞不超过6x107，组织不超过200mg。
将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
3.裂解液RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。
pcr扩增的原理和步骤
pcr扩增的原理和步骤pcr扩增的原理和步骤聚合酶链反应( CR)是分子生物学中的一种科学技术，将一段DNA 的一个或几个拷贝跨越几个数量级，产生数千到数百万个特定DNA序列的拷贝。
目前，PCR是一种常见的、经常不可缺少的技术，用于医学和生物研究实验室的各种应用。
PCR技术涉及三个主要步骤：变性、退火和扩展。
PCR技术有助于对越来越多的疾病进行调查和诊断。
定性PCR不仅可以检测人类基因，还可以检测细菌和病毒的基因。
PCR 也被用于法医实验室，并且特别有用，因为只需要少量的原始DNA。
PCR可以识别与癌症发展有关的基因。
分子克隆得益于PCR作为一种技术的出现。
基本概念PCR基本原理简单。
顾名思义，它是一个链式反应：一个DNA分子被用来产生两个拷贝，然后是四个，然后是八个等等。
这种连续的加倍是由特定的蛋白质完成的，称为聚合酶，这种酶能够将单个DNA 构建块串在一起形成长分子链。
要完成他们的工作聚合酶需要提供DNA构建块，即由腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T)、胞嘧啶(C)和鸟嘌呤(G)组成的核苷酸。
他们还需要一个小的DNA片段，称为引物，他们将构建块以及一个较长的DNA分子连接起来，作为构建新链的模板。
如果提供这三种成分，酶将构建模板的精确副本。
PCR是一种用于获取任何特定核酸链的许多拷贝的方法。
这是一种选择性地扩增DNA特定片段的手段。
该片段可能代表DNA大而复杂的混合物的一小部分。
人类基因的特定外显子。
它可以被认为是分子复印机。
PCR可以在~2小时内扩增出可用数量的DNA（通过凝胶电泳可见）。
模板DNA不需要高度纯化一个煮沸的细菌菌落。
可用限制性内切酶对PC R产物进行酶切，测序或克隆。
PCR可以扩增单个DNA分子，例如，从一个精子聚合酶链反应依赖于DNA复制酶在高温下保持稳定的能力。
PCR 已经改变了几乎所有需要操纵DNA片段的研究都可能由于其简单和有用而进行的方式。
在Mullis的原始PCR过程中，该酶被用于体外。
PCR基因扩增仪操作步骤
PCR基因扩增仪操作步骤
1、首先准备好反应管；
2、打开机盖，将反应管平稳、端正的置入，盖好机盖；
3、打开电源开关，按照机器屏幕显示的提示设定程序，用
proceed键启动扩增，结束时出现“complete”，待风机停止工作，关闭电源。
注意事项：
（1）使用PCR仪时要严格注意本机的使用环境条件和对电源的要求；
（2）打开PCR仪机盖要轻，防止损坏机锁；
（3）PCR基因扩增仪工作时严禁打开机盖；
（4）要定期使用肥皂水清洗仪器的样品槽，不能使用强碱，高浓度酒精和有机溶剂擦洗；
（5）产品出现故障时要请专业的维修人员或厂家维修人员维修
冷冻离心机操作步骤
1、登记离心机使用登记本，检查使用状况。
2、检查箱体内是否有水分。
3、物体离心时应平衡物品：将需要离心的液体导入专
用离心杯内，要求液体的装量不要超过总体积的4/5,
然后在相应的天平进行平衡，旋紧盖筒。
4、装转子：打开离心机上盖，将相应的转子装入，调
试转子直到转好为之，盖上转子上盖，旋紧。
5、设置参数，当温度指针移到设定温度时，绿灯亮，
按下“START”键，此时机器开始正式工作。
在预
设时间完成以后，“STOP”键指示灯闪烁，机器停
止工作。
6、等待机器完全停止下来，“STOP”灯熄灭，转速为
零，打开机器上盖，打开转子上盖，取出离心物体，此时离心工作完成。
注意事项：
（1）、离心物体必须平衡，对称放入离心机转子内。
（2）、注意加速度调整，转子大小与加速度成反比。
基因扩增仪的操作流程
基因扩增仪的操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!基因扩增仪是一种用于扩增 DNA 片段的仪器，它在生物学、医学、遗传学等领域有着广泛的应用。
思路迪扩增试剂配置方法
思路迪扩增试剂配置方法标题：思路迪扩增试剂配置方法详解在分子生物学实验中，PCR（聚合酶链反应）是一种广泛应用的技术，用于扩增特定的DNA片段。
而思路迪扩增试剂作为一种高效的PCR试剂，其配置方法对于实验结果的准确性与可靠性具有重要影响。
以下是一步一步详细解答思路迪扩增试剂的配置方法。
一、准备工作1. 确认实验环境：PCR实验对环境要求较高，需要在无菌、恒温的环境中进行。
确保实验台面清洁，实验器具经过高温灭菌。
2. 准备所需材料和设备：思路迪扩增试剂盒、蒸馏水、离心机、PCR仪、移液器、微量离心管等。
二、试剂配置1. 打开思路迪扩增试剂盒，通常包含以下成分：Premix Buffer（预混液）、Forward Primer（正向引物）、Reverse Primer（反向引物）和DNA模板。
2. 使用移液器，按照以下比例配置PCR反应体系：- Premix Buffer：一般为25μL/反应。
- Forward Primer和Reverse Primer：通常各为0.5-1.0μL/反应，具体用量需根据引物浓度和实验需求调整。
- DNA模板：一般为1-10ng/反应，具体用量需根据模板浓度和实验需求调整。
- 蒸馏水：补充至总体积为50μL/反应。
三、操作步骤1. 使用移液器，将Premix Buffer加入到PCR反应管中，体积为25μL。
2. 分别吸取适量的Forward Primer和Reverse Primer，加入到PCR反应管中，总体积为0.5-1.0μL。
3. 根据模板浓度，吸取适量的DNA模板，加入到PCR反应管中，体积为1-10ng。
4. 使用蒸馏水将PCR反应体系的总体积补充至50μL。
5. 将配置好的PCR反应体系轻轻混匀，避免产生气泡。
6. 将PCR反应管放入PCR仪中，设置好反应条件（包括变性温度、退火温度、延伸温度和循环次数等），启动PCR反应。
四、注意事项1. 在配置PCR反应体系时，应尽量减少气泡的产生，因为气泡可能会影响PCR的效率和结果。
pcr扩增操作流程
pcr扩增操作流程
PCR（Polymerase Chain Reaction）是一种用于DNA扩增的技术，通过PCR可以在短时间内扩增出目标DNA片段，是分子生物学
研究中常用的重要工具。
下面将介绍PCR扩增操作流程。
首先，准备PCR反应体系。
PCR反应体系包括DNA模板、引物、dNTPs（四种脱氧核苷酸）、Taq聚合酶、缓冲液和水。
将这些试剂
按照一定比例混合在一起，制备PCR反应混合液。
接着，将PCR反应混合液分装到PCR管中。
每个PCR管中包含
了反应混合液和DNA模板，每个PCR管对应一个目标DNA片段。
然后，将PCR管放入PCR仪中进行扩增。
PCR仪会根据设定的
温度程序进行PCR扩增反应，包括变性、退火和延伸三个步骤。
在
变性步骤中，将反应体系加热至95°C，使DNA双链解旋成两条单链。
在退火步骤中，将反应体系降温至50-60°C，引物与目标DNA片段结合。
在延伸步骤中，将反应体系加热至72°C，Taq聚合酶在此温度
下进行DNA合成。
最后，检测PCR产物。
可以通过琼脂糖凝胶电泳或实时荧光定
量PCR等方法检测PCR扩增产物，确认目标DNA片段是否扩增成功。
总的来说，PCR扩增操作流程包括准备PCR反应体系、分装PCR
反应混合液、PCR扩增反应和检测PCR产物等步骤。
通过PCR技术，
可以快速、高效地扩增出目标DNA片段，为分子生物学研究提供了重要的工具和方法。
PCR技术的广泛应用，推动了生命科学领域的发展，为人类健康和疾病治疗提供了重要支持。
基因测序操作流程(PCR扩增)
基因测序操作流程(PCR扩增)1. 简介PCR扩增是一种用于产生大量特定DNA序列的常用技术。
本文档将介绍PCR扩增的操作流程。
2. 材料准备- DNA模板：待扩增的DNA样本- 引物：用于指导DNA扩增的两个寡核苷酸序列- dNTP混合物：包含dATP、dCTP、dGTP和dTTP四种脱氧核苷酸- 缓冲液：提供PCR反应所需的离子平衡和pH调节- MgCl2：与DNA聚合酶一起使用，为PCR反应提供必需的镁离子- DNA聚合酶：参与DNA链合成的酶- 纯化水：用于制备反应混合液和其它实验操作3. PCR反应条件设定1. 温度设定：包括变性、退火和延伸步骤2. 引物浓度：控制引物的浓度以避免引物间的非特异性结合3. 模板浓度：初步测定模板DNA的浓度，确定最佳扩增条件4. Mg2+浓度：优化反应中Mg2+离子的浓度以提高PCR效果4. PCR反应操作流程1. 准备PCR反应管：标记反应管，并根据反应数目准备相应管数2. 配制PCR反应液：- 向每个反应管中加入以下试剂，计算总体积为反应体积的1倍：- 缓冲液：X μL- dNTP混合物：X μL- 引物1：X μL- 引物2：X μL- MgCl2：X μL- DNA模板：X μL- 纯化水：X μL- DNA聚合酶：X μL3. 执行PCR扩增：- 放置反应管在热循环PCR仪中- 设置PCR程序：依据反应条件设定程序温度和时间- 启动PCR程序4. 扩增产物分析：- 在琼脂糖凝胶电泳中分析PCR扩增产物- 将PCR产物与大小标准品一同加载至琼脂糖凝胶上- 设置适当电泳条件并进行电泳- 观察PCR产物条带，并根据大小和预期目标进行分析5. 结果解读- 如果PCR反应成功，琼脂糖凝胶上将观察到目标DNA序列的扩增产物。
- 如出现非特异性扩增或无扩增产物，则可能需要优化反应条件，如调整温度、浓度等。
请注意，以上操作流程仅为一般PCR扩增流程，具体细节或特殊要求应根据实际情况进行调整。
PCR扩增实验操作步骤
PCR扩增实验操作步骤PCR扩增反应一、实验原理PCR：是一种选择性扩增DNA或RNA的方法，其基本原理是依据体内细胞分裂中的DNA半保留复制机理，以及在体外dNTP分子于不同温度下双链和单链可以互相转变的性质，人为地控制体外合成系统的温度，以促使双链DNA变成单链DNA；单链DNA与人工合成的引物退火，以及在dNTP存在下，耐高温的DNA聚合酶使引物沿单链模板延伸成为双链DNA。
PCR反应分3步：①变性：通过加热使DNA 双螺旋的氢键断裂，双链解离形成单链DNA；②退火：当温度突然降低时，由于模板分子结构较引物要复杂得多，而且反应体系中引物DNA量大大多于模板DNA，使引物和其互补的模板在局部形成杂交链，而模板DNA 双链之间互补的机会较少。
③延伸：在DNA聚合酶和4 种dNTP底物及Mg2+存在的条件下，5'→3'的聚合酶催化以引物为起始点的DNA链延伸反应，以上3步为一个循环，每一循环的产物可以作为下一个循环的模板，数小时之后，介于两个引物之间的特异性DNA片段得到了大量复制，数量可达2×106~7拷贝。
变性退火延伸图反应历程二、实验材料1·模板：细菌DNA 2·TsgDNA聚合酶3·dNTP混合液4·10倍浓度PCR缓冲液5·2.5mmol/LMgCl2 6·RAPD引物：S14 S15 S18 S66 S74 S88 S97 S103 S110 S115 7·提取细菌DNA的相关试剂三、操作步骤1．细菌染色体DNA的提取（见上一组）3·反应程序：将RAPD反应试剂加入EP管中轻混后用100ul石蜡油覆盖于反应混合液之上，防止样品在反复加热-冷却的过程中蒸发，盖好盖子打开PCR反应仪输入以下反应数据●94 摄氏度预变性5min●94摄氏度变性40s●40摄氏度退火40s●72摄氏度延伸1min将EP管放入仪器开始扩增，循环35次；72摄氏度延伸10min仪器为Model MyGene 25 Plus三、注意事项1、PCR反应体系中DNA样品及各种试剂的用量都极少，必须严格注意吸样量的准确性及全部放入反应体系中。
Premix PrimeSTAR HS 使用说明书
PCR结果： M12345M
1 : 2 kb 的 DNA 扩增片段 2 : 4 kb 的 DNA 扩增片段 3 : 6 kb 的 DNA 扩增片段 4 : 8 kb 的 DNA 扩增片段 5 : 10 kb 的 DNA 扩增片段 M : λ-Hind III digest
注意事项 1. 为保持制品活性，请在第一次融解后轻轻混匀，分装至 PCR 反
2×PCR Solution Premix PrimeSTAR® HS
040A 包 装 量： 500 μl×5 支。
50 μl 的 PCR 反应体系时 100 次量，每次使用 25 μl。
制品说明 本 制 品 是 PCR 反 应 用 的 2 倍 浓 度 的 Premix 制 品 ， 内 含 DNA Polymerase、Buffer、dNTP Mixture等。DNA Polymerase使用了 Takara独自开发的兼具高保真性和高扩增效率的PrimeSTAR® HS DNA聚合酶。使用本制品时，只需在制品溶液中加入模板和引物便 可以进行PCR反应，大大简化了操作过程，减少了PCR操作过程中 的 污 染 。 PrimeSTAR® HS DNA 聚 合 酶 具 有 极 强 的 3 ’ → 5 ’ Exonuclease活性，显示出超群的校正功能，同时还具有优于Taq DNA Polymerase的高扩增效率，其扩增得到的PCR产物几乎都为 平滑末端，经磷酸化后可直接克隆于平滑末端的载体中。
V2012.01
NOTICE TO PURCHASER : LIMITED LICENSE [L15 ] Hot Start PCR Licensed under U.S. Patent No. 5.338,671 and 5,587,287, and corresponding patents in other countries. [M54] PrimeSTAR® HS DNA Polymerase This product is covered by the claims of U.S. Patent No. 7,704,713 and its foreign counterparts
Premix-PrimeSTAR-HS-使用说明书
Premix溶液组成
PrimeSTAR® HS DNA聚合酶 dNTP Mixture PrimeSTAR® Buffer
1.25 U/25 μl 2×conc.；各 0.4 mM 2×conc.；2 mM Mg2+
保存温度: -20℃。反复冻融活性可能降低，请在第一次融解后轻轻混匀，然后 分装至 PCR 反应管中（50 μl 反应时，每管分装 25 μl）后-20℃保 存，以避免多次反复冻融。
30 Cycles
注）本酶具有高退火效率，所以在设定 PCR 条件时可以缩短退 火时间。
应用例 1. 以人基因组DNA为模板进行PCR扩增。
模 板： 人基因组DNA 50 ng（50 μl反应体系）。
PCR仪： TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice®。
PCR条件：
【0.5～6 kb时进行3 Step PCR】
25 μl <200 ng 0.2-0.3 μM（final conc.） 0.2-0.3 μM （final conc.） up to 50 μl
*【50 μl PCR 反应体系中模板 DNA 推荐使用量】
人基因组 DNA 大肠杆菌基因组 DNA λ DNA 质粒 DNA cDNA Library
PCR结果： M12345M
1 : 2 kb 的 DNA 扩增片段 2 : 4 kb 的 DNA 扩增片段 3 : 6 kb 的 DNA 扩增片段 4 : 8 kb 的 DNA 扩增片段 5 : 10 kb 的 DNA 扩增片段 M : λ-Hind III digest
注意事项 1. 为保持制品活性，请在第一次融解后轻轻混匀，分装至 PCR 反
2. 以大肠杆菌基因组DNA为模板进行PCR扩增。
Sureplex法全基因组扩增操作说明
Sureplex法全基因组扩增操作说明
Sureplex法全基因组扩增操作说明：
1：将活检样本洗涤后移入含有2.5ulPBS的pcr管底，瞬时离心。
*2：每个样本加入2.5ul cell extraction buffer（加到侧壁上以免带走细胞），点离，置于4度。
3：在冰上准备extraction cocktail并混匀，点离，组成如下：
4：每个样本中加入5ul extraction cocktail （加到侧壁），点离。
5：pcr仪程序如下：
6：准备pre-amp cocktail并混匀，点离，组成如下：
7：每个样本加入pre-amp cocktail 5ul，点离。
8：pcr仪程序如下：
9：预扩增产物置于冰上。
10：准备amp-cocktail 并混匀，点离，组成如下：
11：每个样本加入60ul amp-cocktail，吹吸混匀，点离。
12：pcr仪条件如下：
13：琼脂糖检测。
14：xp磁珠等体积纯化。
失败原因：
1：细胞活检失败
2：细胞转移时丢失
3：细胞未放置管底，干在壁上，管盖上，无样本。
4：取材时激光烧焦细胞，破坏了内部DNA结构。
sureplex扩增原理
sureplex扩增原理Sureplex扩增原理是一种基于PCR（聚合酶链式反应）的DNA扩增技术，它能够在短时间内扩增出大量的DNA分子。
这项技术的独特之处在于它利用了两个特殊的引物和两个热稳定的DNA聚合酶，以实现高效、精确的扩增。
我们需要了解PCR的基本原理。
PCR是一种通过反复复制DNA片段的方法，它在DNA复制过程中使用了DNA聚合酶酶和引物。
引物是一种短链的DNA序列，它与目标DNA片段的两端序列互补。
在PCR 过程中，DNA被加热至高温，使其双链结构解离成两条单链DNA。
然后，引物与目标DNA片段的互补序列结合，DNA聚合酶将在引物的引导下合成新的DNA链。
通过多次循环这个过程，目标DNA片段就会被扩增出来。
而Sureplex扩增原理在PCR的基础上进行了改进和优化。
它使用了两对特殊的引物，分别称为扩增引物和模板引物。
扩增引物与目标DNA片段的两端序列互补，模板引物则与目标DNA片段的内部序列互补。
在Sureplex扩增过程中，首先将目标DNA片段加热至高温，使其解离成两条单链DNA。
然后，扩增引物与目标DNA片段的两端序列结合，DNA聚合酶开始合成新的DNA链。
与此同时，模板引物与目标DNA片段的内部序列结合，DNA聚合酶也开始在模板引物的引导下合成新的DNA链。
通过这样的双引物双聚合酶的作用，Sureplex扩增可以同时从两个方向扩增目标DNA片段，而不是只从一个方向进行扩增。
这种双引物双聚合酶的设计使得Sureplex扩增具有更高的扩增效率和准确性。
因为两个引物同时进行扩增，所以即使目标DNA片段的两端存在一定的变异，也能够保证扩增的成功。
而且，Sureplex扩增还能够避免了传统PCR中引物结合位置不准确或目标DNA片段过长导致的扩增失败问题。
总的来说，Sureplex扩增原理通过引入双引物双聚合酶的设计，提高了DNA扩增的效率和准确性。
这项技术在基因检测、疾病诊断和生物学研究等领域具有广泛的应用前景。
pcr扩增目的基因的过程
pcr扩增目的基因的过程嘿，朋友！咱今儿来聊聊 PCR 扩增目的基因这档子事儿。
PCR 这玩意啊，就像个神奇的魔法盒子，能把咱想要的目的基因不断复制变多。
那它到底咋操作的呢？先得准备好材料，就像做饭得有食材一样。
要有模板 DNA，这可是咱要扩增的源头；还有引物，就好比是指引方向的箭头，告诉反应往哪儿走；再就是四种脱氧核苷酸，那是搭建基因大厦的砖头；还有耐热的 DNA 聚合酶，这可是干活儿的主力。
然后呢，就开始加热啦！把混合物放到高温环境里，这一步叫变性。
你想想，这就好比把一个大拼图给拆散，原来连在一起的双链 DNA 就变成两条单链啦。
温度一高，氢键扛不住，双链就分开了，这目的基因不就露出来了？接下来是退火，温度降低一些，引物就像找到了自己的位置一样，紧紧地和单链 DNA 结合上。
这就好比钥匙找到了对应的锁，严丝合缝。
再然后就是延伸啦！温度又升高，DNA 聚合酶开始大显身手，沿着引物的方向，把那些脱氧核苷酸一个个连起来，新的 DNA 链就合成啦。
就这样一轮一轮地重复，变性、退火、延伸，目的基因不就像滚雪球一样越来越多啦？你说这过程是不是很神奇？就跟变魔术似的。
每一轮过去，目的基因的数量都翻倍增长。
这要是搁在现实生活里，就好像你的财富每过一段时间就翻一番，那得多爽啊！不过这过程也得精细操作，温度、时间啥的都得把握好，不然就容易出错。
这就好比开车，速度、方向都得控制好，不然就容易出事故。
所以啊，PCR 扩增目的基因，看似复杂，其实只要掌握了窍门，也就不那么难啦。
咱们多实践多琢磨，还怕搞不定它？总之，PCR 扩增目的基因是个精细又神奇的过程，只要用心去做，就能让目的基因乖乖地大量扩增，为咱们的科学研究和实际应用服务！。
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Sureplex法全基因组扩增操作说明：
1：将活检样本洗涤后移入含有2.5ulPBS的pcr管底，瞬时离心。
*2：每个样本加入2.5ul cell extraction buffer（加到侧壁上以免带走细胞），点离，置于4度。
3：在冰上准备extraction cocktail并混匀，点离，组成如下：
4：每个样本中加入5ul extraction cocktail （加到侧壁），点离。
5：pcr仪程序如下：
6：准备pre-amp cocktail并混匀，点离，组成如下：
7：每个样本加入pre-amp cocktail 5ul，点离。
8：pcr仪程序如下：
9：预扩增产物置于冰上。
10：准备amp-cocktail 并混匀，点离，组成如下：
11：每个样本加入60ul amp-cocktail，吹吸混匀，点离。
12：pcr仪条件如下：
13：琼脂糖检测。
14：xp磁珠等体积纯化。
失败原因：
1：细胞活检失败
2：细胞转移时丢失
3：细胞未放置管底，干在壁上，管盖上，无样本。
4：取材时激光烧焦细胞，破坏了内部DNA结构。