血清蛋白琼脂糖凝胶电泳
血清蛋白电泳操作规程
血清蛋白电泳一．项目名称血清蛋白电泳（HYDRAGEL PROTEIN）二．检验方法名称琼脂糖凝胶区带电泳三．方法学原理蛋白电泳是临床实验室中一种常用的蛋白质剖析技术。
它可以对血清或其他体液中的异常蛋白质进行筛选。
它是以区带电泳为基础在一种合适的支持介质—琼脂糖上进行的电泳。
血清蛋白质在给定的PH条件下主要根据其所带电荷数将其分离成五种片段：白蛋白,α1球蛋白,α2球蛋白,β球蛋白,γ球蛋白，每一区带含有一种或多种血清蛋白质。
四．方法学溯源自1930年由Tiselius发现了移界电泳（moving boundary eectrophoresis），而后，这种技术的各种局限性已逐渐被区带电泳（zone elecrrophoresis）所克服，区带电泳的条件和支持介质的选择是电泳成败的关键。
血清蛋白区带电泳是在临床实验室中常用的技术之一，可定性和/或半定量各条正常或异常蛋白区带。
五．仪器（一）型号：SEBIA HYDRASYS (PN1210)（二）分析和计算参数：1．处理量：约162个样本/小时2．所需样本量：10ul3．检验时间：约半小时4．重复性：有良好的批内和批间重复性5．电泳参数：电压0－300V（可选至3000V）电流0－500mA功率0－100W六．试剂及配套品（一）试剂1．HYDRAGEL 7 PROTEIN(E)试剂盒HYDRAGEL 15 PROTEIN(E)试剂盒HYDRAGEL 30 PROTEIN(E)试剂盒（1）商标：SEBIA（2）包装规格：70测试/150测试/300测试（3）货号：PN4100/ PN4120/ PN41402．脱色液（1）商标：SEBIA（2）包装规格：Pack for 10×100ml（3）货号：PN4540(4) 成分：柠檬酸3．洗涤液（1）商标：SEBIA（2）包装规格：Pack for 10×80ml（3）货号：PN4541（4）成分：叠氮钠4．稀释剂（1）商标：SEBIA（2）包装规格：Pack for 1×5ml（3）货号：PN4587（二）配套品质控血清（1）商标：SEBIA(2) 包装规格：Pack for 5×1ml（3）货号：PN4783七．操作步骤㈠开机，启动电泳仪。
琼脂糖凝胶电泳的原理
琼脂糖凝胶电泳的原理
首先，我们来看电泳的原理。
电泳是利用电场对带电粒子进行迁移的现象进行分离的一种技术。
在琼脂糖凝胶电泳中，我们通常使用直流电场来进行电泳实验。
当我们在凝胶上施加电场时，带电的蛋白质会在电场的作用下向阳极或阴极迁移，其迁移速度与其电荷量和大小有关。
这样，不同大小和电荷量的蛋白质就可以在电场的作用下被分离开来。
其次，凝胶的特性对琼脂糖凝胶电泳也起着至关重要的作用。
琼脂糖凝胶是一种具有孔隙结构的凝胶，其孔隙大小可以根据实验需求进行调整。
在进行琼脂糖凝胶电泳时，我们通常会根据待分离的蛋白质的大小和特性选择合适的凝胶浓度和孔隙大小，以便获得最佳的分离效果。
在电泳过程中，蛋白质会在凝胶中逐渐迁移，最终形成不同的带状条带，从而实现蛋白质的分离和检测。
最后，蛋白质分离是琼脂糖凝胶电泳的核心内容。
蛋白质在电场的作用下会根据其大小和电荷量被分离成不同的带状条带。
通过对这些条带的分析，我们可以了解蛋白质的大小、电荷量、等电点等特性，从而对蛋白质进行鉴定和定量分析。
琼脂糖凝胶电泳在生物化学和分子生物学领域中有着广泛的应用，可以用于分离和检测复杂的蛋白质混合物，是一种非常重要的实验技术。
综上所述，琼脂糖凝胶电泳是一种利用电泳、凝胶和蛋白质分离原理的实验技术，通过对蛋白质的分离和检测，可以帮助我们了解蛋白质的特性和功能，对于生物化学和分子生物学研究具有重要意义。
希望通过本文的介绍，读者能对琼脂糖凝胶电泳的原理有一个清晰的认识，并在实验中正确操作和应用这一技术。
DNA琼脂糖凝胶电泳(原)
凝胶制作过程
1. 根据电泳需要，配臵合适浓度的电泳及制胶缓冲液，一 般为1× TAE或0.5×TBE。
注意：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须是相同的。
2. 根据制胶量及凝胶浓度，在加有一定量的电泳缓冲液 的三角锥瓶中，加入准确称量的琼脂糖粉。
注意：总液体量不宜超过三角锥瓶的50%容量。
3. 在微波炉中加热溶解琼脂糖至清明、透亮。
琼脂糖凝胶电泳操作简单、快速，通过调整其使
用浓度，使得分辨率达到大多数实验的要求，因此成 为分离、鉴定、纯化核酸分子的常用方法。但在实际 的操作过程中经常出现一些问题，如凝胶电泳图谱的 条带模糊不清，条带弯曲变形, 凝胶图谱变形，灌制
凝胶后的点样孔撕裂不整齐等，使得电泳结果的重复
性差。
二、相关概念
上样注意事项
加样时枪头不要碰坏凝胶控壁，否则DNA带型不整齐，加 样前要用枪头吸打凝胶孔中的溶液以赶走样品空中的气泡； 每孔最大上样量取决于DNA样品片段的大小，数目及样品 孔形状与容量； 每孔最大上样容积决定于样品孔体积； DNA marker可在两侧的样品孔均加上。
电压和温度
电泳时电压应该不超过20V/cm，电泳温度应该低
4.在软件界面点击“拍摄”按钮即可。
注：1、尽量减少紫外照射时间，调焦距和位臵时可以用白光。 2、不同凝胶结果对比时，用相同焦距、曝光时间和光圈大小。
如何调节焦距、聚焦、光圈以获得 高质量的图片？
三个最重要的可调参数分别是焦距、聚焦 和光圈。其中焦距调节清晰度，聚焦调节图像 大小，光圈调节明暗。一般先调光圈至适宜的 亮度后，再调聚焦将图像放到最大，最后调节 焦距，在图像较大的情况下焦距比较容易调节 到最清晰状态，然后再把图像缩放在适宜大小 后成像即可。
6.2血清蛋白质电泳
结合珠蛋白 α2-巨球蛋白
铜蓝蛋白 转铁蛋白 低密度脂蛋白
C3
C4 β2-微球蛋白 纤维蛋白原
IgG
IgA
IgM C-反应蛋白
成人参考值（g/ L） 35~52 0.9~2.0 0.5~1.2 3×10－5 1.7~3.25 0.3~2.0 1.3~3.0 0.2~0.6 2.0~3.6 0.6~1.55 0.9~1.8 0.1~0.4
多发性骨髓瘤
出现深染的M蛋白 窄区带，多见于γ、 β区，偶见于α区
Alb α1 α2 β1 β2 γ
2. 血清蛋白电泳典型异常图谱
肝硬化
Alb下降，γ明显 升高，β和γ区带 融合呈β-γ桥
Alb α1 α2 β γ
2. 血清蛋白电泳典型异常图谱
肾病综合征
Alb明显低下（尿 中选择性漏出）， α2-球蛋白显著升 高，β-球蛋白升高
0.001~0.002 2.0~4.0 7.0~16 0.7~4.0 0.4~2.3 ＜0.005
分子量（kD） 66.2 52 40 69 200
85~400 720 132 79.6 300 185 206 11.8 340
144~150 ~160 970 ~115
等电点 4.7~4.9
4.8 2.7~3.5
4.1 5.4 4.4 5.7
5.5 6~7.3
6.2
三、SPE有哪些临床应用
血清蛋白电泳异常图谱分型 血清蛋白电泳典型异常图谱
1. 血清蛋白电泳异常图谱分型
图谱类型 低蛋白血症型 肾病型 肝硬化型 弥漫性肝损害型 慢性炎症型 急性时相反应型 M蛋白血症型 高α2(β)-球蛋白血症型 妊娠型 蛋白质缺陷型
二、正常SPE图谱有何特征
血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳原理和操作
血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳原理和操作血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳是一种常用的生化分离和分析技术，主要用于血清中脂蛋白的分析。
其原理是利用琼脂糖凝胶电泳的分离特性，将血清中的脂蛋白按照分子大小进行分离，从而获得脂蛋白的电泳图谱。
琼脂糖凝胶是由琼脂糖溶液制备而成的凝胶。
琼脂糖分子之间通过氢键结合，在溶液中形成网状结构，能够阻碍大分子的迁移，使分子在凝胶中按照分子大小逐渐分离。
根据琼脂糖凝胶的浓度和凝胶体积，可以调整分离脂蛋白的范围和分辨率。
血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳的操作步骤如下：1. 样品制备：将要分析的血清样品进行离心，将清除过量脂蛋白颗粒。
取适量样品于离心管中，加入适量凝胶缓冲液，混匀。
2. 制备凝胶：根据所需的凝胶浓度，称取相应质量的琼脂糖溶解于电泳缓冲液中，并加热至溶解。
待溶液温度降至室温后，加入凝胶稳定剂并混匀。
3. 填充凝胶孔：将凝胶溶液倒入电泳池，待凝胶凝固后，用专用的样品载体或者微量移液器将样品填充到凝胶孔中。
注意不要将样品液面超过凝胶表面。
4. 电泳分离：将电泳池连接电源，设定合适的电泳条件，如电压和电流。
在电泳过程中，离子在电场作用下沿着琼脂糖凝胶的移动方向迁移，分离出不同迁移速度的脂蛋白组分。
5. 染色和观察：电泳结束后，取出凝胶，进行染色和观察。
目前常用的染色方法有银染、共伴染色和乳化状胶体金染色等。
在染色后，可以使用分子影像仪或者专用的凝胶分析系统进行图像捕捉和分析。
血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳可以用于分析血清中各种脂蛋白的分布和比例，如低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、极低密度脂蛋白（VLDL）等。
通过分析脂蛋白的电泳图谱，可以得到脂蛋白的相对含量和分子大小的分布情况，进一步了解脂质代谢的状态以及与某些疾病的关联。
总之，血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳是一种常用的生化分离和分析技术，主要用于血清脂蛋白的分离和分析。
通过其原理和操作步骤的了解，我们可以更好地利用该技术进行实验和数据解读，为脂质相关疾病的研究提供有力的支持。
【名称】血清蛋白电泳
【名称】血清蛋白电泳【英文名】serum protein electrophoresis【别名】【概述】蛋白质等生物分子在缓冲液中带负电荷或正电荷，在电场中向阳极或阴极运动，称为电泳(electmphomsis)。
由于其等电点不同，分子大小、形状和荷质比的不同，使不同蛋白质分子具有不同的电泳迁移率，在一定的支持介质中可借以分离各种蛋白质。
常用的电泳技术有：醋酸纤维素薄膜电泳、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫电泳等。
血清蛋白电泳以醋酸纤维素薄膜应用最为普遍。
【原理】血清中各种蛋白质都有其特有的等电点，各种蛋白质在各自的等电点时呈电中性状态，它的分子所带正电荷与所带负电荷量相等。
将蛋白质置于pH比值等电点较高的缓冲液中，它们将形成带负电荷的质点，在电场中均向正极泳动。
由于血清蛋白质的等电点不同，带电荷的量多少差异，蛋白质分子量大小也不同，所以在同一电场中泳动速度也不同。
蛋白质分子越小带电越多，移动速度越快；分子越大而带电越少，移动速度越慢。
按其泳动速度可以分出以下的主要区带，从正极端起，依次为白蛋白、α球蛋白和α球蛋白，β球蛋白和γ球蛋白5条区带。
【试剂】(1)巴比妥-巴比妥钠缓冲液(pH8.6±0.1、μ＝0.06)：以巴比妥2.21g、巴比妥钠12.36g于500ml蒸馏水中，加热溶解，待冷却至室温后加蒸馏水至1000ml。
(2)染色液：①丽春红S染色液：丽春红9.04g、三氯醋酸6g，用蒸馏水溶解，并稀释至100ml。
②氨基黑10B染色液：氨基黑10B 0.1g，溶于无水乙醇20ml中，加冰醋酸5ml甘油0.5ml使溶解。
然后将磺柳酸2.5 g，溶于少量蒸馏水中，加入前液，再以蒸馏水补足至100ml。
(3)漂洗液：①30ml/L醋酸溶液：用于丽春红染色的漂洗。
②甲醇45ml，冰醋酸5ml和蒸馏水50ml混匀。
用于氨基黑10B染色的漂洗。
(4)透明液：柠檬酸(C H Na O·2H O)21g和N-甲基-吡咯烷酮150g，用蒸馏水溶解，并稀释到500ml。
血清蛋白(serumprotein)琼脂糖凝胶电泳
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weixin"]}};with(document)0[(getElementsBy
TagName('head')[0]||body).appendChild(cre
ateElement('script清血清 0.2mL 中加苏丹黑染色液 0.2mL，混合置 37℃水浴中染色 30 分钟，离心约 5 分钟。以除去悬浮于血清中染料沉渣。
2、制备琼脂糖凝胶板将已配制好的 0.5%琼 脂糖凝胶于沸水浴中加热融化，用吸管吸取凝胶 溶液浇注在载玻片上，约 3mL。静置半小时后凝 固。
3、点样将剪好的滤纸条对折，以折边在距 凝胶一端 2cm 处切一点样口。将毛细管插入预染 好的血清中，待吸入部分血清后，取毛细管使其
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【注意事项】
1、电泳样品应为新鲜的空腹血清。
2、加热溶化琼脂时，须防止水份蒸发过多。 琼脂糖凝胶最好随用随制，以免凝胶表面干燥， 影响分离效果。
实验六：血清脂蛋白的琼脂糖凝胶电泳
实验六：血清脂蛋白的琼脂糖凝胶电泳血清脂蛋白的琼脂糖凝胶电泳是一种常用的分离和鉴定血清脂蛋白的方法。
血清脂蛋白是由蛋白质和脂质组成的颗粒物质，其中包括低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、极低密度脂蛋白（VLDL）和乳糜微粒等。
琼脂糖凝胶电泳可以根据脂蛋白的电泳迁移率和染色性质将脂蛋白分离出不同的带，从而达到分离和鉴定的目的。
实验仪器和试剂：1.琼脂糖凝胶电泳仪2.琼脂糖凝胶板（gel plate）3.20%甘油4.3%琼脂糖5.样品（血清）6.样品缓冲液：Tris-HCl pH 8.97.标准品实验步骤：1.制备琼脂糖凝胶板：取100ml 3%琼脂糖加入十倍浓度的Tris-HCl pH 8.9缓冲液中，搅拌均匀后加入20%甘油，将混合液倒入冷却好的凝胶板中，把已冷却的仪器旋转至仪器倾斜角度20度左右，使混合液均匀地分布在凝胶板的倾斜表面上。
等待凝固即可使用。
2.标记标准品：将标准品加入混合样品缓冲液，在84摄氏度下进行10分钟的煮沸，再进行冷却。
将手套清洗干净并干燥，然后将标准品注入样品单元格中，约10分钟后转动仪器延长电泳时间（通常电泳时间为1个小时左右），直到标准品移动到合适的位置、大小和颜色为止。
标准品的分子量从低分子量到高分子量分别为白色脂蛋白（pre-beta脂蛋白）、β-脂蛋白（LDL）、α-脂蛋白（HDL3）、HDL2和脂蛋白(a)。
3.样品电泳：将样品加入混合样品缓冲液，并煮沸10分钟以去除有机物，然后冷却。
将样品注入样品单元格中，待样品在电泳板上电泳1小时。
电泳结束后，先将凝胶板在120ml的异丙醇/冰醋酸/石油醚混合物中浸泡5-10秒钟，然后在以色列碘溶液中染色。
结果分析：在琼脂糖凝胶板上可以看到不同的带，这些带是由血清脂蛋白的不同组分组成的。
根据标准品的移动位置和样品的移动位置，可以将样品中的脂蛋白分为不同的带。
每个带代表一个不同的脂蛋白类别，通常来说，可以将带分为以下5类：白色脂蛋白（pre-beta脂蛋白）、β-脂蛋白（LDL）、α-脂蛋白（HDL3）、HDL2和脂蛋白(a)。
21 生物化学实验--琼脂糖凝胶电泳法分离预染血清脂蛋白
琼脂糖凝胶电泳法分离预染血清脂蛋白【目的】1. 掌握琼脂糖凝胶电泳法分离预染血清脂蛋白的实验原理和操作方法。
2. 熟悉血清脂蛋白改变在临床上的重要意义。
【原理】电泳是指带电颗粒在电场的作用下，向着与其自身所带电荷相反的电极移动的现象。
根据电泳支持物的不同，血清脂蛋白电泳可分为滤纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳、琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳四类。
由于各种脂蛋白所含载脂蛋白和脂类的种类及数量不同，分子量大小相差较大，并且在一定 pH 值溶液中所带电荷量不同，电泳移动的速度必然有差别，因此，通过电泳可以将不同种类的血清脂蛋白彼此分离。
血清脂蛋白经苏丹黑 B 预染后，以琼脂糖为载体，在 pH 8.6 巴比妥缓冲液中进行电泳，可将脂蛋白分成不同的区带（图 3-9 ）。
正常人空腹状态下，血清脂蛋白电泳后可出现三条区带，从阳极到阴极依次为α- 脂蛋白带、前β- 脂蛋白带及β- 脂蛋白带。
点样槽处不会出现乳糜微粒，有时前β- 脂蛋白也显示不出来。
区带的宽窄及颜色的深浅粗略地反应了各种脂蛋白的量。
另外，可以将已烘干的凝胶片直接放到吸光度扫描仪上，通过扫描得出各种脂蛋白的百分比含量。
或者，将电泳后凝胶板上各区带切下，比色定量分析出各种脂蛋白的百分比含量。
图 3-9 预染血清脂蛋白电泳图谱【器材】1 ．电泳仪2 ．恒温水浴箱3 ．离心机4 ．微量加样器5 ．烫槽器6 ．载玻片7 ．扫描仪8 ．分光光度计9 ．小号试管10 ．吸管11 ．纱布12 ．烘箱【试剂】1 ．电泳缓冲液（ pH8.6 ，离子强度 0.075 的巴比妥缓冲液）称取巴比妥钠 15.458g ，巴比妥 2.768g ，乙二胺四乙酸（ EDTA ） 0.29g ，加适量蒸馏水溶解后加至 1000ml 。
2 ．凝胶缓冲液（ pH8.6 三羟甲基氨基甲烷缓冲液）称取三羟甲基氨基甲烷 1.212g ， EDTA 0.29g ， NaCl 5.85g ，用适量蒸馏水溶解后加至 1000ml 。
免疫固定电泳操作规程
免疫固定电泳操作规程一．项目名称免疫固定电泳(ＨYＤRＡＧＥL IMMUＮＯFIXAＴION)二．检验方法名称琼脂糖凝胶免疫固定电泳三．方法学原理血清蛋白电泳中出现得异常条带主要存在于β—球蛋白与γ—球蛋白区域,通常疑为单克隆蛋白质并且提示丙球蛋白血症。
为鉴别异常条带,可运用免疫固定技术。
免疫固定电泳就是一种简单得技术,电泳后得蛋白质与相应抗体形成复合物与被固定在相应得位置上,通过下列四个步骤:1。
蛋白质在琼脂糖凝胶内进行电泳分离。
2。
电泳后已分离得蛋白质被固定并产生免疫沉淀:应用固定剂与抗血清加于凝胶表面得泳道上,并让固定剂与抗血清在凝胶内渗透扩散、３。
使用吸水纸与清洗将未沉淀得蛋白质去除,已被沉淀得蛋白质贮留在凝胶内。
4、将蛋白质染色,并将这些免疫沉淀区带得位置与蛋白质经电泳后观察到得异常蛋白区带进行比较。
为了精确识别单克隆区带,样品同时在六条泳道上进行测试。
经电泳后,ELP作为参考泳道以显示电泳后得蛋白质。
其余五条泳道用于鉴定单克隆成分。
通过它(们)与抗血清,γ(IｇG)、α(ＩｇA)、μ(IgM)重链与κ、λ轻链(游离与非游离)反应与否进行鉴别、该技术简单、快速、图象清晰,易于解释结果。
四．方法学溯源自1930年由Tｉｓｅlius发现了移界电泳(moviｎg bounｄａry ｅectrophoresis),而后,这种技术得各种局限性已逐渐被区带电泳(zoｎe eｌecrｒophoresiｓ)所克服,区带电泳得条件与支持介质得选择就是电泳成败得关键。
通过免疫化学手段观察其电泳特性及抗原特性就是鉴定某一蛋白成分最好得方法,免疫固定电泳技术就是目前应用最广泛得方法之一。
五．仪器（一）型号:ＳＥBIA HＹＤRASYＳ(PＮ12１0)（二）分析与计算参数:1．处理量:约18个样本/小时2．所需样本量:10ul3．检验时间:约55分钟4．重复性:有良好得批内与批间重复性5．电泳参数:电压0—30０V(可选至３０00V)电流0—500mＡ功率0-１00Ｗ六．试剂及配套品（一）试剂1．HＹDＲＡGEＬ1 IF试剂盒HＹDＲAＧＥL 2IF试剂盒HYDRＡGEL 4IF试剂盒HYＤＲAGＥL 9 ＩＦ试剂盒（1）商标:ＳＥBIA（2）包装规格:10测试/2０测试／40测试/90测试（3）货号:ＰN４301/ＰN４３0２／PN4３04/ＰN４３０９2．脱色液(1) 商标:SＥＢIA(2)包装规格:Ｐａcｋfｏr １０×100ml(3) 货号:PＮ4５40(４) 成分:柠檬酸3、洗涤液（1）商标:ＳEBＩA（2）包装规格:Paｃk foｒ10×80ｍl（3）货号:ＰＮ4541（4）成分:叠氮钠4.稀释剂（1）商标:SEＢIA（2）包装规格:Paｃｋfｏr1×５ml（3）货号:PN458７（二）配套品:ＩＦ试剂抗体(1) 商标:SEBIA(2 ) 包装规格:Pａcｋfor 5×1mｌ(３)PＮ4３15七．操作步骤㈠开机,启动电泳仪。
琼脂糖凝胶电泳详解
一、简介琼脂糖凝胶电泳是以琼脂糖凝胶作为支持介质、利用核酸分子在电场中时的电荷效应和琼脂凝胶的分子筛效应，达到分离核酸混合物的一种电泳技术。
1、琼脂糖的分子筛效应1）琼脂糖（Agarose）来源于海洋红藻细胞壁，是一种大分子线性聚合物，基本结构是由D-半乳糖和3,6-anhydro-α-L-半乳糖通过β-1,4糖苷键结合而成的双糖单位在α-1,3糖苷键的连接下形成的一个长链。
琼脂糖具有亲水性，并几乎完全不存在带电基团，对敏感的大分子极少引起变性和吸附，是理想的惰性载体。
常用作电泳、层析等技术中的半固体支持物，用于生物大分子或小分子物质的分离和分析。
琼脂糖在水中一般加热到90℃以上溶解，温度下降到40℃左右形成良好的半固体状凝胶。
琼脂糖加热溶解后分子呈随机线团状分布，当温度降低时链间糖分子上的羟基通过氢键作用相连接，形成直径从50nm-200nm不等的孔径结构，孔径的大小由凝胶浓度控制。
琼脂糖凝胶中孔径的大小，影响了通过的核酸分子的大小以及通过的速度。
通常来说，琼脂糖凝胶的浓度越高，孔径越小，能够通过的核酸分子越小，迁移速度也越慢。
DNA片段越小，所需的胶浓度越大；而DNA 片段越长，所需的胶浓度则越小。
选择合适的胶浓度才能更好的分离片段。
2）琼脂的质量评价琼脂糖通常通过其凝胶强度和电内渗情况判断质量好坏。
强度越高，凝胶性能越好。
质量较好的琼脂糖强度通常在1200g/cm2以上，硫酸根含量在0.2%以下，电内渗在0.13以下。
琼脂糖是从琼脂中分离而来的。
琼脂由琼脂糖和琼脂果胶组成的，琼脂果胶是由许多更小的分子组成的异质混合物，和琼脂糖结构相似，但带硫酸根和羧基组分，凝胶能力差。
在琼脂糖制备过程中需要把琼脂果胶尽量去除，否则琼脂糖有可能存在极微量硫酸根和丙酮酸取代电离基团，附着到琼脂糖的多糖基质上，造成电内渗（EEO）。
电内渗会导致缓冲液中产生正电荷反向离子，它们向负极移动，从而造成与DNA反方向迁移的液流，使DNA的分离效果变差。
血清脂蛋白电泳原理和操作方法
血清脂蛋白电泳原理和操作方法血清脂蛋白电泳是一种常用的临床检验方法，用于检测血液中脂蛋白的含量和分布情况。
其原理是利用电场将血清中的脂蛋白分子按照其电荷和大小进行分离，进而通过电泳染色或免疫印迹等方法进行分析。
血清脂蛋白电泳的操作方法如下：1. 样本制备：首先，将待测血清标本离心分离清澈的血浆。
避免搅拌或摇晃，以防止脂蛋白在离心过程中发生聚集。
然后，取清澈的血浆进行进一步的操作。
2. 准备凝胶：将脂蛋白电泳所需的琼脂糖凝胶制备好。
通常使用琼脂糖凝胶浸润缓冲液来充分浸润凝胶，并确保凝胶的均匀性。
3. 样本加载：将预处理的血浆样本加载到琼脂糖凝胶孔中。
为了获得更好的分离效果，通常将血浆样本稀释以调节其浓度。
4. 电泳操作：将装有样品的琼脂糖凝胶板放置在电泳槽中。
然后，连接电极，以产生稳定的电场。
根据实验的需要，可以选择不同的电场条件，如电压和电流密度。
5. 电泳结束：在预定时间内进行电泳。
根据脂蛋白的电泳迁移率和分离效果，可以调整电泳时间。
6. 固定凝胶：电泳结束后，将凝胶板取出，用酸性醇溶液进行固定。
这可以确保蛋白质在凝胶上的位置固定，并防止蛋白质的迁移。
7. 染色或免疫印迹：固定后的琼脂糖凝胶可以选择染色方法或者进行免疫印迹。
染色方法可以直接显示脂蛋白的位置，免疫印迹可以使用抗体识别特定的脂蛋白。
总结起来，血清脂蛋白电泳是一种通过电场将血清中的脂蛋白分子分离的方法。
其操作步骤包括样本制备，凝胶制备，样本加载，电泳操作，电泳结束，凝胶固定，染色或免疫印迹等。
注意在操作过程中确保样本和凝胶的稳定性，以及调整电泳条件来获得最佳的分离效果。
免疫固定电泳操作SOP
免疫固定电泳操作规程一、项目名称免疫固定电泳（HYDRAGEL IMMUNOFIXATION）二、检验方法名称琼脂糖凝胶免疫固定电泳三、方法学原理血清蛋白电泳中出现的异常条带主要存在于β-球蛋白和γ-球蛋白区域，通常疑为单克隆蛋白质并且提示丙球蛋白血症。
为鉴别异常条带，可运用免疫固定技术。
免疫固定电泳是一种简单的技术，电泳后的蛋白质与相应抗体形成复合物和被固定在相应的位置上，通过下列四个步骤：1、蛋白质在琼脂糖凝胶内进行电泳分离。
2、电泳后已分离的蛋白质被固定并产生免疫沉淀：应用固定剂和抗血清加于凝胶表面的泳道上，并让固定剂和抗血清在凝胶内渗透扩散。
3、使用吸水纸和清洗将未沉淀的蛋白质去除，已被沉淀的蛋白质贮留在凝胶内。
4、将蛋白质染色，并将这些免疫沉淀区带的位置与蛋白质经电泳后观察到的异常蛋白区带进行比较。
为了精确识别单克隆区带，样品同时在六条泳道上进行测试。
经电泳后，ELP作为参考泳道以显示电泳后的蛋白质。
其余五条泳道用于鉴定单克隆成分。
通过它（们）与抗血清，γ(IgG)、α(IgA)、μ(IgM)重链和κ、λ轻链（游离和非游离）反应与否进行鉴别。
该技术简单、快速、图象清晰，易于解释结果。
四、方法学溯源自1930年由Tiselius发现了移界电泳（moving boundary eectrophoresis），而后，这种技术的各种局限性已逐渐被区带电泳（zone elecrrophoresis）所克服，区带电泳的条件和支持介质的选择是电泳成败的关键。
通过免疫化学手段观察其电泳特性及抗原特性是鉴定某一蛋白成分最好的方法，免疫固定电泳技术是目前应用最广泛的方法之一。
五、仪器（一）型号：SEBIA HYDRASYS (PN1210)（二）分析和计算参数：1、处理量：约18个样本/小时2、所需样本量：10ul3、检验时间：约55分钟4、重复性：有良好的批内和批间重复性5、电泳参数：电压0－300V（可选至3000V）电流0－500mA功率0－100W六、试剂及配套品（一）试剂1、HYDRAGEL 1 IF试剂盒HYDRAGEL 2 IF试剂盒HYDRAGEL 4 IF试剂盒HYDRAGEL 9 IF试剂盒（1）商标：SEBIA（2）包装规格：10测试/20测试/40测试/90测试（3）货号：PN4301/ PN4302/ PN4304/PN4309 2、脱色液（1）商标：SEBIA（2）包装规格：Pack for 10×100ml（3）货号：PN4540（4）成分：柠檬酸3、洗涤液（1）商标：SEBIA（2）包装规格：Pack for 10×80ml（3）货号：PN4541（4）成分：叠氮钠4、稀释剂（1）商标：SEBIA（2）包装规格：Pack for 1×5ml（3）货号：PN4587（二）配套品IF试剂抗体（1）商标：SEBIA（2）包装规格：Pack for 5×1ml（4）货号：PN4315七、操作步骤（一）开机，启动电泳仪。
实验七血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳
实验七血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳实验七血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳一、实验目的1、进一步掌握电泳的基本原理及凝胶电泳的原理。
2、熟悉琼脂糖凝胶电泳的特点和操作要点。
3、掌握正常人血浆脂蛋白的分类。
二、实验原理琼脂糖凝胶是由交替排列组成的直链多糖。
固体支持物的影响较少，故电泳速度快、区带整齐。
而且由于琼脂糖不含带电荷的基团，电渗影响很小，是一种良好的电泳材料，分离效果较好。
血清中脂类物质均与载脂蛋白结合成水溶性脂蛋白形式存在，各种脂蛋白所含载脂蛋白的种类及数量不同，相差很大。
因此，以琼脂糖凝胶为支持物，在电场中可使各种脂蛋白颗粒分开。
将血清脂蛋白用脂类染料苏丹黑（或油红）进行预染。
再将预染过的血清置于琼脂糖凝胶板上进行分离，分成三条区带，从负极到正极依次为（最浅）及α脂蛋白（比前此法应用于高脂蛋白血症的分型。
三、器材和试剂1、器材：电泳仪、电泳槽、离心机、水浴锅、染色盘、微量注射D-半乳糖和3,6电泳时，因为凝胶中含水量大β脂蛋白略深） L-半乳糖的残基通过氢键因而不同脂蛋白颗粒大小可以看到脂蛋白被98%-99%β脂蛋白脱水（），通电后，β脂蛋白（最深）、前，在原点处应无乳糜微粒。
器、滤纸、镊子剪刀、2cm*8cm玻璃片 2、试剂⑴巴比妥缓冲液（PH8.6）：称取巴比妥钠15.4g、巴比妥2.76g及 EDTA0.29g,加水溶解后，再加蒸馏水定容至1000ml（PH为8.6，离子强度0.075），作为电极缓冲液。
⑵苏丹黑染色液：将苏丹黑⑶凝胶缓冲液：称取三羟甲基甲烷（Nacl5.85g,用蒸馏水溶解后，稀释至⑷琼脂糖凝胶：称取琼脂糖50ml，在水浴中加热至沸，待琼脂糖完全溶解后，立即停止加热。
⑸新鲜血清（无溶血现象）四、操作步骤1、预染血清血清合后置于37℃水浴染色2、制备琼脂糖凝胶板波炉）中加热融化，用上，静置约半小时后凝固3、点加预染血清打孔器（在小玻璃片的两面固定两片小胶片）出，然后用胶片剥出长方小条凝胶。
血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳实验报告
血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳实验报告血清脂蛋白是一种由蛋白质和脂质组成的复合物，在人体中的生理功能主要包括运输脂质和调节胆固醇代谢等。
血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳是一种常用的分离血清脂蛋白的实验方法。
本实验旨在通过琼脂糖凝胶电泳的方式分离血清脂蛋白，从而了解不同脂蛋白的特征和分布情况。
一、实验原理琼脂糖凝胶电泳是一种利用琼脂糖凝胶的孔隙度分离分子的电泳方法。
血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳实验中，首先将血清样品加入琼脂糖凝胶管道中，然后进行电泳分离。
在电泳过程中，血清脂蛋白在琼脂糖凝胶孔隙中运动，由于不同脂蛋白的大小、密度和电荷等性质不同，所以它们在琼脂糖凝胶中的移动速度和分离程度也会不同。
二、实验步骤1.取适量琼脂糖凝胶，按照说明书制备琼脂糖凝胶管道。
2.将琼脂糖凝胶管道放置于电泳槽中，向孔道中注入TBE缓冲液。
3.取适量血清样品，加入琼脂糖凝胶管道中。
4.进行电泳实验，设置合适的电压和电流密度，在一定时间内进行分离。
5.取出琼脂糖凝胶，染色并进行照相。
三、实验结果在本实验中，我们分别对正常人血清和高脂血症患者血清进行了琼脂糖凝胶电泳实验。
实验结果显示，正常人血清中主要存在有高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）和极低密度脂蛋白（VLDL）等脂蛋白，而高脂血症患者的血清中，LDL含量较高，HDL含量较低。
四、实验分析血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳实验是一种快速、准确、简便的血清脂蛋白分离方法。
通过本实验，我们可以了解不同脂蛋白的特征和分布情况，有助于更好地了解血脂代谢的状况。
同时，本实验还可以用于临床诊断和治疗高脂血症等疾病。
血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳实验是一种重要的实验方法，可以用于分离不同脂蛋白、了解血脂代谢状况和临床诊断等方面。
在实验中需要注意操作规范、仪器设备维护和实验数据分析等方面，以确保实验结果的准确性和可靠性。
全自动琼脂糖凝胶电泳仪技术参数
1、电泳介质：琼脂糖凝胶
2、整套系统须为全自动分析系统：点样、电泳孵育、染色、脱色、烘干能在同一仪器中进行
▲3、电泳速度：≧100标本/小时
4、点样方式：机内自动点样、一次点样成功、无需重复点样
▲5、加样系统：全自动加样，采用微孔滤纸渗透加样方式加样，加样梳为一次性，避免交叉污染，且试剂盒内配备，无需另购
▲9、免疫固定电泳：可在电泳过程中，直接将抗体快速加在琼脂糖凝胶板上的血清中，5秒钟使抗体完全覆盖到血清上，抗体结合血清充分反映。操作简便。
▲10、尿蛋白电泳：可以按电荷量大小和分子量大小来排列两种方法检测。尿液不需要浓缩，最低检测量可以达15mg/L。投标时需提供尿蛋白电泳后胶片。
▲11、脑脊液电泳：应用酶标记抗血清进行免疫固定来检测、分辨脑脊液中的寡克隆区带，通过血清和脑脊液对照，电泳结果可直观看出患者中枢神经系统是否受到感染、血脑屏障是否受损。需提供与该仪器配套的原装试剂，并在投标时出具该试剂国家医疗器械进口注册证。
12、电脑部分：电脑为品牌机，CPU：P4,内存：2G，硬盘：500G，17寸液晶显示器，数据可联网。
13、分析软件：WINDOWS XP操作平台，具有中文分析软件系统，并能与医院计算中心联网。
14、扫描速度：≧100标本/分钟
15、售后服务：整机免费保修一年，终身维Байду номын сангаас。免费培训检验人员和工程师。
6、加样量：≦40ul/标本
▲7、检测项目：≧6项，并且都具有试剂项目注册证
8、可检测项目包括：血清蛋白、血红蛋白、尿蛋白（按分子量大小排列）、本周氏蛋白、脑脊液（等电聚焦法）、泪液、免疫固定、同工酶（LDH、CK-MB、ALP、CK-MB亚型）、糖化血红蛋白HbA1c、脂蛋白+Lp(a)、高分辨率电泳等；
血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳.
实验五血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳
[原理]血清脂蛋白经饱和乙酰苏丹黑B染色后，以琼脂糖凝胶为载体，在pH8.6
巴比妥缓冲液中电泳分离，各种脂蛋白将分成不同区带。
[器材]
1.玻片
2.水平式电泳仪
[试剂]
1.0.5%琼脂糖（Agarose）溶液：称取0.5g琼脂糖，加巴比妥缓冲液100ml，盛于三角烧杯中，置沸水浴中煮沸溶解，备用。
2.新鲜血清（无溶血）
3.pH8.6、I=0.075 巴比妥缓冲液:称取15.4g巴比妥钠，2.76g巴比妥，0.292gEDTA，以水溶解后加至100ml，调pH至8.6，4℃保存。
4.苏丹黑B染色液：苏丹黑B 100mg，异丙醇10ml，混合。
置37℃水浴使之充分溶解后，离心取上清液置室温备用。
[操作]
1. 制板
配制0.5%的琼脂糖或预先配好置4℃冰箱，用时置沸水溶解，再冷却到50℃～60℃，取约4ml琼脂糖迅速铺在玻璃片上，然后放上开槽器（注意：①开
槽放在中央，距一侧1.5cm处；②避免产生气泡），静置室温待凝固，把开槽器
小心取下，样品槽即制成。
2. 加样
取预染血清20 l加入样品槽（预染血清：血清0.2ml + 苏丹黑B染色液
0.02ml）
3. 电泳
将载有琼脂糖凝胶玻片（已加血清样品）放在电泳槽中，槽内倒入巴比妥缓
冲液，用四层纱布搭板，加样端接负极，电压120V，待最前端区带泳动至玻片
2/3处时可终止电泳，观察实验结果。
[参考值]
正常人血清脂蛋白可分出三条区带：
β脂蛋白（占55%，着色最深）
前β脂蛋白（占15%，着色最浅）α脂蛋白（占30～40%，着色居中）在原点处应无乳糜微粒可见。
血清蛋白电泳原理
血清蛋白电泳原理血清蛋白电泳是一种常见的生物化学分析技术，用于分离和定量血清中的蛋白质。
其原理基于蛋白质在电场中的迁移速度不同，从而实现分离。
下面将详细介绍血清蛋白电泳的原理。
1. 原理概述血清蛋白电泳是一种将血清中的蛋白质按照电荷、大小和形状进行分离的技术。
它基于蛋白质在电场中迁移速度不同的特性，通过将样品放置在凝胶上，利用电场对凝胶进行加速，使得不同大小、形状、电荷的蛋白质在凝胶上呈现出不同的迁移距离，从而实现了对血清中各种类型蛋白质的分离和定量。
2. 原理详解（1）凝胶制备血清蛋白电泳需要使用聚丙烯酰胺凝胶或琼脂糖凝胶作为载体。
这些凝胶具有多孔性结构，在加入样品后可以帮助样品进行分离。
（2）电泳条件血清蛋白电泳需要在一定的电场下进行，常用的电场强度为100-200V/cm。
在电泳过程中，凝胶和样品都需要浸泡在缓冲液中，缓冲液可以帮助维持pH值和离子浓度的稳定。
（3）分离机制血清蛋白电泳的分离机制基于蛋白质在电场中迁移速度不同的特性。
蛋白质分为阴离子、阳离子和中性三类。
在碱性条件下，蛋白质会带有负电荷，成为阴离子；在酸性条件下，蛋白质会带有正电荷，成为阳离子；而在等电点附近，则呈现出中性。
当样品被加入凝胶后，在电场作用下，不同大小、形状、电荷的蛋白质将呈现出不同的迁移距离。
一般来说，在聚丙烯酰胺凝胶上进行血清蛋白电泳时，大分子量的蛋白质会停留在凝胶上方，小分子量则会穿过凝胶，到达凝胶下方。
而在琼脂糖凝胶上进行血清蛋白电泳时，大分子量的蛋白质会停留在凝胶下方，小分子量则会穿过凝胶，到达凝胶上方。
（4）染色和定量血清蛋白电泳完成后，需要进行染色和定量。
通常使用染色剂共沉淀法或银染法进行染色。
其中，共沉淀法可以同时染色多种蛋白质，银染法则对少量样品有更好的灵敏度。
定量可以通过比较样品与标准品的带强度来实现。
标准品是一组已知浓度的蛋白质溶液，在血清蛋白电泳前需要进行校正。
3. 应用范围血清蛋白电泳广泛应用于临床诊断、科学研究和药物开发等领域。
血清蛋白琼脂糖凝胶电泳(agarose gel electrophoresis)
血清蛋白琼脂糖凝胶电泳(agarose gel electrophoresis)【原理】琼脂糖（agarose）是经过挑选，以质地较纯的琼脂（agar）作为原料而制成的。
琼脂在化学上是由琼脂糖和琼脂胶组成的复合物。
琼脂胶是一含有硫酸根和羟基的多糖，它具有离子交换性质，这种性质会给电泳及凝胶过滤以不良的影响。
琼脂糖是直链多糖，它由D－半乳糖和3,6－脱水－L－半乳糖的残基交替排列组成。
琼脂糖主要通过氢键而形成凝胶。
电泳时因凝胶含水量大（98－99%），近似自由电泳，因为固体支持物的影响少，故电泳速度快，区带整齐。
而且由于琼脂糖不含带电荷的基团，电渗影响很少，是一种较好的电泳材料，分离效果较好。
血清中脂类物质与血清载脂蛋白结合成水溶性的脂蛋白（lipoprotein）形式存在。
各种脂蛋白中所含载脂蛋白的种类及数量不同，各种脂蛋白颗粒大小也相差很大，因此，以琼脂糖凝胶为支持物，在电场中可使各种脂蛋白颗粒分离开来。
琼脂糖凝胶电泳分离血清蛋白方法简单。
将血清脂蛋白用脂类染料苏丹黑（或油红等）进行预染。
再将预染过的血清加样于琼脂糖凝胶板加样槽中，通电后可以看到脂蛋白向正极移动，并分离出几个区带。
正常人血清脂蛋白可出现三条区带，从阴极到阳极依次为β－脂蛋白（最深），前β－脂蛋白（最浅）及α－脂蛋白（比前β－脂蛋白略深些），在原点处应无乳糜微粒。
有时前β－脂蛋白也显示不出来。
琼脂糖主要通过氢键而形成凝胶。
电泳时因凝胶含水量大（98－99%），近似自由电泳，因为固体支持物的影响少，故电泳速度快，区带整齐。
而且由于琼脂糖不含带电荷的基团，电渗影响很少，是一种较好的电泳材料，分离效果较好。
血清中脂类物质与血清载脂蛋白结合成水溶性的脂蛋白（lipoprotein）形式存在。
各种脂蛋白中所含载脂蛋白的种类及数量不同，各种脂蛋白颗粒大小也相差很大，因此，以琼脂糖凝胶为支持物，在电场中可使各种脂蛋白颗粒分离开来。
琼脂糖凝胶电泳分离血清蛋白方法简单。
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【原理】
琼脂糖（agarose）是经过挑选，以质地较纯的琼脂（agar）作为原料而制成的。
琼脂在化学上是由琼脂糖和琼脂胶组成的复合物。
琼脂胶是一含有硫酸根和羟基的多糖，它具有离子交换性质，这种性质会给电泳及凝胶过滤以不良的影响。
琼脂糖是直链多糖，它由D－半乳糖和3,6－脱水－L－半乳糖的残基交替排列组成。
琼脂糖主要通过氢键而形成凝胶。
电泳时因凝胶含水量大（98－99%），近似自由电泳，因为固体支持物的影响少，故电泳速度快，区带整齐。
而且由于琼脂糖不含带电荷的基团，电渗影响很少，是一种较好的电泳材料，分离效果较好。
血清中脂类物质与血清载脂蛋白结合成水溶性的脂蛋白（lipoprotein）形式存在。
各种脂蛋白中所含载脂蛋白的种类及数量不同，各种脂蛋白颗粒大小也相差很大，因此，以琼脂糖凝胶为支持物，在电场中可使各种脂蛋白颗粒分离开来。
琼脂糖凝胶电泳分离血清蛋白方法简单。
将血清脂蛋白用脂类染料苏丹黑（或油红等）进行预染。
再将预染过的血清加样于琼脂糖凝胶板加样槽中，通电后可以看到脂蛋白向正极移动，并分离出几个区带。
正常人血清脂蛋白可出现三条区带，从阴极到阳极依次为β－脂蛋白（最深），前β－脂蛋白（最浅）及α－脂蛋白（比前β－脂蛋白略深些），在原点处应无乳糜微粒。
有时前β－脂蛋白也显示不出来。
琼脂糖主要通过氢键而形成凝胶。
电泳时因凝胶含水量大（98－99%），近似自由电泳，因为固体支持物的影响少，故电泳速度快，区带整齐。
而且由于琼脂糖不含带电荷的基团，电渗影响很少，是一种较好的电泳材料，分离效果较好。
血清中脂类物质与血清载脂蛋白结合成水溶性的脂蛋白（lipoprotein）形式存在。
各种脂蛋白中所含载脂蛋白的种类及数量不同，各种脂蛋白颗粒大小也相差很大，因此，以琼脂糖凝胶为支持物，在电场中可使各种脂蛋白颗粒分离开来。
琼脂糖凝胶电泳分离血清蛋白方法简单。
将血清脂蛋白用脂类染料苏丹黑（或油红等）进行预染。
再将预染过的血清加样于琼脂糖凝胶板加样槽中，通电后可以看到脂蛋白向正极移动，并分离出几个区带。
正常人血清脂蛋白可出现三条区带，从阴极到阳极依次为β－脂蛋白（最深），前β－脂蛋白（最浅）及α－脂蛋白（比前β－脂蛋白略深些），在原点处应无乳糜微粒。
有时前β－脂蛋白也显示不出来。
【操作】
1、预染血清血清0.2ml中加苏丹黑染色液0.2ml，混合置37℃水浴中染色30分钟，离心（2000转/分）约5分钟。
以除去悬浮于血清中染料沉渣。
2、制备琼脂糖凝胶板将已配制好的0.5%琼脂糖凝胶于沸水浴中加热融化，用吸管吸取凝胶溶液浇注在载玻片上，约3 ml。
静置半小时后凝固（天热时需延长，也可放入冰箱中数分钟以加速凝固）。
3、点样将剪好的滤纸条对折，以折边在距凝胶一端2cm处切一点样口。
将毛细管插入预染好的血清中，待吸入部分血清后，取毛细管使其有样品的一端靠于点样口端部，停靠3秒左右。
4、电泳将凝胶板平放入电泳槽中，使加样端接在阴极一侧，用四层滤纸或纱布做成“引桥”，敷于胶板的两端，各搭住凝胶板约1cm左右，“引桥”的另一端浸于电泳槽内的巴比妥缓冲液中。
接通电源，首先调节电流为3-4mA/凝胶板，电泳10－15分钟；然后调节电流为6-7mA/凝胶板，电泳30－40分钟，即可观察到分离的区带。
5、如果需要保留电泳图谱，可将电泳后的凝胶板（连同载玻片）放入清水中浸泡脱盐2小时，然后放烘箱（80℃左右）中烘干即可。
【试剂】
1、苏丹黑染色液将苏丹黑B加到无水乙醇中至饱和，摇荡使乙酰化。
用前过滤。
2、巴比妥缓冲液称取巴比妥钠15.4g、巴比妥2.76g及EDTA0.29g，加水溶解后再加蒸馏水至1000ml（pH为8.6，离子强度0.075），为电极缓冲液。
3、凝胶缓冲液取三羟甲基氨基甲烷1.212g、EDTA0.29g及NaCl5.85g，用蒸馏水溶解后，稀释至1000ml，pH为8.6。
4、琼脂糖凝胶称取琼脂糖0.45 g溶于50 ml凝胶缓冲液中，再加水50 ml。
在水浴中加热至沸，待琼脂糖完全溶解后，立即停止加热。
【注意事项】
1、电泳样品应为新鲜的空腹血清。
2、加热溶化琼脂时，须防止水份蒸发过多。
琼脂糖凝胶最好随用随制，以免凝胶表面干燥，影响分离效果。
3、制作凝胶板时琼脂糖浓度一般选用0.5%左右为宜，高于1%以上α－脂蛋白部分较紧密，β和前β－脂蛋白部分不够清晰；低于4.5%则凝固性较差，图谱不清。
4、点样口要大小适宜，边缘整齐、光滑，否则会影响电泳图谱。
5、在α－脂蛋白前若出现较浅区带，可列为前α－脂蛋白。
【正常参考范围】
α－脂蛋白20~30%
β－脂蛋白 20~30%
前β－脂蛋白 0~28%
乳糜微粒（-）。