生物测定方法
生物物质的检测方法
生物物质的检测方法
生物物质的检测方法主要包括以下几种：
1. 分光光度法：利用物质吸收、发射、散射等特性，通过测定样品对光的吸收、发射或散射的强度，来确定生物物质的含量。
2. 色谱法：将样品中的组分分离并定量分析。
常用的色谱方法包括气相色谱（GC）、液相色谱（HPLC）、超高效液相色谱（UHPLC）等。
3. 质谱法：将样品中的分子离子化，通过质谱仪进行质量分析和定性、定量分析。
常用的质谱方法包括质谱-质谱联用技术（GC-MS、LC-MS等）。
4. 核磁共振（NMR）：利用核磁共振现象，通过测量样品中核自旋的磁共振信号，来获取样品的结构和含量信息。
5. 生物传感器：利用生物感知元件与生物物质之间的特异性相互作用，将生物信号转化为测量信号，实现对生物物质的定性、定量检测。
6. 高通量测序：通过测定DNA或RNA的序列，来获取关于生物物质的信息，如基因组、转录组、蛋白质组等。
7. 免疫分析法：利用抗体与抗原（或抗原类似物）之间的特异性结合，来检测
生物物质的含量或活性。
常用的免疫分析方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫荧光法、免疫电化学法等。
总之，生物物质的检测方法多种多样，可根据不同的目的和要求选择不同的方法进行分析和测定。
生物利用度测定方法
生物利用度测定方法生物利用度测定是指评估生物种群资源的利用程度和生态系统的可持续利用能力的方法。
生物利用度测定的目的是为了科学合理地利用生物资源，保护生物多样性和生态环境。
下面将介绍几种常见的生物利用度测定方法。
一、物种多样性测定物种多样性是评估生物资源利用度的重要指标之一。
常用的物种多样性指标有物种丰富度、物种均匀度和物种多样性指数等。
物种丰富度反映了群落中不同物种的数量，物种均匀度反映了物种相对数量的均衡程度，物种多样性指数综合考虑了物种丰富度和均匀度的差异。
通过对不同生态系统的物种组成和特征进行调查和统计分析，可以评估不同区域或不同生态类型的生物资源的利用度。
二、种群数量测定种群数量是评估生物资源利用度和适应性的重要指标之一。
研究人员可以通过野外实地调查、捕捉和标记技术、DNA分析等方法测定不同生物种群的数量。
通过对种群数量的测定和动态变化的监测，可以评估生物种群资源的可持续利用能力和生态系统的稳定性。
三、生物估测方法生物估测是一种常用的生物利用度测定方法，通过对生物群落中个体数量、数量比例、种群密度等进行预测和估计，来评估生物资源利用度和适应性。
生物估测通常采用样方法、标记再捕法、适应性测量等方法。
通过对样方内个体数量和种群密度的测定，可以了解生物种群的状况和数量变化趋势，从而评估生物资源的利用度和适应性。
四、资源评估方法资源评估是一种综合性的生物利用度测定方法，通过对生态系统中各种生物资源的测定和调查，评估生态系统的物种组成和数量、生物种群的分布和数量、生物种群的生态功能和适应性等指标，来评估生物资源的利用程度。
资源评估可通过野外实地调查、样方法、生物标本的收集和鉴定等方法进行。
通过对生态系统的资源的测定和评估，可以全面地了解生物资源的利用度和生态系统的可持续利用能力。
以上介绍了几种常见的生物利用度测定方法，包括物种多样性测定、种群数量测定、生物估测方法和资源评估方法。
这些方法可以评估生物资源的利用程度和生态系统的可持续利用能力，为科学合理地利用生物资源和保护生态环境提供参考。
微生物量的测定方法
微生物量的测定方法
常见的微生物量测定方法包括：
1. 平皿计数法：将样品按一定稀释倍数加入琼脂平皿中，培养后通过计数器统计微生物在平皿上的数量，以此计算原样品中微生物的数量。
2. 滤膜计数法：将样品过滤后将滤膜放在富含营养的琼脂平板上培养，通过计数器统计滤膜上微生物的数量，以此计算原样品中微生物的数量。
3. 光密度法：利用菌落浑浊作用测定微生物规模大小的方法，称为“比色法”，并以光密度来表示菌落数量的多少。
4. 电极测定法：利用特定的氧化还原反应来测定微生物量，例如，生物化学需氧量（BOD）和化学需氧量（COD）。
5. 溶解氧测定法：利用溶解氧在水中的含量来推算微生物的存在量。
6. 分子生物学方法：利用PCR、DNA芯片等技术检测微生物数量，也可通过它们的遗传物质（如rRNA）来推算微生物的存在量。
体外生物测定法
体外生物测定法
体外生物测定法是一种常见的实验方法，用于评估化学物质对生物体的影响。
这种方法不仅应用广泛，而且非常重要，可用于药物研发、毒性测试以及环境监测等领域。
体外生物测定法是指在实验室中，通过对细胞、组织或器官的体外实验，来模拟真实生物环境下的反应过程。
这种方法可以避免动物实验的使用，减少对动物的伤害，并且更加快速和经济高效。
同时，体外生物测定法还可以提供更多关于药物或化学物质对生物体的毒性和效应的信息。
在体外生物测定法中，常用的实验对象包括细胞系、人体组织片、人工器官等。
通过给予待测物质，观察其对细胞或组织的生长、代谢和功能的影响，可以获得对其毒性的初步评估。
此外，还可以运用不同的体外生物测定法，如MTT法、细胞周期分析、细胞凋亡检测等，来深入研究药物或化学物质的作用机制。
体外生物测定法在药物研发过程中起到了非常重要的作用。
通过对新药候选化合物在体外的活性和毒性进行评估，可以帮助研究人员筛选出具有潜力的药物，并在早期阶段排除有不良效应的化合物。
这不仅可以减少动物实验的数量，还可以节约时间和成本。
此外，体外生物测定法还广泛应用于环境监测领域。
通过将环境样品与细胞或组织接触，观察其对细胞或组织的影响，可以评估环境中的污染物对生物体的毒性和危害程度。
这有助于及时掌握环境质量，并采取相应的防治措施。
总体而言，体外生物测定法是一种重要的实验方法，广泛应用于药物研发、毒性测试和环境监测等领域。
它不仅可以减少对动物的伤害，还能提供快速、经济高效的评估手段。
随着科学技术的不断发展，相信体外生物测定法将在未来发展中发挥更加重要的作用。
土壤微生物数量测定方法
土壤微生物数量测定方法土壤微生物是指生活在土壤中的微小生物，包括细菌、真菌、放线菌、古菌等。
土壤微生物在土壤的生物地球化学循环、有机质分解、养分转换和植物健康等过程中起着重要的作用。
因此，对土壤微生物数量的准确测定具有重要意义。
本文将介绍一些常用的土壤微生物数量测定方法。
1.瓶培法：将适量的土壤样品与适量的培养基混合，在37°C下培养约24小时，然后通过平板计数法或最凼稀释法进行测定。
2.膜过滤法：将土壤提取液通过特定孔径的膜过滤器滤过，然后将膜放置在培养基上进行细菌的生长，最后进行计数。
3.间接法：通过测定土壤样品的可培养细菌指标，如氧化还原酶、脱氢酶等的活性，从而推算出土壤中的细菌数量。
4.分子生物学方法：通过PCR扩增土壤DNA中的细菌基因，如16SrRNA基因，再通过测定PCR产物进行细菌数量的测定。
1.直接镜检法：直接在显微镜下观察土壤样品中的真菌，通过计数来估算真菌的数量。
2.平板计数法：将土壤样品均匀撒在培养基上，通过培养方法使真菌生长形成菌落，最后进行计数。
3.膜过滤法：与细菌数量测定相似，将土壤提取液通过膜过滤器滤过，然后将膜放置在适当的培养基上进行真菌的生长，最后进行计数。
4.分子生物学方法：通过PCR扩增土壤DNA中的真菌基因，如18SrRNA基因，再通过测定PCR产物进行真菌数量的测定。
1.直接镜检法：直接在显微镜下观察土壤样品中的放线菌，通过计数来估算放线菌的数量。
2.平板计数法：将土壤样品均匀撒在培养基上，通过培养方法使放线菌生长形成菌落，最后进行计数。
3.膜过滤法：与细菌和真菌数量测定类似，将土壤提取液通过膜过滤器滤过，然后将膜放置在适当的培养基上进行放线菌的生长，最后进行计数。
4.分子生物学方法：通过PCR扩增土壤DNA中的放线菌基因，如16SrRNA基因，再通过测定PCR产物进行放线菌数量的测定。
通过上述方法测定土壤中微生物的数量，可以了解土壤微生物对土壤生态系统功能的影响，并为土壤质量评价和科学合理利用提供依据。
生物量的测定方法
生物量的测定方法
有以下几种常见的生物量测定方法：
1. 直接测量法：直接将生物体进行称量或计数，如称重法、计数法等。
2. 尺度法：通过对生物体或其一部分的长度、体积、表面积等尺度进行测量，再根据预先建立的标准曲线或公式，计算出生物体的生物量。
3. 捕获回收法：对某一生境中的生物体进行捕获或采集，然后通过称重或计数等方法，估算该生境中所有生物体的生物量。
4. 化学分析法：通过将生物体或其部分进行化学处理，然后经过反应后生成的产物进行测量，从而计算出生物体的生物量。
5. 定标法：通过施加一定数量或浓度的标准物质于生物体，然后测量生物体与标准物质之间的关系，推算出实际生物体的生物量。
6. 间接测量法：通过测量与生物体生长或代谢有关的其他参数，如光合作用速率、呼吸速率等，再通过相关公式或模型计算出生物体的生物量。
需要注意的是，不同的生物体和研究目的可能需要采用不同的测量方法，以确保测量结果的准确性和可靠性。
测定微生物数量的方法
测定微生物数量的方法1.计数器测定法：即用血细胞计数器进行计数。
取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内，用显微镜观察计数。
由于计数室的容积是一定的(O.1mm3)，因而根据计数器刻度内的细菌数，可计算样品中的含菌数。
本法简便易行，可立即得出结果。
本法不仅适于细菌计数，也适用于酵母菌及霉菌孢子计数。
2、电子计数器计数法:电子计数器的工作原理是测定小孔中液体的电阻变化，小孔仅能通过一个细胞，当一个细胞通过这个小孔时，电阻明显增加，形成一个脉冲，自动记录在电子记录装置上。
该法测定结果较准确，但它只识别颗粒大小，而不能区分是否为细菌。
因此，要求菌悬液中不含任何碎片。
3、活细胞计数法常用的有平板菌落计数法，是根据每个活的细菌能长出一个菌落的原理设计的。
取一定容量的菌悬液，作一系列的倍比稀释，然后将定量的稀释液进行平板培养，根据培养出的菌落数，可算出培养物中的活菌数。
此法灵敏度高，是一种检测污染活菌数的方法，也是目前国际上许多国家所采用的方法。
使用该法应注意：①一般选取菌落数在30～300之间的平板进行计数，过多或过少均不准确；②为了防止菌落蔓延，影响计数，可在培养基中加入O．001％2，3，5一氯化三苯基四氮唑(TTC)；③本法限用于形成菌落的微生物。
广泛应用于水、牛奶、食物、药品等各种材料的细菌检验，是最常用的活菌计数法。
4、比浊法比浊法是根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量。
细菌悬浮液的浓度在一定范围内与透光度成反比，与光密度成正比，所以，可用光电比色计测定菌液，用光密度(OD值)表示样品菌液浓度。
此法简便快捷，但只能检测含有大量细菌的悬浮液，得出相对的细菌数目，对颜色太深的样品，不能用此法测定。
5、测定细胞重量法此法分为湿重法和干重法。
湿重法系单位体积培养物经离心后将湿菌体进行称重；干重法系单位体积培养物经离心后，以清水洗净放人干燥器加热烘干，使之失去水分然后称重。
此法适于菌体浓度较高的样品，是测定丝状真菌生长量的一种常用方法。
土壤微生物测定方法
土壤微生物测定方法
目前常用的土壤微生物测定方法主要包括直接计数法、培养法、DNA
分析法和生化方法等。
1.直接计数法：直接计数法是指通过显微镜观察和计数土壤中微生物
的数量。
这种方法简单直观，可以快速测定土壤中微生物的数量。
但是，
由于土壤微生物数量庞大，直接计数方法需要大量的样品和时间，且对操
作者的要求较高。
2.培养法：培养法是指通过将土壤样品接种在富含营养物质的培养基上，并在一定温度和湿度下培养一段时间，通过观察和计数可见的菌落来
测定土壤中微生物的数量和种类。
这种方法可以有效地测定土壤中常见的
细菌和真菌等，但是对于无法培养的微生物种类相对有限。
3.DNA分析法：DNA分析法是指通过提取土壤中微生物的DNA，并通
过PCR扩增和DNA测序等技术来测定土壤中微生物的种类和多样性。
这种
方法可以检测到所有存在的微生物，无论是否可以培养。
因此，DNA分析
法可以更全面地测定土壤中微生物的多样性和种类。
但是，这种方法对实
验条件和技术要求较高。
4.生化方法：生化方法是指通过测定土壤中微生物代谢产物的含量或
活性来测定土壤中微生物的数量。
例如，通过测定脲酶、葡萄糖酶、氧化
还原酶等土壤微生物常见的酶活性来评估微生物的活性和数量。
生化方法
可以快速测定土壤微生物的数量和活性，但是受土壤理化性质的影响较大。
总之，以上所述的方法各有优缺点，可以根据实际情况选择合适的方
法或多种方法相结合来测定土壤微生物的数量和多样性。
此外，测定方法
的选择还要考虑实验所需的样品数量、可行性和经济性等因素。
土壤微生物生物量测定方法
土壤微生物生物量测定方法
土壤微生物生物量的测定方法有很多种，一般可以分为直接和间接测定方法。
直接测定方法包括：
1. 水解法：将土壤样品经过水解处理，然后通过高密度离心和显微镜观察计数获得微生物生物量。
2. 利用滴定法：通过向土壤中添加抑制剂或适宜的滴定液，测定细菌和真菌的数量以确定生物量。
3. 融解法：将土壤样品与溶解剂混合，在特定温度下溶解土壤中的微生物，然后通过测定溶液中的生物量来计算土壤中的微生物生物量。
间接测定方法包括：
1. 培养基测定法：将土壤样品接种到特定的培养基中，利用培养基中微生物生长所需的营养物质来测定微生物生物量。
2. 脂肪酸测定法：通过提取土壤样品中的脂肪酸，并利用气相色谱仪测定来确定微生物的生物量。
3. 磷脂酸测定法：通过提取土壤中的磷脂酸，并利用色谱或质谱仪测定磷脂酸来估计微生物生物量。
这些方法各有优缺点，选择适合的方法需要考虑实验条件、样品处理的方便程度
和测定结果的准确性。
微生物数量的测定方法
微生物数量的测定方法微生物数量的测定方法微生物是一类微小的生物体，包括细菌、真菌、病毒等。
它们广泛存在于自然界中的土壤、水体、空气中，也存在于人体内外。
了解微生物的数量对于环境监测、食品安全、医学诊断等领域具有重要意义。
本文将介绍几种常用的微生物数量测定方法。
1. 直接计数法直接计数法是最直接、最常用的微生物数量测定方法之一。
它通过显微镜观察和计数来确定微生物的数量。
首先，将待测样品制备成适当的悬浮液，然后在显微镜下观察，并使用计数器进行计数。
这种方法适用于细菌和酵母等较大的微生物。
但是，由于显微镜观察需要较高的技术水平和时间，所以无法快速测量大量样品。
2. 培养法培养法是一种常用的微生物数量测定方法，它通过培养微生物并计数生长的菌落来确定数量。
首先，将待测样品制备成适当的培养基，然后在恰当的温度和湿度条件下培养一段时间。
培养基中的微生物会形成可见的菌落，通过计数菌落的数量来确定微生物的数量。
这种方法适用于大部分微生物，但是它需要一定的培养时间，并且某些微生物可能无法在常规培养基上生长。
3. 膜过滤法膜过滤法是一种常用的微生物数量测定方法，它通过将待测样品过滤到膜上，并将膜培养在适当的培养基上来确定数量。
首先，将待测样品通过特定孔径的过滤器过滤，然后将过滤后的膜放置在培养基上培养。
培养基中的微生物会在膜上形成可见的菌落，通过计数菌落的数量来确定微生物的数量。
这种方法适用于水样、空气样等液态和气态样品。
4. 分子生物学方法分子生物学方法是一种新兴且快速发展的微生物数量测定方法。
它通过检测和分析微生物DNA或RNA来确定数量。
常用的分子生物学方法包括聚合酶链反应（PCR）、实时荧光定量PCR（qPCR）等。
这些方法可以快速、准确地测定微生物的数量，并且可以检测到少量微生物。
但是，分子生物学方法需要一定的实验设备和技术，并且对样品预处理要求较高。
总结起来，微生物数量的测定方法有直接计数法、培养法、膜过滤法和分子生物学方法等。
生物测定(植物化学保护)
1.3 玻片浸渍法
步骤：
⑴贴双面胶：将双面胶带剪成2cm长，贴在载玻片的一端； ⑵粘虫：用小毛笔选取健康的3~5d龄雌成螨，并将其背 部贴在胶带上（注意螨足、触须及口器不要被粘着），每片粘 20~30头。 ⑶饲虫：放于干净塑料盒（或大培养皿）内，并放入湿棉 球保湿，加盖置于20~30℃温度下； ⑷镜检：经4h后，在双目解剖镜下逐个检查，如有死亡 个体应挑出弃去，重新粘上健康雌螨。
据试虫种类不同，主要方法有： A.将试虫（如黏虫、家蚕）直接浸入药液中，或将试
虫放在铜笼中，再浸液。 B.将试虫（如蚜虫）放入附有铜网底的指形管中(直径
2.5cm，长3.0cm)然后浸人药液中。 C.蚜虫、红蜘蛛及介壳虫等，可连同寄主植物一起浸
入药液。
1.2 浸渍法 Dipping Method
“后续”步骤 浸液一定时间后取出晾干，或用吸水纸吸去多余药液； 移入干净器皿中并提供饲料，置于处理前的饲养环境中； 隔一定时间（5h，24h或48h）观察记载死亡情况，计算 死亡率（或校正死亡率）求得致死中浓度，单位mg/L。
微量点滴仪
微量点滴仪
微量点滴仪
千分尺微量点滴器
毛细管点滴器
毛细管点滴器
毛细管点滴器
Burkard Hand Microapplicator
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
Burkard Auto Microapplicator Drop sizes from 0.1 to 1 µl and 1 µl to 10 µl in ten equal steps
BURKARD 公司产 POTTER 精密实验室喷雾塔
1.2 浸渍法 Dipping Method
原理： 直接将药液施于昆虫体表，测定杀虫药剂穿透表皮引
医院生物检测操作方法
医院生物检测操作方法
生物检测是一种用于检测生物体内特定生物标志物或生物分子的技术。
对于医院生物检测操作方法，一般包括以下步骤：
1. 采样：首先需要采集样本，可以是血液、尿液、唾液、组织样本等。
采样的方式需要根据具体检测的生物标志物而定。
2. 样本处理：采集到的样本需要进行简单的处理，如离心、过滤、离心、去除杂质等，以便获取纯净的生物标志物。
3. 分离和纯化：通过离心、柱层析、电泳等方法，将目标生物标志物从样本中分离出来，并且将其纯化。
4. 测定：使用合适的生物检测方法（如酶联免疫吸附试验、荧光定量PCR、质谱等）对生物标志物进行测定，以获取其浓度或活性等信息。
5. 数据分析：对测定结果进行数据处理和分析，得出样本中生物标志物的浓度或活性信息。
6. 结果解读：根据数据分析结果，对样本中的生物标志物进行解读，判断其是否存在异常或疾病状态。
以上是一般医院生物检测的操作方法，具体操作步骤会根据不同的检测项目和方法而有所差异。
在进行生物检测操作时，需要严格遵守操作规程和安全操作规范，以确保检测结果的准确性和可靠性。
微生物群落测定方法及其原理
微生物群落测定方法及其原理
微生物群落指的是在一个特定环境条件下生长的微生物数量和
种类的总体。
测定微生物群落可以帮助我们了解微生物的分布、数量和种类，进一步探究微生物在特定环境中的生态学和生理学特性。
以下是几种常见的微生物群落测定方法及其原理：
1. 培养基法
培养基法是最常用的微生物群落测定方法之一。
其原理是将样本接种到含有特定营养成分的培养基上，然后放置在适宜的环境条件下（如温度、pH等），促使微生物生长繁殖。
数天后，可以观察到培养皿上出现的菌落，然后再进行菌落计数和种类鉴定。
2. 电子显微镜法
电子显微镜法是一种高分辨率的显微镜技术，可用于直接观察微生物的形态和数量。
该方法需要先将样品进行处理（如固定、染色等），然后用电子显微镜观察样品中的微生物。
由于电子显微镜的分辨率非常高，因此可以观察到微生物的形态、大小、结构和数量等细节。
3. PCR法
PCR法是一种基于DNA扩增的技术，可用于测定微生物群落中不同种类的微生物数量。
该方法需要先设计一组引物，使其能够特异性地扩增出目标微生物的DNA片段，然后用PCR反应进行扩增。
扩增后的DNA片段可以通过凝胶电泳等方法进行定量和鉴定。
4. 流式细胞术
流式细胞术是一种可用于快速测定微生物数量和种类的技术。
该
方法通过将样品中的微生物单个分离，然后在流式细胞术仪中进行检测。
在检测过程中，微生物会通过激光束被逐个扫描，然后通过荧光染色等方式进行定量和鉴定。
总之，不同的微生物群落测定方法各具优缺点，可以根据具体研究目的和需求选择合适的方法进行测定。
生物量测定方法
⑵树冠圆满度是冠幅与冠长之比。用以表明树冠的圆满程度，此值愈大愈圆满，反之而树冠狭长。
⑶树冠投影比是冠幅与胸径之比。用以表明树木营养面积的相对大小，此值愈大则树木占有的相对空间愈大。
上述这些因子在枝叶生物量测定、估计及分析比较中起着较大的辅助作用。而且，这些因子与胸径、树高等测树因子之间有着密切的相关关系，这为利用测树因子直接估测树木生物量提供了依据。
与材积测定相比，生物量测定的对象更为复杂，测定的部分也多，因而使得生物量的测定工作即复杂又困难。但是树木生物量与树木胸径、树高等测树因子之间也有着密切的关系，这些关系也为树木生物量测定提供了依据。在树木生物量测定中，树冠量的大小与形状对枝、叶量的多少有着显着的影响，因此，在实际工作中，要研究反映冠形和冠量的因子，常用的因子有冠长率、树冠圆满度、树冠投影比等因子，这些因子的意义如下：
（11-11）
据此，可以计算出所有样品的绝干含水率，并计算出平均绝干含水率后利用（11-7）式计算各部分的干重。
(2).枝、叶重量测定方法
测定林木枝、叶生物量有两种主要方法。一种标准枝法；另一种方法是全称重法。
①标准枝法
所谓标准枝法是指在树木上选择具有平均枝基径与平均枝长的枝条，测其枝、叶重用于推算整株树枝、叶的重量。根据标准枝的抽取方式，该法又可分为：平均标准枝法和分级标准枝法。
第二步：样方的垂直区划由地表向下划分层次，各层的厚度可以不相等，上层较薄（10—15cm），下面的层可较厚（30—50cm）。各层的编号由上而下分别为I、II…V…。
b.根的分级
按直径的粗细将根分为五级，每级的距离和名称见表11-4，中根（大于0.5cm）以上全部称重，细根（小于0.2cm）及小根（0.2-0.5cm）其重量虽不大但数量极多，很容易遗漏，可于样方内建一定大小的土柱，在土柱内仔细称量这两类根的重量。
生物检验方法
生物检验方法
生物检验方法是用于确定生物体内特定物质的存在、浓度或活性的方法。
常用的生物检验方法包括：
1. 免疫测定法：基于抗原和抗体的特异性结合反应原理，常见的免疫测定方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、放射免疫
测定法（RIA）等。
2. 酶测定法：基于酶对底物的催化作用产生可测定的信号，常见的酶测定方法包括酶活性测定、酶标记技术等。
3. 核酸检测法：用于检测DNA或RNA序列的存在与否，常
见的核酸检测方法包括聚合酶链反应（PCR）、南方杂交等。
4. 细胞培养法：将待测生物样品或细胞培养在适宜的培养基中，观察生长情况、细胞形态等进行检测。
5. 荧光显微镜法：利用荧光染料或荧光蛋白对生物体进行显微观察或定量分析。
6. 电泳法：利用电场将生物分子（如DNA、蛋白质）根据质
量或电荷性质进行分离和分析。
7. 微生物检验法：用于检测食品、水质等中的微生物污染和致病菌的存在。
8. 生物传感器法：利用生物元件（如酶、抗体、细胞等）和传
感器相结合，实时检测生物体内特定物质的变化。
以上仅为常见的生物检验方法，随着科技的不断进步和方法的发展，还会出现新的生物检验方法。
测定生物量的方法
测定生物量的方法
测定生物量的方法是一项重要的生物学实验技术，常用于生态学、农学、林学、水产学等领域的研究。
以下是几种常用的测定生物量的方法：
1. 直接称重法：将样品从生物群落中随机采集，去除多余的部分，称量后计算生物量。
2. 面积法：对于植物生物量的测定，可以使用面积法。
在样地
内选定一个面积，将面积内的所有植物进行测定，计算植物生物量。
3. 标记重捕法：将样品中随机选择一部分进行标记，然后将其
放回生境，等待一段时间后再次采集样品，并检查标记的比例，计算生物量。
4. 估算法：对于大型生物样品的测定，可以使用估算法。
根据
体积、长度、重量等测定参数，进行推算得出生物量。
以上是测定生物量的几种常用方法，实验人员可根据实际情况选择合适的方法进行生物量的测定。
- 1 -。
生物物质的检测方法
生物物质的检测方法生物物质的检测方法是指对生物体内产生的各种物质进行检测和分析的方法。
生物物质包括蛋白质、核酸、多糖、脂类等多种有机物质。
这些物质对于维持生物体的生命活动和执行生物功能至关重要，因此研究和检测生物物质对于了解生物体的结构和功能起着重要的作用。
下面将介绍几种主要的生物物质检测方法。
1.分光光度法：分光光度法是一种根据化学物质对特定波长的光吸收的特性来测定浓度的方法。
通过测量样品溶液对特定波长光的吸收程度，可以推测出样品中所含物质的浓度。
分光光度法在生物学实验中广泛应用于蛋白质、核酸等生物物质的测定。
2.高效液相色谱法：高效液相色谱法是一种利用液相色谱技术分离和分析物质的方法。
它通过将待测样品溶解在流动相中，在高效液相色谱柱上进行一系列色谱分离，并通过检测器测定各个成分的浓度。
该方法广泛应用于生物样品中蛋白质、核酸、多糖等生物物质的分析。
3.质谱法：质谱法是一种通过测量物质的质量/电荷比来确定其结构和组成的方法。
质谱法可以用来分析从有机化合物到生物分子如蛋白质、核酸等各种化合物。
质谱法主要包括质谱仪的使用以及样品的制备和分离。
质谱法在生物物质的检测和研究中发挥着重要的作用。
4.聚合酶链反应（PCR）：PCR是一种体外扩增DNA序列的方法，可以快速、准确地从少量DNA样本中扩增出大量特定片段。
PCR技术在生物学研究中被广泛应用于DNA的测序、基因突变检测、基因表达分析等诸多方面。
5.凝胶电泳法：凝胶电泳法是一种常用的分离和分析生物大分子（如DNA、RNA、蛋白质）的方法。
它利用电场作用，将待检测样品中的分子按照大小和电荷进行分离，从而得到目标物质的相对浓度和分子量信息。
凝胶电泳法广泛用于生物物质的分离纯化、分子量测定以及PCR产物的检测等。
6.酶联免疫吸附法（ELISA）：酶联免疫吸附法是一种通过特异性抗体与待检测物质结合并利用酶的催化作用来测定物质浓度的方法。
ELISA技术广泛用于蛋白质、多糖等生物物质的检测和分析，特别适用于体外诊断和生物学研究领域。
微生物生长测定方法
微生物生长测定方法
常用测定微生物生长的方法有：
1)、称干重法。
可用离心法或过滤法测定。
优点：可适用于一切微生物，缺点：无法区别死菌和活菌。
2)、比浊法。
原理：由于微生物在液体培养时，原生质的增加导致混浊度的增加，可用分光光度计测定。
优点：比较准确。
3)、测含氮量，大多数微生物的含氮量占干重的比例较一致，根据含氮量再乘以6。
25即可测得其粗蛋白的含量。
4)、血球计数板法。
优点：简便、快速、直观。
缺点：结果包括死菌和活菌。
5)、液体稀释法。
对未知菌样作连续的10倍系列稀释，经培养后，记录每个稀释度出现生长的试管数，然后查MPN表，再根据样品的稀释倍数就可计算其中的活菌含量。
优点：可计算活菌数，较准确。
缺点：比较繁琐。
6)、平板菌落计数法。
取一定体积的稀释菌液涂布在合适的固体培养基，经培养后计算原菌液的含菌数。
优点，可以获得活菌的信息。
缺点：操作繁琐，需要培养一定时间才能获得，测定结果受多种因素的影响。
生物利用度测定方法
生物利用度测定方法
生物利用度是指生物对资源的利用效率，即能从资源中获取的能量或营养物质的比例。
以下是常用的生物利用度测定方法：
1. 筛选实验：通过将生物置于特定的环境条件下，如不同类型的饲料或资源，观察其对不同资源的摄食量和摄食频率，并计算消耗或利用的能量或营养物质。
2. 代谢测定：通过测量生物排泄物中消耗的能量或营养物质的量来估计生物对资源的利用效率。
常用的方法是测量尿液和粪便中的能量和物质含量，并与饮食中的能量和物质含量进行比较。
3. 形态测定：通过测量生物生长或生殖的速度和效率来评估其对资源的利用效率。
例如，测量动物体长或重量的增长率，或观察植物种子的产量和品质。
4. 分析化学方法：通过分析生物体内的化学成分和组成，如蛋白质、碳水化合物、脂肪等，以及其在饮食中的含量和消耗量，来计算生物对资源的利用效率。
5. 同位素追踪方法：通过标记生物体内的特定同位素，如稳定同位素15N或
13C，追踪其在食物链中的转移和转化过程，从而评估生物对资源的利用效率。
这些方法可以单独或结合使用，根据具体的研究对象和目的选择适当的测定方法。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
生长量测定法体积测量法：又称测菌丝浓度法。
通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。
方法是，取一定量的待测培养液（如10毫升）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如5分钟）和转速（如5000 rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。
菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。
这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。
称干重法：可用离心或过滤法测定。
一般干重为湿重的10-20%。
在离心法中，将一定体积待测培养液倒入离心管中，设定一定的离心时间和转速，进行离心，并用清水离心洗涤1-5次，进行干燥。
干燥可用烘箱在105℃或100℃下烘干，或采用红外线烘干，也可在80℃或40℃下真空干燥，干燥后称重。
如用过滤法，丝状真菌可用滤纸过滤，细菌可用醋酸纤维膜等滤膜过滤，过滤后用少量水洗涤，在40℃下进行真空干燥。
称干重发法较为烦琐，通常获取的微生物产品为菌体时，常采用这种方法，如活性干酵母（activity dry yeast, ADY）,一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。
比浊法：微生物的生长引起培养物混浊度的增高。
通过紫外分光光度计测定一定波长下的吸光值，判断微生物的生长状况。
对某一培养物内的菌体生长作定时跟踪时，可采用一种特制的有侧臂的三角烧瓶。
将侧臂插入光电比色计的比色座孔中，即可随时测定其生长情况，而不必取菌液。
该法主要用于发酵工业菌体生长监测。
如我所使用UNICO公司的紫外-可见分光光度计，在波长600nm 处用比色管定时测定发酵液的吸光光度值OD600，以此监控E.Coli的生长及诱导时间。
菌丝长度测量法：对于丝状真菌和一些放线菌，可以在培养基上测定一定时间内菌丝生长的长度，或是利用一只一端开口并带有刻度的细玻璃管，到入合适的培养基，卧放，在开口的一端接种微生物，一段时间后记录其菌丝生长长度，借此衡量丝状微生物的生长。
微生物计数法血球计数板法:血球计数板是一种有特别结构刻度和厚度的厚玻璃片，玻片上有四条沟和两条嵴，中央有一短横沟和两个平台，两嵴的表比两平台的表面高0.1 mm，每个平台上刻有不同规格的格网，中央0.1 mm2面积上刻有400个小方格。
通过油镜观察，统计一定大格内微生物的数量，即可算出1毫升菌液中所含的菌体数。
这种方法简便，直观，快捷，但只适宜于单细胞状态的微生物或丝状微生物所产生的孢子进行计数，并且所得结果是包括死细胞在内的总菌数。
染色计数法：为了弥补一些微生物在油镜下不易观察计数，而直接用血球计数板法又无法区分死细胞和活细胞的不足，人们发明了染色计数法。
借助不同的染料对菌体进行适当的染色，可以更方便的在显微镜下进行活菌计数。
如酵母活细胞计数可用美蓝染色液，染色后在显微镜下观察，活细胞为无色，而死细胞为蓝色。
比例计数法：将已知颗粒（如霉菌孢子或红细胞）浓度的液体与一待测细胞浓度的菌液按一定比例均匀混合，在显微镜视野中数出各自的数目，即可得未知菌液的细胞浓度。
这种计数方法比较粗放。
并且需要配制已知颗粒浓度的悬液做标准。
液体稀释法：对未知菌样做连续十倍系列稀释，根据估计数，从最适宜的三个连续的10倍稀释液中各取5毫升试样，接种1毫升到3组共15只装培养液的试管中，经培养后记录每个稀释度出现生长的试管数，然后查最大或然数表MPN（most probably number）得出菌样的含菌数，根据样品稀释倍数计算出活菌含量。
该法常用于食品中微生物的检测，例如饮用水和牛奶的微生物限量检查。
平板菌落计数法：这是一种最常用的活菌计数法。
将待测菌液进行梯度稀释，取一定体积的稀释菌液与合适的固体培养基在凝固前均匀混合，或将菌液涂布于已凝固的固体培养基平板上。
保温培养后，用平板上出现的菌落数乘以菌液稀释度，即可算出原菌液的含菌数。
一般以直径9cm的平板上出现50-500个菌落为宜。
但方法比较麻烦，操作者需有熟练的技术。
平板菌落计数法不仅可以得出菌液中活菌的含菌数，而且同时将菌液中的细菌进行了一次分离培养，获得了单克隆。
试剂纸法：在平板计数法的基础上，发展了小型商品化产品以供快速计数用。
形式有小型厚滤纸片，琼脂片等。
在滤纸和琼脂片中吸有合适的培养基，其中加入活性指示剂2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC，无色）待蘸取测试菌液后置密封包装袋中培养。
短期培养后在滤纸上出现一定密度的玫瑰色微小菌落与标准纸色板上图谱比较即可估算出样品的含菌量。
试剂纸法计数快捷准确，相比而言避免了平板计数法的人为操作误差。
膜过滤法：用特殊的滤膜过滤一定体积的含菌样品，经丫叮橙染色，在紫外显微镜下观察细胞的荧光，活细胞会发橙色荧光，而死细胞则发绿色荧光。
生理指标法：微生物的生长伴随着一系列生理指标发生变化，例如酸碱度，发酵液中的含氮量，含糖量，产气量等，与生长量相平行的生理指标很多，它们可作为生长测定的相对值。
测定含氮量：大多数细菌的含氮量为干重的12.5%，酵母为7.5%，霉菌为6.0%。
根据含氮量×6.25，即可测定粗蛋白的含量。
含氮量的测定方法有很多，如用硫酸，过氯酸，碘酸，磷酸等消化法和Dumas测N2气法。
Dumas测N2气法是将样品与CuO混合，在CO2气流中加热后产生氮气，收集在呼吸计中，用KOH吸去CO2后即可测出N2的量。
测定含碳量：将少量（干重0.2-2.0 mg）生物材料混入1毫升水或无机缓冲液中，用2毫升2%的K2Cr2O7溶液在100 0C下加热30分钟后冷却。
加水稀释至5毫升，在580nm的波长下读取吸光光度值，即可推算出生长量。
需用试剂做空白对照，用标准样品做标准曲线。
还原糖测定法：还原糖通常是指单糖或寡糖，可以被微生物直接利用，通过还原糖的测定可间接反映微生物的生长状况，常用于大规模工业发酵生产上微生物生长的常规监测。
方法是，离心发酵液，取上清液，加入斐林试剂，沸水浴煮沸3分钟，取出加少许盐酸酸化，加入Na2S2O3临近终点时加入淀粉溶液，继续加Na2S2O3至终点，查表读出还原糖的含量。
氨基氮的测定：方法是，离心发酵液，取上清液，加入甲基红和盐酸作指示剂，加入0.02N 的NaOH调色至颜色刚刚褪去，加入底物18%的中性甲醛，反应数刻，加入0.02N的使之变色，根据NaOH的用量折算出氨基氮的含量。
根据培养液中氨基氮的含量，可间接反映微生物的生长状况。
其他生理物质的测定：P，DNA，RNA，ATP，NAM（乙酰胞壁酸）等含量以及产酸，产气，产CO2（用标记葡萄糖做基质），耗氧，黏度，产热等指标，都可用于生长量的测定。
也可以根据反应前后的基质浓度变化，最终产气量，微生物活性三方面的测定反映微生物的生长。
如我所在BMP-2的发酵生产上，随时监测溶氧量的变化和酸碱度的变化，判断细菌的长势。
商业化快速微生物检测法：微生物的检测，其发展方向是快速，准确，简便，自动化，当前很多生物制品公司利用传统微生物检测原理，结合不同的检测方法，设计了形式各异的微生物检测仪器设备，正逐步广泛应用于医学微生物检测和科学研究领域。
例如：1、抗干扰培养基和微生物数量快速检测技术结合解决了传统微生物检测手段不能解决的难题，为建立一套完整的抗干扰微生物检测系统奠定了坚实的基础。
中科院广州分院合作产业处提供的抗干扰微生物培养基，新型生化鉴定管，微生物计数卡，环境质量检测试剂盒等，可方便的用于多项检测。
2、BACTOMETER 全自动各类总菌数及快速细菌检测系统可以数小时内获得监测结果，样本颜色及光学特征都不影响读数，对酵母和霉菌检测同样高度敏感原理是利用电阻抗法（IMPEDANCE TECHNOLOGY）将待测样本与培养基置于反应试剂盒内，底部有一对不锈钢电极，测定因微生物生长而产生阻抗改变。
如微生物生长时可将培养基中的大分子营养物经代谢转变为活跃小分子，电阻抗法可测试这种微弱变化，从而比传统平板法更快速监测微生物的存在及数量。
测定项目包括总生菌数，酵母菌，大肠杆菌群，霉菌，乳酸菌，嗜热菌，革兰氏阴性菌，金黄色葡萄球菌等。
用分光光度计测微生物的OD值为什么要把波长设为600nm这个波长其实只是针对浊度，而分光光度计在600nm处对浊度的反应比较灵敏。
测吸收峰的实际意义并不大，比如LB摇瓶培养过夜的大肠杆菌，其实在400多nm处的吸收最大，但那很可能是培养液的吸收峰，我问过某几个微生物杂志关于菌种鉴定等方面的资深审稿人（事实上我们在一个办公室），他说凡是文章里用测吸收峰来确定测浊度的波长，他都会退稿的。
什么是OD600啊？OD600指的是某种溶液在600nm波长处的吸光值。
通过吸光值的定义可以知道，吸光值正比于溶液中的吸光物质的浓度。
三楼说的仅仅是这个参数的一个应用，那就是利用细菌的吸光来测量细菌培养液的浓度，从而估计细菌的生长情况。
比如，测量细菌培养液在600nm出的吸光值，得到的OD600数值如果在0.6-0.8之间，表明细菌处于旺盛生长的对数生长期，OD600>3表明细菌已经饱和等。
OD600还有别的用途，比如浓度测定、酶活测定等。
OD600是指菌体细胞密度.监测细菌的生长情况,可以通过测OD600来监测细菌的生长比较好的时期是在OD600为1时,此时可以进行转代等研究在细菌的培养中,OD600超过0.8就要稀释培养液!一般大肠杆菌菌液的密度是多少？取决于你的培养基、培养温度、培养时间和通气量（如为摇床，则为转速）等多方面条件，很难说的。
以600nm光密度记，一般摇床培养12小时，LB液体培养基，OD600可以达到2-3，但是在发酵馆做高密度培养，能做到40-60个OD，这差距可是相当的大。
为什么采用560nm波长测定酵母菌悬液的光密度？采用560nm波长测定酵母菌悬液的光密度？如果在实验中需要测定大肠杆菌生长的0D值，你将如何选择波长?其实这个波长也不是绝对的，我们也有用过460 nm，600 nm等。
一般来说测量光密度是用来测量浊度，通过浊度来表示菌的浓度。
那么这个波长可以选择和菌液比较相似的颜色，这就和培养基、菌本身的颜色等等都有关系。
比如在LB培养基培养的大肠杆菌一般可以用600 nm左右，但你用560 nm也无不可。
另外这和仪器也有关系，最好是选择当前仪器能测量得比较准的那个范围的波长。
测OD值方法总结请问怎么测OD值啊,用紫外分光光度能测吗谢谢各位高手根据测OD时光的波长，波长在紫外范围就能够测，如果不在，就不能测量。
非常感谢细履平沙.哪位能说的具体一点啊,我想测枯草芽孢杆菌的OD,我不太知道是在多少nm下测,我看过一些文献,上面说细菌大概600nm,还是我自己摸索吸收波长啊?另外是测吸光度还是透光率啊,空白用培养基做吗.请高人指点,谢谢了.一般测菌体密度的OD的波长范围是580nm-660nm我们那会儿测的(枯草芽孢杆菌)用600nm,已经属于可见光区空白如用水做,需要离心洗涤菌体,空白如用不接种的培养基做就不需要洗涤,但是不接种的培养基要和接种的同时培养,以求条件一致最后注意如果OD大于2.0,一般要稀释后再测,因为OD太大了,分光光度计的灵敏度就会显著降低一般都测吸光值，而且最好是整个实验过程中，保持发酵液或菌体的稀释倍数一致，吸光值与稀释倍数不一定成正比，可保证整个实验点有可比性一般OD值在控制在0 .1-0.4最好，在这个区内的值就可靠，最好不要超过1.0取值的时候要连续读数，重复3次的数最好。