最新高效液相色谱法测丹参酮含量汇编

高效液相色谱测定丹参酮ⅡA含量

【原理】利用各组分在两相中的分配系数的不同而获得分离。

反相色谱柱；棕色瓶（25ml，【仪器与试剂】1.仪器：液相色谱仪；微量注射器；C

18

50ml）；吸量管（2ml）；超神提取器。

2.试剂：甲醇（色谱纯）；蒸馏水。

3.试药：丹参酮ⅡA对照品，单身药材。

【实验内容】

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（73：27）为流动相；检测波长为270 nm，理论塔板数按丹参酮ⅡA峰计算应不低于2000.

对照品溶液的制备取丹参酮ⅡA对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加甲醇制成每1ml含16.25ug的溶液，即得。

供试品溶液的制备取本品20片，精密称定，研细，精密称定，置具塞棕色瓶中，精密加入甲醇100 ml，密塞，称定重量，超声处理15分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，置棕色瓶中，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。

【实验数据及处理】

运用外标法定量分析，分别精密量取一定量的对照品和试样，分别进样相同体积的对照品溶液和试样溶液，在完全相同的色谱条件下进行色谱分析，测的峰面积，用下式可以计算出供试品的浓度。

C供/C对=A供/A对 => C供=（A供/A对）*C对

20片总重量：0.6025g

C对=16.25μg/ml

A供=2999.47（mv/sec）

A对=1088.09（mv/sec）

C供=（A供/A对）*C对

=（2999.47/1088.09）*16.25

=44.80μg/ml

W（%）=（M丹参酮ⅡA/M药材）×100%

=（44.80×10-6g/0.6025g）×100%=0.744% 20片复方丹参片中含丹参酮ⅡA量：4.48mg。

每片含丹参酮ⅡA量：0.224mg。