抗生素效价测量仪

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基于DSP的智能化青霉素效价快速测量仪

基于DSP的智能化青霉素效价快速测量仪
维普资讯
20 0 6正
仪 表 技 术 与 传 感 器
I s u n T c nq e a d S n o n t me t e h iu n e s r r
2 o 06
No.0 1
第 1 0期
基 于 D P的智能 化 青霉 素效 价快 速 测 量仪 S
关键 词 :S ; 霉素 ; DP青 离子敏 场效应管传感 器; 效价 ; 测量仪
中图分类号 :P 1 T 22 文献标识码 : B 文章 编号 :02 8 120 )0 0 3 0 10 —14 (06 1 —0 1 — 2
F s n el e tTe tr o e ii i ln e Ba e n DS a tI tl g n se fP n cl n Vae c s d o P i l
d t删 iain. h s 啪 e t ae nT 2 L 2 0 A D P c i i a d aeb o k da rm s ie u .t s h mai crut ar ms ee n t T e i t 0 nr n s d o M3 0 F 4 7 S hp, sh r w r lc i ga Wa gv n o tI c e t i i d g a b t s c c i o e srs a mc s e e d s n d I h mai a rm f P w t C tr c i ut sd s g e . t s f a e man f w h r fs n 0 i l p e s w r e i e . t s e t d g a o i L D i e a ecr i e i d I ot r i o c at g sc ci DS h n f c wa n s w l
Ab虹 c: oe iei n i t met a ee pd Iue nsniv e fc tnio[ F T a s esro pncl sa tA nv1n l etn r n ws vl e . sdi - si fl eetr st I E ]si no f eiln tl s u d o g t o e tei d a sr S ts r ii

抗生素效价的测定方法

抗生素效价的测定方法

抗生素效价的测定方法1. 磁敏感性法:该方法是将细菌和抗生素共同培养在琼脂平板上,然后在琼脂平板的一侧放置磁性探针,通过磁力对菌落的影响,测定抗生素效价。

这种方法操作简单,结果可重复性好。

2. 微量滴定法:该方法是将不同浓度的抗生素加入含有微生物的培养基中,控制每次加量相同,直至培养基中出现明显的抑菌圈,然后根据最小抑菌浓度来测定抗生素的效价。

这种方法对药物浓度的变化比较敏感,但误差较大。

3. 黏度测定法:该方法是根据细菌代谢后产生的黏性物质的变化,来测定抗生素的效价。

该方法操作简单,但对试验条件较为严格。

4. 限制性酶切割法:该方法是将抗生素和细菌混合后,通过限制性酶将其切割成小片段,进而测定抗生素的效价。

这种方法需使用限制性酶切割试剂和设备,相对较为复杂。

5. 形态学观察法:该方法是观察抗生素对细菌的形态和结构的影响,来判断抗生素的效价。

这种方法适用于细菌的菌落比较大的情况,但操作比较繁琐。

6. 代谢产物测定法:该方法是根据细菌代谢产物的变化,来测定抗生素的效价。

这种方法操作比较简单,但对试验条件较为严格。

7. 荧光标记法:该方法是将抗生素用荧光标记,然后与细菌共同培养,通过荧光强度的变化,来测定抗生素的效价。

这种方法对试验条件要求比较高,但结果可靠性较高。

8. 酶联免疫吸附测定法:该方法是将抗生素用于特定的抗体结合,然后通过检测抗体与细菌结合的情况,来测定抗生素的效价。

这种方法的优点是灵敏度高,同时避免了细菌对抗生素的耐药性。

9. 质谱法:该方法是使用质谱仪分析样品中的分子质量的变化,来测定抗生素的效价。

这种方法可分析多种抗生素,但设备价格昂贵。

10. 核磁共振法:该方法是使用核磁共振仪测定样品中的氢、碳、氮等原子的共振频率和空间结构,来测定抗生素的效价。

这种方法对试验条件的要求非常高,且设备也价格昂贵。

测定抗生素效价的方法有很多种,每种方法都有其特点和适用范围。

在实际应用中,应根据具体情况选择合适的方法,以确保测定结果的准确性和可靠性。

抗生素的生物效价测定法(管碟法)

抗生素的生物效价测定法(管碟法)

抗生素的生物效价测定法(管碟法)work Information Technology Company.2020YEAR抗生素的生物效价测定法测定抗生素效价的方法比较多,一般可以分为物理学方法、化学方法、生物学方法、和两种方法配合等四大类,可根据具体情况选择使用。

生物学方法以抗生素的杀菌力作为衡量效价的标准,其原理恰好和临床应用于的要求一致这是它的优点;又其灵敏度较高,需用检品的量较小,也是其它方法所不及的。

抗生素的生物效价测定法,常用的有稀释法、比浊法和扩散法(或称渗透法)。

稀释法这一方法是用培养基将检品抗生素稀释到各种浓度,并依次分装到一系列的容器内,再加入等量“试验菌种”菌种菌液,并放在37 ℃保温箱内培养一定时间,观察何种稀释度适能抑制细菌的生长,该稀释度即为测定终点(或以细菌生长所引起的PH改变及溶血现象等生化反应作为测定终点),再与同样处理的标准抗生素的终点作比较,即可求得检品的效价。

这种方法可以使用液体培养基,也可以使用固体培养基。

所用的材料及培养基都必须严格无菌,并要注意无菌操作。

由于测定终点是以有无细菌生长来判断的,因此所得结果公是一个范围。

比浊法原理及操作大致与稀释法相同。

比浊法也是将不同量的检品及标准品分别加入培养基中,观察其对“试验菌种”的效应——即细菌生长所引起的混浊。

这一方法和稀释法的区别有二:a.比浊法的稀释间隔的密度比较近,准确度高一些;b.比浊法不以细菌有无生长的区分为终点,而是将标准品浓度和细菌生长所引起的混浊度求得一定的比例,再由检品的细菌生长混浊度推算检品的效价。

这一方法易受杂质的影响,并且不适用于有色或混浊的检品。

扩散法使用固体培养基,在培养基凝固以前将“试验菌种”混合进去,在这样备妥的培养表面,可以用种种设计使检品液或含有抗生素的物质与有菌种的培养基接触。

经过培育后,由于抗生素向培养基中扩散,凡抑菌浓度所能达到之下细菌不能生长因而形成透明的抑菌范围,此种范围一般都呈圆形,称为“抑菌圈”。

基于DSP的智能化青霉素效价快速测量仪

基于DSP的智能化青霉素效价快速测量仪

基于DSP的智能化青霉素效价快速测量仪
王春芳;罗守宾
【期刊名称】《仪表技术与传感器》
【年(卷),期】2006(000)010
【摘要】研制了一种新型智能仪器,它用离子敏场效应晶体管[ISFET]作为传感器来测定青霉素.该仪器以TM320LF2407A DSP芯片作为控制核心,文中给出了其硬件组成方框图、传感器信号处理电路原理图及DSP与LCD的接口电路图,还给出了软件主程序流程图.最后,给出了青霉素效价测量的实验方法和结果.该仪器可和上位机进行通信,与之前由8031单片机控制的检测仪相比,其体积只有原来的1/3,且具有诸如更快的动态响应、更高的可靠性和稳定性、较宽的线性测量范围和较好的实时性等特点,其性能价格比得到了进一步的提高.
【总页数】3页(P13-14,20)
【作者】王春芳;罗守宾
【作者单位】青岛大学,自动化工程学院,山东,青岛,266071;青岛大学,自动化工程学院,山东,青岛,266071
【正文语种】中文
【中图分类】TP2
【相关文献】
1.智能化青霉素效价快速测量仪 [J], 王春芳;马仁富
2.快速简便的青霉素效价测定法:Ⅱ.场效应管型青霉素传感器测定方法和应用 [J],
陈满香;汪正孝
3.青霉素效价快速测量微机控制系统 [J], 王春芳;胡轶
4.智能化变压器绕组电阻快速测量仪的研制 [J], 李亚梅;凌福根
5.快速简便的青霉素效价测定法——Ⅰ.场效应管型青霉素传感器的研制 [J], 陈满香;李晖;李郁章;汪正孝;韩汝水
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CHB-1型抗生素效价测定仪标准操作规程

CHB-1型抗生素效价测定仪标准操作规程

一、目的:制定抗生素效价测定仪标准操作规程,便于操作者的正确操作。

二、适用范围:适用于抗生素效价测定仪的操作。

三、责任者:QC检验员。

四、正文:1.准备:1.1开机前的检查1.1.1检查仪器与计算机的信号线及控制线是否联好。

1.1.2检查计算机、显示器、打印机的连线。

1.1.3检查计算机、显示器、打印机及仪器的电源线是否连接好。

2.开机检查:2.1分别依次打开计算机、仪器和打印机的电源开关。

2.2 POWER总电源指示灯及CAMERA摄像指示灯亮后方可正常工作。

2.3 LIGHT SOURCE2照明光源指示灯应点亮,再打开测量室门,检照明光源是否亮。

2.4用手按下“¤”键,检查测量室内主光源是否点亮。

2.5用手按下“¤”键,检查测量室内菌碟的放置台是否清洁。

3.系统的进入:打开计算机,在“开始”菜单中单击“程序”选项后,单击“抗生素效价测量仪”即可测量。

4. 各种工作的步骤4.1 测量抑菌圈菌碟的步骤文件----建立报告----测量4.2 校正滴错位的菌圈,即菌圈定位编辑----菌圈定位4.3 仪器所测量的若干组数据,进行组间合并计算文件----组间合并计算4.4 手工测量的抑菌圈数据的处理实验步骤按照(见说明书,7-1测量)开始进行,直到(图7-6),这时直接选择关闭项将进入下图,单击上面的数据进入手工输入。

4.5 以f、Sm、Pt数值,进行合并计算文件----建立报告----合并计算4.6 删除旧文件的菌碟步骤文件----删除记录4.7 旧报告的查看及输出文件----打开记录4.8 如何放置菌碟将待测菌碟放置在测量台上,分别按正确方向放置,将标准溶液的低剂量抑菌圈,对准仪器测量内的箭头,即放置在外侧。

每次测量时,即在Light Sources批示灯亮时,严禁打开测量室门,待其熄灭后,即可开门取出菌碟,再依照前图示放入下一个菌碟。

5 结束5.1 退出系统5.2 关机当测量工作全部完成后,其关机顺序与开机时的顺序相反,并关闭测量室门,盖上防护罩。

兽用抗生素生物效价测定中注意事项及分析

兽用抗生素生物效价测定中注意事项及分析

兽用抗生素生物效价测定中注意事项及分析作者:郭玉翠刘晓静韩镌竹邱月张铭洋李欣南来源:《品牌与标准化》2024年第03期【摘要】检验检测技术在保障兽用抗生素产品质量中发挥着重要作用。

管碟法是抗生素效价测定常用的方法之一。

本文针对抗生素效价测定过程中常见的一些技术问题进行总结梳理,结合日常实践,对影响结果准确性的关键环节进行剖析,提出合理化建议,以供兽药检验检测实验室参考。

【关键词】抗生素;效价;管碟法;准确性【DOI编码】10.3969/j.issn.1674-4977.2024.03.005【基金項目】辽宁省检验检测认证中心创新创业项目(SC202319):一种新型动物营养速溶颗粒剂的开发与应用。

Precautions and Analysis in the Biotiter Determination of Veterinary AntibioticsGUO Yucui1, LIU Xiaojing2, HAN Juanzhu1, QIU Yue1, ZHANG Mingyang3, LI Xinnan1*(1.Liaoning Inspection, Examination & Certification Centre〔Liaoning Institute forAgro-product Veterinary Drugs and Feed Control〕, Shenyang 110036, China; 2.ShenyangPharmaceutical University, Shenyang 110016, China; 3.Dalian Medical University, Dalian 116000, China)Abstract: Testing technology plays an important role in ensuring the quality of veterinary antibiotic products. The tube plate method is one of the commonly used methods for determining the potency of antibiotics. This article summarized and sorted out some common technical issues in the process of determining antibiotic potency. Combining with daily practice, it analyzed the key links that affected the accuracy of results, and put forward reasonable suggestions for reference by veterinary drug testing laboratories.Keywords: antibiotics; potency; tube plate method; accuracy随着现代分析技术的快速发展,很多品种的抗生素微生物检定法都被化学分析方法所取代,但是由于部分抗生素依赖生物发酵生产,化学测定结果难以准确表征抗生素的组分组成以及含量与生物活性间的关系,某些抗生素目前尚无适当的化学分析方法表征其活性。

抑菌圈测量仪工作过程及配置 测量仪技术指标

抑菌圈测量仪工作过程及配置 测量仪技术指标

抑菌圈测量仪工作过程及配置测量仪技术指标抑菌圈分析仪又叫抑菌圈测定仪通过图像分析软件及多种计算方法对微生物产生的抑菌圈进行生物效价、药物敏感度、血药浓度、生物利用度的测定,从而实现快速精准的试验分析。

抑菌圈分析仪广泛应用于生产、检测与讨论抗生素药物的药厂、药检所、医院以及相关的院校与讨论所。

又可称为抑菌圈分析仪,数字式抑菌圈测量仪,抗生素效价测量仪,抑菌圈测量分析仪,抑菌圈测定仪,抑菌圈测量仪,抑菌圈自动测量分析仪。

抑菌圈分析仪自动获得各菌落面积、等效直径、长轴、短轴、长宽比、圆度、周长、形状系数等。

可按形态指标过滤查询,鼠标点击修正,无痕剔除网格及文字,自动剔除杂质,有效支持多而杂微生物统计,仪器直接和微机的USB接口连接,无需传统的接收卡。

提高了微机处理图像的速度,使仪器工作更加稳定,故障率大大降低。

抑菌圈分析仪与国际接轨的大平板扫描法,一次可以完成六个碟子的扫描测量,使工作效率比传统测量仪提高了6倍。

配置自动菌落计数仪主机Zstream自动菌落分析软件、抑菌圈测定及效价分析软件商务一体机(双核CPU/4G内存/1G显存/硬盘500GB/DVD—RM/23”彩显/无线网卡、Windows操作系统环境)测量仪器的仪器误差有哪些?测量的紧要目的就是得到真实的结果,测量过程即使在注意和当心也会误差。

误差通最通俗的话来讲就是“测量结果与标准值的差”,再精准的仪器设备测量结果也会存在确定的误差的;导致误差的原因有很多,比如操作人员操作不当,仪器自身存在确定误差等等。

而仪器自身的误差也常常简单疏忽的一点,仪器误差也分为很多种,紧要包括有:固有误差,基本误差,工作误差,影响误差,稳定误差五种。

接下来我讲带大家认得这五种仪器误差:1.固有误差简单可以理解为在基准条件下由产品本身产生的允许误差,大致反映了仪器的最高测量精准明确度,通常用于仪器误差的检验和对比。

(下图为推举基准条件)注:β称为失真因子,交流供电波形应保持在(1+β)sin wt 与(1—β)sin;△U为纹波电压峰峰值,Uo为直流供电电压额定值。

抗生素生物效价测定[参考]

抗生素生物效价测定[参考]

抗生素生物效价测定[参考]抗生素生物效价测定是用来测定抗生素杀菌或抑制菌落生长能力的一种方法。

该方法通过对一定菌种进行抗生素浓度递减系列的稀释,然后观察菌落生长情况来测定抗生素的生物效价。

测定结果可以确定出单位药物中所含抗菌物质的含量,并且通过该结果可以明确指导抗生素的使用。

抗生素生物效价测试的操作步骤如下:实验仪器:清洁平板、无菌匙、无菌棉签、培养皿、移液器、蒸气灭菌器、执卡器、点斑枪。

试验材料:抗生素标准品(如青霉素)、待检物(例如新的抗生素类别)、接种菌种、琼脂片。

操作步骤:1.准备琼脂平板,把琼脂熔化后加入相应的接种菌液并充分混合,倒入无菌平板中,等待琼脂凝固。

2.将待检物或标准品分别通过滴定法配制成一系列浓度递减的抗生素溶液,分别置于移液器或执卡器中。

3.在琼脂平板上均匀涂上少量接种菌液,用无菌点斑枪在琼脂平板上进行不同抗生素浓度的斑点法, 每个浓度上进行三个重复点斑法,保证试验的可靠性和精确度,同时在控制组和空板上也进行斑点法,以和实验组对比。

4.在施抗生素后,将琼脂平板放入恒温器中进行培养。

观察24小时后菌落生长的情况并记录下来。

5.统计不同浓度下的抗生素和菌落生长的比率,画出不同浓度与生长抑制之间的关系曲线。

6.计算抗生素的生物效价,通常以最低有效抑制浓度(MIC)为单位。

其计算公式如下:生物效价=标准品浓度/待检样品浓度。

7.将实验结果与临床使用常规剂量比较,如得出实验效价与常剂相近或更高,则证明该抗生素是有效的。

反之,如果效价较低,则应进一步测试,或对该抗生素进行结构修饰或改进。

抗生素生物效价测定是非常重要的实验手段,它可以确定抗生素的药效值并为临床用药提供科学依据。

在新药物的研发和临床实践中,抗生素生物效价测定是不可或缺的方法,也是提高治疗效果和减少药物滥用的重要手段。

抗生素效价测定方法

抗生素效价测定方法

抗生素效价测定方法抗生素效价测定方法引言:抗生素是一类用于抑制或杀灭细菌生长的药物。

它们的广泛应用已经在医学领域产生了积极的影响,但随之而来的是细菌对抗生素产生的抗药性问题。

为了准确评估抗生素的效力以及制定合适的治疗方案,科学家们研发了多种抗生素效价测定方法。

本文将深入探讨这些方法的原理、应用和局限性。

正文:一、生物学测定法生物学测定法是一种常见的抗生素效价测定方法,它基于抗生素对细菌的抑制或杀菌作用。

主要包括最小抑菌浓度(MIC)测定和最小杀菌浓度(MBC)测定。

1. 最小抑菌浓度(MIC)测定:MIC测定是通过在含有细菌的培养基上逐渐加入不同浓度的抗生素,观察最低的有效浓度,以抑制细菌的生长或形成可见的生长抑制区域。

这个测定方法通常可以定量地测量出抗生素的最低有效浓度。

2. 最小杀菌浓度(MBC)测定:MBC测定是在MIC测定的基础上,进一步通过将培养基转移到不含有抗生素的培养基中培养,观察最低有效浓度,以杀灭细菌生长。

这个测定方法可以提供更准确的抗生素效价评估,因为它考虑了抗生素的细菌杀菌作用。

二、色谱分析法色谱分析法是一种基于抗生素化学性质的效价测定方法。

它通过使用色谱柱将样品中的抗生素分离出来,并测量其峰面积或峰高,以定量分析其浓度。

1. 高效液相色谱法(HPLC):HPLC是一种常用的色谱分析技术,可以有效地分离、定量和鉴定抗生素。

它利用高压泵将样品溶液推入色谱柱,通过样品在固定相和流动相之间的分配系数差异来实现分离。

定量的抗生素效价可以通过峰面积或峰高与标准曲线的关系来计算。

2. 气相色谱法(GC):GC是一种适用于易挥发性物质的色谱分析方法,在某些情况下可以用于抗生素浓度测定。

样品经过气相柱,抗生素蒸发后进入气相检测器进行分析和定量。

三、生物化学测定法生物化学测定法是一种基于抗生素与生物体或其代谢产物之间的相互作用来评估抗生素效力的方法。

常见的生物化学测定法包括酶抑制测定法和細胞毒性試驗。

抗生素生物效价测定详细参考

抗生素生物效价测定详细参考

---一参照秘斗一一页眉页脚可删除一一实验一抗生素生物效价测定【实验目的】1.掌握抗生素生物效价测定的原理和方法;2.掌握管碟法测定抗生素生物效价相关的操作方法。

【实验原理】抗生素的效价常采用微生物学方法测定,它是利用抗生素对特定的微生物具有抗菌活性的原理来测定抗生素效价的方法,如管碟法。

管碟法是目前抗生素效价测定的国际通用方法,我国药典也采用此法。

管碟法是根据抗生素在琼脂平板培养基中的扩散渗透作用,比较标准品和检品两者对试验菌的抑菌圈大小来测定供试品的效价。

管碟法的基本原理是在含有高度敏感性试验菌的琼脂平板上放置小钢管(内径6.0±0.l mm,外径8.0±0.l mm,高10±0. lmm),管内放人标准品和检品的溶液,经16~18小时恒温培养,当抗生素在菌层培养基中扩散时,会形成抗生素浓度由高到低的自然梯度,即扩散中心浓度高而边缘浓度低。

因此,当抗生素浓度达到或高于乂集(最低抑制浓度)时,试验菌就被抑制而不能繁殖,从而呈现透明的无菌生长的区域,常呈圆形,称为抑菌圈。

根据扩散定律的推导,抗生素总量的对数值与抑菌圈直径的平方成线性关系,比较抗生素标准品与检品的抑菌圈大小,可计算出抗生素的效价。

常用的管碟法有:一剂量法、二剂量法、三剂量法。

后二法已经列入药典。

二剂量法系将抗生素标准品和供试品各稀释成一定浓度比例(2:1或4:1)的两种溶液,在同一平板上比较其抗药活性,再根据抗生素浓度对数和抑菌圈直径成直线关系的原理来计算供试品效价。

取含菌层的双层平板培养基,每个平板表面放置4个小钢管,管内分别放入供试品高、低剂量和标准品高、低剂量溶液。

先测量出四点的抑菌圈直径,按下列公式计算出检品的效价。

(1)求出W和V:W=(SH+UH)-(SL+UL)(式 2.10-1)V=(UH+UL)-(SH+SL)(式2.10-2)式中:UH:供试品高剂量之抑菌圈直径;UL:供试品低剂量之抑菌圈直径;SH:标准品高剂量之抑菌圈直径;SL:标准品低剂量之抑菌圈直径;(2)求出① 0=D-antilog(IV/W)(式 2.10-3)式中:。

抗生素效价计算过程

抗生素效价计算过程

USP Cylinder-plate assay 美国药典 管碟法---(标准曲线法)1、 美国药典规定的管碟法抗生素效价方法简述:首先制备5个标准溶液浓度(U/ml ),分别为S1、S2、S3、S4和S5,其中S3为中间浓度。

除S3外的每个浓度准备3个碟子,每个碟子放置6个牛津杯,其中不相连的三个分别加入Si (i 为1、2、4或5),另外三个不相连的加入S3。

待检样品(Unknown )加样方式如Si ,具体放置方法如下图1:图1:标准及样品管碟放置方式图例2、在以上方法的基础上以具体数据进行计算举例: 下表2为按以上方法进行抗生素效价检测的一组测量结果:表2:抗生素效价检测测量结果表Replicate1Replicate2Replicate3Set S1 Set S2 Set S4 Set S5 Sample U1备注:Zone1、3、5表示每个平皿中不相连的三个S3的直径值;Zone2、4、6表示每个平皿中不相连的三个Si的直径值;U1表示待测样品1。

2.1 进行初始计算:对于每种浓度的三个平板,分别求出得到的9个中间浓度标准品的平均值以及9 个Si和U1直径的平均值。

例如:15.867=(16.1,15.6,15.8,16.0……15.8)9个数据的平均值14.167=(14.6,14.1,13.5,14.5……14.1)9个数据的平均值2.2 变异性的适用性检查:然后求出每三个平板得到的9个数值的标准偏差(包括标准对照和样品的),进而计算出其相对标准偏差值(RSD,该值应不超过10%)。

例如:标准偏差0.200 = s(16.1, . . ., 15.8)相对标准偏差1.3% = (0.200/15.867) *1002.3 进行平板间的差异校正:计算公式如下。

X C = X S– (X R– P)X C = 标准品平均值的校正值X S = 原始的标准品的平均值X R = 对照值的平均值P = 校正值例如:14.022 = 14.167 – (15.867 – 15.722) = 14.167 – 0.1452.4 建立标准曲线:标准曲线由2.3计算的标准品平均值的校正值Xc和标准品浓度值的对数值构成。

CHB-1型抗生素效价测定仪标准操作规程

CHB-1型抗生素效价测定仪标准操作规程

一、目的:制定抗生素效价测定仪标准操作规程,便于操作者的正确操作。

二、适用范围:适用于抗生素效价测定仪的操作。

三、责任者:QC检验员。

四、正文:1.准备:1.1开机前的检查1.1.1检查仪器与计算机的信号线及控制线是否联好。

1.1.2检查计算机、显示器、打印机的连线。

1.1.3检查计算机、显示器、打印机及仪器的电源线是否连接好。

2.开机检查:2.1分别依次打开计算机、仪器和打印机的电源开关。

2.2 POWER总电源指示灯及CAMERA摄像指示灯亮后方可正常工作。

2.3 LIGHT SOURCE2照明光源指示灯应点亮,再打开测量室门,检照明光源是否亮。

2.4用手按下“¤”键,检查测量室内主光源是否点亮。

2.5用手按下“¤”键,检查测量室内菌碟的放置台是否清洁。

3.系统的进入:打开计算机,在“开始”菜单中单击“程序”选项后,单击“抗生素效价测量仪”即可测量。

4. 各种工作的步骤4.1 测量抑菌圈菌碟的步骤文件----建立报告----测量4.2 校正滴错位的菌圈,即菌圈定位编辑----菌圈定位4.3 仪器所测量的若干组数据,进行组间合并计算文件----组间合并计算4.4 手工测量的抑菌圈数据的处理实验步骤按照(见说明书,7-1测量)开始进行,直到(图7-6),这时直接选择关闭项将进入下图,单击上面的数据进入手工输入。

4.5 以f、Sm、Pt数值,进行合并计算文件----建立报告----合并计算4.6 删除旧文件的菌碟步骤文件----删除记录4.7 旧报告的查看及输出文件----打开记录4.8 如何放置菌碟将待测菌碟放置在测量台上,分别按正确方向放置,将标准溶液的低剂量抑菌圈,对准仪器测量内的箭头,即放置在外侧。

每次测量时,即在Light Sources批示灯亮时,严禁打开测量室门,待其熄灭后,即可开门取出菌碟,再依照前图示放入下一个菌碟。

5 结束5.1 退出系统5.2 关机当测量工作全部完成后,其关机顺序与开机时的顺序相反,并关闭测量室门,盖上防护罩。

抗生素生物效价测定

抗生素生物效价测定

实验一抗生素生物效价测定【实验目的】1. 掌握抗生素生物效价测定的原理和方法;2. 掌握管碟法测定抗生素生物效价相关的操作方法。

【实验原理】抗生素的效价常采用微生物学方法测定,它是利用抗生素对特定的微生物具有抗菌活性的原理来测定抗生素效价的方法,如管碟法。

管碟法是目前抗生素效价测定的国际通用方法,我国药典也采用此法。

管碟法是根据抗生素在琼脂平板培养基中的扩散渗透作用,比较标准品和检品两者对试验菌的抑菌圈大小来测定供试品的效价。

管碟法的基本原理是在含有高度敏感性试验菌的琼脂平板上放置小钢管(内径6.0±0.l mm,外径8.0±0.l mm,高10±0. lmm),管内放人标准品和检品的溶液,经16~18小时恒温培养,当抗生素在菌层培养基中扩散时,会形成抗生素浓度由高到低的自然梯度,即扩散中心浓度高而边缘浓度低。

因此,当抗生素浓度达到或高于MIC(最低抑制浓度)时,试验菌就被抑制而不能繁殖,从而呈现透明的无菌生长的区域,常呈圆形,称为抑菌圈。

根据扩散定律的推导,抗生素总量的对数值与抑菌圈直径的平方成线性关系,比较抗生素标准品与检品的抑菌圈大小,可计算出抗生素的效价。

常用的管碟法有:一剂量法、二剂量法、三剂量法。

后二法已经列入药典。

二剂量法系将抗生素标准品和供试品各稀释成一定浓度比例(2:1或4:1)的两种溶液,在同一平板上比较其抗药活性,再根据抗生素浓度对数和抑菌圈直径成直线关系的原理来计算供试品效价。

取含菌层的双层平板培养基,每个平板表面放置4个小钢管,管内分别放入供试品高、低剂量和标准品高、低剂量溶液。

先测量出四点的抑菌圈直径,按下列公式计算出检品的效价。

(1)求出W和V:W=(SH+UH)-(SL+UL)(式 2.10-1)V=(UH+UL)-(SH+SL)(式2.10-2)式中:UH:供试品高剂量之抑菌圈直径;UL:供试品低剂量之抑菌圈直径;SH:标准品高剂量之抑菌圈直径;SL:标准品低剂量之抑菌圈直径;(2)求出θ:θ=D·antilog(IV/W)(式2.10-3)式中:θ:供试品和标准品的效价比;D:标准品高剂量与供试品高剂量之比,一般为1;I:高低剂量之比的对数,即log2或log4。

效价测定

效价测定

抗生素效价(二剂量法)链霉素的效价1、试验用试验器材:双碟、陶瓦盖、钢管、钢管放置器、玻璃容器、毛细滴管、灭菌刻度吸管、称量瓶、恒温培养箱、万分之一天平、干燥箱、恒温水浴箱、显微镜、抑菌圈测量仪或游标卡尺、超净工作台、冰箱、酒精灯、接种环2、供试品称量量:50mg3、缓冲液:磷酸盐缓冲液(ph7.8)取磷酸氢二钾5.59g与磷酸氢二钾0.41g,加水使成1000ml,摇匀滤过。

121℃蒸汽灭菌30min备用。

4、培养基制备数量1个供试品效价测定5个每平100ml4个用于预实验1个用于预实验 7个三角瓶2个,每瓶250ml1个供试品效价测定5、营养琼脂培养基:100ml,作为菌种活化用。

6、双碟数量:8套(供试品效价测定)+8套(预试验)。

共16副。

小钢管(牛津杯):32个+32个(预试验),共64个,每个双碟中放置4个。

7、操作步骤7.1菌种1)枯燥芽孢杆菌【Bacillus subtilis CMCC(B)63501】2)枯燥芽孢杆菌菌悬液的制备(供试品效价测定)7.2 菌液制备取枯燥芽孢杆菌的营养琼脂斜面培养物,加灭菌水2ml冲下菌苔,制成悬液,用吸管将此悬液接种于营养琼脂培养基上,均匀摊布,在37℃培养7天,取菌苔少许涂片,用革兰染色镜检,应有芽孢85%以上。

用灭菌水将芽孢洗下,制成芽孢悬液,合并至灭菌大试管内,65℃水浴内加热30min,将菌体杀死,待冷后放冰箱储藏为浓菌液。

7.3 供试品溶液的制备供试品估计效价1000000U/g.精密称取样品50.0mg,加水50ml,稀释制成1000U/ml溶液,吸取2ml加入100ml容量瓶中,加pH7.8磷酸盐缓冲液稀释至刻度,制成20U/ml溶液,吸取7ml加入100ml容量瓶中,加pH7.8磷酸盐缓冲液稀释至刻度,制成1.4U/ml溶液(T1),吸取25ml加入50ml容量瓶中,加pH7.8磷酸盐缓冲液稀释至刻度,制成0.7U/ml溶液(T2),作为供试品溶液。

抗生素效价的测定方法

抗生素效价的测定方法

抗生素效价的测定方法引言抗生素是一类可以抑制或杀灭细菌生长的药物,广泛应用于医疗和农业领域。

抗生素的功效取决于其浓度和效价。

因此,准确测定抗生素的效价对于临床治疗和农业防疫都具有重要意义。

本文将详细探讨抗生素效价的测定方法,包括传统方法和现代方法。

传统方法生物法1.半数致死浓度法:这是最常用的测定抗生素效价的方法之一。

该方法通过将细菌和抗生素溶液一起培养,然后观察细菌生长情况来确定抗生素的效价。

半数致死浓度(MIC)是指在特定细菌培养条件下,抗生素能够抑制细菌生长的最低浓度。

通过逐渐增加抗生素的浓度,观察细菌生长情况,可以确定半数致死浓度,从而确定抗生素的效价。

2.环形扩散法:该方法将抗生素溶液均匀涂抹在培养基的平板上,之后在培养基上均匀撒播细菌。

通过观察细菌生长的抑制圈直径,可以推测抗生素的效价,即抑制圈直径越大,抗生素效价越高。

化学法1.生物活性法:该方法通过测定抗生素和特定细菌的反应,来确定抗生素的效价。

一般会选取对该抗生素敏感的细菌,并观察其生长情况。

通过比较不同浓度的抗生素溶液对细菌生长的抑制程度,可以确定抗生素的效价。

2.光度法:该方法基于抗生素溶液的质量与透过溶液的光的强度之间的关系。

通过使用光度计测量透过溶液的光的强度,可以计算出抗生素的浓度,从而确定其效价。

现代方法分子生物学方法1.PCR法:通过使用聚合酶链式反应(PCR)来测定抗生素效价。

该方法首先提取细菌的DNA,然后在PCR反应中加入不同浓度的抗生素。

根据PCR反应产物的强度和带状图的分析,可以确定抗生素对细菌的抑制能力。

2.荧光标记法:该方法通过将抗生素和荧光物质进行结合,然后观察荧光标记的细菌的生长情况。

荧光信号的强弱可以反映抗生素的浓度,从而确定抗生素的效价。

分析化学方法1.气相色谱法:该方法通过将抗生素溶液进行分离和检测,来测定其浓度和效价。

气相色谱法使用气相色谱仪来分离和定量抗生素化合物。

通过测定抗生素峰的面积和相对保留时间,可以计算出抗生素的浓度和效价。

抗生素效价测定技术—抗生素效价微生物检定法

抗生素效价测定技术—抗生素效价微生物检定法

知识点3:浊度法
四、检定操作方法
(一)线性试验
除另有规定外,取适宜的大小厚度均匀的已灭菌试管,在各试验
管内精密加入含试验菌的液体培养基9. 0ml,再分别精密加入各浓
度的标准品溶液1.0ml,立即混匀,按随机区组分配将各管在规定
条件下培养至适宜测量的浊度值(通常约为4小时)。
知识点3:浊度法
(三)空白试验
线关系,可采用t检验。
4.测定结果的计算及可信限率估计。
5.实验计算所得效价低于估计效价的90%或高于估计效价的1 10%,则检验
结果仅作为初试,应调整供试品估计效价,予以重试。
知识点3:浊度法
6.原料药效价测定一般需双份样品,平行实验以便核对。对不符
合规定的样品应至少有2次符合规定的结果,才能发出报告。
供试品低剂量溶液
(即SH→TH→SL→TL)
6.测量抑菌圈 双碟透明度好,无破损和不透明现象;抑菌圈应圆满,无破
圈或圈不完整现象,否则应弃去该双碟。
技能点1:二剂量法操作规程
技能点1:二剂量法操作规程
技能点1:二剂量法操作规程
在恒温培养箱中培养至规定时间
技能点1:二剂量法操作规程
• 测量抑制圈
的污染,放双碟的台面应用水平仪调水平。
玻璃/塑料
平皿(d=90mm
h=16-17mm)
菌层
5ml
含菌培养基
底层
20ml
灭菌培养基
技能点1:二剂量法操作规程
制备底层
制备菌层
技能点1:二剂量法操作规程
4.放置钢管
5.滴碟、培养
毛细滴管(或滴管)滴碟
滴加顺序:按标准品高剂量溶液→供试品高剂量溶液→标准品低剂量溶液→

抗生素效价测定仪校准用光谱中性滤光片的研制

抗生素效价测定仪校准用光谱中性滤光片的研制

抗生素效价测定仪校准用光谱中性滤光片的研制丁峰元;雷军锋;杨占旗;班继民【摘要】According to the characteristics with the absorbance measuring range and the absorbance decreasing in the cultivation process of the antibiotics potency analyzer,the reference materials of spectral neutral filters with absorbance nominal values of 0.3,0.5,0.7 and 1.0 were prepared by using neutral grey glasses. The absorbance homogeneity, directivity and stability of the reference materials were tested by using an ultraviolet visible near infrared spectrophotometer. The maximum absorbance homogeneity was 0.0020,the maximum absorbance directivity was0.0004,and the maximum absorbance stability was 0.0025,meeting the reference material 2nd level requirement. By evaluation,the relative expanded uncertainty of the reference material absorbance was 1%(k=2). The determination results of this reference material were compared with the calibration results of the previous level measurement standard (National Institute of Metrology , China),the results validated that the absorbance of the reference material was accurate. The reference material can be used to calibrate the absorbance accuracy and traceability of antibiotics potency analyzer.%根据浊度法抗生素效价测定仪吸光度的有效测量范围和液体培养基培养过程中吸光度逐渐降低的特点,选用中性灰色玻璃研制了吸光度标称值分别为0.3,0.5,0.7,1.0的光谱中性滤光片组标准物质.用紫外可见近红外分光光度计对研制的标准物质的均匀性、正反面和稳定性进行测试,吸光度均匀性最大值为0.0020,吸光度正反面最大差值为0.0004,吸光度稳定性最大值为0.0025,符合二级标准物质要求,经评定标准物质吸光度的相对扩展不确定度为1%(k=2).将该标准物质的定值结果与上一级计量标准中国计量科学研究院的校准结果进行比对验证,结果表明研制的标准物质定值准确,可用于抗生素效价测定仪吸光度准确性和溯源性校准.【期刊名称】《化学分析计量》【年(卷),期】2017(026)003【总页数】4页(P10-13)【关键词】光谱中性滤光片;标准物质;吸光度;抗生素效价测定仪【作者】丁峰元;雷军锋;杨占旗;班继民【作者单位】河南省计量科学研究院,郑州 450008;河南省计量科学研究院,郑州450008;河南省计量科学研究院,郑州 450008;河南省计量科学研究院,郑州450008【正文语种】中文【中图分类】O657.3浊度法抗生素效价测定法自2005年在中国药典采用[1],相关企业研制了浊度法抗生素效价测定仪。

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