动物学实验设计(2011-10-27)

实验一四氧嘧啶剂量对小鼠糖尿病模型的影响

一、实验原理

化学性糖尿病动物模型诱发方便、来源广，是目前较广泛的模型。化学物质诱导糖尿病动物模型是应用化学物质损伤胰腺β细胞，从而引起动物发生糖尿病。目前常用的药物有链脲菌素和四氧嘧啶，其作用机制是选择性损伤胰腺β细胞，引起部分细胞坏死，导致血胰岛素不同程度下降伴随血糖升高。但是链脲菌素和四氧嘧啶的实验条件很难掌握，直接影响其造模功能。为此，我们进行本研究，探究不同给药剂量及小鼠性别的不同方案以获得最佳实验条件，建立一种经济、稳定的高血糖动物模型。

二、材料与试剂

动物：雄性小鼠，体重18～22g。

仪器与器具：血糖测定仪、天平、注射器及针头、鼠笼。

试剂：临用前用生理盐水配制成1％（10mg/ml）的四氧嘧啶（ALX），四氧嘧啶分子量：142.07。

三、实验方法

1、将实验小鼠分组编号

将60只小鼠随机分成6组，其中第一组为对照组，后面五组为实验组，每组雌雄各半，并对其做好标记。

2、不同剂量四氧嘧啶糖尿病小鼠模型建立

给60只小鼠禁食24h(不禁水)，腹腔分别注射四氧嘧啶160,180,200,220和240mg/kg（注射时应在30s内注射完成，注射越快越好），对照组腹腔注射生理盐水，72h后用快速血糖仪测血糖（测前禁食12h）。饮食上给予低蛋白和高动物脂肪食物能增加糖尿病的发生率。注意：大剂量四氧嘧啶可致大部分β细胞破坏，使犬、猫产生永久性糖尿病。

3、小鼠高脂血症模型的建立及检测：测前禁食4h ，72 h后测空腹血糖血糖 > 16.8mmol/L（300mg/dl）～10.00mmol/L（180 mg/dl）的小鼠为成功模型。

对实验结果进行统计学处理分析，得出实验结论。