甘油的检测方法汇总
甘油含量检测方法
甘油含量检测方法1、原理由于甘油是醇类物质，而酸性高碘酸盐氧化糖醇产生甲醛，在Nash试剂参与下生成黄色的化合物，该化合物在412nm下有最大吸收峰。
根据吸光值即可计算出甘油的浓度。
2、试剂①Nash试剂：精确称取15g乙酸铵，蒸馏水溶解，加入0.2ml冰醋酸，0.2ml乙酰丙酮，定容至100ml。
现用现配。
②0.015mol/L高碘酸钠溶液：精确称取高碘酸钠3.2g，用0.12mol/LHCl溶液溶解宾并定容至1000ml。
③0.1％L-鼠李糖：精确称取L-鼠李糖0.5g,溶于蒸馏水中，定容至500ml。
④0.5mg/ml甘油标准溶液：称取甘油0.5g（精确至0.0001g），加水定容至100ml。
摇匀，吸取5ml稀释至50ml，即浓度为0.5mg/ml的甘油标准溶液。
⑤0.12mol/L HCl溶液：量取浓盐酸(12mol/L)20ml，加水定容至2000ml。
3、仪器和设备①漩涡混合器②752分光光度计③恒温水浴锅4、标准曲线绘制①.吸取0.5mg/ml甘油标准溶液各0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL，分别定容至50mL。
即配制好0.005mg/ml、0.01mg/ml、0.02mg/ml、0.03mg/ml、0.04mg/ml 的不同浓度的甘油标准液。
②吸取上述各浓度甘油标准液1ml分别置于刻度试管中，然后加入1ml 0.015mol/L的高碘酸钠溶液，混匀，室温放置10min。
然后，加入2ml 0.1％L-鼠李糖溶液，（以除去过多的髙碘酸盐），混匀后加入4ml新鲜配制的Nash试剂，在53℃水浴中加热15min，使其充分显色。
③以空白做参比，在412nm波长下测定其吸光度。
④以甘油浓度（mg/L）为横坐标，OD412为纵坐标绘制标准曲线。
注：空白：用水代替甘油标准稀释液，其余操作同上。
每组样品做2个平行。
15、检测步骤：①称取一定量的甘油样品作适当浓度的稀释。
②吸取1ml稀释液置于刻度试管中，然后加入1ml 0.015mol/L的高碘酸钠溶液，混匀，室温放置10min。
甘油含量的测定
《生物产品的分析与检验技术》甘油含量的测定二、甘油含量的测定（一）滴定法1.原理高含量精制甘油或纯甘油的水溶液，其甘油含量与密度呈对应关系，由测得的密度值查表或计算可得到甘油的含量。
在相应范围内甘油含量与密度呈线性关系，可由密度值用插入法计算确切的甘油含量。
测定甘油含量的常用方法有密度法和滴定法两种。
密度法适用于高含量精制甘油产品和纯甘油的水溶液，滴定法适用于各种甘油产品。
（一）滴定法1.原理滴定法（仲裁法）在强酸介质中，甘油被高碘酸钠氧化，反应产生的甲酸以PH计指示，用氢氧化钠标准滴定溶液滴定。
反应式为：CH2OHCHOCH2OH+2NaIO4→HCOOH+2HCHO+2NaIO3+H2OHCOOH+NaOH→HCOONa+H2O•氢氧化钠标准滴定液的标定（一）滴定法2.试剂与仪器1.试剂（1）蒸馏水：煮沸至少10min，以驱除二氧化碳。
（2）乙二醇稀释溶液：1体积不含甘油的乙二醇，用1体积水稀释，用酚酞作指示剂中和至刚好褪色。
（3）硫酸溶液：0.1 mol/L（4）68 g/L甲酸钠溶液。
（一）滴定法2.试剂与仪器1.试剂（5）60 g/L高碘酸钠酸性溶液。
（6）0.05 mol/L氢氧化钠溶液，无二氧化碳。
（7）0.125mol/L氢氧化钠溶液，无二氧化碳。
（8）酚酞指示液：10g/L乙醇溶液。
2.仪器50ml滴定管。
PH计：灵敏度0.02PH，配有玻璃测量电极和甘汞参比电极。
（一）滴定法3.操作步骤（1）称取试样：称取甘油含量不大于0.50g的试样（精确到0.0001g）。
如果不知甘油的大致含量，应称取0.05g试样预测。
如果甘油含量大于75%，最好称取试样（0.5±0.1）g（精确到0.0001g），置于500ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，混匀后移取50.0ml用于测定。
（一）滴定法3.操作步骤（2）试验溶液的制备：碱性试样或试样酸化出现焦油沉淀物时，可将试样放入配有回流冷凝器的锥形瓶中，需要时稀释到50ml，加2滴酚酞指标液，用硫酸溶液中和至刚好褪色，再过量5ml，煮沸5min，冷却。
甘油的检测方法汇总
甘油的检测方法汇总在发酵行业中，甘油作为底物，是发酵液中生物合成的直接前体，会影响外源蛋白的启动表达效率，其含量的高低直接影响产物的发酵单位，是决定菌种取舍的重要指标，是提高工程菌的发酵密度，提高产品生产率的关键。
在生物柴油生产中，它是副产物，其含量直接影响生物柴油的使用性能，是衡量生物柴油产品品质的重要指标之一。
此外，甘油能与水结合以防止红细胞的冷冻损伤，能延长红细胞的保存期，被普遍用作细胞内冷冻保护剂等。
由于甘油用途很广，因此其含量的测定具有非常重要的意义。
目前国内外甘油含量的测定方法较多，主要有高碘酸氧化法、Cu2 +络合比色法、酶比色法法、紫外-可见分光光度法、高效液相色谱法、气相色谱法、近红外光谱法以及原子吸收法等。
下面将对其进行简要概述：一、高碘酸法二、酶比色法1.原理：它是利用酶的特异性催化反应建立的测定甘油的一种酶学方法，是指甘油在甘油激酶作用下转化为3-磷酸甘油，后者由磷酸甘油氧化酶催化生成磷酸二羟丙酮和过氧化氢，然后过氧化氢和4-氨基安普比林、4-氯酚在过氧化物酶催化下反应生成紫兰色、能在500 nm 左右有特征吸收峰的醌亚胺，通过颜色深浅即吸光度的变化测定所生成的H2O2，甘油的含量与生成的H2O2成正比，这样用比色法就可以测定甘油的含量。
2.操作步骤波长：500nm(480~520nm)反映温度：37℃比色杯光径：1cm取一定量R1(参看R2瓶签)加入1瓶R2中，溶解后即为工作液，工作液预先保温至测试温度。
三、高效液相色谱法1.原理：高效液相色谱法( HPLC) 的原理是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，利用色谱柱对待测混合物先进行分离，然后再进行检测，从而实现对试样的分析，因而其测量的准确性和精确度较高，目前已成为检测生化分子较常用的一种方法。
2.操作步骤（1）首先用水将发酵液稀释2.5倍,然后加H3PO4调pH至5.5,在转速8000r/min、温度4℃下离心10min,经微孔滤膜过滤用于HPLC分析；（2）将甘油标准系列溶液在最佳色谱条件下进行HPLC分析,以峰面积外标法定量得到甘油标准曲线；（3）按照样品预处理方法处理后进样5微升,记录峰面积,代入线性方程中,计算其测定值。
甘油的检测方法汇总
甘油的检测方法汇总甘油的检测方法汇总在发酵行业中，甘油作为底物，是发酵液中生物合成的直接前体，会影响外源蛋白的启动表达效率，其含量的高低直接影响产物的发酵单位，是决定菌种取舍的重要指标，是提高工程菌的发酵密度，提高产品生产率的关键。
在生物柴油生产中，它是副产物，其含量直接影响生物柴油的使用性能，是衡量生物柴油产品品质的重要指标之一。
此外，甘油能与水结合以防止红细胞的冷冻损伤，能延长红细胞的保存期，被普遍用作细胞内冷冻保护剂等。
由于甘油用途很广，因此其含量的测定具有非常重要的意义。
目前国内外甘油含量的测定方法较多，主要有高碘酸氧化法、Cu2 +络合比色法、酶比色法法、紫外-可见分光光度法、高效液相色谱法、气相色谱法、近红外光谱法以及原子吸收法等。
下面将对其进行简要概述：一、高碘酸法二、酶比色法1.原理：它是利用酶的特异性催化反应建立的测定甘油的一种酶学方法，是指甘油在甘油激酶作用下转化为3-磷酸甘油，后者由磷酸甘油氧化酶催化生成磷酸二羟丙酮和过氧化氢，然后过氧化氢和4-氨基安普比林、4-氯酚在过氧化物酶催化下反应生成紫兰色、能在500 nm 左右有特征吸收峰的醌亚胺，通过颜色深浅即吸光度的变化测定所生成的H2O2，甘油的含量与生成的H2O2成正比，这样用比色法就可以测定甘油的含量。
2.操作步骤波长：500nm (480~520nm) 反映温度：37℃比色杯光径：1cm取一定量R1(参看R2瓶签)加入1瓶R2中，溶解后即为工作液，工作液预先保温至测试温度。
三、高效液相色谱法1.原理：高效液相色谱法( HPLC) 的原理是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，利用色谱柱对待测混合物先进行分离，然后再进行检测，从而实现对试样的分析，因而其测量的准确性和精确度较高，目前已成为检测生化分子较常用的一种方法。
2.操作步骤（1）首先用水将发酵液稀释2.5倍,然后加H3PO4调pH至5.5,在转速8000r/min、温度4℃下离心10min,经微孔滤膜过滤用于HPLC分析；（2）将甘油标准系列溶液在最佳色谱条件下进行HPLC分析,以峰面积外标法定量得到甘油标准曲线；（3）按照样品预处理方法处理后进样5微升,记录峰面积,代入线性方程中,计算其测定值。
甘油的检测方法汇总
甘油的检测方法汇总甘油（Glycerol）是一种无色、无臭、甜味的化合物，用途广泛，可作为食品添加剂、制药原料、化妆品等的成分。
因此，对甘油质量的检测非常重要。
下面将介绍一些主要的甘油检测方法。
1.密度测定法密度测定法是一种简便、快速的甘油检测方法。
使用密度计或比重管测量样品的密度，与已知浓度的甘油溶液进行对照。
该方法适用于纯甘油或含有甘油的溶液的浓度测定。
2.折光测定法折光测定法是一种常用的甘油检测方法。
通过使用折光仪测量样品的折射率，将结果与标准甘油溶液进行比较。
该方法可以快速准确地测定甘油溶液的浓度。
3.气相色谱法气相色谱法（GC）是一种高效、灵敏度高的甘油检测方法。
样品经过适当处理后，通过气相色谱仪进行分析。
GC可以检测到极小量的甘油，并且可以用于复杂样品中甘油的定量。
4.高效液相色谱法高效液相色谱法（HPLC）是一种常用的甘油检测方法。
样品通过高效液相色谱仪进行分离和定量分析。
该方法准确度高，适用于不同类型的甘油样品。
5.红外光谱法红外光谱法是一种非破坏性的甘油检测方法。
通过测量样品在红外光区的吸收情况，可以识别和定量甘油。
该方法操作简便，且对样品制备要求较低。
6.核磁共振波谱法核磁共振波谱法（NMR）是一种准确、无损伤的甘油检测方法。
样品通过核磁共振仪进行分析，可以确定甘油的结构和浓度。
NMR对于纯甘油的定性和定量分析非常适用。
7.比色法比色法是一种常用的甘油检测方法之一、通过将甘油样品与适当的试剂反应后，根据产生的颜色变化进行比色测定。
常用的试剂有硫酸铵和硫酸亚铁等。
该方法简便，但对于样品的选择性较差。
综上所述，甘油的检测方法有多种选择，可以根据需求和样品的特点选择适合的方法进行检测。
在实际应用中，也可以综合使用多种方法进行验证，以提高检测结果的准确性和可靠性。
甘油含量测定方法
甘油含量的测定实验原理：采用高碘酸氧化复原法CH2OHCHOH CH2OH +2KIO42HCHO+HCOOH+2KIO3+H2ONaIO4+7KI+4H2SO44I2+4Na2SO4+4H2ONaIO3+5KI+3H2SO43I2+3Na2SO4+3H2OI2+2Na2S2O3Na2S4O6+2NaI仪器及药品：仪器：容量瓶、碘量瓶、锥形瓶药品：NaIO4；KI；H2SO4；淀粉指示剂％淀粉指示液：称取g可溶性淀粉，加10mL水，在搅拌下再注入到90mL水中，微沸2min，放置，取上层清液使用。
试验均要用新配制%的淀粉指示剂。
标准溶液：1. 氢氧化钠：、、〔常用〕用基准苯二甲酸氢钾标定。
2. 硫代硫酸钠：配制：称取26克硫代硫酸钠〔或16克无水硫代硫酸钠〕，溶于1000毫升水中，缓缓煮沸10分钟，冷却，放置两周后过滤备用。
〔常用〕标定：称取克〔精确到克〕于120℃烘至恒重的基准重铬酸钾，置于碘量瓶中，溶于25毫升水，加2克碘化钾及20毫升4mol/L的硫酸〔3mol/L 25ml〕，摇匀。
于暗处放置10分钟。
加75毫升水，用0.1N硫代硫酸钠溶液滴定，近终点时加1毫升0.5％淀粉指示剂，继续滴定至溶液由蓝色变为亮绿色。
同时做空白实验。
N＝〔V1-V2〕式中：G ——重铬酸钾之重量，克V1——硫代硫酸钠之用量，毫升 V2——空白硫代硫酸钠之用量，毫升 ——每毫克当量重铬酸钾之克数实验步骤： 1、 试样处理精确称取大豆油(精确到小数点后二位)，反响完后，将分层液下层甘油相转入500ml 容量瓶中， 并用适量水洗涤上层甲酯层 ， 水相也转入容量瓶中， 最后定容 ，待用。
2、 甘油含量测定准确量取10ml 上述甘油溶液 ，放入250ml 碘量瓶中， 再参加mol/L NaIO 4溶液、mol/L H 2SO 4溶液、5ml 正己烷， 盖好塞盖， 摇匀 ， 在室温下于暗处放置 30 min 。
然后参加1.5g KI(两颗)，反响3min 后， 再加水75ml ，溶液呈现葡萄酒色，析出的碘用配制好的约mol/L Na 2S 2O 3标液滴定 ， 滴定至颜色变亮时参加1ml 淀粉指示剂 ，此时溶液呈现不透明深蓝色， 继续滴至蓝色恰好消失为止〔无色〕 ，平行测定3次， 同时做空白实验。
甘油分析报告
甘油分析报告引言甘油，也称作丙三醇，是一种重要的化工原料。
它具有无色、无味、无毒、粘稠的特性，被广泛应用于医药、食品、化妆品、塑料等行业。
为了保证甘油质量的稳定性和可靠性，需要进行甘油的分析。
本报告旨在对甘油的常见分析方法进行总结和归纳，为相关研究人员提供参考。
1. 理化性质的分析1.1 外观与性状的分析甘油外观为无色或微黄色，呈粘稠液体。
在分析时，可以通过肉眼观察甘油的色泽和粘稠度来评估其外观和性状。
1.2 密度的分析甘油的密度可以通过测量甘油在一定温度下的质量与体积的比值来确定。
常见的密度测量方法包括比重瓶法和密度计法。
1.3 粘度的分析甘油的粘度是衡量其流动性的重要指标。
常见的粘度测量方法有旋转粘度计法、滴定法和圆柱凸度法等。
2. 成分的分析2.1 含水量的分析甘油常常存在着一定的水分，因此对甘油中的含水量进行分析十分重要。
可以通过色谱法、滴定法和干燥法等方法来测定甘油中的水分含量。
2.2 酸值的分析甘油的酸值是评判其纯度和品质的一个重要指标。
常用的酸值测定方法有酸碱滴定法、电位滴定法和紫外分光光度法等。
2.3 酯值的分析酯值是甘油酯化反应过程中的重要参数。
常见的酯值测定方法包括色谱法、化学分析法和质量测定法等。
2.4 含氯量的分析甘油中的氯离子含量是考察甘油纯度和品质的指标之一，常用的检测方法有氯离子滴定法和离子色谱法等。
3. 杂质的分析3.1 硫酸盐的分析硫酸盐是甘油中常见的杂质之一，可以通过沉淀法和离子色谱法等方法进行分析。
3.2 重金属离子的分析重金属离子是甘油中不可忽视的污染物，对于保证甘油质量至关重要。
常用的检测方法有原子吸收光谱法、电感耦合等离子体发射光谱法和草酸酐法等。
3.3 其他杂质的分析除了硫酸盐和重金属离子外，甘油中还可能存在其他杂质，如醛类、酮类和酚类化合物等。
对这些杂质的分析可以使用色谱法、红外光谱法和质谱法等。
结论甘油作为一种重要的化工原料，其质量的稳定性和可靠性对于实际应用非常重要。
甘油的检测方法汇总
甘油的检测方法汇总在发酵行业中，甘油作为底物，是发酵液中生物合成的直接前体，会影响外源蛋白的启动表达效率，其含量的高低直接影响产物的发酵单位，是决定菌种取舍的重要指标，是提高工程菌的发酵密度，提高产品生产率的关键。
在生物柴油生产中，它是副产物，其含量直接影响生物柴油的使用性能，是衡量生物柴油产品品质的重要指标之一。
此外，甘油能与水结合以防止红细胞的冷冻损伤，能延长红细胞的保存期，被普遍用作细胞内冷冻保护剂等。
由于甘油用途很广，因此其含量的测定具有非常重要的意义。
目前国内外甘油含量的测定方法较多，主要有高碘酸氧化法、Cu2 +络合比色法、酶比色法法、紫外-可见分光光度法、高效液相色谱法、气相色谱法、近红外光谱法以及原子吸收法等。
下面将对其进行简要概述：一、高碘酸法二、酶比色法1.原理：它是利用酶的特异性催化反应建立的测定甘油的一种酶学方法，是指甘油在甘油激酶作用下转化为3-磷酸甘油，后者由磷酸甘油氧化酶催化生成磷酸二羟丙酮和过氧化氢，然后过氧化氢和4-氨基安普比林、4-氯酚在过氧化物酶催化下反应生成紫兰色、能在500 nm 左右有特征吸收峰的醌亚胺，通过颜色深浅即吸光度的变化测定所生成的H2O2，甘油的含量与生成的H2O2成正比，这样用比色法就可以测定甘油的含量。
2.操作步骤波长：500nm (480~520nm) 反映温度：37℃比色杯光径：1cm取一定量R1(参看R2瓶签)加入1瓶R2中，溶解后即为工作液，工作液预先保温至测试温度。
三、高效液相色谱法1.原理：高效液相色谱法( HPLC) 的原理是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，利用色谱柱对待测混合物先进行分离，然后再进行检测，从而实现对试样的分析，因而其测量的准确性和精确度较高，目前已成为检测生化分子较常用的一种方法。
2.操作步骤（1）首先用水将发酵液稀释2.5倍,然后加H3PO4调pH至5.5,在转速8000r/min、温度4℃下离心10min,经微孔滤膜过滤用于HPLC分析；（2）将甘油标准系列溶液在最佳色谱条件下进行HPLC分析,以峰面积外标法定量得到甘油标准曲线；（3）按照样品预处理方法处理后进样5微升,记录峰面积,代入线性方程中,计算其测定值。
甘油测试方法范文
甘油测试方法范文甘油（glycerol）是一种重要的有机化合物，在医药、化妆品、食品等领域具有广泛的应用。
为了确保甘油质量的稳定性和可控性，需要进行甘油的测试。
下面将介绍甘油的测试方法。
一、理化性质测试甘油的理化性质测试包括外观、熔点、沸点、密度、折射率等的测定。
1.外观测试将甘油取样放置在一透明容器中，观察样品的颜色和状态。
甘油应为无色或微黄色油状液体，无异味和杂质。
2.熔点测试采用熔点仪测定甘油的熔点。
将适量的甘油样品放入熔点仪内，逐渐加热并观察。
甘油的熔点应在17-18°C之间。
3.沸点测试沸点测试可以确定甘油的纯度。
将适量的甘油放入沸点仪内，加热至沸腾，记录沸腾发生的温度。
甘油的沸点应在290-300°C之间。
4.密度测试采用密度计或密度计测定甘油的密度。
将甘油取样放入测试器具中，记录密度值。
甘油的密度应在1.260-1.276g/mL之间。
5.折射率测试采用折光仪测定甘油的折射率。
将甘油样品放入折光仪中，记录折射率值。
甘油的折射率应在1.474-1.476之间。
二、含量测试含量测试可以确定甘油中有效成分的含量。
1.水分测试将适量的甘油样品放入烘箱中加热干燥，直至恒定质量。
计算干燥后样品与原始样品之间的质量差，从而确定甘油中水分的含量。
甘油的水分含量应在0.5%以下。
2.游离甘油测试采用全自动气相色谱仪测定甘油中游离甘油的含量。
将甘油样品注入气相色谱仪，根据色谱图谱分析，计算出游离甘油的含量。
甘油中游离甘油的含量应在0.1%以下。
三、其他测试除了上述理化性质和含量测试外，还可以进行其他一些相关的测试。
1.酸值测试采用酸碱滴定法测定甘油的酸值。
将甘油样品溶解在酸性溶液中，用碱溶液滴定至酸碱中和终点，并根据滴定用量计算酸值。
甘油的酸值应在1 mg/g以下。
2.过氧化物测试采用过氧化形成物的测定法测试甘油中过氧化物的含量。
将甘油样品与酸性溶液反应生成过氧化物，根据颜色的变化或者标准曲线分析，测定过氧化物的含量。
甘油含量的测定方法国标
甘油含量的测定方法国标甘油是一种常用的化工原料，在不同领域广泛应用。
其含量的测定对于产品质量的控制非常重要。
国标为了保证甘油含量的准确性和可比性，在测定方法上有一些具体的规定。
本文将介绍甘油含量的测定方法国标的主要内容，并对其中的一些重点进行详细讲解。
首先，国标要求甘油含量的测定方法必须符合国际标准或行业标准。
常见的测定方法有重量法、滴定法、气相色谱法等。
下面将以气相色谱法为例来介绍甘油含量的测定方法国标的内容。
接下来，国标要求使用气相色谱仪进行测定。
仪器的性能参数也有一定的要求，包括分析柱类型、分析柱长度以及柱温等。
此外，国标还规定了气相色谱仪的运行条件，包括进样量、进样方式、气体流速和纵向温度梯度等。
在气相色谱仪的运行过程中，国标要求测定样品与内标物的信号比值，通过与标准曲线对照得出甘油含量。
国标还对标准曲线的制备进行了规定，包括内标物的浓度范围和间隔，以及内标物的选择等。
此外，国标还对质量控制进行了详细的规定。
包括对仪器的日常检验和校准的要求，以及对复现性和准确性的评价方法等。
此外，国标还对实验操作的注意事项进行了提醒，例如必要时要进行适当的稀释处理，以避免超出测定范围。
最后，国标还对数据处理方法进行了规定。
例如，对于重复测定的数据，要求计算均值和相对标准偏差。
对于甘油含量低于测定下限的样品，要求报告为“含量低于测定下限”等。
总的来说，甘油含量的测定方法国标对于样品的准备、仪器的性能参数、运行条件、标准曲线的制备、质量控制以及数据处理等方面都进行了具体的规定。
遵守国标的要求可以确保甘油含量的测定结果的准确性和可比性，从而保证产品质量的控制。
甘油分析方法
甘油分析方法甘油的化学分析方法过碘酸钠法（GB/T 13216.6—91）原理：在强酸性介质中，过碘酸钠将三个相连羟基的甘油氧化分解成甲酸和甲醛，用NaOH中和生成的甲酸，用pH值计指示终点。
从NaOH标准溶液的消耗量计算甘油的含量。
CH2OH-CHOH-CH2OH+2NaIO4→2HCHO+HCOOH+2NaIO3+H2O试剂蒸馏水：不含二氧化碳。
乙二醇稀释溶液：1体积不含甘油的乙二醇，用酚酞作指示剂中和后，再用1体积水稀释。
硫酸溶液：约0.1mol/L。
甲酸钠溶液：约0.1mol/L。
过碘酸钠酸性溶液的制备：称取60g（精确至0.1g）过碘酸钠，溶于已加入120mL硫酸溶液的约500mL的水中，边加入边冷却，转移到1000mL容量瓶中，用水稀释到刻度并摇匀。
必要时用玻璃过滤器过滤。
溶液的酸度校核：空白试验所用NaOH溶液的体积应不少于4.5mL，这与基本反应产生的酸度相当。
NaOH溶液：约0.05mol/L。
NaOH标准溶液：约0.125 mol/L。
酚酞指示剂：溶解0.5g酚酞于95%（体积比）乙醇中，稀释至100mL。
仪器滴定管：50mL。
pH值计：pH值计应用两种缓冲溶液校准。
a：邻苯二甲酸氢钾溶液：0.05mol/L（10.12g/L），20℃时pH值为4.00；b：10水四硼酸二钠（Na2B4O7·10H2O）溶液：0.01mol/L（3.81g/L），20℃时pH值为9.22。
测定步骤（1）试验份：称取含甘油不大于0.5g的样品（精确至0.0002g）。
如果不知甘油的大致含量，应称取0.5g样品进行预测（如果甘油含量大于75%，最好称取0.5g+0.1g样品，精确至0.0002g），置于500mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀后取50mL此溶液用于测定。
（2）试验溶液的制备：对碱性样品或样品酸化时出现焦油沉淀，可将试验份放入配有回流冷凝器的烧瓶中，需要时稀释到50mL，加2滴酚酞指示剂，用硫酸溶液中和到刚好褪色。
生物柴油中游离甘油和总甘油测定方法
生物柴油中游离甘油和总甘油测定方法生物柴油是以植物油或动物油为原料制成的，其主要成分是甘油三酯。
甘油是一种有机化合物，也被称为丙三醇，具有多种用途。
在生物柴油中，甘油有两种形态：游离甘油和总甘油。
游离甘油是指未与脂肪酸结合的自由甘油，而总甘油是指游离甘油和脂肪酸结合形成的酯化甘油。
1.液相色谱法液相色谱法是一种常用的测定方法，它基于样品中游离甘油和总甘油分子在柱上的相互作用和迁移速率不同的原理。
该方法的步骤如下：-样品制备：将生物柴油样品加入溶剂中并振荡混合，然后通过过滤或离心将混合物分离。
-样品注射：将样品溶液通过注射器加入液相色谱仪柱中，设置合适的流速和柱温。
-分离和检测：样品中游离甘油和总甘油分子在柱上分离，并通过紫外、质谱或电导检测器进行定量分析。
游离甘油和总甘油的峰面积可以分别用来计算其含量。
2.高效液相色谱法高效液相色谱法也是一种常用的测定方法，其原理和步骤与液相色谱法类似，但有些细节有所不同。
该方法的步骤如下：-样品制备：将生物柴油样品加入溶剂中并振荡混合，然后通过过滤或离心将混合物分离。
-样品注射：将样品溶液通过注射器加入高效液相色谱仪柱中，设置合适的流速和柱温。
-分离和检测：样品中游离甘油和总甘油分子在柱上分离，并通过紫外、质谱或电导检测器进行定量分析。
除了液相色谱法和高效液相色谱法之外，其他测定方法还包括气相色谱法和质谱法等。
不同的方法可以选择不同的检测仪器和技术参数，以获得准确的测量结果。
总结起来，生物柴油中游离甘油和总甘油的测定方法主要包括液相色谱法和高效液相色谱法，它们均基于样品中游离甘油和总甘油分子在柱上的相互作用和迁移速率不同的原理。
通过选择适当的检测仪器和技术参数，可以获得准确的游离甘油和总甘油的含量。
甘油的鉴定实验报告
甘油的鉴定实验报告1. 实验目的本实验旨在通过一系列的化学实验方法鉴定和确认甘油的身份。
2. 实验原理甘油，又称丙三醇，化学名为1,2,3-三羟基丙烷。
在实验室中，我们可以通过以下实验方法来确认甘油的身份：1. 酸碱中和实验：甘油可以和酸发生中和反应，生成相应的盐。
2. 加热反应：甘油在高温下可以分解，生成甲醛、乙醛和醋醛等。
3. 氨水反应：甘油可以与氨水发生反应，生成胺盐。
4. 碘化钠反应：加入碘化钠溶液后，会出现白色沉淀。
3. 实验步骤3.1 酸碱中和实验1. 取一小部分甘油溶液，加入少量盐酸，并观察反应现象。
2. 倒入硫酸试液，观察是否发生结晶。
3.2 加热反应1. 将一定量的甘油倒入试管中，加热至沸腾状态。
2. 观察试管口是否生成白色烟雾，并记录观察结果。
3.3 氨水反应1. 取一小部分甘油溶液，滴加几滴氨水。
2. 观察溶液的颜色变化，并记录观察结果。
3.4 碘化钠反应1. 取一小部分甘油溶液，加入碘化钠溶液。
2. 观察溶液的变化，是否出现白色沉淀，并记录观察结果。
4. 实验结果及分析4.1 酸碱中和实验当盐酸与甘油发生中和反应时，产生了白色结晶，说明甘油具有中和酸性的能力，进一步确认了其身份。
4.2 加热反应当甘油加热至沸腾状态时，试管口冒出白色烟雾，这是甘油分解的结果。
分解产物包括甲醛、乙醛和醋醛等有机物，这进一步确保了我们所检测到的物质是甘油。
4.3 氨水反应添加氨水后，甘油溶液的颜色变为淡黄色，这是因为甘油与氨水发生反应生成了胺盐。
这个结果与甘油的特性一致。
4.4 碘化钠反应加入碘化钠溶液后，溶液中出现白色沉淀，这也与甘油的特征一致。
5. 结论通过酸碱中和实验、加热反应、氨水反应、碘化钠反应等一系列实验，我们可以确认所检测到的物质为甘油。
甘油表现出了中和酸性、分解生成甲醛等有机物、与氨水反应生成胺盐以及与碘化钠生成白色沉淀等特性，这些结果都与甘油的性质相符。
因此，我们可以确定所检测到的物质为甘油。
甘油分析方法
甘油分析方法甘油的化学分析方法过碘酸钠法( GB/T 13216.6—91) 原理：在强酸性介质中，过碘酸钠将三个相连羟基的甘油氧化分解成甲酸和甲醛，用NaOH中和生成的甲酸，用pH值计指示终点。
从NaOH标准溶液的消耗量计算甘油的含量。
CH20H-CHOH-CHOH+2NalC4—2HCHO+HCOOH+2NaI3+H2O试剂蒸馏水：不含二氧化碳。
乙二醇稀释溶液： 1 体积不含甘油的乙二醇，用酚酞作指示剂中和后，再用 1 体积水稀释。
硫酸溶液：约0.1mol/L 。
甲酸钠溶液：约0.1mol/L 。
过碘酸钠酸性溶液的制备：称取60(精确至0.1g)过碘酸钠，溶于已加入120mL 硫酸溶液的约500mL的水中，边加入边冷却，转移到1000mL容量瓶中，用水稀释到刻度并摇匀。
必要时用玻璃过滤器过滤。
溶液的酸度校核：空白试验所用NaOH溶液的体积应不少于4.5mL,这与基本反应产生的酸度相当。
NaOH溶液：约0.05mol/L。
NaOH标准溶液：约0.125 mol/L。
酚酞指示剂：溶解0.5g酚酞于95% (体积比)乙醇中，稀释至100mL o仪器滴定管：50mL。
pH 值计：pH 值计应用两种缓冲溶液校准。
a：邻苯二甲酸氢钾溶液：0.05mol/L (10.12g/L)，20C 时pH 值为4.00;b：10 水四硼酸二钠(Na z B4O7T0H2O)溶液：0.01mol/L (3.81g/L), 20C时pH 值为9.22。
测定步骤(1)试验份：称取含甘油不大于0.5g的样品(精确至0.0002g)。
如果不知甘油的大致含量，应称取0.5g样品进行预测(如果甘油含量大于75%，最好称取0.5g+0.1g样品，精确至0.0002g)，置于500mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀后取50mL此溶液用于测定。
( 2) 试验溶液的制备：对碱性样品或样品酸化时出现焦油沉淀，可将试验份放入配有回流冷凝器的烧瓶中，需要时稀释到50mL，加2滴酚酞指示剂，用硫酸溶液中和到刚好褪色。
甘油的检测方法范文
甘油的检测方法范文甘油是一种在化工、药品、食品、化妆品等行业中广泛应用的化合物。
为了保证产品质量和安全，需要对甘油进行准确的检测。
本文将介绍几种常用的甘油检测方法。
1.重量法重量法是最简单的甘油检测方法之一、该方法通过称量样品的质量变化来计算样品中甘油的含量。
具体步骤如下：a.取一定量的样品，通常为1克左右。
b.将样品放入预先烘干并恒温的干燥器中，干燥时间根据样品性质而定。
c.将样品取出并冷却至室温。
d.再次称量样品，计算质量的变化。
e.利用重量变化推算出样品中甘油的含量。
2.比重法比重法是一种通过测量溶液比重来确定甘油含量的方法。
这种方法适用于甘油含量较高的样品。
具体步骤如下：a.准备两个密度相近的容器，一个装满溶液，另一个装满水。
b.使用密度计分别测量溶液和水的比重。
c.根据比重的差值计算溶液中甘油的含量。
3.色谱法色谱法是一种常用的分析方法，通过样品在色谱柱中分离，再通过检测器检测甘油的含量。
具体步骤如下：a.准备样品溶液，通常使用有机溶剂进行提取。
b.将溶液注入色谱柱中，并使用适当的流动相使样品分离。
c.通过检测器测量样品中甘油的峰面积或峰高，并与标准品进行比较，计算甘油的含量。
4.分光光度法分光光度法是一种常用的甘油检测方法，通过测量样品对特定波长的光的吸收来确定甘油的含量。
a.准备样品溶液并使用适当的溶剂稀释。
b.使用分光光度计选择适当的波长，记录空白试样的吸光度。
c.然后测量样品的吸光度，并使用标准曲线计算甘油的含量。
以上是常用的几种甘油检测方法，每种方法在不同的条件下都有其适用范围和优缺点。
在实际应用中，应根据需要选择合适的方法进行甘油含量的检测，以确保产品质量和安全。
同时，还可以结合多种方法进行互相验证，提高测量结果的准确性。
甘油分析方法
甘油分析方法甘油的化学分析方法过碘酸钠法（GB/T 13216.6—91）原理：在强酸性介质中，过碘酸钠将三个相连羟基的甘油氧化分解成甲酸和甲醛，用NaOH中和生成的甲酸，用pH值计指示终点。
从NaOH标准溶液的消耗量计算甘油的含量。
CH2OH-CHOH-CH2OH+2NaIO4→2HCHO+HCOOH+2NaIO3+H2O试剂蒸馏水：不含二氧化碳。
乙二醇稀释溶液：1体积不含甘油的乙二醇，用酚酞作指示剂中和后，再用1体积水稀释。
硫酸溶液：约0.1mol/L。
甲酸钠溶液：约0.1mol/L。
过碘酸钠酸性溶液的制备：称取60g（精确至0.1g）过碘酸钠，溶于已加入120mL 硫酸溶液的约500mL的水中，边加入边冷却，转移到1000mL容量瓶中，用水稀释到刻度并摇匀。
必要时用玻璃过滤器过滤。
溶液的酸度校核：空白试验所用NaOH溶液的体积应不少于4.5mL，这与基本反应产生的酸度相当。
NaOH溶液：约0.05mol/L。
NaOH标准溶液：约0.125 mol/L。
酚酞指示剂：溶解0.5g酚酞于95%（体积比）乙醇中，稀释至100mL。
仪器滴定管：50mL。
pH值计：pH值计应用两种缓冲溶液校准。
a：邻苯二甲酸氢钾溶液：0.05mol/L（10.12g/L），20℃时pH值为4.00；b：10水四硼酸二钠（Na2B4O7·10H2O）溶液：0.01mol/L（3.81g/L），20℃时pH值为9.22。
测定步骤（1）试验份：称取含甘油不大于0.5g的样品（精确至0.0002g）。
如果不知甘油的大致含量，应称取0.5g样品进行预测（如果甘油含量大于75%，最好称取0.5g+0.1g样品，精确至0.0002g），置于500mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀后取50mL此溶液用于测定。
（2）试验溶液的制备：对碱性样品或样品酸化时出现焦油沉淀，可将试验份放入配有回流冷凝器的烧瓶中，需要时稀释到50mL，加2滴酚酞指示剂，用硫酸溶液中和到刚好褪色。
甘油的检测方法汇总
甘油的检测方法汇总在发酵行业中，甘油作为底物，是发酵液中生物合成的直接前体，会影响外源蛋白的启动表达效率，其含量的高低直接影响产物的发酵单位，是决定菌种取舍的重要指标，是提高工程菌的发酵密度，提高产品生产率的关键。
在生物柴油生产中，它是副产物，其含量直接影响生物柴油的使用性能，是衡量生物柴油产品品质的重要指标之一。
此外，甘油能与水结合以防止红细胞的冷冻损伤，能延长红细胞的保存期，被普遍用作细胞内冷冻保护剂等。
由于甘油用途很广，因此其含量的测定具有非常重要的意义。
目前国内外甘油含量的测定方法较多，主要有高碘酸氧化法、Cu2 +络合比色法、酶比色法法、紫外-可见分光光度法、高效液相色谱法、气相色谱法、近红外光谱法以及原子吸收法等。
下面将对其进行简要概述：1、 高碘酸法1.原理：高碘酸氧化法是目前常见用于甘油含量检测的方法，利用高碘酸与甘油发生氧化还原反应，剩余高碘酸及反应生成的碘酸与碘化钾反应生成碘，再用硫代硫酸钠进行滴定，根据消耗的硫代硫酸钠的量来计算甘油的含量。
2.操作步骤准确发酵液10ml于100mL小烧杯中，加少量水溶解，然后转移至100mL容量瓶中，用水稀释至标线，摇匀，静置。
用移液管准确移取10mL上述溶液于碘量瓶中，加入20mL高碘酸钠溶液，混合均匀后，于黑暗中避光静置40min，然后加入碘化钾溶液和20%盐酸溶液各15mL，调节pH值在0.8～1.0之间，然后用硫代硫酸钠标准溶液滴定，近终点时，加入2mL淀粉指示剂溶液，继续滴定至溶液蓝色消失。
同时做试样空白。
3.计算：式中：w——样品中甘油的含量，％；V1——空白试样消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积，mL；V2——试样消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积，mL；C——硫代硫酸钠标准溶液的浓度，mol／L；M——甘油相对分子质量；2、 酶比色法1.原理：它是利用酶的特异性催化反应建立的测定甘油的一种酶学方法，是指甘油在甘油激酶作用下转化为3-磷酸甘油，后者由磷酸甘油氧化酶催化生成磷酸二羟丙酮和过氧化氢，然后过氧化氢和4-氨基安普比林、4-氯酚在过氧化物酶催化下反应生成紫兰色、能在500 nm 左右有特征吸收峰的醌亚胺，通过颜色深浅即吸光度的变化测定所生成的H2O2，甘油的含量与生成的H2O2成正比，这样用比色法就可以测定甘油的含量。
甘油含量的测定方法国标
甘油含量的测定方法国标【实用版4篇】目录（篇1）1.引言2.甘油含量测定方法的原理3.甘油含量测定方法的实验步骤4.甘油含量测定方法的注意事项5.结语正文（篇1）1.引言甘油是一种重要的化工原料，广泛应用于制药、化妆品、食品等领域。
因此，准确测定甘油含量具有重要的实用价值。
我国国家标准 GB/T 24318-2009《甘油含量的测定方法》规定了测定甘油含量的方法。
2.甘油含量测定方法的原理甘油含量的测定方法基于甘油与硫代硫酸钠反应的原理。
在酸性条件下，甘油与硫代硫酸钠反应生成硫代硫酸甘油酯，同时放出硫化氢。
硫化氢与重铬酸钾反应，产生颜色变化，通过比色定量法测定甘油含量。
3.甘油含量测定方法的实验步骤（1）试样处理：精确称取大豆油 10.00g（精确到小数点后二位），反应完后，将分层液下层甘油相转入 500ml 容量瓶中，并用适量水洗涤上层甲酯层，水相也转入容量瓶中，最后定容，待用。
（2）甘油含量测定：准确量取 10.00mL 试样溶液，加入 5.00mL 硫代硫酸钠溶液，混匀后，加入 1.00mL 重铬酸钾溶液，混匀，静置 30 分钟。
用比色皿取上层清液，以空白硫代硫酸钠溶液为对照，用光电比色计测定吸光度，计算甘油含量。
4.甘油含量测定方法的注意事项（1）试样处理时要保证精确度和准确性，避免试样损失和污染。
（2）在测定过程中，应保持实验环境稳定，避免光线、温度等对实验结果的影响。
（3）比色皿和光电比色计要保持清洁，避免杂质对测量结果的干扰。
5.结语甘油含量的测定方法国标为我国甘油产业的发展提供了重要的技术支持。
目录（篇2）1.甘油含量测定方法的背景和重要性2.国标中甘油含量测定的方法3.甘油含量测定的实验步骤4.甘油含量测定的注意事项5.甘油含量测定方法的优缺点正文（篇2）甘油是一种重要的化工原料，广泛应用于制药、化妆品、食品等行业。
因此，准确测定甘油含量具有重要的意义。
在我国，甘油含量的测定方法有国标规定，以下将为您详细介绍。
甘油的测定原理
甘油的测定原理甘油是一种常见的有机化合物，化学式为C3H8O3。
它是一种无色、无味、粘稠的液体，在水中溶解性较好。
甘油在工业上广泛用于制药、食品、化妆品、烟草等领域。
为了保证产品质量和安全性，需要对甘油进行测定。
下面将介绍甘油的测定原理。
甘油的测定原理主要基于化学反应或物理特性的测量。
常用的测定甘油的方法包括比色法、高效液相色谱法、滴定法、红外光谱法等。
其中，比色法是常用的测定甘油浓度的方法之一。
该方法基于甘油与硫酸结合生成络合物后的吸收特性。
甘油与硫酸反应形成红色络合物，该络合物在520nm 左右有最大吸收峰。
通过测量该峰值吸光度的变化，可以计算出甘油的浓度。
具体操作步骤为：取一定体积的甘油溶液加入适量的硫酸，经混合和加热后测量吸光度，根据样品中已知甘油浓度的标准曲线反推计算出待测样品中甘油的浓度。
高效液相色谱法是一种分离和检测甘油的常用方法。
该方法通过甘油在色谱柱中的分配系数差异，采用不同的流动相和柱填料，实现甘油的分离和检测。
在实际操作中，可以在样品中加入内标物质，通过内标物质和甘油的色谱峰比值来计算甘油的浓度。
高效液相色谱法具有操作简单、分离效果好、准确度高的特点。
滴定法是通过与甘油反应的滴定剂的用量来确定甘油浓度的方法。
常用的滴定剂包括氧化性物质如高锰酸钾、碘溶液等。
滴定方法基于滴定剂与甘油之间的反应，滴定剂与甘油发生定量的化学反应后，可以计算出甘油的浓度。
滴定法具有操作简单、结果可靠的特点，但是需要使用到特定的试剂和仪器。
红外光谱法是一种非常规的测定甘油浓度的方法。
红外光谱法通过检测甘油分子中特定的光谱吸收峰来间接确定甘油的浓度。
甘油分子在红外光谱中具有特定的振动频率，不同浓度的甘油溶液对应着不同的峰值强度。
通过测量这些峰值强度的变化，可以推算出甘油的浓度。
红外光谱法具有非破坏性、无需处理样品、不需要使用特殊试剂的优点，然而由于设备的限制，它在实际应用中并不常见。
综上所述，测定甘油的方法有很多种，可以根据实际需求和条件选择适合的方法。
甘油含量检测方法
甘油含量检测方法甘油含量是指在其中一种样品中甘油所占的百分比或者质量百分比。
甘油（C3H8O3）是一种无色、无味的有机化合物，被广泛应用于食品、药品、化妆品和烟草等工业中。
一、物理方法物理方法是通过测量样品的特定物理性质来确定甘油含量。
1.折射率法：甘油的折射率与其浓度呈线性关系，所以可以通过测量甘油溶液的折射率来确定甘油的含量。
这种方法需要使用折射仪进行测量，适用于透明溶液或液体。
2.密度法：甘油溶液的密度与其浓度呈线性关系，可以通过测量甘油溶液的密度来确定甘油含量。
这种方法需要使用密度计进行测量，适用于透明溶液或液体。
3.蒸汽压法：甘油的蒸汽压与其浓度呈线性关系，可以通过测量甘油溶液的蒸汽压来确定甘油含量。
这种方法需要使用蒸汽压计进行测量，适用于透明溶液或液体。
二、化学方法化学方法是通过甘油与其中一种化学试剂反应产生可测定的物质或产生其中一种特定的化学性质来确定甘油含量。
1.酶法：甘油酶可以将甘油与辅酶NAD+反应生成甘油醛和还原的NADH，可以通过测量NADH的吸收光谱来确定甘油的含量。
2.磺酸法：甘油与冰醋酸反应生成二甘醇酯，该反应可以通过测量其产物的溶解度或者离子电导率来确定甘油的含量。
3.水合反应法：甘油与氧化亚铜反应生成水合甘油铜离子，可以通过测定其溶解度或者电导率来确定甘油含量。
4.碱滴定法：甘油可以与强碱滴定生成甘油醚，可以通过滴定法来测定甘油的含量。
以上只是常见的甘油含量检测方法，具体选择何种方法还要根据样品的性质和实际需要进行裁定。
另外，随着科学技术的不断发展，新的检测方法也在不断涌现，有望提高检测的准确性和效率。
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甘油的检测方法汇总
在发酵行业中，甘油作为底物，是发酵液中生物合成的直接前体，会影响外源蛋白的启动表达效率，其含量的高低直接影响产物的发酵单位，是决定菌种取舍的重要指标，是提高工程菌的发酵密度，提高产品生产率的关键。
在生物柴油生产中，它是副产物，其含量直接影响生物柴油的使用性能，是衡量生物柴油产品品质的重要指标之一。
此外，甘油能与水结合以防止红细胞的冷冻损伤，能延长红细胞的保存期，被普遍用作细胞内冷冻保护剂等。
由于甘油用途很广，因此其含量的测定具有非常重要的意义。
目前国内外甘油含量的测定方法较多，主要有高碘酸氧化法、Cu2 +络合比色法、酶比色法法、紫外-可见分光光度法、高效液相色谱法、气相色谱法、近红外光谱法以及原子吸收法等。
下面将对其进行简要概述：
一、高碘酸法
1.原理：高碘酸氧化法是目前常见用于甘油含量检测的方法，利用高碘酸与甘油发生氧化还原反应，剩余高碘酸及反应生成的碘酸与碘化钾反应生成碘，再用硫代硫酸钠进行滴定，根据消
V1——空白试样消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积，mL；
V2——试样消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积，mL；
C——硫代硫酸钠标准溶液的浓度，mol／L；M——甘油相对分子质量；
二、酶比色法
1.原理：它是利用酶的特异性催化反应建立的测定甘油的一种酶学方法，是指甘油在甘油激酶作用下转化为3-磷酸甘油，后者由磷酸甘油氧化酶催化生成磷酸二羟丙酮和过氧化氢，然后过氧化氢和4-氨基安普比林、4-氯酚在过氧化物酶催化下反应生成紫兰色、能在500 nm 左右
有特征吸收峰的醌亚胺，通过颜色深浅即吸光度的变化测定所生成的H
2O
2
，甘油的含量与生成
的H
2O
2
成正比，这样用比色法就可以测定甘油的含量。
2.操作步骤
波长：500nm (480~520nm) 反映温度：37℃比色杯光径：1cm
取一定量R1(参看R2瓶签)加入1瓶R2中，溶解后即为工作液，工作液预先保温至测试温度。
3.计算：甘油浓度=A
样品/A
校准
×校准浓度（mmol/L或mg/dl）
三、高效液相色谱法
1.原理：高效液相色谱法( HPLC) 的原理是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，利用色谱柱对待测混合物先进行分离，然后再进行检测，从而实现对试样的分析，因而其测量的准确性和精确度较高，目前已成为检测生化分子较常用的一种方法。
2.操作步骤
（1）首先用水将发酵液稀释倍,然后加H
3PO
4
调pH至,在转速8000r/min、温度4℃下离心10min,
经微孔滤膜过滤用于HPLC分析；
（2）将甘油标准系列溶液在最佳色谱条件下进行HPLC分析,以峰面积外标法定量得到甘油标准曲线；
（3）按照样品预处理方法处理后进样5微升,记录峰面积,代入线性方程中,计算其测定值。
将计算值乘以稀释倍数后,即得发酵液中甘油的含量。
四、气相色谱法
1.原理：气相色谱分析法是用于分离分析复杂样品中的化合物的一种方法，其原理是一定量的气体或液体分析物被注入到柱一端的进样口中，在载气带动下通过色谱柱，分析物的分子会受到柱壁或柱中填料的吸附。
由于不同的样品具有不同的物理和化学性质，与特定的固定相有着不同的相互作用，使得每一种类型的分子都有自己的通过速率，因此，分析物中的各种不同组分就会在不同的时间到达柱的末端，从而得到分离。
当化合物从柱的末端流出时，它们被检测器检测到，产生相应的信号，并被转化为电信号输出，从而确定每一个组分到达色谱柱末端的时间顺序以及每一个组分的含量。
2.操作步骤
（1）标准溶液的配制在7个25mL容量瓶中分别准确称入0、、、、、、甘油（精确至），再分别移入2mL内标贮备液，用混合溶剂定容并摇匀，作为标准工作溶液。
其中甘油质量浓度分别为0、2、4、8、12、20g/L，内标质量浓度均为8g/L。
（2）样品的制备在25mL容量瓶中加入5ml的发酵液样品，移入2mL内标贮备液，用混合溶剂定容至刻度并摇匀。
（3）GC条件
色谱柱：HP-5石英毛细管柱，30m（柱长）×（内径）×μm（膜厚）。
柱温：初始温度120℃，保留5min，以20℃/min升至290℃，保留10min。
进样口温度：280℃，进样量：μL，分流比：100∶1。
检测器（FID）温度：300℃，氢气流速：40mL/min，空气流速：300mL/min。
载气：氮气，流速：1mL/min，恒流模式
（4）进样，计算
五、酶电极法
1、检测原理
利用生物酶只能催化一种或一类底物的性质，将甘油氧化酶进行固定化处理，样本中的甘油在甘油酶膜的作用下被催化生成过氧化氢，根据电化学的原理，过氧化氢的浓度与电压值正相关，根据标准液、缓冲液的电压值响应值来确定样本中甘油浓度。
v1.0 可编辑可修改
甘油浓度与电压值相关性分析
2.操作步骤
按相关操作说明进行。
整个检测过程不超过45秒
应用范围：发酵过程甘油浓度检测，食品中甘油检测，西尔曼科技有限公司国内唯一一家有能力生产可以不用预稀释样本就可以检测高达1甘油浓度的分析的制造商。
六、总结
甘油的测定方法很多,最常用的是化学法。
化学法测定甘油含量费用较低,但操作繁琐,试剂用量大,耗时长,且有时误差极大。
酶法测定甘油专一性强,只与溶液中的甘油特异性地反应,但所需试剂昂贵,不利于工业应用和大量样品的检测。
测定游离甘油最灵敏的方法是气相色谱
法、液相色谱法，精确度较高，但需对甘油进行硅烷化，操作麻烦，成本也较高。
由于高碘量法受发酵液中的杂质（糖类、多元醇）影响大，特别是发酵中甘油含量低时，单用此方法检测基本不准确；高效液相色谱法检测准确，但发酵样品前处理工作量大，不适合产生大量样品的。
因此使用酶电极法测定发酵液中甘油含量，具有速度快、专一性强，由于固定化酶可以重复利用，单次检测相对于酶比色法具有更低的成本。