GUS基因表达检测
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
GUS基因表达检测
瞬时表达检测取侵染后共培养1~6d的外植体为材料，稳定表达检测取转化后经分化及生根培养得到的完整植株为材料。取抗性外植体和抗性绿苗的叶片剪成小条，浸泡于10ml的GUS染色缓冲液中37oC进行酶反应1h至过夜，然后用70%乙醇漂洗浸泡叶片数天，至阴性对照材料呈白色，照相观察，白色背景上的蓝色斑点即为GUS表达位点。
GUS染色缓冲液：100mM PH7.0磷酸缓冲液[38ml（NaH2PO46.24g定容至100ml）+62ml(Na2HPO4·2H2O4.34g定容至100ml)]，0.1%Triton x-100，1%DMSO，10MmEDTA，0.5mg/mlX-Gluc。